KR102187653B1

KR102187653B1 - 피부 개선을 위한 동결 건조 화장품

Info

Publication number: KR102187653B1
Application number: KR1020190019516A
Authority: KR
Inventors: 백광현; 김현아; 정재원; 승병욱
Original assignee: 뷰티풀코리아 주식회사; 주식회사 제너셀
Priority date: 2019-02-19
Filing date: 2019-02-19
Publication date: 2020-12-07
Also published as: KR20200101202A

Abstract

본 발명은 피부 개선을 위한 동결 건조 화장품에 관한 것으로, 구체적으로는 만니톨(mannitol), 히알루론산(hyaluronic acid) 및 용매를 유효 성분으로 포함하는 조성물을 동결 건조하여 얻어진 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 제공하는 동결 건조 화장품을 피부에 적용하는 경우, 피부 흡수율이 매우 뛰어나서 피부 세포에 수분을 공급하여 피부 보습, 탄력 개선 및 주름 개선 등 피부 개선 효과를 부여할 수 있고, 유통 과정에서 안정성 또한 우수한 장점이 있다.

Description

피부 개선을 위한 동결 건조 화장품{Freeze dried cosmetics for skin improvement}

본 발명은 피부 개선을 위한 동결 건조 화장품에 관한 것이다.

최근 기능성 화장품의 개발에 관심이 집중되고 있다. 기능성을 갖는 활성 성분의 연구, 효능 성분의 경피 흡수 촉진과 관련된 제형의 연구와, 피부 생리에 대한 기초 연구 등이 활발하게 이루어지고 있으며, 피부 노화 방지, 자외선이나 유해 물질 등의 외부 환경으로부터의 피부 보호, 및 새로운 피부 세포 생성 촉진 등에 관련된 기능성 성분의 개발과 이들의 효능과 피부 안전성의 측정 방법 연구 등이 주된 관심분야가 되고 있다. 화장품 원료로 집중적으로 연구되고 있는 유효성분으로는 비타민 A, C, E 등의 비타민, 세라마이드(ceramide), 알파하이드록시액시드(α-hydroxy acid) 또는 베타하이드록시액시드(β-hydroxy acid), 글루칸(glucan), 효소(enzyme), 조절인자(modulator), 각종 식물추출물 등을 들 수 있다.

그런데 일부 기능성 성분들은 수분, 열, 빛 등에 불안정하여 사용 기간이 짧고, 다양한 제형으로의 적용이 어렵다는 문제점이 있다. 이에 유효 성분의 안정화에 대한 연구가 활발하게 이루어지고 있다. 한편 유효 성분의 안정화에 중점을 두어 제형화 하는 경우에, 화장품을 피부에 적용시 그 유효성분이 피부에 침투하여 이용되는 효율이 떨어지는 문제점이 발생하기도 한다. 그러므로 유효성분을 효율적으로 안정화하면서도 피부에 적용시 활성성분의 피부 흡수율을 높일 수 있도록 제형화하는 것이 중요하다.

종래, 이러한 안정화 방법의 일예로서 피부 활성 성분을 리포좀화하거나, 캡슐화하거나, 다공성 구조체에 포집시켜 제형화하는 방법이 사용되었다. 대한민국 공개특허 제2009-0014633호 "고액 분리형 화장료 제제"에는 '액형 상태에서 성분의 활성이 떨어지는 기능성 화장료 성분을 리포좀 또는 나노 입자로 캡슐화하여 고체제제화하고 사용 시에 액체제제와 혼합하는 것을 특징으로 하는 분리형 화장료 제제'가 개시되어 있다.

본 발명의 목적은 피부에 적용 시 피부 흡수율이 매우 뛰어나고 피부 세포에 수분을 공급하여 피부 보습, 탄력 개선 및 주름 개선 등 피부 개선 효과와 탈모 방지 또는 개선 효과를 부여하며, 유통 과정에서 안정성이 증가된 동결 건조 화장품을 제공하고자 한다.

