KR102223638B1 - 은 화합물과 착화제를 함유하는 항균 조성물 및 삼칠근 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈중 전립선 특이항원 안정화제 - Google Patents

은 화합물과 착화제를 함유하는 항균 조성물 및 삼칠근 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈중 전립선 특이항원 안정화제 Download PDF

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Abstract

본 발명은 은 화합물과 착화제를 함유하는 항균 및 항암 특성을 갖는 조성물과 항염 특성을 갖는 삼칠근(Panax notoginseng) 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈중 전립선 특이항원 안정화제에 관한 것이다.
보다 구체적으로는, 혈중 전립선 특이항원(Prostate-specific Antigen/PSA) 수치를 정상으로 회복시킬 수 있다.

Description

은 화합물과 착화제를 함유하는 항균 조성물 및 삼칠근 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈중 전립선 특이항원 안정화제{PSA stabilizer in blood comprising antimicrobial composition containing silver compound and complexing agent and Panax notoginseng extract}
본 발명은 은 화합물과 착화제를 함유하는 항균 및 항암 특성을 갖는 조성물과 항염 특성을 갖는 삼칠근 (Panax notoginseng) 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈중 전립선 특이항원 안정화제에 관한 것이다.
이하에 기술되는 내용은 단순히 본 발명과 관련되는 배경 정보만을 제공할 뿐 종래기술을 구성하는 것이 아니다.
일반적으로 여러 종류의 암종들의 원인인 만성 염증의 원인이 되는 물질들로는 발암성 물질로 특징지어진 벤젠 등 여러 종류의 유기화합물질들이 알려져 있지만, 세균 및 바이러스 등의 조직 내 감염으로 인한 만성 염증도 악성 암종의 원인으로 오래 전부터 알려져 왔다.
실 예로 B형 바이러스 (Hepatitis Type B virus) 감염에 의하여 만성 B형 간염(Chronic hepatitis, Type B)이 진행되어 간경화 (Hepatocirrhosis) 및 간암 (Liver cancer)의 유발인자로 작용하며, 자궁경부암의 원인균으로서 인유두종 바이러스 (Human Papillomavirus/HPV) 감염에 의하여 자궁경부암이 발생하며 자궁경부암의 99.7%가 HPV16, HPV18 및 기타 인유두종 바이러스(HPV)에 의해 유발된다고 알려져 있다.
위암 (Stomach cancer) 역시 헬리코박터 파일로리 (Helicobacter pylori) 균에 의하여 감염된 위벽 주위의 위산이 중화되고 위벽이 위산에 노출되어 위벽에 만성 염증이 발병하며 종국에 위암으로 진행한다는 사실은 의학계에 이미 입증된 사실로서 헬리코박터 파일로리균을 제거할 경우 위암 발생율 위험도가 73%까지 낮아진다는 사실이 발표되었다. 이와 같이 다양한 세균 및 바이러스 등이 다양한 암종 발생의 원인균들로 작용하고 있음은 증명된 사실이다.
전립선암은 남성에게 가장 흔한 악성질환의 하나로 2006년 유럽에서 346,000명의 환자가 발생하여 87,000명이 사망했다고 보고되었다. 2009년에는 미국에서 가장 일반적으로 진단되는 암으로 남성의 암 관련 사망 원인 중 두 번째로 보고된 바 있고, 우리나라에서도 전립선암의 발생이 점차 증가하는 추세이며, 각종 암 중에서 발병률 5위, 증가율 1위인 것으로 보고된 바 있다.
전립선암(prostate cancer/Pca)의 원인으로는 다양한 가설들이 의학계에서 회자되고 있으나, 앞선 각종 암종들의 예시에서처럼 감염에 의한 만성 전립선염 (Chronic Prostatic Inflammation)이 전립선암(Pca)으로 진행할 수 있다는 것은 충분히 유추할 수 있다. 또한 남성들은 거의 예외 없이 배뇨나 기타 다양한 상황에서 요도 입구를 손을 사용하여 반복적으로 접촉하게 되며 반복적인 접촉에 의하여 손에 상존하는 만성염증 유발균들인 좌창균들 (acnes), 예를 들어, 그람양성균인 프로피온산 균속 좌창균(Gram-positive bacterium Propionibacterium acnes)이 요도를 통해 전립선에 감염되어 만성 전립선염의 원인균들로 작용한다고 알려져 있다.
