KR102297417B1

KR102297417B1 - 신규 화합물 및 이를 이용한 글루코스 검출방법

Info

Publication number: KR102297417B1
Application number: KR1020200060379A
Authority: KR
Inventors: 임흥섭; 김중현; 최홍식; 이성민; 신화희; 김훈주; 신희철
Original assignee: 재단법인 대구경북첨단의료산업진흥재단
Priority date: 2020-05-20
Filing date: 2020-05-20
Publication date: 2021-09-02

Abstract

본 발명은 글루코스 검출 효과가 뛰어난 신규한 화합물 및 이를 이용한 글루코스 검출방법에 관한 것으로, 본 발명의 신규한 화합물은 우수한 포도당 감도를 제공할 뿐만 아니라 개선된 Red shift 및 Stokes shift 스펙트럼 특성의 형광 특성을 유리하게 향상시켰으며, 인체 내 삽입 혹은 근접 사용 시에 기존 화합물보다 높은 안전성을 확보할 수 있고, 보다 단순하고 저렴한 광학 감지 시스템의 명백한 상업적 이점이 있다.

Description

신규 화합물 및 이를 이용한 글루코스 검출방법{Novel compound and glucose detection method using same}

본 발명은 글루코스 검출 효과가 뛰어난 신규한 화합물 및 이를 이용한 글루코스 검출방법에 관한 것이다.

글루코오스는 생물계에서 생명 유지에 필수적인 역할을 한다. 글루코오스 항상성은 에너지 대사와 밀접한 관련이 있고 기본적으로 인슐린-매개 신호경로에 의해 조절된다. 인슐린 분비 또는 인슐린 작용의 결함은 혈중 글루코오스 농도를 비정상적으로 높게 하여 2형 당뇨병, 대사 증후군, 고혈압과 심혈관계 고위험으로 나타날 수 있다. 이와 관련하여, 생물계에서 글루코오스의 생물학적 역할을 규명하기 위한 중요한 과제는 글루코오스를 모니터링하는 능력이다. 이를 위해, 형광색소분자로서 안트라센, 피렌, 스틸벤 및 단당류에 대한 결합부위로서 보론산으로부터 유도된 각종 형광탐침이 개발되어 왔다. 다만 종래의 탐침은 상용 블루 LED의 사용 가능한 피크 파장과 잘 맞지 않는 문제가 있고 흡수 파장과 방출 파장의 차이가 크지 않아 두 개의 사용 필터를 구별하는 과정이 복잡한 문제가 있으며, 인체안정성이 떨어지는 문제도 있는 바 이에 대한 더 많은 연구가 요구되고 있다.

대한민국 등록특허공보 10-1269096

본 발명의 목적은 효과적인 글루코스 검출이 가능한 신규 화합물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 화합물을 포함하는 글루코스 검출용 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 조성물을 포함하는 글루코스 검출용 키트를 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 조성물과 검체를 반응시키는 단계를 포함하는 글루코스 검출방법을 제공하는 것이다.

상기 본 발명의 목적을 달성하기 위해 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 염을 제공한다.

[화학식 1]

(상기 화학식 1에서 X는 독립적으로 -F, -Cl, -Br 또는 -I 중 어느 하나이다).

또한, 본 발명은 하기 화학식 2로 표시되는 화합물 또는 이의 염을 제공한다.

[화학식 2]

또한, 본 발명은 상기 화합물 또는 이의 염을 포함하는 글루코스 검출용 조성물을 제공한다.

본 발명의 일 구현예로, 상기 조성물은 400 내지 440nm에서 흡수 피크가 나타나는 것일 수 있다.

본 발명의 일 구현예로, 상기 조성물은 480 내지 520nm에서 방출 피크가 나타나는 것일 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 글루코스 검출용 키트를 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 조성물과 검체를 반응시키는 단계를 포함하는 글루코스 검출방법을 제공한다.

본 발명의 신규한 화합물은 우수한 포도당 감도를 제공할 뿐만 아니라 개선된 Red shift 및 Stokes shift 스펙트럼 특성의 형광 특성을 유리하게 향상시켰으며, 인체 내 삽입 혹은 근접 사용 시에 기존 화합물보다 높은 안전성을 확보할 수 있고, 보다 단순하고 저렴한 광학 감지 시스템의 명백한 상업적 이점이 있다.