그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

본 발명의 일 구현 예에 따르면, 만니톨(mannitol), 히알루론산(hyaluronic acid) 및 용매를 유효 성분으로 포함하는 조성물을 동결 건조하여 얻어진 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명에서 상기 만니톨은 2 내지 8 중량%, 바람직하게는 4 내지 6 중량%의 양으로 포함될 수 있다. 본 발명에서 상기 만니톨의 함량이 2 중량% 미만인 경우 동결 건조 후 화장료 조성물의 강도가 떨어져 유통 과정에서 안정성이 저하될 수 있고, 상기 만니톨의 함량이 8 중량% 초과인 경우 피부에 적용 시 사용감이 떨어지고 백탁 현상이 발생할 수 있다.

본 발명에서 상기 히알루론산은 0.05 내지 10 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 5 중량%의 양으로 포함될 수 있다. 본 발명에서 상기 히알루론산의 함량이 0.05 중량% 미만인 경우 충분한 보습 효과를 얻을 수 없을 뿐만 아니라 피부 사용감이 둔탁해지고 백탁 현상이 발생할 수 있다. 본 발명에서 상기 히알루론산의 함량이 10 중량% 초과하는 경우 동결 건조 후 화장료 조성물의 강도가 저하되어 목적하는 형상으로 제조가 어려우며 유통 과정에서 안정성이 떨어질 수 있다.

본 발명에서 상기 만니톨과 상기 히알루론산은 1:0.05 내지 1:1의 중량 비율로 포함될 수 있다. 본 발명에서 상기 만니톨과 상기 히알루론산의 혼합 중량 비율이 상기 범위를 벗어나는 경우 피부 사용감이 저하되고 동결 건조 시 안정성이 저하될 뿐만 아니라, 충분한 피부 개선 효과를 얻을 수 없다.

본 발명의 조성물은 잔부로 용매를 포함할 수 있는데, 상기 용매는 정제수, 글리세린, 부틸렌글라이콜, 헥산디올, 메칠프로판디올, 프로판디올, 프로필렌글라이콜, 에탄올, 메탄올, 에틸아세테이트, 디클로로메탄, 에틸에테르 및 헥산으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

또한, 본 발명의 조성물은 헤파리노이드(heparinoid), 성장인자(growth factor) 및 줄기세포 배양액 중 적어도 하나를 추가로 더 포함함으로써 피부 개선의 기능성을 높이고, 동결 건조 후 얻어질 화장료 조성물의 안정성을 높일 수 있다.

본 발명에서 상기 헤파리노이드는 헤파린과 유사한 물질로, 헤파린과 마찬가지로 항혈전, 혈행 개선 등의 기능을 가지고 있는 뮤코다당류이다. 본 발명에서 상기 헤파리노이드는 작은 분자량으로 피부의 진피층까지 깊숙이 침투하여 세포에 수분감을 공급해주고 탄력을 유지하는 기능을 할 수 있다.

본 발명에서 상기 헤파리노이드는 0.05 내지 5 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 3 중량%의 양으로 포함될 수 있다. 본 발명에서 상기 헤파리노이드의 함량이 0.05 중량% 미만인 경우 화장료 조성물의 피부 흡수율이 저하되고, 동결 건조 후 화장료 조성물의 안정성이 저하될 수 있다. 본 발명에서 상기 헤파리노이드의 함량이 5 중량% 초과인 경우 목적하는 질감의 화장료 조성물을 얻을 수 없다.

본 발명에서 상기 성장인자는 혈관 내피세포 성장인자(Vascular endothelial growth factor; VEGF), 혈소판 유래 성장인자(Platelet derived growth factor; PDGF), 인슐린 유사 성장인자-I(Insulin-like growth factor I; IGF-I), 인슐린 유사 성장인자-II(Insulin-like growth factor II; IGF-II), 상피세포 성장인자(Epithelial growth factor; EGF), 섬유아세포 성장인자(Fibroblast growth factor; bFGF) 및 각질세포 성장인자(Keratinocyte growth factor; KGF)로 이루어진 군에서 1종 이상일 수 있다.

본 발명에서 상기 성장인자는 1 내지 50 ppm, 바람직하게는 10 내지 30 ppm의 양으로 포함될 수 있다. 본 발명에서 상기 성장인자의 함량이 1 ppm 미만인 경우 충분한 피부 세포의 재생 및 탄력 개선의 효과를 얻을 수 없고, 상기 성장인자의 함량이 50 ppm 초과인 경우 초과 투입에 따른 상승효과가 적어 경제적이지 못할 수 있다.

