KR102234446B1 - 피부투과성 재조합 뉴로펩타이드 콤플렉스가 함유된 용해성 마이크로니들 패치 - Google Patents

Abstract

본 발명은 피부투과성 재조합 뉴로펩타이드 콤플렉스가 함유된 용해성 마이크로니들 패치에 관한 것으로, 피부 침투성이 우수하여 주름 개선 및 피부 탄력 증진에 탁월한 효과를 발휘한다.

Description

피부투과성 재조합 뉴로펩타이드 콤플렉스가 함유된 용해성 마이크로니들 패치 {Soluble micro-niddle patch with skin penetrating recombinant neuropeptide complex}

본 발명은 마이크로니들 패치에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 피부투과성 재조합 뉴로펩타이드 콤플렉스가 함유된 용해성 마이크로니들 패치에 관한 것이다.

피부에 효과적인 물질들을 전달하기 위한 방법으로, 주사 바늘을 통한 효능 물질의 주입 방식을 우선 고려해 볼 수 있다. 그러나, 수 mm 내외의 직경을 갖는 주사 바늘은 피부에 접촉시 환자에게 통증을 줄 수 있고, 공포감을 유발하기도 하며, 혈관이 터지는 등의 사고를 유발할 수도 있다.

최근 피부에 효능물질을 전달하는 방법으로, 각질을 통과하여 피부층에 직접 효능물질을 투입하는 마이크로 니들 기술이 많은 관심을 받고 있다. 더욱이 최근에는 수용성 고분자를 기초로 하는 용융 마이크로 니들이 개발되어 팁이 피부 내로 침투됨과 동시에 효능물질이 피부 내로 직접 투입될 수 있는 방식이 개발되고 있다.

수용성 마이크로 니들 패치를 이용할 경우, 충분한 양의 효능 물질이 표피층(epidermis layer) 또는 진피층(dermis layer)에 도달될 수 있으며, 피부에 유의적인 효과를 발휘할 수 있다.

대한민국 특허공개번호 제1020190132291호 (공개일자 2019.11.27)에는, 홍합 접착 단백질 및 히알루론산을 포함하는 제1 하이드로겔 층 및 실크 피브로인을 포함하는 제2 하이드로겔 층을 포함하는 마이크로니들 패치, 및 그 제조 방법이 기재되어 있다.

본 발명에서는 피부 침투성이 우수하여 효과적인 주름 개선 및 피부 탄력 증진 효과가 발휘될 수 있는 마이크로니들 패치 제형을 개발하여 제공하고자 한다.

본 발명은 서열번호 1 내지 5의 뉴로펩타이드 및 생분해성 고분자물질을 포함하는 것을 특징으로 하는 마이크로니들 제조용 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 서열번호 1 내지 5의 뉴로펩타이드 및 생분해성 고분자 물질을 포함하는 용해성 마이크로 니들을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 본 발명의 용해성 마이크로 니들이 상부에 위치하고, 하부는 피부 부착용 패치로 구성된 마이크로니들 패치를 제공한다.

본 발명은 생분해성 고분자 물질에 서열번호 1 내지 5의 뉴로펩타이드를 첨가해서 혼합액을 제조하는 단계 (a); 상기 단계 (a)의 혼합액을 삼각형의 마이크로니들이 형성되는 몰드(mold)에 넣고, 건조하여 건조 박막 (membrane)을 제조하는 단계 (b); 상기 단계 (b)에서 제조된 건조된 박막 (membrane)을 하이드로콜로이드에 부착하여 패치 제형으로 제조하는 단계 (c);를 포함하는 것을 특징으로 하는 마이크로니들 패치의 제조방법을 제공한다.

본 발명에 의할 경우, 피부 침투성이 우수하여 주름 개선 및 피부 탄력 증진에 탁월한 효과를 발휘한다.

도 1은 본 발명의 재조합 뉴로펩타이드가 함유된 용해성 마이크로 니들패치 제조 공정 흐름도이다.
도 2는 본 발명에서 제조한 재조합 뉴로펩타이드가 함유된 용해성 마이크로니들 패치의 사진이다.
도 3은 본 발명에서 제조한 마이크로니들의 피부 투과도 측정 현미경 사진이다.
도 4는 마이크로니들에 힘이 가해지는 경우 마이크로니들이 변형되는 모습을 나타낸다.
도 5는 시간에 따른 마이크로니들의 평균 길이 변화 그래프이다.
도 6은 시간에 따른 마이크로니들의 용해정도를 보여주는 사진이다.
도 7은 양성대조군(PLA)의 SEM 이미지와 본 발명 마이크로니들 패치의 SEM 이미지를 비교하여 보여준다.
도 8은 본 발명 마이크로 니들 패치 적용 후, 눈가 주름 개선 이미지 촬영 결과이다.
도 9는 본 발명 마이크로니들 패치 적용 후, 팔자주름 개선 이미지 촬영 결과이다.
도 10은 본 발명 마이크로니들 제품 사용 후 제품의 효능에 대한 설문 결과이다.
도 11은 본 발명 마이크로니들 제품 사용 후 제품의 사용성에 대한 설문 결과이다.

본 발명은 서열번호 1 내지 5의 뉴로펩타이드 및 생분해성 고분자물질을 포함하는 것을 특징으로 하는 마이크로니들 제조용 조성물을 제공한다.

서열번호 1에 기재된 SP1-EGF는, EGF 서열의 N말단에 서열번호 6에 기재된 PEP-1 서열(PTD로서 역할)이 GS를 매개(링커)로 하여 결합된 재조합 펩타이드이다. 본 발명의 마이크로니들 제조용 조성물에는 바람직하게 1~5ppm 함유될 수 있다.

서열번호 2에 기재된 SP1-FGF1은, FGF1 서열의 C말단에 서열번호 6에 기재된 PEP-1 서열 (PTD로서 역할)이 GS를 매개(링커)로 하여 결합된 재조합 펩타이드이다. 본 발명의 마이크로니들 제조용 조성물에는 바람직하게 1~5ppm 함유될 수 있다.

서열번호 3에 기재된 SP1-SOD1는, SOD1 서열의 N말단에 서열번호 6에 기재된 PEP-1 서열 (PTD로서 역할)이 LE를 매개(링커)로 하여 결합된 재조합 펩타이드이다. 본 발명의 마이크로니들 제조용 조성물에는 바람직하게 1~5ppm 함유될 수 있다.

