KR101943578B1 - 탈세포화 조직 제조장치 - Google Patents

Abstract

본 발명의 일 실시예는 탈세포 처리액을 포함하는 제1 용액을 저장하는 제1 저장유닛을 포함하는 저장조, 상기 저장조와 연결되며, 내부에 탈세포화(decellularization) 대상 장기를 수용하는 장기 수용 챔버, 상기 제1 저장유닛과 상기 장기 수용 챔버를 연결하며, 상기 제1 용액을 상기 제1 저장유닛으로부터 상기 장기 수용 챔버로 안내하는 제1 연결관, 상기 제1 연결관에 설치되어, 상기 제1 연결관을 선택적으로 개폐하는 제1 밸브, 상기 장기 수용 챔버와 연결되어, 상기 장기 수용 챔버 내부의 공기 압력을 조절하기 위한 공압공급부 및 진공공급부를 포함하는 압력조절부 및 상기 제1 밸브의 동작 및 상기 압력조절부의 동작을 제어하는 제어부;를 포함하는, 탈세포화 조직 제조장치를 제공한다.

Description

탈세포화 조직 제조장치{Apparatus for producing decellularized tissue}

본 발명의 실시예들은 탈세포화 조직 제조장치에 관한 것이다.

인공적으로 장기를 재생하기 위하여 세포가 배양되는 지지체를 형성하는 방법의 하나로 동물이나 사람의 조직 또는 장기에서 세포를 제거한 후 환자에게 이식할 세포를 배양하는 것이 하나의 방법으로 제시되고 있다. 이를 위하여, 기존의 생체장기에서 세포를 제거하고 환자의 세포 또는 면역조절이 가능한 세포를 접종 (seeding)한 후 원래의 장기 모양으로 형성을 유도하는 방법이 제시되었다. 기존의 장기에서 세포를 제거하는 과정을 탈세포화라고 하며, 세포를 다시 배양하는 것을 재세포화라고 한다.

탈세포화 과정의 주된 목적은 장기의 원래 혈관구조 등을 온전히 유지하면서 세포가 제거된 세포외지지체(Extracellular matrix)를 획득하는 것인데, 기존 탈세포화 장치는 혈관 등에 연결한 구조를 가지고 있으면서 탈세포액의 종류에 따른 탈세포화 효율에 대한 접근이 대부분이었다. 또한, 종래의 장기 탈세포화 장치는 혈관 등에 연결하여 탈세포화액을 관류하는 방식과 조직 등을 탈세포화액 내에서 흔들어주는 방법이 주로 사용되었다. 이러한 탈세포화 방법은 조직의 종류에 따라 달라질 수 있는데, 두께가 5mm이하이거나 연결가능한 큰 혈관이 없는 조직의 경우 교반에 의한 방법을 주로 사용하고, 연결가능한 큰 혈관이 있는 경우는 관류에 의한 탈세포화가 선택되어 이용되고 있다. 펌프를 이용한 관류에 의한 탈세포화 방법은 예측되지 않은 압력에 의해 혈관조직의 구조가 온전히 보존되기 어려운 점이 있어서 재세포화시 혈관의 기능이 재건되지 않는 문제가 발생한다.

상기 문제점을 해결하기 위하여, 본 발명은 탈세포화 처리액의 공급 조건 및 압력 조건을 호흡과 유사한 환경을 부여함으로써, 외부의 강제력에 의한 관류가 아닌 장기 또는 조직 내부의 압력을 낮추어 압력차에 의해 조직에 탈세포액이 공급되도록 하여, 효과적으로 탈세포화가 이루어지도록 하는 탈세포화 조직 제조 장치를 제공한다.

본 발명의 일 실시예는 탈세포 처리액을 포함하는 제1 용액을 저장하는 제1 저장유닛을 포함하는 저장조, 상기 저장조와 연결되며, 내부에 탈세포화(decellularization) 대상 장기를 수용하는 장기 수용 챔버, 상기 제1 저장유닛과 상기 장기 수용 챔버를 연결하며, 상기 제1 용액을 상기 제1 저장유닛으로부터 상기 장기 수용 챔버로 안내하는 제1 연결관, 상기 제1 연결관에 설치되어, 상기 제1 연결관을 선택적으로 개폐하는 제1 밸브, 상기 장기 수용 챔버와 연결되어, 상기 장기 수용 챔버 내부의 공기 압력을 조절하기 위한 공압공급부 및 진공공급부를 포함하는 압력조절부 및 상기 제1 밸브의 동작 및 상기 압력조절부의 동작을 제어하는 제어부;를 포함하는, 탈세포화 조직 제조장치를 제공한다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 저장조는, 세척액을 포함하는 제2 용액을 저장하는 제2 저장유닛 및 DNA 분해효소를 포함하는 제3 용액을 저장하는 제3 저장유닛;을 더 포함할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 제2 저장유닛과 상기 장기 수용 챔버를 연결하며, 상기 제2 용액을 상기 제2 저장유닛으로부터 상기 장기 수용 챔버로 안내하는 제2 연결관, 상기 제2 연결관에 설치되어, 상기 제2 연결관을 선택적으로 개폐하는 제2 밸브, 상기 제3 저장유닛과 상기 장기 수용 챔버를 연결하며, 상기 제3 용액을 상기 제3 저장유닛으로부터 상기 장기 수용 챔버로 안내하는 제3 연결관 및 상기 제3 연결관에 설치되어, 상기 제3 연결관을 선택적으로 개폐하는 제3 밸브를 더 포함하고, 상기 제어부는 사전에 설정된 프로그램에 의해 상기 제1 밸브, 상기 제2 밸브 및 상기 제3 밸브의 동작을 제어할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 세척액은 혈액 항응고제가 함유된 증류수 또는 인산환충용액을 포함하고, 상기 혈액 항응고제는 헤파린, 하루딘, 와파린 중 선택된 1종 이상의 물질로 이루어질 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 세척액은 칼슘 킬레이트를 포함하고, 상기 칼슘 킬레이트는 에틸렌디아민테트라아세틱 에시드, 에틸렌디아민테트라아세틱 에시드 테트라소디움염, 1,2-비스(2-아미노페녹시)에탄-N,N,N',N'-테트라아세틱에시드 테트라키스(아세트옥시메틸 에스테르), 1,2-비스(2-아미노페녹시)에탄-N,N,N',N'-테트라아세틱에시드, 에틸렌글리콜-비스(2-아미노에틸 에테르)-N,N,N',N'-테트라아세트산, 에틸렌글리콜-비스(베타-아미노에틸 에테르)-N,N,N',N'-테트라아세트 산 테트라소디움 염이나 소디움 시트레이트 중 선택된 1종 이상의 물질로 이루어질 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 제1 용액은 소디움 도데실 설페이트(SDS), 트리톤 엑스-100(Triton X-100), 트리톤 엑스-200, 소디움 디옥시콜레이트, 양친성 계면활성제인 3-[(3-콜아미도프로필)디메틸암모니오]-1-프로판술포네이트, 술포베타인-10, 술포베타인 -16, 알코올, 아세톤, 트리부틸포스페이트, 트립신, 디스페이즈, 알엔에이 및 디엔에이 분해효소 중 선택된 1종 이상의 물질을 포함할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 제1 용액이 소디움 도데실 설페이트(sodium dodecyl sulfate; SDS) 또는 소디움 디옥시콜레이트를 포함하는 경우, 상기 소디움 도데실 설페이트(SDS) 또는 소디움 디옥시콜레이트는 0.01 내지 5%의 농도를 가질 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 장기 수용 챔버의 내부 압력을 감지하여 압력신호를 생성하는 압력센서를 더 포함하고, 상기 제어부는 상기 압력신호를 근거로 상기 압력조절부의 동작을 제어할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 장기 수용 챔버와 연결되며, 상기 제1 용액을 배출하도록 상기 장기 수용 챔버로부터 외부로 안내하는 배출유로 및 상기 배출유로에 설치되어, 상기 배출유로를 선택적으로 개폐하는 배출밸브를 더 포함할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 장기 수용 챔버 내부에 설치되며, 상기 장기 수용 챔버의 수위를 감지하여 수위 측정신호를 생성하는 수위센서를 더 포함할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 제어부는 상기 수위 측정신호를 근거로 상기 배출밸브의 동작을 제어할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 저장조는 지면을 기준으로 상기 장기 수용 챔버보다 높은 곳에 위치할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 장기 수용 챔버는 상기 제1 용액 및 상기 대상 장기를 수용하는 수용부 및 상기 장기 수용 챔버 중 상기 수용부를 제외한 나머지 부분인 공간부를 포함하며, 상기 압력조절부는 상기 공간부와 연결되어 상기 공간부의 압력을 조절할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 제1 연결관은, 제1 공급호스 및 상기 제1 밸브와 상기 장기 수용 챔버에 인접한 상기 제1 공급호스의 일단부 사이에서 상기 제1 공급호스로부터 분지되는 제2 공급호스를 포함할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 대상 장기가 폐조직인 경우, 상기 제1 공급호스는 상기 폐조직의 혈관부에 연결되고, 상기 제2 공급호스는 상기 폐조직의 기관부에 연결될 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 제2 공급호스는 상기 기관부로부터 상기 장기 수용 챔버의 외부로 상기 제1 용액을 배출하는 배출호스와 연결되고, 상기 배출호스에는 역류방지밸브인 제4 밸브가 설치될 수 있다.