도 1은 DMC-1의 흡수 / 방출 스펙트럼을 그래프로 나타낸 것이다.
도 2는 DMC-2의 흡수 / 방출 스펙트럼을 그래프로 나타낸 것이다.
도 3은 DMC-1 및 글루코스 농도에 따른 형광 강도를 확인한 것이다.
도 4는 글루코스 농도를 달리 처리함에 따르나 DMC-1 및 DMC-2의 형광 강도를 비교한 것이다.
도 5는 DMC-1의 글루코스에 대한 선택성을 비교한 것이다.
도 6는 DMC-2의 글루코스에 대한 선택성을 비교한 것이다.

본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 염을 제공한다.

[화학식 1]

상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 흡수피크는 약 420nm이고 방출피크는 약 498nm로, Red shift를 통해 인체 내 삽입 혹은 근접 사용시 기존 화합물보다 더욱 인체 안전성을 가지기 위해 더 긴 파장과 더 큰 스톡 시프트 (Stokes shift)를 가진다. 또한, 방출 피크 파장을 더 긴 파장 영역으로 이동시켜 우수한 포도당 감도를 제공했을 뿐만 아니라 개선된 Red shift 및 Stokes shift 스펙트럼 특성의 형광 특성을 유리하게 향상시켰으며, 인체 내 삽입 혹은 근접 사용 시에 기존 화합물보다 높은 안전성을 확보할 수 있고, 보다 단순하고 저렴한 광학 감지 시스템의 명백한 상업적 이점이 있다.

상기 화학식 1로 표시되는 화합물에서 아세틸기는 안트라센 모체에 결합하는 것일 수 있으며, 안트라센 모체에 결합하는 것이라면 그 결합위치의 제한은 없고, 결합하는 아세틸기는 1개 이상일 수 있다.

본 발명에서 염은 본 발명의 화합물이 임의의 무기산 또는 유기산 또는 염기와 형성된 염을 의미하며, 바람직하게는 나트륨염 일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명에서 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 구체적으로 하기 화학식 2로 표시되는 화합물 일 수 있으며, 하기 화학식 2로 표시되는 화합물의 염은 나트륨염일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.

[화학식 2]

다른 양태로서, 본 발명은 화합물 또는 이의 염을 포함하는 글루코스 검출용 조성물을 제공한다.

상기 조성물은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 화학식 1로 표시되는 화합물의 염, 화학식 2로 표시되는 화합물 및 화학식 2로 표시되는 화합물의 염으로 이루어지는 군으로부터 선택된 1 이상의 화합물이 포함할 수 있다.

상기 조성물은 상기 화합물뿐만 아니라 상기 화합물과 반응한 글루코스를 측정하기 위한, 당해분야의 통상적으로 이용되는 시약이 추가될 수 있다.

본 발명에서 상기 조성물은 400 내지 440nm에서 흡수 피크가 나타나는 것일 수 있으며, 바람직하게는 420nm에서 흡수 피크가 나타나는 것일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명에서 상기 조성물은 480 내지 520nm에서 방출 피크가 나타나는 것일 수 있으며, 바람직하게는 498nm에서 방출 피크가 나타나는 것일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.

다른 양태로서, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 글루코스 검출용 키트를 제공한다. 상기 키트는 본 발명의 화합물뿐만 아니라 특정 물질의 검출 키트 제조를 위해 당해 분야에서 통상적으로 이용되는 시약 등이 추가될 수 있다.

다른 양태로서, 본 발명은 상기 조성물과 검체를 반응시키는 단계를 포함하는 글루코스 검출방법을 제공한다.

상기 검출방법은 조성물과 검체를 반응시켜 형광 강도(fluorescence intensity)의 변화를 측정하는 방법일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니며, 상기 검출방법 및 형광 강도 측정은 당해 분야에서 통상적으로 사용하는 방법을 이용할 수 있다.

이하에서 본 발명의 이해를 돕기 위해 화학식 1의 일 실시예인 화학식 2로 나타내는 화합물의 제조방법을 예시적인 반응식에 기초하여 설명하지만, 본 발명이 속한 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 화학식 1 또는 2의 구조를 바탕으로 다양한 방법에 의해 화학식 1또는 2의 화합물 또는 이의 염을 제조할 수 있으며, 이러한 방법들은 모두 본 발명의 범주에 포함되는 것으로 해석되어야 한다. 즉, 본 명세서에 기재되어 있거나, 선행기술에 개시된 여러 합성법들을 임의로 조합하여 본 발명에 따른 화합물의 제조가 가능하며, 이는 본 발명의 범위 내에 속하는 것으로 이해하여야 한다.