전립선암은 현재 개발된 치료법으로는 그 치료 효과가 미흡하며, 평균 생존기간도 약 40~60주에 불과하여 통증 완화 및 삶의 질 향상을 위한 치료가 주로 시행된다. 진통제 투여, 항암 화학치료제 사용, 통증이 심한 전이 부위에 대한 방사선 치료, 전신 골전이로 인한 통증에 대한 스트론튬-89 투여, 골전이에 대한 약물 투여 등이 시행되며, 최근 일부에서 유전자 치료법, 면역 요법과 같은 시험적인 치료방법의 개발이 시도되고 있으나 그 효과는 아직 속단하기 이른 상황이다. 따라서 기존의 항전립선암제의 부작용을 최소화하고 미량으로 탁월한 항전립선암 활성을 발휘할 수 있는 항전립선암제 개발이 필요한 실정이다.
이에, 본 발명자들은 전립선암(Pca) 치료 및 전립선암의 중요 진단 지표인 전립선특이항원(PSA) 혈중 농도를 정상으로 회복시키기 위해서는 악성 종양의 증식 및 혈중 PSA 증식 유발인자인 다재 내성균들을 포함한 감염균들을 성공적으로 제거하는 것이 중요함을 확인하였고, 이에 따라 감염된 세균들의 항생제 다재내성의 특성이 없으며 상당기간 (일반적으로 3~6개월, 경우에 따라서 그 이상) 복용함으로 오는 부작용이 없거나 경미한 항균 및 항암의 특성을 나타내는 치료제 개발에 대해 연구한 결과, 은 화합물과 착화제를 함유하는 항균 조성물 및 삼칠근 추출물이 상기 감염균에 대해 부작용이 없거나 경미하면서도 우수한 항균 및 항암의 특성을 나타냄을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
대한민국 특허등록 제10-2123206호
본 발명의 목적은 급, 만성전립선염 (Acute or Chronic prostate inflammation) 및 전립선암(Pca)의 증식 및 성장 및 전립선암(Pca)의 중요 진단 지표인 혈중 전립선특이항원(PSA) 농도 증가를 유발하는 다재내성균들을 포함한 감염균들을 성공적으로 제거하여, 암세포의 증식 및 성장을 억제하고 혈중 PSA 수치를 정상으로 회복시킬 수 있으면서도 장기 투여나 외용 (관주/urethra irrigation) 적용으로 인한 부작용이 없거나 극미한 혈중 전립선 특이항원 안정화제를 제공하는 것이다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은,
은 화합물과 착화제 (complexing agent)를 함유하는 항균 조성물과 삼칠근 (Panax notoginseng) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 혈중 전립선 특이항원 안정화제를 제공한다.
본 발명에 있어서, 상기 혈중 전립선 특이항원 안정화제는 은 화합물과 착화제를 함유하는 항균 조성물을 단독으로 또는 삼칠근 (Panax notoginseng) 추출물과의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 은 화합물과 착화제를 포함하는 항균 조성물은 물, 은 화합물 및 티올기 없는 비이온성 착화제를 포함하고, 전체 은 화합물 중 유리되는 은 화합물의 양은 10중량% 이하이며, 최소저해농도(MIC)는 10㎍/ml일 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 은 화합물은 조성물 내에서 유리되어 은 이온을 형성하며, 질산은, 황산은 또는 탄산은으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상일 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 착화제는 아미노산 및 카르복시산 중 하나 이상의 작용기를 가질 수 있으며, 상기 아미노산은 글리신, 글루탐산, 시스틴 및 메티오닌으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상이며, 상기 카르복시산은 글리콜산, 타르타르산 및 시트르산으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상일 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 삼칠근(Panax notoginseng) 추출물은 알코올, 산성용매 및 물로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 용매를 사용하여 추출되며, 상온, 가압 및 열 추출 방식으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 방법을 사용하여 추출될 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 은 화합물과 착화제를 포함하는 항균 조성물의 유효농도는 5 ppm 내지 100 ppm이고, 상기 삼칠근(Panax notoginseng) 추출물의 유효농도는 1 g/mL 내지 100 g/mL일 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 혈중 전립선 특이항원 안정화제는 내복 또는 외용으로 적용되며, 개별 또는 동시 적용될 수 있고, 상기 외용 적용은 관주 (urethra irrigation) 적용인 것이 바람직하다.
