KR101932877B1

KR101932877B1 - 프테로스틸벤 배당체를 포함하는 외용 조성물

Info

Publication number: KR101932877B1
Application number: KR1020177031502A
Authority: KR
Inventors: 히로키 하마다; 다이스케 우에스기; 케이 시모다
Original assignee: 토모이케 인더스트리얼 (에이치.케이.) 리미티드
Priority date: 2016-08-17
Filing date: 2017-08-17
Publication date: 2018-12-26
Also published as: EP3501490B1; EP3501490A1; WO2018034328A1; KR20180032526A; EP3501490A4

Abstract

본 발명은 주름이나 피부 처짐 등의 방지 또는 개선하는 효과를 발휘하는 외용 조성물 및 미백 효과를 발휘하는 외용 조성물 중 어느 하나 또는 이들 모두를 제공하는 것을 과제로 하고, 프테로스틸벤 배당체를 포함하는 외용 조성물을 제공함으로써, 이러한 과제를 해결한다.

Description

프테로스틸벤 배당체를 포함하는 외용 조성물

본 발명은 프테로스틸벤 배당체를 포함하는 외용 조성물에 관한 것이다.

특허문헌 1에는 카로티노이드 및 프테로스틸벤을 유효성분으로 함유하는 조성물이 개시되어 있다. 이러한 조성물은 주름이나 피부 처짐 등의 방지 또는 개선 효과를 나타내는 것이 기재되어 있다.

특허문헌 2에는 단백질 입자 및 프테로스틸벤을 유효성분으로 함유하는 조성물이 개시되어 있다. 이러한 조성물은 멜라닌 생산 제어 효과를 발휘하여 미백제로 사용할 수 있음이 기재되어 있다.

특허문헌 1에 기재된 조성물이 나타내는 주름이나 피부 처짐 등의 방지 또는 개선 효과는 시장에 있어서는 굉장히 매력적인 효과이지만, 개선되야 할 여지가 존재한다. 특허문헌 2에 기재된 조성물이 나타내는 미백 효과에 대해서도 시장이 만족하는 수준에는 도달하고 있지 않다.

[특허문헌 1] 일본공개특허공보 제2013-227275호 [특허문헌 2] 일본공개특허공보 제2013-075850호

본 발명은 주름이나 피부 처짐 등의 방지 또는 개선하는 효과를 발휘하는 외용 조성물 및 미백 효과를 발휘하는 외용 조성물 중 어느 한쪽 또는 이들 양쪽을 제공하는 것을 과제로 한다.

본 발명자들은 예의 검토를 거듭한 결과, 프테로스틸벤에 대하여 특정 처리를 실시하여 프테로스틸벤 배당체를 제작한 결과, 이 배당체가 주름이나 피부 처짐 등의 방지 또는 개선 작용에 관하여 우수한 효과를 발휘한 것을 발견하였다. 또한, 상기한 배당체가 우수한 미백 효과를 발휘하는 것도 발견하였다.

본 발명은 이러한 발견을 근거로 하여 완성된 것이며, 하기에서 나타내는 양태의 발명을 넓게 포함하는 것이다.

제1항, 프테로스틸벤 배당체를 유효성분으로 포함하는, 외용 조성물.

제2항, 제1항에 있어서, 상기 프테로스틸벤 배당체가 프테로스틸벤 다당체 또는 프테로스틸벤모노글리코시드인 것인, 외용 조성물.

제3항, 제2항에 있어서, 상기 프테로스틸벤 다당체가 하기 화학식 (1)로 나타내는 것인, 외용 조성물.

[화학식 1]

상기 식에서, n은 1 내지 9의 정수이다.

제4항, 제3항에 있어서, 상기 n이 1 또는 2인 것인, 외용 조성물.

제5항, 제2항에 있어서, 상기 프테로스틸벤모노글리코시드가 프테로스틸벤모노글루코시드인 것인, 외용 조성물.

제6항, 제5항에 있어서, 상기 프테로스틸벤모노글리코시드가 하기 화학식 (2)로 표시되는 것인, 외용 조성물.

[화학식 2]

제7항, 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 외용 조성물 중에 카로티노이드 화합물을 포함하지 않는 것인, 외용 조성물.

제8항, 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 외용 조성물의 유효성분이 실질적으로 프로테로스틸벤 배당체만으로 이루어진 것인, 외용 조성물.

제9항, 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 4형 콜라겐 생산을 촉진시키는 용도로 사용되는 것인, 외용 조성물.

제10항, 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 피부에 탄력을 부여하는 용도로 사용되는 것인, 외용 조성물.

제11항, 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 티로시나제 활성을 저해하는 용도로 사용되는 것인, 외용 조성물.

제12항, 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 미백 용도로 사용되는 것인, 외용 조성물.