서열번호 4에 기재된 Bicelphin-IGF1는, IGF1 서열의 N말단에 서열번호 7에 기재된 Bicelphin 서열 (PTD로서 역할)이 LE를 매개(링커)로 하여 결합된 재조합 펩타이드이다. 본 발명의 마이크로니들 제조용 조성물에는 바람직하게 1~5ppm 함유될 수 있다.

서열번호 5에 기재된 SP1-NPToc는, NPToc 서열의 N말단에 서열번호 6에 기재된 PEP-1 서열 (PTD로서 역할)이 결합된 재조합 펩타이드이다. 본 발명의 마이크로니들 제조용 조성물에는 바람직하게 0.01~1ppm 함유될 수 있다.

본 발명의 서열번호 1~5의 재조합 펩타이드에는 PTD가 결합되어 있다. PTD는 생물학적 분자들이 통과하지 못하는 세포투과를 할 수 있는데, 이는 세포막의 글라이코사미노클라이칸 (glycosaminoglycan, GAG)을 통해 세포 내로 들어갈 수 있으며, 엔도사이토시스 경로를 통해 유입될 수 있다. 기존의 전달체 (예컨대, 리포좀, 폴리머 등)보다 PTD의 중요한 장점은 치료 목적이나 진단용으로 세포 내에 전달하고자 할 때 낮은 독성과 치료에 대한 면역거부반응이 적고, 고농도의 처리 방법에 따른 문제점을 단계적인 처리기법으로 개선할 수 있는 이점을 지니고 있는 것이다.

본 발명의 용해성 마이크로니들 제조용 조성물에 있어서, 생분해성 고분자 물질은 마이크로니들을 형성하여 그 형태를 유지할 수 있고, 피부 투과 후 체내에서 용해되는 물질이라면 제한 없이 사용할 수 있다. 예를 들어, 히알루론산 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 카르복시메틸셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 폴리비닐알코올, 폴리락틱글리콜산, 젤라틴, 콜라겐, 키토산 또는 이들의 혼합물일 수 있으나, 반드시 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 생분해성 고분자 물질의 평균 분자량은 바람직하게 300 내지 800 kDa일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 500 내지 750 kDa 일 수 있다. 상기 생분해성 고분자 물질은 조성물의 총 중량 대비 45 내지 80 %로 포함될 수 있다. 본 발명의 일 구체예에 따르면, 1개 이상의 생분해성 고분자 물질의 혼합물로 이루어 질 수 있으며, 상기 생분해성 고분자 물질은 분자량이 상이한 동일 고분자 물질의 혼합물일 수도 있다. 본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 생분해성 고분자 물질은 히알루론산 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염일 수 있다. 상기 히알루론산 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 평균 분자량은 300 내지 800 kDa일 수 있으며, 바람직하게는 500 내지 750 kDa 일 수 있다.

본 발명의 일 구체예에 따르면, 본 발명의 조성물은 친수성 용매에 용해된 것일 수 있다. 상기 친수성 용매는 예를 들어, 물, 이온수, 생리식염수, 증류수, 정제수, 멸균 정제수, C1-4 알코올을 들 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 바람직하게는 물일 수 있다. 본 발명의 마이크로니들 제조용 조성물은 사용 목적에 맞게 가용화제, 가소제, 계면활성제, 보존제 등을 더 포함할 수 있다.

한편, 본 발명은 서열번호 1 내지 5의 뉴로펩타이드 및 생분해성 고분자 물질을 포함하는 용해성 마이크로 니들을 제공한다.

마이크로니들 기술은 기존의 단순 패치 형태가 아닌 피부층을 관통하는 마이크로 크기의 채널을 형성하는 것으로, 국소적이고 효과적인 경피 약물 전달 시스템 (transdermal drug delivery system)이다. 이 기술은 기존 피하주사의 통증 및 경구 투여시 발생하는 약물 변성 및 낮은 흡수율을 극복한 것으로, 다양한 약물, 호르몬, 백신 등을 경피 전달하는 것을 목적으로 한다. 실리콘, 금속, 유리, 세라믹 등의 다양한 물질이 재료로 선택될 수 있고, 고형(solid), 코팅(coated), 용해성 (dissolving) 및 할로우(hollow) 등의 마이크로니들 형태로 성형되어 효능물질을 피부층에 주입시킬 수 있다. 본 발명에서는 용해성 마이크로니들을 개발하였다.

본 발명에서는 용해성 마이크로니들을 개발하여 본 발명 서열번호 1~5의 뉴로펩타이드를 피부에 전달함으로써 피부주름 개선 등의 효과를 발휘시키고자 하였다. 마이크로니들 제형에 있어, 효능물질 (본 발명 서열번호 1~5 뉴로펩타이드의 주름 개선에 대한 효능)이 마이크로니들 제형으로 제조되어도 피부에 유효하게 침투하여 기대 효능이 발휘되는지를 검증할 필요가 있는데, 하기 본 발명의 실험에 의할 경우, 본 발명 서열번호 1~5의 뉴로펩타이드는 본 발명 조성의 마이크로니들 제형으로 제조되어도, 피부에 유효하게 침투하여 현저한 주름개선 효능을 보임을 확인할 수 있었다.

한편, 본 발명은 상기 본 발명의 용해성 마이크로 니들이 상부에 위치하고, 하부는 피부 부착용 패치로 구성된 마이크로니들 패치를 제공한다. 본 발명의 마이크로니들 패치는 점착성을 가지는 소재일 수 있는데, 바람직하게 하이드로겔을 사용할 수 있다. 조직 공학 분야에서 널리 활용되고 있는 하이드로겔 (hydrogel)은 물 또는 체액 내에서 가교된 격자 안으로 많은 양의 물 또는 체액을 흡수하여 팽윤되며, 물 속에서도 흩어지지 않고 삼차원 구조를 유지하는 재료이다. 팽윤된 이후에도, 열역학적으로 안정하게 존재하여 액체와 고체의 중간 형태에 해당하는 기계적 및 물리화학적 특성을 갖는다. 이러한 하이드로겔은 대개 우수한 생체 적합성, 높은 다공성 및 산소 투과도를 보이며, 생체 연조직과 비슷한 물리적 특성을 나타낼 수 있다.

한편, 본 발명은 생분해성 고분자 물질에 서열번호 1 내지 5의 뉴로펩타이드를 첨가해서 혼합액을 제조하는 단계 (a); 상기 단계 (a)의 혼합액을 삼각형의 마이크로니들이 형성되는 몰드(mold)에 넣고, 건조하여 건조 박막 (membrane)을 제조하는 단계 (b); 상기 단계 (b)에서 제조된 건조된 박막 (membrane)을 하이드로콜로이드에 부착하여 패치 제형으로 제조하는 단계 (c);를 포함하는 것을 특징으로 하는 마이크로니들 패치의 제조방법을 제공한다.

