KR102088569B1 - 천궁 유래 정유 추출물을 포함하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 및 치료용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 천궁(Cnidii Rhizoma) 유래 정유(essential oil) 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 또는 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로, 본 발명의 천궁 유래 정유 추출물은 지방세포의 지방 축적을 억제하고, 지방세포의 분화 및 지방의 대사 조절에 관여하는 단백질의 발현을 조절하는 효과를 나타냄으로써, 비만 등 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료에 유용하게 사용할 수 있고, 셀룰라이트 감소 또는 예방에 유용하게 사용할 수 있다.
Description
본 발명은 천궁(Cnidii Rhizoma) 유래 정유(essential oil) 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 또는 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
비만이란 대사 장애로 인하여 지방이 체내에 과잉 축적된 상태로서, 칼로리 섭취가 성장과 신체활동에 필요한 에너지보다 초과되어 일어나는 열량 불균형 현상으로 야기되며, 대개 체내의 지방이 남자는 체중의 25%, 여자는 30% 이상인 경우를 말한다. 특히 비만은 당뇨, 고지혈증, 심혈관계 질환 및 동맥경화증 등, 각종 대사성 질환의 원인이 될 뿐만 아니라, 비만으로 인한 사망률의 증가는 대사성 질환, 담낭질환, 호르몬 감수성 암과 위장관 암 등에서 명확하게 나타나며, 비만은 또한 비치명적인 요통, 관절염, 불임 등의 신체적 질병과 정신·사회적 기능의 저하 등 정신적 질병의 위험성도 증가시킨다.
AMPK(AMP-activated protein kinase)는 catalytic α subunit, regulatory β 및 γ subunit로 구성되어 있는 serine/threonine kinase이다. 에너지 균형 조절자로서 지질과 포도당을 조절하여 당뇨와 비만의 대사에 중요한 역할을 한다. AMPK는 에너지 소모로 유발된 AMP/ATP ratio의 증가에 따른 γ subunit의 AMP 결합이며, α subunit의 threonine residue Thr172 인산화와 allosteric activation 촉진에 의해 활성화가 유발된다. AMPK의 활성화는 포도당 생성 및 지방 생성을 감소시키며, ACC 및 포도당 산화의 불활성화를 통해 지방산과 같은 ATP 소비에서 활성 ATP 생산 과정으로 전환시킨다. 또한, AMPK의 활성화는 지방산 합성과 콜레스테롤 합성을 조절하는 ACC(acetyl-CoA carboxylase)를 인산화시킴으로서 ACC효소를 불활성화시킨다.
전지방세포에서 지방세포로 분화가 일어나는 과정은 세포형태의 변화, 유전자 발현의 변화, 호르몬 민감성의 변화 그리고 단백질 발현의 변화가 복합적으로 작용하는 과정이다. 지방세포의 형성 과정에서 가장 중요한 조절 인자는 peroxisome proliferator-activated receptor(PPAR)s와 CCAAT/enhancer binding protein(C/EBP)s로 알려져 있다. 분화가 시작되면 초기 전사 인자인 C/EBP-β, C/EBP-δ가 C/EBP-α와 PPAR-γ의 발현량을 증가시키며, 이는 최종적으로 lipoprotein lipase (LPL), leptin, adiponectin, fatty acid binding protein (FABP) 4와 같은 최종 마커들의 발현을 촉진시킨다.
셀룰라이트(cellulite)는 과도한 지방과 노폐물의 축적에 의한 순환장애로 피부가 거친 오렌지 껍질 같이 울퉁불퉁하게 되는 현상으로, 콜라겐과 엘라스틴이 존재하는 피부의 진피층 내에서 생성되며 여성에서 특히 빈번하게 발생한다. 셀룰라이트 비만은 피하 지방조직의 이상 누적 외에도 임파체계의 이상으로 임파액이 인체 조직 간극에 정체됨으로써 그 부위에 일종의 부종현상이 나타나 마치 살이 찐 것처럼 보이는 것으로, 체형 변화의 큰 요인이 된다. 조직 간극에 임파액이 정체되면 비만증과 같은 미용상의 문제뿐만 아니라 체내에 독성물질이 누적되어 피부세포에 악영향을 끼치고 세포의 영양섭취를 위한 이온화 활동을 저해하여 피부의 노화는 물론 세포의 괴사현상까지 유발하게 된다.
항비만 약물에 대한 연구는 전 세계적으로 다양하게 진행되고 있다. 세로토닌과 노르에피네프린의 재흡수를 억제하는 작용을 하는 sibutramine은 심혈관계 부작용으로 인하여 사용 금지되었고, 소장에서 지방분해 효소의 작용을 억제하여 지방흡수를 감소시키는 orlistat는 지방변, 복부불편감 등의 부작용이 있다. 최근에는 locaserine, bupropione-naltrexone, phentermine-topiramate가 비만치료 약물로 사용되고 있으며, 이 중 가장 빈용 처방되는 locaserine은 sibutramine과 유사한 serotonin 활성 관련 약물로서 낮은 빈도의 두통, 오심, 현훈 등의 부작용이 보고되고 있다.
