KR101926075B1 - 명월초에서 분리한 화합물 등을 이용한 항당뇨 조성물 - Google Patents

명월초에서 분리한 화합물 등을 이용한 항당뇨 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR101926075B1
KR101926075B1 KR1020170001709A KR20170001709A KR101926075B1 KR 101926075 B1 KR101926075 B1 KR 101926075B1 KR 1020170001709 A KR1020170001709 A KR 1020170001709A KR 20170001709 A KR20170001709 A KR 20170001709A KR 101926075 B1 KR101926075 B1 KR 101926075B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
diabetes
composition
compound
food
tea
Prior art date
Application number
KR1020170001709A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20180080770A (ko
Inventor
허준회
김광숙
이경동
Original Assignee
동신대학교산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 동신대학교산학협력단 filed Critical 동신대학교산학협력단
Priority to KR1020170001709A priority Critical patent/KR101926075B1/ko
Publication of KR20180080770A publication Critical patent/KR20180080770A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101926075B1 publication Critical patent/KR101926075B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/03—Organic compounds
    • A23L29/035—Organic compounds containing oxygen as heteroatom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A61K31/353—3,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
    • A61K31/355—Tocopherols, e.g. vitamin E
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/25—Araliaceae (Ginseng family), e.g. ivy, aralia, schefflera or tetrapanax
    • A61K36/254—Acanthopanax or Eleutherococcus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
    • A61K36/282—Artemisia, e.g. wormwood or sagebrush
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/328—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having effect on glycaemic control and diabetes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00—Food ingredients
    • A23V2250/20—Natural extracts
    • A23V2250/21—Plant extracts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2121/00—Preparations for use in therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

본 발명은 제2 당뇨병 동물모델에서 항당뇨 활성이 확인된, 감국에서 분리한 화합물 등을 이용한 항당뇨 조성물을 개시한다.

Description

명월초에서 분리한 화합물 등을 이용한 항당뇨 조성물{Composition for Anti-Diabetes Using Compounds Isolated From Gynura procumbens et al}
본 발명은 명월초에서 분리한 화합물 등을 이용한 항당뇨 조성물에 관한 것이다.
당뇨병이란 췌장의 β세포에서 분비되는 글루코스 조절 호르몬인 인슐린이 부족하거나 제대로 작용하지 못하여 혈액 속의 혈당이 에너지로 이용되지 않고 혈액 속에 쌓여 고혈당을 유발하고 요중에 당이 검출되는 증상을 말한다.
당뇨병은 보통 인슐린 의존형 당뇨병(I형 당뇨병)과 인슐린 비의존형 당뇨병(II형 당뇨병)으로 구분된다. 인슐린 의존형 당뇨병은 바이러스 감염 등이 원인이 되어 췌장의 베타세포가 파괴된 결과 인슐린이 분비되지 않아 발병하며, 주로 10 내지 20대의 젊은 연령층에서 발병되기 때문에 소아 당뇨병이라고도 하는데, 인슐린이 외부에서 공급되지 않으면 생명유지가 어렵기 때문에 붙여진 이름이다. 인슐린 비의존형 당뇨병은 비만 등의 원인으로 췌장의 베타 세포에서 인슐린이 분비되기는 하지만 그 양이 부족하고 그 작용력이 감소하여 발병하며, 주로 30대 이후에 발병하므로 성인형 당뇨병이라고도 한다. 생명유지를 위해서는 외부로부터 인슐린을 반드시 공급할 필요가 없다고 하여 인슐린 비의존형 당뇨병이라 불리고 있지만, 그렇다고 고혈당 치료를 위하여 인슐린 치료가 필요하지 않다는 의미는 아니다.
당뇨병 치료에는 비구아니드(biguanides), 티아졸리딘디온(thiazolidinediones), 설포닐우레아(sulfonylureas), 벤조산(benzoic acid) 유도체, α-글루코시다제 저해제(α-glucosidase inhibitor) 등이 사용되고 있으나, 이들 약물을 이용한 당뇨병 치료는 많은 부작용이 따르고 있어, 세계보건기구(WHO)는 당뇨병에 부작용이 적은 천연물의 이용을 적극 추천하고 있다(Grover J.K., Vats. V., Rathi. S.S., Journal of Ethnopharmacology, 73, pp461-470, 2000).