상기 본 발명의 마이크로니들 패치의 제조방법에 있어서, 상기 건조는, 바람직하게 20~40℃의 온도에서 12~36시간 동안 수행하는 것이 좋다.

또한, 상기 단계 (a)의 혼합액에는, 마이크로니들 제조를 위해 널리 사용되는 마이크로니들 제조용 부형제 또는 보조제를 더 포함할 수 있다. 기타, 마이크로니들 제조에 관한 공지의 기술을 본 발명에 사용하여 마이크로니들 패치를 제조할 수 있다.

이하, 본 발명의 내용에 대해 실시예 및 실험예를 통해 더욱 상세히 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예 및 실험예에만 한정되는 것은 아니고, 그와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.

[실시예 1: 마이크로니들 패치 제작]

재조합 뉴로펩타이드가 함유된 용해성 마이크로 니들패치는 도 1에 기재한 공정으로 제작되었다. 도 1은 본 발명의 재조합 뉴로펩타이드가 함유된 용해성 마이크로 니들패치 제조 공정 흐름도이다.

(1) 혼합액 제조: 표 1에 기재된 성분들과 정제수를 11:89의 중량비로 혼합하고 고르게 섞어 혼합액을 제조하였다.

(2) 건조: 건조를 위해 상기에서 제조한 혼합액을 몰드 플레이트에 일정량 씩 소분하고, 30℃에서 24시간 건조하여 건조 박막 (membrane)을 제조하였다.

(3) 성형: 상기에서 제조한 박막 (membrane)을 하이드로콜로이드에 부착하여 일정한 모양으로 성형함으로써 본 발명의 마이크로니들 패치를 제조하였다.

본 발명의 뉴로펩타이드가 함유된 용해성 마이크로니들 패치 제형 처방에 대한 구체적인 것은 하기 표 1에 나타내었다. 본 실시예의 마이크로니들 패치에 첨가된 주요 효능 성분은 (1) SP1-EGF (서열번호 1), (2) SP1-FGF1 (서열번호 2), (3) SP1-SOD1 (서열번호 3), (4) Bicelphin-IGF1 (서열번호 4), (5) SP1-NPToc (서열번호 5)이다.

(1) SP1-EGF: 서열번호 1에 기재된 SP1-EGF는, EGF 서열의 N말단에 서열번호 6에 기재된 PEP-1 서열(PTD로서 역할)이 GS를 매개(링커)로 하여 결합된 재조합 펩타이드이다.

(2) SP1-FGF1: 서열번호 2에 기재된 SP1-FGF1은, FGF1 서열의 C말단에 서열번호 6에 기재된 PEP-1 서열 (PTD로서 역할)이 GS를 매개(링커)로 하여 결합된 재조합 펩타이드이다.

(3) SP1-SOD1 : 서열번호 3에 기재된 SP1-SOD1는, SOD1 서열의 N말단에 서열번호 6에 기재된 PEP-1 서열 (PTD로서 역할)이 LE를 매개(링커)로 하여 결합된 재조합 펩타이드이다.

(4) Bicelphin-IGF1: 서열번호 4에 기재된 Bicelphin-IGF1는, IGF1 서열의 N말단에 서열번호 7에 기재된 STeP 서열 (PTD로서 역할)이 LE를 매개(링커)로 하여 결합된 재조합 펩타이드이다.

(5) SP1-NPToc : 서열번호 5에 기재된 SP1-NPToc는, NPToc 서열의 N말단에 서열번호 6에 기재된 PEP-1 서열 (PTD로서 역할)이 결합된 재조합 펩타이드이다.

재조합 뉴로펩타이드가 함유된 용해성 마이크로니들 패치 제형 처방

순번	원료명(INCI name)	함량(%)	기능
1	Sodium hyaluronate	88.63509	humectant, skin conditioning
2	Glycerin	4.68969	humectant, skin conditioning, skin protecting
3	Hydroxypropyl Cyclodexrin	4.68969	skin conditioning
4	Trehalose	0.93794	humectant, moisturising
5	Adenosine	0.10317	skin conditioning
6	Ectoin	0.47835	skin conditioning
7	Disodium Phosphate	0.26966	Buffering Agent
8	Copper Tripeptide-1	0.09379	skin conditioning
9	Sodium Phosphate	0.05346	Buffering Agent
10	Tripeptide-46 Hexapeptide-40 Decapeptide-27 Methionyl Oligopeptide-91 Tetrapeptide-38 sh-Oligopeptide-1 (SP1-EGF)	0.00469	효능물질
11	sh-Polypeptide-11 Dipeptide-35 Oligopeptide-91 Dipeptide-19 Hexapeptide-40 (SP1-FGF1)	0.00469	효능물질
12	Tripeptide-46 Hexapeptide-40 Decapeptide-27 Oligopeptide-91 Dipeptide-19 sh-Polypeptide-60 Tetrapeptide-48 (SP1-SOD1)	0.00469	효능물질
13	r-(Oligopeptide-133 sh-Oligopeptide-2) (Bicelphin-IGF1)	0.00188	효능물질
14	sr-(Oligopeptide-91 Clostridium Botulinum Polypeptide-1) (SP1-NPToc)	0.00001	효능물질
15	Acetyl Hexapeptide-8	0.00001	skin conditioning
16	Soidium Dextran Sulfate	0.00094	skin conditioning
17	Lysine	0.00469	skin conditioning
18	Arginine	0.00094	skin conditioning
19	Aspartic acid	0.00094	skin conditioning
20	Threonine	0.00188	skin conditioning
21	Serine	0.00188	skin conditioning
22	Glutamic acid	0.00047	skin conditioning
23	Proline	0.00375	skin conditioning
24	Glycine	0.00469	skin conditioning
25	Alanine	0.00281	skin conditioning
26	Valine	0.00188	skin conditioning
27	Methionine	0.00084	skin conditioning
28	lsoleucine	0.00188	skin conditioning
29	Leucine	0.00188	skin conditioning
30	Phenylalanine	0.00188	skin conditioning
31	Histidine	0.00094	skin conditioning
32	Cysteine	0.00094	skin conditioning
	소계	100%

한편, 본 발명에서 제조한 재조합 뉴로펩타이드가 함유된 용해성 마이크로니들 패치의 사진은 도 2와 같았다. 도 2는 본 발명에서 제조한 재조합 뉴로펩타이드가 함유된 용해성 마이크로니들 패치의 사진이다.