본 발명에서 상기 줄기세포 배양액은 무기염; 탄소원; 아미노산 및 비타민 중 적어도 하나; 및 용매;를 포함하는 배양 배지에 줄기세포를 배양하여 얻어진 것으로, 피부 개선 효과가 뛰어날 뿐만 아니라, 상기 줄기세포의 배양 시 무혈청 배지를 사용함에 따라 피부에 적용하여도 안전한 장점이 있다.

본 발명에서 상기 줄기세포 배양액은 0.05 내지 20 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 10 중량%의 양으로 포함될 수 있다. 본 발명에서 상기 줄기세포 배양액의 함량이 0.05 중량% 미만인 경우 충분한 피부 개선의 효과를 얻을 수 없고, 상기 줄기세포 배양액의 함량이 20 중량% 초과인 경우 초과 투입에 따른 상승효과가 적어 경제적이지 못할 수 있다.

본 발명의 배양 배지에서 상기 무기염은 NaCl, KCl, CaCl₂, K₂HPO₄ 및 NaH₂PO₄로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상, 이들의 무수물 또는 수화물일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 배양 배지에서 상기 무기염은 용매 1L 당 3000 내지 6000 mg, 3500 내지 5500 mg, 4000 내지 5000 mg, 또는 4000 내지 4500 mg일 수 있다.

본 발명의 배양 배지에서 상기 탄소원(C)은 녹말, 덱스트린(dextrin), 유청(whey), 전분, 포도당, 사과산, 구연산, 주석산, 초산, 지방산, 파라핀, 탄화수소, 옥수수 전분(Corn starch), 트레할로오스(trehalose), 락토오스(lactose), 글리세롤(glycerol), 가용성 전분(soluble starch), 덱스트린(dextrin), 설탕(sucrose), 탈토오스(maltose), 솔비톨(sorbitol), 만니톨(mannitol), 프록토오스(fructose), 글루코스(D-glucose) 및 소듐바이카보네이트(NaHCO₃)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 배양 배지에서 상기 탄소원은 용매 1L 당 1000 내지 5000 mg, 1500 내지 4000 mg, 2000 내지 3000 mg, 또는 2500 내지 3000 mg으로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 배양 배지에서 상기 아미노산은 20종 아미노산 중 1종 이상, 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 무수화물일 수 있고, 바람직하게는 알기닌(arginine), 티로신(tyrosine), 라이신(lysine), L-류신(leucine), 이소류신(isoleucine), 트레오닌(threonine), 발린(valine), 페닐알라닌(phenylalanine), 히스티딘(histidine), 세린(serine), 글라이신(glycine), 시스테인(cysteine), 메티오닌(methionine) 및 트리토판(tryptophan)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상, 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 무수화물일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 배양 배지에서 상기 아미노산은 용매 1L 당 0 초과 300 mg 이하, 10 초과 200 mg 이하, 50 초과 200 mg 이하, 또는 100 내지 200 mg 이하의 양으로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 배양 배지에서 상기 비타민은 이노시톨(inositol), 엽산(folic acid), 티아민(thiamine), 피리독신(pyridoxine), 니아신아마이드(niacineamide) 및 리보플라빈(riboflavin)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상, 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 무수화물일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 배양 배지에서 상기 비타민은 용매 1L 당 0 초과 150 mg 이하, 10 초과 150 mg 이하 또는 10 초과 100 mg 이하의 양으로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 배양 배지에서 상기 용매는 정제수, 글리세린, 부틸렌글라이콜, 헥산디올, 메칠프로판디올, 프로판디올, 프로필렌글라이콜, 에탄올, 메탄올, 에틸아세테이트, 디클로로메탄, 에틸에테르 및 헥산으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명에서 상기 배양되는 줄기세포의 종류는 특별히 제한하지 않으며, 배아 줄기세포, 성체 줄기세포 또는 역분화 줄기세포일 수 있다. 여기서 상기 성체 줄기세포는 골수 유래, 제대혈 유래, 지방 유래, 혈액 유래, 간장 유래, 피부 유래, 위장관 유래, 태반 유래, 신경 유래, 부신 유래, 상피 유래 또는 자궁 유래 등의 성체 줄기세포일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명에서 상기 배양 배지에 줄기세포를 배양하는 방법은 당업계에 공지된 세포 배양 방법을 응용할 수 있으며, 특별히 제한하지 않는다.

