KR102092151B1 - 두충 추출물 및 산약 추출물을 포함하는 남성갱년기 증후군의 예방 또는 개선용 약학적 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 두충 추출물 및 산약 추출물을 포함하는 남성갱년기 증후군의 예방 또는 개선용 약학적 조성물에 관한 것으로, 두충과 산약을 특정한 비율로 혼합하여 제조된 혼합물이 남성갱년기 증상의 원인이 되는 호르몬 및 단백질의 발현을 조절하므로, 본 발명의 조성물을 제약 분야에서 유용하게 사용할 수 있다.

Description

두충 추출물 및 산약 추출물을 포함하는 남성갱년기 증후군의 예방 또는 개선용 약학적 조성물{Pharmaceutical Composition Comprising Extracts of Eucommia ulmoides Oliver and Dioscorea japonica for Preventing or Treating Andropause syndrome}
본 발명은 두충 추출물 및 산약 추출물을 포함하는 남성갱년기 증후군의 예방 또는 개선용 약학적 조성물에 관한 것이다.
남성갱년기(PADAM; Partial Androgen Deficiency in Aging Male)란 신체의 노화 현상에 따라 남성이 전반적인 신체적, 정신적 측면의 쇠퇴 현상을 겪게 되는 과정이며, 남성호르몬의 저하로 인한 영향으로 남성적 특징, 전반적인 생활 활력이나 기분이 서서히 저하되는 것을 의미한다. 남성갱년기 증상으로는 신경과민, 정서 불안, 우울증, 현기증, 안면 홍조, 발한, 수면 장애, 활력 저하, 기억력 저하, 업무 능력 감소, 성욕 감퇴, 피부 노화, 골밀도 감소, 내장 지방의 증가 등이 있다.
여성과 마찬가지로 남성에게도 50대 전후부터 갱년기가 발생하기 시작하여 나이가 들수록 발생 빈도가 늘어가며, 나이가 들면서 부신 분비의 기능, 정자의 생식력, 레이디히(Leydig) 세포 기능이 감퇴하고, 혈청 테스토스테론이 감소하면서 남성갱년기 증세가 나타나게 된다. 이러한 남성갱년기의 원인은 기타 환경적 요인 외에도 주원인이 남성 호르몬을 주축으로 한 내분비계의 쇠퇴이기 때문에, 종래에는 남성 호르몬을 보충하는 치료가 주된 치료 요법으로 알려져 왔다. 남성 호르몬 보충 요법은 먹는 약이나 바르는 제제, 붙이는 패치형 제제, 주사 요법 등이 있다.
남성갱년기와 관련된 호르몬으로, 테스토스테론은 남성의 주요 순환 안드로겐이다. 주로 고환의 레이디히 세포에 의해 분비되고, 테스토스테론은 주로 남성의 2차 성징의 발달 및 유지에 관여한다. 신체에서 순환하는 테스토스테론은 5α-환원효소에 의해 디히드로테스토스테론(Dihydrotestosterone, DHT)로 대사될 수 있다. 테스토스테론은 간, 지방 및 고환에서 발견되는 아로마타아제(aromatase) 효소복합체에 의해 에스트라디올(estradiol)로 대사될 수 있다. 테스토스테론이 에스트라디올로 방향화됨으로써 여성형 유방 증상과 같은 남성갱년기 증상이 나타날 수 있다. 테스토스테론을 증가시키고, 디히드로테스토스테론 및 에스트라디올의 수준을 감소시키는 것이 남성갱년기 증상을 완화하는데 도움을 준다.
테스토스테론의 DHT로의 전환은 많은 측면에서 중요하다. 예를 들어, DHT는 테스토스테론보다 훨씬 높은 친화도로 SHBG에 결합한다. 또한, 많은 조직에서 테스토스테론의 활성이 시토솔 수용체 단백질에 결합한 DHT로의 환원을 결정한다. 스테로이드 수용체 복합체는 핵으로 이동되고, 전사 및 안드로겐 작용과 관련된 세포 변화가 시작된다.
테스토스테론은 단백질에 98% 결합되어 혈액에서 순환한다. 남성에서 대략 40%는 고친화성 성호르몬 결합 글로불린(Sex hormone binding globulin, SHBG)에 결합한다. 나머지 60%는 알부민에 약하게 결합한다. 따라서, 임상 실험으로부터 다수의 테스토스테론에 대한 측정이 가능하다. 단백질에 결합되지 않은 혈액 중의 테스토스테론 부분을 "유리" 테스토스테론이라고 하고, 유리 테스토스테론과 단백질 결합 테스토스테론을 포함하여 "전체 테스토스테론" 또는 "테스토스테론"이라고 한다.
SHBG는 테스토스테론과 결합하여 테스토스테론의 실제 작용을 조절하는 역할을 한다. SHBG이 테스토스테론과 결합하면 호르몬의 활성을 잃어버리며, 분리되면 실제로 작용하는 호르몬이 된다. 테스토스테론의 40~80%는 SHBG와 결합하여 생물학적으로 불활성화 상태로 존재하며 남성 40~70세를 대상으로 조사한 결과 SHBG가 증가하는 것으로 나타났다. 노화에 따른 혈중 SHBG의 증가로 생체이용가능한 테스토스테론은 더욱 감소하므로 남성갱년기 증상이 악화될 수 있다.
남성갱년기 복합증후군의 치료 방법으로 남성호르몬(안드로겐) 약물 보충 요법이 있다. 그러나 이와 같은 약물 보충 요법은, 간 독성을 나타낼 수 있으며, 혈중 지질 대사에 영향을 미쳐 LDL을 상승시키고, HDL을 감소시켜 심혈관 질환을 야기할 수 있는 등의 부작용이 문제되고 있다. 또한, 남성호르몬의 투여가 간, 지질 상태, 심혈관 및 전립선 질환, 및 수면 및 행동 장애에 역효과를 미칠 수도 있고, 이러한 부작용에 대해서 정기적으로 검사를 받아야 하는 문제점이 있었다. 한편으로, 무증상이거나 또는 명백한 전립선암의 존재 하에서는 남성호르몬 치료가 제공될 수 없음이 보고되어 있다.