[실험예 1: 상기 실시예 1에서 제조한 본 발명 마이크로니들 패치의 물성 평가]

(1) 마이크로니들의 피부투과도 측정

마이크로니들에 함유되어 있는 유효 성분이 경피를 통해 피부내로 효율적으로 전달되기 위해서는 마이크로니들 패치의 마이크로니들이 피부를 투과하여야 한다. 본 실험에서는 전체 마이크로니들 숫자 중 피부를 투과한 마이크로니들의 수를 ‘마이크로니들 피부 투과도’라 정의하였다.

마이크로니들의 피부 투과도를 확인하기 위해 돼지 등 피부를 해동시킨 뒤 1.75cm X 1.1cm의 크기로 자른 마이크로니들을 올리고 45~50N의 일정한 힘으로 10초간 누른 후 마이크로니들을 제거하였다. 마이크로니들 제거 후 진피층을 염색하는 트리판 블루 (trypan blue)를 도포하여 마이크로니들이 투과된 부위를 염색시키고, 5 분뒤 각질 표면에 잔류한 트리판 블루를 면봉으로 제거한 후 현미경으로 관찰하여 트리판 블루로 염색된 블루 닷(blue dot)의 개수를 측정하여 아래와 같은 식을 활용하여 피부투과도를 계산하였다.

[수학식 1]

마이크로니들의 피부투과도를 측정한 결과, 10개의 샘플 모두 100%의 피부투과도를 나타내었다 (도 3). 실험을 통해 본 발명 마이크로니들 패치의 매우 우수한 투과도를 확인하였으며, 제조된 마이크로니들은 피부를 투과하기에 충분한 기계적 강도와 뾰족함을 가졌음을 확인할 수 있었다. 도 3은 본 발명에서 제조한 마이크로니들의 피부 투과도 측정 현미경 사진이다.

(2) 본 발명에서 제조한 마이크로니들의 강도 측정

마이크로니들이 피부를 얼마나 잘 투과하는가에 있어서 마이크로니들의 강도는 중요한 인자이다. 용해성 마이크로니들은 solid 마이크로니들, coated 마이크로니들에 비해 재료적으로 무른 특성을 갖고 있어, 피부를 투과할 수 있는 강도를 가져야 피부 속으로 적절하게 유효 성분을 전달 할 수 있으므로, 마이크로니들 강도는 마이크로니들 제작에 있어 확인이 필요한 물성이다.

마이크로니들 강도 측정에 대한 국제 표준 및 국내 표준이 아직 정해진바가 없으며, 기존 선행연구들을 확인해 보면 0.05N/needle의 강도를 가질 때 피부를 투과 할 수 있는 것으로 사료된다.

마이크로니들의 강도를 측정하기 위해 universal testing machine 장비를 사용하여 측정하였으며, 마이크로니들을 2X2 (총 4개) needle로 제작한 후 장비의 compression mode로 10N의 힘까지 눌러 수직적인 힘에 의한 니들의 변형을 force-displacement를 이용하여 관찰하고, 그래프의 초기 기울기 값을 계산하여 니들의 강도를 측정하였다. 수직적 힘에 의한 변형을 정량적으로 관찰하고 피부 투과 실험과 연계하여 니들 형성의 적합성을 판단하였다. 그 결과는 표 2와 같았다.

본 발명 마이크로 니들의 강도 측정

샘플번호	1	2	3	4	5
강도(N/needle)	0.371	0.491	0.528	0.429	0.384
6	7	8	9	10	평균
0.419	0.558	0.559	0.396	0.424	0.456

*실험실 온도:23.5℃, 습도:45%

*팁 끝으로부터 니들이 150μm 변형되었을때의 힘을 기준으로 계산

마이크로니들의 강도가 낮을 경우 마이크로니들은 피부를 투과하지 못하고 피부에 의해 니들의 변형이 발생한다. 자사 개발 마이크로 니들 강도 평균이 0.456 N/needle로 피부를 투과하기 위한 기준 니들강도인 0.05N 이상의 강도를 보이고 있어, 피부를 투과하기 위한 충분한 강도를 가진 것으로 사료되었다. 도 4는 마이크로니들에 힘이 가해지는 경우 마이크로니들이 변형되는 모습을 나타낸다.

(3) 마이크로니들의 용해속도

마이크로니들이 피부주름개선 효과를 나타내기 위해서는 마이크로니들이 피부에서 용해되어 유효성분이 피부 속으로 전달되어야 하며, 피부에서 니들이 용해되는 시간이 오래 걸릴 경우 마이크로니들 패치 부착시간이 길어지기 때문에 사용자 관점에서 불편을 느낄 수 있다. 따라서, 마이크로니들이 피부를 투과해 실제 용해되는 속도의 확인이 필요하다.

마이크로니들 용해속도를 측정하기 위해 마이크로니들을 돼지 피부에 찌른 후 0, 5, 10, 20, 30, 60min 후 떼어낸 뒤 SEM을 통해 마이크로니들의 남은 높이를 측정하고, 아래와 같은 식을 활용하여 계산하였다.

[수학식 2]

[수학식 3]

마이크로니들을 돼지 피부에 부착 후 5분 이내에 50%의 니들이 피부로 용해되었다. 또한, 10.06 %/min 이상의 니들이 용해되는 것으로 나타났으며, 20분 이내에 80 % 이상 용해되었다 (표 3). 이와 결과로부터, 본 발명에서 개발된 마이크로니들을 피부에 부착할 경우 내부에 포함된 유효성분을 빠르게 전달할 수 있을 것으로 사료되었다.