본 발명에서는 상기 배양 배지에 줄기세포를 배양하여 얻어진 배양액으로부터 원심분리를 통해 줄기세포를 제거한 것을 사용할 수 있다. 상기 원심분리는 500~1000 rpm에서 2~5분간 수행될 수 있으나, 구체적인 조건은 특별히 제한하지 않는다.

또한, 본 발명의 조성물은 피부 탄력 개선의 기능성을 위해 아데노신 및 니아신아마이드 중 적어도 하나를 더 포함할 수 있다.

본 발명에서 상기 아데노신은 DNA를 구성하는 리보뉴클레오티드로, 염기인 아데닌과 당인 D-리보오스가 결합한 화합물로, 아데노신에 인산기가 3개 붙으면, 세포 내 에너지의 주 근원인 ATP(adenosine triphosphate)가 된다. 이러한 성능으로 인해, 아데노신은 피부에 흡수되면, 진피층에서 DNA와 단백질 합성을 촉진하여 피부의 주름을 완화하고 탄력을 복원하게 해준다.

본 발명에서 상기 아데노신은 0.01 내지 0.5 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 0.3 중량%의 양으로 포함되는 것이 바람직하다. 본 발명에서 상기 아데노신의 함량이 0.01 중량% 미만인 경우, 탄력 복원 효과를 얻을 수 없으며, 상기 아데노신의 함량이 0.5 중량%를 초과하는 경우 초과 투입에 따른 상승 효과가 적어 경제적이지 못할 수 있다.

본 발명에서 상기 니아신아마이드는 니코틴산아마이드로서, 니코틴아마이드, 피리딘-3-카르복실산으로도 불리며, 비타민 B3의 생리활성 아마이드이다. 니아신아마이드는 대표적인 피부 미백 성분으로, 멜라노좀의 이동을 저해하여 합성된 멜라닌이 케라티노사이트로 이동하는 것을 저해하기 때문에, 피부 색소 침착을 감소시킨다. 본 발명은 니아신아마이드의 피부 미백 성능에 더하여 콜라겐 합성 및 세포간 지질의 합성을 증가시켜 피부 보습과 탄력 증진에 유리한 작용을 하는 점에 주목하였다.

본 발명에서 상기 니아신아마이드는 0.01 내지 0.5 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 0.3 중량%의 양으로 포함될 수 있다. 본 발명에서 상기 니아신아마이드의 함량이 0.1 중량% 미만인 경우, 충분한 보습 및 탄력 증진 효과를 얻을 수 없으며, 상기 니아신아마이드의 함량이 0.5 중량%를 초과하는 경우, 초과 투입에 따른 상승효과가 적어 경제적이지 못할 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 기능성 부여 물질을 0.01 내지 10 중량%의 양으로 추가로 더 포함할 수 있다. 여기서, 상기 기능성 부여 물질로서는 미백제, 항발적제, 자외선 차단제, 보습제, 습윤제, 박리제, 항노화제, 항주름제, 탄성을 개선시키는 성분, 교질(collagen) 또는 엘라스틴 합성을 자극하는 성분, 줄기세포 추출물, 항여드름제, 항염증제, 항산화제, 항자유 라디칼 성분, 프로착색제 또는 탈색소제, 펩티드, 비타민 또는 그 유도체, 향 정유, 항바이러스제, 항진균제, 소염제 및 항알레르기제로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 것을 원하는 기능에 따라 사용할 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 그 형태를 유지하고, 사용감을 개선하기 위한 보조적인 역할을 수행하기 위해 충전제를 0.01 내지 5 중량%의 양으로 추가로 더 포함할 수 있다, 여기서 상기 충전제로는 마이크로콜로이드 실리카, 나노클레이, 티타늄옥사이드, 탈크, 마이카, 아크릴 파우더, 나일론 파우더, 폴리에틸렌 파우더 및 폴리프로필렌 파우더로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

또한, 본 발명의 조성물은 외관 및 역가 보존 등의 특별한 목적을 위하여 첨가제를 0.01 내지 5 중량%의 양으로 추가로 더 포함할 수 있다. 여기서 상기 첨가제는 계면활성제, 착색제, 착향제, 감미제 및 보존제로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 조성물은 동결 건조된 것으로, -40 내지 20 ℃의 온도 조건 하에서 38 내지 96 시간 동안 동결 건조된 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

또한, 본 발명의 조성물은 동결 건조 시 배합된 원료들의 특성에 따라 다양한 형상으로 제형 가능한 괴상 또는 시트상으로 얻어질 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 동결 건조 후 파우더, 구형, 하트형, 정제형 또는 시트형으로 제작될 수 있으나, 구체적인 형상을 특별히 제한하지는 않는다.