최근에는 이러한 약물의 치료 요법에 의한 문제점을 극복하기 위하여 천연 생약을 주성분으로 하는 남성갱년기 복합증후군 개선제의 개발이 시도되고 있다. 그 예로, 특허문헌 1에 옻나무 추출물을 포함하는 성기능 개선용 제약 조성물이 있다. 그러나 이와 같은 생약재를 주성분으로 하는 종래 기술은 주로 남성갱년기 복합증후군의 단편적 증상인 성기능 관련한 연구만 한정될 뿐, 골다공증, 근력 저하, 의욕 저하 등 남성갱년기 복합증후군으로 나타나는 제반 증상들을 근본적으로 개선시키는 것은 아니어서 남성갱년기 복합증후군 개선용 제제의 개발은 미흡한 현실이다.
또한, 일부 기술들은 남성 정력, 자양강장에 효과가 있다는 다수의 한약재 등의 혼합물을 개시하는 것으로서 특정 성분의 기능에 대해서는 명확히 드러나 있지 않다. 생약재는, 여러 종류의 생약 성분들이 섞여서 사용될 때 상호 영향을 주므로, 복합 성분, 사용량에 따라 질병에의 사용이 전혀 달라지는 특성을 가지고 있다. 또한, 사람의 체질이나 이미 가지고 있는 질병에 따라 사용이 가능한 생약재가 모두 달라, 단순히 유사한 효능을 가지는 재료들을 복합하는 것만으로는 실질적으로 환자에게 그대로 적용하는 것이 어렵다. 이와 같이 남성갱년기의 증상 개선에 적용할 수 있는 생약에 대한 개발이 여전히 초보적인 단계에 있는 실정이다.
두충(Eucommia ulmoides oliver)은 두충나무과에 속하는 낙엽교목 또는 이의 나무껍질을 말린 생약을 의미한다. 두충은 줄기나 잎 등이 예로부터 차로서 음용되어 왔으며, 비타민 C가 많이 함유되어 있고, 혈압 강하 작용, 이뇨 작용 등이 알려져 있으며, 그 줄기나 잎 등이 스트레스, 숙취 등의 각종 질병에 유용한 생약으로서 음용 되어왔을 뿐만 아니라, 최근 들어 임상적인 실험을 통해 두충에 함유된 여러 성분들의 약리학적 메카니즘이 점차 밝혀짐에 따라 그 가치가 재인식되고 있고, 건강차로서 많이 음용되고 있다.
산약(Dioscorea japonica)은 한국을 비롯한 동남아 지역에 널리 분포하는 다년생 덩굴 식물이며, 산약의 지하부는 15~20%의 전분질, 1.0~1.5%의 단백질, 미량의 미네랄 및 비타민을 가지는 등 우수한 영양 성분을 함유하고 있어서, 식량 자원으로도 이용되고 있다. 면역질환 감소, 항염증 효과, 고혈당을 억제하는 작용이 있다고 알려져 있고, 한방에서는 산약을 설사, 소갈, 빈뇨 등의 치료 목적으로 사용하여 왔다.
본 발명자들은 남성갱년기 증상의 개선에 적용할 수 있는 생약 후보군을 검토하였으며, 두충과 산약을 특정 비율로 조합하여 남성갱년기 동물모델에 투여하였을 때 남성갱년기 증상에 관련된 내분비계 호르몬과 단백질의 발현을 조절하는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
한국 특허출원 제2007-0009766호
남성갱년기 증상을 개선시키고자 종래에 적용되어 왔던 호르몬 요법을 대체할 수 있는 생약 유래의 남성갱년기 증상 완화 효과를 나타내는 물질을 제공하는 것이다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 두충 추출물 및 산약 추출물을 포함하는 남성갱년기 증후군의 예방 또는 개선용 약학적 조성물을 제공한다.
아울러, 본 발명은 두충 추출물 및 산약 추출물을 포함하는 남성갱년기 증후군 개선용 건강식품 조성물을 제공한다.
본 발명은 두충 추출물 및 산약 추출물을 특정 비율로 혼합할 때에 남성갱년기 증상에 주요한 역할을 하는 테스토스테론의 함량을 증가시키고, SHBG, DHT, 에스트라디올 함량을 감소시키는 효과가 있다.
도 1은 두충 추출물 및 산약 추출물을 단독 처리 또는 혼합 처리하였을 때, 혈중 테스토스테론의 함량을 나타낸다(시료 투여량: 40 mg/kg): NC(3M, 3month, young rat); 정상군, C(8M, 8month, old rat); 비교대조군, KGC08eu; 두충 추출물 단독 처리, KGC08dj; 산약 추출물 단독 처리, KGC08ED(3:1); 두충 추출물 및 산약 추출물의 3:1 혼합물, KGC08ED(1:1); 두충 추출물 및 산약 추출물의 1:1 혼합물, KGC08ED(1:3); 두충 추출물 및 산약 추출물의 1:3 혼합물(위 시료명은 도 2 내지 도 4에서도 동일한 의미를 나타낸다).
도 2는 두충 추출물 및 산약 추출물을 단독 처리 또는 혼합 처리하였을 때, 혈중 SHBG의 함량을 나타낸다(시료 투여량: 40 mg/kg).
도 3은 두충 추출물 및 산약 추출물을 단독 처리 또는 혼합 처리하였을 때, 혈중 DHT의 함량을 나타낸다(시료 투여량: 40 mg/kg).
도 4는 두충 추출물 및 산약 추출물을 단독 처리 또는 혼합 처리하였을 때, 혈중 에스트라디올의 함량을 나타낸다(시료 투여량: 40 mg/kg).