한편, 천궁(川芎, Cnidii Rhizoma)은 미나리과(산형과, Umbelliferae)에 속한 다년생 초본인 궁궁이(Cnidium officinale Makino)의 근경을 건조한 것이며, 성질(性)은 온무독(溫無毒)하고 미(味)는 신고(辛苦)하다. 또한, 천궁은 수세보원(壽世保元)에 방향활혈약(芳香活血藥)으로 분류되어 있으며, 이기(利氣), 활혈(活血), 개규(開竅)하는 작용을 한다고 기록되어 있다. 이러한 천궁은 진정작용, 혈압강하작용, 항균작용, 항산화작용 등 다양한 약리활성에 대한 연구결과가 보고된 바 있으나, 천궁의 방향성 정유 추출물에 대한 항비만 및 지방 축적 억제효과에 관한 연구는 이루어지지 않았다.
이에, 본 발명자들은 항비만 활성 물질을 연구하던 중, 천궁의 정유 추출물이 3T3-L1 세포의 분화 및 지방 축적을 억제할 수 있음을 확인함으로써, 상기 천궁 정유 추출물을 비만 등 대사성 질환 예방, 개선 및 치료 용도와 셀룰라이트 감소 또는 예방 용도로 사용할 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은, 천궁(Cnidii Rhizoma) 유래 정유(essential oil) 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사성 질환의 예방, 치료 또는 개선용 약학적, 건강기능식품 및 건강식품 조성물을 제공하는 것이다.
나아가, 본 발명의 다른 목적은, 천궁(Cnidii Rhizoma) 유래 정유(essential oil) 추출물을 유효성분으로 포함하는 셀룰라이트 감소 또는 예방용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기의 목적을 달성하기 위하여,
본 발명은 천궁(Cnidii Rhizoma) 유래 정유(essential oil) 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 천궁(Cnidii Rhizoma) 유래 정유(essential oil) 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 천궁(Cnidii Rhizoma) 유래 정유(essential oil) 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 천궁(Cnidii Rhizoma) 유래 정유(essential oil) 추출물을 유효성분으로 포함하는 셀룰라이트 감소 또는 예방용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 천궁 유래 정유 추출물은 지방세포의 지방 축적을 억제하고, 지방세포의 분화 및 지방의 대사 조절에 관여하는 단백질의 발현을 조절하는 효과를 나타냄으로써, 비만 등 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료에 유용하게 사용할 수 있으며, 셀룰라이트 감소 또는 예방을 위한 용도로도 유용하게 사용할 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 천궁(Cnidii Rhizoma)으로부터 정유(essential oil)를 추출하는 과정을 나타낸 모식도이다. 여기서, EA는 에틸아세테이트를 이용한 정유 추출물, PE는 석유에테르를 이용한 정유 추출물, SD는 수증기 증류를 이용한 정유 추출물을 의미한다.
도 2는 3T3-L1 세포 분화(differentiation) 및 천궁 정유 추출물(CR) 처리 일정을 나타낸 모식도이다. 여기서, DM은 FBS-DMEM, IBMX, 덱사메타손 및 인슐린을 함유하는 분화용 배지, Post-DM은 FBS-DMEM 및 인슐린을 함유하는 Post-분화용 배지, Final-DM은 FBS-DMEM을 함유하는 Final-분화용 배지를 의미한다.
도 3은 본 발명의 대조군(CON), 양성대조군(fenofibrate, FF) 및 추출 용매별 천궁 정유 추출물 처리군 (a)EA, (b)PE 및 (c)SD의 처리 농도에 따른 3T3-L1 전지방세포의 세포생존율(%)을 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 대조군(CON), 양성대조군(fenofibrate, FF) 및 추출 용매별 천궁 정유 추출물 처리군(EA, PE, SD)에 의한 3T3-L1 세포의 지방축적정도(%)를 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 대조군(CON), 양성대조군(fenofibrate, FF) 및 추출 용매별 천궁 정유 추출물 처리군(EA, PE, SD)에 의한 3T3-L1 세포에서의 P-AMPK 및 AMPK 단백질 발현을 western blot을 통해 분석한 결과를 나타낸 (a) 이미지 및 (b) 그래프이다.
도 6은 본 발명의 대조군(CON), 양성대조군(fenofibrate, FF) 및 추출 용매별 천궁 정유 추출물 처리군(EA, PE, SD)에 의한 3T3-L1 세포에서의 P-ACC 및 ACC 단백질 발현을 western blot을 통해 분석한 결과를 나타낸 (a) 이미지 및 (b) 그래프이다.
도 7은 본 발명의 대조군(CON), 양성대조군(fenofibrate, FF) 및 추출 용매별 천궁 정유 추출물 처리군(EA, PE, SD)에 의한 3T3-L1 세포에서의 C/EBP-α 단백질 발현을 western blot을 통해 분석한 결과를 나타낸 (a) 이미지 및 (b) 그래프이다.
도 8은 본 발명의 대조군(CON), 양성대조군(fenofibrate, FF), 에틸아세테이트를 이용한 천궁 정유 추출물 처리군(EA) 및 리구스틸라이드 처리군(LIG)에 의한 3T3-L1 세포의 지방축적정도(%)를 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 3T3-L1 세포 분화(differentiation) 및 천궁 정유 추출물(CR) 처리 일정을 나타낸 모식도이다. 여기서, DM은 FBS-DMEM, IBMX, 덱사메타손 및 인슐린을 함유하는 분화용 배지, Post-DM은 FBS-DMEM 및 인슐린을 함유하는 Post-분화용 배지, Final-DM은 FBS-DMEM을 함유하는 Final-분화용 배지를 의미한다.
