KR102150116B1 - 항암성분인 진세노사이드 Mc 함량이 증가된 흑삼 추출물, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암용 조성물 - Google Patents

항암성분인 진세노사이드 Mc 함량이 증가된 흑삼 추출물, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 흑삼 추출물 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 항암성분의 함량이 현저히 증가한 흑삼 추출물 및 이의 제조방법, 이를 포함하는 항암용 조성물에 관한 것이다.

Description

항암성분인 진세노사이드 Mc 함량이 증가된 흑삼 추출물, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암용 조성물{Black ginseng extract with increased anti-cancer component ginsenoside Mc contents, method for manufacturing thereof, and anti-cancer composition comprising the same}
본 발명은 흑삼 추출물 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 항암성분의 함량이 현저히 증가한 흑삼 추출물 및 이의 제조방법, 이를 포함하는 항암용 조성물에 관한 것이다.
우리나라의 인삼은 약 1,000년 전부터 제조된 역사적 기록을 가지고 있으며, 현재는 약 35억 달러의 세계시장규모로 형성되어 국내벤처기업들이 세계시장에 진입하기 좋은 고유의 전통한약재 또는 건강기능식품이다. 인삼은 다년생 반음지성 식물로 오가피과에 속하는 것으로서 중국, 한국의 다양한 의서에서 그 효능이 널리 알려져 있어 예로부터 많은 분야의 한약재로 사용되어 왔으며, 인삼의 성분은 탄수화물(60~70%), 함질소화합물(12~16%), 사포닌(3~6%), 지용성성분(1~2%), 회분(4~6%), 비타민(0.005%) 등을 함유하고 있다. 인삼의 생리 활성은 최근 체계적인 약리학적 접근으로 자양 강장 효과, 성기능 및 생식기능 부전 개선 효과, 항고혈압 및 항동맥경화 효과, 조혈기능 하인 및 빈혈치료 효과, 혈당 대사 및 당뇨병 개선 효과, 항암효과, 간장기능 부전 개선 효과, 숙취해소 효과, 기생충 감염 방지 효과, 진통 소염 작용 등이 있다. 현대에 와서 인삼에 대해 널리 연구한바, 인삼에는 다량의 진세노사이드(Ginsenoside)가 함유되어 있는 것으로 알려져 예로부터 사용되는 약재 이외에도 근래에는 식품에 적용하여 건강식품의 재료로 많이 사용하고 있다.
지금까지 연구된 바에 의하면, 인삼에 존재하는 활성성분은 대체로 인삼 사포닌(ginsenoside)이라고 알려져 있는데, 인삼 사포닌은 트리터펜(triterpene)인 비당부(protopanaxadiol 또는 protopanaxatriol)의 R1, R2, R3의 알콜성 OH기에 글루코스, 람노스, 자일로스, 아라비노스와 같은 당류가 에스테르 결합된 구조를 갖는 화합물로서, 현재까지 30종 이상이 밝혀져 있으며, 항암작용, 항당뇨작용, 중추신경 억제작용, 동맥경화 및 고혈압의 예방, 간기능 촉진 및 숙취제거 효과, 항피로 및 항스트레스 작용, 항산화작용, 항염활성, 단백질합성 촉진작용, 면역증강작용 등의 약리활성 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다.
이들 인삼 사포닌은 대체로 수삼에 존재하는 것으로 알려져 있으나, 특정한 일부 인삼 사포닌은 가공된 인삼에만 존재하는 것으로 알려져 있다. 최근에는, 이들 가공된 인삼에만 존재하는 인삼 사포닌의 함량을 더욱 높이기 위한 많은 연구가 진행되었으며, 그 결과 태극삼(太極參, taeguk ginseng), 흑삼(黑參, black ginseng) 등의 가공인삼이 개발되었다. 특히, 흑삼은 수회 증숙 및 건조과정을 거쳐 인삼이 검은 색으로 변한 삼을 의미하는 것으로서, 수회 증식 및 건조과정을 거치면서 기본적으로 존재하는 인삼 사포닌이 소실되지 않을 뿐만 아니라, 가공된 인삼에만 존재하는 인삼 사포닌의 함량이 증진되는 것으로 알려져 있어, 이러한 흑삼을 보다 효과적으로 제조하는 방법에 대한 연구가 활발하게 수행되고 있다. 그러나 현재까지 제조되는 흑삼의 문제점은 흑삼에 포함된 인삼 사포닌 성분의 함량이 홍삼의 것과 현저한 차이를 나타내지 못한다는 것에 기인하므로, 흑삼에 포함된 인삼 사포닌 성분의 함량, 특히 가공된 인삼에만 존재하는 인삼 사포닌 성분의 함량을 홍삼의 것에 비하여 현저하게 증가시킬 수 있다면, 상술한 흑삼의 문제점을 해결할 수 있을 것으로 기대되고 있으나, 아직까지는 별다른 성과가 보고되지 않고 있는 실정이다.
KR 10-2018-0078658A
본 발명은 상술한 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로, 항암성분의 함량이 현저히 증가된 흑삼 추출물 및 이의 제조방법을 제공하는데 목적이 있다.
또한, 본 발명은 항암성분이 높은 함량으로 포함된 흑삼 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 갖는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 또는 암 예방 또는 개선용 식품조성물을 제공하는데 다른 목적이 있다.
