KR102128974B1 - 여주, 감나무잎 및 비단풀의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 대한 피부 보호용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 여주, 감나무잎 및 비단풀의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 대한 피부 보호용 화장료 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 복합추출물은 피부에 자극을 일으키지 않으면서 자외선 조사에 따른 피부 손상을 효과적으로 억제할 수 있어 자외선으로부터 피부를 보호하고 자외선에 의한 손상된 피부의 회복에 도움을 줄 수 있는 새로운 기능성 화장품의 소재로 사용될 수 있다.

Description

여주, 감나무잎 및 비단풀의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 대한 피부 보호용 화장료 조성물{Cosmetic composition for protecting skin from UV which comprises extract of bitter ground, persimmon leaf and ceramium kondoi}

본 발명은 여주, 감나무잎 및 비단풀의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 대한 피부 보호용 화장료 조성물에 관한 것이다.

태양광으로부터 조사되는 자외선은 피부에 홍반이나 부종, 주근깨, 피부암 등을 일으키는 주요 원인이 되고 있다. 일반적으로 자외선은 그 파장에 따라 자외선 A(320∼400nm), 자외선 B(280∼320nm) 및 자외선 C(240∼280nm)로 분류된다. 상기 자외선 A는 장파장·저에너지를 특징으로 하며 피부의 진피까지 침투하여 피부암과 주름, 멜라닌 형성을 촉진하는 등 피부 노화 및 피부 자극을 유발하는 것으로 알려져 있으나, 에너지의 강도가 높지 않다. 자외선 B는 단파장·고에너지를 특징으로 하며 자외선 중 광 생물학적으로 인체에 가장 영향을 많이 미치며 피부에 광 손상을 일으키는 주원인이다. 상기 자외선 B는 에너지의 강도가 높기 때문에 피부의 표피까지 침투하여 홍반, 주근깨 및 부종 등을 일으킨다. 또한, 상기 자외선 B에 만성적으로 노출되면 피부 노화, 면역 억제, 피부암 및 세포사멸의 결과를 초래한다. 자외선 C는 오존층을 통과하면서 지표면에 도달하지 못하고 소실된다.

최근에는 이러한 자외선에 의한 피부 손상을 억제하기 위하여 자외선의 침투 자체를 차단하여 세포를 보호하는 자외선 차단제나 자외선에 의한 세포내 활성산소종의 생성을 억제하는 항산화 기능을 가진 성분들을 이용한 화장료 조성물에 대한 개발이 활발히 이루어지고 있다.

그러나 개발된 대다수의 자외선에 의한 피부 보호제는 합성 화합물을 유효성분으로 하고 있어 피부에 손상을 유발시키거나 가려움 및 반점 등 부작용이 발생하고 있어, 피부 부작용에 없으면서 자외선에 의한 피부 보호 활성이 우수한 새로운 천연물 소재의 개발이 필요하다.

대한민국 공개특허 제10-2010-0042181호

이에 본 발명자들은 천연물인 여주, 감나무잎 및 비단풀의 복합추출물이 피부 세포에 유해하지 않으면서 자외선으로부터 효과적으로 피부 세포를 보호하는 활성이 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서 본 발명의 목적은 본 발명은 여주 추출물, 감나무잎 추출물 및 비단풀 추출물의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는, 자외선에 대한 피부 보호용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위해서, 본 발명은 여주 추출물, 감나무잎 추출물 및 비단풀 추출물의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는, 자외선에 대한 피부 보호용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 추출물은 물 또는 탄소수 5 이하의 저급 알코올을 이용하여 수득한 추출물일 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 추출물은 에탄올 추출물일 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 복합추출물은 여주 추출물, 감나무잎 추출물 및 비단풀 추출물이 1:1:1~1:2:2의 중량비로 혼합된 추출물일 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 자외선은 자외선 B일 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션, 프레스파우더 및 루스파우더로 이루어진 군으로부터 선택된 1종으로 제형화 되는 것일 수 있다.

본 발명은 여주, 감나무잎 및 비단풀의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 대한 피부 보호용 화장료 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 복합추출물은 피부에 자극을 일으키지 않으면서 자외선 조사에 따른 피부 손상을 효과적으로 억제할 수 있어 자외선으로부터 피부를 보호하기 위한 새로운 기능성 화장품의 소재로 사용될 수 있다.