마이크로 니들 용해도 및 용해속도

	니들 부착 시간
	0min			5min			10min			20min			30min			60min
샘플번호	잔존니들길이 (μm)	니들 용해도 (%)	용해속도 (%/min)	잔존니들길이 (μm)	니들 용해도 (%)	용해속도 (%/min)	잔존니들길이 (μm)	니들 용해도 (%)	용해속도 (%/min)	잔존니들길이 (μm)	니들 용해도 (%)	용해속도 (%/min)	잔존니들길이 (μm)	니들 용해도 (%)	용해속도 (%/min)	잔존니들길이 (μm)	니들 용해도 (%)	용해속도 (%/min)
1	250	-	-	122	51.2	10.24	61	75.6	7.56	44	82.4	4.12	35	86	2.87	25	90	1.5
2	251	-	-	126	49.6	9.92	62	75.2	7.52	46	81.6	4.08	38	84.8	2.83	28	88.8	1.48
3	249	-	-	126	49.6	9.92	69	72.4	7.24	45	82	4.1	39	84.4	2.81	29	88.4	1.47
4	249	-	-	126	49.6	9.92	64	74.4	7.44	48	80.8	4.04	39	84.4	2.81	24	90.4	1.51
5	251	-	-	121	51.6	10.32	65	75	7.5	45	82	4.1	39	84.4	2.81	25	90	1.5
평균	250	-	-	124.2	50.32	10.06	64.2	74.52	7.45	45.6	81.76	4.09	38	84.8	2.83	26.2	89.52	1.49

마이크로니들 부착 후 5분 후에 높이의 약 49~51%가 용해되었고, 빠른 용해 속도를 보였다. 마이크로니들은 5분 내에 급격한 용해가 발생하였지만, 시간이 지날수록 마이크로니들의 용해속도가 점차 느려지는 패턴을 관찰할 수 있었으며, 60분 부착 시 약 10~12%는 용해되지 않고 잔류하였다. 이는 초기에 작은 부피의 니들 팁이 수분이 충분한 피부 층에서 빠르게 용해되지만 니들 뒷부분의 경우 용해되어야하는 부피가 늘어나며, 니들 용해에 필요한 수분이 각질에 가까이 갈수록 상대적으로 감소하기 때문일 것이라 예상되었다.

도 5는 시간에 따른 마이크로니들의 평균 길이 변화 그래프이고, 도 6은 시간에 따른 마이크로니들의 용해 정도를 보여주는 사진이다.

[실험예 2: 본 발명 마이크로 니들 패치의 장기 보관 안정성 시험]

마이크로니들 패치 제품에 대하여 온도별 (-20℃, 25℃, 40℃), 습도별(40%, 90%) 장기 보관 안정성 평가를 실시하였다. 각 조건별로 0주, 4주, 8주, 12주 보관 후 평가하였으며, 평가방법은 아래 표 4와 같았다.

본 발명에서 제작한 마이크로 니들의 모양 평가 및 강도 평가 결과

마이크로니들 모양 평가	마이크로니들 강도 평가
<온도에 따른 모양 변화 관찰> -니들의 변형 정도(니들이 휘어짐에서 발생되는 높이 변화)를 평가 -니들의 뾰족한 정도(니들 팁 부분의 직경 변화)를 평가 -온도 조건 : -20℃, 25℃, 40℃ -조건별 N=3개의 마이크로 패치로 구성 -양성 대조군으로 같은 형태의 PLA (poly lactic acid) 마이크로 니들 사용	<온도에 따른 강도 측정> -온도에 따른 마이크로니들의 기계적 강도를 Force-displacement 장비를 사용하여 니들의 기계적 변형 특성을 정량적으로 측정 -온도 조건 : -20℃, 25℃, 40℃ -조건별 N=3개의 마이크로 패치로 구성 -양성 대조군으로 같은 형태의 PLA (poly lactic acid) 마이크로 니들 사용 -Force-displacement curve 그래프 첨부 -마이크로니들 패치를 한 어레이당 2x2크기 (4개의 마이크로니들)로 자른 뒤 결과 값을 4로 나눔으로써 투여 강도를 한 개의 니들에 대하여 나타냄
<습도에 따른 모양 변화 관찰> -니들의 변형 정도(니들이 휘어짐에서 발생되는 높이 변화)를 평가 -니들의 뾰족한 정도(니들 팁 부분의 직경 변화)를 평가 -습도 조건 :　40%, 90% -조건별 N=3개의 마이크로 패치로 구성 -양성 대조군으로 같은 형태의 PLA (poly lactic acid) 마이크로 니들 사용 -SEM 이미지 첨부	<습도에 따른 강도 측정> -습도에 따른 마이크로니들의 기계적 강도를 Force-displacement 장비를 사용하여 니들의 기계적 변형 특성을 정량적으로 측정 -습도 조건 :　40%, 90% -조건별 N=3개의 마이크로 패치로 구성 -양성 대조군으로 같은 형태의 PLA (poly lactic acid) 마이크로 니들 사용 -Force-displacement curve 그래프 첨부 -마이크로니들 패치를 한 어레이당 2x2크기 (4개의 마이크로니들)로 자른 뒤 결과 값을 4로 나눔으로써 투여 강도를 한 개의 니들에 대하여 나타냄

마이크로니들의 온도에 따른 모양 변화 관찰결과, 4주차, 8주차, 12주차 모두 0주차에 비하여 온도에 따른 마이크로니들의 길이 및 뾰족한 정도가 크게 달라지지 않았다. 마이크로니들의 길이는 245~255 um이며 뾰족한 정도는 2.0~3.2 um 로 균일하였다. 마이크로니들의 습도에 따른 모양 변화 관찰결과,　개봉된 마이크로니들이 습도 90% 조건에서는 전부 녹아 사라졌다.

마이크로니들의 형태 균일성에는 온도 조건보다 습도 조건이 더 많은 영향을 미친다는 것을 알 수 있었다. 미개봉 마이크로니들 패치는 모든 조건에서 처음과 같은 길이와 뾰족한 정도를 보이고 있으므로, 장기보관 시 마이크로니들을 완벽히 동봉하는 것이 중요한 것으로 사료되었다. 도 7은 양성대조군(PLA)의 SEM 이미지와 본 발명 마이크로니들 패치의 SEM 이미지를 비교하여 보여준다.

한편, 마이크로니들의 온도에 따른 강도 측정결과, 마이크로니들은 온도조건에 따라 0.4N~0.56N/needle의 강도를 나타내었으며 4주차, 8주차, 12주차 모두 0주차에 비하여 마이크로니들의 강도가 유의하게 달라지지 않았다. 또한, 마이크로니들의 습도에 따른 강도 측정결과,　미개봉 마이크로니들 패치는 습도 조건에 관계없이 강도가 유지되었으나, 개봉된 마이크로니들 패치의 경우 40%의 습도조건에서 4주차 까지는 0주차에 비해 크게 변동이 없었으나 8주차, 12주차에 관찰시 약 0.25~0.37N/needle로 강도가 약해진 것을 확인하였다. 90%의 습도조건에서는 마이크로니들이 전부 녹아 없어져서 강도 측정이 불가하였다. 이로써 마이크로니들의 강도는 온도보다 습도가 더 많은 영향을 미친다는 것을 알 수 있으며, 장기 보관시 마이크로니들패치의 완벽한 동봉이 필요하다는 것을 확인할 수 있었다.

