KR101971546B1 - 유산균, 노루궁뎅이버섯 추출물 및 은행잎 추출물을 포함하는 인지기능 또는 기억능력 개선용 식품 조성물 - Google Patents

유산균, 노루궁뎅이버섯 추출물 및 은행잎 추출물을 포함하는 인지기능 또는 기억능력 개선용 식품 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 유산균, 은행잎 추출물 및 노루궁뎅이버섯 추출물의 혼합 조성물을 포함하는, 인지기능 또는 기억능력 개선용 조성물에 대한 것이다.

Description

유산균, 노루궁뎅이버섯 추출물 및 은행잎 추출물을 포함하는 인지기능 또는 기억능력 개선용 식품 조성물{FOOD COMPOSITION FOR IMPROVING LEARNING AND MEMORY FUNCTION COMPRISING LACTIC ACID BACTERIA, HERICIUM ERINACEUS EXTRACT AND GINKGO LEAF EXTRACT}
본 발명은 유산균, 노루궁뎅이버섯 추출물 및 은행잎 추출물을 포함하는 인지기능 또는 기억능력 개선용 식품 조성물에 대한 것이다.
노루궁뎅이버섯은 일반 버섯보다 많은 종류의 활성 다당을 가지고 있고, 그 중에서 갈락토키실로글루칸과 만노글루코키실란이라는 특수한 활성 다당체를 함유하고 있어서 항종양성이 뛰어나다. 또한, 노루궁뎅이버섯에서만 있다고 알려진 다당체인 헤리시움폴리사카라이드(Hericium Polysaccharide)는 박테리아나 바이러스 또는 결함이 있는 세포를 공격하여 대식세포나 림프구를 강화시키는 작용을 하여, 대장암이나 위암의 발생을 막아주고, 각종 위염에도 효과가 있는 것으로 조사되었다. 여기에 몇몇 약용버섯에만 있는 올레아놀릭산(Oleanolic Acid)이 노루궁뎅이버섯에는 많이 포함되어있어 위벽을 보호해 주어서 위궤양과 위염에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
한편, 최근 장내 미생물이 인체의 육체적 정신적 건강에 미치는 영향이 널리 알려지면서, 장내 유익한 미생물들의 종류를 다양하게 하고, 그 활성을 증진시키려는 노력이 이루어지고 있다. 이러한 노력 중 가장 대중적이며 널리 이루어지는 것이 프로바이오틱스의 섭취이다. 프로바이오틱스(probiotics)는 인체, 동물체 등의 건강에 유익한 영향을 미치는 생균을 가리키는데, 이 중 락토바실러스, 비피도박테리아, 락토코커스 등의 유산균들이 많이 이용되고 있다.
본 발명자들은 유산균, 노루궁뎅이버섯 추출물 및 은행잎 추출물을 이용하여 인지기능 또는 기억능력 개선용 제제를 연구하던 중 이를 특정 방법으로 가공하는 경우 인지기능 및 기억능력 개선 효과가 우수한 것을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 인지기능 또는 기억능력 개선용 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 유산균 및 노루궁뎅이버섯 추출물의 혼합 조성물을 포함하는, 인지기능 또는 기억능력 개선용 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물은 인지기능 또는 기억능력 개선 효과를 갖는다.
본 발명은 유산균 및 노루궁뎅이버섯 추출물의 혼합 조성물을 포함하는,
인지기능 또는 기억능력 개선용 조성물에 대한 것이다.
이하, 본 발명을 설명한다.