도 1은 본 발명에 따른 여주, 감나무잎 및 비단풀의 복합추출물에 대한 농도별 HaCaT 세포의 생존율을 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 HaCaT 세포주를 대상으로 본 발명의 복합추출물 처리 농도에 따른 UV-B 조사에 대한 세포 보호 활성을 분석한 결과이다.
도 3은 HaCaT 세포주를 대상으로 본 발명의 복합추출물 처리 농도에 따른 UV-B 조사로 인해 발생한 ROS의 생성 억제 정도를 분석한 결과를 나타낸 것이다.

본 발명자들은 피부에 자극을 주지 않으면서 자외선으로부터의 피부 손상을 효과적으로 억제하여 피부 보호 효과를 갖는 새로운 화장품 소재를 연구하던 중, 여주, 감나무잎 및 비단풀의 복합추출물이 이러한 기능을 갖고 있음을 확인하였다.

따라서 본 발명은 여주, 감나무잎 및 비단풀의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 대한 피부 보호용 화장료 조성물을 제공함에 특징이 있다.

자외선은 활성 산소종, 프리 라디칼 및 피부세포 손상을 촉진하는 다양한 세포 내 신호전달 분자의 생성을 유도함으로써 피부의 광노화, 색소 침착 및 홍반과 같은 다양한 피부손상을 유발한다. 자외선에 의해 활성 산소종이 과다하게 생성되는 경우, 세포 내의 단백질, 핵산 및 지방과 같은 생체고분자가 손상을 입게 되며, 특히 자외선에 의해 과다 생성된 활성 산소종은 피부노화의 주 원인으로 알려져 있다. 또한, 피부에 자외선을 조사하면 피부세포 손상을 촉진하는 세포내 신호전달 분자의 생성이 유도된다. 상기 세포내 신호전달 분자로는 NF-kB, COX-2 및 인산화된 IκBα등이 있다.

본 발명자들은 우선 여주, 감나무잎 및 비단풀이 혼합된 복합추출물이 자외선으로부터 피부를 보호하는 활성이 있는지 확인하기 위해, 여주, 감나무잎 및 비단풀 추출물이 혼합된 복합추출물을 제조하고, 피부 세포주에 처리한 후, 자외선을 조사하여 피부 세포 손상 억제 정도를 분석하였다.

그 결과, 여주 추출물, 감나무잎 추출물 및 비단풀 추출물을 단독 처리한 군에 비해, 이들의 복합 추출물이 자외선 조사에 따른 피부 세포의 세포사멸을 효과적으로 억제할 수 있음을 확인하였다.

또한, 자외선에 의해 생성되는 피부 손상의 원인 물질인 활성산소종(ROS)의 생성 억제 효과를 분석한 결과, 상기 추출물 단독에 비해 복합 추출물이 더 우수하게 자외선에 의해 피부 세포에서 생성되는 활성산소종(ROS)의 생성을 효과적으로 억제하는 것으로 나타났다.

그러므로 본 발명자들은 이들 본 발명의 여주 추출물, 감나무잎 추출물 및 비단풀 추출물의 복합추출물을 자외선 조사에 대한 피부 세포 보호용 화장료 조성물의 제조에 사용할 수 있음을 알 수 있었다.

따라서 본 발명은 여주 추출물, 감나무잎 추출물 및 비단풀 추출물의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는, 자외선에 대한 피부 보호용 화장료 조성물을 제공할 수 있다.

여주(bitter gourd; bitter melon; Momordica charantia L.)는 아시아에서 널리 재배되는 박과의 다년생 덩굴 식물로서 쓴 맛의 멜론이라는 뜻으로 중국에서는 고과(苦瓜), 일본에서는 고야로, 한국에서는 여주, 여자, 여지 등으로 불리고 있다. 여주는 항암효과와 말라리아 치료, 체중 감소, 소화 촉진 기능을 가지고 있어 한방의 재료로 쓰이고 있으며 당뇨병의 치료에도 사용될 수 있는 것으로 알려져 있어 의학계에서도 관심이 높아지고 있는 식물성 채소이다. 그러나 아직까지 여주가 자외선에 의한 피부 세포를 보호하는 활성에 대한 연구는 보고된 바가 없다.