본 발명의 조성물이 동결 건조 후 구형의 형상으로 제작되는 경우 직경은 1~15mm의 크기로 형성될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

또한, 본 발명의 조성물은 물 또는 물이 함유된 화장수, 로션, 크림 또는 에센스 등의 화장료에 재용해 시켜 사용될 수 있고, 그 경우 피부에의 흡수율을 높일 수 있다.

본 발명에 따른 조성물은 피부 보습 외에 전반적인 피부 개선을 위해 사용될 수 있는 바, 예컨대 피부 탄력 향상, 색소 침착 개선, 미백, 피부 당김 개선, 피부결 개선, 피부톤 밝아짐, 피부 각질 감소, 바람직하게 보습 외에 주름 개선, 미백 및 각질 개선으로 이루어진 군에서 선택된 1 이상의 피부 개선 효과를 위해 사용될 수 있고, 그 외에도 두피에 적용 시 발모 및 육모 효과가 탁월하여 탈모의 예방 또는 개선을 위한 목적으로도 사용될 수 있다.

본 발명의 다른 구현 예에 따르면, 본 발명의 화장료 조성물과 함께 물, 화장수, 로션, 크림 및 에센스 중 적어도 하나를 포함하는 화장품 키트를 제공한다.

본 발명에서 화장료 조성물은 화장수, 영양로션, 영양에센스, 마사지 크림, 미용목욕물첨가제, 바디로션, 바디밀크, 배스오일, 베이비오일, 베이비파우더, 샤워겔, 샤워크림, 선스크린로션, 선스크린크림, 선탠크림, 스킨로션, 스킨크림, 자외선차단용 화장품, 크렌징밀크, 탈모제{화장용}, 페이스 및 바디로션, 페이스 및 바디크림, 피부미백크림, 핸드로션, 헤어로션, 화장용크림, 쟈스민오일, 목욕비누, 물비누, 미용비누, 샴푸, 손세정제(핸드클리너), 약용비누{비의료용}, 크림비누, 페이셜 워시, 전신 세정제, 두피 세정제, 헤어린스, 화장비누, 치아미백용 겔, 치약 등의 형태로 제조될 수 있다. 이를 위해 본 발명의 유효 성분은 화장료 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 용매나, 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물 내에 더 추가될 수 있는 용매의 종류는 특별히 한정하지 않으나, 예를 들어, 물, 식염수, DMSO 또는 이들의 조합을 사용할 수 있고, 담체, 부형제 또는 희석제로는 정제수, 오일, 왁스, 지방산, 지방산 알콜, 지방산 에스테르, 계면활성제, 흡습제(humectant), 증점제, 항산화제, 점도 안정화제, 킬레이팅제, 완충제, 저급 알콜 등이 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 또한, 필요에 따라 미백제, 보습제, 비타민, 자외선 차단제, 향수, 염료, 항생제, 항박테리아제, 항진균제를 포함할 수 있다.

상기 오일로서는 수소화 식물성유, 피마자유, 면실유, 올리브유, 야자인유, 호호바유, 아보카도유가 이용될 수 있으며, 왁스로는 밀랍, 경랍, 카르나우바, 칸델릴라, 몬탄, 세레신, 액체 파라핀, 라놀린이 이용될 수 있다.

지방산으로는 스테아르산, 리놀레산, 리놀렌산, 올레산이 이용될 수 있고, 지방산 알콜로는 세틸 알콜, 옥틸 도데칸올, 올레일 알콜, 판텐올, 라놀린 알콜, 스테아릴 알콜, 헥사데칸올이 이용될 수 있으며 지방산 에스테르로는 이소프로필 미리스테이트, 이소프로필 팔미테이트, 부틸 스테아레이트가 이용될 수 있다. 계면 활성제로는 당업계에 알려진 양이온 계면활성제, 음이온 계면활성제 및 비이온성 계면활성제가 사용가능하며 가능한 한 천연물 유래의 계면활성제가 바람직하다.