상술한 과제를 해결하기 위하여 본 발명은 (1) 인삼을 55℃ ~ 75℃에서 열처리 하는 제1증삼공정과 상기 제1증삼공정 수행된 인삼을 85℃ ~ 105℃에서 열처리 하는 제2증삼공정을 포함하되 상기 제2증삼공정을 2 ~ 5회 반복수행 하여, 하기 화학식 1로 표시되는 화합물의 함량이 증가된 흑삼을 제조하는 단계; 및 (2) 흑삼을 추출하여 흑삼 추출물을 제조하는 단계;를 포함하는 항암성분의 함량이 증가된 흑삼 추출물 제조방법을 제공한다.
[화학식 1]
Figure 112018118844469-pat00001
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 제1증삼공정은 5 ~ 15분 동안 수행되며, 상기 제2증삼공정은 1회 수행시간이 1.5 ~ 5.5시간일 수 있다.
또한, 상기 (1) 단계 전에 인삼을 세척 및 건조하는 단계;를 더 포함할 수 있다.
또한, 상기 (2) 단계는 2-1) 흑삼 및 유기용매를 포함하는 혼합액을 30℃ ~ 50℃에서 20 ~ 28시간 동안 2 ~ 5회 반복 추출하는 단계; 및 2-2) 추출한 흑삼을 감압농축하여 흑삼 추출물을 제조하는 단계;를 포함할 수 있다.
또한, 상기 (2) 단계에서 추출은 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올인 유기용매를 통해 수행될 수 있다. 또한, 상기 유기용매는 농도 80% 이상의 메탄올일 수 있다.
또한, 상기 2-1) 단계의 혼합액은 흑삼 및 유기용매를 60 : 40 ~ 80 : 20의 중량비로 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 상술한 제조방법으로 제조된 흑삼 추출물을 분획하여 하기 화학식 1로 표시되는 화합물이 포함된 흑삼 추출물의 분획물을 제조하는 단계;를 포함하는 항암성분의 함량이 증가된 흑삼 추출분획물 제조방법을 제공한다.
[화학식 1]
Figure 112018118844469-pat00002
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 흑삼 추출물의 분획물은 에틸아세테이트 분획물일 수 있다.
한편, 본 발명은 상술한 제조방법으로 제조되며, 수분함량이 15% 이하인 흑삼 1g 당 하기 화학식 1로 표시되는 화합물이 0.10㎎ 이상 포함된 항암성분의 함량이 증가된 흑삼 추출물을 제공한다.
[화학식 1]
Figure 112018118844469-pat00003
또한, 본 발명은 하기 화학식1로 표시되는 화합물을 포함하는 상술한 제조방법을 통해 제조된 추출물, 또는 하기 화학식1로 표시되는 화합물을 포함하는 상술한 제조방법을 통해 제조된 분획물을 유효성분으로 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학조성물을 제공한다.
[화학식 1]
Figure 112018118844469-pat00004
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 암은 난소암, 피부암, 자궁암, 간암 및 대장암으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나일 수 있다.
또한, 본 발명은 하기 화학식1로 표시되는 화합물 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학조성물을 제공한다.
[화학식 1]
Figure 112018118844469-pat00005
또한, 본 발명은 하기 화학식1로 표시되는 화합물을 포함하는 상술한 제조방법을 통해 제조된 추출물, 또는 하기 화학식1로 표시되는 화합물을 포함하는 상술한 제조방법을 통해 제조된 분획물을 유효성분으로 포함하는 암 예방 또는 개선용 식품조성물을 제공한다.
이하, 본 발명에서 사용되는 용어에 대해 설명한다.
본 발명에 사용된 용어로서, 본 발명에서 용어, "예방"이란 조성물의 투여에 의해 암 발생을 억제시키거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 용어, "치료"란 조성물의 투여에 의해 암에 의한 증세가 호전되거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 흑삼 추출물 제조방법은 항암 작용이 매우 우수한 본 발명에 따른 화학식1로 표시되는 화합물의 함량을 현저히 증가시킬 수 있다. 이에 따라서 고함량의 항암성분이 포함된 흑삼 추출물의 수득이 가능하며, 이러한 흑삼 추출물은 항암 작용을 갖는 약학적 조성물 또는 식품 조성물의 유효성분으로서 유용하게 응용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 흑삼 에틸아세테이트 추출분획물에 대한 UPLC-QTOF/MS 수행 결과이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물의 농도에 따른 여러 암세포주의 암세포 독성 저해에 대한 그래프이다.
이하, 본 발명의 실시예에 대하여 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 상세히 설명한다. 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
본 발명의 일실시예에 따른 흑삼 추출물의 제조방법은, (1) 인삼을 55℃ ~ 75℃에서 열처리 하는 제1증삼공정과 상기 제1증삼공정 수행된 인삼을 85℃ ~ 105℃에서 열처리 하는 제2증삼공정을 포함하되 상기 제2증삼공정을 2 ~ 5회 반복수행함을 통하여 하기 화학식 1로 표시되는 화합물의 함량이 증가된 흑삼을 제조하는 단계, 및 (2) 흑삼을 추출하여 흑삼 추출물을 제조하는 단계를 포함한다.
