KR102065913B1 - 인삼 및 녹차의 발효물에서 추출한 다당체를 함유하는 미백용 및 자외선 차단용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 인삼 다당체와 녹차 다당체를 함유하는 미백용 및 자외선 차단용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 인삼 및 녹차의 발효물로부터 추출한 각각의 다당체를 혼합하여 사용함으로써 미백효과, 자외선 차단 효과 및 자외선에 의한 피부손상 방지 효과가 우수한 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 인삼 다당체와 녹차 다당체를 함유하는 미백용 및 자외선 차단용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 인삼 및 녹차의 발효물로부터 추출한 각각의 다당체를 혼합하여 사용함으로써 미백효과, 자외선 차단 효과 및 자외선에 의한 피부손상 방지 효과가 우수한 조성물에 관한 것이다.
사람의 피부색은 멜라닌 색소를 만드는 멜라노사이트(melanocyte)의 활동성, 혈관의 분포, 피부의 두께 및 카로티노이드 및 빌리루빈 등 인체 내외의 색소 함유 유무와 같은 여러 요인들에 의해 결정되며 그 중 멜라노사이트에서 타이로시나제 등의 여러 효소가 작용하여 생성되는 멜라닌이라는 흑색 색소가 가장 중요하다. 멜라닌 색소의 형성에는 유전적 요인, 호르몬 분비 및 스트레스 등과 관련된 생리적 요인 및 자외선 조사 등과 같은 환경적 요인이 영향을 미친다. 멜라닌은 피부에 존재하여 자외선 등으로부터 신체를 보호하는 중요한 기능을 가지고 있지만 멜라닌이 과잉 생산됨으로써 기미 또는 주근깨 등을 형성할 뿐 아니라 피부노화를 촉진하며 피부암 유발에도 중요한 작용을 하는 것으로 알려져 있다.
기미, 주근깨 또는 색소침착 등과 같은 피부색소 이상침착 증상과 자외선 노출 등에 의해 발생된 과도한 멜라닌색소 침착을 치료 또는 경감시켜주기 위해서 이전부터 아스코르빈산, 코지산, 알부틴, 하이드로퀴논, 글루타치온 또는 이들의 유도체, 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합 사용하여 왔는데, 이들은 불충분한 미백효과, 피부에 대한 안전성 문제, 화장료에 배합시 제형 및 안정성 문제 등으로 인해 그 사용이 제한되고 있다.
태양광에 포함된 자외선은 피부에 과도하게 조사되는 경우 홍반 형성이나 피부세포 내의 멜라닌색소 생성을 촉진시켜 기미나 잡티 발생의 원인이 되기도 하며 표피에 분비되는 피지와 반응하여 과산화지질을 생성함으로써 피부트러블을 발생시키기도 할 뿐만 아니라, 심할 경우 피부암 발생의 원인이 되기도 한다. 자외선은 그 파장에 따라 UV-A(320~400nm), UV-B(280~320nm) 및 UV-C(200~280nm)로 나누며, 짧은 파장인 UV-C로 갈수록 에너지가 크지만 짧은 파장의 자외선은 대기 중에서 대부분 흡수되므로 인체에 직접적인 영향을 주는 자외선은 UV-A와 UV-B로 알려져 있다.
자외선에 의한 피부 손상 방지를 목적으로 사용되고 있는 자외선 차단제는 일정한 피부 부위에 특수한 물질을 도포함으로써 자외선 차단 효과를 나타내는 제제를 말하는데, 자외선의 차단효과는 자외선 차단지수(SPF; Sun Protection Factor)라는 단위를 사용하여 그 제품의 차단 정도를 표기한다. 자외선 차단지수는 FDA(미국식품의약품안전청)의 공식에 의해 계산되는데, 자외선 차단제를 바르지 않은 상태에서의 UV-B의 최소홍반량(Minimal Erythema Dose; MED)과 자외선 차단제를 바른 후의 UV-B의 최소홍반량의 비를 나타낸다. 즉, 자연 상태의 피부가 자외선을 차단하는 정도에 대한 배수로서, 자외선 차단지수의 수치가 높을수록 햇빛 차단의 효과는 좋지만, 피부에 대한 착용감이 나빠지고 부작용 또한 높아질 확률이 크다.
자외선 차단제는 크게 화학적 자외선 차단제와 물리적 자외선 차단제로 분류되고 있다. 자외선의 화학적 흡수를 메커니즘으로 하는 화학적 자외선 차단제는 신남산계, 살리실산계 및 벤조페논계 등의 유기차단제가 잘 알려져 있으며, 자외선의 물리적 산란 및 차폐를 메커니즘으로 하는 물리적 자외선 차단제는 이산화티탄, 산화아연 등과 같은 무기차단제가 잘 알려져 있다. 화학적 자외선 차단제의 경우, 자외선 차단 효과가 뛰어난 장점이 있으나 적용되는 파장범위가 좁고, 끈적이고 번들거려 사용감이 나쁘며 분자형태로 피부에 흡수될 수 있어 피부자극을 유발하는 단점이 있다. 물리적 자외선 차단제의 경우, 자외선을 반사하고 산란시켜 투과 자외선량을 감소시키는 것이다. 주로 초미립자 형태의 무기 화합물이 사용되며, 이러한 물질은 광굴절률이 매우 높은 특징이 있고, 유기물질 자외선 차단제에 비해 내열성이 우수하다. 피부자극은 화학적 자외선 차단제에 비해 상대적으로 낮지만 무거운 사용감과 백화 현상을 유발하는 단점이 있어 미용적으로 적절하지 못하다(공개특허 제2003-0046103호).
화학적 자외선 차단제와 물리적 자외선 차단제의 단점을 보완하고자 자외선 차단제에 대한 다양한 연구가 진행되어 왔다. 구체적으로, 화학적 자외선 차단제와 물리적 자외선 차단제를 적절한 비율로 혼합한 형태는 현재 자외선 차단용 제품에 대부분 적용되고 있는 방법이지만 전술한 근본적인 단점은 존재한다. 또한, 무기물이나 고분자 입자 표면에 무기차단제인 이산화티탄을 흡착시키거나 입자 내부에 유기차단제를 함유하는 형태는 피부안전도 측면에서는 보완을 하였으나 제조과정이 복잡하고 자외선 차단 효율이 높지 않다는 단점이 있다. 마지막으로, 이산화티탄이나 산화아연과 같은 무기물을 초미립자로 제조하여 기존 무기차단제의 단점을 보완하고 고효율의 차단효과를 갖는 형태가 있으나, 이는 백화현상을 완전히 감소시킬 수 없으며 입자 크기가 작아질수록 사용감이 나빠지는 단점을 갖고 있다. 이와 같은 화학 물질을 재료로 한 유기, 무기 자외선 차단제는 그 부작용이 문제가 되고 있기 때문에, 인체에 전혀 무해한 천연 자외선 차단제에 관심을 가지게 되었다.
천연 자외선 차단제에 관한 선행발명의 예를 보면, 천연의 히드록시안트라센 폴리글리코시드가 자외선 차단제로 보고되어 있으며 (Bader et al., Cosmetics＆Toiletries, 96(10), pp67, 1981), 자외선 차단제로서의 커피유의 사용이 프랑스 특허 제2-479-688호에 보고되어 왔다. 이와 유사하게, 안트라퀴논 유도체를 함유하는 알로에, 프랑굴라, 센나 및 카스카라 천연 추출물도 역시 유용한 자외선 차단제로서 보고되어 있다(Fox et al., Cosmetics ＆ Toiletries, 102(3), pp41, 1987).
이에 본 발명자들은 인삼과 녹차를 발효하고 이로부터 다당체를 추출하면, 발효시키지 않은 인삼 또는 녹차에 비하여 다당체를 보다 고수율로 수득할 수 있으며, 이와 같이 얻은 인삼 다당체와 녹차 다당체를 동시에 사용하게 되면 상승 효과에 의하여 이들 다당체를 각각 사용하는 경우보다 우수한 피부 미백 효과 및 자외선 차단 효과를 제공함과 동시에 피부에 대한 자극은 작음을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명은 인삼 및 녹차 발효물로부터 추출한 인삼 다당체와 녹차 다당체를 동시에 사용함으로써 우수한 피부 미백 효과 및 자외선 차단효과를 나타내는 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 인삼 및 녹차의 발효물로부터 추출한 인삼 다당체와 녹차 다당체를 유효성분으로 함유하는 미백용 및 자외선 차단용 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물은 인삼과 녹차의 발효물로부터 다당체를 추출함으로써 우수한 피부 미백 효과를 제공하고, 자외선에 의한 피부손상을 방지하는 효과를 나타낸다. 따라서, 상기 인삼 다당체 및 녹차 다당체를 함유하는 조성물은 기미, 주근깨와 같은 색소 침착 증상을 감소시키고, 피부색을 균일하고 밝게 보일 수 있게 하며, 자외선 차단 효과가 매우 뛰어나고, 피부에 대한 자극이 없어 피부 외용제 조성물 또는 약학 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 유효성분으로서 인삼 다당체와 녹차 다당체를 함유하며, 상기 인삼 다당체와 녹차 다당체는 인삼과 녹차의 발효물로부터 추출한다.
이하, 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다.
본 발명에서 사용되는 인삼(Panax ginseng C.A. Meyer) 다당체는 분자량이 34,600인 펙틴(pectin) 유사물질로서, 갈락투론산(galacturonic acid)이 60% 정도를 차지하고, 그 외 아라비노스, 람노오스, 글루코스 및 갈락토오스 등이 측쇄를 구성하고 있다. 본 발명에서 사용되는 인삼은 오가피과 인삼 속에 속하는 식물로서, 본 발명에서 인삼은 그 종류 및 연근(年根)에 제한없이 사용가능하며, 말리거나 말리지 않은 인삼을 모두 사용할 수 있다. 또한 본 발명에서 인삼은 그 부위에 제한없이 사용 가능하며, 구체적으로는 인삼의 뿌리를 사용할 수 있다.
