KR102171152B1

KR102171152B1 - 보르티옥세틴 및 도네페질을 포함하는 조성물

Info

Publication number: KR102171152B1
Application number: KR1020157015715A
Authority: KR
Inventors: 코니 산체스 모릴로
Original assignee: 하. 룬드벡 아크티에셀스카브
Priority date: 2012-12-13
Filing date: 2013-12-12
Publication date: 2020-10-29
Also published as: RU2015122256A; MA38253B1; CL2015001615A1; CA2893468A1; HK1212601A1; AR093939A1; PL2931276T3; UA114016C2; SG11201504483YA; EA028300B1; EA201590932A1; ME03029B; ES2663680T3; MY171802A; US9211288B2; PE20151026A1; AP2015008498A0; ECSP15023182A; PH12015501302A1; AR125920A2

Abstract

보르티옥세틴 및 도네페질을 포함하는 약학 조성물과, 인지 기능장애 치료에 있어서 이와 같은 조성물의 용도가 제공된다.

Description

보르티옥세틴 및 도네페질을 포함하는 조성물{COMPOSITIONS COMPRISING VORTIOXETINE AND DONEPEZIL}

본 발명은 보르티옥세틴 및 도네페질을 포함하는 약학 조성물과, 인지 기능장애의 치료에 있어서 도네페질과 보르티옥세틴이 함께 사용될 때 이것들의 용도에 관한 것이다.

국제 특허 출원들, 예를 들어 WO 제03/029232호 및 WO 제2007/144005호는 화합물 1-[2-(2,4-디메틸-페닐설파닐)-페닐]-피페라진 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 개시한다. 그 후 WHO는 보르티옥세틴이 1-[2-(2,4-디메틸-페닐설파닐)-페닐]-피페라진에 대해 권고된 국제 일반명(International Non-proprietary Name; INN)임을 공표한 바 있다. 보르티옥세틴은 공식적으로 문헌에서 LU AA21004로서 언급되었다. 2013년 9월, FDA는 상표명 브린텔릭스(Brintellix)™인 보르티옥세틴을 주요 우울 장애의 치료용으로서 승인하였다.

보르티옥세틴은 5-HT₃, 5-HT₇ 및 5-HT_1D 수용체들에 대한 길항제, 5-HT_1A 수용체에 대한 작용제, 5-HT_1B 수용체에 대한 부분 작용제, 그리고 세로토닌 수송체의 억제제이다. 추가적으로, 보르티옥세틴은 뇌의 특정 구역에서 신경 전달 물질인 세로토닌, 노르아드레날린, 도파민, 아세틸콜린 및 히스타민의 수준을 향상시키는 것으로 입증된 바 있다. 이러한 활성들 모두는 임상학적으로 관련성이 있으며, 상기 화합물의 작용 기전에 잠재적으로 관여되어 있는 것으로 간주되고 있다[J. Med . Chem., 54, 3206-3221, 2011; Eur . Neuropshycopharmacol., 18(suppl 4), S321, 2008; Eur . Neuropshycopharmacol., 21(suppl 4), S407-408, 2011; Int . J. Psychiatry Clin Pract. 5, 47, 2012].

임상 실험에서 보르티옥세틴은 우울증 치료에 있어서 안전하고 효과적인 것으로 나타났다. 주요 우울 장애(MDD)가 있는 환자에서 상기 화합물의 효능과 내약성을 평가하기 위한 개념 증명 연구로부터 얻어진 결과들을 보고하고 있는 논문(Alvares et al)이 문헌[Int . J. Neuropsychopharm. 18 July 2011]에 의해 온 라인 상으로 입수 가능하였다. 각각의 임상군에 속하는 대략 100 명의 환자들로 행하여진 6 주간의 무작위 위약 제어 연구로부터 얻어진 결과들은, MDD가 있는 환자들에서 우울 및 불안 증상들의 치료시 보르티옥세틴이 위약과 유의적으로 구분됨을 나타낸다. 또한 임상 실험실 결과들, 활력 징후들, 체중 또는 ECG 매개 변수들에도 임상학적으로 관련된 변화들이 보이지 않은 것으로 보고되었다. 장기간의 연구로부터 얻어진 결과들은 또한 보르티옥세틴이 MDD를 앓고 있는 환자들에서 재발을 예방하는 데 효과적이라는 것도 나타낸다[Eur . Neuropsychopharmacol. 21(suppl 3), S396-397, 2011]. 문헌[Int . Clin . Psychopharm., 27, 215-227, 2012]에 보고된 고령의 우울증 환자들에서의 연구는, 보르티옥세틴이 인지 기능장애들을 치료하는 데 사용될 수 있음을 나타낸다.

WO 제2009/062517호로 공개된 국제 출원은, 보르티옥세틴이 기타 다른 유형의 약학적 활성 성분들, 예를 들어 인터페론, 아편, ACE 억제제 및 아세틸콜린 에스터라제 억제제와 병합될 수 있음을 개시한다.

세로토닌 수준과 세로토닌 수용체들의 활성화 또는 억제가 아세틸콜린 수준에 미칠 수 있는 영향은 광범위하게 검토된 바 있다(문헌[Pharmacol Rev, 59, 360-417, 2007] 참조). 상기 검토로부터, 세로토닌 작동성 시스템이 아세틸콜린 방출에 미치는 영향은 극히 복잡하고 이해하기 힘들다는 것이 드러난다.

아세틸콜린은 중추 신경계뿐만 아니라 말초 신경계에서도 작용을 하는 신경 전달 물질이다. 아세틸콜린의 낮은 수준은 인지 기능장애가 유의적 역할을 담당하고 있는 질병들, 예를 들어 알츠하이머병과 연관되어 있다. 실제로 아세틸콜린 에스터라제 억제제의 투여는 알츠하이머병에 대한 2 가지 주요 치료 패러다임 중 하나이다. 나머지 주요 치료 패러다임은 메만틴, 즉 NMDA 수용체 길항제의 투여이다. 아세틸콜린 에스터라제 억제제 3 가지, 즉 도네페질, 리바스티그민 및 갈란타민은 현재 알츠하이머병의 치료용으로서 승인되어 있다. 도네페질은 1996년에 FDA에 의해 처음 승인되었고; 리바스티그민은 2000년에 FDA에 의해 처음 승인되었으며; 갈란타민은 2001년에 FDA에 의해 처음 승인되었다.

상기 언급된 아세틸콜린 에스터라제 억제제 3 가지 이외에도, 화합물 타크린이 FDA에 의해 이전에 승인되었다. 뿐만 아니라, 특허 문헌은 아세틸콜린 에스터라제 억제제로서 작용을 하는 화합물을 개시하고 있는 광범위한 문헌들을 포함하는데, 그 예로서는 WO 제88/08708호, WO 제93/13100호, W0 제97/38993호, WO 제2003/082820호, US 제4,914,102호, US 제5,231,093호, US 제5,246,947호, EP 제268871호, EP 제298202호, EP 제409676호, EP 제477903호 및 EP 제703901호를 포함한다.

인지 기능장애는 다수의 CNS(중추 신경계) 질병들에 있어서 주요 역할을 담당한다. 이러한 질병의 예로서는 알츠하이머병, 혈관성 치매, 및 우울증, 조현병, 파킨슨병, 약물 남용 또는 헌팅톤병 연관 인지 기능장애를 포함한다. 인지 기능장애는 현존하는 치료법으로서는 충분히 해결되지 않으며, 본 발명은 인지 기능장애를 치료하기 위한 대안적이면서 더 효율적인 방법을 제공하고자 한다.