제13항, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 화장료 조성물인 것인, 외용 조성물.

제14항, 프테로스틸벤 배당체와 외용 조성물에 첨가하는 것이 허용되는 성분을 배합하는 공정을 포함하는 것인, 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른, 외용 조성물의 제조 방법.

제15항, 피부 처짐 방지, 피부 탄력 부여 및 미백으로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 효과를 추구하는 사람에 대해서 프테로스틸벤 배당체를 피부 또는 두피에 적용하는 공정을 포함하는 것인, 미용 방법.

제16항, 프테로스틸벤 배당체의 피부 처짐 방지, 피부 탄력 부여 및 미백으로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 용도로 사용되는 외용 조성물의 제조를 위한 사용.

본 발명의 외용 조성물은 4형 콜라겐 생산을 촉진하는 효과를 발휘한다. 이와 같은 효과에 근거하여, 본 발명의 외용 조성물은 피부 처짐을 방지하는 용도 및 피부에 탄력을 부여하는 용도 중 어느 하나 또는 이들 모두에 유용하다.

본 발명의 외용 조성물, 특히 프테로스틸벤모노글리코시드는 티로시나제 활성을 저해한다. 이와 같은 효과에 근거하여, 본 발명의 외용 조성물은 미백 효과를 부여하는 용도에 유용하다.

도 1은 피부 세포에서 4형 콜라겐 유전자의 발현량을 마이크로어레이법에 의해 확인된 실험 결과를 나타내는 도면 (실험예 1)이다. 도면 중의 A는 음성 대상 실험의 결과, B는 프테로스틸벤모노글리코시드를 첨가한 결과를 나타낸다. 도면 중의 그래프의 세로축은 A의 4형 콜라겐 유전자의 발현량에 대하여 4형 콜라겐 유전자의 발현량의 상대치을 나타낸다.
도 2는 3차원 피부 모델에서 4형 콜라겐의 발현량을 웨스턴 블랏팅에 의해 확인한 실험 결과를 나타내는 도면 (실험예 2)이다. 도면의 그래프 세로축은 피부 3차원 모델 중의 4형 콜라겐의 양을, α-튜블린을 내부 표준으로 한 덴시토메트리에 의한 계산치을 나타낸다. 도면의 그래프 가로축의 단위는 각각 mM이다.
도 3은 시험관내 (in vitro)에서의 티로시나제 저해 실험 결과를 나타내는 도면 (실험예 3)이다. 도면 중 A는 프테로스틸벤, B는 프테로스틸벤모노글리코시드, 그리고 도면 중 C는 알부틴을 첨가한 경우의 결과를 나타낸다. 도면 중 그래프의 세로축은 티로시나제의 IC₅₀치 (단위: mM)을 나타낸다.
도 4는 실험예 4에 나타내는 프테로스틸벤 다당배당체의 제조 결과를 나타내는 도면이다. 도면 중 A는 프테로스틸벤모노글리코시드를 시클로덱스트린글루카노트랜스퍼라제의 존재하에서 가용성 전분과 반응시킨 반응물을 HPLC로 해석한 결과의 차트를 나타낸다. 또한, 도면의 "모노"란 "프테로스틸벤 단당배당체", "디"란 "프테로스틸벤 이당배당체", "트리"란 "프테로스틸벤 삼당배당체", "테트라"란 "프테로스틸벤 사당배당체", "펜타"란 "프테로스틸벤 오당배당체", "헥사"란 "프테로스틸벤 육당배당체", "헵타"란 "프테로스틸벤 칠당배당체", "옥타"란 "프테로스틸벤 팔당배당체"를 나타낸다. 도면 중의 B는 차트의 보유시간을 근거로 프테로스틸벤 이당배당체를 단리한 것을 나타내는 차트이다. 도면 중의 C는 동일한 프테로스틸벤 삼당배당체를 단리한 것을 나타낸 차트이다.
도 5는 삼차원 피부모델에서 4형 콜라겐의 발현량을 웨스턴 블랏팅에 의해 확인한 실험 결과를 나타내는 도면 (실험예 5)이다. 도면 중 사진은 웨스턴블랏의 결과를 나타낸다. 또한, 도면의 그래프의 세로축은 웨스턴 블랏의 결과를 근거로 α-튜블린을 내부 표준으로 한 덴시토메트리 해석에 의한 4형 콜라겐의 발현량을 나타낸다.

외용 조성물

본 발명의 외용 조성물은 프테로스틸벤 배당체를 유효성분으로 포함한다.

이와 같은 프테로스틸벤 배당체는, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 프테로스틸벤 다당체 또는 프테로스틸벤모노글리코시드를 들 수 있다.