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
1. 두충 추출물 및 산약 추출물의 제조
본 발명에서 일컫는 "추출물"은 원료로부터 임의의 방법으로 추출된 물질을 의미하며, 이렇게 추출된 추출액, 이로부터 얻을 수 있는 농축액, 상기 농축액의 건조물 및 분말을 제한 없이 모두 포함하는 의미로 사용된다.
상기 추출물은 원료 또는 이의 건조물로부터 추출하여 얻을 수 있으며, 상기 추출물의 원료는 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있다.
상기 추출물을 원료로부터 추출하여 수득할 때, 추출 방법으로는 용매 추출법, 초음파 추출법, 여과법 및 환류 추출법 등 종래 알려진 통상적인 추출 방법을 모두 사용할 수 있으며, 바람직하게는 용매 추출법이나 환류 추출법을 이용함으로써 제조할 수 있다. 상기 추출 과정은 수회 반복할 수 있으며, 이후에 농축 또는 동결건조 등의 단계를 추가적으로 거칠 수 있다. 구체적으로, 수득한 추출물을 감압 농축하여 농축액을 얻고, 상기 농축액을 동결건조시킨 후 분쇄기를 이용하여 고농도의 추출 분말을 제조할 수 있다. 추출물은 추출물을 추가적으로 분획하여 얻은 분획물도 포함한다.
상기 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합물을 추출용매로 하여 추출될 수 있다. 상기 유기용매는 알코올, 바람직하게는 C1-C4의 저급 알코올, 헥산(n-헥산), 에테르, 글리세롤, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 에틸아세테이트, 메틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸아세테이트, 벤젠 및 이들의 혼합용매로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있고, 바람직하게는 에탄올일 수 있다. 물 및 유기용매의 혼합물을 추출 용매로 사용하는 경우, 물 및 유기용매의 혼합물은 바람직하게는 물 및 C1-C4의 저급 알코올의 혼합물일 수 있고, 더욱 바람직하게는 물 및 에탄올의 혼합물일 수 있다.
상기 물 및 에탄올의 혼합물은 3%(v/v) 내지 70%(v/v) 에탄올 수용액, 예컨대 5%(v/v) 내지 50%(v/v) 에탄올 수용액일 수 있고, 바람직하게는 10%(v/v) 내지 45%(v/v) 에탄올 수용액일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 15%(v/v) 내지 40%(v/v) 에탄올 수용액일 수 있고, 보다 더 바람직하게는 20%(v/v) 내지 35%(v/v) 에탄올 수용액일 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다. 상기 물 및 에탄올의 혼합물이 하한값 미만의 농도일 경우에는 추출물을 제조하더라도 남성갱년기 증상에 관여하는 호르몬 또는 단백질의 발현을 조절할 수 없어서 남성갱년기 증상들을 완화시킬 수 없다. 물 및 에탄올의 혼합물이 상한값을 초과하는 농도일 경우에는 두충 추출물과 산약 추출물을 혼합하여 처리하여도 남성갱년기 증상이 개선되지 않는다.
두충 또는 산약 추출시 용매 첨가량은 생약 중량 2kg 대비 5 내지 20배수일 수 있고, 바람직하게는 7 내지 18배수일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 9 내지 16배수일 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다. 추출은 60℃ 내지 100℃에서 실시될 수 있고, 바람직하게는 65℃ 내지 95℃에서 실시될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 70℃ 내지 90℃에서 실시될 수 있으나, 이에 한정되지 아니한다. 추출은 4시간 내지 20시간 동안 실시될 수 있고, 바람직하게는 4시간 내지 16시간 동안 실시될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 4시간 내지 12시간 동안 실시될 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다. 추출은 1회 내지 8회 실시될 수 있고, 바람직하게는 1회 내지 6회 실시될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 1회 내지 5회 실시될 수 있으나, 이에 한정하지 않으며, 추출물은 각 추출에서 얻어진 단독 추출물 또는 각 추출에서 얻어진 추출물들의 혼합 추출물일 수 있다. 추출 조건 중 추출시 첨가되는 용매의 양, 온도 및 시간이 하한값 미만이거나, 추출 횟수가 상한값을 초과하여 실시될 경우에는 두충 추출물과 산약 추출물을 혼합하더라도 남성 갱년기 증상을 개선할 수 없다.
두충 추출물 및 산약 추출물은 두충과 산약의 혼합물을 추출할 수도 있고, 두충 추출물과 산약 추출물을 혼합할 수도 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 분획물은 남성갱년기 증후군 개선 효과를 높이기 위해서 추가로 통상의 분획 공정을 수행하여 분획물을 수득한 것일 수도 있다. 예를 들면, 본 발명에 따른 분획물을 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 얻은 분획물, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등으로 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 활성 분획물도 본 발명의 분획물에 포함된다. 여러 성분이 혼합되어 있는 분획물을 농도구배 컬럼 크로마토그래피 등을 통하여 활성 성분의 성질에 따라 분리하여서 보다 남성갱년기 증후군 개선 효과가 높은 특정 활성 분획물을 제조할 수 있다.
상기 컬럼 크로마토그래피는 실리카겔, 세파덱스, LH-20, ODS 겔, RP-18, 폴리아미드, 도요펄(Toyopearl) 및 XAD 수지로 이루어진 군으로부터 선택된 충진제를 이용하는 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 활성 분획물을 분리 및 정제할 수 있고, 컬럼 크로마토그래피는 필요에 따라 적절한 충진제를 선택하여 수차례 실시할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 크로마토그래피를 사용함에 있어 용출 용매, 용출 속도 및 용출 시간은 본 기술 분야에서 일반적으로 사용하는 용매, 속도 또는 시간을 적용할 수 있다.