[화학식 1]
Figure 112018118844469-pat00006
상기 (1) 단계는 인삼을 증삼시켜 흑삼을 제조하는 공정으로서, 제1증삼공정과, 상기 제1증삼공정 이후 2 ~ 5회 반복 수행되는 제2증삼공정을 포함한다.
상기 제1증삼공정은 인삼을 55 ~ 75℃로 열처리 하여 증삼 시키는 공정이며, 통상의 증삼공정에 이용되는 장치를 사용할 수 있고, 일예로 증숙기에서 수행될 수 있다.
상기 인삼은 제1증삼공정 전 세척 및 건조 공정을 더 수행한 것 일 수 있다. 상기 세척은 인삼의 표면에 묻은 흙, 비닐 등의 이물질을 완전히 제거할 수 있는 방법의 경우 제한이 없으며, 다만 세척 시 인삼 표면에 상처가 나지 않도록 세척하는 것이 바람직하다.
세척된 인삼은 이후 건조공정을 더 거칠 수 있고, 상기 건조공정은 30 ~ 40℃로 10 ~ 15시간 동안 수행되는 열풍건조 또는, 2 ~ 3일 동안 수행되는 자연건조일 수 있다.
이후, 건조된 인삼은 제1증삼공정에 투입되어 실온, 예를 들어 25℃에서 55℃ ~ 75℃까지 빠르게 승온된 뒤 해당 온도에서 5 ~ 15분 보다 바람직하게는　10 ~ 15분 동안 열처리될 수 있다. 이때, 승온속도는 40 ~ 60℃/분이 바람직하며, 상기 승온속도 보다 늦은 속도로 승온되는 경우 목적하는 항암성분의 현저한 함량 증가가 어려울 수 있는 등 본 발명의 목적을 달성하기 어려울 수 있다. 상기 제1증삼공정은 바람직하게는 빠르게 승온된 뒤 60℃ ~ 70℃에서 6 ~ 13분 동안 열처리될 수 있다. 만일 상기 제1증삼공정의 열처리의 온도 및/또는 시간 범위를 만족하지 못하면, 목적하는 항암성분, 특히 화학식1로 표시되는 화합물이 거의 생성되지 않거나, 생성되더라도 현저한 함량 증가가 어려울 수 있는 등 본 발명의 목적을 달성하기 어려울 수 있다.
상기 제1증삼공정을 수행한 뒤 제2증삼공정을 수행할 수 있는데, 바람직하게는 제2증삼공정 수행 전 건조공정을 더 거칠 수 있다. 상기 건조공정은 30 ~ 40℃의 건조기에서 20 ~ 30시간 동안 수행하는 것이 바람직하다.
제1증삼공정 후 건조공정을 거친 1차 증삼된 인삼은 제2증삼공정에 투입된다. 상기 제2증삼공정은 투입된 인삼을 실온, 예를들어 25℃에서 85℃ ~ 105℃까지 승온한 뒤 해당온도에서 1.5 ~ 5.5시간 동안 열처리되는 공정이며, 바람직하게는 90℃ ~ 100℃에서 2 ~ 5시간 동안 열처리될 수 있다. 만일 상기 제2증삼공정의 열처리의 온도 및/또는 시간 범위를 만족하지 못하면, 목적하는 항암성분, 특히 상술한 화학식1로 표시되는 화합물이 거의 생성되지 않거나, 생성되더라도 현저한 함량 증가가 어려울 수 있는 등 본 발명의 목적을 달성하기 어려울 수 있다. 한편, 제2증삼공정에서 승온속도는 15 ~ 20℃/분이 바람직하며, 상기 승온속도 보다 늦은 속도로 승온되는 경우 목적하는 항암성분의 현저한 함량 증가가 어려울 수 있는 등 본 발명의 목적을 달성하기 어려울 수 있다.
상기 제2증삼공정을 거친 2차 증삼된 인삼은 이후 2 ~ 6회, 바람직하게는 3 ~ 5회 제2증삼공정을 반복 수행하여 흑삼으로 제조될 수 있다. 만일 상기 제2증삼공정의 반복수행 횟수가 2회 미만이면 목적하는 항암성분, 특히 상술한 화학식1로 표시되는 화합물이 거의 생성되지 않거나, 생성되더라도 현저한 함량 증가가 어려울 수 있는 등 본 발명의 목적을 달성하기 어려울 수 있다.
한편, 1회의 제2증삼공정을 거친 뒤, 다음 회의 제2증삼공정에 다시 들어가기 전 건조공정을 더 거칠 수 있다. 상기 건조공정은 30 ~ 40℃의 건조기에서 20 ~ 30시간 동안 수행하는 것이 바람직하다.
또한, 최종 제2증삼공정이 수행된 이후에는 완전건조공정을 더 거칠 수 있고, 상기 완전건조는 40 ~ 60℃ 건조기에서 20 ~ 30시간, 30 ~ 40℃ 건조기에서 1 ~ 3일, 또는 수일 동안 자연건조 될 수 있다. 최종 완전건조공정을 거친 흑삼은 수분함량이 수분함량 15% 이하일 수 있다.
다음으로 본 발명에 따른 (2) 단계로서, 흑삼을 추출하여 흑삼 추출물을 제조하는 단계를 수행한다.