인지기능 또는 기억능력 개선용 조성물
본 발명은 유산균 및 노루궁뎅이버섯 추출물의 혼합 조성물을 포함하는, 인지기능 또는 기억능력 개선용 조성물에 대한 것이다. 이 때, 유산균 및 노루궁뎅이버섯 추출물 외 은행잎 추출물을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명은 유산균 분말을 이용하여 본 발명의 조성물을 제조할 수 있다. 상기 유산균은 비피도박테리움 락티스, 비피도박테리움 롱검, 락토바실러스 애시도필러스, 락토바실러스 플랜타룸 및 락토바실러스 람노서스로 구성된 군으로부터 선택되는 유산균을 포함할 수 있다. 바람직하게는 본 발명의 유산균은 비피도박테리움 락티스, 비피도박테리움 롱검, 락토바실러스 애시도필러스, 락토바실러스 플랜타룸 및 락토바실러스 람노서스를 포함할 수 있다. 더욱 바람직하게는 본 발명의 유산균은 비피도박테리움 락티스, 비피도박테리움 롱검, 락토바실러스 애시도필러스, 락토바실러스 플랜타룸, 락토바실러스 람노서스 및 비피도박테리움 락티스 이중마이크로 미세캡슐 분말을 포함할 수 있다.
이 때, 상기 비피도박테리움 락티스 이중마이크로 미세캡슐 분말을 제외한 나머지 유산균들은 이중마이크로 미세캡슐이 아니다. 상기 이중마이크로 미세캡슐이 아닌 유산균들은 다른 캡슐 형태로 코팅되어 있을 수도 있고, 코팅이 되어 있지 않을 수도 있다.
바람직하게는 본 발명의 유산균은 유산균 분말이며, 비피도박테리움 락티스 이중마이크로 미세캡슐 분말과 이중마이크로 미세캡슐이 아닌 비피도박테리움 락티스를 1 : 0.5 내지 1.5의 중량비로 포함하며, 바람직하게는 1 : 0.8 내지 1.2의 중량비로 포함하고, 더욱 바람직하게는 1: 1의 중량비로 포함한다.
상기 비피도박테리움 락티스는 비피도박테리움 락티스 CBG-C10 (기탁번호 KACC 15464)인 것이 바람직하다. 상기 비피도박테리움 롱검은 비피도박테리움 롱검 CBG-C11 (기탁번호 KCTC 11979BP)인 것이 바람직하다. 상기 락토바실러스 애시도필러스는 락토바실러스 애시도필러스 CBG-C13 (기탁번호 KACC 91980P)인 것이 바람직하다. 상기 락토바실러스 플랜타룸은 락토바실러스 플랜타룸 JBMI F5 (기탁번호 KACC 91638P) 인 것이 바람직하다. 상기 락토바실러스 람노서스는 락토바실러스 람노서스 CBG-C14 (기탁번호 KACC 91981P) 인 것이 바람직하다.
또한 한국등록특허 10-1446309호, 10-1401530호 및 10-1274467호 및 한국특허출원 10-2015-0023370호 및 10-2015-0023375호의 내용은 그 전체가 참고로서 본 출원 명세서에 모두 포함된다.
본 발명의 노루궁뎅이버섯 추출물은 노루궁뎅이버섯 자실체의 추출물, 노루궁뎅이 균사체의 추출물 또는 노루궁뎅이버섯 자실체 및 균사체의 추출물이다. 상기 추출물은 바람직하게는 물 또는 탄소 수 5 이하의 저가 알코올의 추출물이며, 더욱 바람직하게는 물 또는 탄소 수 3 이하의 저가 알코올의 추출물이고 가장 바람직하게는 메탄올 추출물 또는 에탄올 추출물이다. 이 때 상기 에탄올 추출물은 에탄올과 물을 포함하는 용매로 추출한 추출물인 것이 바람직하고, 상기 메탄올 추출물은 메탄올과 물을 포함하는 용매로 추출한 추출물인 것이 바람직하다. 또는 본 발명의 노루궁뎅이버섯 추출물은 노루궁뎅이버섯 분말을 메탄올로 추출한 메탄올 추출물을 물로 현탁한 후, n-헥산, CH2Cl2, 에틸 아세테이트, n-부탄올, 물의 순서로 분획하여 얻은 n-헥산층 유래일 수 있고, 이 경우 헤리신(Hericene) A를 포함할 수 있다. 또는 또는 본 발명의 노루궁뎅이버섯 추출물은 노루궁뎅이버섯 분말을 메탄올로 추출한 메탄올 추출물을 물로 현탁한 후, n-헥산, CH2Cl2, 에틸 아세테이트, n-부탄올, 물의 순서로 분획하여 얻은 n-헥산층을 다시 메탄올로 재결정하여 얻은 조결정 유래일 수 있고, 이 경우 코랄로신(corallocin) A를 포함할 수 있다.