본 발명자는 아세틸콜린 에스터라제 억제제인 도네페질과 보르티옥세틴의 병합 사용이 뇌내 아세틸콜린의 세포외 수준을 상승적으로 증가시킨다는 것을 발견하였다.

따라서 하나의 구현예에서, 본 발명은 보르티옥세틴과 도네페질을 포함하는 조성물에 관한 것이다.

하나의 구현예에서, 본 발명은 인지 기능장애를 치료하기 위한 의약품의 제조에 있어서 보르티옥세틴과 도네페질의 용도에 관한 것이다.

하나의 구현예에서, 본 발명은 인지 기능장애를 치료하기 위한 방법에 관한 것으로서, 상기 방법은 인지 기능장애의 치료를 필요로 하는 환자에게 보르티옥세틴과 도네페질을 병합 투여하는 것을 포함한다.

하나의 구현예에서, 본 발명은 인지 장애를 치료하기 위한 방법에 있어서 병합 사용하기 위한 보르티옥세틴과 도네페질에 관한 것이다.

도 1: 보르티옥세틴과 도네페질의 병합 투여 후 자유롭게 움직이는 래트들의 복측 해마에 있어서 약력학적 아세틸콜린 반응. 도 1a: 보르티옥세틴 0 ㎎/㎏ 및 도네페질 0 ㎎/㎏(●); 도네페질 0.3 ㎎/㎏(▲); 또는 도네페질 1 ㎎/㎏(■) 투여시 아세틸콜린 반응. 도 1b: 보르티옥세틴 5 ㎎/㎏ 및 도네페질 0.3 ㎎/㎏(▲); 및 도네페질 1 ㎎/㎏(■) 투여시 아세틸콜린 반응. 비이클/비이클(●)은 참고용으로 포함되어 있다. 도 1c: 보르티옥세틴 10 ㎎/㎏ 및 도네페질 0.3 ㎎/㎏(▲); 및 도네페질 1 ㎎/㎏(■) 투여시 아세틸콜린 반응. 비이클/비이클(●)은 참고용으로 포함되어 있다.
도 2: 보르티옥세틴과 도네페질의 병합 투여 후 자유롭게 움직이는 래트들의 복측 해마에 있어서 약력학적 아세틸콜린 반응. 도 2a: 도네페질 0.3 ㎎/㎏ 및 보르티옥세틴 0 ㎎/㎏(▲); 보르티옥세틴 5 ㎎/㎏(■); 또는 보르티옥세틴 10 ㎎/㎏(×) 투여시 아세틸콜린 반응. 비이클/비이클(●)은 참고용으로 포함되어 있다. 도 2b: 도네페질 1 ㎎/㎏ 및 보르티옥세틴 0 ㎎/㎏(▲); 보르티옥세틴 5 ㎎/㎏(■); 또는 보르티옥세틴 10 ㎎/㎏(×) 투여시 아세틸콜린 반응. 비이클/비이클(●)은 참고용으로 포함되어 있다.
도 3: 보르티옥세틴 투여 후 자유롭게 움직이는 래트들의 복측 해마에 있어서 약력학적 아세틸콜린 반응. 보르티옥세틴 0 ㎎/㎏(●), 2.5 ㎎/㎏(▲), 5 ㎎/㎏(■) 및 10 ㎎/㎏(×) 투여시 아세틸콜린 반응.
도 4: 보르티옥세틴과 갈란타민의 병합 투여 후 자유롭게 움직이는 래트들의 복측 해마에 있어서 약력학적 아세틸콜린 반응. 도 4a: 비이클(①에서 주사) 및 비이클(

에서 주사)(○); 그리고 비이클(①에서 주사) 및 보르티옥세틴 10 ㎎/㎏(

에서 주사)(●) 투여시 아세틸콜린 반응. 도 4b: 갈란타민 0.3 ㎎/㎏(①에서 주사) 및 비이클(

에서 주사)(△); 그리고 갈란타민 1.0 ㎎/㎏(①에서 주사) 및 비이클(

에서 주사)(▲) 투여시 아세틸콜린 반응. 도 4c: 비이클(①에서 주사) 및 비이클(

에서 주사)(○); 비이클(①에서 주사) 및 보르티옥세틴 10 ㎎/㎏(

에서 주사)(●); 갈란타민 0.3 ㎎/㎏(①에서 주사) 및 비이클(

에서 주사)(△); 갈란타민 1.0 ㎎/㎏(①에서 주사) 및 비이클(

에서 주사)(□); 갈란타민 0.3 ㎎/㎏(①에서 주사) 및 보르티옥세틴 10 ㎎/㎏(

에서 주사)(▲); 그리고 갈란타민 1.0 ㎎/㎏(①에서 주사) 및 보르티옥세틴 10 ㎎/㎏(

에서 주사)(■) 투여시 아세틸콜린 반응.
도 5: 보르티옥세틴과 리바스티그민의 병합 투여 후 자유롭게 움직이는 래트들의 복측 해마에 있어서 약력학적 아세틸콜린 반응. 도 5a: 리바스티그민 0.2 ㎎/㎏(①에서 주사) 및 비이클(

에서 주사)(+); 리바스티그민 0.6 ㎎/㎏(①에서 주사) 및 비이클(

에서 주사)(×) 투여시 아세틸콜린 반응. 도 5b: 비이클(①에서 주사) 및 비이클(

에서 주사)(●); 리바스티그민 0.2 ㎎/㎏(①에서 주사) 및 비이클(

에서 주사)(×); 리바스티그민 0.2 ㎎/㎏(①에서 주사) 및 보르티옥세틴 10 ㎎/㎏(

에서 주사)(◇); 및 리바스티그민 0.6 ㎎/㎏(①에서 주사) 및 보르티옥세틴 10 ㎎/㎏(

에서 주사)(◆) 투여시 아세틸콜린 반응.
도 6: 비이클; 스코폴라민(0.5 ㎎/㎏); 스코폴라민(0.5 ㎎/㎏) + 보르티옥세틴(5 ㎎/㎏); 스코폴라민(0.5 ㎎/㎏) + 도네페질(0.5 ㎎/㎏); 또는 스코폴라민(0.5 ㎎/㎏) + 보르티옥세틴(5 ㎎/㎏) + 도네페질(0.5 ㎎/㎏)로 처리된 래트에 있어서 낯선 물체 인지능으로부터 구하여진 인지 지수(recognition index).

본 발명은 인지 기능장애의 치료를 위한 보르티옥세틴의 용도를 포괄한다. 본원의 내용 중 “보르티옥세틴”은 유리 염기 및 약학적으로 허용 가능한 염으로서의 보르티옥세틴을 포함한다. 구체적으로 HBr염, 타르트레이트 염 및 (DL)-젖산 염이 언급된다.

보르티옥세틴 유리 염기의 분자 구조는 다음과 같이 표시된다.

본 발명은 인지 기능장애의 치료용으로서의 도네페질의 용도를 포괄한다. 본원의 내용 중 “도네페질”은 유리 염기 및 약학적으로 허용 가능한 염으로서의 도네페질을 포함한다. 구체적으로 HCl 염이 언급된다.

도네페질 유리 염기의 분자 구조는 다음과 같이 표시된다.