당뇨병 치료에 효과가 있다고 제안된 천연물로서는 뜸부기 추출물(대한민국 특허 제464815호), 잔나비걸상버섯으로부터 분리한 아플아나산 유도체 화합물(대한민국 특허 제457690호), 헛개나무의 추출물(대한민국 특허 제417287호), 참당귀에서 분리한 다당류(국제공개 제2001-60386호), 반추동물의 담즙(미국특허 제6451355호) 등을 예시할 수 있다.
본 발명도 명월초로부터 분리한 화합물 등의 항당뇨 활성을 개시한다.
본 발명의 목적은 명월초에서 분리한 화합물 등의 항당뇨 조성물을 개시하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적이나 구체적인 목적은 이하에서 제시될 것이다.
본 발명은 아래의 실시예 및 실험예에서 확인되는 바와 같이, 제2 당뇨병 동물모델에서 명월초 등에서 분리한 아래 화학식 1 내지 3의 화합물의 항당뇨 활성을 확인하는 한편, 개똥쑥 잎 등의 발효차의 항당뇨 활성을 확인하고, 더불어 명월초 잎 추출물과 개똥쑥 잎 추출물 등과 의 과립차 추출물 등의 항당뇨 활성을 확인함으로써 완성된 것이다.
<화학식 1>
Figure 112017001386606-pat00001
<화학식 2>
Figure 112017001386606-pat00002
<화학식 3>
Figure 112017001386606-pat00003
본 발명의 항당뇨 조성물은 전술한 바를 고려할 때, 아래의 (i) 내지 (vi)에서 열거한 화합물 또는 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 한다:
(i) 상기 <화학식 1>의 화합물;
(ii) 상기 <화학식 2>의 화합물;
(iii) 상기 <화학식 3>의 화합물;
(iv) 개똥쑥(잎, Artemisia annua L.), 오가피(잎, leutherococcus sessiliflorus), 명월초(잎, Gynura procumbens Merr), 작두콩(열매, Canavalia gladiata), 및 야콘(잎, Polymnia sonchifolia) 중 어느 하나의 황국균과 락토바실러스에 의한 발효물(발효 잎차) 또는 그 추출물;
(v) 야콘(잎), 명월초(잎), 갈근(뿌리, Pueraria lobata), 울금(뿌리, Curcuma longa L.), 오가피(잎), 개똥쑥(잎), 및 감국(꽃, Chrysanthemum indicum L.) 중 어느 넷 이상의 각 추출물의 혼합물; 및
(vi) 돼지감자(뿌리, Helianthus tuberosus L.), 율무(열매, Coix lacryma-jobi L.), 갈근(뿌리), 울금(뿌리), 명월초(잎) 또는 야콘(잎)의 어느 넷 이상의 혼합물 또는 그 추출물.
바람직하게는 (iv) 내지 (vi) 발효물이나 추출물 등의 바람직한 혼합 비율이나 이들 혼합된 혼합물의 제형 등의 제품 형태는 아래의 실시예, 실험예 등에서 확인할 수 있다.
또 본 명세서에서, "발효물(발효 잎차)"는 발효 대상 잎을 채취한 후 이물질을 제거하고 여기에 황국균(Aspergillus oryzae)와 락토바실러스(Lactobacillus plantarum)를 접종하여 발효 숙성시키고 일반적인 차의 제조 방법에 따른 덖음과 유념 과정을 통하여 얻어진 잎차를 의미한다. 바람직하게는 건성으로 발효 숙성시켜 얻어진 것을 의미한다. 여기서 "건성 발효 숙성"이란 발효시 인위적으로 수분을 공급하지 않고 또 외부와의 수분 접촉도 차단한 상태에서 발효와 숙성이 진행되는 것을 말한다. 이러한 건성 발효 숙성은 미생물이 내·외부로 이동할 수 있는 공극이 구비된 밀봉 부재에 해당 미생물을 함유시켜 발효 대상인 야콘 잎과 함께 외부와의 수분 접촉을 차단할 수 있는 비닐 등에 넣어 이루어질 수 있다. 미생물을 함유하는 공극이 구비된 밀봉 부재는 거즈, 부직포 등 합성섬유 또는 천연섬유 재질의 직물로 구성될 수 있다.
또 본 명세서에서, "추출물"은 추출 대상을 메탄올, 에탄올 등의 탄소수 1 내지 4의 알콜, 아세톤, 에틸아세테이트, 클로로포름, 메틸렌클로라이드, 물, 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 얻어진 추출물과 그 추출물에서 상기 열거된 용매로 더 정제된 분획물을 포함하는 의미로서 이해된다. 여기서 추출 방법은 추출 대상을 추출 용매에 침지시키는 방법과 추출 대상을 추출 용매로 증류시키는 방법을 모두 포함한다. 또한 침지를 통한 추출 방법에는 냉침, 가온, 초음파, 환류 등 임의의 방식이 적용될 수 있다. 그럼에도 상기 "추출물"은 바람직하게는 그 추출 대상을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합 용매로 추출(침지 또는 증류)하여 얻어진 것을 의미하며, 더 바람직하게는 60℃ 내지 100℃의 열수로 얻어진 추출물을 의미한다.