본 발명의 일 실시예는, 탈세포화(decellularization) 대상 장기를 장기 수용 챔버에 수용하는 단계, 탈세포 처리액을 포함하는 제1 용액을 상기 장기 수용 챔버로 공급하는 단계 및 상기 장기 수용 챔버와 연결되는 압력조절부를 이용하여 상기 장기 수용 챔버 내부의 공기 압력을 조절하면서 탈세포화를 진행하는 단계를 포함하는 탈세포화 조직 제조방법을 제공한다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 탈세포화를 진행하는 단계는, 상기 탈세포화 대상 장기가 폐조직인 경우 상기 대상장기의 호흡주기에 대응되도록 상기 장기 수용 챔버 내부의 공기 압력을 조절할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 탈세포화를 진행하는 단계는, 압력 센서에 의해, 상기 장기 수용 챔버의 내부 압력을 감지하여 압력신호를 생성하는 단계 및 제어부에 의해 상기 압력신호를 근거로 상기 압력조절부의 동작을 제어하는 단계를 포함할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 세척액을 포함하는 제2 용액 및 DNA 분해효소를 포함하는 제3 용액을 상기 장기 수용 챔버로 공급하는 단계를 더 포함하고, 상기 제어부는 외부 입력신호 또는 사전에 설정된 프로그램에 따라 상기 제1 용액, 상기 제2 용액 및 상기 제3 용액의 공급조건을 제어할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 장기 수용 챔버는 상기 제1 용액 및 상기 대상 장기를 수용하는 수용부 및 상기 장기 수용 챔버 중 상기 수용부를 제외한 나머지 부분인 공간부를 포함하며, 상기 압력조절부는 상기 공간부와 연결되어 상기 공간부의 압력을 조절할 수 있다.

전술한 것 외의 다른 측면, 특징, 이점이 이하의 도면, 특허청구범위 및 발명의 상세한 설명으로부터 명확해질 것이다.

본 발명에 따른 탈세포화 조직 제조장치는 사전에 설정된 프로그램에 의해 탈세포 처리액, 세척액, DNA 분해효소를 포함하는 제1 용액 내지 제3 용액을 공급함으로써, 실험자의 대기 시간을 절감할 있으며, 효과적인 탈세포화 공정이 가능할 수 있다. 또한, 본 발명의 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조장치는 장기 수용 챔버의 내부 압력을 제어하면서 탈세포화를 진행할 수 있어, 대상 장기 조직의 외부뿐만 아니라 내부까지 효과적으로 탈세포화가 진행될 수 있다.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조장치를 개략적으로 나타낸 개념도이다.
도 2는 도 1의 제어부의 제어 관계를 개략적으로 나타낸 블록도이다.
도 3은 도 1의 탈세포화 조직 제조장치의 일 실시형태를 나타낸 사진이다.
도 4는 도 1의 탈세포화 조직 제조장치의 다른 실시 형태의 일부를 나타낸 개념도이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예예 따른 탈세포화 조직 제조방법을 순차적으로 도시한 순서도이다.
도 6은 도 1의 탈세포화 조직 제조 장치를 이용하여 동물의 폐를 환자에게 이식하는 과정을 나타낸 개념도이다.
도 7은 도 1의 탈세포화 조직 제조 장치를 이용한 폐의 탈세포 과정을 순차적으로 도시한 사진이다.
도 8은 도 1의 탈세포화 조직 제조 장치를 이용한 탈세포화 전후의 조직의 현미경 이미지이다.
도 9는 도 1의 탈세포화 조직 제조 장치를 이용한 탈세포화 전후의 세포핵 염색 결과(DAPI)를 나타낸 이미지이다.

본 발명은 다양한 변환을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 특정 실시예들을 도면에 예시하고 상세한 설명에 상세하게 설명하고자 한다. 본 발명의 효과 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 도면과 함께 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 다양한 형태로 구현될 수 있다.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 실시예들을 상세히 설명하기로 하며, 도면을 참조하여 설명할 때 동일하거나 대응하는 구성 요소는 동일한 도면부호를 부여하고 이에 대한 중복되는 설명은 생략하기로 한다.

이하의 실시예에서, 제1, 제2 등의 용어는 한정적인 의미가 아니라 하나의 구성 요소를 다른 구성 요소와 구별하는 목적으로 사용되었다.

이하의 실시예에서, 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다.

이하의 실시예에서, 포함하다 또는 가지다 등의 용어는 명세서상에 기재된 특징, 또는 구성요소가 존재함을 의미하는 것이고, 하나 이상의 다른 특징들 또는 구성요소가 부가될 가능성을 미리 배제하는 것은 아니다.