그 외에도 화장품 분야에서 널리 알려진 흡습제, 증점제, 항산화제 등을 포함할 수 있으며, 이들의 종류와 양은 당업계에 공지된 바에 따른다.

본 발명에서 제공하는 동결 건조 화장품을 피부에 적용하는 경우, 피부 흡수율이 매우 뛰어나서 피부 세포에 수분을 공급하여 피부 보습, 탄력 개선 및 주름 개선 등 피부 개선 효과를 부여할 수 있고, 두피에 적용하는 경우 발모 및 육모 효과가 뛰어나 탈모의 예방 또는 개선 효과를 부여할 수 있으며, 유통 과정에서 안정성 또한 우수한 장점이 있다.

도 1은 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 동결 건조 볼 화장품의 사진을 나타낸 것이다.
도 2는 실험예 1에서 본 발명의 조성물 내 상피세포 성장인자의 함량에 따른 동결 건조 후 흡광도의 변화를 나타낸 그래프이다.
도 3은 실험예 1에서 본 발명의 동결 건조 볼 화장품 내에 포함된 상피세포 성장인자의 함량과, 상기 화장품을 제조하는 데에 사용된 상피세포 성장인자의 함량을 비교한 그래프이다.
도 4는 실험예 2에서 HEK 293 (Human Embryo Kidney cell) 세포에 본 발명의 동결 건조 볼 화장품과, 동결 건조하지 않은 상피세포 성장인자를 처리한 후 세포의 증식율을 비교한 그래프이다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

실시예

[준비예 1] 줄기세포 배양액의 제조

증류수 1L에 하기 표 1에 나타낸 성분을 첨가하여 배양 배지를 준비하였다. 이렇게 준비된 배양 배지에 역분화 유도한 지방세포 유래 줄기세포 2x10^6 세포수를 접종한 뒤 37 ℃의 온도 하에서 72 시간 동안 배양하였다. 이후, 1200 rpm에서 5 분 동안 원심 분리하여 줄기세포를 제거하고, 부유물 제거를 위해 0.45 um의 필터로 배양액을 걸러 최종 줄기세포 배양액을 준비하였다.

구분	성분		농도 (mg/L)
무기염	소듐클로라이드	NaCl	4000
	포타슘클로라이드	KCl	200
	칼슘클로라이드	CaCl₂ (anhydrous)	25
	소듐포스페이트	NaH₂PO₄·H₂O	80
탄소원	소듐바이카보네이트	NaHCO₃	2000
탄소원	글루코오스	D-Glucose	600
아미노산	알지닌에이치씨엘	L-Arginine HCl	10미만
	타이로신	L-Tyrosine	10미만
	라이신에이치씨엘	L-Lysine HCl	10미만
	류신	L-Leucine	10미만
	이소류신	L-Isoleucine	10미만
	트레오닌	L-Threonine	10미만
	발린	L-Valine	10미만
	페닐알라닌	L-Phenylalanine	10미만
	히스티딘에이치씨엘	L-Histidine HCl·H₂O	10미만
	세린	L-Serine	10미만
	글라이신	Glycine	10미만
	시스테인에이치씨엘	L-Cystine 2HCl	10미만
	메치오닌	L-Methionine	10미만
	트립토판	L-Tryptophan	10미만
비타민	이노시톨	Myo-Inositol	10미만
	엽산	Folic Acid	10미만
	티아민에이치씨엘	Thiamine HCl	10미만
	피리독신에이치씨엘	Pyridoxine HCl	10미만
	나이아신아마이드	Niacinamide	10미만
	리보플라빈	Riboflavin	10미만

[실시예 1 내지 10] 동결 건조 볼 화장품의 제조

정제수 1L에 만니톨 5 중량%, 히알루론산 0.5 중량%, 아데노신 0.1 중량%, 나이아신아마이드 0.1 중량%, 상피세포 성장인자 10 ppm, 헤파리노이드 0.3 중량%, 상기 준비예 1에서 얻어진 줄기세포 배양액 1 중량%를 혼합한 뒤, 직경 10mm의 구형의 틀에 상기 조성물을 충진하고 하기 표 2에 나타낸 조건으로 - 20 ℃에서 20 ℃로 천천히 온도를 올리면서 동결 건조하여 도 1(실시예 1)에 나타낸 동결 건조 볼 화장품을 제조하였다.