구체적으로 상기 (2) 단계는 2-1) 흑삼 및 유기용매를 포함하는 혼합액을 반복 추출하는 단계 및 2-2) 추출한 흑삼을 감압농축하여 흑삼 추출물을 제조하는 단계를 포함할 수 있다.
상기 2-1) 단계는 흑삼 및 유기용매를 포함하는 혼합액을 반복 추출하는 단계로써, 상기 혼합액을 30℃ ~ 50℃에서 20 ~ 28시간 동안 2 ~ 5회 반복 추출할 수 있고, 바람직하게는 40℃ ~ 50℃에서 22 ~ 26시간 동안 2 ~ 4회 반복 추출할 수 있다. 만일 상기 반복추출의 온도가 상기 범위를 만족하지 못하면 항암성분, 특히 상술한 화학식1로 표시되는 화합물이 현저한 함량으로 추출되기 어려울 수 있는 등 본 발명의 목적을 달성하기 어려울 수 있다.
한편, 상기 유기용매는 통상적으로 추출용매로 사용될 수 있는 물질이라면 제한 없이 사용할 수 있으며, 바람직하게는 탄소수 1 ~ 4개의 저급 알코올일 수 있고, 보다 바람직하게는 메탄올, 에탄올, 발효에탄올 중 선택된 1종 이상일 수 있으며, 보다 더 바람직하게는 메탄올을 사용할 수 있다. 상기 유기용매로 메탄올을 사용하는 경우 상기 유기용매는 농도 80% 이상의 메탄올일 수 있고, 바람직하게는 농도 85% 이상의 메탄올일 수 있으며, 보다 바람직하게는 농도 90% 이상의 메탄올 일 수 있다. 만일 상기 메탄올의 농도가 80% 미만이면 항암성분, 특히 상술한 화학식1로 표시되는 화합물이 현저한 함량으로 추출되기 어려울 수 있는 등 본 발명의 목적을 달성하기 어려울 수 있다.
또한, 상기 혼합액은 상기 흑삼 및 유기용매를 60 : 40 ~ 80 : 20의 중량비로, 바람직하게는 65 : 35 ~ 75 : 25의 중량비로 포함할 수 있다. 만일 상기 흑삼 및 유기용매의 중량비가 상기 범위를 벗어나면 항암성분, 특히 상술한 화학식1로 표시되는 화합물이 현저한 함량으로 추출되기 어려울 수 있는 등 본 발명의 목적을 달성하기 어려울 수 있다.
그리고, 상기 2-2) 단계는 흑삼을 감압농축하여 흑삼 추출물을 제조하는 단계로써, 상기 감압농축의 조건은 통상적으로 사용할 수 있는 감압농축의 조건이라면 제한 없이 사용할 수 있음에 따라, 본 발명에서는 이를 특별히 한정하지 않는다.
한편, 본 발명은 상술한 제조방법으로 제조되는 수분함량이 15% 이하인 흑삼 1g 당 하기 화학식 1로 표시되는 화합물이 0.10㎎ 이상 포함된 항암성분의 함량이 증가된 흑삼 추출물을 포함한다.
[화학식 1]
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종래의 구증구포 등 인삼을 증삼시키는 다른 방법에 대비해 상기 화학식 1로 표시되는 화합물이 현저히 높은 함량으로 포함되고, 구체적으로 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 수분함량이 15% 이하인 흑삼 1g 당 하기 화학식 1로 표시되는 화합물이 0.10㎎ 이상, 바람직하게는 0.15㎎ 이상, 보다 바람직하게는 0.20㎎ 이상 포함됨에 따라서 본 발명에 따른 흑삼 추출물은 항암용 조성물의 유효성분으로 매우 유용할 수 있다.
한편, 상술한 제조방법으로 제조된 흑삼 추출물은 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 항암성분을 분리하기 위한 분획공정을 더 거칠 수 있으며, 이를 통해 화학식 1로 표시되는 화합물이 포함된 흑삼 추출물의 분획물을 제조할 수 있다. 상기 흑삼 추출물의 분획물 즉, 흑삼 추출분획물은 바람직하게는 에틸 아세테이트 분획물 일 수 있다.
이하, 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 에틸아세테이트 분획물을 제조하는 방법에 대해 구체적으로 설명하면, 상술한 방법으로 수득된 흑삼추출물을 흑삼추출물 1kg 당 에틸아세테이트(1.5 ~ 2.5L) / 물(1.5 ~ 2.5L)의 분획용매를 통해 3 ~ 5회 분배 추출하고, 이후 다시 물층을 n-부탄올(1.5 ~ 2.5L)을 통해 1 ~ 3회 분획 후 감압농축하여 에틸아세테이트 분획물, 물 분획물 및 n-부탄올 분획물을 수득할 수 있다.
한편, 수득된 에틸아세테이트 흑삼 추출분획물 역시 추출 전 수분함량이 15% 이하인 흑삼 1g을 기준으로 하기 화학식 1로 표시되는 화합물이 0.10 ㎎ 이상, 바람직하게는 0.15㎎ 이상, 보다 바람직하게는 0.2㎎ 이상 포함될 수 있음에 따라서 본 발명에 따른 흑삼 추출분획물은 항암용 조성물의 유효성분으로 매우 유용할 수 있다.