또한, 감나무는 우리나라 중부 이남 지방에 주로 분포되어 있으며 생식하는 시자 이외에도 시엽, 시화, 시체 등은 예로부터 민간요법으로 사용되어 왔다. 그 중에서도 특히 감잎은 주로 차로 이용되어 동의보감에 혈관질환의 예방, 치료와 함께 자반증(혈관염증)에도 효과가 있다고 기록되어 있다. 또한, 감잎에는 비타민 C,아미노산, 핵산, 페놀성 화합물, 유리당 등 여러 물질들이 다양하게 함유되어 있어 우수한 항균성이 있고, 감기 및 성인병 예방의 약리작용 효과가 있는 것으로 보고되고 있다. 또한, 항알레르기, 충치예방, 심장질환 및 당뇨병 예방에도 효과가 있는 것으로 밝혀지면서 감나무잎에 대한 다양한 기능성 소재에 대한 연구가 활발히 진행 중에 있다. 그러나 아직까지 감나무잎에 대해 자외선으로부터 피부세포를 보호하는 활성이 있다는 내용은 보고된 바가 없다.

또한, 비단풀은 대극과에 딸린 한해살이 풀로서 우리나라와 중국, 일본, 동남아시아, 남북미 등 온대와 열대지방에 널리 분포하는 야생 잡초이며, 모양은 쇠비름과 비슷하지만 쇠비름보다 훨씬 작고, 풀밭이나 마당, 길바닥에 더러 자라지만 작아서 별로 눈에 띄지 않는다. 줄기는 땅바닥을 기면서 자라고 줄기나 잎에 상처를 내면 흰 즙이 제법 많이 나온다. 밑동에서부터 많은 가지가 갈라져서 땅을 덮으면 줄기에 털이 약간 있고, 가지는 보통 두 개씩 갈라지고 붉은빛이 돈다. 비단풀은 바이러스성 피부질환의 치료에 효과가 있고 숙취 해소에 도움을 줄 수 있다는 내용이 알려져 있을 뿐, 아직까지 그 기능에 대한 연구가 미비한 실정이다.

한편, 본 발명은 이러한 천연소재 즉, 여주, 감나무잎 및 비단풀의 복합추출물이 자외선에 대한 피부 보호 효과가 우수함을 확인하였고 이들을 기능성 화장품 소재의 원료로 사용할 수 있음을 규명하였다.

태양광에 포함된 자외선은 피부에 직접적으로 과도하게 조사되면, 홍반 형성이나 피부세포 내의 멜라닌색소 생성을 촉진시켜 기미나 잡티 발생의 원인이 되기도 하며, 표피에 분비되는 피지와 반응하여 과산화지질을 생성함으로써 피부트러블을 발생시키기도 하고, 심할 경우 피부암 발생의 원인이 되기도 한다. 자외선은 파장에 따라 UV-A (320~400 nm), UV-B (280~320 nm), UV-C (200~280 nm)로 구분되며, 이 중 지표에 도달하여 인체에 영향을 주는 자외선은 UV-A 및 UV-B로 알려져 있다. 또한, UVB 노출은 피부 내에서 자유라디칼(free radical) 형성과 활성산소종(reactive oxygen species; ROS)의 발생을 증가시키고, DNA, 세포막 및 단백질 등 세포성분들에 대한 산화적 스트레스를 유발시켜 피부노화를 일으키는 것으로 알려져 있다. 이러한 이유로, 최근 천연 항산화제의 UVB로 유도된 피부 손상을 막기 위한 다양한 연구가 진행 중이다.

이러한 점에서 본 발명에서 제공하는 복합추출물은 자외선 조사로 인한 피부세포 내에서의 자유라디칼 생성을 효과적으로 억제할 수 있고, 활성산소종의 생성을 억제할 수 있음을 하기 실시예들의 실험들을 통해 확인하였다.

뿐만 아니라 본 발명의 일실시예에서는 본 발명의 복합추출물이 피부 세포에 대한 안정성이 있는 확인하기 위해, 피부 각질세포주를 대상으로 복합추출물을 농도별로 처리하고 MTT 분석을 통해 세포사멸 정도를 측정한 결과, 피부세포주의 세포생존율에는 아무런 영향을 주지 않음을 알 수 있었다.

따라서 본 발명의 복합추출물은 피부 세포에 독성을 나타내지 않기에 피부에 적용하는 화장품의 제조에 안심하고 사용할 수 있다.

또한, 본 발명은 여주 추출물, 감나무잎 추출물 및 비단풀 추출물의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선 차단용 화장료 조성물을 제공할 수 있으며, 상기 조성물은 자외선으로부터 피부를 보호하는 기능을 가질 수 있다.