본 발명의 화합물들에서 사용되는 산, 염기, 및 반응 용매는 이 분야에서 일반적으로 사용되는 것을 제한없이 사용할 수 있다. 예컨대, 산으로는 염산, 황산, 질산, 인산, 브롬화수소산, 요오드화수소산등과 같은 무기산과 타타르산, 포름산, 시트르산, 아세트산, 아디핀산, 트리클로로아세트산, 트리플루 오로아세트산, 글루콘산, 벤조산, 락트산, 푸마르산, 말레인산등과 같은 유기 카본산, 메탄설폰산, 벤젠설폰산, p-톨루엔설폰산 또는 나프탈렌설폰산 등과 같은 설폰산을 사용 할 수 있고, 염기로는 NaH, K₂CO₃, Na₂CO₃, NaHCO₃, K₃PO₄, KOH, NaOH, LiOH, n-BuLi, sec-BuLi, LiHMDS 등이 사용될 수 있으며, 반응용매는 DCM, THF, Dioxane, MeOH, EtOH, Hexane, EtOAC, Ether, DMF, DMSO, toluene, xylene 등 또는 이들의 혼합용매 등이 사용될 수 있다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시 예를 제시한다. 그러나, 하기의 실시 예는 본 발명을 더욱 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 실시 예에 의하여 본 발명이 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 화합물을 제조할 때, 반응 순서는 적절히 변경할 수 있다. 즉 임의의 반응 단계를 먼저 수행하거나 임의의 치환기 변화를 삽입할 수 있고, 필요에 따라서 예시한 시약 이외의 임의의 시약을 사용할 수 있다.

<실시예 1: DMC-001의 합성>

Step 1: 4,4,5,5-테트라메틸-2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,2-디옥소보롤란의 합성

플라스크에 1-브로모-2-메틸-4-(트리플루오오메틸)벤젠 20g (0.084mol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비스(1,3,2-디옥소보롤란) 42.5g (0.167mol), 아세트산 칼륨 32.85g (0.335mol), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II) 6.12g (0.0084mol), 1,4-디옥산 600ml를 투입한다. 100℃로 승온하고 1시간 교반한다. 반응 완료 확인 후 상온으로 냉각하고 정제수 600ml를 투입한다. 염화메틸렌 600ml로 추출하고 유기층을 황산마그네슘으로 탈수한다. 고체를 여과하고 농축한다. 헥산 500ml를 투입하고 상온에서 0.5시간 교반한다. 석출된 고체를 여과하여 제거하고 여과액을 농축한 뒤 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 방법으로 정제하여 21.5g을 수득한다 (수율 : 89.8%).

¹H-NMR (400MHz, CDCl₃): δ[ppm] = 1.38 (s, 12H), 2.61 (s, 3H), 7.42-7.43 (m, 2H), 7.88 (d, 1H)

Step2: 2-(2-(브로모메틸)-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥소보롤란의 합성

플라스크에 4,4,5,5-테트라메틸-2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,2-디옥소보롤란 21.5g (0.075mol), n-브로모숙신이미드 14.7g (0.083mol), 1,2-디클로로에탄(EDC) 390ml를 투입한다. 80℃로 승온하고 아조비스이소부티로니트릴(AIBN) 1.23g (0.0075mol)을 투입한다. 80℃에서 3시간 교반한다. 반응 완료 확인 후 상온으로 냉각하고 용매를 농축한다. 헥산200ml를 투입하고 상온에서 0.5시간 교반한다. 석출된 고체를 여과하여 제거하고 용매를 농축해서 29g을 수득한다. (수율: 106%). 추가정제없이 그 다음 반응에 사용한다.