상기 은행잎 추출물은 은행잎의 용매 추출물이다. 상기 용매는 상기 추출물은 바람직하게는 물 또는 탄소 수 5 이하의 저가 알코올의 추출물이며, 더욱 바람직하게는 물 또는 탄소 수 3 이하의 저가 알코올의 추출물이고 가장 바람직하게는 물 추출물이다. 예컨대, 상기 은행잎 추출물은 은행잎 100 중량부에 대하여 물 400 내지 600 중량부를 가하고, 이를 100 내지 110 ℃에서 1시간 내지 5시간 동안 가열하여 제조한 은행잎 열수 추출물이다. 상기 은행잎 열수 추출물은 추출 후 농축 및 건조하여 분말 상태로 이용하는 것이 바람직하다.
상기 혼합 조성물은 유산균에 노루궁뎅이버섯 추출물 및 은행잎 추출물을 가하고 혼합하여 덩어리진 혼합물을 제조하고, 여기에 코팅 용액을 가하여 코팅한 후 동결건조하여 제조한다. 상기 노루궁뎅이버섯 추출물이 점성을 갖고 있기 때문에 유산균 및 은행잎 추출물을 혼합한 후 코팅함으로써 유산균의 생존력을 높이고 체내 이용률을 증진시킨다. 또한 노루궁뎅이버섯 추출물과 유산균 및 은행잎 추출물이 혼합됨으로써 이들을 개별적으로 이용할 때보다 인기기능 및 기억능력 개선 효과가 유의하게 증진되게 된다. 노루궁뎅이버섯 추출물을 건조시킨 상태로 유산균 및 은행잎 추출물을 혼합하여 이용하는 경우, 노루궁뎅이버섯 추출물이 점성을 가진 상태 그대로 이용하는 경우보다 인기기능 및 기억능력 개선 효과가 낮아지게 된다.
이 때, 상기 유산균 100 중량부에 노루궁뎅이버섯 추출물 300 내지 500 중량부, 은행잎 추출물 200 내지 400 중량부를 이용한다.
상기 코팅 용액은 펙틴, 카세인 나트륨 및 탈지 분유를 포함하며, 바람직하게는 상기 코팅 용액은 탈지 분유 100 중량부에 대하여 팩틴 10 내지 20 중량부, 카세인 나트륨 70 내지 120 중량부를 포함한다.
식품 조성물
본 발명의 인지기능 또는 기억능력 개선용 조성물은 식품 조성물일 수 있다. 본 발명의 식품은 건강보조식품, 건강기능식품, 기능성 식품 등이 될 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니며, 천연식품, 가공식품, 일반적인 식자재 등에 본 발명의 혼합 조성물을 포함하는 것도 포함된다.
본 발명의 식품 조성물은, 본 발명의 혼합 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 조성물과 함께 사용될 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방, 개선 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 본 발명의 본 발명의 혼합 조성물은, 식품 또는 음료의 제조 시에 식품 또는 음료의 원료 100 중량%에 대하여 0.1 내지 70 중량%, 바람직하게는 2 내지 50 중량%로 첨가될 수 있다. 상기 본 발명의 혼합 조성물의 유효용량은 상기 약학적 조성물의 유효용량에 준해서 사용할 수 있으나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 유효성분은 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 식품 조성물은 정제, 경질 또는 연질 캅셀제, 액제, 현탁제 등과 같은 경구투여용 제제의 형태로 이용될 수 있으며, 이들 제제는 허용 가능한 통상의 담체, 예를 들어 경구투여용 제제의 경우에는 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 가용화제, 현탁화제, 보존제 또는 증량제 등을 사용하여 조제할 수 있다.