본 발명에 따른 혈중 전립선 특이항원 안정화제는 은 화합물과 착화제를 함유하는 항균 조성물 단독 및/또는 항염 특성을 갖는 삼칠근 (Panax notoginseng) 추출물과의 복합물질을 포함함으로써, 전립선암종의 증식에 필수적 인자인 전립선암종 주위 염증원인을 제거하고 전립선 염증을 소거함으로서 전립선암종의 증식을 효과적으로 억제하고, 전립선암으로 인한 불완전한 암세포 벽을 용해하여 세포내 액의 삼출 (exudation)을 유도하여 암세포의 사멸 및 증식을 억제함으로서 전립선암의 중요 진단 인자인 혈중 PSA 농도를 정상범위로 회복할 수 있다.
또한, 상기 혈중 전립선 특이항원 안정화제는 감염된 세균들의 항생제 다재내성의 특성이 없으며 상당기간 (일반적으로 3~6개월, 경우에 따라서 그 이상) 복용함으로 오는 부작용이 없거나 경미하면서도 우수한 항균 및 항암의 특성을 나타낸다.
도 1은 본 발명의 혈중 전립선 특이항원 안정화제의 처리 농도에 따른 전립선암 세포주의 세포 생존율 (cell viability, %) 및 전립선암 세포의 증식 억제 및 사멸을 유도하는 유효농도를 확인한 결과를 나타낸 그래프이다.
이하, 본 발명을 더욱 구체적으로 설명한다.
본 발명은 은 화합물과 착화제를 함유하는 항균 및 항암 특성을 갖는 조성물과 항염 특성을 갖는 삼칠근 (Panax notoginseng) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 혈중 전립선 특이항원 안정화제를 제공한다.
본 발명에 있어서, 상기 혈중 전립선 특이항원 안정화제는 은 화합물과 착화제를 함유하는 조성물 단독 또는 상기 조성물과 삼칠근 추출물의 혼합물인 것이 바람직하다.
본 발명에 있어서, 상기 은 화합물과 착화제를 포함하는 항균 조성물은 본 출원인에 의한 대한민국 특허등록 제10-2123206호에 개시된 조성물인 것이 바람직하다.
상기 은 화합물과 착화제를 포함하는 항균 조성물은 물, 은 화합물 및 티올기 없는 비이온성 착화제를 포함하고, 전체 은 화합물 중 유리되는 은 화합물의 양은 10중량% 이하이며, 최소저해농도(MIC)는 10㎍/ml일 수 있다.
상기 은 화합물은 혈중 전립선 특이항원 안정화제 내에서 유리되어 은 이온을 형성하며, 질산은, 황산은 또는 탄산은으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상일 수 있다.
상기 착화제는 아미노산 및 카르복시산 중 하나 이상의 작용기를 가질 수 있으며, 상기 아미노산은 글리신, 글루탐산, 시스틴 및 메티오닌으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상이며, 상기 카르복시산은 글리콜산, 타르타르산 및 시트르산으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상일 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 항균 조성물은 특허등록 제10-2123206호에 개시된 제조방법, 원료물질 및 농도 범위에 준한다.