또한, 본 발명에서 사용되는 녹차(Green tea) 다당체는 녹차로부터 유래한 것으로서, 다른 식물에서 발견되는 다당체와는 달리 산성 다당체군이며, 광합성을 통해 만들어진 당 성분과 아미노산이 결합되어 생성된 것이다. 본 발명에서 녹차는 그 종류 및 재배 일수에 제한없이 사용가능하며, 말리거나 말리지 않은 녹차를 모두 사용할 수 있다. 또한 본 발명에서 녹차는 그 부위에 제한없이 사용 가능하며, 구체적으로는 녹차의 잎을 사용할 수 있다.
본 발명에서는 인삼 또는 녹차 추출물 내에 본 발명에서 유효성분으로서 사용하는 다당체의 함량을 높이기 위하여 인삼 또는 녹차를 직접 발효시키거나, 인삼 또는 녹차의 추출물을 발효시키서 얻은 발효물로부터 다당체를 추출하여 사용한다.구체적으로, 본 발명의 녹차 다당체 및 인삼 다당체는 물로 인삼 뿌리 또는 녹차 잎 추출물을 제조한 후에 이를 농축하고, 이를 필터로 불순물을 제거한 다음, 여기에 에탄올을 적가하고 열풍 건조시킴으로써 수득할 수 있다.
본 발명에 있어서 인삼과 녹차의 발효물은 당업계에 잘 알려진 통상적인 방법으로 제조할 수 있으며, 그 방법이 특별히 한정되는 것은 아니지만, 바람직하게는 자연 발효, 염장 발효 또는 균 발효의 방법을 이용할 수 있다.
본 발명에서의 자연 발효물은 인삼 또는 녹차, 또는 인삼 또는 녹차의 추출물을 당 성분과 혼합하여 옹기 등의 용기에 담아 인위적인 조작없이 발효시킴으로써 수득할 수 있다. 이 때 사용 가능한 당 성분은 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 자당, 자일리톨, 올리고당, 식이섬유, 에리스리톨, 포도당, 과당 등을 사용할 수 있다. 발효시 당 성분은 발효물 총 중량에 대하여 1~10중량%의 양으로 혼합되는 것이 바람직하고, 햇볕이 잘 드는 사계절의 자연환경에서 30일 내지 6년, 바람직하게는 6개월 이상 발효시키는 것이 좋다.
본 발명에서 염장 발효물은 인삼 또는 녹차, 또는 인삼 또는 녹차의 추출물에 소금을 첨가하여 장기 숙성 발효시킴으로써 수득할 수 있다. 이 때 사용 가능한 소금으로는 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 정제한 고순도 염화나트륨, 천일염, 암염, 죽염 등을 사용할 수 있다. 발효 시 소금은 발효물 총 중량에 대하여 10~30중량%의 양으로 혼합되는 것이 바람직하고, 4~40℃의 온도에서, 충분한 발효가 일어날 수 있도록 30일 내지 1년, 바람직하게는 6개월 내지 1년 정도 발효시키는 것이 좋다. 4℃ 미만에서는 유용 미생물의 성장이 잘 되지 않고 40℃를 초과할 경우 미생물의 성장이 너무 과하게 일어나 바람직하지 않다.
이와 같이 수득한 발효물로부터 물 또는 유기용매로 추출하여 발효 추출물을 얻을 수 있으며, 본 발명에 사용 가능한 추출용매로는 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄 및 헥산으로 이루어진 그룹에서 선택된 1종 또는 이들의 혼합물 등을 들 수 있다
본 발명에서 균 발효물은 인삼 또는 녹차, 또는 인삼 또는 녹차의 추출물에 당업계에 잘 알려져 있는 유용한 발효 균주를 접종하여 발효시킴으로써 수득할 수 있다. 이 때 사용 가능한 발효 균주로는 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 효모균, 버섯균, 유산균, 누룩균, 바실러스속균(고초균) 등을 사용할 수 있다. 균주를 접종한 후 10~60℃의 온도에서, 18시간 내지 100일 정도 발효시킬 수 있다.
본 발명에서 사용하는 효모균은 사카로마이세스(Saccharomyces sp .), 스키조사카로마이세스(Schizosaccharomyces sp .), 토룰로프시스(Torulopsis sp .), 로도토룰라(Rhodotorula sp .) 또는 칸디다(Candida sp .) 등을 들 수 있으며, 버섯균은 식용으로 가능한 버섯균이라면 어느 것이나 가능하나, 바람직하게는 차가버섯(Inonnotus - obliquus), 동충하초균류(Cordyceps sinensis, Paecilomyces japonica), 송이버섯(Tricholomamatsutake), 상황버섯(Phellinus linteus) 또는 영지버섯(Ganoderma lucidum) 등을 사용할 수 있다. 또한 유산균은 락토바실러스(Lactobacillus sp .), 스트렙토코쿠스(Streptococcus sp .), 류코노스톡(Leuconostoc sp .) 또는 비피도박테리아(Bifidobacteria sp .) 등을 들 수 있으며, 누룩균은 라이조푸스(Rhyzopus), 우사미(Usami) 및 오리재(Oryzae), 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 또는 아스퍼질러스 소재(Aspergillus sojae) 등을 들 수 있고, 바실러스속균(고초균)은 바실러스 리체니포르미스(Bacillus licheniformis) F1017, 바실러스 리체니포르미스(Bacillus licheniformis) F1232, 바실러스 리체니포르미스(Bacillus licheniformis) F1267, 바실러스 리체니포르미스(Bacillus licheniformis) F1268, 바실러스 리체니포르미스(Bacillus licheniformis) F1200, 바실러스 푸미루스(Bacillus pumilus) F1337, 바실러스 소노렌시스(Bacillus sonorensis) F1005, 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) F1236 또는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) F1279 등을 들 수 있으나, 이에만 한정되는 것은 아니다.
본 발명에서 효모를 사용하여 발효시킬 경우, 인삼 또는 녹차, 또는 인삼 또는 녹차의 추출물이 함유된 기본 배지에 일정한 농도(약 105~107 cell/mL)로 효모를 접종하여, pH 5.5~6.5, 온도 25~50℃, 통기량 0.05~0.5VVM의 조건을 유지하면서 배양한 후, 이 발효액을 원심분리하여 고분자 침전물과 효모균제를 제거함으로써 인삼 또는 녹차의 균 발효 추출물을 수득할 수 있다. 배양 시간은 24~120시간이 바람직하다.
또한, 본 발명에서 버섯균을 사용하여 발효시킬 경우, 인삼 또는 녹차, 또는 인삼 또는 녹차의 추출물에 버섯균을 접종하여, 온도 18~25℃, 습도 60~80%의 조건을 유지하면서 배양한 후, 물이나 탄소수 1~4의 무수 또는 함수 저급 알코올(예를 들어, 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올 등), 상기 저급 알코올과 물의 혼합 용매, 아세톤, 에틸아세테이트, 클로로포름, 1,3-부틸렌글리콜, 헥산 또는 디에틸에테르 중 1종 이상을 이용하고, 50~100℃, 1~5시간 동안 가열하여 감압 농축하여 발효 추출물을 수득할 수 있다. 배양 시간은 1일 내지 100일이 바람직하다.
또한, 본 발명에서 유산균을 사용하여 발효시킬 경우, 인삼 또는 녹차, 또는 인삼 또는 녹차의 추출물이 함유된 기본 배지에 일정한 농도(약 105~107 cell/mL)로 유산균을 접종하여, pH 6.5~7.5, 온도 25~50℃, 통기량 1VVM의 조건을 유지하면서 배양한 후, 이 발효액을 원심분리하여 고분자 침전물과 유산균제가 제거된 발효 추출물을 수득할 수 있다. 배양 시간은 24~120시간이 바람직하다.
또한, 본 발명에서 누룩균을 사용하여 발효시킬 경우, 인삼 또는 녹차, 또는 인삼 또는 녹차의 추출물에 누룩균을 접종하여, 온도 15~45℃의 조건을 유지하면서 배양한 후, 이 발효액을 원심분리하여 고분자 침전물과 누룩균제가 제거된 인삼 또는 녹차 발효 추출물을 수득할 수 있다. 배양 시간은 18~120시간이 바람직하다.
또한, 본 발명에서 바실러스속균을 사용하여 발효시킬 경우, 인삼 또는 녹차, 또는 인삼 또는 녹차의 추출물이 함유된 기본 배지에 일정한 농도(약 105~107 cell/mL)로 바실러스속균을 접종하여, pH 5.5~8.5, 온도 10~60℃의 조건을 유지하면서 배양한 후 이 발효액을 원심분리하여, 고분자 침전물과 바실러스균제가 제거된 발효 추출물을 수득할 수 있다. 배양 시간은 24~96시간이 바람직하다.
본 발명은 상기 방법에 의한 제조된 인삼 또는 녹차의 발효 추출물로부터 추출한 인삼 다당체와 녹차 다당체를 각각 조성물 총 중량에 대하여 0.001~10중량%의 양으로 함유할 수 있으며, 바람직하게는 인삼 다당체와 녹차 다당체를 각각 조성물 총 중량에 대하여 0.005~9.5중량%, 0.01~9중량%, 0.03~8.5중량%, 0.05~8중량%, 0.07~7.5중량%, 0.09~7중량%, 0.1~6.5중량%, 0.3~6중량%, 0.5~5.5중량% 또는 0.7~5중량%의 양으로 함유할 수 있다.