2. 두충 추출물 및 산약 추출물을 포함하는 남성갱년기 증후군의 예방 또는 개선용 약학적 조성물
두충 추출물과 산약 추출물 제조 방법은 상기 " 1. 두충 추출물과 산약 추출물 제조 "에서 언급한 것과 동일하므로 기재를 생략한다.
상기 두충 추출물 30중량부에 대해서, 상기 산약 추출물은 0.1중량부 내지 25중량부로 포함될 수 있고, 바람직하게는 상기 두충 추출물 30중량부에 대해서, 상기 산약 추출물은 1중량부 내지 20중량부로 포함될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 상기 두충 추출물 30중량부에 대해서, 상기 산약 추출물은 5중량부 내지 15중량부로 포함될 수 있고, 보다 더 바람직하게는 상기 두충 추출물 30중량부에 대해서, 상기 산약 추출물은 7중량부 내지 13중량부로 포함될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 두충과 산약의 혼합물 제조시에도 위의 비율에 따라 제조될 수 있다. 산약 추출물이 하한값 미만으로 포함될 경우에는 두충 추출물과 산약 추출물을 혼합하더라도 남성갱년기 증후군을 개선하는 효과가 낮다. 또한, 산약 추출물을 상한값을 초과하여 포함할 경우에는 두충 추출물과 산약 추출물을 혼합하더라도 상승 효과가 낮아지는 문제점이 있다.
본 발명의 한 실시예에서는 두충 추출물 및 산약 추출물의 혼합물을 두충 혼합물 30중량부에 대해서, 산약 추출물을 0.1중량부 내지 25중량부로 포함시키고(제조예 3의 3:1 비율), 이 혼합물을 남성갱년기 동물 모델에 투여한 경우, 남성갱년기 증상과 관련된 테스토스테론의 함량을 증가시키고, 성호르몬 결합 글로불린(SHBG), 디히드로테스토스테론(DHT), 및 에스트라디올의 함량을 감소시키므로 남성갱년기 증후군을 개선시키는 효과가 있다(도 1 내지 도 4). 두충 및 산약 추출물의 혼합 비율이 상기 범위를 벗어난 경우, 예를 들면 두충 추출물 30중량부에 대해서, 산약 추출물을 30중량부 이상으로 포함시키는 경우(제조예 3의 1:1 비율, 1:3 비율)는 테스토스테론의 함량을 증가시키고, SHBG의 함량은 감소시키지만, DHT의 함량은 증가하기 때문에 남성갱년기 증상에 적용하기에 적합하지 않았다.
본 발명에서 "예방"은 상기 조성물의 투여로 남성갱년기 증상을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 말하며, "치료"는 상기 조성물에 의해 남성갱년기 증상이 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 말한다.
상기 남성갱년기 증후군은 중년의 남성에서 나타나는 정신적 병태, 신체적 병태 및 성적 병태로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있다.
상기 정신적 병태는 우울증, 기분 변화, 신경과민, 불안, 과민, 집중력 저하, 인지 능력 저하, 공간 지각력의 감소 및 기억 저하로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 병태를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다.
상기 신체적 병태는 피로증, 현기증, 열감, 홍조, 발한, 지방 과다, 근력 감소, 뼈 질환, 수면 장애, 체모의 감소, 내장 지방 증가, 근육량 감소, 근력 감소, 골밀도 감소, 동맥경화 증가 및 경동맥 혈관 두께 증가, 인슐린 저항성 증가, 무기력, 체력 또는 지구력 감퇴, 피부 변화 및 관절 질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 병태를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다.
상기 성적 병태는 감소된 성욕, 발기 부전, 저하된 사정력, 저하된 사정량, 정자수 감소 및 정자의 활동성 감소로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 병태를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다.
또한, 남성갱년기 증후군은 테스토스테론의 감소 또는 성호르몬 결합 글로불린(SHBG), 디히드로테스토스테론(DHT), 및 에스트라디올의 증가에 의해서 나타나는 정신적, 신체적 및 병적 병태들일 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 상기 두충 추출물 및 산약 추출물 외에 본 발명이 목적으로 하는 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 상기 두충 추출물 및 산약 추출물의 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 추가로 함유할 수 있다. 예를 들어 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 또는 담체를 포함할 수 있다.
상기 약학적 조성물의 투여 경로는 구강, 정맥내, 근육내, 동맥내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장이 포함되고, 예컨대 도포에 의한 국부투여(topical application) 방식으로 적용될 수 있다. 상기 비경구는 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 병소내 주사 또는 주입기술을 포함한다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여할 수 있다.
본 발명에서 "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 질병의 종류, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 본 기술 분야의 통상의 기술자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 남성갱년기 증상의 개선을 목적으로 하는 개체이면 특별히 한정되지 않고, 어떠한 것이든 적용가능하다. 예를 들면, 원숭이, 개, 고양이, 토끼, 모르모트, 랫트, 마우스, 소, 양, 돼지, 염소 등과 같은 인간이 아닌 동물, 인간, 조류 및 어류 등 어느 것에 사용가능하다.
상기 약학적 조성물은 상기 두충 추출물 및 산약 추출물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 상기 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
경구 투여를 위한 고형 제제에는 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 연질 캅셀제, 환 등이 포함된다. 경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제로는 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 멸균된 수용액, 액제, 비수성용제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 좌제, 에어로졸 등의 외용제 및 멸균 주사제제의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 바람직하게는 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제의 피부 외용 약학적 조성물을 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
상기 조성물은 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 보조제, 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 추가로 함유할 수 있으며, 통상적인 방법인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제형화할 수 있다.
상기 약학적 조성물의 투여량은 개체의 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별, 투여시간, 투여 경로, 배출률, 약물 배합 및 특정 질환의 중증을 포함한 여러 요인에 따라 다양하게 변할 수 있다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다. 또한 상기 약학적 조성물은 성인 기준으로 0.001 내지 200㎎/㎏ 범위 내의 투여량으로 투여될 수 있고, 상기 약학적 조성물이 외용제인 경우에는 성인기준으로 1.0 내지 3.0㎖의 양으로 1일 1회 내지 5회 도포하여 1개월 이상 계속하는 것이 좋으나, 상기 투여량은 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.