도 3은 본 발명의 대조군(CON), 양성대조군(fenofibrate, FF) 및 추출 용매별 천궁 정유 추출물 처리군 (a)EA, (b)PE 및 (c)SD의 처리 농도에 따른 3T3-L1 전지방세포의 세포생존율(%)을 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 대조군(CON), 양성대조군(fenofibrate, FF) 및 추출 용매별 천궁 정유 추출물 처리군(EA, PE, SD)에 의한 3T3-L1 세포의 지방축적정도(%)를 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 대조군(CON), 양성대조군(fenofibrate, FF) 및 추출 용매별 천궁 정유 추출물 처리군(EA, PE, SD)에 의한 3T3-L1 세포에서의 P-AMPK 및 AMPK 단백질 발현을 western blot을 통해 분석한 결과를 나타낸 (a) 이미지 및 (b) 그래프이다.
도 6은 본 발명의 대조군(CON), 양성대조군(fenofibrate, FF) 및 추출 용매별 천궁 정유 추출물 처리군(EA, PE, SD)에 의한 3T3-L1 세포에서의 P-ACC 및 ACC 단백질 발현을 western blot을 통해 분석한 결과를 나타낸 (a) 이미지 및 (b) 그래프이다.
도 7은 본 발명의 대조군(CON), 양성대조군(fenofibrate, FF) 및 추출 용매별 천궁 정유 추출물 처리군(EA, PE, SD)에 의한 3T3-L1 세포에서의 C/EBP-α 단백질 발현을 western blot을 통해 분석한 결과를 나타낸 (a) 이미지 및 (b) 그래프이다.
도 8은 본 발명의 대조군(CON), 양성대조군(fenofibrate, FF), 에틸아세테이트를 이용한 천궁 정유 추출물 처리군(EA) 및 리구스틸라이드 처리군(LIG)에 의한 3T3-L1 세포의 지방축적정도(%)를 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
본 발명은 천궁(Cnidii Rhizoma) 유래 정유(essential oil) 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 사용되는 용어 "추출물(extract)"은 추출 대상을 적절한 침출액으로 수득하고 침출액을 증발시켜 농축한 제제를 의미하는 것으로, 이에 제한되지는 않으나, 추출처리에 의해 얻어지는 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 이들의 조정제물 또는 정제물일 수 있다. 상기 천궁 유래 정유 추출물은 통상의 기술분야에 공지된 일반적인 추출방법, 분리 및 정제방법을 이용하여 제조할 수 있다. 상기 추출방법으로는, 이에 제한되지는 않으나, 바람직하게 용매 추출, 수증기 증류, 압착, 유지흡수, 휘발성 유기용제 추출, 또는 초임계 유체 추출, 열탕 추출, 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 방법을 사용할 수 있고, 바람직하게는 용매 추출 또는 수증기 증류의 방법을 사용하는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 약학적 조성물에 있어서, 상기 정유 추출물은 물, 에틸아세테이트 및 석유에테르로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 용매를 이용하여 추출되는 것일 수 있고, 바람직하게는 에틸아세테이트를 용매로 이용하여 추출되는 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에서는 추출 용매로서 물(증류수), 에틸아세테이트 및 석유에테르를 이용하여 수증기 증류법 또는 용매 추출법을 통해 천궁으로부터 정유 성분을 추출하여 '천궁 정유 추출물'을 수득하였다. 본 발명의 일실시예에 따르면, 본 발명의 상기 에틸아세테이트를 이용한 천궁 정유 추출물은 물(증류수) 또는 석유에테르를 이용하여 추출한 천궁 정유 추출물보다 더 우수한 지방 생성 억제 및 지방 축적 억제 효과를 갖는다(실험예 2 내지 4 참조).
본 발명의 일실시예에 따르면, 상기 에틸아세테이트를 이용한 천궁 정유 추출물(EA)은 (1) 에틸아세테이트를 용매로 이용하여 천궁 분쇄물로부터 천궁 추출물을 제조하는 단계; (2) 상기 천궁 추출물에 에탄올을 첨가하여 정유 성분을 침전시키는 단계; 및 (3) 여과 및 농축을 통해 정제된 천궁 정유 추출물을 제조하는 단계;를 포함하는 방법으로 제조되는 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따르면, 상기 석유에테르를 이용한 천궁 정유 추출물(PE)은 (1) 석유에테르를 용매로 이용하여 천궁 분쇄물로부터 천궁 추출물을 제조하는 단계; (2) 상기 천궁 추출물에 에탄올을 첨가하여 정유 성분을 침전시키는 단계; 및 (3) 여과 및 농축을 통해 정제된 천궁 정유 추출물을 제조하는 단계;를 포함하는 방법으로 제조되는 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따르면, 상기 물(증류수)를 이용한 천궁 정유 추출물은 수증기 증류를 이용한 천궁 정유 추출물(SD)일 수 있으며, (1) 증류수를 용매로 이용하여 가열하여 천궁 분쇄물로부터 천궁 증류액을 제조하는 단계; (2) 상기 천궁 증류액에 무수황산나트륨을 첨가하여 탈수시키는 단계; 및 (3) 원심분리하여 상층부(supernatant)에 부유하는 성분을 취하여 천궁 정유 추출물을 제조하는 단계;를 포함하는 방법으로 제조되는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 약학적 조성물에 있어서, 상기 대사성 질환은 비만, 당뇨병, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있고, 바람직하게는 비만, 당뇨 및 고콜레스테롤증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있으며, 더 바람직하게는 비만일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따르면, 본 발명에 따른 천궁 정유 추출물은 지방세포의 분화 및 지방 생성을 억제하고, 지방 세포에서 AMPK 및 ACC 인산화를 유의적으로 증가시키고, C/EBP-α의 발현을 유의적으로 감소시킴으로써, 지방 축적 억제 및 지방 대사 조절 효과를 나타내므로, 비만 등 대사성 질환을 예방, 개선 또는 치료할 수 있음을 확인하였다(실험예 3 내지 5 참조).