이하의 실시예에서, 막, 영역, 구성 요소 등의 부분이 다른 부분 위에 또는 상에 있다고 할 때, 다른 부분의 바로 위에 있는 경우뿐만 아니라, 그 중간에 다른 막, 영역, 구성 요소 등이 개재되어 있는 경우도 포함한다.

도면에서는 설명의 편의를 위하여 구성 요소들이 그 크기가 과장 또는 축소될 수 있다. 예컨대, 도면에서 나타난 각 구성의 크기 및 두께는 설명의 편의를 위해 임의로 나타내었으므로, 본 발명이 반드시 도시된 바에 한정되지 않는다.

어떤 실시예가 달리 구현 가능한 경우에 특정한 공정 순서는 설명되는 순서와 다르게 수행될 수도 있다. 예를 들어, 연속하여 설명되는 두 공정이 실질적으로 동시에 수행될 수도 있고, 설명되는 순서와 반대의 순서로 진행될 수 있다.

이하의 실시예에서, 막, 영역, 구성 요소 등이 연결되었다고 할 때, 막, 영역, 구성 요소들이 직접적으로 연결된 경우뿐만 아니라 막, 영역, 구성요소들 중간에 다른 막, 영역, 구성 요소들이 개재되어 간접적으로 연결된 경우도 포함한다. 예컨대, 본 명세서에서 막, 영역, 구성 요소 등이 전기적으로 연결되었다고 할 때, 막, 영역, 구성 요소 등이 직접 전기적으로 연결된 경우뿐만 아니라, 그 중간에 다른 막, 영역, 구성 요소 등이 개재되어 간접적으로 전기적 연결된 경우도 포함한다.

이하, 도면을 참조하여 본 발명의 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조장치(10)를 설명한다.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조장치(10)를 개략적으로 나타낸 개념도이고, 도 2는 도 1의 제어부(170)의 제어 관계를 개략적으로 나타낸 블록도이고, 도 3은 도 1의 탈세포화 조직 제조장치(10)의 일 실시형태를 나타낸 사진이다. 도 4는 도 1의 탈세포화 조직 제조장치의 다른 실시 형태의 일부를 나타낸 개념도이다.

도 1 내지 도 3을 참조하면, 본 발명의 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조장치(10)는 저장조(110), 장기 수용 챔버(130), 제1 연결관(R1), 제1 밸브(V1), 압력조절부(140) 및 제어부(170)를 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조장치(10)는 압력센서(150) 및 수위센서(160)를 더 포함할 수 있다.

기존에 제시된 전장기의 탈세포화 방법들은 조직의 크기에 따라 다르나, 탈세포환경이 정밀하게 조절되지 않기 때문에 모세혈관 등의 미세구조가 손상되는 경우가 발생하여 재세포화 과정이 효과적이지 않은 단점을 가지고 있다. 특히, 관류에 의한 방법으로 어떤 대상장기 전체를 탈세포화 할 경우, 모세혈관 조직의 손상을 예측할 수 없는 단점이 있다. 이의 원인은 탈세포화 할 때 모세혈관 등에 남은 혈액이 응고하여 혈전이 생성된 경우가 대부분이며, 혈전이 있는 모세혈관에 펌프로 관류할 때 혈전으로 막힌 혈관 내부의 압력이 과도하게 상승하여, 탈세포화 과정에서 온전한 형태를 보존하지 못하고 미세혈관 구조가 손상될 수 있다.

한편, 미세혈관이 손상된 상태의 탈세포화 장기는 재세포화 단계에서 혈관의 재생성이 불완전하게 될 가능성이 높게 된다. 재세포화 단계에서 혈관구조가 온전하게 보존되지 않은 혈관벽의 세포외기질에 혈관내피세포를 배양할 경우, 혈관의 입출구가 온전해 보이는 경우라도 조직 내의 미세혈관의 손상으로 혈액이 누출될 수 있는 불완전한 구조를 가지게 된다. 또한, 조직 또는 장기의 탈세포화 후 획득된 지지체의 내부에 존재하는 3차원 구조의 혈관망을 확인하기 용이하지 않기 때문에 탈세포화 단계에서 혈관구조를 보존하는 것이 중요하다. 후술하는 본 발명의 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조장치(10)는 탈세포화 처리액의 공급 조건 및 압력 조건을 호흡과 유사한 환경을 부여함으로써, 외부의 강제력에 의한 관류가 아닌 장기 또는 조직 내부의 압력을 낮추어 압력차에 의해 조직에 탈세포액이 공급되도록 하여, 효과적인 탈세포화를 진행할 수 있다.

구체적으로, 저장조(110)는 탈세포 처리액을 포함하는 제1 용액(S1)을 저장하는 제1 저장유닛(111)을 포함할 수 있다. 제1 용액(S1)은 대상 장기(M)의 세포를 제거하기 위한 것으로서, 물, 생리 식염수, 프로필렌 글리콜 또는 그 수용액, 글리세린 또는 그 수용액, 당류 수용액과 같은 용매에 일정 질량%의 농도를 갖는 1종 이상의 계면활성제를 포함할 수 있다. 계면활성제는 음이온성 계면활성제, 양이온성 계면활성제, 양성 계면활성제 및 비이온성 계면활성제로 분류될 수 있다.

여기서, 음이온성 계면활성제는 알킬 설폰산염(도데실 술폰산 나트륨 등), 지방산 비누, 알콕시 카르복실산염, 폴리옥시에틸렌 알콕시 카르복실산염, 알킬 벤젠설폰산염, 알킬 황산 에스테르염, 폴리옥시에틸렌알킬 황산 에스테르염, 알킬 인산 에스테르염, α-설포 지방산 에스테르염, N-아실 글루타민산염, 아실-N-메틸타우린염, N-알킬 사르코신염, 콜산 및 그 유도체의 소금 등 일 수 있다.

양이온성 계면활성제는 알킬디메틸 아민, 알킬 디에탄올 아민, 알킬 트리메틸 암모늄염, 디알킬디메틸암모늄염, 알킬피리듐염, 알킬 벤질 디메틸암모늄 소금 등일 수 있으며, 양성 계면활성제는 알킬디메틸 아민 옥사이드, 알킬카르복시 베타인, 알킬 아미드 프로필 베타인, 알킬 아미도프로필 술포베타인, 아르키르이미다조니움베타인, 3-[(3-콜 아미도프로필) 디메틸암모니오]-2-하이드록시-1-프로판 술포네이트염, 3-[(3-콜 아미도프로필) 디메틸암모니오]-1-프로판 술포네이트염 등을 들 수 있다.