삼칠근(Panax notoginseng)은 드릅나무과의 다년생초본으로, 인삼보다 작고 쪽잎이 7 개이며 뿌리는 작은 실북모양의 형태를 하고 있고, 주로 중국 남부 운남 사천 등지에서 재배된다. 뿌리에는 3 내지 8%의 사포닌을 포함하고 있는데, 그 주성분은 진세노시드(ginsenoside) Rb1, Rg1, Re와 노토진세노시드(notoginsenoside) R1, R2, Fa, Fc 이며, 소량의 진세노시드(ginsenoside) R2, b2, d, e, c가 있고, R0는 없거나 매우 적게 함유되어 있다. 정유 성분은 인삼보다 적으며 올레아놀산 등도 함유되어 있다. 삼칠근은 우수한 소염, 진통, 지혈작용이 있어 간염을 비롯한 많은 염증질환에 유효할 뿐 아니라, 외상 또는 절상으로 생긴 출혈과 내출혈에 유효하며, 상처에 직접 바르거나 먹어도 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
따라서 본 발명의 혈중 전립선 특이항원 안정화제는 항염작용이 있는 삼칠근의 추출물을 포함할 수 있으며, 상기 삼칠근(Panax notoginseng) 추출물은 알코올, 산성용매 및 물로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 용매를 사용하여 추출될 수 있다.
예를 들어, 상기 삼칠근 추출물은 삼칠근을 물, 알코올 또는 물과 알콜의 혼합용매로 추출할 수 있으며, 상기에서 알코올은 에탄올이 바람직하다. 이때, 상기 에탄올 추출은 70 내지 80℃에서 3 내지 5 시간 동안 이루어지는 것이 바람직하고, 상기 농축은 20 내지 40℃에서 진공감압으로 이루어지는 것이 바람직하다.
상기 추출물의 추출방법은 상기 용매를 사용하여 상온, 냉침, 온침, 가압, 가열 등 통상의 추출방법이 가능이 가능하고, 상온, 가압 및 열 추출 방식으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 방법을 사용하여 추출될 수 있다.
상기 추출물의 유효성분을 보다 단리하기 위하여 유기용매추출, 크로마토그래피 등 사용할 수 있는 분리 방법에 특별히 제한되는 것은 아니다.
상기 추출물은 본 발명의 혈중 전립선 특이항원 안정화제 효과를 나타낼 수 있는 삼칠근 추출물인 한, 이에 제한되지 않고, 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 또는 이의 조정제물 또는 정제물을 모두 포함한다.
본 발명의 혈중 전립선 특이항원 안정화제 내 은 화합물과 착화제를 포함하는 항균 조성물의 유효농도는 1 ppm 내지 1000 ppm, 바람직하게는 3 ppm 내지 500 ppm, 더욱 바람직하게는 5 ppm 내지 100 ppm이고, 상기 삼칠근(Panax notoginseng) 추출물의 유효농도는 0.1 g/mL 내지 1000 g/mL, 바람직하게는 0.5 g/mL 내지 500 g/mL, 더욱 바람직하게는 1 g/mL 내지 100 g/mL일 수 있다.
본 발명의 혈중 전립선 특이항원 안정화제 내에서의 항균 조성물 및 삼칠근 추출물의 농도가 상기 범위를 벗어나는 경우에는 항균력이 급격히 떨어지거나 부작용이 증가할 수 있으므로, 바람직하지 않다.
본 발명에 있어서, 상기 혈중 전립선 특이항원 안정화제는 임상 투여시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있으며, 개별 또는 동시 적용될 수 있고, 상기 비경구 투여는 관주 (urethra irrigation) 투여인 것이 바람직하다.
본 발명의 혈중 전립선 특이항원 안정화제를 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조된다.
경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환자, 산제, 과립제, 캡슐제, 트로키제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 본 발명의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스 (sucrose), 락토오스(lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등이 포함된다.
비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있고, 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 혈중 전립선 특이항원 안정화제의 인체에 대한 효과적인 투여량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로 약 1~5 g/kg/일이며, 바람직하게는 1~4 g/kg/일이다. 몸무게가 70 ㎏인 성인 환자를 기준으로 할 때, 일반적으로 1~350g/일이며, 바람직하게는 1~280g/일이며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정시간 간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.