조건	SV01	SV02	SV03	SV04	SV05	SV06	SV07	SV08	SV09	SV10
온도(℃)	-20	-20	-10	-10	0	0	10	10	20	20
시간(분)	120	480	120	480	120	540	60	240	120	9999

[비교예 1] 동결 건조 볼 화장품의 제조

정제수 1L에 만니톨 1 중량%, 히알루론산 1 중량%, 아데노신 0.1 중량%, 나이아신아마이드 0.1 중량%, 상피세포 성장인자 10 ppm, 헤파리노이드 0.3 중량%, 상기 준비예 1에서 얻어진 줄기세포 배양액 1 중량%를 혼합한 뒤, 직경 10mm의 구형의 틀에 상기 조성물을 충진하고 -80 ℃의 온도 하에서 24시간 동안 동결하고, 상기 표 2에 나타낸 조건으로 동결 건조하여 동결 건조 볼 화장품을 제조하였다.

[비교예 2] 동결 건조 볼 화장품의 제조

정제수 1L에 만니톨 10 중량%, 히알루론산 1 중량%, 아데노신 0.1 중량%, 나이아신아마이드 0.1 중량%, 상피세포 성장인자 10 ppm, 헤파리노이드 0.3 중량%, 상기 준비예 1에서 얻어진 줄기세포 배양액 1 중량%를 혼합한 뒤, 직경 10mm의 구형의 틀에 상기 조성물을 충진하고 -80 ℃의 온도 하에서 24시간 동안 동결하고, 상기 표 2에 나타낸 조건으로 동결 건조하여 동결 건조 볼 화장품을 제조하였다.

[실험예 1] 동결 건조 후 성장인자의 함량 변화

상기 실시예 1의 동결 건조 볼 화장품에 있어서, 동결 건조 전 성장인자와 동결 건조 후 성장인자를 100~100,000배로 희석한 샘플을 준비하였다. 효소결합 면역흡착 검사 (Enzyme-linked immunosorbent assay; ELISA)기법에 따라 그 양을 측정하였으며, 알려진 성장인자의 농도를 희석하여 기준을 설정하여 각각의 함량을 측정하였다.

도 2 및 3에서 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 동결 건조 볼 화장품을 제조하기 위하여 동결 건조하여도 동결 건조 전과 비교하여 성장인자의 함량에 큰 변화가 없는 것을 확인할 수 있었다.

[실험예 2] 세포의 증식 촉진 효과

100mm 세포배양 플레이트에 10%우혈청이 포함된 DMEM 배지를 넣어준다. 여기에 1x10^6 개의 HEK 293 세포를 접종한 후, 세포가 바닥에 붙으면 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체하여 아무것도 넣지 않은 음성 대조군(Negative control), 실시예 1의 동결 건조 볼 화장품(동결건조 EGF), 및 상기 실시예 1의 동결건조 볼 화장품에 함유된 동량의 성장인자(EGF)를 넣어 24시간, 48시간이 지난 후 세포의 수를 개수하였다.

구분	배양 시간에 따른 세포 성장율(%)
구분	0hr	24hr	48hr
Negative control	100	94	80
EGF	100	102	120
동결건조 EGF	100	106	126

상기 표 3 및 도 4에서 보는 바와 같이, HEK 293 세포(Human Embryo Kidney cell)에 본 발명에 따른 동결 건조 볼 화장품을 처리한 경우, 동결 건조하지 않은 상피세포 성장인자를 처리한 경우에 비하여 세포 증식율이 현저히 향상된 것을 확인할 수 있었다.

[실험예 3] 화장품의 안정성 평가

실시예 1, 비교예 1 및 비교예 2의 동결 건조 볼 화장품에 있어서, 실시예 1 및 비교예 2의 화장품은 안정적인 볼 형상의 화장품이 제조되었지만, 비교예 1의 화장품은 만니톨의 함량이 너무 낮아 화장품이 볼 형상을 유지하지 못하고 무너져 내리는 결과를 보였다.