상기 본 발명의 혼합 조성물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제, 기타 영양제 등을 들 수 있으나 이들 종류의 식품으로 제한되는 것은 아니다.
약학적 조성물
본 발명의 인지기능 또는 기억능력 개선용 조성물은 약학적 조성물일 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 알츠하이머, 파킨슨병, 루게릭병, 경도 인지장애, 뇌졸중, 및 헌팅턴 병으로 구성된 군으로부터 선택되는 질환을 예방, 개선 또는 치료한다.
본 발명의 약학적 조성물은 상기 혼합 조성물을 0.01 내지 80 중량% 포함할 수 있으며, 바람직하게는 0.02 내지 65 중량% 포함할 수 있다. 그러나 이는 투약자의 필요에 따라 증감할 수 있으며, 식생활, 영양 상태, 병의 진행 정도, 비만의 정도 등 상황에 따라 적절히 증감할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구로 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다. 바람직한 약제학적 제제는 정제, 경질 또는 연질 캅셀제, 액제, 현탁제 등과 같은 경구투여용 제제가 있으며 이들 약제학적 제제는 약제학적으로 허용 가능한 통상의 담체, 예를 들어 경구투여용 제제의 경우에는 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 가용화제, 현탁화제, 보존제 또는 증량제 등을 사용하여 조제할 수 있다.
본 발명의 혼합 조성물을 포함하는 약학적 조성물의 투여 용량은, 환자의 상태, 연령, 성별 및 합병증 등의 다양한 요인에 따라 전문가에 의해 결정될 수 있지만 일반적으로는 성인 1kg 당 0.1㎎ 내지 10g, 바람직하게는 10 mg 내지 5g의 용량으로 투여될 수 있다. 또, 단위 제형당 상기 약학적 조성물의 1일 용량 또는 이의 1/2, 1/3 또는 1/4의 용량이 함유되도록 하며, 하루 1 내지 6 회 투여될 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 유효성분은 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나, 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
<재료 및 방법>
노루궁뎅이버섯의 자실체 및 균사체는 시판되는 국산 노루궁뎅이버섯의 자실체 및 균사체를 구입하여 이용하였다. 알츠하이머 모델 마우스는 C57BL/6 마우스를 조레틸(Zoletil)과 럼푼(Rompun)이 2:1로 혼합된 마취약으로 마취한 후, 뇌의 해마 CA1 지역(coordinates: -2.3 mm anterior/posterior, 1.8 mm medial/lateral and -1.75 mm dorsal/ventral from Bregma)에 아밀로이드 베타 펩티드를 주입하여, 알츠하이머 병 유발 마우스 모델을 제조하여 이용하였다.
유산균들로는 하기 표 1의 유산균들을 사용하였으며, 유산균들은 ㈜케비젠으로부터 공급받아 이용하였다. 또한 ㈜케비젠으로부터 비피도박테리움 락티스 CBG-C10의 이중마이크로 미세캡슐 분말(Bifidobacterium lactis)을 공급받아 이용하였다. 이 중 락토바실러스 애시도필러스 CBG-C13 (기탁번호 KACC 91980P) 및 락토바실러스 람노서스 CBG-C14(기탁번호 KACC 91981P)는 내산성, 내담즙성 및 항생제 내성이 있으며, 특히 장내 유익균 증식 및 유해균 억제에 우수한 효과를 갖고 있고, 배변활동을 돕는 능력이 매우 우수하다.