본 발명 마이크로 니들 강도 평가

			0주차	4주차		8주차		12주차
				미개봉	개봉	미개봉	개봉	미개봉	개봉
PLA (N=1)	온도 조건	-20℃	0.83	0.85		0.88		0.85
		25℃		0.97		0.93		0.92
		40℃		1.01		0.79		0.79
	습도 조건	40%		0.83		1.00		0.90
		90%		0.90		0.92		0.89
샘플 패치 (N=3)	온도 조건	-20℃	0.52 ±0.03	0.55 ±0.04	0.49 ±0.06	0.48 ±0.03	0.47 ±0.03	0.48 ±0.00	0.54 ±0.06
		25℃		0.52 ±0.04	0.47 ±0.05	0.47 ±0.02	0.49 ±0.02	0.49 ±0.04	0.45 ±0.01
		40℃		0.54 ±0.04	0.41 ±0.03	0.55 ±0.01	0.47 ±0.05	0.49 ±0.04	0.47 ±0.02
	습도 조건	40%		0.55 ±0.02	0.46 ±0.02	0.45 ±0.02	0.28 ±0.03	0.46 ±0.03	0.36 ±0.01
		90%		0.54 ±0.00	-	0.47 ±0.04	-	0.47 ±0.01	-

*실험실 온도:23.5℃, 습도:45%

*단위:N/needle

[실험예 3: 본 발명 마이크로니들 패치 제품 내 유해물질 분석]

본 발명 마이크로니들 패치 제품에 대하여 파라벤 5종, 페녹시에탄올, 스테로이드 39종에 대한 분석을 수행하였다. 화장품 중 배합금지성분 분석법 가이드라인(2017)에 따라 분석하였으며, 분석 결과 파라벤 5종, 페녹시에탄올, 스테로이드 39종 모두 검출되지 않은 것을 확인하였다.

[실험예 4: 본 발명 마이크로니들 패치 제품의 인체 피부 일차자극 시험]

1) 시험 방법 : 위탁 시험

2) 시험 기관 : 더마프로

3) 시험 목적 : '본 발명 마이크로니들 패치'에 대한 인체피부 일차자극 유무를 확인하기 위함

4) 시료 형태 : 본 발명 마이크로니들 패치

5) 시료수 : 1종

6) 시험 방법 :

- 시험 대상자 : 선정기준과 제외기준에 부합하는 피험자 30명 이상

- 첩포 : Van der Bend를 이용하여 등 부위에 시험물질을 24시간 도포 후 제거

- 검사 : 첩포 제거 20분 후와 24시간 후 관찰

- 평가 기준 : Personal Care Products Council (PCPC) guidelines (2014)에 의해 평가

7) 시험 결과 :

- 시험 대상자 : 총 31명이 본 시험의 전 과정에 참여하였으며 피험자들의 평균 연령은 42.03±8.82세였으며, 최고 연령자는 50세, 최저 연령자는 20세

- 결과 : 하기 표 6

일차 자극 테스트 결과

Test Sample	No. of Responder	24hr				48hr				Reaction Grade (R)
		+1	+2	+3	+4	+1	+2	+3	+4	Mean
트리블 부스팅 마이크로 패치	0	-	-	-	-	-	-	-	-	0.0

*저자극:0.00≤R<0.87

8) 결론 : 본 시험물질은 인체피부 일차자극 측면에서 저자극 범주의 물질로 판단되었다.

[실험예 5: 본 발명 마이크로 니들 패치 제품의 임상효능평가]

1) 시험 방법 : 위탁 시험

2) 시험 기관 : 더마프로

3) 시험 목적 : 본 시험은 '본 발명 마이크로 패치'에 대한 피부, 수분, 탄력, 진피치밀도 및 주름 개선효과 및 안전성을 평가하기 위함

4) 평가 기간 : 2020.02.17~2020.04.17

5) 시험 방법 :

- 시험 대상자 : 시험대상자 및 수: 눈가 및 팔자주름이 있는 42~53세의 여성 피험자 22명(평균 연령 47.86±3.44세)

- 평가기간 : 8주

- 시험제품: 본 발명 마이크로 패치

- 평가방법: 본 시험 목적에 적합한 피험자들을 대상으로 시험제품을 사용법에 따라 눈가와 팔자주름 부위에 사용하도록 하였다. 평가는 제품 사용전과 사용 2시간, 2주, 4주 및 8주 후 시점에서 피부 수분, 탄력, 진피치밀도 및 주름을 눈가와 팔자부위에서 측정을 실시하였고, 제품사용 2시간, 2주, 4주 및 8주 후 시점에서 피험자에 의한 설문평가 및 피부 안전성 평가를 진행하였다.

6) 시험 결과 :

<피부 수분량 분석>

- 눈가

제품 사용 전과 비교 시 사용 2시간, 2주, 4주 및 8주 후 시점에서 눈가 부위에서의 수분량이 유의하게 증가하였으며(p<0.05), 증가율은 각각 12.22%, 5.71%, 7.79% 및 9.25%였다.

- 팔자

제품 사용 전과 비교 시 사용 2시간, 2주, 4주 및 8주 후 시점에서 팔자 부위에서의 수분량이 유의하게 증가하였으며(p<0.05), 증가율은 각각 34.65%, 15.83%, 19.90% 및 21.27%였다.

<피부 탄력 분석>

- 눈가

제품 사용 전과 비교 시 사용 2시간, 2주, 4주 및 8주 후 시점에서 눈가 부위에서의 탄력이 유의하게 증가하였으며(p<0.05), 증가율은 각각 0.56%, 0.82%, 1.20% 및 1.42%였다.

- 팔자

제품 사용 전과 비교 시 사용 2시간, 2주, 4주 및 8주 후 시점에서 팔자 부위에서의 탄력이 유의하게 증가하였으며(p<0.05), 증가율은 각각 0.42%, 0.86%, 1.11% 및 1.34%였다.

<진피치밀도 분석>

- 눈가

제품 사용 전과 비교 시 사용 2시간, 2주, 4주 및 8주 후 시점에서 눈가 부위에서의 진피치밀도가 유의하게 증가하였으며(p<0.05), 증가율은 각각 0.78%, 0.92%, 1.56% 및 2.91%였다.