더 일반적인 용어들에 있어서, 상기 약학적으로 허용 가능한 염들은 무독성인 산들의 산 부가염이다. 상기 염들은 유기산, 예를 들어 말레산, 푸마르산, 벤조산, 아스코르브산, 숙신산, 옥살산, 비스-메틸렌살리실산, 메탄설폰산, 에탄디설폰산, 아세트산, 프로피온산, 타르타르산, 살리실산, 시트르산, 글루콘산, 젖산, 말산, 만델산, 신남산, 시트라콘산, 아스파르트산, 스테아르산, 팔미트산, 이타콘산, 글리콜산, p-아미노벤조산, 글루탐산, 벤젠설폰산, 테오필린 아세트산으로부터 만들어진 염들, 그리고 8-할로테오필린, 예를 들어 8-브로모테오필린을 포함한다. 상기 염들은 또한 무기염, 예를 들어 염산, 브롬화수소산, 황산, 설팜산, 인산 및 질산으로부터 만들어질 수 있다.

보르티옥세틴의 제조 방법들은 WO 제03/029232호, WO 제2007/144005호 및 WO 제2010/094285호로 공개된 국제 특허 출원에 개시되어 있다. 도네페질은 다수의 상업적 공급처들로부터 용이하게 입수될 수 있다.

보르티옥세틴과 도네페질의 병합 투여는 동시 투여의 형태를 취할 수 있다. 이러한 구현예에서, 보르티옥세틴과 도네페질은 환자에게 본질적으로 동시에 보르티옥세틴과 도네페질 둘 다를 포함하는 하나의 투여형의 형태로 투여되거나, 또는 별도의 투여형들, 즉 보르티옥세틴을 포함하는 제1 투여형과 도네페질을 포함하는 제2 투여형의 형태로 투여된다.

대안적으로, 보르티옥세틴과 도네페질의 병합 투여는 보르티옥세틴의 투여와 도네페질의 투여 간 시차를 포함한다. 이러한 구현예에서, 보르티옥세틴 또는 도네페질 중 어느 하나가 처음에 투여될 수 있다. 실시예 파트에 나타낸 데이터에 의해 증명되는 바와 같이, 보르티옥세틴과 도네페질 간 상승 효과가 존재한다. 상기 상승 효과는 보르티옥세틴과 도네페질 둘 다의 약리학적 관련양이 체내에 동시에 존재하는지에 따라서 달라진다. 이는, 보르티옥세틴의 투여와 도네페질의 투여 간에 있을 수 있는 시차의 상한치를 부여한다. 실제로 보르티옥세틴의 투여와 도네페질의 투여가, 투여될 2 개의 화합물들 중 첫 번째 화합물의 반감기 대략 2 구간 초과의 간격을 두고 행하여진다면 상승 효과는 떨어질 가능성이 있다. 하나의 구현예에서, 2 개의 화합물들의 투여는, 투여될 첫 번째 화합물의 반감기 0 구간 내지 1 구간의 간격을 두고 행하여진다. 본원의 내용 중 “반감기”는 약학적으로 활성인 성분의 혈장 수준이 해당 성분의 처음 값의 50%에 도달하는데 필요한 시간이다.

사람의 체내 도네페질의 반감기는 대략 70 시간이다[xPharm: The Comprehensive Pharmacology Reference, 1-5, Elsevier, 2007].

사람의 체내 보르티옥세틴의 반감기는 대략 57 시간이다[Basic & Clin Pharm&Tox, 111, 198-205, 2012].

보르티옥세틴은 통상적으로 1 ㎎/일 내지 100 ㎎/일, 예를 들어 1 ㎎/일 내지 50 ㎎/일, 예를 들어 5 ㎎/일, 10 ㎎/일, 15 ㎎/일, 20 ㎎/일 또는 30 ㎎/일로 투여된다.

도네페질은 통상적으로 1 ㎎/일 내지 100 ㎎/일, 예를 들어 1 ㎎/일 내지 30 ㎎/일, 예를 들어 1 ㎎/일, 5 ㎎/일, 15 ㎎/일 또는 25 ㎎/일로 투여된다.

보르티옥세틴과 도네페질의 이러한 1 일 투여량은 1 부로 또는 2 부 이상으로 나누어 투여될 수 있다.

실시예 파트에서 입증된 바와 같이, 보르티옥세틴과 도네페질의 병합 투여는 뇌내 아세틸콜린 수준에 상승 효과를 일으킨다. 더욱이, 실시예 파트는 또한 기타 다른 아세틸콜린 에스터라제 억제제, 예를 들어 갈란타민과 리바스티그민의 병합 투여가 이와 같은 상승 효과를 일으키지 않음을 입증한다. 따라서 데이터는, 보르티옥세틴/도네페질 병용이, 이러한 구체적 병용에 대해서만 특유하고, 보르티옥세틴과 기타 다른 아세틸콜린 에스터라제 억제제들의 병용에 의해서는 공유되지 않는 특성들을 제공함을 나타낸다.

이러한 발견들은, 도네페질과 보르티옥세틴이 래트의 기억력에 미치는 영향에 대해 연구되었던 실시예 5에 보고된 실험에 의해 추가로 뒷받침된다. 사용된 테스트는 소정의 처리가 기억력에 미치는 영향을 평가하기 위한 알려진 방법인 낯선 물체 인지 테스트이다. 상기 테스트는 래트들이, 자신들이 처한 환경에서 낯선 물체들을 찾아 나서는 자연적인 성향을 바탕으로 하는 것으로서, 래트들이, 자신들에게 이미 노출된 물체들을 기억하는 정도를 정량화한다. 습관화 기간(habituation phase)에 있어서, 래트들은 테스트 방의 환경과, 모양, 색상 및 질감이 상이한 물체들 2 개를 찾도록 허용된다. 테스트 기간 중 물체들 중 하나가 교환되는데, 이로써 래트들은 낯선 물체 하나와 익숙한 물체 하나에 노출된다. 테스트 화합물들이 투여된 후에는 낯선 물체와 익숙한 물체를 찾는데 소요된 시간이 기록된다. 실시예 5의 결과들은, 보르티옥세틴 5 ㎎/㎏이 스코폴라민 0.5 ㎎/㎏에 의해 유도된 기억력 손상을 보상하지 않음을 나타낸다. 이와 유사하게, 도네페질 0.5 ㎎/㎏은 스코폴라민 0.5 ㎎/㎏에 의해 유도된 기억력 손상을 보상하지 않는다. 그러나, 명백하게도, 하위 유효 투여량(sub-effective dosage)의 보르티옥세틴과 도네페질이 함께 투여될 때 이 화합물들은 래트들의 기억력을 유의적으로 개선시킨다. 이러한 행동 모델로부터 얻어진 결과들은, 실시예 1 내지 실시예 4에서 입증된 아세틸콜린 수준의 상승적 증가가 래트들의 행동에 반영되는 것으로 보임을 나타낸다.