또한 본 명세서에서, "항당뇨"는 당뇨병의 증상의 경감, 예방, 또는 치료를 의미한다.
본 명세서에서 "당뇨병"이란 전술한 바의 인슐린 의존형 당뇨병(제1형 당뇨병)과 인슐린 비의존형 당뇨병(제2형 당뇨병)을 포함하는 의미이며, 나아가 다른 질병 등으로 인하여 췌장이 손상됨에 따라 발생하는 당뇨병 예컨대, 갑상선 기능 항진증, 부신피질 기능 항진증, 성장호르몬 과다증 또는 카테콜라민 과다증에 의한 당뇨병, 임신성 당뇨병을 포함하는 의미이다.
또한 본 명세서에서 "유효성분"이란 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.
본 발명의 조성물에서 그 유효성분은 항당뇨 효과 등 나타낼 수 있는 한, 용도, 제형 등에 따라 임의의 양(유효량)으로 포함될 수 있는데, 통상적인 유효량은 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.001 중량 % 내지 15 중량 % 범위 내에서 결정될 것이다. 여기서 "유효량"이란 그 적용 대상인 포유동물 바람직하게는 사람에게 의료 전문가 등의 제언에 의한 투여 기간 동안 본 발명의 조성물이 투여될 때, 항당뇨 효과 등 의도한 의료적·약리학적 효과를 나타낼 수 있는, 본 발명의 조성물에 포함되는 유효성분의 양을 말한다. 이러한 유효량은 당업자의 통상의 능력 범위 내에서 실험적으로 결정될 수 있다.
본 발명의 조성물은 구체적인 양태에 있어서 식품 조성물로서 파악할 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 어떠한 형태로도 제조될 수 있으며, 예컨대 차, 쥬스, 탄산음료, 이온음료 등의 음료류, 우유, 요구루트 등의 가공 유류(乳類), 껌류, 떡, 한과, 빵, 과자, 면 등의 식품류, 정제, 캡슐, 환, 과립, 액상, 분말, 편상, 페이스트상, 시럽, 겔, 젤리, 바 등의 건강기능식품 제제류 등으로 제조될 수 있다. 또 본 발명의 식품 조성물은 법률상·기능상의 구분에 있어서 제조·유통 시점의 시행 법규에 부합하는 한 임의의 제품 구분을 띨 수 있다. 예컨대 한국 "건강기능식품에관한법률"에 따른 건강기능식품이거나, 한국 "식품위생법"의 식품공전(식약처 고시 "식품의 기준 및 규격"임)상 각 식품유형에 따른 과자류, 두류, 다류, 음료류, 특수용도식품 등일 수 있다.
본 발명의 식품 조성물에는 그 유효성분 이외에 식품첨가물이 포함될 수 있다. 식품첨가물은 일반적으로 식품을 제조, 가공 또는 보존함에 있어 식품에 첨가되어 혼합되거나 침윤되는 물질로서 이해될 수 있는데, 식품과 함께 매일 그리고 장기간 섭취되므로 그 안전성이 보장되어야 한다. 식품의 제조·유통을 규율하는 각국 법률(한국에서는 "식품위생법"임)에 따른 식품첨가물공전에는 안전성이 보장된 식품첨가물이 성분 면에서 또는 기능 면에서 한정적으로 규정되어 있다. 한국 식품첨가물공전(식약처 고시 "식품첨가물 기준 및 규격)에서는 식품첨가물이 성분 면에서 화학적 합성품, 천연 첨가물 및 혼합 제제류로 구분되어 규정되어 있는데, 이러한 식품첨가물은 기능 면에 있어서는 감미제, 풍미제, 보존제, 유화제, 산미료, 점증제 등으로 구분된다.
감미제는 식품에 적당한 단맛을 부여하기 위하여 사용되는 것으로, 천연의 것이거나 합성된 것 모두 본 발명의 식품 조성물에 사용할 수 있다. 바람직하게는 천연 감미제를 사용하는 경우인데, 천연 감미제로서는 옥수수 시럽 고형물, 꿀, 수크로오스, 프룩토오스, 락토오스, 말토오스 등의 당 감미제를 들 수 있다.