또한, 비이온성 계면활성제는 글리세린 지방산 에스테르, 솔비탄 지방산 에스테르, 자당 지방산 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌글리세린 지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌소르비탄 지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌알킬 에테르, 폴리옥시에틸렌알킬 페닐 에테르(폴리옥시에틸렌 옥틸페닐에테르, 노닐 페놀 에톡실레이트(폴리옥시에틸렌 노닐페닐에테르) 등) 폴리옥시에틸렌 폴리옥시프로필렌 에테르, 알킬(폴리) 글리세린 에테르, 지방산 알칸올 아미드, 폴리옥시에틸렌 지방산 알칸올 아미드, 알킬(폴리) 글리코시드 등 일 수 있다. 전술한 종류의 계면활성제 중 1종을 선택할 수도 있고, 2종 이상 조합도 가능할 수 있다.

다른 실시예로서, 제1 용액(S1)은 소디움 도데실 설페이트(SDS), 트리톤 엑스-100(Triton X-100), 트리톤 엑스-200, 소디움 디옥시콜레이트, 양친성 계면활성제인 3-[(3-콜아미도프로필)디메틸암모니오]-1-프로판술포네이트, 술포베타인-10, 술포베타인 -16, 알코올, 아세톤, 트리부틸포스페이트, 트립신, 디스페이즈, 알엔에이 및 디엔에이 분해효소 중 선택된 1종 이상의 물질을 포함할 수 있다. 이때, 제1 용액(S1)이 소디움 도데실 설페이트(SDS) 또는 소디움 디옥시콜레이트를 포함하는 경우, 소디움 도데실 설페이트(SDS) 또는 소디움 디옥시콜레이트는 0.01 내지 5%의 농도를 가지며, 예를 들면, 0.5 내지 2%의 농도를 가질 수 있다.

한편, 저장조(110)는 세척액을 포함하는 제2 용액(S2)을 저장하는 제2 저장유닛(112) 및 DNA 분해효소를 포함하는 제3 용액(S3)를 저장하는 제3 저장유닛(113)을 더 포함할 수 있다. 여기서, 제2 용액(S2)은 대상 장기(M)의 혈관 내부에 남아 있는 혈액을 제거하고 조직 또는 장기 내부의 세포막의 분해를 용이하게 하는 것으로서, 혈관 이외의 기관 등의 내부에 존재하는 이물질을 제거하는 기능을 수행할 수 있다. 세척액은 증류수, 초순수, 인산완충용액, 생리식염수 등을 포함할 수 있다. 또한, 세척액은 탈세포 대상 장기(M)의 혈관에 남아있는 혈액으로부터 혈전을 제거하기 위하여, 혈전분해제 및 항응고제를 포함할 수 있다. 예를 들면, 혈전분해제는 유로키나제, 플라스미노겐 중 선택된 1종 이상의 물질일 수 있으며, 항응고제는 헤파린, 히루딘, 와파린 또는 혈액응고를 지연시키는 물질일 수 있다. 또한, 세척액은 조직 또는 장기의 내부에 대한 세포의 결합을 약하게 하는 칼슘 킬레이트 또는 칼슘대체성 이온이 공급될 수 있도록, 칼슘 킬레이트인 에틸렌디아민테트라아세트산, 에틸렌디아민테트라산 테트라소디움염, 1,2-비스(2-아미노페녹시)에탄-N,N,N',N'-테트라아세트산 테트라키스(아세트옥시메틸 에스테르), 1,2-비스(2-아미노페녹시)에탄-N,N,N',N'-테트라아세트산, 에틸렌글리콜-비스(2-아미노에틸 에테르)-N,N,N',N'-테트라아세트산, 에틸렌글리콜-비스(베타-아미노에틸 에테르)-N,N,N',N'-테트라아세트산 테트라소디움 염 등의 칼슘 킬레이트나 소디움 시트레이트 등을 포함할 수도 있다.

일 실시예에 따른 저장조(110)는 제1 저장유닛(111), 제2 저장유닛(112) 및 제3 저장유닛(113)을 구비하는 경우를 중심으로 설명하였으나, 본 발명은 이에 제한되지 않는다. 저장조(110)는 2개 이상의 저장유닛을 더 포함할 수 있으며, 각각의 저장유닛에 탈세포에 필요한 용액들이 저장될 수 있다. 한편, 일 실시예에 따른 저장조(110)는 제1 저장유닛(111), 제2 저장유닛(112) 및 제3 저장유닛(113) 각각에 제1 용액(S1), 제2 용액(S2), 제3 용액(S3)이 저장되는 경우를 설명하였으나, 다른 실시예로서, 제1 용액(S1), 제2 용액(S2), 제3 용액(S3) 중 하나 이상 혼합된 용액들을 저장할 수 있음은 물론이다. 또한, 저장조(110)가 2개의 저장유닛을 포함하는 경우, 세척액을 포함하는 제2 용액(S2) 공급 후 탈세포 처리액을 포함하는 제1 용액(S1)을 공급한 후, 다시 제2 용액(S2)을 장기 수용 챔버(130)로 공급할 수 있다. 다른 실시예로서, 4개 이상의 저장유닛을 포함하는 경우, 탈세포 처리액의 종류를 2개 이상 사용할 수도 있다.

한편, 저장조(110)는 중력에 의해 저장된 용액들이 장기 수용 챔버(130)으로 공급될 수 있도록 지면을 기준으로 장기 수용 챔버(130)보다 높은 곳에 위치할 수 있다. 다른 실시예로서, 저장조(110)는 전술한 바와 같이 위치를 한정하지 않고, 펌프 등을 이용하여 저장된 용액들을 장기 수용 챔버(130)로 공급할 수도 있다.

장기 수용 챔버(130)는 저장조(110)와 연결되며, 내부에 탈세포화(decellularization) 대상 장기(M)를 수용할 수 있다. 여기서, 대상 장기(M)는 척추동물 유래의 세포를 가지는 생체 조직일 수 있으며, 거절반응이 적은 포유류 또는 조류 유래의 생체 조직이 이용될 수 있다. 예를 들면, 포유류로는 돼지, 소, 말 등일 수 있으며, 조류로는 닭, 오리, 거위 등일 수 있다. 대상 장기(M)는 간장, 신장, 뇨관, 방광, 요도, 혀, 편도, 식도, 위, 소장, 대장, 항문, 췌장, 심장, 혈관, 비장, 폐, 뇌, 골, 척수, 연골, 정소, 자궁, 난관, 난소, 태반, 각막, 골격근, 건, 신경, 피부 중 어느 하나일 수 있다.

장기 수용 챔버(130)는 저장조(110)로부터 공급된 제1 용액(S1), 제2 용액(S2), 제3 용액(S3)과 대상 장기(M)를 수용하는 수용부(A1) 및 장기 수용 챔버(130) 중 수용부(A1)를 제외한 나머지 부분인 공간부(A2)를 포함할 수 있다. 후술하는 압력조절부(140)는 공간부(A2)와 연결되어 공간부(A2)의 압력을 조절할 수 있다. 장기 수용 챔버(130)는 이러한 압력 조절이 효과적으로 진행될 수 있도록 실링(sealing) 처리될 수 있다. 또한, 장기 수용 챔버(130)는 일측에 개폐부(미도시)를 포함하여, 대상 장기(M)의 투입을 용이하게 할 수 있다. 장기 수용 챔버(130)는 내부의 대상 장기(M)의 탈세포화 진행 과정을 관찰할 수 있도록 적어도 일면이 투명할 수 있다. 또한, 장기 수용 챔버(130)는 세척 및 관리 용이성을 위하여 하면에 배수 구멍이 형성될 수 있다. 이때, 배수 구멍에는 후술하는 배출유로(B1)가 연결되어, 탈세포화 진행에 사용된 제1 용액 내지 제3 용액을 외부로 배출할 수 있다.