본 발명은 또한 은 화합물과 착화제를 함유하는 항균 및 항암 특성을 갖는 조성물과 항염 특성을 갖는 삼칠근 (Panax notoginseng) 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈중 전립선 특이항원 안정화용 건강기능식품 또는 건강식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 상기 건강기능식품 조성물 또는 건강식품 조성물은 혈중 전립선 특이항원 안정화 목적으로 상기 은 화합물과 착화제를 함유하는 조성물 단독 또는 상기 조성물과 삼칠근 추출물의 혼합물을 식품, 음료 등의 건강기능식품 또는 건강식품에 첨가할 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 본 발명에 따른 혈중 전립선 특이항원 안정화제를 첨가할 수 있는 식품의 예로는 드링크제, 육류, 소시지, 빵, 비스킷, 떡, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 알코올 음료 및 비타민 복합제, 유제품 및 유가공 제품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품 및 건강기능성식품을 모두 포함한다.
본 발명에 따른 혈중 전립선 특이항원 안정화제를 함유하는 건강식품 및 건강기능성식품 조성물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 상기 혈중 전립선 특이항원 안정화제의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강식품 및 건강기능성식품 중의 상기 화합물의 양은 전체 식품 중량의 0.1 내지 90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 유지를 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
본 발명의 건강식품 및 건강기능성식품 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명에 따른 혈중 전립선 특이항원 안정화제를 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트라이톨 등의 당알코올이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강기능성 식품 조성물 100 g당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.
상기 외에 본 발명에 따른 혈중 전립선 특이항원 안정화제를 함유하는 건강식품 및 건강기능성식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강식품 및 건강기능성식품 조성물은 천연 과일쥬스 및 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 유효물질을 함유하는 건강식품 및 건강기능성식품 조성물 100 중량부 당 0.1 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본 발명은 앞서 설명한 혈중 전립선 특이항원 안정화제를 치료 대상에 적용하는 단계를 포함하는 혈중 전립선 특이항원 안정화 방법을 제공할 수 있다. 본 발명에 있어서, 상기 "적용"은 본 발명의 혈중 전립선 특이항원 안정화제의 예방 또는 치료 효과가 대상을 향해 나타날 수 있게끔 하는 일련의 모든 행위를 포함하며, 예컨대 대상에 혈중 전립선 특이항원 안정화제를 분사하거나, 도포하는 행위 역시 적용에 포함된다. 상기 적용은 체내 또는 체외에서 수행될 수 있으며, 상기 항균 대상은 균이 존재하는 대상이라면 특별히 제한되지 않는다.
<실시예>
이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 단, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 은 화합물 및 착화제를 함유하는 항균 조성물의 제조
물 1,000 ml에 은 화합물로는 AgNO3 1.45 g 및 착화제로는 글리신을 용해시켜 항균 조성물을 제조하였다.
항균 조성물 중에서의 은 화합물 농도는 약 1,000 ppm 이었다.
실시예 2: 삼칠근 추출물의 제조
삼칠근은 재배산으로 시중의 건재상에서 구입하여 사용하였다.
삼칠근을 1 내지 2 ㎝의 크기로 절편한 다음, 흐르는 물에 세척하여 불순물을 제거하였다. 절편한 삼칠근을 분말로 분쇄하여 분말 200 g을 3 ℓ플라스크에 넣고, 에탄올 2,000 ㎖을 이용하여 78.5℃에서 환류 교반시키면서 4 시간 동안 가열 추출을 3 회 반복 실시하였다. 상기 추출액을 여과한 후, 40℃ 이하에서 회전식 진공농축증발기(vacuum rotary evaporator)를 사용하여 진공 감압농축시킴으로써 삼칠근 추출물을 수득하였다.
실험예 1: 항균 조성물의 항균력 확인
상기 실시예 1에서 제조한 항균 조성물의 항균력을 PC12 세포주 및 SP2 세포주에 대해 실험하였다. 구체적으로 세포주에 대한 실시예 항균 조성물의 최소 저해 농도(Minimum Inhibitory Concentration)을 확인하였으며, 이를 도 1에 나타내었다.