풍미제는 맛이나 향을 좋게 하기 위한 용도로 사용되는 것으로, 천연의 것과 합성된 것 모두 사용될 수 있다. 바람직하게는 천연의 것을 사용하는 경우이다. 천연의 것을 사용할 경우에 풍미 이외에 영양 강화의 목적도 병행할 수 있다. 천연 풍미제로서는 사과, 레몬, 감귤, 포도, 딸기, 복숭아 등에서 얻어진 것이거나 녹차잎, 둥굴레, 대잎, 계피, 국화 잎, 자스민 등에서 얻어진 것일 수 있다. 또 인삼(홍삼), 죽순, 알로에 베라, 은행 등에서 얻어진 것을 사용할 수 있다. 천연 풍미제는 액상의 농축액이나 고형상의 추출물일 수 있다. 경우에 따라서 합성 풍미제가 사용될 수 있는데, 합성 풍미제로서는 에스테르, 알콜, 알데하이드, 테르펜 등이 이용될 수 있다.
보존제로서는 소르브산칼슘, 소르브산나트륨, 소르브산칼륨, 벤조산칼슘, 벤조산나트륨, 벤조산칼륨, EDTA(에틸렌디아민테트라아세트산) 등이 사용될 수 있고, 또 유화제로서는 아카시아검, 카르복시메틸셀룰로스, 잔탄검, 펙틴 등이 사용될 수 있으며, 산미료로서는 연산, 말산, 푸마르산, 아디프산, 인산, 글루콘산, 타르타르산, 아스코르브산, 아세트산, 인산 등이 사용될 수 있다. 산미료는 맛을 증진시키는 목적 이외에 미생물의 증식을 억제할 목적으로 식품 조성물이 적정 산도로 되도록 첨가될 수 있다. 점증제로서는 현탁화 구현제, 침강제, 겔형성제, 팽화제 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 전술한 바의 식품첨가물 이외에, 기능성과 영양성을 보충·보강할 목적으로 당업계에 공지되고 식품첨가물로서 안정성이 보장된 생리활성 물질이나 미네랄류를 포함할 수 있다.
그러한 생리활성 물질로서는 녹차 등에 포함된 카테킨류, 비타민 B1, 비타민 C, 비타민 E, 비타민 B12 등의 비타민류, 토코페롤, 디벤조일티아민 등을 들 수 있으며, 미네랄류로서는 구연산칼슘 등의 칼슘 제제, 스테아린산마그네슘 등의 마그네슘 제제, 구연산철 등의 철 제제, 염화크롬, 요오드칼륨, 셀레늄, 게르마늄, 바나듐, 아연 등을 들 수 있다.
본 발명의 식품 조성물에는 전술한 바의 식품첨가물이 제품 유형에 따라 그 첨가 목적을 달성할 수 있는 적량으로 포함될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물에 포함될 수 있는 기타의 식품첨가물과 관련하여서는 각국 법률에 따른 식품공전이나 식품첨가물공전을 참조할 수 있다.
본 발명의 조성물은 다른 구체적인 양태에 있어서는 약제학적 조성물로 파악될 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 유효성분 이외에 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하여 당업계에 공지된 통상의 방법으로 투여 경로에 따라 경구용 제형 또는 비경구용 제형으로 제조될 수 있다. 여기서 "약제학적으로 허용되는" 의미는 유효성분의 활성을 억제하지 않으면서 적용(처방) 대상이 적응 가능한 이상의 독성을 지니지 않는다는 의미이다.