제1 연결관(R1)은 제1 저장유닛(111)과 장기 수용 챔버(130)를 연결하며, 제1 용액(S1)을 제1 저장유닛(111)으로부터 장기 수용 챔버(130)로 안내할 수 있다. 또한, 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조장치(10)는 제2 연결관(R2) 및 제3 연결관(R3)를 더 포함할 수 있다. 제2 연결관(R2)는 제2 저장유닛(112)과 장기 수용 챔버(130)를 연결하며 제2 용액(S2)을 제2 저장유닛(112)으로부터 장기 수용챔버(130)로 안내하고, 제3 연결관(R3)는 제3 저장유닛(113)과 장기 수용 챔버(130)를 연결하며 제3 용액(S3)을 제3 저장유닛(113)으로부터 장기 수용 챔버(130)로 안내할 수 있다. 제1 연결관(R1) 내지 제3 연결관(R3)은 제1 저장유닛(111) 내지 제3 저장유닛(113)과 장기 수용 챔버(130)을 각각 연결할 수도 있지만, 도시된 바와 같이, 설치된 제1 밸브(V1) 내지 제3 밸브(V3) 이후 하나의 연결관으로 통합되어 장기 수용 챔버(130)와 연결될 수도 있다.

제1 밸브(V1)는 제1 연결관(R1)에 설치되어 제1 연결관(R1)을 선택적으로 개폐할 수 있다. 또한 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조장치(10)는 제2 밸브(V2) 및 제3 밸브(V3)를 더 포함할 수 있다. 제2 밸브(V2)는 제2 연결관(R2)에 설치되어 제2 연결관(R2)을 선택적으로 개폐하며, 제3 밸브(V3)는 제3 연결관(R3)에 설치되어 제3 연결관(R3)을 선택적으로 개폐할 수 있다. 제1 밸브(V1) 내지 제3 밸브(V3)는 외부로부터 제어신호 또는 전기 신호 등에 따라 제어되는 솔레노이드 밸브 형태일 수 있다. 그러나, 이에 제한되지 않으며, 다른 실시예로서, 제1 밸브(V1) 내지 제3 밸브(V3)는 수동개폐가 가능한 수동식 밸브이거나, 솔레노이드 밸브와 수동식 밸브를 조합하여 이용할 수도 있다. 또한, 제1 밸브(V1) 내지 제3 밸브(V3)는 일방향으로 제1 용액(S1) 내지 제3 용액(S3)의 이동이 가능하도록 일방향 체크 밸브로 이루어지며, 이를 통해 장기 수용 챔버(130)의 내부 압력이 높아지는 경우 역류를 방지할 수 있다.

한편, 도 4를 참조하면, 다른 실시예로서, 제1 연결관(R1)은 제1 공급호스(H1) 및 제1 밸브(V1)와 장기 수용 챔버(130)에 인접한 제1 공급호스(H1)의 일단부 사이에서 제1 공급호스(H1)으로부터 분지되는 제2 공급호스(H2)를 포함할 수 있다. 제1 연결관(R1)은 제1 공급호스(H1) 및 제2 공급호스(H2)를 포함하는 복수의 공급호스로 이루어질 수 있지만, 본 명세서에서는 설명의 편의를 위하여 제1 공급호스(H1) 및 제2 공급호스(H2)를 포함하는 경우를 중심으로 설명하기로 한다. 탈세포화 대상 장기(M)가 폐 조직인 경우, 제1 공급호스(H1)는 대상 장기(M)인 폐의 혈관부에 연결되고, 제2 공급호스(H2)는 대상 장기(M)인 폐의 기관부에 연결되어, 제1 용액(S1)을 공급할 수 있다.

이때, 폐의 기관부는 장기 수용 챔버(130)의 내부 압력 변화에 따라 수축과 팽창이 일어나며, 기관부로 주입된 제1 용액이 장기 수용 챔버(130)의 압력이 높아지면 외부로 배출될 수 있다. 제2 공급호스(H2)는 이러한 기관부로부터 장기 수용챔버(130)의 외부로 제1 용액을 배출하기 위한 배출호스(H3)와 연결될 수 있다. 또한, 배출호스(H3)에는 역류방지밸브인 제4 밸브(V4)가 설치되어, 제2 공급호스(H2)로부터 제1 용액이 공급되거나 배출호스(H3)의 외부로부터 용액이 역류되는 것을 방지할 수 있다. 배출호스(H3)는 제2 공급호스(H2)와 연통될 필요는 없으며, 배출호스(H3)의 일단부와 제2 공급호스(H2)의 일단부가 인접하게 배치되는 구조로 가능하다. 배출호스(H3)는 제4 밸브(V4)를 통해 기관부로부터 배출되는 제1 용액을 장기 수용 챔버(130)의 외부로 안내할 수 있다.

다시 도 1 내지 도 3을 참조하면, 압력조절부(140)는 장기 수용 챔버(130)와 연결되어, 장기 수용 챔버(130)의 내부 압력을 조절할 수 있다. 압력조절부(140)는 장기 수용 챔버(130)의 압력을 가압하는 공압공급부(141) 및 감압하는 진공공급부(143)를 포함할 수 있다. 일 실시예로서, 공압공급부(141)는 공압펌프를 포함하고, 진공공급부(143)는 진공펌프를 포함할 수 있다. 압력조절부(140)는 제1 유로(D1) 및 제2 유로(D2)를 이용하여 장기 수용 챔버(130)와 연결될 수 있다. 이때, 제1 유로(D1)는 공압공급부(141)와 연결될 수 있으며, 제2 유로(D2)는 진공공급부(143)와 연결될 수 있다. 또한, 제1 유로(D1)에는 제1 압력밸브(PV1)이 설치될 수 있으며, 제2 유로(D2)에는 제2 압력밸브(PV2)가 설치될 수 있다. 압력조절부(140)는 후술하는 제어부(170)에 의해 제1 압력밸브(PV1) 및 제2 압력밸브(PV2)를 선택적으로 개폐됨으로써, 장기 수용 챔버(130)의 내부 압력을 조절할 수 있다. 한편, 압력센서(150)는 장기 수용 챔버(130)의 내부 압력을 감지하여 압력신호를 생성하며, 압력조절부(140)는 압력신호에 근거하여 장기 수용 챔버(130)의 내부 압력을 조절할 수 있다.

한편, 본 발명의 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조장치(10)는 배출유로(B1) 및 배출밸브(DV)를 더 포함할 수 있다.