본 발명에 따른 상기 여주 추출물, 감나무잎 추출물 및 비단풀 추출물의 복합추출물은 당업계에 공지된 추출 및 분리하는 방법을 사용하여 천연으로부터 추출 및 분리하여 수득한 것을 사용할 수 있으며, 본 발명에서 정의된‘추출물’은 적절한 용매를 이용하여 여주, 감나무잎, 비단풀로부터 추출한 것이며, 예를 들어, 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성용매 가용 추출물을 모두 포함한다.

상기 추출물을 추출하기 위한 적절한 용매로는 물 또는 유기용매, 바람직하게는 물 또는 탄소수 5 이하의 저급 알코올을 사용할 수 있으며, 이에 제한되지는 않으나, 예를 들어, 정제수, 메탄올 (methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol) 등을 포함하는 탄소수 1 내지 4의 알코올, 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane) 및 시클로헥산(cyclohexane) 등의 각종 용매를 단독으로 혹은 혼합하여 사용할 수 있다. 더욱 바람직하게는 에탄올을 사용할 수 있다.

상기 기술된 바와 같은 다양한 유기용매를 사용하여 본 발명의 여주, 감나무잎, 비단풀의 복합 추출물을 제조할 수 있는데, 다른 용매를 사용하여 수득한 복합추출물에 비해 에탄올을 이용하여 수득한 복합추출물이 자외선에 대한 피부세포 보호 활성이 더 우수한 것으로 나타났다.

또한, 본 발명의 자외선에 대한 피부 보호용 화장료 조성물에 함유된 복합추출물은 여주 추출물, 감나무잎 추출물 및 비단풀 추출물이 1:1:1~1:2:2의 중량비로 포함된다는 점에 특징이 있다.

각 식물에 대한 추출물의 혼합비가 상기 범위에 미치지 못하는 경우, 자외선으로부터 피부세포를 보호하는 효과가 미비한 문제점이 있고, 상기 혼합비를 초과하여 다량 함유될 경우에는 피부에 자극을 유발시켜 피부 트러블 등의 문제점이 발생한다.

따라서 자외선에 대한 피부 보호 활성의 최대 효과를 위해서는, 여주, 감나무잎 및 비단풀을 1:1:1~1:2:2의 중량비로 혼합하여 사용하는 것이 좋으며, 바람직하게는 1:1:1의 중량비로 사용할 수 있다.

추출 방법으로는 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있으며, 바람직하게는 열수추출법을 사용할 수 있다.

또한, 목적하는 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다.

상기 본 발명의 복합추출물은 본 발명의 조성물 총 중량을 기준으로 10~100ug/ml의 농도로 함유되어 있을 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 상기 조성물은 자외선 중에서도 자외선 B에 의한 피부보호 및 자외선 차단 효과를 가지는데, 일반적으로 자외선은 자외선 A, B 및 C의 3가지 파장 영역으로 구분된다.

먼저, UV-A (320~400nm)는 오존층에 흡수되지 않으며 파장영역이 0.32~0.40에 해당하고, UV-B에 비하여 에너지량이 적지만 피부를 그을릴 수 있다. 피부를 태우는 주역은 UV-B 이지만 UV-A는 피부를 벌겋게 만들 뿐 아니라 피부 면역 체계에 작용하여 피부 노화에 따른 장기적 피부 손상을 일으킬 수 있다. 최근에는 UV-A 노출 시간이 피부를 그을릴 정도로 길어지면 피부암 발생의 위험이 UV-B의 경우와 같아진다는 연구 결과가 보고되기도 하였다.

UV-B (280~320nm)는 대부분은 오존층에 흡수되지만, 일부는 지표면에 도달한다. 지구에 극소량이 도달하는 UV-B는 파장영역이 0.28~0.32에 해당하는 자외선으로서, 동물체의 피부를 태우고 피부 조직을 뚫고 들어가며 때로는 피부암을 일으키는데, 피부암 발생의 원인은 대부분 태양 광선의 노출 및 UV-B와 관련이 있다.

또한, UV-C (100~280nm)는 오존층에 완전히 흡수된다. 파장영역이 0.20~0.29인 자외선 중 UV-C는 염색체 변이를 일으키고 단세포 유기물을 죽이며, 눈의 각막을 해치는 등 생명체에 해로운 영향을 미친다. 다행히 UV-C로 알려진 이 범위의 자외선은 성층권의 오존에 의해 거의 모두 흡수된다.