본 발명에 있어서, 인삼 다당체와 녹차 다당체는 중량비로 0.1~10:1의 범위로 혼합하여 사용된다. 또한, 상기 두 성분의 병용에 따른 상승 효과를 극대화하기 위하여, 바람직하게는 인삼 다당체와 녹차 다당체를 중량비로 0.5~9.5:1, 1~9:1 또는 1.5~8.5:1의 범위로 혼합하여 사용할 수 있다.
본 발명에 의한 조성물은 미백용 및 자외선에 의한 피부 손상방지용으로 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 피부 외용제 조성물, 특히 화장료 조성물로서 제형화될 수 있으며, 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 국소 적용에 적합한 모든 제형으로 제공될 수 있으며, 예를 들어 용액, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 고체, 겔, 분말, 페이스트, 포말(foam) 또는 에어로졸 조성물의 제형으로 제공될 수 있다. 이러한 제형의 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 조성물은 상기한 물질 이외에 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분들을 포함할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 조성물은 보습제, 에몰리언트제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및 무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한제를 더 포함할 수 있다. 상기 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하며, 그 배합량은 조성물 총 중량에 대하여 0.01~5중량%, 구체적으로 0.01~3중량%일 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물은 약학 조성물로서 제형화될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물을 의약품에 적용할 경우에는, 본 발명에서 사용되는 유효성분에 상용되는 무기 또는 유기의 담체를 가하여 고체, 반고체 또는 액상의 형태로 경구 투여제 혹은 비경구 투여제로 제형화할 수 있으며, 본 발명에 따른 상기 약학 조성물은 경구, 비경구, 직장, 국소, 경피, 정맥 내, 근육 내, 복강 내, 피하 등으로 투여될 수 있다.
상기 경구 투여를 위한 제형으로서는 정제, 환제, 과립제, 캡슐제, 산제, 세립제, 분제, 유탁제, 시럽제, 펠렛제 등을 들 수 있다. 또한, 상기 비경구 투여를 위한 제형으로는 주사제, 점적제, 연고, 로션, 스프레이, 현탁제, 유제, 좌제 등을 들 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 상법에 따라 실시함으로써, 유효성분을 용이하게 제형화할 수 있으며, 이 때 계면활성제, 부형제, 착색료, 향신료, 보존료, 안정제, 완충제, 현탁제, 기타 상용하는 보조제를 적당히 사용할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물의 유효 성분의 투여 용량은 투여받을 대상의 연령, 성별, 체중, 병리 상태 및 그 심각도, 투여 경로 또는 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 적당한 용량의 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 투여 용량은 예를 들어 0.1mg/kg/일 내지 100mg/kg/일, 보다 구체적으로는 5mg/kg/일 내지 50mg/kg/일이 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
[비교예 1-1] 인삼 자연 발효 다당체의 제조
깨끗한 물로 세척한 인삼 1kg를 올리고당 50g과 함께 섞어 옹기에 넣고, 옹기가 가득차면 위에서 압을 가하여 누르지 않고 자연 상태로 옹기의 뚜껑을 덮고 6개월간 자연 발효시켰다. 발효가 끝난 후, 발효된 원료를 여과 헝겊으로 걸러내어 찌꺼기를 제거한 후 정제수 10ℓ를 넣고 38~42℃ 온수로 24시간 교반 추출한 다음, 15℃에서 1일간 침적시켰다. 그 후 여과포로 여과와 원심분리를 통해 잔사와 여액을 분리하고, 분리된 여액을 정제수 양의 1/10까지 감압 농축한다. 여기에 농축된 양의 4배수의 에탄올을 드랍와이즈(dropwise)방식으로 첨가하고 열풍 건조시켜 인삼 자연 발효 다당체를 얻었다.
[비교예 1-2] 녹차 자연 발효 다당체의 제조
1차 가공된(덖음 과정) 녹차 잎 1kg을 사용하는 것을 제외하고는 상기 비교예 1-1과 동일한 방법을 사용하여 녹차 자연 발효 다당체을 얻었다.
[실시예 1-1] 인삼 자연 발효 다당체와 녹차 자연 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 1-1에서 제조한 인삼 자연 발효 다당체와 비교예 1-2에서 제조한 녹차 자연 발효 다당체를 1:3의 중량비로 혼합하였다.
[실시예 1-2] 인삼 자연 발효 다당체와 녹차 자연 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 1-1에서 제조한 인삼 자연 발효 다당체와 비교예 1-2에서 제조한 녹차 자연 발효 다당체를 1:1의 중량비로 혼합하였다.
[실시예 1-3] 인삼 자연 발효 다당체와 녹차 자연 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 1-1에서 제조한 인삼 자연 발효 다당체와 비교예 1-2에서 제조한 녹차 자연 발효 다당체를 3:1의 중량비로 혼합하였다.
[비교예 2-1] 인삼 염장 발효 다당체의 제조
인삼 1kg을 깨끗한 물로 씻어 건조시킨 후 10중량% 농도의 소금 용액에 혼합한 다음 옹기에 담아 준비하고 4℃에서 약 30일간 발효시킨 후 여기에 80% 에탄올 수용액 5ℓ를 넣고, 3회 환류 추출한 다음, 15℃에서 1일간 침적시켰다. 그 후, 여과포 여과와 원심분리를 통해 잔사와 여액을 분리하고, 분리된 여액을 감압농축하여 얻은 추출물을 물에 현탁한 다음, 에테르 1ℓ로 5회 추출하여 색소를 제거하고, 수층을 1-부탄올 500㎖로 3회 추출하였다. 이로부터 얻은 총 1-부탄올층을 감압농축하여 1-부탄올 추출물을 얻고, 이를 소량의 메탄올에 녹인 후, 대량의 에틸아세테이트에 추가하여, 생성된 침전물을 건조함으로써, 인삼 염장 발효 다당체를 얻었다.
[비교예 2-2] 녹차 염장 발효 다당체의 제조
1차 가공된(덖음 과정) 녹차 잎 1kg을 사용하는 것을 제외하고는 상기 비교예 2-1과 동일한 방법을 사용하여 녹차 염장 발효 다당체를 얻었다.
[실시예 2-1] 인삼 염장 발효 다당체와 녹차 염장 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 2-1에서 제조한 인삼 염장 발효 다당체와 비교예 2-2에서 제조한 녹차 염장 발효 다당체를 1:3의 중량비로 혼합하였다.
[실시예 2-2] 인삼 염장 발효 다당체와 녹차 염장 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 2-1에서 제조한 인삼 염장 발효 다당체와 비교예 2-2에서 제조한 녹차 염장 발효 다당체를 1:1의 중량비로 혼합하였다.
[실시예 2-3] 인삼 염장 발효 다당체와 녹차 염장 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 2-1에서 제조한 인삼 염장 발효 다당체와 비교예 2-2에서 제조한 녹차 염장 발효 다당체를 3:1의 중량비로 혼합하였다.
[비교예 3-1] 효모를 이용한 인삼 발효 다당체의 제조
인삼 추출물 분말이 함유된 기본 배지에 일정한 농도(약 105~107 cell/mL)로 사카로마이세스(Saccharomyces sp.)를 접종하여, pH 5.5~6.5, 온도 25~50℃, 통기량 0.05~0.5VVM의 조건을 유지하면서 24~120시간 배양하였다. 상기 발효액을 1.000×g에서 30분간 원심분리하여 고분자 침전물과 효모 균체가 제거된 최종 인삼 발효 다당체를 얻었다.
[비교예 3-2] 효모를 이용한 녹차 발효 다당체의 제조
녹차 추출물 분말을 사용하는 것을 제외하고는 상기 비교예 3-1과 동일한 방법을 사용하여 녹차 발효 다당체를 얻었다.
[실시예 3-1] 효모를 이용한 인삼 발효 다당체와 녹차 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 3-1에서 제조한 인삼 발효 다당체와 비교예 3-2에서 제조한 녹차 발효 다당체를 1:3의 중량비로 혼합하였다.
[실시예 3-2] 효모를 이용한 인삼 발효 다당체와 녹차 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 3-1에서 제조한 인삼 발효 다당체와 비교예 3-2에서 제조한 녹차 발효 다당체를 1:1의 중량비로 혼합하였다.
[실시예 3-3] 효모를 이용한 인삼 발효 다당체와 녹차 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 3-1에서 제조한 인삼 발효 다당체와 비교예 3-2에서 제조한 녹차 발효 다당체를 3:1의 중량비로 혼합하였다.
[비교예 4-1] 버섯균을 이용한 인삼 발효 다당체의 제조
인삼 추출물 분말에 동충하초균류(Paecilomyces japonica)를 5중량%로 첨가하고, 18~25℃, 습도 60~70%에서 60일간 발효시킨 후 건조시킨 다음, 이를 분쇄하여 얻어진 분쇄물 100g씩을 80% 메탄올 3ℓ에 각각 넣고 냉각콘덴서가 달린 환류추출기에서 3시간 끓여 추출하였다. 그 다음 100 메쉬 여과포로 여과한 후 잔사를 같은 방법으로 1회 더 추출하였다. 각각의 추출액을 합하여 상온에서 와트만 2번 여과지로 여과하여 불용성 물질을 제거한 후, 냉각 콘덴서가 달린 증류장치에서 60℃로 감압농축한 후 동결건조하여 최종 인삼 발효 다당체를 얻었다.
[비교예 4-2] 버섯균을 이용한 녹차 발효 다당체의 제조
녹차 추출물 분말을 사용하는 것을 제외하고는 상기 비교예 4-1과 동일한 방법을 사용하여 녹차 발효 다당체를 얻었다.
[실시예 4-1] 버섯균을 이용한 인삼 발효 다당체와 녹차 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 4-1에서 제조한 인삼 발효 다당체와 비교예 4-2에서 제조한 녹차 발효 다당체를 1:3의 중량비로 혼합하였다.