배출유로(B1)는 장기 수용 챔버(130)와 연결되며, 제1 용액(S1) 내지 제3 영역(S3)이 탈세포 공정 진행 후 배출되도록 장기 수용 챔버(130)로부터 외부로 안내할 수 있다. 또한, 배출밸브(DV)는 배출유로(B1)에 설치되어, 배출유로(B1)를 선택적으로 개폐할 수 있다. 배출밸브(DV)는 배출되는 용액이 일방향으로 이동이 가능하도록 일방향 체크밸브로 이루어질 수 있다. 배출밸브(DV)는 외부로부터 제어신호 또는 전기 신호 등에 따라 제어되는 밸브, 수동적으로 작동하는 밸브 또는 전기신호에 의해 제어되는 밸브와 수동적으로 작동하는 밸브가 조합된 형태일 수 있다.

한편, 수위센서(170)는 장기 수용 챔버(130) 내부에 설치되며, 장기 수용 챔버(130)의 수위를 감지하여 수위 측정신호를 생성할 수 있다. 상기한 배출밸브(DV)는 수위센서(170)로부터 수위 측정신호를 직접 제공받아 배출유로(B1)의 개폐를 선택할 수 있다. 구체적으로, 사전에 설정된 수위보다 높은 수위 측정신호를 입력받는 경우, 배출밸브(DV)는 개방되어 배수가 가능할 수 있다. 다른 실시예로서, 배출밸브(DV)는 후술하는 제어부(160)에 의해 제어될 수도 있다.

제어부(170)는 전기 회로, 집적회로칩 등을 포함하며, 외부의 입력신호에 따라 또는 사전에 설정된 프로그램에 따라 연산을 수행하여 피제어부들을 제어하는 기능을 가진다. 제어부(170)는 제1 밸브(V1) 내지 제3 밸브(V3)의 동작 및 압력조절부(140)의 동작을 제어할 수 있으며, 배출밸브(DV)의 동작도 제어할 수 있다. 구체적으로, 제어부(170)는 사전에 설정된 프로그램에 의해 제1 용액(S1), 제2 용액(S2) 및 제3 용액(S3)이 일정한 비율로 장기 수용 챔버(130)에 공급될 수 있도록 제어할 수 있다. 이때, 사전에 설정된 프로그램은 제1 용액(S1), 제2 용액(S2) 및 제3 용액(S3)이 공급되는 시점도 저장될 수 있으며, 이에 따라 제어부(170)는 제1 밸브(V1) 내지 제3 밸브(V3)를 제어할 수 있다.

또한, 제어부(170)는 압력센서(150)로부터 제공된 압력신호를 근거로, 압력조절부(140)를 제어할 수 있다. 이때, 제어부(170)는 압력조절부(140)의 공압공급부(141) 및 진공공급부(143)의 온오프(on-off) 동작을 직접 제어할 수도 있다. 다른 실시예로서, 제어부(170)는 제1 압력밸브(PV1) 및 제2 압력밸브(PV2)의 동작을 제어할 수도 있다. 다시 말해, 사전에 설정된 기준압력보다 높은 경우, 제어부(170)는 제1 압력밸브(PV1)를 폐쇄하고, 제2 압력밸브(PV2)를 개방할 수 있다. 이러한 기준압력은 정해진 시점에 따라 달라질 수 있는데, 폐와 같은 조직을 대상 장기(M)로 하는 경우, 실제 호흡과 유사한 환경을 제공하기 위하여, 흡기인 경우의 기준압력과 호기인 경우의 기준압력이 달라질 수 있다. 또한, 제어부(170)는 수위센서(160)로부터 제공된 수위 측정신호를 근거로 배출밸브(DV)의 동작을 제어할 수 있다.

이하, 도 5를 참조하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조방법에 대해 설명하기로 한다.

도 5는 본 발명의 일 실시예예 따른 탈세포화 조직 제조방법을 순차적으로 도시한 순서도이다.

도 5를 참조하면, 본 발명의 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조방법은 먼저, 탈세포화 대상 장기를 장기 수용 챔버(130)에 수용한다(S100).

이후, 장기 수용 챔버(130)로 탈세포 처리액을 포함하는 제1 용액(S1)을 공급한다(S200). 이때, 장기 수용 챔버(130)로 세척액을 포함하는 제2 용액(S2) 및 DNA 분해효소를 포함하는 제3 용액(S3)를 더 공급할 수 있다. 제어부(170)는 외부 입력신호 또는 사전에 설정된 프로그램에 따라 제1 용액(S1) 내지 제3 용액(S3)의 공급조건을 제어할 수 있다. 구체적으로, 전술한 바와 같이, 제어부(170)는 제1 용액(S1) 내지 제3 용액(S3)이 일정한 비율로 장기 수용 챔버(130)에 공급될 수 있도록 제어할 수 있다. 또한, 제어부(170)는 제1 용액(S1) 내지 제3 용액(S3)을 사전에 설정된 공급 시점에 따라 공급되도록 제어하거나, 제1 용액(S1) 내지 제3 용액(S3)이 순차적으로 공급되도록 제어할 수 있다.

다음, 장기 수용 챔버(130)와 연결되는 압력조절부(140)를 이용하여 장기 수용 챔버(130) 내부의 공기 압력을 조절하면서 탈세포화를 진행한다(S300). 이러한 공기 압력을 조절하면서 탈세포화를 진행하는 단계는, 압력센서에 의해 장기 수용 챔버(130)의 내부 압력을 감지하여 압력 신호를 생성하고, 압력신호를 근거로 압력조절부의 동작을 제어함으로써, 공기 압력을 조절할 수 있다. 다른 실시예로서, 탈세포화 대상 장기가 폐조직인 경우 대상장기의 호흡주기에 대응되도록 장기 수용 챔버(130) 내부의 공기 압력을 조절할 수도 있다. 이때, 장기 수용 챔버(130)는 제1 용액 및 대상 장기를 수용하는 수용부와, 장기 수용 챔버 중 수용부를 제외한 나머지 부분인 공간부를 포함할 수 있으며, 압력조절부는 공간부와 연결되어 공간부의 공기 압력을 조절할 수 있다.

한편, 도면에서는 제1 용액을 장기 수용 챔버로 공급하는 단계(S200)와, 장기 수용 챔버의 공기 압력을 조절하면서 탈세포화를 진행하는 단계(S300)가 순차적으로 진행되는 것으로 도시하였으나, 본 발명은 이에 제한되지 않는다. 탈세포화 조직 제조방법은 제1 용액을 공급함과 동시에 장기 수용챔버(130)의 공기 압력을 조절하여 탈세포화를 진행할 수 있음은 물론이다.

전술한 바와 같이, 본 발명의 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조장치는 사전에 설정된 프로그램에 의해 탈세포 처리액, 세척액, DNA 분해효소를 포함하는 제1 용액 내지 제3 용액을 공급함으로써, 실험자의 대기 시간을 절감할 있으며, 효과적인 탈세포화 공정이 가능할 수 있다. 또한, 본 발명의 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조장치는 장기 수용 챔버의 내부 압력을 제어하면서 탈세포화를 진행할 수 있어, 압력에 따른 장기의 팽창과 수축을 기대할 수 있어서 정적으로 일정한 유량이 공급되는 방식보다 대상 장기 조직의 외부뿐만 아니라 내부까지 효과적으로 탈세포화가 진행될 수 있다.