프테로스틸벤 다당체

상기한 프테로스틸벤 다당체란, 프테로스틸벤 (IUPAC 명: 4-[(E)-2-(3,5-디메톡시페닐)에테닐]페놀)의 3위 수산기에 대하여, 2개 이상의 당으로 이루어지는 다당에 의해 수식된 배당체이다.

이와 같은 프테로스틸벤 다당체에 포함되는 당 잔기는, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 글루코스, 트레오스, 릭소스, 알로스, 프시코스, 세도헵툴로스 및 볼레미톨 등으로 대표되는 단당에서 유래하는 당 잔기를 들 수 있다. 이들 당 잔기 중에서도 글루코스가 바람직하다.

상기한 당 잔기의 종류는, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 모두 동일한 종류로 할 수도 있고, 각각 다른 종류로 할 수도 있다. 예를 들어, 모두 동일한 종류의 당 잔기로 하는 것이 바람직하다.

상기한 프테로스틸벤 다당체에 포함되는 당 잔기의 개수는, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 2개 내지 10개 중 어느 하나를 들 수 있다. 바람직하게는, 2개 또는 3개이고, 3개가 가장 바람직하다.

상기한 프테로스틸벤 다당체에서 다당을 구성하는 단당 간의 글리코시드 결합의 종류는, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 1-4 글리코시드 결합, 1-3 글리코시드 결합, 1-6 글리코시드 결합 등을 들 수 있다. 바람직하게는, 1-4 글리코시드 결합이다. 또한, α-글리코시드 결합으로 할 수 있고, β-글리코시드 결합으로 할 수도 있다. 바람직하게는 α-글리코시드 결합으로 하는 것이다.

또한, 상기한 다당에서 글리코시드 결합이 복수일 경우의 글리코시드 결합의 종류는, 각각 동일한 종류로 할 수 있고, 다른 종류로도 할 수 있다. 바람직하게는, 동일한 종류로 하는 것이다.

상기한 프테로스틸벤 다당체에 포함된 당 잔기를 구성하는 단당의 입체 배치는, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, D체로 할 수도 있고, L체로 할 수도 있다. 바람직하게는 D체이다.

이와 같은 프테로스틸벤 다당체 중에서도, 하기 화학식 (1)로 표시되는 화합물이 가장 바람직하다.

[화학식 1]

여기에서, n은 1 내지 9의 정수를 의미한다. 바람직하게는 1 내지 5이며, 보다 바람직하게는 1 또는 2이다.

상기한 프테로스틸벤 다당체에서 프테로스틸벤 3위의 수산기와 당과의 결합 방식은, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, α-글리코시드 결합으로 할 수 있고, β-글리코시드 결합으로 할 수도 있다. 바람직하게는 β-글리코시드 결합으로 하는 것이다.

상기한 프테로스틸벤 다당체는 프테로스틸벤과 상기 단당을 원료로, 퀘니그스-크놀 반응 (Koenigs-Knorr reaction) 등을 이용한 화학적 합성에 의해 제조한, 후술하는 프테로스틸벤 단당배당체와 당을 시클로덱스트린트랜스퍼라제 등의 효소를 이용하는 것에 의한 제조 방법; 또는 양쪽 원료와 함께 PaGT2 등의 배당화 효소를 이용하여 생합성에 제공하는 방법; 또는 포도류 등의 과실을 포함하는 식물체로부터 공지의 방법을 채용한 추출법에 제공하는 방법에 의해 제조할 수 있다.

프테로스틸벤모노글리코시드

상기한 프테로스틸벤모노글리코시드란, 프테로스틸벤 (IUPAC 명: 4-[(E)-2-(3,5-디메톡시페닐)에테닐]페놀)의 3위 수산기에 대하여 단당이 수식된 유도체이다.

단당이란, 순단당이라고도 불리는 더이상 가수분해되지 않는 종류의 것을 말하며, 이는 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 글루코스, 트레오스, 릭소스, 알로스, 프시코스, 세도헵툴로스 및 볼레미톨 등을 들 수 있다.

이들 단당 중에서도 글루코스가 바람직하다. 따라서, 상기한 프테로스틸벤모노글리코시드는 프테로스틸벤모노글리코시드로 하는 것이 바람직하다.

상기 단당의 입체배치는, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, D체로 할 수도 있고, L체로 할 수도 있다. 바람직하게는 D체이다.

프테로스틸벤모노글리코시드에서 프테로스틸벤의 3위 수산기와 단당의 결합 양식은, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, α-글리코시드 결합으로 할 수도 있고, β-글리코시드 결합으로 할 수도 있다. 바람직하게는 β-글리코시드 결합이다.

이와 같은 프테로스틸벤모노글리코시드 중에서도, 하기 화학식 (2)로 표시되는 프테로스틸벤모노글리코시드가 가장 바람직하다.