[실시예 4-2] 버섯균을 이용한 인삼 발효 다당체와 녹차 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 4-1에서 제조한 인삼 발효 다당체와 비교예 4-2에서 제조한 녹차 발효 다당체를 1:1의 중량비로 혼합하였다.
[실시예 4-3] 버섯균을 이용한 인삼 발효 다당체와 녹차 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 4-1에서 제조한 인삼 발효 다당체와 비교예 4-2에서 제조한 녹차 발효 다당체를 3:1의 중량비로 혼합하였다.
[비교예 5-1] 유산균을 이용한 인삼 발효 다당체의 제조
인삼 추출물 분말이 함유된 기본 배지에 락토바실러스(Lactobacillus sp.)를 106 cell/mL로 접종하고, pH 6.5~7.5, 온도 25~50℃, 통기량 1 VVM의 조건을 유지하면서 24~120시간 배양하였다. 상기 발효액을 1.000×g에서 30분간 원심분리하여 고분자 침전물과 유산균 균체가 제거된 최종 인삼 발효 다당체를 얻었다.
[비교예 5-2] 유산균을 이용한 녹차 발효 다당체의 제조
녹차 추출물 분말을 사용하는 것을 제외하고는 상기 비교예 5-1과 동일한 방법을 사용하여 녹차 발효 다당체를 얻었다.
[실시예 5-1] 유산균을 이용한 인삼 발효 다당체와 녹차 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 5-1에서 제조한 인삼 발효 다당체와 비교예 5-2에서 제조한 녹차 발효 다당체를 1:3의 중량비로 혼합하였다.
[실시예 5-2] 유산균을 이용한 인삼 발효 다당체와 녹차 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 5-1에서 제조한 인삼 발효 다당체와 비교예 5-2에서 제조한 녹차 발효 다당체를 1:1의 중량비로 혼합하였다.
[실시예 5-3] 유산균을 이용한 인삼 발효 다당체와 녹차 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 5-1에서 제조한 인삼 발효 다당체와 비교예 5-2에서 제조한 녹차 발효 다당체를 3:1의 중량비로 혼합하였다.
[비교예 6-1] 누룩균을 이용한 인삼 발효 다당체의 제조
인삼 추출물 분말이 함유된 기본 배지에 106 cell/mL로 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)를 접종하여, pH 5.5~6.5, 온도 15~45℃, 통기량 0.05~0.5VVM의 조건을 유지하면서 18~120시간 배양하였다. 상기 발효액을 1.000×g에서 30분간 원심분리하여 고분자 침전물과 누룩균체가 제거된 최종 인삼 발효 다당체를 얻었다.
[비교예 6-2] 누룩균을 이용한 녹차 발효 다당체의 제조
녹차 추출물 분말을 사용하는 것을 제외하고는 상기 비교예 6-1과 동일한 방법을 사용하여 녹차 발효 다당체를 얻었다.
[실시예 6-1] 누룩균을 이용한 인삼 발효 다당체와 녹차 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 6-1에서 제조한 인삼 발효 다당체와 비교예 6-2에서 제조한 녹차 발효 다당체를 1:3의 중량비로 혼합하였다.
[실시예 6-2] 누룩균을 이용한 인삼 발효 다당체와 녹차 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 6-1에서 제조한 인삼 발효 다당체와 비교예 6-2에서 제조한 녹차 발효 다당체를 1:1의 중량비로 혼합하였다.
[실시예 6-3] 누룩균을 이용한 인삼 발효 다당체와 녹차 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 6-1에서 제조한 인삼 발효 다당체와 비교예 6-2에서 제조한 녹차 발효 다당체를 3:1의 중량비로 혼합하였다.
[비교예 7-1] 바실러스균을 이용한 인삼 발효 다당체의 제조
인삼 추출물 분말이 함유된 기본 배지에 일정한 농도(약 105~107 cell/mL)의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) F1279를 접종하고, pH 5.5~8.5, 온도 10~60℃, 통기량 0.05~0.5VVM의 조건을 유지하면서 24~96시간 배양하였다. 상기 발효액을 1.000×g에서 30분간 원심분리하여 고분자 침전물과 바실러스 균체가 제거된 최종 인삼 발효 다당체를 얻었다.
[비교예 7-2] 바실러스균을 이용한 녹차 발효 다당체의 제조
녹차 추출물 분말을 사용하는 것을 제외하고는 상기 비교예 7-1과 동일한 방법을 사용하여 녹차 발효 다당체를 얻었다.
[실시예 7-1] 바실러스균을 이용한 인삼 발효 다당체와 녹차 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 7-1에서 제조한 인삼 발효 다당체와 비교예 7-2에서 제조한 녹차 발효 다당체를 1:3의 중량비로 혼합하였다.
[실시예 7-2] 바실러스균을 이용한 인삼 발효 다당체와 녹차 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 7-1에서 제조한 인삼 발효 다당체와 비교예 7-2에서 제조한 녹차 발효 다당체를 1:1의 중량비로 혼합하였다.
[실시예 7-3] 바실러스균을 이용한 인삼 발효 다당체와 녹차 발효 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 7-1에서 제조한 인삼 발효 다당체와 비교예 7-2에서 제조한 녹차 발효 다당체를 3:1의 중량비로 혼합하였다.
[비교예 8-1] 인삼 다당체의 제조
건조된 인삼 1kg을 믹서기로 분쇄한 뒤 여기에 정제수 10ℓ를 넣고, 38~42℃ 온수로 24시간 교반 추출한 다음, 15℃에서 1일간 침적시켰다. 그 후, 여과포 여과와 원심분리를 통해 잔사와 여액을 분리하고, 분리된 여액을 정제수 양의 1/10까지 감압 농축하였다. 여기에 농축된 양의 4배수의 에탄올을 드랍와이즈(dropwise)방식으로 첨가하고 열풍 건조시켜 인삼 다당체를 얻었다.
[비교예 8-2] 녹차 다당체의 제조
1차 가공된(덖음 과정) 녹차잎 1 kg을 믹서기로 분쇄한 뒤 정제수 10ℓ를 넣고, 38~42℃ 온수로 24시간 교반 추출한 다음, 15℃에서 1일간 침적시켰다. 그 후, 여과포 여과와 원심분리를 통해 잔사와 여액을 분리하고, 분리된 여액을 정제수 양의 1/10까지 감압 농축하였다. 여기에 농축된 양의 4배수의 에탄올을 드랍와이즈(dropwise)방식으로 첨가하고 열풍 건조시켜 녹차 다당체를 얻었다.
[비교예 8-3] 인삼 다당체와 녹차 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 8-1과 비교예 8-2에서 제조한 인삼 다당체와 녹차 다당체를 1:3의 중량비로 혼합하였다.
[비교예 8-4] 인삼 다당체와 녹차 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 8-1과 비교예 8-2에서 제조한 인삼 다당체와 녹차 다당체를 1:1의 중량비로 혼합하였다.
[비교예 8-5] 인삼 다당체와 녹차 다당체의 혼합물의 제조
상기 비교예 8-1과 비교예 8-2에서 제조한 인삼 다당체와 녹차 다당체를 3:1의 중량비로 혼합하였다.
[시험예 1] 티로시나제 저해 효과
티로시나제 효소는 버섯류(Mushroom)로부터 추출된 것으로 시그마(SIGMA)사의 것을 사용하였다. 먼저 기질인 티로신을 증류수에 용해시켜 0.3mg/ml의 용액으로 만들고 그 용액을 1.0ml씩 시험관에 넣은 다음, 여기에 포타슘-포스페이트 완충용액(0.1mol 농도, pH 6.8) 1.0ml 및 증류수 0.7ml를 첨가하였다.
상기 실시예 1-1 내지 7-3의 인삼 다당체와 녹차 다당체의 혼합물 또는 비교예 1-1 내지 8-5의 인삼 다당체와 녹차 다당체를 에탄올 용액에 적당한 농도로 혼합하여 준비한 시료액 0.2ml를 반응액에 넣은 다음 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다. 이때 음성대조군(무첨가)으로는 각 시료액 대신 용매만을 0.2ml 넣은 것으로 준비하였고, 양성대조군으로는 아스코르브산을 사용하였다. 이 반응액에 2500유닛/ml의 티로시나제 용액 0.1ml씩을 넣고 다시 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다. 이 반응액이 든 시험관을 얼음물 속에 넣어서 급냉시켜 반응을 중지시키고 광전분광분석계로 파장 475nm에서의 흡광도를 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다. 각각의 티로시나제 저해 효과는 하기 수학식 1로 산출하였다.
| 시험물질 | 티로시나제 저해율(%) |
| 음성대조군(무첨가) | 0 |
| 양성대조군(아스코르브산) | 52 |
| 실시예 1-1 | 54 |
| 실시예 1-2 | 57 |
| 실시예 1-3 | 59 |
| 실시예 2-1 | 56 |
| 실시예 2-2 | 57 |
| 실시예 2-3 | 59 |
| 실시예 3-1 | 52 |
| 실시예 3-2 | 55 |
| 실시예 3-3 | 56 |
| 실시예 4-1 | 54 |
| 실시예 4-2 | 56 |
| 실시예 4-3 | 58 |
| 실시예 5-1 | 56 |
| 실시예 5-2 | 58 |
| 실시예 5-3 | 60 |
| 실시예 6-1 | 57 |
| 실시예 6-2 | 59 |
| 실시예 6-3 | 61 |
| 실시예 7-1 | 55 |
| 실시예 7-2 | 58 |
| 실시예 7-3 | 60 |
| 비교예 1-1 | 49 |
| 비교예 1-2 | 48 |
| 비교예 2-1 | 50 |
| 비교예 2-2 | 49 |
| 비교예 3-1 | 49 |
| 비교예 3-2 | 49 |
| 비교예 4-1 | 48 |
| 비교예 4-2 | 47 |
| 비교예 5-1 | 48 |
| 비교예 5-2 | 48 |
| 비교예 6-1 | 51 |
| 비교예 6-2 | 49 |
| 비교예 7-1 | 50 |
| 비교예 7-2 | 51 |
| 비교예 8-1 | 48 |
| 비교예 8-2 | 45 |
| 비교예 8-3 | 52 |
| 비교예 8-4 | 53 |
| 비교예 8-5 | 57 |
상기 표 1의 결과에서, 인삼 다당체와 녹차 다당체 각각을 함유한 경우에는 티로시나제 억제 효과가 미비하지만, 이들을 함께 사용하는 경우는 티로시나제 억제 효과가 현저하게 우수함을 알 수 있다. 따라서 인삼 및 녹차의 발효물로부터 추출한 다당체를 모두 함유하는 조성물은 매우 우수한 미백 효과를 제공할 수 있음을 알 수 있다.