도 1에 나타난 바와 같이, 상기 실시예 1의 화합물의 처리에 의해 세포가 사멸하였으며, 농도 의존적으로 세포의 생존율(세포 활성)이 감소되어 약 10 ppm의 농도에서 거의 모든 세포가 사명되었음을 확인하였다.
따라서 본 발명의 상기 실시예 1에 따른 항균 조성물은 전립선암 세포에 특이적으로 작용하여 암세포의 증식을 억제하여 사멸시키는 항전립선암 효과를 가짐을 알 수 있었다.
상기와 같은 결과는 본 발명의 실시예에 따른 화합물이 항전립선암 활성을 가짐을 시사하는 것이다.
실험예 2: 항균 조성물의 안정성 시험
상기 실시예 1의 항균 조성물에 대해 안정성 시험을 실시하였으며, 상기 시험은 한국화학연구원 부설 안정성 평가 연구소에서 실시하였다.
1) 안점막 자극시험
상기 실시예 1의 항균 조성물의 안점막 자극성을 조사하기 위하여 9마리의 뉴질랜드 화이트계 수컷 토끼에 시험물질 0.1 ml를 처치한 후 7일간의 사망률, 일반증상, 체중변화 및 국소자극성을 평가하였다.
이와 같이 시험한 결과는 다음과 같다
- 시험 기간 중 시험물질의 적용에 기인된 사망동물은 관찰되지 않았다.
- 일반증상 관찰 시 시험물질의 적용에 기인된 이상소견은 관찰되지 않았다.
- 체중측정 결과, 시험물질의 적용에 기인된 체중 변화는 관찰되지 않았다.
- 시험물질 적용 후 1,2,3,4, 및 7일째에 적용부위의 국소자극성을 관찰한 결과, 시험물질의 적용에 의한 어떠한 이상 소견도 인정되지 않았다.
따라서 본 시험물질의 급성 안자극 지수 (acute ocular irritation index)는 세안군 및 비세안군이 각각 “0”으로 무자극성 물질로 평가되었다.
이상의 결과로 보아 뉴질랜드 화이트계 토끼에 있어서 본 발명의 항균 조성물의 안점막 적용은 어떠한 자극성도 유발하지 않는 것으로 나타났으며, 따라서 본 시험불질은 무자극성 물질인 것으로 판단된다.
2) 복귀돌연변이시험
세균에서의 유전독성 검색을 위하여 salmonella typhimurium의 히스티딘 요구성 균주 TA100, TA1535, 및 TA1537과 대장균 Escherichia coli의 트립토판 요구성 균주인 WP2 uvrA를 이용하여 복귀돌연변이 시험을 실시하였다. 콜로이드 상태의 시험물질은 멸균증류수로 희석하여 처리하였으며 본 시험의 처리농도는 예비시험에서 결정하였다. 예비시험결과 모든 균주에서 대사활성효소계 미적용시 최저 농도에서 미생물 성장이 완전히 저해 되었고, 적용시에도 8 ㎍/plate를 제외한 모든 농도에서 성장이 저해되었다. 따라서 4 ㎍/plate을 최고농도로 2차 예비시험을 실시하여 본시험에서는 2 ㎍/plate을 최고농도로 하여 대사활성효소계 미적용(-S) 및 적용(+S)하에 공비 2로서 6단계 농도군(0.063, 0.25, 0.5, 1, 2 ㎍/plate) 및 각각 음성/양성대조군으로 실험하였다.
시험결과, 모든 시험균주에서 본시험의 최고 농도인 2 ㎍/plate 농도에 이르기까지 유의성 있는 복귀돌연변이 집락 수의 증가는 나타나지 않았다. 집락수의 감소와 같은 항균성도 균주에 따라 처리 최고농도인 2㎍/plate에서만 관찰되었다. 모든 양성대조군에서는 집락 수가 음성대조군에 비해 현저한 증가를 나타내었다.
따라서 본 발명의 항균 조성물은 본 시험 조건하에서 사용한 농도범위에서는 시험균주들에 복귀돌연변이를 유발하지 않는 것으로 사료된다.