균주명 특허등록(출원)번호 기탁번호
비피도박테리움 락티스(Bifidobacterium lactis 비피도박테리움 락티스(Bifidobacterium lactis) CBG-C10 특허등록번호:
10-1446309호
KACC 15464
비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) CBG-C11 특허등록번호:
10-1401530호
KCTC 11979BP
락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) CBG-C13 특허출원번호:
10-2015-0023370호
KACC 91980P
락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum) 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum) JBMI F5 특허등록번호:
10-1274467호
KACC 91638P
락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus) 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus) CBG-C14 특허출원번호:
10-2015-0023375호
KACC 91981P
<제조예 1> 노루궁뎅이버섯 자실체 분말의 제조
노루궁뎅이버섯 자실체 10 kg을 깨끗하게 세척한 후, 원통형 스테인레스 감압 건조기에서 40 내지 60 ℃의 온도로 20시간 이상 건조하여, 수분함량 3% 이하의 노루궁뎅이버섯 자실체 건조체를 제조하였다. 제조된 노루궁뎅이버섯 자실체 건조체를 핀밀(pin mill)로 분쇄하여 약 50mesh의 노루궁뎅이버섯 자실체 분말을 제조하였다.
<제조예 2> 노루궁뎅이버섯 균사체 분말의 제조
노루궁뎅이버섯 균사체 10 kg을 깨끗하게 세척한 후, 원통형 스테인레스 감압 건조기에서 40 내지 60℃의 온도로 20시간 이상 건조하여, 수분함량 3% 이하의 노루궁뎅이버섯 균사체 건조체를 제조하였다. 제조된 노루궁뎅이버섯 균사체 건조체를 핀밀(pin mill)로 분쇄하여 약 50mesh의 노루궁뎅이버섯 균사체 분말을 제조하였다.
<제조예 3> 노루궁뎅이버섯 추출물 A의 제조
제조예 1에서 제조한 노루궁뎅이버섯 자실체 분말 5 kg을 에탄올 2.5 L와 물 10 L의 혼합용제에 넣고, 환류(Reflux)장치가 있는 스테인레스 용기 100 L에서 90 내지 98 ℃의 온도로 24시간 동안 가열하여 추출하였다. 그리고 상기 조추출물을 부직포 필터로 필터링한 후, 감압증류방식으로 혼합용제를 증류하여, 농축된 액체 형태의 노루궁뎅이버섯 자실체 추출물 A 500 mL를 제조하였다.
<제조예 4> 노루궁뎅이버섯 추출물 B의 제조
제조예 2에서 제조한 노루궁뎅이버섯 균사체 분말 5 kg을 에탄올 2.5 L와 물 10 L의 혼합용제에 넣고, 환류(Reflux)장치가 있는 스테인레스 용기 100 L에서 90 내지 98 ℃의 온도로 24시간 동안 가열하여 추출하였다. 그리고 상기 조추출물을 부직포 필터로 필터링한 후, 감압증류방식으로 혼합용제를 증류하여, 농축된 액체 형태의 노루궁뎅이버섯 균사체 추출물 B 500 mL를 제조하였다.
<제조예 5> 노루궁뎅이버섯 추출물 C의 제조
제조예 1에서 제조한 노루궁뎅이버섯 자실체 분말 5 kg을 에탄올 2.5 L와 물 10 L의 혼합용제에 넣고, 환류(Reflux)장치가 있는 스테인레스 용기 100 L에서 90 내지 98 ℃의 온도로 24시간 동안 가열하여 추출하였다. 그리고 상기 조추출물을 부직포 필터로 필터링한 후, 감압증류방식으로 혼합용제를 증류하여, 농축된 액체 형태의 노루궁뎅이버섯 자실체 추출물 500 mL를 제조하고, 이를 동결건조하여 노루궁뎅이버섯 추출물 C를 제조하였다.
<제조예 6> 노루궁뎅이버섯 분획 A의 제조
노루궁뎅이버섯 분말(자실체 및 균사체 모두 포함)을 100% MeOH로 추출 후, 감압 농축하여 총 메탄올 추출물을 얻었다. 이를 물로 현탁 후 각각 n-hexane, CH2Cl2, 에틸 아세테이트, n-BuOH, water 순서대로 분획을 진행하였고 각각 n-hexane, CH2Cl2, 에틸 아세테이트, n-BuOH, water 분획을 얻었다.이 중 n-hexane 층을 silica column chromatography (전개용매 n-hexane : EtOAc 100 : 0 → 0 : 100)를 이용하여 13개의 분획 (HE-H1 - H13)으로 나누었다.