본 발명의 약제학적 조성물이 경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 현탁액, 웨이퍼 등의 제형으로 제조될 수 있다. 이때 약제학적으로 허용되는 적합한 담체의 예로서는 락토스, 글루코스, 슈크로스, 덱스트로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨 등의 당류, 옥수수 전분, 감자 전분, 밀 전분 등의 전분류, 셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸셀룰로오스 등의 셀룰로오스류, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 마그네슘 스테아레이트, 광물유, 맥아, 젤라틴, 탈크, 폴리올, 식물성유 등을 들 수 있다. 제제화활 경우 필요에 따라 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 및/또는 부형제를 포함하여 제제화할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물이 비경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 점안제, 주사제, 경피 투여제, 비강 흡입제, 좌제의 형태로 제제화될 수 있다. 점안제로 제제화활 경우 적합한 담체로서는 멸균수, 식염수, 5% 덱스트로스 같은 등장 용액 등을 사용할 수 있으며 필요에 따라 염화벤잘코늄, 메필파라벤, 에틸파라벤 등을 방부 목적으로 첨가할 수 있다. 주사제로 제제화할 경우 적합한 담체로서는 멸균수, 에탄올, 글리세롤이나 프로필렌 글리콜 등의 폴리올 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 링거 용액, 트리에탄올 아민이 함유된 PBS(phosphate buffered saline)나 주사용 멸균수, 5% 덱스트로스 같은 등장 용액 등을 사용할 수 있다. 경피 투여제로 제제화할 경우 연고제, 크림제, 로션제, 겔제, 외용액제, 파스타제, 리니멘트제, 에어롤제 등의 형태로 제제화할 수 있다. 비강 흡입제의 경우 디클로로플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 등의 적합한 추진제를 사용하여 에어로졸 스프레이 형태로 제제화할 수 있으며, 좌제로 제제화할 경우 그 기제로는 위텝솔(witepsol), 트윈(tween) 61, 폴리에틸렌글리콜류, 카카오지, 라우린지, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르류, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트류, 소르비탄 지방산 에스테르류 등을 사용할 수 있다.
약제학적 조성물의 구체적인 제제화와 관련하여서는 당업계에 공지되어 있으며, 예컨대 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)] 등을 참조할 수 있다. 상기 문헌은 본 명세서의 일부로서 간주 된다.
본 발명의 약제학적 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태, 체중, 성별, 연령, 환자의 중증도, 투여 경로에 따라 1일 0.001mg/kg ~ 10g/kg 범위, 바람직하게는 0.001mg/kg ~ 1g/kg 범위일 수 있다. 투여는 1일 1회 또는 수회로 나누어 이루어질 수 있다. 이러한 투여량은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석되어서는 아니 된다.
전술한 바와 같이 본 발명에 따르면 식품 또는 약품으로 제품화될 수 있는 항당뇨 조성물을 제공할 수 있다.
도 1 내지 도 5은 화학식 1의 화합물의 구조 동정에 사용된 IR 스펙트럼 등의 데이터이다.
도 6 내지 도 11은 화학식 2의 화합물의 구조 동정에 사용된 IR 스펙트럼 등의 데이터이다.
도 12 내지 도 17은 화학식 3의 화합물의 구조 동정에 사용된 IR 스펙트럼 등의 데이터이다.
도 18은 화학식 1 내지 화학식 3의 화합물의 항당뇨 활성을 보여주는 동물실험 결과이다.
도 19는 개똥쑥 등의 발효 잎차의 항당뇨 활성을 보여주는 동물실험 결과이다.
도 20은 아콘 추출물 등을 포함하여 제조된 과립차의 항당뇨 활성을 보여주는 동물실험 결과이다.
도 21은 돼지감자 분말 등을 포함하여 제조된 환 형태 제품의 항당뇨 활성을 보여주는 동물실험 결과이다.
이하 본 발명의 실시예, 제조예 및 실험예를 참조하여 설명한다. 그러나 본 발명의 범위가 이러한 실시예, 제조예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예> 시료 준비
<실시예 1> 약용식물 시료 준비
실험에 사용한 개똥쑥(Artemisia annua L.), 오가피(Eleutherococcus sessiliflorus), 야콘(Polymnia sonchifolia), 돼지감자(Helianthus tuberosus L.) 등의 약용식물은 동신대학교 시험포장에서 2013년에서 2015년까지의 봄에서 가을동안 확보하였다. 대부분의 잎은 봄과 초여름에 채취하였고 돼지감자는 가을에 채취하여 사용하였다. 잎은 직접 건조하거나 가공하고, 괴경은 수확 후 흙을 제거하고 4-6의 냉장고에 보관하면서 실험재료로 사용하였다. 그 이외 한약재(명월초(Gynura procumbens Merr), 작두콩(Canavalia gladiata), 갈근(Pueraria lobata), 울금(Curcuma longa L.), 율무(Coix lacryma-jobi L.), 감국(Chrysanthemum indicum L.))들은 인터넷이나 동호회, 영농조합 형태의 전문가에게 구입하였고 구입 후에는 일부 동정을 다시 수행하였다.
수집되고 채취되어진 시료들은 물로 이물질을 제거하고 깨끗이 씻어 세절한 후 건조기에 넣고 45℃로 열풍건조하였다. 일부는 건조시간 및 건조상태에 따른 품질을 확인하기 위하여 음건, 실온건조 또는 열풍건조기 등의 방법으로 온도별 조건에 따라 건조하였으며 저온건조를 위해서는 동결건조법(삼원냉열, SFD)을 주로 사용하였다.