또한, 본 발명은 상술한 방법들을 통해 제조된, 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 흑삼 추출물이나 흑삼 추출분획물을 유효성분으로 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학조성물을 포함한다.
화학식 1로 표시되는 화합물은 암, 특히 난소암, 피부암, 자궁암, 간암 및 대장암으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 암일 수 있고, 보다 바람직하게는 피부암, 난소암, 대장암 중 어느 하나의 암에 대한 예방 또는 치료효과가 더욱 우수할 수 있다.
또한, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 20 ~ 100μM의 농도로 구비될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
한편, 본 발명은 화학식1로 표시되는 화합물 또는 이의 염을 유효성분으로 포함시켜 암 예방 또는 치료용 약학조성물을 구현할 수 있다. 상기 화학식 화학식 1로 표시되는 화합물은 상술한 흑삼 추출물 또는 흑삼 추출분획물에서 분리된 것일 수 있다. 구체적으로 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 분리하는 방법에 대해 설명하면, 상기 분리는 통상적인 분리방법이라면 제한 없이 사용할 수 있으며, 바람직하게는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 및 옥타데실실레인(ODS)화된 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 방법으로 수행할 수 있고, 보다 바람직하게는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 및 옥타데실실레인(ODS)화된 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 일련의 공정으로 수행할 수 있다. 또한, 상기 제조방법은 상기 분리하는 단계 뒤에 분리한 분리물을 정제하는 단계를 더 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상술한 방법을 통해 분리, 정제된 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 약학적으로 허용가능한 염의 형태로 포함될 수 있다. 상기 염으로는 약학적으로 허용 가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산 부가염이 유용하다. 산 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요드화수소산, 아질산 또는 아인산과 같은 무기산류와 지방족 모노 및 디카르복실레이트, 페닐-치환된 알카노에이트, 하이드록시 알카노에이트 및 알칸디오에이트, 방향족 산류, 지방족 및 방향족 설폰산류와 같은 무독성 유기산으로부터 얻는다. 이러한 약학적으로 무독한 염류로는 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트, 니트레이트, 포스페이트, 모노하이드로겐 포스페이트, 디하이드로겐 포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 플루오라이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 석시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥산-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로 벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 벤젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, β-하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트 또는 만델레이트를 포함할 수 있다.
또한, 상기 산 부가염은 통상의 방법, 예를 들면, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 과량의 산 수용액 중에 용해시키고, 이염을 수혼화성 유기 용매, 예를 들면 메탄올, 에탄올, 아세톤 또는 아세토니트릴을 사용하여 침전시켜서 제조할 수 있다.
또한, 본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 염기를 사용하여 약학적으로 허용 가능한 금속염의 형태로 만들어 사용할 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염은 예를 들면 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물 염을 여과하고, 여액을 증발, 건조시켜 얻을 수 있다. 이때, 금속 염으로는 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하다. 또한, 이에 대응하는 은 염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 은염(예, 질산은)과 반응시켜 얻을 수 있다.
또한, 본 발명의 일 실시예에 의한 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 상기 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다.
제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테로 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
또한, 약학적 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여될 수 있다. 발명에서 용어 "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 암을 예방하기 위한 목적인지, 또는 암을 치료하는 목적인지, 그리고 암을 치료하는 목적일 경우 암 발생 정도, 원인, 연령, 성별, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 일 실시예에 의한 약학적 조성물은 1일 0.0001 내지 100mg/kg으로, 바람직하게는 0.001 내지 100mg/kg으로 투여하는 것이 좋으며, 화학식 1로 표시되는 화합물은 1일 0.0001 내지 100mg/kg으로, 바람직하게는 0.001 내지 10mg/kg으로 투여하는 것이 좋다. 본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
또한, 본 발명의 일 실시예에 의한 약학적 조성물은 당업계에 알려진 여러 방법으로 투여될 수 있으며, 일예로 복강내 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 경구투여, 비내 투여, 폐내 투여, 직장내 투여될 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
다음으로, 본 발명은 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 상술한 제조방법으로 제조된 흑삼추출물 또는 추출분획물을 유효성분으로 포함하는 암 예방 및 개선용 식품조성물을 포함한다.
즉, 암 예방 및 개선을 목적으로 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 상술한 제조방법으로 제조된 흑삼추출물 또는 추출분획물을 식품조성물에 첨가할 수 있다.
이 경우, 상기 추출물, 분획물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조 시에 본 발명의 추출물 또는 이의 분획물은 원료 조성물 중 0.01 ~ 10 중량%, 바람직하게는 0.1 ~ 3중량%의 양으로 첨가될 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니며, 섭취기간 등을 고려하여 변경하여 첨가될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
또한, 건강음료 조성물일 경우 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니며, 기호에 따라 적절히 변경될 수 있다.
또한, 기타 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수도 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 전체 조성물 중량을 기준으로 0.01 ~ 0.1 중량%의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다. 그밖에 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 과육의 비율은 크게 중요하진 않지만 전체 조성물 중량을 기준으로 0.01 ~ 10 중량%의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다. 이들 성분들은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
하기의 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하기로 하지만, 하기 실시예가 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니며, 이는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것으로 해석되어야 할 것이다.