¹H-NMR (400MHz, CDCl₃): δ[ppm] = 1.39 (s, 12H), 4.92 (s, 2H), 7.52 (d, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.93 (d, 1H)

Step3: 2-아세틸-9,10-디메틸안트라센의 합성

플라스크에 9,10-디메틸안트라센 20.6g (0.10mol), 염화메틸렌 600ml를 투입한다. 0~5℃ 로 냉각하고 염화아세틸 9.4g (0.12mol), 염화알루미늄 18.8g (0.149mol)을 투입한다. 상온에서 5시간 교반하고 추가로 1시간동안 환류한다. 반응 완료 확인 후 상온으로 냉각하고 얼음 1kg과 염산 50ml의 혼합액에 반응액을 투입한다. 0.5시간 교반하고 층분리 한다. 유기층을 농축한 뒤 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 방법으로 정제하여 14.0g을 수득한다 (수율 : 56.5%).

¹H-NMR (400MHz, CDCl₃): δ[ppm] = 2.80 (s, 3H), 3.15 (d, 6H), 7.60-9.00 (m, 7H)

Step4: 2-아세틸-9,10-비스(브로모메틸)안트라센의 합성

플라스크에 2-아세틸-9,10-디메틸안트라센 14.0g (0.056mol), 1,2-디클로로에탄(EDC) 300ml를 투입하고 완전히 용해될 때까지 교반한다. 용해 확인 후 n-브로모숙신이미드 22.1g (0.124mol)을 투입하고 1시간동안 환류 한다. 반응 완료 확인 후 상온으로 냉각하고 반응액을 농축한다. 메탄올 150ml를 투입하고 0.5시간 동안 교반한 후 석출된 고체를 여과하고 메탄올로 세척한다. 진공 건조기를 사용해서 40℃에서 12시간 이상 건조하여 7.7g을 수득한다 (수율: 33.6%).

¹H-NMR (400MHz, CDCl₃): δ[ppm] = 2.80 (s, 3H), 5.50 (d, 4H), 7.50-9.00 (m, 7H)

Step5: DMC-A004의 합성

플라스크에 β-알라닌 t-부틸 에스테르 염산염 12.5g (0.069mol), n-(3-아미노프로필)메타크릴아마이드 염산염 12.3g (0.069mol), 부틸레이티드하이드록시톨루엔(BHT) 280mg (0.00127mol), N.N-디이소프로필에틸아민(DIPEA) 24ml (0.138mol) 클로로포름 400ml를 투입하고 30℃에서 18시간 이상 교반한다. 반응 완료 환인 후 정제수 200ml씩 3회 세척하고 유기층을 황산마그네슘으로 탈수한다. 고체를 여과하고 농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 방법으로 분리 하여 1.1g을 수득한다 (수율 : 15.0%).

¹H-NMR (400MHz, CDCl₃) : δ[ppm] = 1.42 (s, 9H), 1.74(t, 2H), 1.98(s, 3H), 2.50(m, 7H), 2.94(d, 2H), 3.18(d, 2H), 4.16(m, 6H), 5.72(s, 1H), 5.79(s, 1H), 7.29-8.70(m, 8H).

Mass (Shimadzu LC-MS) : m/z = 532 [M+H]⁺

Step6: DMC-A005의 합성

플라스크에 DMC-A004 200mg (0.38mmol), N.N-디이소프로필에틸아민(DIPEA) 520μl (2.97mmol), 클로로포름 20ml를 투입하고 상온에서 교반한다. 부틸레이티드하이드록시톨루엔(BHT) 10mg (0.038mmol), 2-(2-(브로모메틸)-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥소보롤란 535mg (1.47mmol) 을 투입하고 상온에서 24시간 이상 교반한다. 반응 완료 확인 후 반응액을 농축하고 이소프로필에테르 20ml에 용해하고 인산완충액(0.2M, pH7.0) 20ml씩 3회 세척한다. 유기층을 농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 방법으로 분리하여 200mg을 수득한다 (수율 : 48.3%).

¹H-NMR (400MHz, CDCl₃) : δ[ppm] = 1.42 (s, 9H), 1.73(t, 2H), 1.98(s, 3H), 2.46(m, 7H), 3.18(d, 2H), 3.66-3.76(m, 6H), 4.10(s, 2H), 4.20(s, 4H), 5.72(s, 1H), 5.79(s, 1H), 7.28-8.70(m, 14H).