보르티옥세틴 투여 후 래트들의 수용체 점유율이 문헌[J pharmacol Exp Ther. 340, 345-366, 2012] 및 [Eur Neuropsychopharm, 23, 133-145, 2013]에서 연구된 바 있다. 결과들은, 5 ㎎/㎏ 내지 10 ㎎/㎏ 투여된 보르티옥세틴이 관련 표적들, 예를 들어 세로토닌 수송체, 5-HT₃-수용체 및 5HT_1B-수용체를 거의 완전히 점유함을 나타낸다. 사람에 있어서 세로토닌 수송체 점유율은 문헌[Basic & Clin Pharmacol & Tox, 110, 401-404, 2012]에서 연구되었다. 1 일 5 ㎎, 10 ㎎ 및 20 ㎎이 투여되면 점유율은 각각 51%, 63% 및 90%가 된다는 것이 발견되었다. 도네페질의 혈장 농도와 아세틸콜린 에스터라제의 억제 간 상관 관계는 문헌[Neurol, 50, 136-145, 1998]에서 연구된 바 있다. 혈장 농도가 약 20 ng/㎖이면 억제율은 약 60%가 되고, 혈장 농도가 약 6 ng/㎖이면 억제율은 15%가 된다는 것이 발견되었다. 이러한 측면에서, 사람 아세틸콜린 에스터라제의 활성 서열들(Uniprot P22303)과 래투스 노르베기쿠스(rattus norvegicus)의 활성 서열들(Uniprot P37136)은 동일성이 90%에 가깝다는 것이 주목된다. 이러한 배경에서, 실시예 1에 보고된 혈장 수준을 염두에 두었을 때, 보르티옥세틴의 연구된 수준(5 ㎎/㎏ 내지 10 ㎎/㎏)은 사람에 있어서 보르티옥세틴의 1 일 임상 용량 5 ㎎ 내지 20 ㎎에 해당한다는 결론이 내려진다. 이와 유사하게, 도네페질의 연구된 용량 0.3 ㎎/㎏은 하위 유효 용량에 해당하는 반면에, 용량 1 ㎎/㎏은 사람에 있어서 1 일 임상 용량 5 ㎎ 내지 25 ㎎에 해당한다.

도네페질에 대하여 승인된 유지 투여량(maintenance dosage)(FDA)은, 초기 용량 5 ㎎일 때 1 일 10 ㎎ 또는 23 ㎎이다. 따라서 하나의 구현예에서, 본 발명은 통상적으로 1 일 1 ㎎, 5 ㎎, 15 ㎎ 또는 20 ㎎으로 투여되는 보르티옥세틴과 함께, 도네페질이 1 일 1 ㎎ 이상, 예를 들어 2 ㎎ 이상, 예를 들어 5 ㎎ 이상, 예를 들어 10 ㎎ 이상 투여되는 것에 관한 것이다. 구체적인 예들로서는 1 일 5 ㎎ 내지 20 ㎎, 예를 들어 10 ㎎ 또는 15 ㎎의 보르티옥세틴과 함께, 5 ㎎ 내지 10 ㎎의 도네페질을 포함한다. 구체적인 예들로서는 1 일 5 ㎎ 내지 20 ㎎, 예를 들어 10 ㎎ 또는 15 ㎎의 보르티옥세틴과 함께, 10 ㎎ 내지 25 ㎎의 도네페질, 예를 들어 23 ㎎의 도네페질을 포함한다.

본 발명에 사용되는 활성 약학 성분들, 즉 보르티옥세틴과 도네페질은 단일 용량 또는 복수 용량으로, 순수한 화합물들로서 단독 투여되거나 약학적으로 허용 가능한 담체들 또는 부형제들과 함께 투여될 수 있다. 본 발명에 따른 약학 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체 또는 희석제뿐만 아니라 통상의 기법들, 예를 들어 문헌[Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21 Edition, Hauber, Ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2006]에 개시된 것에 따른 임의의 기타 다른 공지된 보조제들 및 부형제들과 함께 제형화될 수 있다.

약학 조성물은 특히 임의의 적당한 경로, 예를 들어 경구, 직장, 비강, 폐, 국소(협측 및 설하를 포함함), 경피, 낭내, 복강내, 질내 및 비경구(피하, 근육내, 척추강내, 정맥내 및 진피내) 경로에 의한 투여용으로서 제형화될 수 있으며, 경구 경로가 바람직하다. 바람직한 경로는 치료될 피험체의 전체적인 상태와 연령, 치료될 병태의 본질, 그리고 선택된 활성 성분에 따라 달라질 수 있음이 이해될 것이다.

경구 투여용 약학 조성물은 고체 투여형, 예를 들어 캡슐, 정제, 드라제, 알약, 로젠지, 분말 및 과립을 포함한다. 적절한 경우, 상기 고체 투여형은 코팅이 있는 상태로 제조될 수 있다.

경구 투여용 액체 투여형들은 용액, 에멀젼, 현탁액, 시럽 및 엘릭시르를 포함한다.

비경구 투여용 약학 조성물은 멸균 수성 및 비수성 주사 용액, 분산액, 현탁액 또는 에멀젼뿐만 아니라, 사용전 멸균 주사 용액 또는 분산액 중에 재구성될 멸균 분말을 포함한다.

기타 다른 적당한 투여형들로서는 좌제, 스프레이, 연고, 크림, 겔, 흡입제, 진피 패치제, 임플란트 등을 포함한다.

비경구 투여에 있어서, 멸균 수용액, 수성 프로필렌 글리콜, 수성 비타민 E 또는 참기름이나 피넛 오일 중 본 발명의 화합물의 용액이 이용될 수 있다. 이와 같은 수용액들은 필요하다면 적당히 완충되어야 하고, 액체 희석제는 처음에 충분한 염수나 글루코스로 등장성이 되어야 한다. 수용액은 특히 정맥내, 근육내, 피하 및 복강내 투여용으로 적당하다. 이용된 멸균 수성 매질은 모두 당업자들에게 알려진 표준 기법들에 의해 용이하게 얻어질 수 있다.

적당한 약학 담체들로서는 비활성 고체 희석제 또는 충전제, 멸균 수용액 및 다양한 유기 용매를 포함한다. 고체 담체의 예들로서는 락토스, 백토, 수크로스, 사이클로덱스트린, 활석, 젤라틴, 아가, 펙틴, 아카시아, 스테아르산마그네슘, 스테아르산 및 셀룰로스의 저급 알킬 에테르가 있다. 액체 담체의 예들로서는 시럽, 피넛 오일, 올리브 오일, 인지질, 지방산, 지방산 아민, 폴리옥시에틸렌 및 물이 있다. 본 발명에 사용된 화합물과 약학적으로 허용 가능한 담체들의 혼합에 의해 형성된 약학 조성물은 이후 개시된 투여 경로들에 적당한 여러 가지 투여형으로서 용이하게 투여된다.

경구 투여에 적당한 본 발명의 제형들은 각각 소정량의 활성 성분을 함유하고, 적당한 부형제를 포함할 수 있는 개별 단위들, 예를 들어 캡슐이나 정제로서 제시될 수 있다. 뿐만 아니라, 경구 섭취 가능한 제형들은 분말이나 과립, 수성 또는 비수성 액체 중 용액이나 현탁액, 또는 수중유 또는 유중수 액체 에멀젼의 형태일 수 있다.

고체 담체가 경구 투여용으로서 사용는 경우, 제조물은 정제, 예를 들어 경질 젤라틴 캡슐에 담긴 것, 분말이나 펠릿 형태 또는 트로키나 로젠지의 형태일 수 있다. 고체 담체의 양은 다양할 수 있으나, 일반적으로는 약 25 ㎎ 내지 약 1 g일 것이다.

액체 담체가 사용되는 경우, 제조물은 시럽, 에멀젼, 연질 젤라틴 캡슐 또는 멸균 주사액, 예를 들어 수성 또는 비수성 액체 현탁액 또는 용액의 형태일 수 있다.