본 발명의 조성물이 제공하는 피부 보호를 위한 자외선 차단은 상기 3가지의 자외선 중에서 280~320nm의 파장 영역을 갖는 UV-B에 해당한다.

나아가 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 복합추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 본 발명의 화장료 조성물은 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다. 본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다. 본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다. 본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다. 본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

또한, 본 발명은 본 발명의 여주 추출물, 감나무잎 추출물 및 비단풀 추출물의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 이용하여 자외선으로부터 피부를 보호하는 효과를 갖는 것을 특징으로 하는 화장방법을 제공할 수 있다. 즉, 본 발명은 본 발명의 화장료 조성물을 인간의 피부에 적용하여 자외선에 의한 피부노화 방지효과를 갖는 것을 특징으로 하는 화장방법을 제공한다.

본 발명의 화장 방법은 본 발명의 화장료 조성물을 이용하는 모든 화장 방법을 일컫는다. 즉, 화장료 조성물을 이용하는 당업계에 공지된 모든 방법이 본 발명의 화장 방법에 속한다. 본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비 함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.

< 실시예 1>

여주, 감나무잎 및 비단풀의 복합추출물 제조

건조된 여주, 건조된 감나무 잎 및 건조된 비단풀을 동일한 비율로 섞고(100g:100g:100g)이를 분쇄한 후, 분쇄한 혼합물에 대한 10배의 중량에 해당하는 50%의 에탄올을 첨가한 다음, 실온에서 24시간 동안 침지한 후, 상등액과 침전물을 분리하였다. 이와 같은 방법으로 2회 반복 추출한 후, 각 시료의 상등액 추출물을여과지(Whatman No. 2)를 이용하여 여과한 후 EYELA 증발기로 감압 농축하여 용매를 완전히 제거한 후 동결 건조함으로써 여주, 감나무잎 및 비단풀의 복합 추출물을 제조하였다.

< 실시예 2>

본 발명의 복합추출물에 대한 세포독성 여부확인

상기 실시예 1에서 수득한 본 발명의 복합추출물이 세포에 대한 독성이 있는지 여부를 확인하기 위해 MTT 분석을 수행하였다. 구체적으로 인간 각질세포주인 HaCaT 세포에 독성을 미치는지 확인하기 위해 96 웰 플레이트에 웰 당 1×10⁵ cell/mL로 분주한 후 24시간 동안 DMEM 배지에서 배양하고, PBS 버퍼(인산완충용액)에 용해시킨 본 발명의 복합 추출물을 농도별로 처리한 뒤 24시간 뒤에 MTT(methyl thiazolyl diphenyl tetrazolium) 분석을 수행하였다. 즉, 5 mg/ml 농도로 제조한 MTT 용액 0.02 ml를 상기 배양 배지에 첨가하고 4시간 배양한 후 배양액을 제거하고 각 웰 당 DMSO를 0.15ml를 가하여 실온에서 30분간 반응시킨 뒤 ELISA 리더기로 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포 독성 측정은 복합추출물 처리군과 무첨가군(대조군)에 대한 흡광도 감소율로 나타내었다.

세포 생존율(%)=(1-복합추출물첨가군의 흡광도/무첨가군의 흡광도)x100

분석 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이 본 발명의 복합추출물을 세포에 독성을 유발시키지 않는 것으로 나타나, 세포에 유해하지 않는 안전한 추출물임을 알 수 있었다.

< 실시예 3>

본 발명의 복합추출물의 자외선 B에 대한 세포보호 활성분석

본 발명의 복합추출물이 자외선 B로부터 세포를 보호하는 효과가 있는지 확인하기 위해, HaCaT 세포에 복합추출물을 농도별로 처리한 후, UV-B 램프를 사용하여 세포에 50 mJ/cm² 의 UV-B를 조사한 후, 세포생존율과 ROS 생성양을 DCF-DA 염색방법을 사용하여 측정하였다. 이때 대조군으로는 본 발명의 복합추출물을 처리하지 않은 군을 사용하였다.

그 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이 아무것도 처리하지 않은 대조군의 경우, 자외선 B 조사 시, 세포생존율이 감소하는 것으로 나타난 반면, 본 발명의 복합추출물을 처리한 군의 경우, 자외선으로부터 세포사멸을 억제하여 세포를 보호하는 활성이 있음을 알 수 있었다.

또한, 이러한 자외선 B로부터의 세포 보호 활성은 여주, 감나무 잎 및 비단풀의 단독 추출물, 2가지의 혼합추출물에 비해 3가지를 모두 혼합한 복합추출물이 가장 우수한 보호 효과가 있는 것으로 나타났다.