본 발명의 한 실시예에서는 두충 혼합물 30중량부에 대해서, 산약 추출물을 0.1중량부 내지 25중량부로 포함시켜서 제조된 두충 추출물 및 산약 추출물의 혼합물(제조예 3의 3:1 비율)을 남성갱년기 동물 모델에 40mg/kg의 용량으로 투여할 경우 테스토스테론의 함량이 증가하고, SHBG, DHT, 및 에스트라디올 함량이 감소하는 효과가 있다(도 1 내지 도 4 참조).
상기 약학적 조성물을 단위 용량 형태로 제형화하는 경우, 유효성분으로서 본 발명의 두충 추출물 및 산약 추출물은 약 0.01 내지 1,500㎎의 단위 용량으로 함유되는 것이 바람직하고, 성인 치료에 필요한 투여량은 투여의 빈도와 강도에 따라 하루에 약 1 내지 500㎎ 범위가 보통이나 이에 한정되는 것은 아니며, 일부 환자의 경우 더 높은 1일 투여량이 바람직할 수 있다.
상기 약학적 조성물 조성물은 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
3. 두충 추출물 및 산약 추출물을 포함하는 남성갱년기 증후군 개선용 건강식품 조성물
두충 추출물과 산약 추출물 제조 방법은 상기 " 1. 두충 추출물과 산약 추출물 제조 "에서 언급한 것과 동일하므로 기재를 생략한다.
상기 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물은 상기 건강 기능 식품의 총 중량에 대하여 0.005 내지 20.0 중량%의 함량으로 함유되는 것이 바람직하고, 0.01 내지 10.0 중량%의 함량으로 함유되는 것이 보다 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 상기 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물의 유효 함량이 0.005 중량% 미만일 경우에는 남성갱년기 증상을 완화시킬 수 없고, 20 중량%를 초과할 경우에는 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효능 상승 효과가 떨어져 비경제적이다.
상기 건강 기능 식품은 본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물 외에 본 발명이 목적으로 하는 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 상기 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물의 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 추가로 함유할 수 있다. 예를 들어 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 또는 담체를 포함할 수 있다.
또한 식품 제조시 통상적으로 첨가되는 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함한다. 상기 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상기 향미제로는 천연 향미제 타우마틴, 스테비아 추출물 및 합성 향미제를 사용할 수 있다. 예컨대, 본 발명의 건강 기능 식품이 드링크제로 제조되는 경우에는 본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 천연 추출액 등이 추가로 포함될 수 있다.
상기 건강 기능 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강 기능 식품을 모두 포함한다.
이하, 본 발명을 제조예 및 실시예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 제조예, 실험예, 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 제조예 및 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
<제조예 1> 두충 추출물의 제조
두충(Eucommia ulmoides Oliver, 줄기껍질) 2 kg에 중량 대비 12배수의 30%(v/v) 에탄올 수용액을 가하고, 80℃에서 8시간 1~3회 추출하고, 각 추출에서 얻어진 추출물들을 혼합한 추출액을 5㎛ 필터를 이용하여 여과하였다. 여액은 회전감압농축기(BUCHI, R-220)를 이용하여 55℃에서 농축하고, 최종적으로 농축액에 멸균된 증류수를 가해 15°Brix가 되도록 희석한 후 동결건조(OPERON, FDT-12012)하여 두충 추출분말 255.9g을 수득하였다.
<제조예 2> 산약 추출물의 제조
산약(Dioscorea japonica, 뿌리) 2 kg에 중량 대비 12배수의 30%(v/v) 에탄올 수용액을 가하고, 80℃에서 8시간 1~3회 추출하고, 각 추출에서 얻어진 추출물들을 혼합한 추출액을 5㎛ 필터를 이용하여 여과하였다. 여액은 회전감압농축기(BUCHI, R-220)를 이용하여 55℃에서 농축하고, 최종적으로 농축액에 멸균된 증류수를 가해 15°Brix가 되도록 희석한 후 동결건조(OPERON, FDT-12012)하여 산약 추출분말 266g을 수득하였다.
<제조예 3> 두충 추출물 및 산약 추출물의 혼합물의 제조
제조예 1 및 제조예 2에서 얻어진 단독 추출물을 비율을 다르게 하여서 제조하였다. 3종류의 혼합물을 제조하였으며, 두충:산약의 비율을 3:1(30:10), 1:1(30:30), 1:3(30:90)으로 하였다.
<실시예 1> 남성갱년기 개선 효능 확인
<1-1> 실험군의 구성
제조된 단일 추출물 및 복합물들이 노화 동물(24주령, SD 랫, 웅성)의 남성갱년기 개선에 미치는 영향을 확인하기 위하여 노유헌 등의 Nutr Res Pract., 2012, 6(6), 505-512에 기재된 방법을 이용하여 실험을 수행하였다. (주)샘타코바이오(Gyeonggi-do, Korea)로부터 실험군 및 비교대조군으로서 24주령(6개월)의 웅성 SD 랫과, 정상군으로서 7주령(2개월)의 웅성 SD 랫을 공급받아 7일간 순화시켜 사용하였다. 제조예 3의 두충 및 산약 추출물의 혼합물을 실험군에는 투여하였고, 비교대조군 및 정상군에는 투여하지 않았다. 물과 사료는 자유롭게 섭취하도록 하였고, 온도(23±2℃), 습도(55±10%) 및 명암 주기(12시간)는 자동으로 조절되도록 하였다. 안정화 후 체중을 측정하여 군 분리를 실시하고 실험을 진행하였다(표 1). 표 1의 "eu"는 두충을 나타내고, "dj"는 산약을 나타내며, "ED"는 두충 및 산약의 혼합물을 나타낸다.