정제는 활성 성분과 통상의 보조제들 및/또는 희석제들이 혼합된 후 이 혼합물이 통상의 타정기 내에서 압착됨으로써 제조될 수 있다. 보조제 또는 희석제의 예들로서는 옥수수 전분, 감자 전분, 활석, 스테아르산마그네슘, 젤라틴, 락토스, 검 등을 포함한다. 일반적으로 착색, 착향 및 보존 등과 같은 목적으로 사용되는 기타 다른 임의의 보조제들 또는 첨가제들이 사용될 수 있되, 다만 이것들은 활성 성분들과 혼화 가능한 것들이다.

편리하게, 본 발명의 화합물은 보르티옥세틴과 도네페질을 각각 약 1 ㎎ 내지 100 ㎎의 양으로 함유하는 단위 투여형으로서 투여된다. 특히 보르티옥세틴의 단위 용량은 5 ㎎, 10 ㎎, 15 ㎎, 20 ㎎ 또는 25 ㎎일 수 있다. 특히 도네페질의 단위 용량은 1 ㎎, 2 ㎎, 5 ㎎, 10 ㎎, 15 ㎎, 20 ㎎ 또는 25 ㎎일 수 있다.

인지 기능장애는 인지 기능 또는 인지적 영역, 예를 들어 작업 기억력, 주의력 및 경계성, 언어 학습 및 기억력, 시각 학습 및 기억력, 추리력 및 문제 해결 능력, 예를 들어 집행 기능, 일 처리 속도 및/또는 사회 인지의 저하를 포함한다. 특히, 기능장애는 주의력 결핍, 혼란한 사고, 느린 사고, 이해 곤란, 집중력 저하, 문제 해결 능력의 손상, 기억력 저하, 사고 표현의 곤란 및/또는 사고, 감정 및 행동 통합의 곤란, 또는 상관 없는 사고들의 제거 곤란을 나타낼 수 있다. 치매는 인지 기능장애의 한 징후이다. 용어 “인지 결핍” 및 “인지 손상”은 “인지 기능장애”와 동의어로 사용될 수 있다.

상기 언급된 바와 같이, 인지 기능장애는 다수의 CNS 질병의 임상 징후의 중요한 일부를 형성한다. 몇몇 CNS 질병에 있어서, 인지 기능장애는 질병, 예를 들어 알츠하이머병의 주요 징후이다. 기타 다른 질병, 예를 들어 우울증에 있어서, 인지 기능장애는 상기 질병의 임상 징후의 일부를 형성할 수 있지만, 우울증과는 독립적으로 유의적 정도에 이를 수도 있다. 예를 들어 우울증 환자들에서 항우울제를 이용한 임상 실험에 있어서 인지 척도 및 우울 척도 상 결과가 일치하는 것은 아니라는 것이 관찰되었다. 우울증 증상들의 회복시에도 인지 기능장애는 종종 지속된다. 이러한 배경에서, 보르티옥세틴과 도네페질의 병합 투여는 알츠하이머병 치매, 혈관성 치매, 픽병 치매, 크로이츠펠트-야콥병 치매, 헌팅톤병 치매, 파킨슨병 치매, HIV(사람 면역 결핍 바이러스) 치매, (알코올 또는 약물) 남용 치매, MCI(경도 인지 손상), 우울증 연관 인지 기능장애 및 조현병 연관 인지 기능장애의 치료에 유용한 것으로 여겨진다.

하나의 구현예에서, 본 발명은 인지 기능장애; 알츠하이머병 치매; 혈관성 치매; 픽병 치매; 크로이츠펠트-야콥병 치매; 헌팅톤병 치매; 파킨슨병 치매; HIV(사람 면역 결핍증 바이러스) 치매; (알코올 또는 약물) 남용 치매; MCI(경도 인지 손상); 우울증 연관 인지 기능장애; 및 조현병 연관 인지 기능장애로부터 선택되는 질병을 치료하기 위한 방법에 관한 것으로서, 상기 방법은 상기 질병들의 치료를 필요로 하는 환자에게 치료학적 유효량의 보르티옥세틴 및 도네페질을 병합 투여하는 것을 포함한다.

하나의 구현예에서, 본 발명은 인지 기능장애; 알츠하이머병 치매; 혈관성 치매; 픽병 치매; 크로이츠펠트-야콥병 치매; 헌팅톤병 치매; 파킨슨병 치매; HIV(사람 면역 결핍증 바이러스) 치매; (알코올 또는 약물) 남용 치매; MCI(경도 인지 손상); 우울증 연관 인지 기능장애; 및 조현병 연관 인지 기능장애로부터 선택되는 질병을 치료하기 위한 의약품의 제조에 있어서 보르티옥세틴과 도네페질의 용도에 관한 것이다.

하나의 구현예에서, 본 발명은 인지 기능장애; 알츠하이머병 치매; 혈관성 치매; 픽병 치매; 크로이츠펠트-야콥병 치매; 헌팅톤병 치매; 파킨슨병 치매; HIV(사람 면역 결핍증 바이러스) 치매; (알코올 또는 약물) 남용 치매; MCI(경도 인지 손상); 우울증 연관 인지 기능장애; 및 조현병 연관 인지 기능장애로부터 선택되는 질병을 치료하기 위한 방법에 있어서 병합 사용되기 위한 보르티옥세틴 및 도네페질에 관한 것이다.

본원에 사용된 화합물의 “치료학적 유효량”이란, 상기 화합물의 투여를 포함하는 치료적 개입에 있어서 소정의 질병과 이의 합병증들의 임상 징후들을 치유, 경감 또는 부분 지연시키는데 충분한 양을 의미한다. 이를 달성하는데 충분한 양은 “치료학적 유효량”이라 정의된다. 각각의 목적에 효과적인 양들은 질병이나 손상의 중증도, 뿐만 아니라 피험체의 체중 및 전체적인 상태에 따라서 달라질 것이다.

본원에 사용된 용어 “치료” 및 “치료하는 것”이란, 병태, 예를 들어 질병이나 장애가 발생하는 것을 막기 위한 목적으로 환자를 관리하고 돌보는 것을 의미한다. 상기 용어는 환자가 앓고 있는 소정의 병태에 대한 치료의 전 범위, 예를 들어 증상들이나 합병증들을 완화하거나, 병태의 진행을 지연시키고/지연시키거나 병태를 치유 또는 없애기 위한 활성 화합물의 투여를 포함하는 것으로 의도된다. 치료될 환자는 바람직하게 포유동물, 특히 사람이다.

본원에 인용된 모든 참고 문헌들, 예를 들어 간행물들, 특허 출원들 및 특허들은, 본원의 다른 곳에서 이루어진 특정 문헌들에 관해서 별도로 제공된 임의의 포함에 상관 없이, 각각의 참고 문헌들이 개별적으로 그리고 구체적으로 참고로 포함되었다고 나타내어지고 본원에 전체가 기재된 것과 동일한 정도로(법으로 허용되는 최대 한도로), 전체가 본원에 참고로 포함되어 있다.

본 발명을 기술하는 내용에 있어서 관사 용어들(“a”, “an” 및 “the”), 및 이와 유사한 용어들의 사용은, 본원에 달리 나타내어져 있거나 내용에 의해 명백히 모순되지 않는 한, 단수형 및 복수형 둘 다를 포함하는 것으로 해석되어야 한다. 예를 들어 어구 “상기 화합물”은, 달리 나타내어져 있지 않는 한, 본 발명의 다양한 “화합물들” 또는 구체적으로 기술된 양태를 말하는 것으로 이해되어야 한다.