[시험예 2] B16/F10 멜라노마 세포를 이용한 멜라닌 생성 억제 효과
상기 실시예 1-1 내지 7-3의 인삼 다당체와 녹차 다당체의 혼합물 또는 비교예 1-1 내지 8-5의 인삼 다당체와 녹차 다당체를 각각 0.1중량%로 함유한 시료를 시험물질로 하여 일정 농도로 B16/F10 멜라노마 세포(한국세포주은행)의 배양액에 첨가하여 3일간 배양한 후 배양액을 제거하고 PBS로 세척한 다음 1N NaOH로 세포를 녹여 405nm에서 흡광도를 측정하였다. 시험물질을 첨가하지 않은 세포를 대조군으로 하여 대조군에서의 멜라닌 함량과 비교하여 각 시험물질의 멜라닌 생성 저해 정도를 측정하였다. 멜라닌 생성 억제제로 알려진 코지산을 양성대조군으로 사용하였다. 하기 수학식 2에 따라 멜라닌 생성 억제율을 계산하여 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
| 시험물질 | 멜라닌생성 저해율(%) |
| 음성대조군(무첨가) | 0 |
| 양성대조군(코지산) | 53 |
| 실시예 1-1 | 55 |
| 실시예 1-2 | 57 |
| 실시예 1-3 | 59 |
| 실시예 2-1 | 53 |
| 실시예 2-2 | 55 |
| 실시예 2-3 | 58 |
| 실시예 3-1 | 56 |
| 실시예 3-2 | 58 |
| 실시예 3-3 | 61 |
| 실시예 4-1 | 58 |
| 실시예 4-2 | 59 |
| 실시예 4-3 | 61 |
| 실시예 5-1 | 58 |
| 실시예 5-2 | 60 |
| 실시예 5-3 | 63 |
| 실시예 6-1 | 57 |
| 실시예 6-2 | 59 |
| 실시예 6-3 | 60 |
| 실시예 7-1 | 56 |
| 실시예 7-2 | 59 |
| 실시예 7-3 | 61 |
| 비교예 1-1 | 48 |
| 비교예 1-2 | 49 |
| 비교예 2-1 | 48 |
| 비교예 2-2 | 48 |
| 비교예 3-1 | 49 |
| 비교예 3-2 | 48 |
| 비교예 4-1 | 52 |
| 비교예 4-2 | 50 |
| 비교예 5-1 | 49 |
| 비교예 5-2 | 48 |
| 비교예 6-1 | 51 |
| 비교예 6-2 | 50 |
| 비교예 7-1 | 51 |
| 비교예 7-2 | 49 |
| 비교예 8-1 | 49 |
| 비교예 8-2 | 48 |
| 비교예 8-3 | 51 |
| 비교예 8-4 | 53 |
| 비교예 8-5 | 56 |
상기 표 2의 결과에서 인삼 다당체와 녹차 다당체 각각을 함유한 경우에는 멜라닌 생성 억제 효과가 미비하지만, 이들을 함께 사용하는 경우는 멜라닌 생성 억제 효과가 현저하게 우수함을 알 수 있다. 따라서 발효를 인삼 및 녹차의 발효물로부터 추출한 다당체를 모두 함유하는 조성물은 매우 우수한 미백 효과를 제공할 수 있음을 알 수 있다.
[참조예 1] 제형예 및 비교제형예의 영양크림 제조
하기 표 3 내지 표 7의 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양크림을 제조하였다(단위: 중량%).
| 성분 | 제형예 | ||||||||
| 1-1 | 1-2 | 1-3 | 2-1 | 2-2 | 2-3 | 3-1 | 3-2 | 3-3 | |
| 정제수 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 |
| 실시예 1-1 | 0.1 | - | - | - | - | - | - | - | - |
| 실시예 1-2 | - | 0.1 | - | - | - | - | - | - | - |
| 실시예 1-3 | - | - | 0.1 | - | - | - | - | - | - |
| 실시예 2-1 | - | - | - | 0.1 | - | - | - | - | - |
| 실시예 2-2 | - | - | - | - | 0.1 | - | - | - | - |
| 실시예 2-3 | - | - | - | - | - | 0.1 | - | - | - |
| 실시예 3-1 | - | - | - | - | - | - | 0.1 | - | - |
| 실시예 3-2 | - | - | - | - | - | - | - | 0.1 | - |
| 실시예 3-3 | - | - | - | - | - | - | - | - | 0.1 |
| 식물성 경화유 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 |
| 스테아린산 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 |
| 글리세롤 스테아레이트 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| 스테아릴 알코올 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 |
| 폴리글리세릴-10 펜타스테아레이트 & 베헤닐 알코올 &소디움 스테아로일 락틸에이트 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| 아라키딜 베헤닐 알코올 &아라키딜글루코사이드 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| 세틸아릴 알코올 & 세테아릴글루코사이드 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 |
| PEG-100 스테아레이트 & 글리세롤올레이트 & 프로필렌글리콜 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 |
| 성분 | 제형예 | ||||||||
| 4-1 | 4-2 | 4-3 | 5-1 | 5-2 | 5-3 | 6-1 | 6-2 | 6-3 | |
| 정제수 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 |
| 실시예 4-1 | 0.1 | - | - | - | - | - | - | - | - |
| 실시예 4-2 | - | 0.1 | - | - | - | - | - | - | - |
| 실시예 4-3 | - | - | 0.1 | - | - | - | - | - | - |
| 실시예 5-1 | - | - | - | 0.1 | - | - | - | - | - |
| 실시예 5-2 | - | - | - | - | 0.1 | - | - | - | - |
| 실시예 5-3 | - | - | - | - | - | 0.1 | - | - | - |
| 실시예 6-1 | - | - | - | - | - | - | 0.1 | - | - |
| 실시예 6-2 | - | - | - | - | - | - | - | 0.1 | - |
| 실시예 6-3 | - | - | - | - | - | - | - | - | 0.1 |
| 식물성 경화유 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 |
| 스테아린산 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 |
| 글리세롤 스테아레이트 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| 스테아릴 알코올 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 |
| 폴리글리세릴-10 펜타스테아레이트 & 베헤닐 알코올 &소디움 스테아로일 락틸에이트 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| 아라키딜 베헤닐 알코올 &아라키딜글루코사이드 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| 세틸아릴 알코올 & 세테아릴글루코사이드 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 |
| PEG-100 스테아레이트 & 글리세롤올레이트 & 프로필렌글리콜 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 |
| 성분 | 제형예 | 비교제형예 | |||||||
| 7-1 | 7-2 | 7-3 | 1-1 | 1-2 | 2-1 | 2-2 | 3-1 | 3-2 | |
| 정제수 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 |
| 실시예 7-1 | 0.1 | - | - | - | - | - | - | - | - |
| 실시예 7-2 | - | 0.1 | - | - | - | - | - | - | - |
| 실시예 7-3 | - | - | 0.1 | - | - | - | - | - | - |
| 비교예 1-1 | - | - | - | 0.1 | - | - | - | - | - |
| 비교예 1-2 | - | - | - | - | 0.1 | - | - | - | - |
| 비교예 2-1 | - | - | - | - | - | 0.1 | - | - | - |
| 비교예 2-2 | - | - | - | - | - | - | 0.1 | - | - |
| 비교예 3-1 | - | - | - | - | - | - | - | 0.1 | - |
| 비교예 3-2 | - | - | - | - | - | - | - | - | 0.1 |
| 식물성 경화유 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 |
| 스테아린산 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 |
| 글리세롤 스테아레이트 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| 스테아릴 알코올 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 |
| 폴리글리세릴-10 펜타스테아레이트 & 베헤닐 알코올 &소디움 스테아로일 락틸에이트 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| 아라키딜 베헤닐 알코올 &아라키딜글루코사이드 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| 세틸아릴 알코올 & 세테아릴글루코사이드 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 |
| PEG-100 스테아레이트 & 글리세롤올레이트 & 프로필렌글리콜 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 |
| 성분 | 비교제형예 | |||||||
| 4-1 | 4-2 | 5-1 | 5-2 | 6-1 | 6-2 | 7-1 | 7-2 | |
| 정제수 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 |
| 비교예 4-1 | 0.1 | - | - | - | - | - | - | - |
| 비교예 4-2 | - | 0.1 | - | - | - | - | - | - |
| 비교예 5-1 | - | - | 0.1 | - | - | - | - | - |
| 비교예 5-2 | - | - | - | 0.1 | - | - | - | - |
| 비교예 6-1 | - | - | - | - | 0.1 | - | - | - |
| 비교예 6-2 | - | - | - | - | - | 0.1 | - | - |
| 비교예 7-1 | - | - | - | - | - | - | 0.1 | - |
| 비교예 7-2 | - | - | - | - | - | - | - | 0.1 |
| 식물성 경화유 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 |
| 스테아린산 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 |
| 글리세롤 스테아레이트 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| 스테아릴 알코올 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 |
| 폴리글리세릴-10 펜타스테아레이트 & 베헤닐 알코올 &소디움 스테아로일 락틸에이트 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| 아라키딜 베헤닐 알코올 &아라키딜글루코사이드 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| 세틸아릴 알코올 & 세테아릴글루코사이드 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 |
| PEG-100 스테아레이트 & 글리세롤올레이트 & 프로필렌글리콜 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 |
| 성분 | 비교제형예 | |||||
| 8-1 | 8-2 | 8-3 | 8-4 | 8-5 | 9 | |
| 정제수 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 |
| 비교예 8-1 | 0.1 | - | - | - | - | - |
| 비교예 8-2 | - | 0.1 | - | - | - | - |
| 비교예 8-3 | - | - | 0.1 | - | - | - |
| 비교예 8-4 | - | - | - | 0.1 | - | - |
| 비교예 8-5 | - | - | - | - | 0.1 | - |
| 식물성 경화유 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 |
| 스테아린산 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 | 0.60 |
| 글리세롤 스테아레이트 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| 스테아릴 알코올 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 |
| 폴리글리세릴-10 펜타스테아레이트 & 베헤닐 알코올 &소디움 스테아로일 락틸에이트 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| 아라키딜 베헤닐 알코올 &아라키딜글루코사이드 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| 세틸아릴 알코올 & 세테아릴글루코사이드 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 | 2.00 |
| PEG-100 스테아레이트 & 글리세롤올레이트 & 프로필렌글리콜 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 | 1.50 |
[시험예 3] 피부톤 개선 효과
인삼 다당체와 녹차 다당체의 피부톤 개선 효과를 알아보기 위하여 60명의 피험자를 10명씩 6개 군으로 나누고 각 군의 피험자에게 상기 제형예 1-1 내지 7-3, 비교제형예 1-1 내지 9의 영양크림을 각각 사용(저녁 1회/일 도포, 총 1주간)하도록 한 후, Facial Stage DM-3(Moritex, Japan) 기기를 활용하여 피부톤 개선 정도를 평가하였다. 피부톤 개선율은 피부의 명도 및 색채 측정값으로 피부의 명도 및 색채 변화 값으로 판단하였으며, 그 결과는 하기 표 8에 나타내었다. 명도 및 색채 변화값이 클수록 피부톤이 개선되었음을 의미한다.