3) 피부 감작시험
피부 감작성을 조사하기 위하여 30마리의 Hartley계 수컷 기니픽을 이용하여 시험물질 감작군(T1군), 증류수 감작군(V1군), 양성대조물질 감작군(T2군) 및 에탄올 감작군(V2군)의 4군으로 구성된 guinea pig maximization test를 수행하였다. 동물의 등 부위에 1주 간격으로 2차례 감작(1차 감작: 피내투여, 2차 감작: 폐쇄첩포)하여 피부반응을 관찰하였다. 시험결과는 아래와 같다.
- 관찰 기간을 통하여, 시험물질의 투여에 기인된 것으로 사료되는 일반증상의 변화는 관찰되지 않았으며 시험물질 투여에 따른 체중의 변화도 관찰되지 않았다.
- 시험물질 적용부의 홍반 및 부종으로 평가된 48시간째 평균피부반응은 0.0 그리고 감작율 0%로 양성대조군의 피부반응 1.2, 감작율 80%에 비해 현저히 낮으며 부형제대조군(평균피부반응: 0.0 감작율은 0%)와 동일한 것으로 매우 약한 피부감작성이 관찰되었다. 72시간째 관찰결과도 마찬가지로 시험물질 투여군의 평균피부반응은 0.0 그리고 감작율은 0%로 관찰되었으며 양성대조군의 평균피부반응 0.9, 감작율은 70%를 나타내었다.
이상의 결과로 보아 Hartley계 기니픽에 있어서 본 발명의 항균 조성물의 피부 감작성은 등급 1인 (매우 약한) 것으로 판단된다.
4) 광감작시험
광감작시험을 Hartly계 수컷 기니픽을 군당 6마리씩 사용하여 수행하였다. 시험군은 비감작군(1군), 시험물질 감작군(2군) 및 양성대조물질 감작군(3군)으로 구성하였으며 시험물질을 개방도포하고 UV를 조사하는 광감작과정을 1일 1회, 5일 연속 반복수행하였고, 광감작개시 3주후 광야기를 실시하였다. 시험기간동안 일반증상과 사망률, 체중변화 및 피부반응을 관찰하여 광감작성을 평가하였으며 그 시험 결과는 다음과 같다.
- 시험기간 중 시험물질의 적용에 기인된 사망동물은 관찰되지 않았다.
- 일반증상 관찰시 시험물질의 적용에 기인된 이상소견은 관찰되지 않았다.
- 체중측정 결과, 시험물질의 적용에 기인된 체중변화는 관찰되지 않았다.
- 광야기 후 홍반과 가피 및 부종을 관찰한 결과, 투여부위 중 모든 UV 비조사부위와 UV 조사부위 중 비감작군(1군) 및 시험물질 감작군(2군)에서는 아무런 피부반웅이 관찰되지 않았다. 한편 양성대조물질인 CPZ 감작군(3군)에서는 CPZ 광야기부위에서 광야기 후 24시간째 관찰시에 평균피부반응이 1.5, 감작율이 100%였으며, 광야기 후 48시간째 관찰시에는 평균피부반응이 1.2, 감작율이 100%로 관찰되었다. 한편 CPZ 감작군(3군)의 acetone 광야기부위에서는 아무런 피부반응이 관찰되지 않았다.
이상의 결과로 보아, 본 발명의 항균 조성물은 광감작성이 없는 것으로 판단된다.
5) 광독성시험
광독성을 조사하기 위하여 6마리의 Hartley계 수컷 기니픽에 시험물질을 개방도포하고 UV를 조사한 후 일반증상, 체중변화 및 피부반응을 관찰하여 광독성을 평가하였으며 그 시험 결과는 다음과 같다.
- 시험기간 중 시험물질의 적용에 기인된 사망동물은 관찰되지 않았다.
- 일반증상 관찰시 시험물질의 적용에 기인된 이상소견은 관찰되지 않았다.
- 체중측정 결과, 시험물질의 적용에 기인된 체중변화는 관찰되지 않았다.