요소 또는 요소들에 관하여 “~를 포함하는”, “~를 가지는”, “~를 포함한” 또는 “~를 함유하는”과 같은 용어들을 사용하여 본 발명의 양태 또는 임의의 양태를 본원에 기술하는 것은, 달리 진술되어 있거나 본 발명의 내용에 의해 명백히 모순되지 않는 한, “특정 요소 또는 요소들로 이루어지거나”, “본질적으로 특정 요소 또는 요소들로 이루어지거나” 또는 “실질적으로 특정 요소 또는 요소들을 포함하는” 본 발명의 양태 또는 유사한 양태에 대한 뒷받침을 제공하는 것으로 의도된다(예를 들어, 달리 진술되어 있거나 본 발명의 내용에 의해 명백히 모순되지 않는 한, 본원에 특정 요소를 포함하는 것으로 기술되어 있는 조성물은 또한 해당 요소로 이루어진 조성물을 기술하는 것으로도 이해되어야 할 것이다).

실시예

투여된 화합물의 양은 상응하는 유리 염기의 양으로서 나타내어진다.

실시예 1. 자유롭게 움직이는 래트들의 해마에 있어서 아세틸콜린 수준에 미치는 보르티옥세틴과 도네페질의 효과

성체 수컷 위스타(Wistar) 래트들을 본 실험에 사용하였다. 래트들을 마취시킨 후 수술하였다. 각각의 동물을 입체 정위 틀(코프 인스트루먼츠(Kopf Instruments), 미국)에 눕히고 나서 두개골 상부를 절개하였다. 표면 4 ㎟가 노출된 미소 투석 프로브(폴리아크릴니트릴막, 네덜란드 브레인링크(Brainlink))를 복측 해마에 이식하였다. 좌표들은 다음과 같았다: (브레그마에 대해) AP = -5.3 ㎜, (중앙선에 대해) 측면 = +4.8 ㎜, (경막에 대해) 복측 = -8.0 ㎜, 절개 장치 바 -3.3 ㎜로 설정[Paxinos and Watson, The rat brain in stereotaxic coordinates, Academic Press, 6^th edition, New York, 2008]. 스테인리스 강 스크류와 치과용 시멘트를 이용하여 프로브들을 두개골에 부착하였다. 회복후 1 일 경과시 실험들을 시작하였다.

보르티옥세틴 HBr을 10% 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린 중에 0 ㎎/㎖, 5 ㎎/㎖ 또는 10 ㎎/㎖로 준비하였다. 도네페질 HCl을 초순수 중에 0 ㎎/㎖, 0.3 ㎎/㎖ 또는 1.0 ㎎/㎖로 준비하였다. 보르티옥세틴은 피하 투여하였으며, 도네페질은 복강내 투여하였다.

실험 당일, 미소 투석 프로브를 가요성 PEEK 튜브를 이용하여 미세 관류 펌프(하버드(Harvard))와 연결시키고, 147 mM NaCl, 3.0 mM KCl, 1.2 mM CaCl₂ 및 1.2 mM MgCl₂를 함유하는 인공 뇌척수액을 1.5 ㎕/분의 유속으로 관류시켰다. 2 시간 동안 예비 안정화시킨 후, 샘플(30 ㎕)을 수집하고 나서, 20 mM 포름산 및 0.04% 아스코르브산(10 ㎕) 중에 보관하였다.

내부 표준으로서 아세틸-β-메틸-콜린을 사용하는 검출을 위해 샘플 중 아세틸콜린의 농도를 이중 질량 분광 분석기(MS/MS)가 끼워 맞춰진 HPLC로 측정하였다. 50℃에서 역상 페노메넥스 시너지 맥스-RP 컬럼(reversed phase Phenomenex Synergi Max-RP column)(2.0 × 150 ㎜, 입도 4 ㎛) 상에서 크로마토그래피 분리를 수행하였다. 0.25 ㎖/분의 유속으로 용리액 A(20 mM 아세트산암모늄, 5% 아세토니트릴 및 0.3% 트리플루오로아세트산)의 등용매 흐름을 사용하여 성분들을 분리하였다.

API 3000 MS/MS 검출기와 터보 이온 분사 인터페이스(Turbo Ion Spray interface)로 이루어진 API 3000 MS/MS 시스템을 사용하여 MS 분석을 수행하였다. 이온화 분사 전압이 4.5 kV로 설정되고 프로브 온도는 550℃로 맞춘 양 이온화 모드로 데이터 습득을 수행하였다. 상기 기구를 다중 반응 모니터링 모드로 작동시켰다.

3 가지의 예비 투여 샘플들의 평균을 100%로 설정하였다. 만일 비교 샘플들이 <50% 또는 >150%이면, 이 샘플들은 이상치(outlier)로 간주하고 기준치 산정에 사용하지 않았다. 모든 투여 후 샘플들을 동일 피험체 내 기준 수준의 백분율로서 표현하였다. 반복된 측정치들에 대하여 2 원 분산 분석법(ANOVA)을 사용한 후 다시 스튜던트-뉴먼-큘스(Student-Newman-Keuls) 사후 검정을 수행하여 시간 및 처리 효과들을 비교하였다. 유의도는 p<0.05로 한정하였다.

5 마리의 동물들로 이루어진 그룹들을, 보르티옥세틴(비이클, 5 ㎎/㎏ 및 10 ㎎/㎏, 피하 주사)과 도네페질(비이클, 0.3 ㎎/g 및 1 ㎎/㎏, 복강내 주사)의 동시 투여에 의한 병용에 노출시켰다. 데이터는 도 1a 내지 도 1c 및 도 2a 및 도 2b에 나타내어져 있다.

추가로, 각각의 동물로부터 혈액 샘플들을 채취하여 활성 성분들의 혈장 수준을 측정하였다. 이하 표 1은 그 결과들을 나타낸다.

		보르티옥세틴
		비이클		5 mg/kg		10 mg/kg
도네페질		혈장 중 보르티옥세틴 (ng/ml)	혈장 중 도네페질 (ng/ml)	혈장 중 보르티옥세틴 (ng/ml)	혈장 중 도네페질 (ng/ml)	혈장 중 보르티옥세틴 (ng/ml)	혈장 중 도네페질 (ng/ml)
	비이클	0	0	ND	ND	ND	ND
	0.3 mg/kg	0	6.4	149	7.8	317	6.4
	1 mg/kg	0	21	137	28	317	26

상기 표의 데이터는, 동물들이 실제로 2 개의 활성 성분들에 노출되었으며, 실험들 전반에 걸쳐 일관된 수준이 발견되었음을 나타낸다.

복측 해마 내 아세틸콜린의 수준에 대해 얻어지고, 도 1a 내지 도 1c 및 도 2a 및 도 2b에 나타낸 데이터는, 보르티옥세틴 10 ㎎/㎏과 도네페질 1 ㎎/㎏ 투여시의 아세틸콜린 수준이 임의의 기타 다른 처리시의 아세틸콜린 수준과 비교하여 유의적으로 증가하였음을 나타낸다. 상기 데이터는 또한 보르티옥세틴 5 ㎎/㎏과 도네페질 1 ㎎/㎏ 투여시의 아세틸콜린 수준이 보르티옥세틴의 임의의 수준에서 도네페질 0 ㎎/㎏과 0.3 ㎎/㎏ 투여시 아세틸콜린 수준과 비교하여 유의적으로 증가하였음을 나타낸다. 상기 데이터는 또한, 도네페질 1 ㎎/㎏과 비이클의 투여가 비이클 + 비이클 처리시와 비교하여 아세틸콜린 수준을 유의적으로 증가시켰음을 나타낸다.