[화학식 2]

본 발명의 외용 조성물에는 프테로스틸벤 다당체 이외의 임의의 성분을 포함할 수 있다. 그러나, 임의의 성분으로서 카로티노이드 화합물은 본 발명의 외용 조성물에 포함되지 않는 것이 바람직하다.

카로티노이드 화합물이란, 화학식 C₄₀H₅₆의 화학 구조를 가지는 화합물의 유도체로서, 탄소 및 수소만으로 형성되는 카로틴과, 탄소 및 수소 이외의 원소를 포함하는 크산토필로 분류되는 화합물이다. 구체적으로 카로틴은, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, α-카로틴, β-카로틴, γ-카로틴, δ-카로틴, 리코펜 등의 화합물을 들 수 있다.

크산토필은 화학식 C₄₀H₅₆의 화학 구조를 가지는 화합물의 유도체로서, 탄소, 수소 및 그 외 원소로 형성되는 화합물이다. 구체적인 크산토필은, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 아스타크산틴, 제아잔틴, 루테인, 크립톡산틴, 츠나크산틴 (tunaxanthin), 살모크산틴 (salmo xanthine), 파라실로크산틴 (parasiloxanthin), 비올라크산틴 (violaxanthin), 안테라크산틴 (antheraxanthin), 쿠커비타크산틴 (cucurbita xanthine), 디아토크산틴 (diatoxanthin), 알로크산틴 (alloxanthin), 펙티놀 (pectinol), 펙티놀론 (pectinolone), 맥트라크산틴 (mactraxanthin), 캅산틴 (capsanthin), 캅산티놀 (capsanthinol), 푸코산틴 (fucoxanthin), 푸코산티놀 (fucoxanthinol), 페리디닌 (peridinin), 할로신티아잔틴 (halocynthiaxanthin), 아마로시아잔틴 (amarouciaxanthin), 칸타크산틴 (canthaxanthin), 에키네논 (echinenone), 로도크산틴 (rhodoxanthin), 빅신 (bixin), 노르빅신 (norbixin) 등을 들 수 있다. 상기 크산토필에는 이들의 모노에스테르체 및 디에스테르체도 포함된다.

바람직하게는, 본 발명의 외용 조성물은 유효성분으로 실질적으로 프테로스틸벤 배당체만을 함유하는 것이다.

여기서 유효성분이란, 본 발명의 외용 조성물이 발휘하는 효과로서 후술하는 4형 콜라겐 생산을 촉진하는 효과 및 티로시나제 활성을 저해하는 효과 중 어느 하나 또는 이들 모두를 나타내는 성분을 의미한다. 즉, 본 발명의 외용 조성물은 프테로스틸벤 배당체 이외에, 4형 콜라겐 생산 촉진 작용 및 티로시나제 활성 저해 작용 중 적어도 하나의 작용을 가지는 성분을 함유하지 않는 것이 바람직하다.

본 발명의 외용 조성물에 포함되는 프테로스틸벤 배당체의 함유량은 본 발명의 외용 조성물이 본 발명의 효과를 나타내는 것을 한도로서 특별히 제한되지 않는다. 예를 들어, 100 질량%의 외용 조성물에 대한 유효성분의 배합량으로서, 통상은 0.001 질량% 내지 100 질량% 정도로 할 수 있다.

하기 실시예 (예를 들어, 실험예 2)에 나타난 바와 같이, 프테로스틸벤 배당체를 유효성분으로 함유하는 조성물은 우수한 4형 콜라겐 생산 촉진 효과를 발휘한다. 이 때문에, 프테로스틸벤 배당체도 마찬가지로 우수한 4형 콜라겐 생산 촉진 효과를 발휘하는 것으로 생각된다. 따라서, 프테로스틸벤 배당체를 유효성분으로 하는 조성물은 4형 콜라겐 생산을 촉진시키는 용도로 적절히 이용된다.

4형 콜라겐이란 세라마이드 전달 단백질 (CETR)로도 불리며, 피부 기저막에 존재하고, 기저막에서 세포외 매트릭스 간의 결합에 관여하는 것이 알려져 있다. 프테로스틸벤 배당체를 외용함으로써, 기저막의 4형 콜라겐이 항진함과 동시에 노화 등에 의한 피부 처짐을 억제하고, 피부에 탄력을 부여하는 효과를 발휘한다.

이상의 관점에서, 본 발명의 외용 조성물은 이를 사람에게 적용 (외용)함으로써 피부 처짐을 억제하고 탄력을 부여하는 효과를 나타내는 것이 기대된다.

하기 실시예 (예를 들어, 실험예 3)에 나타난 바와 같이, 프테로스틸벤모노글리코시드는 우수한 티로시나제 저해 활성을 발휘한다. 이 때문에, 마찬가지로 그 외 프테로스틸벤 배당체도 우수한 티로시나제 저해 활성을 발휘할 것이 기대된다. 따라서, 프테로스틸벤 배당체를 유효성분으로 하는 조성물은 티로시나제 활성을 저해하는 용도로 적절히 이용된다.