- 팔자

제품 사용 전과 비교 시 사용 2시간, 2주, 4주 및 8주 후 시점에서 팔자 부위에서의 진피치밀도가 유의하게 증가하였으며(p<0.05), 증가율은 각각 0.80%, 1.16%, 2.17% 및 2.46%였다.

<피부 주름 분석>

- 눈가

제품 사용 전과 비교 시 사용 2시간, 2주, 4주 및 8주 후 시점에서 ‘Average depth of wrinkles’, ‘Mean depth biggest wrinkle’, ‘Total wrinkle volume', 및 'Ra' 파라미터가, 사용 2시간, 2주 및 8주 후 시점에서 ‘Max. depth biggest wrinkle' 파라미터가, 사용 2시간 후 시점에서 ‘Total wrinkle area' 파라미터가, 사용 2시간, 4주 및 8주 후 시점에서 'Ry' 파라미터가 눈가 부위에서 유의하게 감소하였으며 (p<0.05), 감소율은 0.49%~15.55%였다. 도 8은 본 발명 마이크로 니들 패치 적용 후, 눈가 주름 개선 이미지 촬영 결과이다.

- 팔자

제품 사용 전과 비교 시 사용 2시간, 2주, 4주 및 8주 후 시점에서 ‘Average depth of wrinkles’, ‘Mean depth biggest wrinkle’, ‘Max. depth biggest wrinkle', ‘Total wrinkle volume', 'Ra' 및 'Ry' 파라미터가, 사용 2시간 후 시점에서 ‘Total wrinkle area' 파라미터가 팔자 부위에서 유의하게 감소하였으며(p<0.05), 감소율은 1.65%~16.31%였다. 도 9는 본 발명 마이크로니들 패치 적용 후, 팔자주름 개선 이미지 촬영 결과이다.

<설문평가 분석>

- 효능에 관한 설문평가 분석

제품 사용 2시간, 2주, 4주 및 8주 후 시점에서 ‘눈가 주름 감소’, ‘팔자주름 감소’, ‘피부가 촉촉해짐’ 및 ‘전반적인 피부상태 개선’ 항목에 대해 피험자의 약 55%~86%가, 제품 사용 후 2주, 4주 및 8주 후 시점에서 ‘피부 속이 촘촘하게 채워짐’ 및 ‘피부 탄력 증가’ 항목에 대해 피험자의 약 50%~68%가 긍정적으로 응답하였다. 도 10은 본 발명 마이크로니들 제품 사용 후 제품의 효능에 대한 설문 결과이다.

- 사용성에 관한 설문평가 분석

모든 항목에 대하여 약 55%~77%의 피험자가 긍정적으로 응답하였다. 도 11은 본 발명 마이크로니들 제품 사용 후 제품의 사용성에 대한 설문 결과이다.

<안전성 평가>

본 시험기간 동안 모든 피험자에게서 이상반응은 관찰되지 않았다.

7) 결론 : 본 발명의 마이크로 패치는 피부 수분, 탄력, 진피치밀도 및 주름 개선에 도움을 주는 것으로 사료되었다.