No. Label 군 분리 마리수 주령 시료 투여량
1 NC 정상군 6 13 -
2 C 대조군 10 32 -
3 eu40 KGC08eu 40 mg/kg 10 32 KGC08eu 40 mg/kg
4 dj40 KGC08dj 40 mg/kg 10 32 KGC08dj 40 mg/kg
5 ED(3:1)40 KGC08eu+dj (3:1) 40 mg/kg 10 32 KGC08eu+dj (3:1) 40 mg/kg
6 ED(1:1)40 KGC08eu+dj (1:1) 40 mg/kg 10 32 KGC08eu+dj (1:1) 40 mg/kg
7 ED(1:3)40 KGC08eu+dj (1:3) 40 mg/kg 10 32 KGC08eu+dj (1:3) 40 mg/kg
군 분리 후, 6주간 1일 1회 두충, 산약 추출물 및 복합물을 각각 경구용 존데를 이용하여 표 1과 같이 각각의 동물에 kg/bw의 양만큼 경구투여하였다. 총 6주간의 경구투여가 종료되면 부검하여 간정맥에서 혈액을 채취하여 혈액학적 지표 및 생화학적 지표를 측정하였다.
<1-2> 혈중 테스토스테론 수준 측정
테스토스테론이 감소하면 남성갱년기 증상이 나타나게 되므로, 제조예 1 내지 3에서 얻은 두충 추출물, 산약 추출물, 이들의 혼합물을 각각 남성갱년기 동물 모델에 투여한 후, 혈중 테스토스테론의 함량을 확인하였다.
혈중 테스토스테론 수준 측정은 테스토스테론 엘라이자 키트(Abcam사)를 사용하여 제조사에서 제공되는 표준 시약과 분석 절차에 따라 수행하였다. 혈청을 준비 후 테스토스테론 IgG 코팅된 마이크로플레이트에 25 μL씩 분주한 후 테스토스테론-HRP 콘주게이트 시약을 100 μL씩 분주하였다. 볼텍스를 이용하여 균질하게 섞은 후 37℃의 인큐베이터(VISION SCIENTIFIC, VS-9160C)에서 1시간 동안 반응시켰다. 워싱 버퍼를 이용하여 3회 워싱 후 TMB 기질 용액을 100 μL씩 분주하여 15분간 37℃의 인큐베이터에서 반응시켰다. 15분 후 정지 용액(Stop solution)을 100 μL씩 분주하여 엘라이자 리더기(Thermo SCIENTIFIC, Multi Skan Go)를 이용하여 450 nm 파장으로 O.D값을 측정 후 계산하였다. 측정 결과를 도 1에 나타낸다.
측정 결과, 제조예 3의 두충 및 산약 혼합물 중 30:10 비율이 비교대조군, 두충 추출물, 산약 추출물 단독에 비해서 테스토스테론의 함량을 증가시켰다. 반면에 두충 추출물 및 산약 추출물을 30:30으로 혼합한 추출물은 30:10 비율에 비해서 테스토스테론의 함량 증가 효과가 낮았고, 두충 및 산약을 30:90으로 혼합한 추출물은 두충 단독 추출물에 비해서 테스토스테론 함량이 낮았다.
위 결과로부터 두충과 산약을 단독으로 사용하는 경우에 비해서, 두가지 생약을 혼합하여 사용함으로써 테스토스테론의 함량을 개선시키는 효과가 있는 것을 알 수 있었고, 테스토스테론의 함량을 개선시키기 위해서는 두충 및 산약을 혼합하는 비율 중에서 30:10 비율이 적합한 것을 알 수 있었다.
<1-3> 혈중 성호르몬 결합 글로불린(Sex hormone binding globulin, SHBG) 수준 측정
SHBG이 증가하면 생체이용가능한 테스토스테론이 더욱 감소하여 남성갱년기 증상이 나타나게 되므로, 제조예 1 내지 3에서 얻은 두충 추출물, 산약 추출물, 이들의 혼합물을 남성갱년기 동물 모델에 투여한 후, 혈중 테스토스테론의 함량을 확인하였다.
혈중 SHBG 수준 측정은 랫 SHBG 엘라이자 키트(Elabscience사)를 사용하여 제조사에서 제공되는 표준 시약과 분석 절차에 따라 수행하였다. 혈청을 준비 후 마이크로 엘라이자 플레이트에 100 μL씩 분주한 후 37℃의 인큐베이터에 90분 동안 반응시켰다. 상층액을 제거하고 비오틴화 검출 AB 작용 용액(Biotinylated Detection AB working solution)을 100 μL씩 분주하여 37℃의 인큐베이터에 1시간 동안 반응시켰다. 워싱 버퍼를 이용하여 3회 워싱 후 HRP 컨주게이트 작용 용액을 100 μL씩 분주하여 37℃의 인큐베이터에 30분 동안 반응시켰다. 워싱 버퍼를 이용하여 3회 워싱 후 기질 시약(Substrate reagent)를 90 μL씩 분주하여 37℃의 인큐베이터에 15분간 반응시켰다. 15분 후 정지 용액 50 μL씩 분주하여 엘라이자 리더기를 이용하여 450 nm 파장으로 O.D값을 측정 후 계산하였다. 측정 결과를 도 2에 나타낸다.
측정한 결과, 제조예 3의 두충 및 산약 혼합물 중 30:10, 30:90 비율이 비교대조군, 두충 추출물, 산약 추출물 단독에 비해서 SHBG 함량이 낮았고, 정상군에 가깝게 SHBG 함량을 회복시키는 것으로 나타났다. 반면에 두충 추출물 및 산약 추출물을 30:30로 혼합한 추출물은 30:10, 30:90 비율에 비해서 SHBG의 함량이 높았다.