티로시나제란 멜라닌 합성에 관련된 효소이고, 이의 활성을 저해하는 조성물은 미백 효과를 나타내는 것이 알려져 있다. 따라서, 본 발명의 외용 조성물은 이를 사람에게 적용 (외용)함으로써, 미백 효과를 나타내는 것이 기대된다. 즉, 미백제로서 유용하다.

본 발명의 외용 조성물의 적용대상으로는, 상기와 같은 효과를 필요로 하는 사람이라면 특별히 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 외용 조성물의 사용량은 상기와 같은 효과를 기대할 수 있는 범위 내의 사용량인 한, 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 후술하는 본 발명의 외용 조성물의 한 형태인 화장료 조성물, 또는 의약 조성물 등에서의 사용량으로부터 적절히 결정할 수 있다. 구체적으로는, 외용 조성물에 포함된 프테로스틸벤 배당체의 양으로 환산하여 피부 또는 두피 1 cm² 당 통상 1 mg 내지 5 mg 정도의 양으로 할 수 있다.

본 발명의 외용 조성물의 형태는, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 화장료 조성물, 또는 의약 조성물을 들 수 있다. 이중에서도, 화장료 조성물이 바람직하다.

화장료 조성물

본 발명의 외용 조성물은 화장료 조성물의 형태로 할 수 있다. 본 발명의 화장료 조성물에는 약용 화장품 등의 의약부외품도 포함된다.

화장료 조성물에 포함되는 프테로스틸벤 배당체의 배합량은, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 100 질량%의 화장료 조성물에 대한 유효성분의 배합량으로서, 통상은 0.001 질량% 내지 100 질량% 정도로 할 수 있다.

화장료 조성물의 구체적인 양태는, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 파운데이션, 볼연지, 백분 등의 메이크업 화장료; 화장수, 유액, 스킨 크림, 로션, 오일, 팩 등의 기초 화장료; 세안료, 클렌징, 바디 샴푸 등의 피부 세정제; 샴푸, 린스, 컨디셔너, 정발제, 육모제 등의 모발 화장료; 목욕 소금, 배스 테블릿, 배스 리퀴드 등의 입욕제, 마사지제, 청정제 등의 양태를 들 수 있다.

화장료 조성물의 형상은, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 로션상 (액상), 무스상, 젤 상, 젤리상, 유액상, 현탁액상, 크림상, 연고상, 시트상, 에어졸상, 스프레이상 등을 들 수 있다. 이와 같은 종류의 형상으로 함으로써, 피부 뿐만 아니라 두피에도 적용할 수 있다.

화장료 조성물의 적용량은, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 구체적으로는, 적용 대상자의 성별과 연령, 해당 화장료 조성물의 적용 형태, 원하는 효과의 정도 등에 따라 적절히 설정할 수 있다. 예를 들어, 화장료 조성물에 포함되는 프테로스틸벤 배당체의 양으로 환산해서 피부 또는 두피의 1 cm² 당 통상 1 mg 내지 5 mg 정도의 양으로 할 수 있다. 피부란, 사람의 두피 이외의 외부에 노출된 점막 이외의 영역을 의미한다.

의약 조성물

본 발명의 외용 조성물은 의약 조성물의 형태로 할 수 있다.

의약 조성물에 포함되는 프테로스틸벤 배당체의 배합량은, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 100 질량%의 의약 조성물에 대한 유효성분의 배합량으로서, 통상은 0.001 질량% 내지 100 질량% 정도로 할 수 있다.

의약 조성물의 제형은, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 에어졸제, 액제, 엑기스제, (안)연고제, 경피 흡수형 제제, 현탁제, 유제, 주정제, 첩부제(貼付劑), 틴크제, 찜질제 (Poultice), 방향수제, 리니먼트제, 유동 엑기스제, 로션제 등의 주로 외용되는 제형을 들 수 있다.

이와 같은 의약 조성물의 투여량은, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 구체적으로는, 적용대상자의 성별과 연령, 해당 의약 조성물의 적용 형태, 원하는 효과의 정도 등에 따라 적절히 설정할 수 있다. 예를 들어, 의약 조성물에 포함되는 프테로스틸벤 배당체의 양으로 환산하여, 성인 1일 당, 통상 1 내지 5 mg/cm² 정도의 양으로 할 수 있다.

외용 조성물의 제조 방법

본 발명의 외용 조성물의 제조 방법은 프테로스틸벤 배당체와 외용 조성물에 첨가하는 것이 허용된 성분을 혼합하는 공정을 포함한다.

프테로스틸벤 다당체란, 상기한 바와 같다.