실시예 2. 자유롭게 움직이는 래트들의 해마에 있어서 아세틸콜린 수준에 미치는 보르티옥세틴의 효과

본 실험은 본질적으로 실시예 1에 기술된 바대로 수행하였다. 분석을 위한 구성은 다음과 같이 약간 변형시켰다. 4 ×2.0 ㎜ 가드 컬럼(페노메넥스 시너지 맥스-RP AJO-6073, 베스터(Bester))으로 보호되는 역상 150 × 2.00 ㎜(4 ㎛) 분석 컬럼(페노메넥스 시너지 맥스-RP, 베스터) 상에서 크로마토그래피 분리를 수행하였으며, 이때 상기 컬럼은 둘 다 30℃의 온도로 유지되었다. 이동상(등용매)은 0.200 ㎖/분의 유속으로 물과 아세토니트릴(ACN), 그리고 트리플루오로아세트산(TFA)으로 이루어졌다(물:ACN:TFA = 95.0:5:0.1 v/v/v%).

API 3000 MS/MS 검출기와 터보 이온 분사 인터페이스(이 기구들은 둘 다 어플라이드 바이오시스템즈(Applied Biosystems)(네덜란드)로부터 입수함)로 이루어진 API 3000 MS/MS 시스템을 사용하여 MS 분석을 수행하였다. 이온화 분사 전압이 5.5 kV로 설정되고 프로브 온도는 450℃로 맞춘 양 이온화 모드로 데이터 습득을 수행하였다.

5 마리의 동물들로 이루어진 그룹들을, 보르티옥세틴(비이클, 2.5 ㎎/㎏, 5 ㎎/㎏ 및 10 ㎎/㎏, 피하 주사)에 노출시켰다. 데이터는 도 3에 나타내어져 있다.

실시예 1과 실시예 2에서 얻어진 결과들은, 보르티옥세틴과 도네페질의 병합 투여의 결과로 얻어진 세포외 아세틸콜린 수준이 보르티옥세틴과 도네페질의 개별 투여시 얻어진 수준보다 유의적으로 더 높음을 명확히 확립한다. 즉, 보르티옥세틴과 도네페질 간 아세틸콜린 수준에 대한 상승 효과가 입증되었다.

2 개의 약학적으로 활성인 화합물들 간 상승 효과는 2 가지 이상의 방법으로 활용될 수 있다. 보통 2 개의 약학적으로 활성인 화합물을 사용하는 1 회 처리에 적용된 용량들은 병용 처리에서 유지될 수 있으며, 예상되는 임상 효과보다 더 큰 효과가 달성될 수 있다. 대안적으로, 소량의 약물 노출에도 임상 효과가 유지되도록 만들기 위해, 보통 2 개의 약학적으로 활성인 화합물을 사용하는 1 회 처리에 적용된 것보다 더 적은 용량들이 상기 화합물들 중 어느 하나 또는 둘 다에 대해 적용될 수 있다. 약물의 양이 증가함에 따라서 부작용들도 증가할 것으로 예상될 수 있기 때문에 더 적은 양의 약물 노출이 유리할 수 있다.

실시예 3. 자유롭게 움직이는 래트들의 해마에 있어서 아세틸콜린 수준에 미치는 보르티옥세틴 및 갈란타민의 효과

성체 수컷 스프라그 돌리(Sprague Dawley) 래트들을 본 실험에 사용하였다. 래트들을 마취시킨 후 수술하였다. 동물을 입체 정위 틀(코프 인스트루먼츠, 미국)에 눕히고 나서, CMA12 가이드 캐뉼러(CMA 마이크로다이알리시스(CMA Microdialysis), 스웨덴)를 복측 해마를 향하게 하여 이식하였다. 프로브들의 팁들에 대한 좌표들은 다음과 같았다: (브레그마에 대해) AP = -5.3 ㎜, (중앙선에 대해) 측면(ML) = -4.8 ㎜, (경막에 대해) 복측 = -8.0 ㎜, (Paxinos and Watson).

화학명이 (4aS,6R,8aS)-4a,5,9,10,11,12-헥사하이드로-3-메톡시-11-메틸-6H-벤조푸로[3a,3,2-ef][2]벤즈아제핀-6-올인 갈란타민을 HBr 염으로서 투여하였다. 보르티옥세틴을 HBr 염으로서 투여하였다. 보르티옥세틴 및 갈란타민을 0.9% 염수 중에 준비하였다. 보르티옥세틴을 10 ㎎/㎏으로 피하 투여하였고, 갈란타민을 0.3 ㎎/㎏ 및 1.0 ㎎/㎏으로 피하 투여하였다.

실험 전날, 미소 투석 프로브(CMA/12, 4 ㎜, PAES, MWKO 100 KDa)를 각성 상태의 래트들 체내에 있는 각각의 가이드 캐뉼러에 삽입하였다. 이 프로브들에 148 mM NaCl, 4 mM KCl, 0.8 mM MgCl₂, 1.4 mM CaCl₂, 1.2 mM Na₂HPO₄, 0.3 mM NaH₂PO₄(pH7.2)를 함유하는 멸균 인공 뇌척수액을 1 ㎕/분의 일정한 유속으로 관류시켰다. 실험 당일 투여 전 30 분의 간격으로 샘플들을 수집하여 기준치를 한정하였다. 데이터를 동일한 동물 내에서 기준치 백분율로서 제시하였다. 유의도는 p<0.05로서 한정하였다. 실험 프로토콜에 따라서 동물들에 처리를 가하였으며, 샘플들을 30 분 간격으로 수집하였다.

MS/MS 모드로 작동하는 워터스 콰트로 프리미어 XE(Waters Quattro Premier XE) 삼중 사중 극자 질량 분광 분석계가 끼워 맞춰진 썬셸 RP-아쿠아(Sunshell RP-Aqua) 2.1×100 ㎜, 2.6 ㎛ 입자 컬럼이 장착된 워터스 액쿼티 HPLC 시스템(Waters Acquity HPLC system)을 사용하여 샘플 중 아세틸콜린의 농도를 측정하였다. 용리액 A(밀리 Q(milliQ) 물 중 100 mM 아세트산암모늄)의 등용매 흐름을 사용하여 성분들을 분리하였다.

6 마리 내지 8 마리의 동물들로 이루어진 그룹들을, 보르티옥세틴(비이클, 10 ㎎/㎏) 및 갈란타민(비이클, 0.3 ㎎/㎏ 및 1.0 ㎎/㎏)의 병용에 노출시켰다. 보르티옥세틴을 주사하기 60 분 전에 갈란타민을 주사하였다. 얻어진 데이터는 도 4a 내지 도 4c에 나타내어져 있다.

데이터는, 갈란타민 0.3 ㎎/㎏ 및 1.0 ㎎/㎏의 투여가 자유롭게 움직이는 래트들의 해마에 있어서 아세틸콜린 수준을 용량에 의존하여 유의적으로 증가시킴을 나타낸다. 결과들은 또한, 보르티옥세틴 10 ㎎/㎏의 투여가 자유롭게 움직이는 래트들의 해마에 있어서 아세틸콜린 수준을 유의적으로 증가시킴을 나타낸다.