- 시험물질의 도포종료 후 홍반과 가피 및 부종을 관찰한 결과, 시험물질의 광독성에 의한 어떠한 피부반응도 관찰되지 않았다.
이상의 결과로 보아, 본 발명의 항균 조성물은 기니픽에 대한 광독성이 없는 것으로 판단된다.
실험예 3: 전립선 암 환자에서 혈중 PSA농도 회복 효과 확인
1) 전립선 암 판정을 받은 76세 남자 환자를 대상으로 본 발명의 조성물을 50 cc씩 1일 3회, 총 150 cc/일의 농도로 경구투여 하였으며 (2016년 1월 22일), 혈중 PSA농도의 변화를 하기 표 1에 나타내었다.
혈중 PSA 농도
투여 전 (2015년 12월 11일) 3.1 ng/mL
투여 후 (2016년 1월 22일) 0.04 ng/mL (정상)
2) 전립선 암 판정을 받은 66세 남자 환자를 대상으로 본 발명의 조성물을 50 cc씩 1일 3회, 총 150 cc/일의 농도로 경구투여 하였으며, 혈중 PSA농도의 변화를 하기 표 2에 나타내었다.
혈중 PSA 농도
투여 전 (2015년 03월 27일) 8.30 ng/mL
투여 (2016년 10월 15일) -
투여 후 (2016년 11월 03일) 10.07 ng/mL
투여 후 (2016년 11월 14일) 14.08 ng/mL
투여 후 (2017년 02월 28일) 5.93 ng/mL
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허 청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (12)

  1. 은 화합물과 착화제 (complexing agent)를 함유하는 항균 조성물과 삼칠근 (Panax notoginseng) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 혈중 전립선 특이항원 안정화제.
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서,
    상기 은 화합물과 착화제를 포함하는 항균 조성물은 물, 은 화합물 및 티올기 없는 비이온성 착화제를 포함하고, 전체 은 화합물 중 유리되는 은 화합물의 양은 10중량% 이하이며, 최소저해농도(MIC)는 10㎍/ml인 것을 특징으로 하는, 혈중 전립선 특이항원 안정화제.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 은 화합물은 조성물 내에서 유리되어 은 이온을 형성하며, 질산은, 황산은 또는 탄산은으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는, 혈중 전립선 특이항원 안정화제.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 착화제는 아미노산 및 카르복시산 중 하나 이상의 작용기를 갖는 것을 특징으로 하는, 혈중 전립선 특이항원 안정화제.
  6. 제5항에 있어서,
    상기 아미노산은 글리신, 글루탐산, 시스틴 및 메티오닌으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상이며, 상기 카르복시산은 글리콜산, 타르타르산 및 시트르산으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는, 혈중 전립선 특이항원 안정화제.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 삼칠근(Panax notoginseng) 추출물은 알코올, 산성용매 및 물로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 용매를 사용하여 추출되는 것임을 특징으로 하는, 혈중 전립선 특이항원 안정화제.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 삼칠근(Panax notoginseng) 추출물은 상온, 가압 및 열 추출 방식으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 방법을 사용하여 추출되는 것임을 특징으로 하는, 혈중 전립선 특이항원 안정화제.
  9. 제1항에 있어서,
    상기 은 화합물과 착화제를 포함하는 항균 조성물의 유효농도는 5 ppm 내지 100 ppm인 것을 특징으로 하는, 혈중 전립선 특이항원 안정화제.
  10. 제1항에 있어서,
    상기 삼칠근(Panax notoginseng) 추출물의 유효농도는 1 g/mL 내지 100 g/mL인 것을 특징으로 하는, 혈중 전립선 특이항원 안정화제.
  11. 제1항에 있어서,
    상기 혈중 전립선 특이항원 안정화제는 경구 또는 비경구로 적용되며, 개별 또는 동시 투여되는 것을 특징으로 하는, 혈중 전립선 특이항원 안정화제.
  12. 제11항에 있어서,
    상기 비경구 투여는 관주 (urethra irrigation) 투여임을 특징으로 하는, 혈중 전립선 특이항원 안정화제.
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