<실시예 1>
(1) 흑삼추출물의 제조
6년생의 인삼을 수세 및 35℃에서 12시간 열풍건조하고, 증숙기에 투입하여 실온에서 승온속도 50℃/분으로 65℃까지 승온한 뒤, 65℃에서 10분 동안 제1증삼공정을 수행하고, 이후 35℃ 건조기에서 1일간 건조 후 증숙기에 투입하여 실온에서 승온속도 18℃/분으로 94℃까지 승온한 뒤, 94℃에서 3.5시간 동안 제2 증삼공정을 수행하였고, 이후 35℃ 건조기에서 1일간 다시 건조하였다. 건조된 증삼 인삼을 상기 제2증삼공정과 동일조건으로 3회 반복하여 총 4회 제2증삼공정을 수행했고, 반복되는 제2증삼공정 사이에는 35℃ 건조기에서 1일간 건조하는 건조공정을 거쳤다. 최종 제2증삼공정 후 수분율 15%가 되도록 50℃ 건조기에서 1일간 완전건조공정을 거쳐 최종 흑삼을 제조하였다.
이후 제조한 흑삼을 농도 100%의 메탄올과 70: 30의 중량비로 혼합한 혼합액을 35℃에서 24시간 동안 3회 반복추출하고, 온도 45℃에서 45 psi의 압력으로 5 시간 동안 감압농축을 수행하여 흑삼 추출물을 제조하였다.
(2) 흑삼 추출물로부터 화학식 1로 표시되는 화합물의 분리, 정제
수득된 흑삼추출물을 TLC(thin layer chromatography)를 사용하여 비교한 후 추출물을 합쳐 총 1.5kg의 농축물을 얻었다. 농축된 추출물을 EtOAc(3 L) / H2O(3L)로 3회 분배 추출하였고, 다시 H2O층을 n-BuOH(2.7 L)로 3회 분배 추출하였다. 각층을 감압 농축하여, EtOAc 분획물과 n-BuOH 분획물 및 H2O분획물을 얻었다.
수득한 에틸 아세테이트 분배추출물 50g을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(SiO2columnchromatography,이하 'SiO2c.c.'로 표기)(Φ14 ×16 ㎝, CHCl3-MeOH-H2O=15:3:1)→ CHCl3-MeOH-H2O=7:3:1)를 실시하여 100 ㎖씩 분취하여 분취액을 수득하였다. 상기 분취액을 TLC(CHCl3-MeOH-H2O=9:3:1)로 확인하여, 유사한 부분을 함께 모으고, 감압농축기를 사용하여 농축하여 10개의 분획물(BGE1 내지 BGE10)을 수득하였다.
이후, 상기 10개의 분획물을 이용하여 화합물을 분리 정제하였다.
상기 10개 분획물 중 7번째 분획물(BGE7, 3.30 g)에 대하여 ODS 컬럼 크로마토그래피(Φ 3×10㎝, MeOH-H2O=4:1)을 실시하여 총 8개의 분획물(BGE7-1 내지 BGE7-8)을 수득하였으며, BGE7-5 분획에 대하여(400 mg), prep LC를 이용하여, 약 100 mg씩 1 ml의 용매에 녹여 주입하였고, CH2Cl2-MeOH(5:1)의 비율로 분당 1.5ml의 유속으로 흘려주었다. 이때 사용된 검출기(Detector)는 굴절률검출기(Refractive Index Detector)를 사용했으며, 검출기에 나오는 signal을 확인하면서 회수를 하였으며, 위의 과정을 반복적으로 진행하여 같은 분획을 모은 뒤 TLC로 확인을 하여 최종적으로 하기 화학식 1로 표시되는 화합물을 추출 전 수분함량 15%인 흑삼 1g을 기준으로 0.21㎎(에틸아세테이트 분획물 1g 기준 25 ㎎) 분리하였다.
[화학식 1]
Figure 112018118844469-pat00008
<비교예 1 ~ 2>
실시예1과 동일하게 실시하여 제조하되, 시중에서 구입한 구증구포의 흑삼을 사용하였다. 구체적으로 비교예1은 천일고려인삼, 비교예2는 대동인삼을 구입하여 사용하였다.
<실험예 1>
(1) 실험예 1-1. UPLC 분석 조건 확립
Waters ACQUITY UPLCTM system (Waters Corp., MA, USA)을 이용해 수행하였다. Thermo Hypersil Gold(2.1 X 100 mm 1.9 um) 컬럼 (column)을 사용하고 이동상으로는 0.1% 포름산 (formic acid)이 첨가된 물 (A)과 0.1% 포름산 (formic acid)이 첨가된 아세토니트릴 (acetonitrile; B)을 사용하였다. 컬럼 오븐을 40℃로 유지시켰고, 이동상을 용매 A(물 중 0.1% 포름산, v/v) 및 용매 B(아세토니트릴 중 0.1% 포름산, v/v)로 구성하였다. 최적 LC 용리 조건을 하기와 같이 적용하였다: 0-0.5 분, 15-15% B; 0.5-1 분, 15-20% B; 1-6 분, 20-20% B; 6-13 분, 20-30% B; 13-23 분, 30-35% B; 23-24 분, 35-38% B; 24-27 분, 38-60% B, 및 27-31 분, 60-90% B. 유동률은 0.5 mL/분이었다. 2 μ분액을 자동-샘플러를 사용하여 컬럼에 주입시켰다.