위 결과로부터 두충과 산약을 단독으로 사용하는 경우에 비해서, 두가지 생약을 혼합하여 사용함으로써 SHBG의 함량을 감소시키는 효과가 있는 것을 알 수 있었고, SHBG의 함량을 감소시키기 위해서는 두충 및 산약을 혼합하는 비율 중에서 30:10 비율이 적합한 것을 알 수 있었다. 한편으로는 실시예 1-2에서는 두충 및 산약을 30:90 비율로 투여한 경우에는 테스토스테론의 함량이 감소하였고, 실시예 1-3에서는 SHBG의 함량을 증가시켜서, 남성갱년기 증상 개선에 일관된 효과가 나타나지 않았으므로 30:90 비율은 남성갱년기 증상 개선에 적용하는데 적합하지 않은 것을 알 수 있었다.
<1-4> 혈중 디히드로테스토스테론(Dihydrotestosterone, DHT) 수준 측정
테스토스테론은 5α-환원효소에 의해 디히드로테스토스테론으로 대사되며, 디히드로테스토스테론의 수준을 감소시킴으로써 남성갱년기 증상이 완화된다고 알려져 있다.
혈중 DHT 수준 측정법은 랫 디히드로테스토스테론 엘라이자 키트(Cusabio사)를 사용하여 제조사에서 제공되는 표준 시약과 분석 절차에 따라 수행하였다. 혈청을 준비 후 마이크로플레이트에 50 μL씩 분주한 후 HRP-컨주게이트 시약을 50 μL씩 분주하였다. 잘 섞은 후 37℃의 인큐베이터에 1시간 동안 반응시켰다. 워싱 버퍼를 이용하여 3회 워싱 후 기질 A와 B를 50 μL씩 섞은 용액을 100 μL씩 분주하여 37℃의 인큐베이터에 15분간 반응시켰다. 15분 후 정지 용액 50 μL씩 분주하여 엘라이자 리더기를 이용하여 450 nm 파장으로 O.D값을 측정 후 계산하였다. 측정 결과를 도 3에 나타낸다.
측정한 결과, 제조예 3의 두충 및 산약 혼합물 중 30:10 비율이 비교대조군, 두충 추출물, 산약 추출물 단독에 비해서 DHT 함량이 낮았고, 정상군에 가깝게 DHT 수준을 회복시키는 것으로 나타났다. 반면에 두충 추출물 및 산약 추출물을 30:30, 30:90으로 혼합한 추출물은 30:10 비율에 비해서 DHT의 함량이 높았다.
위 결과로부터 두충과 산약을 단독으로 사용하는 경우에 비해서, 두가지 생약을 혼합하여 사용함으로써 DHT의 함량을 감소시키는 효과가 있는 것을 알 수 있었고, DHT의 함량을 감소시키기 위해서는 두충 및 산약을 혼합하는 비율 중에서 30:10 비율이 적합한 것을 알 수 있었다.
<1-5> 혈중 에스트라디올 수준 측정
테스토스테론은 아로마타아제 효소복합체에 의해 에스트라디올로 대사될 수 있고, 에스트라디올의 수준을 감소시키는 것이 남성갱년기 증상을 완화하는데 도움을 주는 것으로 알려져 있다.
혈중 에스트라디올 수준 측정법은 마우스/랫 에스트라디올 엘라이자 키트(Calbiotech사)를 사용하여 제조사에서 제공되는 표준 시약과 분석 절차에 따라 수행하였다. 혈청을 준비 후 폴리클로날 항-에스트라디올 항체가 코팅된 마이크로웰에 25 μL씩 분주한 후 에스트라디올 효소 컨주게이트 시약을 100 μL씩 분주하였다. 잘 혼합한 후 20~25℃의 실온에서 2시간 동안 반응시켰다. 1X 워싱 버퍼를 이용하여 3회 워싱 후 TMB 시약을 100 μL씩 분주하여 37℃의 인큐베이터에 15분간 반응시켰다. 15분 후 정지 용액 50 μL씩 분주하여 엘라이자 리더기를 이용하여 450 nm 파장으로 O.D값을 측정 후 계산하였다. 측정 결과를 도 4에 나타낸다.
측정한 결과, 제조예 3의 두충 및 산약 혼합물 중 30:10 비율이 비교대조군, 두충 추출물, 산약 추출물 단독에 비해서 에스트라디올 함량이 낮았다.
위 결과로부터 두충과 산약을 단독으로 사용하는 경우에 비해서, 두가지 생약을 혼합하여 사용함으로써 에스트라디올의 함량을 감소시키는 효과가 있는 것을 알 수 있었다.
<1-6> 생화학적 분석(간 수치, 혈당, 혈중 지질 프로필)
간 독성 지표(ALT, AST), 혈중 글루코스(GLU), 혈중 지질(TG, TC, LDL, HDL) 수준 측정법은 생화학분석기(HITACHI, HITACHI 7100)에 각 지표에 맞는 표준 시약을 넣고 생화학 분석 측정용 튜브에 혈청을 250 μL씩 분주한 후 측정하였다. 하기 표 2에 그 결과를 나타낸다.
대조군 단독 처리 두충 및 산약 혼합물 처리
비교군
(8M)		 두충
40mg/kg		 산약
40mg/kg		 3:1
40mg/kg		 1:1
40mg/kg		 1:3
40mg/kg
AST 150.70 127.90 128.10 121.10* 107.20** 74.90***
ALT 47.11 41.00 40.00 37.33* 33.89** 36.56
TC 118.70 110.00 110.60 95.30* 121.10 87.20**
TG 175.56 136.11 157.11 95.56* 119.78 89.89*
HDL 33.00 31.11 31.56 28.33* 33.78 27.33*
LDL 16.00 15.67 14.33 11.78** 16.44 10.56**
C : 비교대조군(8M, 8month, old rat)
* : p<0.05, ** : p<0.01 , *** : p<0.001(Student's t-test, 비교대조군과 비교)
측정 결과, 두충 및 산약 혼합물을 처리한 경우, 두충, 산약을 단독으로 처리한 경우에 비해서, 간 독성 지표인 ALT, AST와, 혈중 지질(TC, TG, LDL)이 유의하게 낮은 값을 나타내었다. 두충 및 산약의 혼합 비율에 따라서 효과가 상이하였고, 30:10 비율의 경우 간 독성 지표와, 혈중 지질 수준이 낮았지만 30:30 비율의 경우 혈중 지질 수준은 낮추지 못하였다.