이러한 결과들은 실시예 2의 관찰 결과들을 뒷받침한다. 데이터는 또한, 보르티옥세틴과 조합한 갈란타민 0.3 ㎎/㎏ 또는 1.0 ㎎/㎏의 투여가 비이클과 함께 임의의 수준의 갈란타민의 투여와 비교하여 아세틸콜린 수준을 유의적으로 증가시키지 않음을 나타낸다. 사실, 아세틸콜린 수준의 수치상 값들은, 임의의 수준의 갈란타민과 비이클의 투여와 비교하여 임의의 수준의 갈란타민과 보르티옥세틴의 병합 투여에 대하여 더 낮다. 중요하게도, 실시예 3에서 얻어진 결과들은, 보르티옥세틴과 갈란타민의 병합 투여가 아세틸콜린 수준에 상승 효과를 미치지 않음을 나타낸다.

실시예 4: 자유롭게 움직이는 래트들의 해마에 있어서 아세틸콜린 수준에 미치는 보르티옥세틴 및 리바스티그민의 효과

실시예 4는, 테스트 화합물들을 제외하고 실시예 3과 본질적으로 유사하게 수행하였다. 리바스티그민을 0.9% 염수 중에 준비한 후 0.2 ㎎/㎏ 및 0.6 ㎎/㎏으로 피하 투여하였다. 화학명이 카밤산 (S)-N-에틸-N-메틸-3[1-(디메틸아미노)에틸]-페닐인 리바스티그민을 타르트레이트 염으로서 투여하였다.

비이클-비이클 테스트에 대해서 얻어진 데이터는 도 5d 및 도 5e와 도 4a에 나타내어져 있다.

데이터는, 리바스티그민 0.2 ㎎/㎏ 및 0.6 ㎎/㎏의 투여가 아세틸콜린 수준을 용량 의존적으로 그리고 유의적으로 증가시킴을 나타낸다. 데이터는 또한, 보르티옥세틴과 리바스티그민 0.6 ㎎/㎏의 병합 투여가 리바스티그민과 비이클의 투여와 비교하여 아세틸콜린 수준을 증가시키지 않음을 나타낸다. 데이터는, 리바스티그민 0.2 ㎎/㎏과 보르티옥세틴의 병합 투여가 리바스티그민 0.2 ㎎/㎏과 비이클의 투여와 비교하여 아세틸콜린의 수준을 유의적으로 더 높게 상승시킴을 나타낸다. 데이터는, 보르티옥세틴 + 비이클의 투여 후와 리바스티그민 0.2 ㎎/㎏ + 비이클의 투여 후 아세틸콜린 수준의 합이 리바스티그민 0.2 ㎎/㎏과 보르티옥세틴의 병합 투여 후 아세틸콜린 수준과 상이하지 않음을 나타낸다. 이는, 보르티옥세틴과 리바스티그민 0.2 ㎎/㎏의 병합 투여가 자유롭게 움직이는 래트들의 해마에 있어서 아세틸콜린 수준에 부가 효과가 생기게 함을 나타낸다. 중요하게도, 데이터는, 갈란타민과 보르티옥세틴의 병합 투여가 해마에 있어서 아세틸콜린 수준에 상승 효과가 생기게 하지 않음을 나타낸다.

실시예 5. 래트에 있어서 단기 에피소드 기억력에 미치는 도네페질과 보르티옥세틴의 효과

낯선 물체 인지(NOR) 직무를 사용하여 스코폴라민 유도성 기억력 손상이 있는 래트의 기억력에 미치는 보르티옥세틴과 도네페질의 단독 또는 병용시의 영향을 평가하였다. 스프라그-돌리 래트들을 사용하였다.

실험 제1 일과 제2 일에, 래트들에게 2 개의 물체들(익숙한 물체들)을 포함하는 테스트 방의 환경에 대한 습관화 기간들을 2 기 부여하였다. 각각의 기간은 6 분간 지속시켰다. 물체들을 찾지 않은 래트들 또는 천성적으로 다른 물체보다는 어느 하나의 물체를 더 선호하는 래트들은 본 실험에서 제외하였다. 테스트 당일, 5 개의 래트 그룹들을 대상으로 3 차 습관화 테스트(익숙화 실험(familiarization trial))를 실시하였으며, 이후 상기 래트들을 테스트 장치에서 꺼낸 다음 물체들 중 어느 하나를 낯선 물체로 대체하였다. 그로부터 4 시간 경과 후, 래트들을 다시 테스트 장치에 넣고(테스트 기간), 익숙한 물체와 낯선 물체를 찾아내는데 사용된 시간을 기록하였다.

5 개의 래트 그룹들을 다음과 같이 비이클, 스코폴라민, 보르티옥세틴, 도네페질 및 보르티옥세틴 + 도네페질로 복강내 처리하였다. 괄호안 숫자들은 각각의 그룹 내 래트들의 수를 나타낸다.

도 6은 다음과 같이 정의되는 인지 지수(RI)에 의해 낯선 물체를 찾아내는 능력을 나타내며,

상기 식 중, N은 낯선 물체를 찾아내는데 소요된 시간이고, F는 익숙한 물체를 찾아내는데 소요된 시간이다.

데이터는, 그룹 2, 3 및 4에 대한 RI가 그룹 1에 대한 RI보다 유의적으로 더 낮고(p<0.001), 그룹 5에 대한 RI가 그룹 2, 3 및 4 중 임의의 그룹에 대한 RI보다 유의적으로 더 높음(p<0.05)을 나타낸다. 이는, 스코폴라민이 래트의 단기 기억력을 손상시키고, 보르티옥세틴 5 ㎎/㎏이나 도네페질 0.5 ㎎/㎏ 중 어느 것도 이러한 손상을 역전시킬 수 없음을 나타낸다. 이와는 대조적으로, 보르티옥세틴 5 ㎎/㎏과 도네페질 0.5 ㎎/㎏의 병용 효과는 스코폴라민에 의해 유도된 기억력 손상을 역전시킨다.

Claims

보르티옥세틴과 도네페질을 약학적으로 허용 가능한 부형제와 함께 포함하는, 인지 기능장애; 알츠하이머병 치매; 혈관성 치매; 픽병 치매; 크로이츠펠트-야콥병 치매; 헌팅톤병 치매; 파킨슨병 치매; HIV(사람 면역 결핍증 바이러스) 치매; 알코올 또는 약물 남용 치매; MCI(경도 인지 손상); 우울증 연관 인지 기능장애; 및 조현병 연관 인지 기능장애로부터 선택되는 질병을 치료하기 위한 약학 조성물로서, 5 ㎎ 내지 25 ㎎ 도네페질 및 5 ㎎ 내지 20 ㎎ 보르티옥세틴을 포함하는 약학 조성물.
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조합된 보르티옥세틴 및 도네페질을 포함하는, 인지 기능장애; 알츠하이머병 치매; 혈관성 치매; 픽병 치매; 크로이츠펠트-야콥병 치매; 헌팅톤병 치매; 파킨슨병 치매; HIV(사람 면역 결핍증 바이러스) 치매; 알코올 또는 약물 남용 치매; MCI(경도 인지 손상); 우울증 연관 인지 기능장애; 및 조현병 연관 인지 기능장애로부터 선택되는 질병을 치료하기 위한 약학 조성물로서, 5 ㎎ 내지 25 ㎎ 도네페질 및 5 ㎎ 내지 20 ㎎ 보르티옥세틴을 포함하는 약학 조성물.
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