Mass (Shimadzu LC-MS) : m/z = 936 [M+H]⁺, 918 [M-H₂O+H]⁺, 900 [M-2H₂O+H]⁺

Step7: DMC-001의 합성

플라스크에 DMC-A005 200mg (0.182mmol), 20wt% 트리플루오로아세트산을 포함하는 염화메틸렌 용액 5ml를 투입하고 상온에서 20시간 이상 교반한다. 반응 완료 확인 후 농축하고 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 방법으로 분리하여 74mg을 수득한다 (수율 : 43.5%).

¹H-NMR (400MHz, CDCl₃) : δ[ppm] = 1.73(t, 2H), 1.98(s, 3H), 2.46(m, 7H), 3.18(d, 2H), 3.66-3.76(m, 6H), 4.10(s, 2H), 4.20(s, 4H), 5.72(s, 1H), 5.79(s, 1H), 7.28-8.70(m, 14H), 12.27(s, 1H).

Mass (Shimadzu LC-MS) : m/z = 880 [M+H]⁺, 862 [M-H₂O+H]⁺, 844 [M-2H₂O+H]⁺

한편, 본 발명의 DMC-1의 효과와 비교하기 위해 이용한 DMC-2의 구조는 아래 화학식 3과 같다.

[화학식 3]

<실시예 2: 흡수 및 방출 스펙트럼 분석>

PBS 버퍼 (pH7.5)에 녹인 글루코스와 에탄올에 DMC-1,-2를 녹여 준비하고, 튜브에 DMC-1 혹은 DMC-2의 최종 농도가 각각 50 uM과 100 uM, 그리고 글루코스의 최종 농도가 0, 50, 100, 200 mg/dL가 되도록 혼합하여 샘플들을 준비하였다. 각 샘플 혼합물들을 384-well plate에 30 uL씩 3개의 well 각각 옮겨 담아 형광 플레이트 리더기로 흡수 및 방출 스캐닝을 통해 형광 값을 읽었다. 흡수 스캐닝은 흡수 파장 230-550 nm, 방출 파장 600 nm로 설정하며 방출 스캐닝은 흡수 파장 230 nm, 방출 파장 280-850 nm로 설정하였다.

그 결과, 도 1 및 2에 나타난 바와 같이 본원 발명 화합물인 DMC-1은 글루코스와 결합하였을 때, 약 415 nm의 흡수 피크 및 약 498 nm의 방출 피크를 가짐을 확인하였고, 안트라센 모체에 아세틸기가 비치환된 DMC-2는 글루코스와 결합하였을 때, 약 380 nm의 흡수 피크 및 약 426 nm의 방출 피크를 가짐을 확인하였다. 이는 본 발명의 신규 합성한 물질(DMC-1)의 방출 피크 파장이 더 긴 파장 영역으로 이동되어 형광 특성이 유리하게 향상되었으며 인체 내 삽입 혹은 근접 사용 시에 기존 화합물보다 높은 안전성을 확보할 수 있음을 의미한다. 또한, 바이오센서 등의 응용 기술 개발 시, 보다 저렴한 광원 사용을 가능하게 함으로써 가격 경쟁에서 우위성을 확보할 수 있게 한다.

<실시예 3: DMC-1 농도에 따른 반응 강도 확인>

DMC-1과 글루코스를 혼합하여 최종 농도가 각각 0, 15, 30, 50, 100 uM의 DMC-01, 0, 100, 300, 500 mg/dL 글루코스가 되도록 하여 총 20개의 샘플을 준비하였다. 각 혼합물들을 384-well plate에 30 uL씩 3개의 well 각각 옮겨 담고 형광 플레이트 리더기로 흡수 파장 420 nm, 방출 파장 500 nm로 설정하여 각 샘플의 형광 세기 값을 측정하였다.

그 결과, 도 3에 나타난 바와 같이 DMC-1의 농도가 증가함에 따라 형광 강도도 증가하였으며, 글루코스 첨가 유무 및 농도 증가에 따라 현저한 형광 광도 차이가 있어 DMC-1는 글루코스 검출 감도가 뛰어남을 확인하였다.

<실시예 4: 글루코스에 대한 본 발명 화합물의 감도 확인>

DMC-1 혹은 DMC-2와 글루코스를 각각 혼합한 샘플을 준비하였으며 DMC-1 혹은 DMC-2의 최종 농도는 50 uM가 되도록 하였으며 글루코스의 최종 농도가 0-600 mg/dL 범위 내에 들어가도록 총 22개의 혼합 샘플을 준비하였다. 각 혼합물들을 384-well plate에 30 uL씩 3개의 well 각각 옮겨 담고 형광 플레이트 리더기로 흡수 파장 420 nm, 방출 파장 500 nm로 설정하여 각 샘플의 형광 세기 값을 측정하였다.