외용 조성물에 첨가하는 것이 허용되는 성분이란, 본 발명의 과제를 해결하는 범위에 있어서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 상기 외용 조성물의 하나의 형태로 든 화장료 조성물 또는 의약 조성물에 첨가하는 것이 허용되는 성분으로 할 수 있다.

(실시예)

이하에, 본 발명을 보다 상세히 설명하기 위한 실시예를 나타낸다. 또한, 본 발명이 이하에 나타내는 실시예에 한정되지 않는 것은 말할 필요도 없다.

<실험예 1>

하기 화학식 (2) 로 표시되는 프테로스틸벤모노글리코시드를 마이스타바이오사로부터 입수하여, 이하 실험에 사용하였다.

[화학식 2]

htert 유전자를 도입하여 불사화(不死化)한 인간 피부 세포를 준비하고, 이를 소정의 배지인 Prigrow III (APB) 중에서 순화(馴化)하였다. 그 후, 순화 배지에 50μM의 상기 프테로스틸벤모노글리코시드를 첨가하고, 5일간 37℃의 5% CO₂환경하에서 배양하였다.

배양 후의 세포로부터 RNA를 회수하고, 4형 콜라겐 mRNA 발현량의 변화를 마이크로어레이법으로 조사하였다. 결과를 도 1에 나타낸다. 또한, 순화 배지에 프테로스틸벤모노글리코시드를 첨가하지 않은 음성 대상 실험도 실시하였다.

도 1에 나타난 바와 같이, 프테로스틸벤모노글리코시드를 첨가함으로써 (도면 중의 A), 인간 피부 세포에 포함되는 4형 콜라겐 유전자의 발현량이 음성 대상 실험 (도면의 B)와 비교하여, 1.35배 정도 증대하는 것이 밝혀졌다.

<실험예 2>

프테로스틸벤모노글리코시드는 피부 세포에서 4형 콜라겐 유전자의 발현량을 항진시키는 것이 상기 실험예 1로부터 밝혀졌기 때문에, 마찬가지로 프테로스틸벤모노글리코시드에 의한 피부 세포에서의 4형 콜라겐 단백질 레벨의 발현량 항진도 기대되었다.

이에, 인간 피부 각화 세포 및 인간 섬유아 세포로 구성되는 피부 3차원 모델의 제작 키트 (EFT-400; Kurabo 사)를 사용한 웨스턴 블랏팅법으로 실험을 실시하였다.

키트의 프로토콜에 따라 피부 3차원 모델을 제작하고, 이를 상기 키트에 부속된 배지를 사용하여 순화하였다. 순화 배지에 상기 프테로스틸벤모노글리코시드 (최종 농도로 25 μM 및 100 μM)를 첨가하고 7일간 배양하였다.

배양 후의 세포를 회수하고, 그 용해물을 항 인간 콜라겐 항체 (COL4A3BP; Abcam 사)를 사용한 웨스턴 블랏팅법에 제공하여, 4형 콜라겐 단백질 발현량을 검토하였다. 또한, 내부 표준으로 항 α-튜블린 항체를 사용한 웨스턴 블랏팅도 실시하고 얻어진 화상 데이터를 덴시토메트리 해석에 제공하였다. 이들 결과를 도 2에 나타낸다.

도 2에 나타난 바와 같이, 프테로스틸벤모노글리코시드는, 피부 3차원 모델내 4형 콜라겐의 발현량을 첨가 농도의존적으로 대조군에 비하여 최대 2.5배 정도로 증대시키는 것으로 밝혀졌다. 따라서, 프테로스틸벤모노글리코시드를 유효성분으로 포함하는 조성물은, 피부 세포에서 4형 콜라겐 증대에 기인하는 각종 효과 (예를 들어, 기저막의 비후에 의한 피부 탄력을 부여하는 효과 등)에 관련된 것이 밝혀졌다.

<실험예 3>

프테로스틸벤모노글리코시드에 의한 티로시나제 저해 효과 (IC₅₀ 치 측정)를 일반적으로 알려진 방법 (예를 들어, Expert Poin Ther Pat. 2016, 26(3), pp. 347-62)에 기초하여 실시하였다. 티로시나제로서 SIGMA 사의 티로시나제 (Cat No. T3824)를 사용하고, 프테로스틸벤 (동경화성공업 사 제조; 도면 중 A), 상기 프테로스틸벤모노글리코시드 (도면 중 B) 및 양성 대조군으로서 알부틴 (도면 중 C)을 사용하였다. 이들 결과를 도 3에 나타낸다.

도 3에 나타난 바와 같이, 프테로스틸벤모노글리코시드 (도면 중 B)는, 이의 아글리콘인 프테로스틸벤 (도면 중 A)과 비교하여, 우수한 티로시나제 저해 활성을 가지는 것이 밝혀졌다. 양자를 IC₅₀ 치으로 비교하면, 프테로스틸벤모노글리코시드 가 5.5배 가까이 우수한 티로시나제 저해 효과를 발휘하는 것이 밝혀졌다.