<110> BioCeltran <120> Soluble micro-niddle patch with skin penetrating recombinant neuropeptide complex <130> YP-20-112 <160> 7 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 76 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> SP1-EGF <400> 1 Lys Glu Thr Trp Trp Glu Thr Trp Trp Thr Glu Trp Ser Gln Pro Lys 1 5 10 15 Lys Lys Arg Lys Val Gly Ser Asn Ser Asp Ser Glu Cys Pro Leu Ser 20 25 30 His Asp Gly Tyr Cys Leu His Asp Gly Val Cys Met Tyr Ile Glu Ala 35 40 45 Leu Asp Lys Tyr Ala Cys Asn Cys Val Val Gly Tyr Ile Gly Glu Arg 50 55 60 Cys Gln Tyr Arg Asp Leu Lys Trp Trp Glu Leu Arg 65 70 75 <210> 2 <211> 163 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> SP1-FGF1 <400> 2 Phe Asn Leu Pro Pro Gly Asn Tyr Lys Lys Pro Lys Leu Leu Tyr Cys 1 5 10 15 Ser Asn Gly Gly His Phe Leu Arg Ile Leu Pro Asp Gly Thr Val Asp 20 25 30 Gly Thr Arg Asp Arg Ser Asp Gln His Ile Gln Leu Gln Leu Ser Ala 35 40 45 Glu Ser Val Gly Glu Val Tyr Ile Lys Ser Thr Glu Thr Gly Gln Tyr 50 55 60 Leu Ala Met Asp Thr Asp Gly Leu Leu Tyr Gly Ser Gln Thr Pro Asn 65 70 75 80 Glu Glu Cys Leu Phe Leu Glu Arg Leu Glu Glu Asn His Tyr Asn Thr 85 90 95 Tyr Ile Ser Lys Lys His Ala Glu Lys Asn Trp Phe Val Gly Leu Lys 100 105 110 Lys Asn Gly Ser Cys Lys Arg Gly Pro Arg Thr His Tyr Gly Gln Lys 115 120 125 Ala Ile Leu Phe Leu Pro Leu Pro Val Ser Ser Asp Gly Ser Lys Glu 130 135 140 Thr Trp Trp Glu Thr Trp Trp Thr Glu Trp Ser Gln Pro Lys Lys Lys 145 150 155 160 Arg Lys Val <210> 3 <211> 174 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> SP1-SOD1 <400> 3 Lys Glu Thr Trp Trp Glu Thr Trp Trp Thr Glu Trp Ser Gln Pro Lys 1 5 10 15 Lys Lys Arg Lys Val Leu Glu Met Ala Thr Lys Ala Val Cys Val Leu 20 25 30 Lys Gly Asp Gly Pro Val Gln Gly Ile Ile Asn Phe Glu Gln Lys Glu 35 40 45 Ser Asn Gly Pro Val Lys Val Trp Gly Ser Ile Lys Gly Leu Thr Glu 50 55 60 Gly Leu His Gly Phe His Val His Glu Phe Gly Asp Asn Thr Ala Gly 65 70 75 80 Cys Thr Ser Ala Gly Pro His Phe Asn Pro Leu Ser Arg Lys His Gly 85 90 95 Gly Pro Lys Asp Glu Glu Arg His Val Gly Asp Leu Gly Asn Val Thr 100 105 110 Ala Asp Lys Asp Gly Val Ala Asp Val Ser Ile Glu Asp Ser Val Ile 115 120 125 Ser Leu Ser Gly Asp His Cys Ile Ile Gly Arg Thr Leu Val Val His 130 135 140 Glu Lys Ala Asp Asp Leu Gly Lys Gly Gly Asn Glu Glu Ser Thr Lys 145 150 155 160 Thr Gly Asn Ala Gly Ser Arg Leu Ala Cys Gly Ile Ala Gln 165 170 <210> 4 <211> 98 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Bicelphin-IGF1 <400> 4 Lys Glu Thr Trp Trp Glu Thr Trp Trp Thr Glu Trp Ser Gln Pro Val 1 5 10 15 Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Leu Glu Gly Pro Glu Thr 20 25 30 Leu Cys Gly Ala Glu Leu Val Asp Ala Leu Gln Phe Val Cys Gly Asp 35 40 45 Arg Gly Phe Tyr Phe Asn Lys Pro Thr His Tyr Gly Ser Ser Ser Arg 50 55 60 Arg Ala Pro Gln Thr Gly Ile Val Asp Glu Cys Cys Phe Arg Ser Cys 65 70 75 80 Asp Leu Arg Arg Leu Glu Met Tyr Cys Ala Pro Leu Lys Pro Ala Lys 85 90 95 Ser Ala <210> 5 <211> 451 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> SP1-NPToc <400> 5 Lys Glu Thr Trp Trp Glu Thr Trp Trp Thr Glu Trp Ser Gln Pro Val 1 5 10 15 Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Pro Phe Val Asn Lys Gln 20 25 30 Phe Asn Tyr Lys Asp Pro Val Asn Gly Val Asp Ile Ala Tyr Ile Lys 35 40 45 Ile Pro Asn Ala Gly Gln Met Gln Pro Val Lys Ala Phe Lys Ile His 50 55 60 Asn Lys Ile Trp Val Ile Pro Glu Arg Asp Thr Phe Thr Asn Pro Glu 65 70 75 80 Glu Gly Asp Leu Asn Pro Pro Pro Glu Ala Lys Gln Val Pro Val Ser 85 90 95 Tyr Tyr Asp Ser Thr Tyr Leu Ser Thr Asp Asn Glu Lys Asp Asn Tyr 100 105 110 Leu Lys Gly Val Thr Lys Leu Phe Glu Arg Ile Tyr Ser Thr Asp Leu 115 120 125 Gly Arg Met Leu Leu Thr Ser Ile Val Arg Gly Ile Pro Phe Trp Gly 130 135 140 Gly Ser Thr Ile Asp Thr Glu Leu Lys Val Ile Asp Thr Asn Cys Ile 145 150 155 160 Asn Val Ile Gln Pro Asp Gly Ser Tyr Arg Ser Glu Glu Leu Asn Leu 165 170 175 Val Ile Ile Gly Pro Ser Ala Asp Ile Ile Gln Phe Glu Cys Lys Ser 180 185 190 Phe Gly His Glu Val Leu Asn Leu Thr Arg Asn Gly Tyr Gly Ser Thr 195 200 205 Gln Tyr Ile Arg Phe Ser Pro Asp Phe Thr Phe Gly Phe Glu Glu Ser 210 215 220 Leu Glu Val Asp Thr Asn Pro Leu Leu Gly Ala Gly Lys Phe Ala Thr 225 230 235 240 Asp Pro Ala Val Thr Leu Ala His Glu Leu Ile His Ala Gly His Arg 245 250 255 Leu Tyr Gly Ile Ala Ile Asn Pro Asn Arg Val Phe Lys Val Asn Thr 260 265 270 Asn Ala Tyr Tyr Glu Met Ser Gly Leu Glu Val Ser Phe Glu Glu Leu 275 280 285 Arg Thr Phe Gly Gly His Asp Ala Lys Phe Ile Asp Ser Leu Gln Glu 290 295 300 Asn Glu Phe Arg Leu Tyr Tyr Tyr Asn Lys Phe Lys Asp Ile Ala Ser 305 310 315 320 Thr Leu Asn Lys Ala Lys Ser Ile Val Gly Thr Thr Ala Ser Leu Gln 325 330 335 Tyr Met Lys Asn Val Phe Lys Glu Lys Tyr Leu Leu Ser Glu Asp Thr 340 345 350 Ser Gly Lys Phe Ser Val Asp Lys Leu Lys Phe Asp Lys Leu Tyr Lys 355 360 365 Met Leu Thr Glu Ile Tyr Thr Glu Asp Asn Phe Val Lys Phe Phe Lys 370 375 380 Val Leu Asn Arg Lys Thr Tyr Leu Asn Phe Asp Lys Ala Val Phe Lys 385 390 395 400 Ile Asn Ile Val Pro Lys Val Asn Tyr Thr Ile Tyr Asp Gly Phe Asn 405 410 415 Leu Arg Asn Thr Asn Leu Ala Ala Asn Phe Asn Gly Gln Asn Thr Glu 420 425 430 Ile Asn Asn Met Asn Phe Thr Lys Leu Lys Asn Phe Thr Gly Leu Phe 435 440 445 Glu Phe Tyr 450 <210> 6 <211> 21 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> PEP-1 <400> 6 Lys Glu Thr Trp Trp Glu Thr Trp Trp Thr Glu Trp Ser Gln Pro Lys 1 5 10 15 Lys Lys Arg Lys Val 20 <210> 7 <211> 26 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> STeP <400> 7 Lys Glu Thr Trp Trp Glu Thr Trp Trp Thr Glu Trp Ser Gln Pro Val 1 5 10 15 Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg 20 25

Claims (4)

1. 서열번호 1 내지 5의 뉴로펩타이드 및 생분해성 고분자물질을 포함하는 것을 특징으로 하는 마이크로니들 제조용 조성물.
   
2. 서열번호 1 내지 5의 뉴로펩타이드 및 생분해성 고분자 물질을 포함하는 용해성 마이크로 니들.
   
3. 제2항의 용해성 마이크로 니들이 상부에 위치하고,
   하부는 피부 부착용 패치로 구성된 마이크로니들 패치.
   
4. 생분해성 고분자 물질에 서열번호 1 내지 5의 뉴로펩타이드를 첨가해서 혼합액을 제조하는 단계 (a);
   상기 단계 (a)의 혼합액을 삼각형의 마이크로니들이 형성되는 몰드(mold)에 넣고, 건조하여 건조 박막 (membrane)을 제조하는 단계 (b);
   상기 단계 (b)에서 제조된 건조된 박막 (membrane)을 하이드로콜로이드에 부착하여 패치 제형으로 제조하는 단계 (c);를 포함하는 것을 특징으로 하는 마이크로니들 패치의 제조방법.
   

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