건조된 시료들은 각각 1차로 일반분쇄기(동양과학, 회전날) 등을 이용하여 큰 조직을 잘게 자르고 2차로 식품전용 기류식 분쇄기(air mill, 현준파우텍, HTM-101)과 초미립분쇄기 등을 이용하여 미세 분말화하였다. 분말화된 시료들은 진공포장 후 냉장고에 보관하였으며 실험에 사용하였다.
상기 실시예에 기재된 바와 같이 확보된 시료를 열수 추출하였으며 남녀 각각 10명을 대상으로 관능평가를 수행하였다. 향, 쓴맛, 단맛, 색, 기호성 등의 관능평가 결과를 토대로 시료를 잎차, 과립차, 선식 또는 환의 형태로 제조하였으며 항당뇨 효과를 확인하였다.
<실시예 2> 활성성분 분리
주요 약용 식물 중 명월초의 잎과 감국의 꽃에 함유되어 있는 항당뇨 단일 성분을 확보하였다.
감국 및 명월초는 주정(95% ethanol)으로 2일간 실온에서 방치한 다음 1차 Watman No.2로 필터한 다음 45℃에서 회전진공농축기(EYELA, Japan)를 이용하여 조추출물을 확보하였다. 확보한 조추출물을 분말화하기 위하여 농축을 실시하였다. 농축은 동결건조기((주)삼원)를 활용하여 28시간동안 건조하고 파우더형태로 시료를 확보하였다.
파우더 형태의 추출물들은 증류수에 현탁하고 동량의 용매로 순차적 용매분획(hexane, chloroform, ethylacetate, butanol)을 수행한 후 silica gel이 충진된 컬럼에서 silica gel column chromatography와 preparative TLC를 기본으로 실시하여 1 내지 10차례의 fractionation 얻어 활성물질을 확보하였다.
<실시예 2-1> 감국에서 활성 성분 분리(화합물 1)
감국의 클로로포름층을 회수하여 분획물을 얻어 실리카겔이 충진된 10×20 cm 오픈 컬럼에 넣어 CHCl3/MeOH용매 조합을 활용하여 농도구배를 통하여 fractionation 하였다. 순수하게 정제하기 위하여 2 내지 3차례 더 오픈 컬럼을 이용하여 백색의 결정을 단리하는데 성공하였다. 이 화합물은 백색의 침상결정으로 발색시약 황산을 활용했을 때 붉은색으로 발색되는 전형적인 sesquiterpene의 성질을 가지고 있음을 확인할 수 있었다.
IR spectrum에서 1754 cm-1의 carbonyl group과 3418cm-1의 hydroxyl group이 관찰되었고, MS에서는 m/z 266에서 molecular ion peak를 관찰 할 수 있었다. 1H-NMR spectrum에서 δ1.33의 3H분의 doublet (J=7.0Hz)은 methyl proton이 관찰되었으며, δ4.98에서는 1개의 exo-methylene기를 추정할 수 있다. 13C-NMR에서 총 15개의 탄소 피크가 관찰되었고, DEPT spectrum에서 2개의 methyl, 3개의 methylene, 8개의 methine carbon signal을 관찰할 수 있었다. 이러한 결과들로 미루어보아 분자식은 C15H22O4이고 분자량은 266임을 추정할 수 있었다.
13C-1H COSY에서는 115ppm에서 5와 4.98의 수소이온피크가, 48.9ppm에서는 2.7과 2.08 수소이온피크가 존재함을 확인할 수 있었다. 1H-1H COSY spectrum(Figure 15)에서 H-13(δ1.33)은 vicinal proton H-11(δ2.58)과, H-11은 H-7(δ1.90)과 상관관계를 보였으며 H-7은 인접한 H-6(δ3.94) 및 H-8(δ3.56)과 cross peak을 보였다. H-4는 H-3(δ3.60) 및 H-15(δ1.17)과 교차 peak를 보이고, H-3은 인접해있는 H-2a/b와 상관관계를 보였다.
상기 화합물 구조 동정에 사용한 IR 스펙트럼 등은 <도 1> 내지 <도 5>에 개시하였다.
이러한 결과를 종합하여, 아래의 화학식 1의 구조를 갖는 guaianolide계 화합물인 3,8-hydroxy-10-guaien-12,6-olide (화합물 1)인 것으로 동정되었다.