<실험예 4>

상기 실험예 1 내지 3에서 사용한 프테로스틸벤모노글리코시드를 원료로 프테로스틸벤 다당체를 제조하였다.

구체적으로는, 상기한 화학식 (2)로 표시된 1 g의 프테로스틸벤모노글리코시드를 40 mL의 증류수에 용해시켰다. 이와 같이 하여 제조한 용해액에 4 g의 가용성 전분 (나칼라이 테스크 사)을 가하고, 0.5 m의 시클로덱스트린글루카노트랜스퍼라제 (amano enzyme)의 존재하에서, 60℃에서 24시간 인큐베이트 하였다.

이 효소는 글루코스 분자를 가지는 화합물에 대하여 다른 글루코스 분자를 1-4 글리코시드 결합시키는 반응을 촉매하는 효소이다. 이와 같이 하여 얻은 반응물을 HPLC에 제공하였다. 결과 (HPLC 차트)를 도 4A에 나타낸다. HPLC의 조건은 이하와 같다.

·사용칼럼: YMC-Pack R&D ODS (φ20x150 mm)

·전개액 : 아세트니트릴 35% 수용액

·유속 : 1 ml/분

·측정온도: 40℃

도 4A에 나타난 바와 같이, 상기 반응물에는 프테로스틸벤 배당체인 프테로스틸벤 단당배당체, 및 여기에 1 내지 7개 정도의 글루코스가 α(1-4)결합한 프테로스틸벤 다당체가 포함된 것을 HPLC로 확인하였다. 보유 시간이 짧을수록 프테로스틸벤에 부가된 글루코스 수가 늘어나는 경향이 있는 것을 시사한다.

또한, 이 반응물로부터 프테로스틸벤 이당배당체 및 프테로스틸벤 삼당배당체를, HPLC를 반복 실시하여 단리하였다. 단리한 후의 HPLC 차트를 각각 도 4B (프테로스틸벤 이당배당체) 및 도 4C (프테로스틸벤 삼당배당체)에 나타낸다.

또한, 단리한 프테로스틸벤 이당배당체 및 프테로스틴벤 삼당배당체의 질량 분석 데이터는 이하와 같다. 또한, 질량 분석은 ESI법을 이용하여 실시하였다

프테로스틸벤 이당배당체 : 실측치 579.2; 추정치 580.3

프테로스틸벤 삼당배당체 : 실측치 741.2; 추정치 742.3

<실험예 5>

상기 실험예 4에서 단리한 프테로스틸벤 이당배당체 및 프테로스틸벤 삼당배당체를 사용하여 프테로스틸벤 다당체가 피부 3차 모델에 대하여 4형 콜라겐 단백질의 발현량을 항진시킬 수 있는지를 확인하는 실험을 실시하였다.

구체적으로는, 실험예 2와 동일한 실험을 실시하여 프테로스틸벤모노글리코시드 대신에 상기하는 프테로스틸벤 이당배당체 및 프테로스틸벤 삼당배당체의 DMSO 용액 (모두 50 μM)을 제조하고, 이들 피부 3차원 모델에 첨가하여 7일간 배양하였다. 배양 후의 세포 용해물을 항 인간 콜라겐 항체를 사용한 웨스턴 블랏팅법에 제공하여, 세포 내에서의 4형 콜라겐 발현량을 검토하였다. 음성 대조군 (Ctrl)로서, DMSO 용액만을 피부 3차원 모델에 첨가한 실험을 실시하였다.

또한, 내부 표준으로 항 α-튜불린 항체를 사용한 웨스턴 블랏팅도 실시하고, 얻어진 화상 데이터를 덴시토메트리 해석에 제공하였다. 이들 결과를 도 5에 나타낸다.

도 5에 나타난 결과로부터, 음성 대조군 (DMSO)과 비교하여, 프테로스틸벤 이당배당체의 첨가에 의해 피부 3차원 모델에서 4형 콜라겐의 발현량이 약 1.37배 정도로 상승한 것이 밝혀졌다. 그리고, 프테로스틸벤 이당배당체의 첨가에 의해, 피부 3차원 모델에서 4형 콜라겐의 발현량이 약 1.97배 정도로 상승한 것이 밝혀졌다.

따라서, 프테로스틸벤 다당체를 유효성분으로 포함하는 조성물도, 피부 세포에서 4형 콜라겐 증대에 기인하는 각종 효과 (예를 들어, 기저막의 비후에 의한 피부에 탄력을 부여하는 효과 등)에 관련하는 것이 밝혀졌다.