본 발명의 천궁 유래 정유 추출물은 임상 투여시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있으며, 바람직하게는 경구 투여, 경피 투여, 국소 투여, 흡입 투여, 비강내 투여, 정맥내 투여, 진피내 투여, 복강내 투여, 주사 및 피하 주사용 제형으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 제형으로 투여되는 것일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조된다.
경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환자, 산제, 과립제, 캡슐제, 트로키제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 본 발명의 왕불류행 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스(sucrose), 락토오스(lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결건조제제, 좌제, 크림, 겔, 스프레이, 점적제(drops) 등이 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 천궁 유래 정유 추출물의 인체에 대한 효과적인 투여량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로 약 0.01-1000 mg/kg/일이며, 바람직하게는 0.1-500 mg/kg/일 수 있고, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정시간 간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 유효성분으로서 천궁 유래 정유 추출물 이외에 공지된 대사성 질환 치료제를 추가로 포함할 수 있고, 이들 질환의 치료를 위해 공지된 다른 치료와 병용될 수 있다.
대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 및 건강식품 조성물
본 발명은 천궁(Cnidii Rhizoma) 유래 정유(essential oil) 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 건강기능식품 조성물에 있어서, 상기 천궁 유래 정유 추출물은 상기 정유 추출물은 물, 에틸아세테이트 및 석유에테르로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 용매를 이용하여 추출되는 것일 수 있고, 바람직하게는 에틸아세테이트를 용매로 이용하여 추출되는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 건강기능식품 조성물에 있어서, 상기 대사성 질환은 비만, 당뇨병, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있고, 바람직하게는 비만, 당뇨 및 고콜레스테롤증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있으며, 더 바람직하게는 비만일 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "건강기능식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 '기능성'이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 통상의 기술분야에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 통상의 기술분야에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 상기 건강기능식품의 제형 또한 건강기능식품으로 인정되는 제형이면 제한없이 제조될 수 있다. 본 발명의 건강기능식품 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 본 발명의 건강기능식품은 대사성 질환 치료제의 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
또한, 본 발명은 천궁(Cnidii Rhizoma) 유래 정유(essential oil) 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 건강식품 조성물에 있어서, 상기 천궁 유래 정유 추출물은 상기 정유 추출물은 물, 에틸아세테이트 및 석유에테르로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 용매를 이용하여 추출되는 것일 수 있고, 바람직하게는 에틸아세테이트를 용매로 이용하여 추출되는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 건강식품 조성물에 있어서, 상기 대사성 질환은 비만, 당뇨병, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있고, 바람직하게는 비만, 당뇨 및 고콜레스테롤증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있으며, 더 바람직하게는 비만일 수 있다.
본 발명의 조성물을 건강기능식품 조성물 또는 건강식품 조성물로 사용하는 경우, 상기 천궁 유래 정유 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상의 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 상기 조성물은 유효성분 이외에 식품학적으로 허용가능한 식품보조첨가제를 포함할 수 있으며, 유효성분의 혼합량은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품 또는 건강식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 조성물이 사용될 수 있는 건강기능식품 또는 건강식품의 종류에는 제한이 없다. 아울러 본 발명의 천궁 유래 정유 추출물을 활성성분으로 포함하는 조성물은 당업자의 선택에 따라 건강기능식품에 함유될 수 있는 적절한 기타 보조 성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 추출물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다.
셀룰라이트
감소 또는 예방용
화장료
조성물
본 발명은 천궁(Cnidii Rhizoma) 유래 정유(essential oil) 추출물을 유효성분으로 포함하는 셀룰라이트 감소 또는 예방용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 천궁 유래 정유 추출물은 상기 정유 추출물은 물, 에틸아세테이트 및 석유에테르로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 용매를 이용하여 추출되는 것일 수 있고, 바람직하게는 에틸아세테이트를 용매로 이용하여 추출되는 것일 수 있다.
상기 화장료 조성물은, 예를 들면 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀), 비이온형의 소낭 분산제의 형태, 크림, 스킨, 로션, 오일, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 포말(foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다.
또한, 상기 화장료 조성물은 본 발명의 상기 천궁 유래 정유 추출물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 통상적으로 함유되는 화장료 조성물에 본 발명의 상기 천궁 유래 정유 추출물이 0.1 내지 50 중량%, 바람직하게는 1 내지 10 중량%의 양으로 첨가될 수 있다.
본 발명에 따른 천궁 유래 정유 추출물을 피부 외용제로 사용하는 경우, 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 피부용 외용제에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 또한, 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.
본 발명에 따른 천궁 유래 정유 추출물은 천연 식물을 원료로 하므로 약학적, 식품 또는 화장료 조성물로 사용할 경우에도 일반적인 합성 화합물에 비하여 부작용이 덜할 수 있으므로, 안전하게 약학적 조성물, 건강기능식품, 건강식품 및 화장료 조성물에 포함되어 유용하게 사용될 수 있다.