이 중 HE-H4 분획을 메탄올로 재결정하여 조결정을 얻었으며 이를 preparative HPLC (100% AcCN)를 이용하여 화합물을 정제 하였다. 분리한 화합물은 1H, 13C NMR, MS를 이용하여 확인 하여, 하기 화학식 1의 Hericene A로 동정 하였다.
<화학식 1>
Figure 112017060255943-pat00001
<제조예 7> 노루궁뎅이버섯 분획 B의 제조
상기 제조예 6의 HE-H13 분획을 semi-preparative HPLC (AcCN : H2O) = 45 : 55)를 이용하여 화합물을 분리 정제하였다. 분리한 화합물은 1H, 13C, HSQC, HMBC NMR, MS를 이용하여 하기 화학식 2의 corallocin A로 구조 동정 하였다.
<화학식 2>
Figure 112017060255943-pat00002
<제조예 8> 은행잎 추출물의 제조
은행잎 100 중량부에 물 500 중량부를 첨가하여 102 ℃에서 2시간 동안 끓여 은행잎 열수 추출물을 제조하였다. 수득된 은행잎 열수 추출물을 여과 및 농축한 후 동결건조하여 은행잎 추출물 분말을 제조하였다.
<제조예 9> 코팅 용액의 제조
90 ℃로 가열된 증류수에 펙틴을 첨가하고 균질화시켜, 펙틴 용액을 제조하였다. 상기 펙틴 용액에 카세인 나트륨을 첨가하고 균질화한 후, 탈지 분유를 첨가하여 균질화하였다. 그리고 이를 121 ℃, 1.2 atm에서 10분간 가열하여 살균된 코팅 용액을 제조하였다. 이 때 탈지 분유 100 중량부에 대하여 증류수는 1000 중량부, 펙틴 15 중량부, 카세인 나트륨 80 중량부를 사용하였다.
<제조예 10> 유산균 분말의 제조
증류수 100 중량부에 우유 10 중량부를 넣고 혼합한 후 살균하였다. 여기에 유산균 2 중량부를 접종하고 38 ℃에서 10시간 동안 배양하고, 이를 동결건조하여 유산균 분말을 제조하였다.
이 때 상기 유산균으로는 비피도박테리움 락티스, 비피도박테리움 롱검, 락토바실러스 애시도필러스, 락토바실러스 플랜타룸, 락토바실러스 람노서스 및 비피도박테리움 락티스 이중마이크로 미세캡슐 분말을 이용하였으며, 상기 6종류를 동일 중량비로 혼합하여 이용하였다.
<실시예 1>
혼합 조성물의 제조
제조예 10의 유산균 분말에 제조예 3의 노루궁뎅이버섯 추출물 A, 제조예 8의 은행잎 추출물을 가하고 혼합하여 덩어리진 혼합물을 제조하였다. 이 때 유산균 분말 100 중량부에 대하여 노루궁뎅이버섯 추출물 A는 400 중량부, 은행잎 추출물은 300 중량부를 사용하였다. 그리고 상기 덩어리를 제조예 9에서 제조한 코팅 용액 300 중량부에 가하고 잘 혼합하여, 코팅하였다. 그리고 코팅된 유산균 분말, 노루궁뎅이버섯 추출물 및 은행잎 추출물의 혼합물을 동결건조하여, 혼합 조성물을 제조하였다.
<실시예 2>
제조예 3의 노루궁뎅이버섯 추출물 A 대신 제조예 4의 노루궁뎅이버섯 추출물 B를 사용한 것을 제외하면, 실시예 1과 동일한 방법으로 혼합 조성물을 제조하였다.
<실시예 3>
제조예 3의 노루궁뎅이버섯 추출물 A 대신 제조예 5의 노루궁뎅이버섯 분획 A를 사용한 것을 제외하면, 실시예 1과 동일한 방법으로 혼합 조성물을 제조하였다.