[처방예]

이하의 표 1 내지 4에 나타난 배합예에 따라, 각종 화장료 조성물을 제조한다. 또한, 프테로스틸벤 배당체란, 하기 화학식 (1)로 표시되는 화합물 및 하기 화학식 (2)로 표시되는 화합물 중 하나 또는 이들 둘다이다.

[화학식 1]

상기 식에서, n은 1 내지 9 중 어느 하나이고, 3당이 바람직하다. 또한, 식 중 글루코스 간 글리코시드 결합은 모두 1-4 결합으로, 프테로스틸벤의 3위와 글루코스의 결합 방식 및 글루코스간 글리코시드 결합은 모두 α-결합이다.

[화학식 2]

Claims

프테로스틸벤 배당체를 유효성분으로 포함하는, 4형 콜라겐의 생산을 촉진시키는 용도로 사용되는 화장료 조성물로서,
상기 프테로스틸벤 배당체는 프테로스틸벤의 수산기가 2개 또는 3개의 글루코스로 수식된 프테로스틸벤 다당체, 또는 프테로스틸벤의 수산기가 1개의 글루코스로 수식된 프테로스틸벤 모노글루코시드인, 화장료 조성물.
프테로스틸벤 배당체를 유효성분으로 포함하는, 티로시나제 활성을 저해하는 용도로 사용되는 화장료 조성물로서,
상기 프테로스틸벤 배당체는 프테로스틸벤의 수산기가 2개 또는 3개의 글루코스로 수식된 프테로스틸벤 다당체, 또는 프테로스틸벤의 수산기가 1개의 글루코스로 수식된 프테로스틸벤 모노글루코시드인, 화장료 조성물.
삭제
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 프테로스틸벤 다당체가, 하기 화학식 (1)로 표시되는 것인, 화장료 조성물:
[화학식 1]

상기 식에서, n은 1 또는 2이다.
삭제
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 프테로스틸벤 배당체가 프테로스틸벤 모노글루코시드인 것인, 화장료 조성물.
제6항에 있어서, 상기 프테로스틸벤 모노글루코시드가 하기 화학식 (2)로 표시되는 것인, 화장료 조성물.
[화학식 2]
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 화장료 조성물 중에 카로티노이드 화합물을 포함하지 않는 것인, 화장료 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 화장료 조성물의 유효성분이 프테로스틸벤 배당체만으로 이루어진 것인, 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 피부 처짐을 방지하는 용도 및 피부 탄력을 부여하는 용도 중 적어도 하나의 용도로 사용되는 것인, 화장료 조성물.
제2항에 있어서, 미백 용도로 사용되는 것인, 화장료 조성물.
프테로스틸벤 배당체를 화장료 조성물에 첨가하는 것이 허용되는 성분과 혼합하는 단계를 포함하는, 제1항 또는 제2항에 따른 화장료 조성물의 제조방법으로서,
상기 프테로스틸벤 배당체는 프테로스틸벤의 수산기가 2개 또는 3개의 글루코스로 수식된 프테로스틸벤 다당체, 또는 프테로스틸벤의 수산기가 1개의 글루코스로 수식된 프테로스틸벤 모노글루코시드인, 제조방법.
프테로스틸벤 배당체를 유효성분으로 포함하는, 4형 콜라겐의 생산을 촉진시킴으로써, 주름 또는 피부 처짐을 방지 또는 개선하는 용도; 및 피부 탄력을 부여하는 용도 중 적어도 하나의 용도에 사용되는 약학 조성물로서,
상기 프테로스틸벤 배당체는 프테로스틸벤의 수산기가 2개 또는 3개의 글루코스로 수식된 프테로스틸벤 다당체, 또는 프테로스틸벤의 수산기가 1개의 글루코스로 수식된 프테로스틸벤 모노글루코시드인, 약학 조성물.
프테로스틸벤 배당체를 유효성분으로 포함하는, 티로시나제 활성을 저해시킴으로써, 미백용도에 사용되는 약학 조성물로서,
상기 프테로스틸벤 배당체는 프테로스틸벤의 수산기가 2개 또는 3개의 글루코스로 수식된 프테로스틸벤 다당체, 또는 프테로스틸벤의 수산기가 1개의 글루코스로 수식된 프테로스틸벤 모노글루코시드인, 약학 조성물.
프테로스틸벤 배당체를 약학 조성물에 첨가하는 것이 허용되는 성분과 혼합하는 단계를 포함하는, 제13항 또는 제14항에 따른 약학 조성물의 제조방법으로서,
상기 프테로스틸벤 배당체는 프테로스틸벤의 수산기가 2개 또는 3개의 글루코스로 수식된 프테로스틸벤 다당체, 또는 프테로스틸벤의 수산기가 1개의 글루코스로 수식된 프테로스틸벤 모노글루코시드인, 제조방법.
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