하기의 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명의 내용을 구체화하기 위한 것일 뿐 이에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
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준비예
1> 시약
및 기기
1-1. 한약재 및 시약
본 발명의 실시예 및 실험예에서 사용된 천궁(양양, 한국)은 대원약업사(대구, 한국)에서 구입하여 사용하였다. 그리고 3T3-L1 세포 배양 및 지방구 염색에 사용된 시약 중 우아혈청(bovine calf serum, BCS), 우태아혈청(fetal bovine serum, FBS), Dulbecco′s modified Eagle′s medium(DMEM)은 Hyclone사(Logan, USA) 제품을 구입하였고, 페니실린(penicillin), 스트렙토마이신(streptomycin), 인슐린(insulin), 덱사메타손(dexamethasone), 이소부틸 메틸잔틴(isobutyl methyl xanthine, IBMX), 카코딜산염(cacodylate), 글루타르알데하이드(glutaraldehyde), 3-(4,5-methylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyletetrazolium bromide(MTT)와 Oil red-O 용액은 Sigma사(St. Louis, USA)로부터 구입하였다. 또한, 우태아혈청(fetal bovine serum, FBS)은 Fisher scientific(Gibco®, Pittsburg, USA) 제품, 디메틸 술폭시드(dimethyl sulfoxide, DMSO), CaCl2는 덕산약품(안산, 한국) 제품을 사용 하였으며, 포름알데하이드(formaldehyde), 이소프로필 알콜(isopropyl alcohol)은 Junsei chemical(Tokyo, Japan) 제품을 사용하였다. 그리고 세포 용해에 사용된 프로테아제 억제제(protease inhibitor) 및 인산화효소 억제제(phosphatase inhibitor)와 방사선면역 침전분석(radioimmunoprecipitation assay, RIPA) 버퍼(buffer)는 Thermo scientific사(Rockford, USA)로부터 구입하였다. 또한, 웨스턴 블랏(western blot) 분석 시약인 도데실황산나트륨(sodium dodecyl sulfate, SDS)은 BIO-RAD(Hercules, USA), C/EBP-α, β-actin의 1차 항체는 Santa-Cruz Biotechnology사(Dallas, USA), P-AMPK, AMPK, P-ACC, ACC의 1차 항체는 Cell Signaling(Danvers, USA)으로부터 구입하였으며, 2차 항체는 GeneTex(Irvine, USA), ECL 시약은 GE Healthcare(Amersham™, Chalfont Saint Giles, UK)로부터 구매하였다. 시료의 추출에는 일정 순도 이상의 에틸아세테이트(99.5% ethyl acetate, 덕산약품, 안산, 한국), 석유에테르(99% petroleum ether, 대정화금(주), 시흥, 한국) 및 에탄올(95% ethanol, 대한주정라이프, 서울, 한국)을 사용하였으며, 무수황산나트륨(덕산약품, 안산, 한국)은 1급 시약을 사용하였다.
1-2. 기기
정유 추출과정에서 사용된 회전증발농축기는 Buchi(Rotavapor R-300, Flawii, Swiss) 제품을 사용하였고, 세포의 분화 및 지방구는 현미경(AE31, Motic, Xiamen, China)을 통해 관찰하고 분광광도계(Sunrise, Tecan, Grodig, Austria)를 통해 흡광도로 분석하였다. 그리고 지방대사 관련 단백질은 Lugen™ Sensi-Q2000 Chemidoc((주)루젠에스씨아이, 부천, 한국)을 통해 분석하였다.
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실시예
1> 에틸아세테이트를 이용한 천궁 정유 추출물의 제조
에틸아세테이트(ethyl acetate, EA)를 이용한 천궁(Cnidii Rhizoma) 정유 추출물(EA)은 용매추출법을 이용하여 제조하였다.
구체적으로, 건조된 천궁(Cnidii Rhizoma) 100g을 분쇄하여 1ℓ의 에틸아세테이트를 첨가한 다음, 72시간 동안 상온 추출하고 Advantec Filter paper No. 2(Toyo Roshi Kaisha Ltd, Tokyo, Japan)로 여과한 후, 여과액을 회전증발농축기로 감압 농축하였다. 농축된 정유성분에 에탄올(ethanol)을 첨가하여 정유 성분을 침전시키고, 여과를 통해 얻은 여과물을 진공회전농축기에서 감압농축한 후, 농축 추출물로부터 유기용매를 완전히 제거하여 정제된 정유를 얻었다(도 1). 최종 에틸아세테이트 용매로부터 추출된 천궁 정유(EA)의 수율은 3.54%이었으며, 실험을 시작할 때까지 4℃이하의 냉장실에서 보관하였다.
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실시예
2>
석유에테르를
이용한 천궁 정유 추출물의 제조
석유에테르(petroleum ether, PE)를 이용한 천궁 정유 추출물(PE)은 에틸아세테이트 용매 대신 석유에테르(1ℓ)를 이용한 것을 제외하고 상기 실시예 1과 동일한 용매추출법을 이용하여 제조하였다(도 1). 최종 석유에테르 용매로부터 추출된 천궁 정유(PE)의 수율은 1.82%이었으며, 실험을 시작할 때까지 4℃이하의 냉장실에서 보관하였다.
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실시예
3> 수증기 증류를 이용한 천궁 정유 추출물의 제조
증류수(distilled water)를 용매로 이용하여 수증기증류법(steam distillation, SD)을 이용한 천궁 정유 추출물(SD)을 제조하였다.