| 피부톤 개선율(%) | ||
| 시험물질 | 명도(평균±표준편차) | 색채(평균±표준편차) |
| 제형예 1-1 | 12±2.72 | 12±2.48 |
| 제형예 1-2 | 14±3.05 | 12±2.38 |
| 제형예 1-3 | 15±2.24 | 14±2.66 |
| 제형예 2-1 | 12±2.87 | 12±2.45 |
| 제형예 2-2 | 13±2.56 | 13±2.86 |
| 제형예 2-3 | 15±2.44 | 14±3.12 |
| 제형예 3-1 | 13±2.91 | 12±2.17 |
| 제형예 3-2 | 14±2.31 | 13±2.85 |
| 제형예 3-3 | 15±2.85 | 14±2.69 |
| 제형예 4-1 | 13±2.12 | 12±2.42 |
| 제형예 4-2 | 14±2.53 | 13±2.33 |
| 제형예 4-3 | 15±2.48 | 14±2.68 |
| 제형예 5-1 | 12±2.64 | 12±3.19 |
| 제형예 5-2 | 14±2.38 | 13±2.77 |
| 제형예 5-3 | 15±2.49 | 13±2.69 |
| 제형예 6-1 | 13±2.75 | 12±2.15 |
| 제형예 6-2 | 14±2.66 | 13±2.32 |
| 제형예 6-3 | 15±2.47 | 14±2.88 |
| 제형예 7-1 | 13±3.25 | 12±2.29 |
| 제형예 7-2 | 14±2.88 | 13±2.19 |
| 제형예 7-3 | 15±3.04 | 13±2.68 |
| 비교제형예 1-1 | 11±2.48 | 10±2.95 |
| 비교제형예 1-2 | 11±2.67 | 10±2.27 |
| 비교제형예 2-1 | 12±2.38 | 11±2.35 |
| 비교제형예 2-2 | 11±3.08 | 10±2.46 |
| 비교제형예 3-1 | 12±2.45 | 11±2.25 |
| 비교제형예 3-2 | 11±2.42 | 10±2.23 |
| 비교제형예 4-1 | 12±2.98 | 10±2.44 |
| 비교제형예 4-2 | 11±2.25 | 10±2.69 |
| 비교제형예 5-1 | 12±2.47 | 11±2.05 |
| 비교제형예 5-2 | 11±2.61 | 10±2.08 |
| 비교제형예 6-1 | 12±2.23 | 11±3.14 |
| 비교제형예 6-2 | 11±2.48 | 10±2.36 |
| 비교제형예 7-1 | 12±2.92 | 11±2.48 |
| 비교제형예 7-2 | 11±2.16 | 10±2.91 |
| 비교제형예 8-1 | 11±2.02 | 10±2.18 |
| 비교제형예 8-2 | 10±2.38 | 9±2.16 |
| 비교제형예 8-3 | 12±3.04 | 11±1.89 |
| 비교제형예 8-4 | 13±2.95 | 13±2.12 |
| 비교제형예 8-5 | 15±3.25 | 13±2.03 |
| 비교제형예 9 | 5±2.34 | 5±2.05 |
상기 표 8 결과에서, 인삼 다당체와 녹차 다당체 각각을 함유한 경우에는 피부톤 개선 효과가 미비하지만, 이들을 함께 사용하는 경우는 피부톤 개선 효과가 현저하게 우수함을 알 수 있다. 따라서 인삼 및 녹차의 발효물로부터 추출한 다당체를 모두 함유하는 조성물은 매우 우수한 피부톤 개선 효과를 제공할 수 있음을 알 수 있다.
[시험예 4] 자외선 차단 지수 측정
상기 비교예 및 실시예들의 UVB차단 효과를 확인하기 위하여, 자외선 차단지수(SPF, Sun Protection Factor)를 문헌에 보고된 일반적인 방법(J. Soc. Cosmet. Chem., 40, pp127-133, 1989)에 따라 측정하였다. 여성 30명을 대상으로 솔라 시뮬레이터(Solar simulater) 램프로부터 시험 부위에 방사되는 자외선의 광량을 20-100mj/㎠로 조정하여 피시험자의 등 부위에 조사하였다. 시료의 자외선 차단 효과를 확인하기 위하여 피험자의 등에 2㎕/㎠의 두께로 시료를 균일하게 도포하고 15분간 방치하여 건조하였다. 자외선 조사창을 상기 실시예 1-1 내지 7-3, 비교예 1-1 내지 8-5의 시료 도포 부위에 부착하여 고정시키고 조사창을 제외한 다른 부위를 피혁과 수건을 사용하여 자외선을 차단하며 자외선을 조사하였다. 자외선을 조사하고 24시간 후 최소홍반량(MED)을 판정하고, 하기 수학식 3에 따라 자외선 차단 효과를 계산하였다. UVB 차단 효과는 SPF로 나타내는데, 여기서 SPF란 무처리된 피부상에 MED를 생성시키는데 요구되는 자외선량에 대한 자외선 차단제가 처리된 피부상에 MED를 생성시키는데 요구되는 자외선량으로 정의되고, 하기 수학식 3으로 계산된다. 따라서, SPF가 높을수록 UVB 차단효과가 우수하다는 것을 의미한다. 상기 방법에 의한 결과를 하기 표 9에 나타내었다.
| 시험물질 | 자외선 차단지수 (SPF) |
| 대조군 | 8 |
| 실시예 1-1 | 23 |
| 실시예 1-2 | 26 |
| 실시예 1-3 | 29 |
| 실시예 2-1 | 24 |
| 실시예 2-2 | 27 |
| 실시예 2-3 | 30 |
| 실시예 3-1 | 22 |
| 실시예 3-2 | 25 |
| 실시예 3-3 | 27 |
| 실시예 4-1 | 24 |
| 실시예 4-2 | 26 |
| 실시예 4-3 | 29 |
| 실시예 5-1 | 24 |
| 실시예 5-2 | 27 |
| 실시예 5-3 | 29 |
| 실시예 6-1 | 25 |
| 실시예 6-2 | 26 |
| 실시예 6-3 | 28 |
| 실시예 7-1 | 25 |
| 실시예 7-2 | 28 |
| 실시예 7-3 | 31 |
| 비교예 1-1 | 15 |
| 비교예 1-2 | 13 |
| 비교예 2-1 | 16 |
| 비교예 2-2 | 13 |
| 비교예 3-1 | 16 |
| 비교예 3-2 | 15 |
| 비교예 4-1 | 17 |
| 비교예 4-2 | 14 |
| 비교예 5-1 | 16 |
| 비교예 5-2 | 15 |
| 비교예 6-1 | 16 |
| 비교예 6-2 | 14 |
| 비교예 7-1 | 17 |
| 비교예 7-2 | 16 |
| 비교예 8-1 | 15 |
| 비교예 8-2 | 12 |
| 비교예 8-3 | 24 |
| 비교예 8-4 | 25 |
| 비교예 8-5 | 28 |
상기 표 9에 나타낸 바와 같이, 인삼 다당체와 녹차 다당체 각각을 함유한 경우보다 이들을 함께 사용하는 경우에 자외선 차단 효과가 현저하게 우수함을 알 수 있다.