<실시예 4>
제조예 3의 노루궁뎅이버섯 추출물 A 대신 제조예 7의 노루궁뎅이버섯 분획 B를 사용한 것을 제외하면, 실시예 1과 동일한 방법으로 혼합 조성물을 제조하였다.
<비교예 1>
제조예 3의 노루궁뎅이버섯 추출물 A 대신 제조예 5의 동결건조된 노루궁뎅이버섯 추출물 C를 사용한 것을 제외하면, 실시예 1과 동일한 방법으로 혼합 조성물을 제조하였다.
<비교예 2>
제조예 10의 유산균 분말에 제조예 3의 노루궁뎅이버섯 추출물 A, 제조예 8의 은행잎 추출물을 가하고 혼합하여 덩어리진 혼합물을 제조하였다. 이 때 유산균 분말 100 중량부에 대하여 노루궁뎅이버섯 추출물 A는 400 중량부, 은행잎 추출물은 300 중량부를 사용하였다. 그리고 상기 덩어리를 동결건조하여, 혼합 조성물을 제조하였다.
<비교예 3>
제조예 10의 유산균 분말에 제조예 8의 은행잎 추출물을 가하고 혼합하여 혼합물을 제조하였다. 이 때 유산균 분말 100 중량부에 대하여 은행잎 추출물은 300 중량부를 사용하였다. 그리고 상기 덩어리를 제조예 9에서 제조한 코팅 용액 200 중량부에 가하고 잘 혼합하여, 코팅하였다. 그리고 코팅된 유산균 분말 및 은행잎 추출물의 혼합물을 동결건조하여, 혼합 조성물을 제조하였다.
<비교예 4>
제조예 10의 유산균 분말에 제조예 3의 노루궁뎅이버섯 추출물 A을 가하고 혼합하여 덩어리진 혼합물을 제조하였다. 이 때 유산균 분말 100 중량부에 대하여 노루궁뎅이버섯 추출물 A는 400 중량부를 사용하였다. 그리고 상기 덩어리를 제조예 9에서 제조한 코팅 용액 200 중량부에 가하고 잘 혼합하여, 코팅하였다. 그리고 코팅된 유산균 분말 및 노루궁뎅이버섯 추출물의 혼합물을 동결건조하여, 혼합 조성물을 제조하였다.
<비교예 5>
제조예 3의 노루궁뎅이버섯 추출물 A 및 제조예 8의 은행잎 추출물을 혼합하여 덩어리진 혼합물을 제조하였다. 이 때 노루궁뎅이버섯 추출물 A 100 중량부에 대하여 은행잎 추출물은 75 중량부를 사용하였다. 그리고 상기 덩어리를 제조예 9에서 제조한 코팅 용액 75 중량부에 가하고 잘 혼합하여, 코팅하였다. 그리고 코팅된 노루궁뎅이버섯 추출물 및 은행잎 추출물의 혼합물을 동결건조하여, 혼합 조성물을 제조하였다.
<실험예 1>
상기 실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 5의 혼합 조성물들에 대하여 알츠하이머 병 개선 효과를 평가하였다. 상기 평가는 알츠하이머 모델 마우스의 단기 행동 기억 정도를 단기 행동 기억 정도를 Y-maze에서의 자발적인 교차 행동량을 측정하여 수행하였다. 각 그룹 당 5 마리의 마우스를 사용하였으며, 각 시료는 100 mg/kg의 양으로 구강투여하였다. 이 때 음성대조군인 시료 무처리군은 증류수를 100 mg/kg 투여하였다. 양성 대조군으로는 알츠하이머 모델 마우스가 아닌 정상 마우스를 사용하였다.