구체적으로, 건조된 천궁 100g을 분쇄하여 1ℓ의 증류수를 첨가한 다음, 정유정량장치를 사용하여 110℃에서 3시간 가열한 후 증류액을 얻었다. 증류액을 농축시킨 다음 무수황산나트륨을 가하여 탈수시키고, 원심분리한 후 상층부(supernatant)에 부유하는 성분을 취하여 정유를 수득하였다(도 1). 최종 수증기증류법을 통해 증류수로부터 추출된 천궁 정유(SD)의 수율은 0.43%이었으며, 실험을 시작할 때까지 4℃이하의 냉장실에서 보관하였다.
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실험예
1> 실험 준비
1-1. 세포배양
3T3-L1 세포주는 American type culture collection(ATCC, Manassas, USA)에서 구입하여 사용하였다. 세포는 10%의 BCS, 1% penicillin streptomycin을 첨가한 DMEM 배지에서 37℃, 5% CO2에서 8일간 배양 후, confluent한 상태가 되면 10% FBS가 첨가된 DMEM 배지에서 분화를 유도하면서 시료를 처리하였다. 그 다음, 도 2에 나타난 바와 같이, 분화가 시작한 시점(D-0)에서는 10% FBS, 1% penicillin/streptomycin, 10㎍/㎖ insulin, 2μM dexamethasone, 0.5μM isobutyl methyl xanthine(IBMX)이 포함된 DMEM 배지(differentiation medium, DM)로 교환하여 배양하고, 2일 후(D-2)에 10% FBS, 1% penicillin/streptomycin, 5㎍/㎖ insulin이 포함된 DMEM 배지(post-differentiation medium, Post-DM)로 다시 교체하였으며, D-5일 이후, insulin이 무첨가된 10% FBS 함유 DMEM 배지(final-differetiation medium, Final-DM)로 배양하였다.
1-2. 시료의 처리
상기 실험예 1-1의 세포 배양 과정 중, 분화가 시작된 시점(D-0)부터 3T3-L1 세포를 대조군(control, CON), 양성대조군(fenofibrate, FF), 천궁의 정유처리군(Cnidii Rhizoma, CR)으로 나눈 후, 2일 마다 분화 배지 교환 시 각각의 시료를 처리하였다(도 2). 정유처리군(CR)은 다시 3군으로 구분하여 추출법을 달리한 정유 시료인 실시예 1 내지 3의 EA(에틸아세테이트를 이용한 천궁 정유 추출물), PE(석유에테르를 이용한 천궁 정유 추출물) 및 SD(수증기 증류를 이용한 천궁 정유 추출물)를 각각 0.01∼0.2㎎/㎖로 농도를 달리하여 처리하였다. 한편, CON군에는 DMSO를 40 μM, FF군에는 동량의 fenofibrate(FF)를 CR군과 같은 일정으로 처리하였다.
1-3. 통계처리
모든 결과의 통계처리는 IBM SPSS statistics 22를 이용하여 산출되었으며, 군간의 평균차이에 대한 유의성 검정은 one-way analysis of variance(ANOVA)를 실시하였다. 다 군간의 차이는 Ducan’s multiple range test에 P<0.0.5 이상의 수준에서 사후검정을 실시하였으며, mean±S.E(Standard error)로 표시하였다.
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실험예
2> 천궁 정유의 추출 용매에 따른 세포 생존율에 미치는 영향 분석
대조군(CON), 양성대조군(FF) 및 천궁 정유 추출물 처리군(CR; EA, PE, SD) 각각의 시료가 3T3-L1 세포독성에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 96 well plate에 5×104 cells/㎖로 세포를 분주하여 confluent한 상태까지 배양하였다. 그 후 분화유도와 동시에 추출용매별 천궁 정유추출물(EA, PE, SD)을 각 농도(0.01, 0.02, 0.05, 0.1 및 0.2㎎/㎖)로 처리하였다. 48시간 배양 후 MTT 용액 200㎕를 넣어 37℃, 5% CO2 incubator에서 4시간 반응시킨 뒤, MTT 용액을 완전히 제거한 다음 DMSO를 200㎕씩 분주하여 생성된 formazan을 모두 녹인 후 분광광도계로 570㎚에서의 흡광도를 측정하였다.
먼저, 도 3A에 나타난 바와 같이, 3T3-L1 세포에 EA(에틸아세테이트를 이용한 천궁 정유 추출물)를 0.01, 0.02, 0.05, 0.1 및 0.2㎎/㎖ 농도로 처리한 결과, CON군에 비해 0.2㎎/㎖ 처리군을 제외한 모든 농도에서 세포생존율이 유의하게 높았다. 또한 FF군보다 높은 세포생존율을 보였다.
도 3B에 나타난 바와 같이, PE(석유에테르를 이용한 천궁 정유 추출물)를 0.01, 0.02, 0.05, 0.1 및 0.2㎎/㎖ 농도로 처리한 실험에서도 CON군에 비해 0.2㎎/㎖ 처리군을 제외한 모든 농도에서 세포생존율을 유의하게 높은 것으로 나타났다. 또한 FF군에 비해 유의하게 세포생존율이 높게 나타났다.
도 3C에 나타난 바와 같이, SD(수증기 증류를 이용한 천궁 정유 추출물)를 0.01, 0.02, 0.05, 0.1 및 0.2㎎/㎖ 농도로 처리한 실험에서는 CON군에 비해 0.01 및 0.02㎎/㎖ 처리군에서 세포생존율이 높게 나타났으며, 0.01㎎/㎖에서는 CON군 및 FF군에 비해 유의하게 높은 세포생존율을 보였다.
즉, 0.1 ㎎/㎖ 이하의 농도 범위까지 EA와 PE가 유사하게 세포독성을 보이지 않았으며, SD는 0.02 ㎎/㎖ 이하의 농도까지 세포독성을 보이지 않았다.