<화학식 1>
Figure 112017001386606-pat00004
<실시예 2-2> 감국에서 활성 성분 분리(화합물 2)
감국의 조추출물을 용매분획하여 클로로포름층 분획물을 얻은 다음 또 다른 물질을 분리하였다. 순수 분리된 화합물은 무색분말로 mp. 195℃, [α]20D=-29.8(c 0.5, CHCl3)였다. IR spectrum에서는 3387, 2930, 1763 and 1715 cm-1, Mass spectrum에서 m/z=306에서 morecular ion peak을 확인하였다. UV(CHCl3)λmax =204 nm, 분자식은 C17H22O5인 것으로 추정되었다.
1H-NMRδH (CDCl3,500MHz):6.23(1H,d, J=3.3Hz, H-13a), 5.72(1H, d, J=2.9Hz, H-13b), 5.43(1H, dd, J=10.4, 9.8Hz, H-8), 5.30(1H, d, J=10.1Hz, H-5), 4.84(1H, d, J=10.5Hz, H-9), 4.68(1H, dd, J=9.8, 9.2Hz, H-6), 4.41(1H, dd, J=10.8, 5.08Hz, H-1), 3.03(1H, m, H-7), 2.28(1H, m, H-3a), 2.08(3H, s, H-2'), 2.00(1H, m, H-2a), 1.89(3H, s, H-14), 1.86(1H, m, H-3b), 1.81(3H, d, J=1.3Hz, H-15), 1.72(1H, m, H-2b); 13C-NMR은 1-66.9d, 2-27.5t, 3-35.6t, 4-137.3s, 5-126.5d, 6-74.6d, 7-49.4d, 8-73.5d, 9-126.3d, 10-138.4s, 11-143.5 등 호모코지와 헤테로코지의 수소이온과 탄소 피크를 서로 대조하여 상관관계를 유추한 결과 가 서로 상관관계가 있음을 확인하였다. 이 결과 화합물 2는 아래의 화학식 2의 구조를 갖는 susquiterpene계 화합물인 tulirinol로 확인되었다. 마찬가지로 이 화합물 구조 동정에 사용한 IR 스펙트럼 등은 <도 6> 내지 <도 11> 에 개시하였다.
<화학식 2>
Figure 112017001386606-pat00005
<실시예 2-3> 명월초에서 활성 성분 분리(화합물 3)
명월초의 EtOAc층에서 화합물을 분리하였으며, 분리한 화합물은 흰색의 분말형으로 녹는점이 178~180℃이고 황산으로는 전형적인 sesquiterpene형 주황색으로 발색되었다. [α]D 20은 -71.4(c 2.0, MeOH)로 확인되었다.
IR spectrum에서는 3369cm-1에서 hydroxy기와 1612cm-1에서 carbonyl group의 흡수 피이크를 확인할 수 있다. 질량스펙트럼 에서 분자이온(M+)의 피이크가 m/z=424에서 확인되었다.
13C-NMR spectrum 에서는 총 25개의 carbon signal이 관찰되었고, δ199.4 ppm에서 1개의 carbonyl기에 기인하는 signal이 관찰되었다. DEPT 90과 DEPT 135에서는 3개의 CH3(3H×3=9H)와 4개의 CH2(2H×4=8H)가 관찰되었으며, 7개의 CH(1H×7=7H)와 11개의 4차 탄소가 존재함을 알 수 있었다.
1H-NMR spectrum(의 적분비로부터 수소수가 24로 나타났으며, δ2.73, δ2.97, δ5.55 ppm에서 flavanone의 2번과 3번 위치에 존재하는 전형적인 수소 피이크를 관찰할 수 있었다. 이로서 분자식은 C25H28O6으로 추정되었다.
13C-NMR spectrum에서 100ppm 이상의 모든 CH는 이중결합을 가지고 있음을 알 수 있었다. 13C-1H COSY(HMQC) spectrum에서 아래와 같은 상관관계(cross peak)를 찾았다. 1H-1H COSY(HMQC) spectrum에서 H2는 H3 (2.73, 2.97ppm)과 상관관계가 관찰되었고, H5′(6.35ppm)는 H6′(7.30 ppm)와 H5′는 allylic 위치의 H3′(6.37ppm)과 상관관계가 관찰되었다. H1′′(2.58ppm)는 H2′′(2.47ppm)와 상관관계가 관찰되었고, H2′′는 H3′′(2.00ppm)와 상관관계가 관찰되었다. 이상의 결과로 볼 때 화합물 3은 아래의 화학식 3의 구조를 갖는 lavendulylflavavone 계통의 화합물로 추정되었다. 마찬가지로 화합물 구조 동정에 사용한 IR 스펙트럼 등은 <도 12> 내지 <도 17> 에 개시하였다.