뿐만 아니라, 도 3에 나타낸 바와 같이, DCF-DA 형광 염색 결과, 피부 세포에 UVB를 조사한 경우, ROS 생성양이 60% 이상 증가한 것으로 나타난 반면, 본 발명의 복합추출물을 처리한 군의 경우, ROS 생성양이 현저하게 감소되는 것으로 나타났고, 50ug/ml의 농도로 처리한 경우, 정상 세포군(자외선 미처리 군)과 거의 유사한 정도의 ROS 생성율을 나타내었다. 따라서 이러한 결과를 통해 본 발명자들은 본 발명의 복합추출물이 UVB에 의한 ROS 생성을 효과적으로 저해하여 피부 각질 세포를 보호하는 활성이 있음을 알 수 있었다.

< 실시예 4>

본 발명의 복합추출물을 함유한 화장료 조성물의 제조

점도가 있는 수상형의 에센스 형태의 화장료 조성물의 제조는 여주, 비단풀 및 감나무잎의 복합추출물 함량을 0.1% 및 0.5%로 하여 사용하였고 제형의 사용감에 영항을 줄 수 있는 글리세린의 함량을 조정하여 하기 표와 같이 총 4가지 제조예의 화장료 조성물을 제조하였다.

에센스 화장료 조성물의 성분 및 함량

성분명	제조예 (%, W/V)
	제조예1	제조예2	제조예3	제조예 4
복합추출물	0.1	0.5	0.1	0.5
정제수	90.6	90.2	88.6	88.2
글리세린	3	3	5	5
1,3 부틸렌글라이콜	3	3	3	3
1,2-헥산디올	2	2	2	2
풀루란	0.1	0.1	0.1	0.1
폴리글루타믹애씨드	0.03	0.03	0.03	0.03
알란토인	0.1	0.1	0.1	0.1
알지닌	0.15	0.15	0.15	0.15
디포타슘글리시리제이트	0.1	0.1	0.1	0.1
카보머	0.05	0.05	0.05	0.05
하이드록시에칠셀룰로오스	0.1	0.1	0.1	0.1
스클레로튬검	0.2	0.2	0.2	0.2
소듐하이알루로네이트	0.1	0.1	0.1	0.1
폴리소르베이트80	0.32	0.32	0.32	0.32
향료	0.05	0.05	0.05	0.05
합계	100.00	100.00	100.00	100.00

< 실시예 5>

본 발명의 복합추출물을 함유한 화장료 조성물에 대한 관능평가

10명의 30 대 및 40대의 주부 패널들에게 상기 실시예 4에서 제조한 에센스 제품을 나누어 주고 2주간 사용하게 한 후 선호도를 각 항목에 대해 5점 척도로 조사하였다.

제조된 화장료 관능 평가 결과

평 가 기 준	결과
	제조예1	제조예2	제조예3	제조예4
제형의 색상	3.9	4.3	3.6	4.2
제형의 질감 (점도, 발림성등)	4.2	4.6	4.0	4.1
제형의 향에 대한 만족도	4.1	3.9	4.3	3.6
사용 후 피부 자극정도	4.8	4.8	4.4	4.4
사용 후 피부건조 및 보습력	3.7	4.1	3.5	4.5
사용후 피부톤 밝기	3.8	4.3	3.6	4.2
합 계	24.5	26.0	23.4	25.0

1 : 매우 나쁨 2 : 나쁨 3 : 보통 4 : 좋음 5 : 매우 좋음

표 2에서 나타낸 바와 같이, 제조예 2의 에센스(여주, 비단풀, 감나무잎 복합추출물 함량 0.5% 및 글리세린 3% 함유) 제형에 대한 선호도가 가장 높게 나타났다.

이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (6)

1. 건조된 여주, 건조된 감나무잎 및 건조된 비단풀을 1:1:1의 중량비로 혼합한 혼합물에 에탄올을 첨가하여 수득한 여주, 감나무잎 및 비단풀의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는, 자외선 B에 대한 피부 보호용 화장료 조성물.
2. 삭제
3. 삭제
4. 삭제
5. 삭제
6. 제1항에 있어서,
   상기 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션, 프레스파우더 및 루스파우더로 이루어진 군으로부터 선택된 1종으로 제형화 되는 것을 특징으로 하는, 자외선 B에 대한 피부 보호용 화장료 조성물.

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