이후 실험예에서는 모든 정유추출물에서 세포생존율이 가장 높게 나타난 0.01㎎/㎖ 농도 이하로 세포를 처리하였다.
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실험예
3> 천궁 정유의 추출 용매에 따른 3T3-L1 세포의 분화 및 지방 축적에 미치는 영향 분석
3T3-L1 세포의 분화 및 지방 축적에 미치는 영향을 관찰하기 위하여, Oil red-O 염색을 실시하였다.
구체적으로, 분화시킨 3T3-L1 세포에 추출 용매별 천궁 정유(EA, PE, SD) 각 0.01㎎/㎖를 이틀에 한 번씩 배지를 교환하여 처리하였다. 6일 후 세포 배양액을 제거한 뒤 phosphate buffered saline(PBS)로 2회 세척하고 pH 7.2 cacodylate buffer로 4℃에서 세포를 3시간 동안 고정시켰다. 고정시킨 세포에 Oil red-O solution을 3㎖씩 넣어 1시간 동안 지방구를 염색한 다음 40% isopropyl alcohol로 세척한 후 증류수 1㎖을 넣어 현미경으로 관찰하였다. 염색된 지방세포의 지방함량 측정을 위하여 건조시킨 다음 100% isopropyl alcohol로 지방을 추출하여 흡광도 값이 1±0.05 이하로 나오도록 희석한 후, 510㎚ 파장에서 분광광도계로 흡광도를 측정하여, 대조군(100%) 대비 지방축적정도(%)를 측정하였다.
그 결과, 도 4에 나타난 바와 같이, CON군 뿐만 아니라 양성대조군인 FF군에 비해 모든 천궁 정유 처리군(EA, PE 및 SD 각각 0.01㎎/㎖)에서 유의하게 세포 내 지방축적 및 세포분화를 억제시키는 것으로 나타났으며, 특히, EA가 세포분화 및 지방축적을 가장 많이 억제한 것으로 확인되었다.
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실험예
4> 천궁 정유의 추출 용매에 따른 지방세포 분화 및 지방생성 관련 단백질 발현에 미치는 영향 분석
3T3-L1 전지방세포의 세포분화 및 성숙 지방세포의 지방생성에 관여하는 단백질 발현을 관찰하기 위하여, 대조군(CON), 양성대조군(FF) 및 추출 용매별 천궁 정유 추출물(EA, PE 및 SD)를 처리한 3T3-L1 세포를 대상으로 웨스턴 블랏(western blot)을 실시하였다.
구체적으로, 실험예 1에서 분화가 종료된 세포(D-7)를 PBS로 세척하고, protease inhibitor 및 phosphatase inhibitor를 각각 첨가한 radioimmunoprecipitation assay(RIPA) buffer를 적당량 첨가하여 세포를 용해시켰다. 그 후 세포를 수거하여 21G needle로 분쇄시키고 13,000 rpm, 4℃, 30분간 원심분리하여 상층액을 취한 후 Bradford법을 사용하여 단백질 정량을 하였다. 정량된 단백질의 적정량을 12% SDS-poiyacrylmide gel eletrophoresis(SDS PAGE)에서 분리한 후 polyvinylidene fluoride(PVDF) membrane으로 전이시키고 단백질이 전이된 membrane을 5% skim milk 처리하여 비 특이적인 단백질에 대한 blocking을 실시하였다. 연이어 AMPK, P-AMPK, ACC, P-ACC, C/EBP-α 및 β-actin의 단백질 항체를 4℃에서 각각 overnight 반응 처리하여 tris-buffered saline과 Tween 20을 혼합한 TBST로 세척하고 각각의 단백질 항체에 알맞은 2차 항체를 4℃에서 1시간 동안 반응시킨 후 ECL 시약을 10초간 처리하여 Chemidoc system을 이용해 western band를 검출하였다.
3T3-L1 세포에 EA, PE 및 SD 각각을 0.01㎎/㎖ 농도로 처리하고 western blot 분석을 수행하여 에너지 대사 및 지방대사를 조절하는 P-AMPK 및 AMPK의 단백 발현을 확인한 결과, 도 5에 나타난 바와 같이, 3가지 천궁 정유 추출물 처리군 모두 CON군에 비해 유의한 P-AMPK/AMPK의 발현 증가를 보였으며, 특히, EA군은 FF군보다도 현저히 우수한 P-AMPK/AMPK 발현 증가가 나타났다.
지방산 합성과 콜레스테롤 합성을 조절하는 P-ACC 및 ACC의 단백 발현에 미치는 영향을 확인한 결과, 도 6에 나타난 바와 같이, PE 및 SD군의 경우 CON군 및 FF군에 비하여 유의성 있는 발현 증가를 보이지 않은 반면, EA군의 경우, CON군 및 FF군에 비해 P-ACC/ACC의 발현이 유의하게 증가한 것으로 나타났다.
지방세포의 형성 과정에서 전지방세포에서 지방세포로 분화하는데 가장 중요한 조절 인자 중 하나인 C/EBP-α의 단백발현에 미치는 영향을 확인한 결과, 도 7에 나타난 바와 같이, 천궁 정유 처리군인 EA, PE 및 SD군 모두 CON군 및 FF군에 비해 C/EBP-α의 발현이 감소하는 것으로 나타났으며, 특히 EA 처리군에서 가장 현저한 C/EBP-α의 발현 감소를 보였다.