실시예 1의 정리
두충 및 산약 혼합물은 30:10의 비율로 혼합시에 남성갱년기 증상에 관여하는 내분비계 호르몬 및 단백질의 발현을 조절하면서도 간 독성 지표와, 혈중 지질 수준을 낮추는 효과가 있는 것을 알 수 있었다. 두충 및 산약을 30:30, 30:90의 비율로 혼합하는 경우에는 남성갱년기 증상에 관여하는 내분비계 호르몬 및 단백질의 발현에 있어서, 일부 호르몬 및 단백질에 대해서만 효과를 나타내거나, 혈중 지질 수준을 낮추지 못하는 점 등이 확인되었다. 따라서, 두충에 대해서 산약을 동일 중량 또는 그 이상으로 포함시킬 경우에는 남성갱년기 증상을 완화시킬 수 없는 것을 알 수 있고, 두충 및 산약을 혼합하는 비율 중에서 30:10 비율이 남성갱년기 증상을 개선하는데 적합한 것을 알 수 있었다.
<제조예 4> 약학적 제제의 제조
<4-1> 산제의 제조
본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물 2 g
유당 1 g
상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
<4-2> 정제의 제조
본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조 방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
<4-3> 캡슐제의 제조
본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
<4-4> 환의 제조
본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물 1 g
유당 1.5 g
글리세린 1 g
자일리톨 0.5 g
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 방법에 따라 1환 당 4g이 되도록 제조하였다.
<4-5> 과립의 제조
본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물 150 ㎎
대두추출물 50 ㎎
포도당 200 ㎎
전분 600 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 30% 에탄올 100 ㎎을 첨가하여 섭씨 60℃에서 건조하여 과립을 형성한 후 포에 충진하였다.
<제조예 5> 건강식품의 제조
<5-1> 밀가루 식품의 제조
본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물 0.5 ~ 5.0 중량부를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하였다.
<5-2> 스프 및 육즙(gravies)의 제조
본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물 0.1 ~ 5.0 중량부를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조하였다.
<5-3> 그라운드 비프(ground beef)의 제조
본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물 10 중량부를 그라운드 비프에 첨가하여 건강 증진용 그라운드 비프를 제조하였다.
<5-4> 유제품(dairy products)의 제조
본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물 5~10 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
<5-5> 선식의 제조
현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물을 진공 농축기에서 감압농축하고, 분무, 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60 메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.
상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물을 다음의 비율로 배합하여 제조하였다.
곡물류(현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부), 종실류(들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부), 본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물(3 중량부), 영지(0.5 중량부), 지황(0.5 중량부)
<제조예 6> 음료의 제조
<6-1> 건강음료의 제조
액상과당(0.5%), 올리고당(2%), 설탕(2%), 식염(0.5%), 물(75%)과 같은 부재료와 본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물 5 g을 균질하게 배합하여 순간 살균을 한 후 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 제조하였다.
<6-2> 야채 주스의 제조
본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물 5 g을 토마토 또는 당근 주스 1,000 ㎖에 가하여 야채 주스를 제조하였다.
<6-3> 과일 주스의 제조
본 발명의 두충 추출물과 산약 추출물의 혼합물 1 g을 사과 또는 포도 주스 1,000 ㎖ 에 가하여 과일 주스를 제조하였다.

Claims (7)

  1. 두충 추출물 및 산약 추출물을 포함하는 남성갱년기 증후군의 예방 또는 개선용 약학적 조성물로서,
    상기 두충 추출물 30중량부에 대해서, 상기 산약 추출물은 5중량부 내지 15중량부로 포함되고,
    상기 두충 추출물 제조시 사용된 용매는 20%(v/v) 내지 35%(v/v) 에탄올 수용액인 남성갱년기 증후군의 예방 또는 개선용 약학적 조성물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 청구항 1에 있어서,
    상기 산약 추출물 제조시 사용된 용매는 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 및 이들의 혼합 용매로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 약학적 조성물.
  6. 청구항 1에 있어서,
    상기 남성갱년기 증후군은 중년의 남성에서 나타나는 정신적 병태, 신체적 병태 및 성적 병태로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 병태로서, 정신적 병태는 우울증, 기분 변화, 신경과민, 불안, 과민, 집중력 저하, 인지 능력 저하, 공간 지각력의 감소 및 기억 저하로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 병태이고, 신체적 병태는 피로증, 현기증, 열감, 홍조, 발한, 지방 과다, 근력 감소, 뼈 질환, 수면 장애, 체모의 감소, 내장 지방 증가, 근육량 감소, 근력 감소, 골밀도 감소, 동맥경화 증가 및 경동맥 혈관 두께 증가, 인슐린 저항성 증가, 무기력, 체력 또는 지구력 감퇴, 피부 변화 및 관절 질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 병태이며, 성적 병태는 감소된 성욕, 발기 부전, 저하된 사정력, 저하된 사정량, 정자수 감소 및 정자의 활동성 감소로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 병태인 약학적 조성물.
  7. 두충 추출물 및 산약 추출물을 포함하는 남성갱년기 증후군 개선용 건강식품 조성물로서,
    상기 두충 추출물 30중량부에 대해서, 상기 산약 추출물은 5중량부 내지 15중량부로 포함되고,
    상기 두충 추출물 제조시 사용된 용매는 20%(v/v) 내지 35%(v/v) 에탄올 수용액인 남성갱년기 증후군 개선용 건강식품 조성물.
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