도 6은 도 1의 탈세포화 조직 제조장치를 이용하여 동물의 폐를 환자에게 이식하는 과정을 나타낸 개념도이다.

도 6의 (a) 내지 (d)를 참조하면, 우선, 동물의 장기를 적출한다. 이후, 본 발명의 탈세포화 조직 제조장치(10)를 이용하여 장기 조직의 탈세포화를 진행한다. 다음, 탈세포화된 조직에 사람의 세포를 배양하여 장기를 재생한다. 마지막으로, 재생된 장기를 사람에 이식한다.

도 7은 도 1의 탈세포화 조직 제조 장치를 이용한 폐의 탈세포 과정을 순차적으로 도시한 사진이다. 도 7의 (a)는 탈세포화 전의 폐의 조직 사진이고, (b)는 탈세포화 중간 단계의 폐의 조직 사진이며, (c)는 탈세포화 과정이 완료된 상태의 폐의 조직 사진이다.

도 7의 (c)를 참조하면, 본 발명의 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조장치(10)를 통해 폐 조직 외부뿐만 아니라 내부도 탈세포화가 효과적으로 발생하였음을 알 수 있다. 다시 말해, 본 발명의 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조 장치(10)는 균일한 탈세포화를 유도할 수 있다.

도 8은 도 1의 탈세포화 조직 제조장치를 이용한 탈세포화 전후의 조직의 현미경 이미지이다. 도 7의 (a)는 탈세포화 전 혈관형태를 나타낸 이미지이고, (b)는 탈세포화 완료된 후의 세포외기질을 나타낸 이미지이다. 도 6의 (b)를 참조하면, 탈세포화의 진행으로 세포가 제거된 세포외지지체(Extracellular matrix)를 획득했음을 알 수 있다.

한편, 도 8의 (c)는 탈세포화 전 조직의 헤마톡실린 및 에오신 조직 염색 결과를 나타낸 이미지이며, (b)는 탈세포화 후 조직의 헤마톡실린 및 에오신 조직 염색 결과를 나타낸 이미지이다. 도 8의 (c)에서는 짙은 점 모양의 세포핵이 산재되어 있음을 알 수 있고, 도 8의 (d)에서는 이러한 짙은 점 모양의 세포핵이 없어, 탈세포화가 성공적으로 진행되었음을 알 수 있다.

도 9는 도 1의 탈세포화 조직 제조장치를 이용한 탈세포화 전후의 세포핵 염색 결과(DAPI)를 나타낸 이미지이다.

도 9의 (a)는 탈세포화전 세포핵 염색 결과를 나타낸 이미지이고, (b)는 탈세포화 중간 단계에서의 세포핵 염색 결과, (c)는 탈세포화 완료단계에서의 세포핵 염색 결과를 나타낸 이미지이다. 세포핵이 염색되면, 푸른색으로 형광을 보이게 되는데 도 9의 (a)에서 (c)로 갈수록 푸른색 형광 염색이 줄어들고 있음을 알 수 있다.

도 6 내지 도 9에서와 같이, 본 발명의 일 실시예에 따른 탈세포화 조직 제조장치(10)를 이용하여 탈세포화를 진행하는 경우, 장기 조직의 탈세포화가 외부뿐만 아니라 내부까지 균일하게 효과적으로 이루어짐을 확인할 수 있다.

이와 같이 본 발명은 도면에 도시된 일 실시예를 참고로 하여 설명하였으나 이는 예시적인 것에 불과하며 당해 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 이로부터 다양한 변형 및 실시예의 변형이 가능하다는 점을 이해할 것이다. 따라서, 본 발명의 진정한 기술적 보호 범위는 첨부된 특허청구범위의 기술적 사상에 의하여 정해져야 할 것이다.

10 : 탈세포화 조직 제조장치
110 : 저장조
111 : 제1 저장유닛
112 : 제2 저장유닛
113 : 제3 저장유닛
130 : 장기 수용 챔버
140 : 압력조절부
150 : 압력센서
160 : 수위센서
170 : 제어부

Claims (21)