(2) 실험예 1-2. Q-TOF/MS 조건 확립
Q-TOF Micro mass detector (Waters, Manchester, UK)를 사용해 네거티브 (negative) 와 포지티브 모드(positive mode)에서 각각 흑삼의 대사체 분석을 위한 최적의 조건을 확립하였다. 비교 결과, 음이온 전자분무 방식 (Negative mode)에서 다양한 대사체가 효과적으로 분석됐으며, 분석조건은 다음과 같다; capillary voltage 3000, cone voltage 40, collision energy 6, desolvation temperature 550℃, source temperature 120℃, cone gas flow 30 L/h, desolvation gas flow 800 L/h. 전구체 이온 정보는 100 및 2,000 m/z 사이에서 데이터를 수집하였다.
상기의 방법으로 실시예 1, 비교예 1 및 비교예 2의 시료의 성분 분석을 하였다(도 1, 표 1). 이때 실시예1, 비교예1 및 비교예2의 시료 성분은 에틸아세테이트 분획물을 시료로 하여 분석하였다.
화학식 1로 표시되는 화합물 관측된 시간(min) 화학식 1로 표시되는 화합물 함량(㎎/g)
실시예1 비교예1 비교예2
26.38 0.21 0.057 0.06
도 1은 UPLC-QTOF/MS를 한 결과이고, 표 1는 이를 정량화한 결과이다. 표 1에서 확인할 수 있듯이 본 발명의 제조방법을 통해 제조된 흑삼에 화학식 1로 표시된 화합물의 함량이 현저히 증가했다는 사실을 알 수 있었다
<실험예 2>
실시예1을 통해 분리, 정제된 화학식 1로 표시되는 화합물의 암 예방, 치료 효과를 확인하기 위하여 하기 표 2와 같은 여러 종류의 암세포 세포주를 이용해 암세포 독성평가(Cytotoxicity assay)를 수행했다. 구체적으로 10% FBS(fetal bovine serum), 100 mg/mL의 스트렙토마이신-페니실린(streptomycin-penicillin) 및 200 nM의 TPA(12-ο-tetradecanoylphorbol-13-acetate)가 포함된 RPMI-1640 배지를 구비한 94-웰 플레이트에 표 2의 암세포주를 각각 세포 1×105개 분주하여 24시간 배양했다. 이후 실시예1을 통해 분리, 정제된 화학식 1로 표시되는 화합물을 0.1% DMSO 용매에 용해시켜 농도별로 처리 후 24시간 배양했다. 이후 MTT solution (5mg/ml)을 20㎕ 처리한 뒤, 1시간 동안 CO2incubator에서 배양한 뒤 ELISA reader에서 450 nm에서 흡광도를 측정하여 암세포 독성 정도를 확인하되, 암세포 독성을 50% 저하하는 농도를 암세포 별로 하기 표 2 및 도 2에 나타내었다.
암 세포주 IC50(μM)
SK-OV-3(Human Caucasian ovary adenocarcinoma, 난소암) 30.364
HepG2(Human hepatocellular carcinoma, 간암) 42.102
Hela(Human cervix epitheloid carcinoma, 자궁암) 47.3
HCT-116(Human colorectal carcinoma, 대장암) 28.751
SK-MEL-5(Human melanoma cell line, 피부암) 25.992
상기 표 2를 통해 확인할 수 있듯이, 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물은 난소암, 간암, 자궁암, 대장암 및 피부암에 대해서 아주 낮은 농도에서 암세포 독성을 50% 저해할 수 있음을 확인할 수 있고, 이를 통해 해당 암들에 대해 항암효과가 우수함을 알 수 있었다.
<실시예 2 ~ 7 및 비교예 3 ~ 7>
실시예 1과 동일하게 실시하되, 제1증삼공정의 유무, 제1증삼공정과 제2증삼공정의 온도조건 등을 하기 표 3과 같이 변경하여 흑삼을 제조하였고, 제조된 흑삼에서 하기 표 3과 같이 화학식1로 표시되는 화합물을 분리하였다.
구분 실시예1 실시예2 실시예3 실시예4 실시예5 실시예6 실시예7
제1증삼공정 온도(℃) 65 65 65 65 65 65 65
시간(min) 10 3 5 15 17 10 10
제2증삼공정 온도(℃) 94 94 94 94 94 94 94
시간(hr) 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5
반복횟수
(회)		 4 4 4 4 4 3 5
화학식 1로 표시되는 화합물(mg/g) 0.21 0.12 0.17 0.19 0.12 0.20 0.19
구분 비교예3 비교예4 비교예5 비교예6 비교예7
제1증삼공정 온도(℃) 50 80 65 65 미수행
시간(min) 10 10 10 10
제2증삼공정 온도(℃) 94 94 94 94 94
시간(hr) 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5
반복횟수
(회)		 4 4 1 7 4
화학식 1로 표시되는 화합물 (mg/g) 0.10 0.08 0.08 0.13 0.06
상기 표 3 내지 표 4에서 알 수 있듯이,
본 발명의 제1증삼공정의 온도를 불만족한 비교예 3 및 4는 실시예 1에 대비해 화학식 1로 표시되는 화합물의 함량이 크게 저하된 것을 확인할 수 있고, 제1증삼공정을 실시하지 않은 비교예 7의 경우 더욱 함량이 낮게 생성된 것을 확인할 수 있다.