[실험예 4] 화장품의 사용감 평가

실시예 1과 비교예 2 각각의 동결 건조 볼 화장품을 1개 취하여 그에 액상의 에센스를 5 방울 혼합하자 동결건조 볼 화장품이 에센스에 완전히 용해되었다. 동결건조 볼 화장품이 용해된 에센스를 피부에 발라 사용감을 평가한 결과, 실시예 1의 동결건조 볼 화장품이 용해된 에센스는 부드럽게 잘 발리는 등 높은 사용감을 보였지만, 만니톨의 함량이 너무 높은 비교예 2의 동결건조 볼 화장품이 용해된 에센스는 피부에 적용 시 뻑뻑하게 발리는 등 사용감이 매우 낮고, 피부에 백탁 현상을 유발시키는 것을 볼 수 있었다.

Claims

만니톨(mannitol), 히알루론산(hyaluronic acid), 아데노신, 니아신아마이드, 헤파리노이드(heparinoid), 성장인자(growth factor), 줄기세포 배양액 및 용매를 유효 성분으로 포함하며,
상기 줄기세포 배양액은 증류수에 무기염, 탄소원, 아미노산, 비타민 성분을 포함하고, 혈청을 포함하지 않는 것을 특징으로 하는 조성물을 동결 건조하여 얻어진 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 만니톨은 2 내지 8 중량%의 양으로 포함되는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 히알루론산은 0.05 내지 10 중량%의 양으로 포함되는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 만니톨과 상기 히알루론산은 1:0.05 내지 1:1의 중량 비율로 포함되는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 헤파리노이드는 0.05 내지 5 중량%의 양으로 포함되는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 성장인자는 혈관 내피세포 성장인자(Vascular endothelial growth factor; VEGF), 혈소판 유래 성장인자(Platelet derived growth factor; PDGF), 인슐린 유사 성장인자-I(Insulin-like growth factor I; IGF-I), 인슐린 유사 성장인자-II(Insulin-like growth factor II; IGF-II), 상피세포 성장인자(Epithelial growth factor; EGF), 섬유아세포 성장인자(Fibroblast growth factor; bFGF) 및 각질세포 성장인자(Keratinocyte growth factor; KGF)로 이루어진 군에서 1종 이상인, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 성장인자는 1 내지 50 ppm의 양으로 포함되는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 무기염은 NaCl, KCl, CaCl₂, K₂HPO₄ 및 NaH₂PO₄로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상, 이들의 무수물 또는 수화물인, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 탄소원은 녹말, 덱스트린(dextrin), 유청(whey), 전분, 포도당, 사과산, 구연산, 주석산, 초산, 지방산, 파라핀, 탄화수소, 옥수수 전분(Corn starch), 트레할로오스(trehalose), 락토오스(lactose), 글리세롤(glycerol), 가용성 전분(soluble starch), 덱스트린(dextrin), 설탕(sucrose), 탈토오스(maltose), 솔비톨(sorbitol), 만니톨(mannitol), 프록토오스(fructose), 글루코스(D-glucose) 및 소듐바이카보네이트(NaHCO₃)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 아미노산은 알기닌(arginine), 티로신(tyrosine), 라이신(lysine), L-류신(leucine), 이소류신(isoleucine), 트레오닌(threonine), 발린(valine), 페닐알라닌(phenylalanine), 히스티딘(histidine), 세린(serine), 글라이신(glycine), 시스테인(cysteine), 메티오닌(methionine) 및 트리토판(tryptophan)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상, 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 무수화물인, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 비타민은 이노시톨(inositol), 엽산(folic acid), 티아민(thiamine), 피리독신(pyridoxine), 니아신아마이드(niacineamide) 및 리보플라빈(riboflavin)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상, 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 무수화물인, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 줄기세포 배양액은 용매 1L 당 무기염 3000 내지 6000 mg, 탄소원 1000 내지 5000 mg, 아미노산 0 초과 300 mg 이하, 및 비타민 0 초과 150 mg 이하를 포함하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 아데노신은 0.01 내지 0.5 중량%의 양으로 포함되는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 니아신아마이드는 0.01 내지 0.5 중량%의 양으로 포함되는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 -40 내지 20 ℃의 온도 조건 하에서 38 내지 96 시간 동안 동결 건조된 것인, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 파우더, 구형, 하트형, 정제형 또는 시트형인 화장료 조성물.
제1항 내지 제16항 중 어느 한 항의 화장료 조성물; 물, 화장수, 로션, 크림 및 에센스 중 적어도 하나;를 포함하는 화장품 키트.
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