[참조예 2] 제형예 및 비교제형예의 영양화장수 제조
하기 표 10 내지 표 14의 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양화장수(밀크로션)를 제조하였다(단위: 중량%).
| 성분 | 제형예 | ||||||||
| 1-1 | 1-2 | 1-3 | 2-1 | 2-2 | 2-3 | 3-1 | 3-2 | 3-3 | |
| 정제수 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 |
| 실시예 1-1 | 0.1 | - | - | - | - | - | - | - | - |
| 실시예 1-2 | - | 0.1 | - | - | - | - | - | - | - |
| 실시예 1-3 | - | - | 0.1 | - | - | - | - | - | - |
| 실시예 2-1 | - | - | - | 0.1 | - | - | - | - | - |
| 실시예 2-2 | - | - | - | - | 0.1 | - | - | - | - |
| 실시예 2-3 | - | - | - | - | - | 0.1 | - | - | - |
| 실시예 3-1 | - | - | - | - | - | - | 0.1 | - | - |
| 실시예 3-2 | - | - | - | - | - | - | - | 0.1 | - |
| 실시예 3-3 | - | - | - | - | - | - | - | - | 0.1 |
| 시토 스테롤 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 |
| 폴리글리세릴 2-올레이트 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
| 세라마이드 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 |
| 세테아레스-4 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 |
| 콜레스테롤 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
| 디세틸포스페이트 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 |
| 농글리세린 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 |
| 선플라워오일 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 |
| 카르복시비닐폴리머 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
| 잔탄검 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 |
| 방부제, 향 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 |
| 성분 | 제형예 | ||||||||
| 4-1 | 4-2 | 4-3 | 5-1 | 5-2 | 5-3 | 6-1 | 6-2 | 6-3 | |
| 정제수 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 |
| 실시예 4-1 | 0.1 | - | - | - | - | - | - | - | - |
| 실시예 4-2 | - | 0.1 | - | - | - | - | - | - | - |
| 실시예 4-3 | - | - | 0.1 | - | - | - | - | - | - |
| 실시예 5-1 | - | - | - | 0.1 | - | - | - | - | - |
| 실시예 5-2 | - | - | - | - | 0.1 | - | - | - | - |
| 실시예 5-3 | - | - | - | - | - | 0.1 | - | - | - |
| 실시예 6-1 | - | - | - | - | - | - | 0.1 | - | - |
| 실시예 6-2 | - | - | - | - | - | - | - | 0.1 | - |
| 실시예 6-3 | - | - | - | - | - | - | - | - | 0.1 |
| 시토 스테롤 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 |
| 폴리글리세릴 2-올레이트 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
| 세라마이드 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 |
| 세테아레스-4 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 |
| 콜레스테롤 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
| 디세틸포스페이트 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 |
| 농글리세린 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 |
| 선플라워오일 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 |
| 카르복시비닐폴리머 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
| 잔탄검 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 |
| 방부제, 향 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 |
| 성분 | 제형예 | 비교제형예 | |||||||
| 7-1 | 7-2 | 7-3 | 1-1 | 1-2 | 2-1 | 2-2 | 3-1 | 3-2 | |
| 정제수 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 |
| 실시예 7-1 | 0.1 | - | - | - | - | - | - | - | - |
| 실시예 7-2 | - | 0.1 | - | - | - | - | - | - | - |
| 실시예 7-3 | - | - | 0.1 | - | - | - | - | - | - |
| 비교예 1-1 | - | - | - | 0.1 | - | - | - | - | - |
| 비교예 1-2 | - | - | - | - | 0.1 | - | - | - | - |
| 비교예 2-1 | - | - | - | - | - | 0.1 | - | - | - |
| 비교예 2-2 | - | - | - | - | - | - | 0.1 | - | - |
| 비교예 3-1 | - | - | - | - | - | - | - | 0.1 | - |
| 비교예 3-2 | - | - | - | - | - | - | - | - | 0.1 |
| 시토 스테롤 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 |
| 폴리글리세릴 2-올레이트 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
| 세라마이드 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 |
| 세테아레스-4 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 |
| 콜레스테롤 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
| 디세틸포스페이트 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 |
| 농글리세린 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 |
| 선플라워오일 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 |
| 카르복시비닐폴리머 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
| 잔탄검 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 |
| 방부제, 향 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 |
| 성분 | 비교제형예 | |||||||
| 4-1 | 4-2 | 5-1 | 5-2 | 6-1 | 6-2 | 7-1 | 7-2 | |
| 정제수 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 |
| 비교예 4-1 | 0.1 | - | - | - | - | - | - | - |
| 비교예 4-2 | - | 0.1 | - | - | - | - | - | - |
| 비교예 5-1 | - | - | 0.1 | - | - | - | - | - |
| 비교예 5-2 | - | - | - | 0.1 | - | - | - | - |
| 비교예 6-1 | - | - | - | - | 0.1 | - | - | - |
| 비교예 6-2 | - | - | - | - | - | 0.1 | - | - |
| 비교예 7-1 | - | - | - | - | - | - | 0.1 | - |
| 비교예 7-2 | - | - | - | - | - | - | - | 0.1 |
| 시토 스테롤 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 |
| 폴리글리세릴 2-올레이트 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
| 세라마이드 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 |
| 세테아레스-4 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 |
| 콜레스테롤 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
| 디세틸포스페이트 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 |
| 농글리세린 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 |
| 선플라워오일 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 |
| 카르복시비닐폴리머 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
| 잔탄검 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 |
| 방부제, 향 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 |
| 성분 | 비교제형예 | |||||
| 8-1 | 8-2 | 8-3 | 8-4 | 8-5 | 9 | |
| 정제수 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 |
| 비교예 8-1 | 0.1 | - | - | - | - | - |
| 비교예 8-2 | - | 0.1 | - | - | - | - |
| 비교예 8-3 | - | - | 0.1 | - | - | - |
| 비교예 8-4 | - | - | - | 0.1 | - | - |
| 비교예 8-5 | - | - | - | - | 0.1 | - |
| 시토 스테롤 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 | 1.7 |
| 폴리글리세릴 2-올레이트 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
| 세라마이드 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 | 0.7 |
| 세테아레스-4 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 | 1.2 |
| 콜레스테롤 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
| 디세틸포스페이트 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 |
| 농글리세린 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 |
| 선플라워오일 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 | 10.0 |
| 카르복시비닐폴리머 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
| 잔탄검 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 |
| 방부제, 향 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 |
[시험예 5] 피부자극도 평가
인삼 다당체와 녹차 다당체의 피부안전성, 즉 피부반응의 관찰을 통해서 자극 또는 알레르기성 반응의 발생 여부를 알아보기 위하여 한국 식품의약품안전청 기준 피부안전성 검사법에 따라 인체 첩포 시험을 실시하였다. 피시험자로 20~35세의 여성 30명을 선정하고 피시험자의 등 정중선을 피해 양쪽에 상기 제형예 1-1 내지 7-3, 비교제형예 1-1 내지 9의 영양화장수를 각각 도포하고, 1시간 동안 방치해 놓은 후 하기 판정 기준에 따라서 피부 자극도를 평가하였다. 그 결과는 하기 표 15 내지 표 19에 나타내었다.
| 제형예 | |||||||||
| 1-1 | 1-2 | 1-3 | 2-1 | 2-2 | 2-3 | 3-1 | 3-2 | 3-3 | |
| +++ | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| ++ | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| + | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 0 | 0 | 1 |
| ± | 10 | 10 | 10 | 9 | 10 | 9 | 10 | 10 | 9 |
| - | 10 | 10 | 10 | 11 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
| (+++: 강한 트러블, ++: 약한 트러블, +: 미약한 트러블, ±: 정상, -: 음성) | |||||||||
| 제형예 | |||||||||
| 4-1 | 4-2 | 4-3 | 5-1 | 5-2 | 5-3 | 6-1 | 6-2 | 6-3 | |
| +++ | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| ++ | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| + | 1 | 0 | 0 | 0 | 1 | 0 | 0 | 1 | 0 |
| ± | 10 | 9 | 8 | 9 | 8 | 10 | 11 | 10 | 10 |
| - | 9 | 11 | 12 | 11 | 11 | 10 | 9 | 9 | 10 |
| (+++: 강한 트러블, ++: 약한 트러블, +: 미약한 트러블, ±: 정상, -: 음성) | |||||||||
| 제형예 | 비교제형예 | ||||||||
| 7-1 | 7-2 | 7-3 | 1-1 | 1-2 | 2-1 | 2-2 | 3-1 | 3-2 | |
| +++ | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| ++ | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| + | 1 | 1 | 0 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 |
| ± | 10 | 10 | 9 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 11 |
| - | 9 | 9 | 11 | 9 | 9 | 9 | 9 | 9 | 8 |
| (+++: 강한 트러블, ++: 약한 트러블, +: 미약한 트러블, ±: 정상, -: 음성) | |||||||||
| 비교제형예 | ||||||||
| 4-1 | 4-2 | 5-1 | 5-2 | 6-1 | 6-2 | 7-1 | 7-2 | |
| +++ | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| ++ | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| + | 1 | 1 | 1 | 1 | 0 | 0 | 0 | 1 |
| ± | 9 | 10 | 11 | 10 | 9 | 11 | 10 | 10 |
| - | 10 | 9 | 8 | 9 | 11 | 9 | 10 | 9 |
| (+++: 강한 트러블, ++: 약한 트러블, +: 미약한 트러블, ±: 정상, -: 음성) | ||||||||
| 비교제형예 | ||||||
| 8-1 | 8-2 | 8-3 | 8-4 | 8-5 | 9 | |
| +++ | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| ++ | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| + | 2 | 2 | 1 | 1 | 0 | 2 |
| ± | 10 | 10 | 10 | 11 | 11 | 9 |
| - | 8 | 8 | 9 | 8 | 9 | 9 |
| (+++: 강한 트러블, ++: 약한 트러블, +: 미약한 트러블, ±: 정상, -: 음성) | ||||||
상기 표 15 내지 표 19에 나타난 바와 같이, 본 발명의 인삼 및 녹차의 발효물로부터 추출한 다당체를 함께 사용하는 경우는 피부 자극을 유발하지 않는 것으로 나타났다. 따라서 본 발명의 조성물은 피부 자극을 일으키지 않고 안전하여 자외선 차단용 피부 외용제 조성물 또는 약학 조성물로 사용될 수 있음을 확인할 수 있었다.