또한, 제2증삼공정의 횟수가 본 발명의 바람직한 범위 내인 실시예1, 6 및 7은 비교예 5 및 6에 대비해 화학식 1로 표시되는 화합물의 함량이 크게 증가한 것을 확인할 수 있다.
[제조예 1] - 의약품
실시예 1의 제조과정 중 흑삼 에틸아세테이트 분획물 50 mg, 결정셀룰로오즈 400 mg, 스테아린산 마그네슘 5mg을 혼합한 후 통상의 정제 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
[제조예 2] - 식품
실시예 1의 제조과정 중 흑삼 에틸아세테이트 분획물 1000 mg, 비타민 A 아세테이트 70 ㎍, 비타민 E 1.0mg, 비타민 B1 0.13 mg, 비타민 B2 0.15 mg, 비타민 B6 0.5 mg, 비타민 B12 0.2 ㎍, 비타민 C 10 mg, 비오틴 10 ㎍, 니코틴산아미드 1.7 mg, 엽산 50 ug, 판토텐산 칼슘 0.5 mg, 황산제1철 1.75 mg, 산화아연 0.82 mg, 탄산마그네슘 25.3 mg, 제1인산칼륨 15 mg, 제2인산칼슘 55 mg, 구연산칼륨 90 mg, 탄산칼슘 100 mg, 염화마그네슘 24.8 mg를 혼합하여 제조할 수 있으며, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조였다.
이상에서 본 발명의 일 실시예에 대하여 설명하였으나, 본 발명의 사상은 본 명세서에 제시되는 실시 예에 제한되지 아니하며, 본 발명의 사상을 이해하는 당업자는 동일한 사상의 범위 내에서, 구성요소의 부가, 변경, 삭제, 추가 등에 의해서 다른 실시 예를 용이하게 제안할 수 있을 것이나, 이 또한 본 발명의 사상범위 내에 든다고 할 것이다.

Claims (11)

  1. (1) 인삼을 55℃ ~ 75℃에서 열처리 하는 제1증삼공정과 상기 제1증삼공정 수행된 인삼을 85℃ ~ 105℃에서 열처리 하는 제2증삼공정을 포함하되 상기 제2증삼공정을 2 ~ 5회 반복수행 하여, 하기 화학식 1로 표시되는 화합물의 함량이 증가된 흑삼을 제조하는 단계; 및
    (2) 흑삼을 추출하여 흑삼 추출물을 제조하는 단계;를 포함하는 항암성분의 함량이 증가된 흑삼 추출물 제조방법.
    [화학식 1]
    Figure 112018118844469-pat00009
  2. 제1항에 있어서,
    상기 제1증삼공정은 5 ~ 15분 동안 수행되며, 상기 제2증삼공정은 1회 수행시간이 1.5 ~ 5.5시간인 것을 특징으로 하는 항암성분의 함량이 증가된 흑삼 추출물 제조방법.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 (1) 단계 전에 인삼을 세척 및 건조하는 단계;를 더 포함하는 항암성분의 함량이 증가된 흑삼 추출물 제조방법.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 (2) 단계에서 추출은 흑삼을 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올을 통해 수행되는 것을 특징으로 하는 항암성분의 함량이 증가된 흑삼 추출물 제조방법.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따라 제조된 흑삼 추출물을 분획하여 하기 화학식 1로 표시되는 화합물이 포함된 흑삼 추출물의 분획물을 제조하는 단계;를 포함하는 항암성분의 함량이 증가된 흑삼 추출분획물 제조방법.
    [화학식 1]
    Figure 112018118844469-pat00010
  6. 제5항에 있어서,
    상기 흑삼 추출물의 분획물은 에틸아세테이트 분획물인 것을 특징으로 하는 항암성분의 함량이 증가된 흑삼 추출분획물 제조방법.
  7. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따라서 제조되며, 수분함량이 15% 이하인 흑삼 1g 당 하기 화학식 1로 표시되는 화합물이 0.10㎎ 이상 포함된 항암성분의 함량이 증가된 흑삼 추출물.
    [화학식 1]
    Figure 112018118844469-pat00011
  8. 하기 화학식1로 표시되는 화합물을 포함하는 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따라서 제조된 추출물, 또는 하기 화학식1로 표시되는 화합물을 포함하는 제5항에 따라 제조된 분획물을 유효성분으로 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학조성물.
    [화학식 1]
    Figure 112018118844469-pat00012
  9. 제8항에 있어서,
    상기 암은 난소암, 피부암, 자궁암, 간암 및 대장암으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 암 예방 또는 치료용 약학조성물.
  10. 삭제
  11. 하기 화학식1로 표시되는 화합물을 포함하는 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따라서 제조된 추출물, 또는 하기 화학식1로 표시되는 화합물을 포함하는 제5항에 따라 제조된 분획물을 유효성분으로 포함하는 암 예방 또는 개선용 식품조성물.
    [화학식 1]
    Figure 112018118844469-pat00014
KR1020180149483A 2018-11-28 2018-11-28 항암성분인 진세노사이드 Mc 함량이 증가된 흑삼 추출물, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암용 조성물 KR102150116B1 (ko)

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