결과적으로, 천궁 정유 추출물이 항비만 효과를 나타낼 수 있음을 확인하였으며, 특히 본 발명 실시예 1의 에틸아세테이트를 이용한 천궁 정유 추출물(EA)이 지방세포의 분화 및 지방의 대사 조절에 관여하는 단백질의 발현 조절을 통한 세포분화 및 지방 축적 억제 효과가 가장 뛰어남을 확인하였다.
<
실험예
5> 천궁 정유와
리구스틸라이드의
지방 축적 억제 효과 분석
에틸아세테이트를 이용한 천궁 정유 추출물(EA)과 리구스틸라이드(ligustilide, LIG; Sigma, St. Louis, MO, USA)의 3T3-L1 세포의 분화 및 지방 축적에 미치는 영향을 비교하기 위하여, EA 0.01 및 0.02㎎/㎖ 처리군 및 리구스틸라이드(LIG) 0.5 및 1μM 처리군으로 구분하여, 상기 실험예 1 및 3과 동일한 방법으로 Oil red-O 염색을 실시하였다.
그 결과, 도 8에 나타난 바와 같이, LIG 0.5 및 1μM 처리군은 각각 대조군 대비 지방축적정도(%)가 93.64% 및 78.68% 수준으로, 농도 의존적으로 억제되는 것으로 나타났으나, EA 0.01 및 0.02㎎/㎖ 처리군의 경우 대조군 대비 지방축적정도(%)가 각각 65.36% 및 57.11% 수준으로 억제 되는 것으로 나타나, LIG 보다 지방 축적 억제율이 더 큰 것으로 확인되었다.
따라서, 상기 실험결과로부터, 본 발명의 실시예 1의 에틸아세테이트를 이용한 천궁 정유 추출물(EA)이 리구스틸라이드(LIG)보다 3T3-L1 세포의 분화 및 지방 축적을 억제하는 효과가 더 우수함을 확인하였다.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허 청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.
Claims (11)
- (단계 1) 천궁 분말을 에틸아세테이트로 상온에서 추출하는 단계;
(단계 2) 상기 추출물의 여과액을 농축하는 단계;
(단계 3) 상기 농축액에 에탄올을 첨가하여 침전시키고 여과한 여과물을 얻는 단계; 및
(단계 4) 상기 여과물을 농축하고 유기용매를 제거하여 정유를 얻는 단계;
를 포함하여 제조되는, 천궁(Cnidii Rhizoma) 유래 정유(essential oil)를 유효성분으로 포함하는,
비만, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간으로 이루어진 군으로부터 선택되는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 삭제
- 삭제
- 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 대사성 질환은 비만인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 약학적 조성물은 경구 투여, 경피 투여, 국소 투여, 흡입 투여, 비강내 투여, 정맥내 투여, 진피내 투여, 복강내 투여, 주사 및 피하 주사용 제형으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 제형으로 투여되는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물. - (단계 1) 천궁 분말을 에틸아세테이트로 상온에서 추출하는 단계;
(단계 2) 상기 추출물의 여과액을 농축하는 단계;
(단계 3) 상기 농축액에 에탄올을 첨가하여 침전시키고 여과한 여과물을 얻는 단계; 및
(단계 4) 상기 여과물을 농축하고 유기용매를 제거하여 정유를 얻는 단계;
를 포함하여 제조되는, 천궁(Cnidii Rhizoma) 유래 정유(essential oil)를 유효성분으로 포함하는,
비만, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간으로 이루어진 군으로부터 선택되는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물. - 삭제
- (단계 1) 천궁 분말을 에틸아세테이트로 상온에서 추출하는 단계;
(단계 2) 상기 추출물의 여과액을 농축하는 단계;
(단계 3) 상기 농축액에 에탄올을 첨가하여 침전시키고 여과한 여과물을 얻는 단계; 및
(단계 4) 상기 여과물을 농축하고 유기용매를 제거하여 정유를 얻는 단계;
를 포함하여 제조되는, 천궁(Cnidii Rhizoma) 유래 정유(essential oil)를 유효성분으로 포함하는,
비만, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간으로 이루어진 군으로부터 선택되는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물. - 삭제
- (단계 1) 천궁 분말을 에틸아세테이트로 상온에서 추출하는 단계;
(단계 2) 상기 추출물의 여과액을 농축하는 단계;
(단계 3) 상기 농축액에 에탄올을 첨가하여 침전시키고 여과한 여과물을 얻는 단계; 및
(단계 4) 상기 여과물을 농축하고 유기용매를 제거하여 정유를 얻는 단계;
를 포함하여 제조되는, 천궁(Cnidii Rhizoma) 유래 정유(essential oil)를 유효성분으로 포함하는 셀룰라이트 감소 또는 예방용 화장료 조성물.
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| KR1020180066599A KR102088569B1 (ko) | 2018-06-11 | 2018-06-11 | 천궁 유래 정유 추출물을 포함하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 및 치료용 조성물 |
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020180066599A KR102088569B1 (ko) | 2018-06-11 | 2018-06-11 | 천궁 유래 정유 추출물을 포함하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 및 치료용 조성물 |
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| KR1020180066599A KR102088569B1 (ko) | 2018-06-11 | 2018-06-11 | 천궁 유래 정유 추출물을 포함하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 및 치료용 조성물 |
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-
2018
- 2018-06-11 KR KR1020180066599A patent/KR102088569B1/ko active IP Right Grant
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| KR20190140161A (ko) | 2019-12-19 |
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