이상의 결과로부터, 본 발명에 의한 인삼 및 녹차의 발효물로부터 추출한 다당체를 함유하는 조성물은 피부톤을 개선시키고, 자외선 차단에 효과적이며, 안정성 면에서도 우수하여 미백용 및 자외선 차단용 조성물로서 유용한 원료임을 확인할 수 있었다.
이하, 본 발명에 따른 조성물의 제형예를 설명하나, 약학 조성물 및 화장료 조성물은 여러 가지 제형으로 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
[제제예 1] 연질캅셀제
비교예 1-1의 인삼 다당체 150mg, 비교예 1-2의 녹차 다당체 150mg, 팜유 2mg, 팜경화유 8mg, 황납 4mg 및 레시틴 6mg을 혼합하고, 통상의 방법에 따라 1 캡슐당 400mg씩 충진하여 연질캅셀을 제조하였다.
[제제예 2] 정제
비교예 1-1의 인삼 다당체 150mg, 비교예 1-2의 녹차 다당체 150mg, 포도당 100mg, 홍삼추출물 50mg, 전분 96mg 및 마그네슘 스테아레이트 4mg을 혼합하고 30% 에탄올을 40mg 첨가하여 과립을 형성한 후, 60℃에서 건조하고 타정기를 이용하여 정제로 타정하였다.
[제제예 3] 과립제
비교예 1-1의 인삼 다당체 150mg, 비교예 1-2의 녹차 다당체 150mg, 포도당 100mg, 홍삼추출물 50mg 및 전분 600mg을 혼합하고 30% 에탄올을 100mg 첨가하여 과립을 형성한 후, 60℃에서 건조하여 과립을 형성한 다음 포에 충진하였다. 내용물의 최종 중량은 1g으로 하였다.
[제제예 4] 유연화장수(스킨로션)
하기 표 20에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 유연화장수를 제조하였다.
| 배합 성분 | 함량 (중량 %) |
| 비교예 1-1의 인삼 다당체 | 0.1 |
| 비교예 1-2의 녹차 다당체 | 0.1 |
| 글리세린 | 3.0 |
| 부틸렌글리콜 | 2.0 |
| 프로필렌글리콜 | 2.0 |
| 카르복시비닐폴리머 | 0.1 |
| 피이지-12 노닐페닐에테르 | 0.2 |
| 폴리솔베이트 80 | 0.4 |
| 에탄올 | 10.0 |
| 트리에탄올아민 | 0.1 |
| 방부제, 색소, 향료 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
[제제예 5] 영양화장수(밀크로션)
하기 표 21에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양화장수를 제조하였다.
| 배합 성분 | 함량 (중량 %) |
| 비교예 1-1의 인삼 다당체 | 0.5 |
| 비교예 1-2의 녹차 다당체 | 0.5 |
| 글리세린 | 3.0 |
| 부틸렌글리콜 | 3.0 |
| 프로필렌글리콜 | 3.0 |
| 카르복시비닐폴리머 | 0.1 |
| 밀납 | 4.0 |
| 폴리솔베이트 60 | 1.5 |
| 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 | 5.0 |
| 스쿠알란 | 5.0 |
| 솔비타세스퀴올레이트 | 1.5 |
| 유동파라핀 | 0.5 |
| 세테아릴 알코올 | 1.0 |
| 트리에탄올아민 | 0.2 |
| 방부제, 색소, 향료 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
[제제예 6] 영양크림
하기 표 22에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양크림을 제조하였다.
| 배합 성분 | 함량(중량%) |
| 비교예 1-1의 인삼 다당체 | 1.0 |
| 비교예 1-2의 녹차 다당체 | 1.0 |
| 글리세린 | 3.0 |
| 부틸렌글리콜 | 3.0 |
| 유동파라핀 | 7.0 |
| 베타글루칸 | 7.0 |
| 카보머 | 0.1 |
| 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 | 3.0 |
| 스쿠알란 | 5.0 |
| 세테아릴 글루코사이드 | 1.5 |
| 소르비탄 스테아레이트 | 0.4 |
| 폴리솔베이트 60 | 1.2 |
| 트리에탄올아민 | 0.1 |
| 방부제, 색소, 향료 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
[제제예 7] 마사지 크림
하기 표 23에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 마사지 크림을 제조하였다.
| 배합 성분 | 함량(중량%) |
| 비교예 1-1의 인삼 다당체 | 1.5 |
| 비교예 1-2의 녹차 다당체 | 1.5 |
| 글리세린 | 8.0 |
| 부틸렌글리콜 | 4.0 |
| 유동파라핀 | 45.0 |
| 베타글루칸 | 7.0 |
| 카보머 | 0.1 |
| 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 | 3.0 |
| 밀납 | 4.0 |
| 세테아릴 글루코사이드 | 1.5 |
| 세스퀴 올레인산 소르비탄 | 0.9 |
| 바세린 | 3.0 |
| 파라핀 | 1.5 |
| 방부제, 색소, 향료 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
[제제예 8] 팩
하기 표 24에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 팩을 제조하였다.
| 배합 성분 | 함량(중량%) |
| 비교예 1-1의 인삼 다당체 | 0.1 |
| 비교예 1-2의 녹차 다당체 | 0.1 |
| 글리세린 | 4.0 |
| 폴리비닐알콜 | 15.0 |
| 히알루론산 추출물 | 5.0 |
| 베타글루칸 | 7.0 |
| 알란토인 | 0.1 |
| 노닐 페닐에테르 | 0.4 |
| 폴리솔베이트 60 | 1.2 |
| 에탄올 방부제 | 6.0적량 |
| 방부제, 색소, 향료 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
[제제예 9] 연고
하기 표 25에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 연고를 제조하였다.
| 배합 성분 | 함량(중량%) |
| 비교예 1-1의 인삼 다당체 | 0.1 |
| 비교예 1-2의 녹차 다당체 | 0.1 |
| 글리세린 | 8.0 |
| 부틸렌글리콜 | 4.0 |
| 유동파라핀 | 15.0 |
| 베타글루칸 | 7.0 |
| 카보머 | 0.1 |
| 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 | 3.0 |
| 스쿠알란 | 1.0 |
| 세테아릴 글루코사이드 | 1.5 |
| 소르비탄 스테아레이트 | 0.4 |
| 세테아릴 알코올 | 1.0 |
| 밀납 | 4.0 |
| 방부제, 색소, 향료 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (12)
- 인삼의 발효물에서 추출한 인삼 다당체 및 녹차의 발효물에서 추출한 녹차 다당체를 유효성분으로 함유하는 미백용 피부 외용제 조성물로서,
상기 인삼의 발효물 및 녹차의 발효물은 자연 발효, 염장 발효 및 균 발효로 이루어진 군에서 선택된 발효를 통해 얻어지고,
여기서 상기 자연 발효는 인삼, 녹차, 인삼 추출물 또는 녹차 추출물을 자당, 자일리톨, 올리고당, 식이섬유, 에리스리톨, 포도당 및 과당으로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 당 성분과 혼합하여 이루어지는 발효이고,
여기서 상기 염장 발효는 인삼, 녹차, 인삼 추출물 또는 녹차 추출물에 소금을 첨가하여 이루어지는 발효이고,
여기서 상기 균 발효는 인삼, 녹차, 인삼 추출물 또는 녹차 추출물에 효모균, 버섯균, 유산균, 누룩균, 바실러스속균으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 발효 균주를 접종하여 이루어지는 발효이고,
상기 균 발효에 의할 경우, 인삼 및 녹차에 대하여 동일한 균이 사용되는, 미백용 피부 외용제 조성물. - 제1항에 있어서, 상기 인삼 다당체와 녹차 다당체는 각각 조성물 총 중량에 대하여 0.001~10중량%의 양으로 함유되는 미백용 피부 외용제 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 인삼 다당체와 녹차 다당체는 중량비로 0.1~10:1의 비율로 혼합사용되는 미백용 피부 외용제 조성물.
- 인삼의 발효물에서 추출한 인삼 다당체 및 녹차의 발효물에서 추출한 녹차 다당체를 유효성분으로 함유하는 미백용 약학 조성물로서,
상기 인삼의 발효물 및 녹차의 발효물은 자연 발효, 염장 발효 및 균 발효로 이루어진 군에서 선택된 발효를 통해 얻어지고,
여기서 상기 자연 발효는 인삼, 녹차, 인삼 추출물 또는 녹차 추출물을 자당, 자일리톨, 올리고당, 식이섬유, 에리스리톨, 포도당 및 과당으로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 당 성분과 혼합하여 이루어지는 발효이고,
여기서 상기 염장 발효는 인삼, 녹차, 인삼 추출물 또는 녹차 추출물에 소금을 첨가하여 이루어지는 발효이고,
여기서 상기 균 발효는 인삼, 녹차, 인삼 추출물 또는 녹차 추출물에 효모균, 버섯균, 유산균, 누룩균, 바실러스속균으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 발효 균주를 접종하여 이루어지는 발효이고,
상기 균 발효에 의할 경우, 인삼 및 녹차에 대하여 동일한 균이 사용되는, 미백용 약학 조성물. - 제4항에 있어서, 상기 인삼 다당체와 녹차 다당체는 각각 조성물 총 중량에 대하여 0.001~10중량%의 양으로 함유되는 미백용 약학 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 인삼 다당체와 녹차 다당체는 중량비로 0.1~10:1의 비율로 혼합사용되는 미백용 약학 조성물.
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