1. 탈세포 처리액을 포함하는 제1 용액을 저장하는 제1 저장유닛을 포함하는 저장조;
   상기 저장조와 연결되며, 내부에 탈세포화(decellularization) 대상 장기를 수용하는 장기 수용 챔버;
   상기 제1 저장유닛과 상기 장기 수용 챔버를 연결하며, 상기 제1 용액을 상기 제1 저장유닛으로부터 상기 장기 수용 챔버로 안내하는 제1 연결관;
   상기 제1 연결관에 설치되어, 상기 제1 연결관을 선택적으로 개폐하는 제1 밸브;
   상기 장기 수용 챔버와 연결되어, 상기 장기 수용 챔버 내부의 공기 압력을 조절하기 위한 공압 공급부 및 진공 공급부를 포함하는 압력조절부;
   상기 장기 수용 챔버 내부에 배치되며, 상기 장기 수용 챔버의 내부 압력을 감지하여 압력신호를 생성하는 압력센서; 및
   외부의 입력신호 또는 사전에 설정된 프로그램에 따라 상기 제1 밸브의 동작을 제어하고, 상기 압력신호에 근거하여 상기 압력조절부의 동작을 제어하는 제어부;를 포함하고,
   상기 제1 연결관은, 제1 공급호스 및 상기 제1 밸브와 상기 장기 수용 챔버에 인접한 상기 제1 공급호스의 일단부 사이에서 상기 제1 공급호스로부터 분지되는 제2 공급호스를 포함하고,
   상기 대상 장기는 폐조직이며, 상기 제1 공급호스는 상기 폐조직의 혈관부에 연결되고, 상기 제2 공급호스는 상기 폐조직의 기관부에 연결되는, 탈세포화 조직 제조장치.
2. 제1 항에 있어서,
   상기 저장조는,세척액을 포함하는 제2 용액을 저장하는 제2 저장유닛; 을 더 포함하고,
   상기 탈세포화 조직 제조장치는 상기 저장유닛과 상기 장기 수용 챔버를 연결하며, 상기 제2 용액을 상기 제2 저장유닛으로부터 상기 장기 수용 챔버로 안내하는 제2 연결관; 및
   상기 제2 연결관에 설치되어, 상기 제2 연결관을 선택적으로 개폐하는 제2 밸브;를 더 포함하고,
   상기 제어부는 사전에 설정된 프로그램에 의해 상기 제1 밸브 및 상기 제2 밸브의 동작을 제어하는, 탈세포화 조직 제조 장치.
3. 제2 항에 있어서,
   상기 저장조는, DNA 분해효소를 포함하는 제3 용액을 저장하는 제3 저장유닛;을 포함하고,
   상기 탈세포화 조직 제조장치는 상기 제3 저장유닛과 상기 장기 수용 챔버를 안내하며, 상기 제3 용액을 상기 제3 저장유닛으로부터 상기 장기 수용 챔버로 안내하는 제3 연결관; 및
   상기 제3 연결관에 설치되어, 상기 제3 연결관을 선택적으로 개폐하는 제3 밸브;를 더 포함하고,
   상기 제어부는 사전에 설정된 프로그램에 의해 상기 제1 밸브, 상기 제2 밸브 및 상기 제3 밸브의 동작을 제어하는, 탈세포화 조직 제조장치.
4. 제2 항에 있어서,
   상기 세척액은 혈액 항응고제가 함유된 증류수 또는 인산완충용액을 포함하고,
   상기 혈액 항응고제는 헤파린, 하루딘, 와파린 중 선택된 1종 이상의 물질로 이루어진, 탈세포화 조직 제조 장치.
5. 제2 항에 있어서,
   상기 세척액은 칼슘 킬레이트를 포함하고,
   상기 칼슘 킬레이트는 에틸렌디아민테트라아세트산, 에틸렌디아민테트라아세트산 테트라소디움염, 1,2-비스(2-아미노페녹시)에탄-N,N,N',N'-테트라아세트산 테트라키스(아세트옥시메틸 에스테르), 1,2-비스(2-아미노페녹시)에탄-N,N,N',N'-테트라아세트산, 에틸렌글리콜-비스(2-아미노에틸 에테르)-N,N,N',N'-테트라아세트산, 에틸렌글리콜-비스(베타-아미노에틸 에테르)-N,N,N',N'-테트라아세트산 테트라소디움 염이나 소디움 시트레이트 중 선택된 1종 이상의 물질로 이루어진, 탈세포화 조직 제조장치.
6. 제1 항에 있어서,
   상기 제1 용액은 소디움 도데실 설페이트(SDS), 트리톤 엑스-100(Triton X-100), 트리톤 엑스-200, 소디움 디옥시콜레이트, 양친성 계면활성제인 3-[(3-콜아미도프로필)디메틸암모니오]-1-프로판술포네이트, 술포베타인-10, 술포베타인 -16, 알코올, 아세톤, 트리부틸포스페이트, 트립신, 디스페이즈, 알엔에이 및 디엔에이 분해효소 중 선택된 1종 이상의 물질을 포함하는, 탈세포화 조직 제조 장치.
7. 제6 항에 있어서,
   상기 제1 용액은 소디움 도데실 설페이트(sodium dodecyl sulfate; SDS) 또는 소디움 디옥시콜레이트를 포함하며,
   상기 소디움 도데실 설페이트(SDS) 또는 소디움 디옥시콜레이트는 0.01 내지 5%(w/v)의 농도를 가지는, 탈세포화 조직 제조 장치.
8. 제1 항에 있어서,
   상기 장기 수용 챔버의 내부 압력을 감지하여 압력신호를 생성하는 압력센서;를 더 포함하고,
   상기 제어부는 상기 압력신호를 근거로 상기 압력조절부의 동작을 제어하는, 탈세포화 조직 제조장치.
9. 제1 항에 있어서,
   상기 장기 수용 챔버와 연결되며, 상기 제1 용액을 배출하도록 상기 장기 수용 챔버로부터 외부로 안내하는 배출유로; 및
   상기 배출유로에 설치되어, 상기 배출유로를 선택적으로 개폐하는 배출밸브;를 더 포함하는, 탈세포화 조직 제조장치.
10. 제9 항에 있어서,
    상기 장기 수용 챔버 내부에 설치되며, 상기 장기 수용 챔버의 수위를 감지하여 수위 측정신호를 생성하는 수위센서;를 더 포함하는, 탈세포화 조직 제조장치.
11. 제10 항에 있어서,
    상기 제어부는 상기 수위 측정신호를 근거로 상기 배출밸브의 동작을 제어하는, 탈세포화 조직 제조장치.
12. 제1 항에 있어서,
    상기 저장조는 지면을 기준으로 상기 장기 수용 챔버보다 높은 곳에 위치하는, 탈세포화 조직 제조 장치.
13. 제1 항에 있어서,
    상기 장기 수용 챔버는 상기 제1 용액 및 상기 대상 장기를 수용하는 수용부 및 상기 장기 수용 챔버 중 상기 수용부를 제외한 나머지 부분인 공간부를 포함하며,
    상기 압력조절부는 상기 공간부와 연결되어 상기 공간부의 압력을 조절하는, 탈세포화 조직 제조장치.
14. 삭제
15. 삭제
16. 제1 항에 있어서,
    상기 제2 공급호스는 상기 기관부로부터 상기 장기 수용 챔버의 외부로 상기 제1 용액을 배출하는 배출호스와 연결되고,
    상기 배출호스에는 역류방지밸브인 제4 밸브가 설치되는, 탈세포화 조직 제조장치.
17. 탈세포화(decellularization) 대상 장기를 장기 수용 챔버에 수용하는 단계;
    탈세포 처리액을 포함하는 제1 용액을 상기 장기 수용 챔버로 공급하는 단계; 및
    상기 장기 수용 챔버와 연결되는 압력조절부를 이용하여 상기 장기 수용 챔버 내부의 공기 압력을 조절하면서 탈세포화를 진행하는 단계;를 포함하고,
    상기 탈세포화를 진행하는 단계는,
    압력센서에 의해, 상기 장기 수용 챔버의 내부 압력을 감지하여 압력신호를 생성하는 단계; 및
    제어부에 의해, 상기 압력신호를 근거로 상기 압력조절부의 동작을 제어하는 단계;를 포함하고,
    상기 제어부는 외부 입력신호 또는 사전에 설정된 프로그램에 따라 상기 제1 용액의 공급조건을 제어하고,
    상기 탈세포화 대상 장기는 폐조직이며,
    상기 탈세포화를 진행하는 단계는, 상기 폐조직의 호흡주기에 대응되도록 상기 장기 수용 챔버 내부의 공기 압력을 조절하는, 탈세포화 조직 제조방법.
18. 삭제
19. 삭제
20. 제17 항에 있어서,
    세척액을 포함하는 제2 용액 및 DNA 분해효소를 포함하는 제3 용액을 상기 장기 수용 챔버로 공급하는 단계;를 더 포함하고,
    상기 제어부는 외부 입력신호 또는 사전에 설정된 프로그램에 따라 상기 제1 용액, 상기 제2 용액 및 상기 제3 용액의 공급조건을 제어하는, 탈세포화 조직 제조방법.
21. 제17 항에 있어서,
    상기 장기 수용 챔버는 상기 제1 용액 및 상기 대상 장기를 수용하는 수용부 와, 상기 장기 수용 챔버 중 상기 수용부를 제외한 나머지 부분인 공간부를 포함하며,
    상기 압력조절부는 상기 공간부와 연결되어 상기 공간부의 압력을 조절하는, 탈세포화 조직 제조방법.

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