Y자형 미로 측정 장치는 3개의 팔(arm)를 뻗어 알파벳 Y자 형태를 갖고 있으며, 각 팔은 길이 40 cm, 높이 20 cm, 폭 5 cm이고 120 °로 배치되어 있다. 마우스는 기구의 중앙에 놓고, 세 차례 8 분 동안 자유롭게 움직이게 한 후, 마우스가 들어간 팔을 기록하였다. 이 때 뒷발까지 들어간 경우를 통과한 것으로 간주하였다. 마우스의 움직임을 교차횟수로 나타내는데, 교차횟수란 동물이 연속적으로 3개의 통로를 통과하였을 때 한 번 교차한 것으로 정의된다. 자발적인 교차 행동량은 실제 교차횟수와 최대 가능한 교차횟수(즉, 총 교차횟수에서 2를 뺀 값)의 백분비이다. 높은 자발적 교차 행동량은 행동의 상승으로 간주된다. 각 군당 5 마리의 평균치를 구하였다.
그 결과, 정상 마우스에 비하여 증류수를 투여한 모델 마우스의 경우 자발적 교차 행동량이 감소된 것이 확인되었다. 반면 실시예 1 내지 4의 혼합 조성물을 투여한 마우스들의 경우 정상 마우스만큼은 아니나, 음성 마우스 모델보다 자발적인 행동 변화가 19.3 % 내지 27.6 %까지 유의적으로 증가하였다. 비교예 2의 경우 자발적 행동 변화가 다소 증가하였으나(4.2 %), 유의한 정도는 아니었으며, 비교예 1 및 비교예 3 내지 비교예 5는 음성 대조군과 자발적 행동 변화의 차이가 거의 없었다.
노루궁뎅이버섯 추출물을 동결건조하여 사용한 비교예 1의 경우 효과가 거의 없었는바, 실시예 1 내지 4의 효과들은 노루궁뎅이버섯 추출물이 동결건조가 아닌 끈적한 상태로 은행잎 추출물 및 유산균들과 혼합됨으로써 유효 성분들 간 동반 상승 효과가 생기고 흡수율이 높아지기 때문으로 생각되었다. 또한 끈적한 덩어리를 코팅함으로써 장내 도달율이 증가하는 것으로 추측되었다.
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Claims (10)

  1. 유산균, 은행잎 추출물 및 노루궁뎅이버섯 추출물의 혼합 조성물을 포함하고,
    이때 상기 혼합 조성물은 유산균에 점성이 있는 노루궁뎅이버섯 추출물 및 은행잎 추출물을 가하고 혼합하여 덩어리진 혼합물을 제조하고, 여기에 펙틴, 카세인 나트륨 및 탈지 분유를 포함하는 코팅 용액을 가하여 상기 혼합물을 코팅 용액으로 코팅한 후 동결건조하여 제조되며,
    유산균 100 중량부에 대하여 노루궁뎅이버섯 추출물 300 내지 500 중량부, 은행잎 추출물 200 내지 400 중량부를 이용하는,
    인지기능 또는 기억능력 개선용 식품 조성물.
  2. 삭제
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 유산균은 비피도박테리움 락티스, 비피도박테리움 롱검, 락토바실러스 애시도필러스, 락토바실러스 플랜타룸 및 락토바실러스 람노서스로 구성된 군으로부터 선택되는 유산균을 포함하는 것을 특징으로 하는,
    인지기능 또는 기억능력 개선용 식품 조성물.
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 유산균은 비피도박테리움 락티스 이중마이크로 미세캡슐 분말을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는,
    인지기능 또는 기억능력 개선용 식품 조성물.
  5. 삭제
  6. 삭제
  7. 제 1항에 있어서,
    상기 코팅 용액은 탈지 분유 100 중량부에 대하여 팩틴 10 내지 20 중량부, 카세인 나트륨 70 내지 120 중량부를 포함하는 것을 특징으로 하는,
    인지기능 또는 기억능력 개선용 식품 조성물.
  8. 삭제
  9. 삭제
  10. 제 1항에 있어서,
    은행잎 추출물은 은행잎 용매 추출물인 것을 특징으로 하는,
    인지기능 또는 기억능력 개선용 식품 조성물.
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