그 결과, 도 4에 나타난 바와 같이 흡수 파장 420 nm, 방출 파장 500 nm 조건 하에서 DMC-1의 경우 글루코스 첨가 농도가 증가함에 따라 형광 강도가 증가하는 경향을 보였으나 DMC-2의 경우 글루코스 농도가 증가하여도 형광 강도가 거의 증가하지 않음을 확인하였다. 이는 장파장의 조건 하에서 DMC-1의 글루코스 감지 감도가 현저히 우수함을 의미한다.

<실시예 5: 본 발명 화합물을 이용한 글루코스 검출 시, 다른 화합물로 인한 간섭 효과 확인 (선택성 간접적 확인)>

최종 농도가 50 uM인 DMC-1 혹은 DMC-2를 글루코스 최종 농도 50 mg/dL 및 100 mg/dL가 되도록 기본적으로 혼합한다. 다른 화합물로는 유사 당류와 대표적 진통제 류를 선택하였으며, 최종 농도가 200 mg/dL의 말토스, 98 mg/dL의 만니톨, 180 mg/dL의 자일로스, 15 mg/dL의 갈라토스, 50 mg/dL의 이부프로펜이 되도록 하였으며 농도 기준은 ISO 및 체내 농도 기준으로 하였다. 글루코스와 DMC-1 혹은 DMC-2만이 섞인 혼합 샘플 1개(Glc+DMC-1 및 Glc+DMC-2, 도 5 및 6), 글루코스 및 DMC-1 혹은 DMC-2 그리고 각각 다른 화합물을 혼합한 샘플 5개(도 5 및 6), 마지막으로 글루코스, DMC-1 혹은 DMC-2 그리고 5개의 다른 화합물 모두를 혼합한 샘플 1개(Glc+DMC-1+All 및 Glc+DMC-2+All, 도 5 및 6)를 준비하였다. 각 혼합물들을 384-well plate에 30 uL씩 3개의 well 각각 옮겨 담고 형광 플레이트 리더기로 DMC-1을 혼합한 샘플들은 흡수 파장 420 nm, 방출 파장 500 nm로 설정하고, DMC-2을 혼합한 샘플들은 흡수 파장 380 nm, 방출 파장 426 nm로 설정하여 각 샘플의 형광 세기 값을 측정하였다. 글루코스와 DMC-1 혹은 DMC-2만을 혼합한 샘플의 형광 세기 값을 1로 보고 나머지 샘플에 대한 형광 세기의 상대 값(비율)을 계산하였다.

그 결과, 도 5 및 6에 나타난 바와 같이 DMC-2 비해 DMC-1이 글루코스에 대한 선택성이 훨씬 크다는 것이 확인되었으며 다른 화합물이 있는 경우에도 측정된 신호에 영향을 보다 적게 받음을 확인하였다. 따라서, DMC-1이 DMC-2에 비해 글루코스의 선택적 검출에 더 큰 이점이 있는 화합물에 해당한다. DMC-002의 경우 만니톨에 대한 간섭 효과가 DMC-1보다 크게 나왔으며, 그로 인해 다수 성분을 혼합한 분석에서도 변별력이 낮은 것을 확인하였다.

Claims

하기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 염:
[화학식 1]

(상기 화학식 1에서 X는 독립적으로 -F, -Cl, -Br 또는 -I 중 어느 하나이다).
하기 화학식 2로 표시되는 화합물 또는 이의 염:
[화학식 2]
제1항의 화합물 또는 이의 염을 포함하는 글루코스 검출용 조성물.
제3항에 있어서, 상기 조성물은 400 내지 440nm에서 흡수 피크가 나타나는 것인, 조성물.
제3항에 있어서, 상기 조성물은 480 내지 520nm에서 방출 피크가 나타나는 것인, 조성물.
제3항의 조성물을 포함하는 글루코스 검출용 키트.
제3항의 조성물과 검체를 반응시키는 단계를 포함하는 글루코스 검출방법.