<화학식 3>
etrahydro-6-hydroxy-4,4,8-trimethyl-benzofuranone
Figure 112017001386606-pat00006
<제조예> 항당뇨 시제품 제조
상기 <실시예 1>과 같이 확보한 시료를 이용하여 향, 쓴맛, 단맛, 색, 기호성 등의 관능평가를 수행하였으며 그 결과를 토대로 시료를 잎차, 과립차, 선식 또는 환의 형태로 제조하였다.
<제조예 1> 잎차 제조
<제조예 1-1> 일반잎차
잎차의 항당뇨 효과를 확인하기 위하여 개똥쑥, 오가피, 명월초, 작두콩 및 야콘의 4월 어린새순 어린잎을 채취하여 실험에 사용하였다.
잎차의 제조는 일반적인 차의 제조 방법에 따라 덖음 과정, 유념 과정 및 건조 과정을 순차적으로 실시하여 제조하였다. 구체적으로, 솥의 온도를 200℃로 유지하면서 가볍게 20분간 뒤집어 주고 유념과정으로 밑바닥에 돗자리를 깔고 손으로 30분간 마찰시켜 찻잎이 세절되도록 하였다. 마지막으로 70℃에서 5시간 동안 열풍 건조시켜 일반 잎차를 제조하였다. 이 잎차를 비닐로 밀봉하고 냉장 보관하면서 시험 시료로 사용하였다.
<제조예 1-2> 발효잎차
개똥쑥(잎), 오가피(잎), 명월초(잎), 작두콩(열매), 및 야콘(잎)를 건조 과정을 거치지 않고 채취 후 이물질을 제거한 다음 곧바로 비닐에 넣어 외부와의 수분 접촉을 차단하였다. 이때 인공발효과정을 유도하기 위하여 황국균(5 × 108, Aspergillus oryzae)과 락토바실러스(2×107, Lactobacillus plantarum)균체를 함유한 부식포 팩(10cm×10cm, 3g)에 잎 시료 1kg당 10개를 넣었다.
1차 발효는 28℃에서 8시간동안 수행하였으며 2차 발효는 32℃에서 8시간 이상 수행하여 숙성을 가속화시켰다. 숙성시 30분 간격으로 비닐봉지를 흔들어 공기밀도를 균일하게 유지하고 발표팩의 균사가 잘 퍼지도록 하였다. 숙성과정이 끝남과 동시에 살청을 실시하였다. 살청은 가마솥의 온도 200℃를 유지하면서 가볍게 20분간 뒤집어 주고 유념과정으로 밑바닥에 돗자리를 깔고 손으로 30분간 마찰시켜 야콘 잎의 수액이 빠져 나오지 않을 정도로 하였다.
마지막으로 70℃에서 5-6시간 동안 열풍 건조시켜 숙성 발효 잎차를 완성하였다. 제조된 잎차는 진공으로 포장하여 냉장 보관하면서 시험 시료로 사용하였다.
<제조예 2> 과립차 제조
과립차 제조를 위하여 야콘(잎), 명월초(잎), 갈근(뿌리), 울금(뿌리), 오가피(잎), 개똥쑥(잎), 및 감국(꽃)를 시료로 사용하였다.
상기 실시예 2에서 동일한 방법으로 주정으로 추출한 각 시료의 추출물은 일반 필터(Whatman No.2)로 1차 여과하고 ultrafiltration kit를 사용하여 부분적으로 2차 여과한 후 감압농축 및 동결건조를 실행하고 무게를 측정하였다.
과립차 혼합물의 제조는 농축액의 물성정도를 파악하고 당의 함유량에 따라 설탕대신 스테비아를 넣고 구연산을 일정량 혼합하였다. 유당을 적당한 비율로 혼합하여 반죽여 50 메쉬(mesh) 표준체 망을 통과시켜 과립을 형성하여 30℃에서 건조하였다. 배합조건은 추출물의 함량, 스테비아 및 구연산 함량, 그리고 유당의 함량을 1.0:0.01:2.0을 기준으로 다양하게 비율을 조절하였다.
또한 약용식물의 특유 냄새를 억제하기 위하여 향미를 소량 첨가하여 과립차를 제조하였다.
제조된 과립차에 사용된 추출물의 혼합 비율(중량비)은 아래 <표 1>에 기재하였다.
과립차 추출물 혼합 비율
시료명 명월초 야콘잎 오가피 개똥쑥 감국 갈근 울금
GT11 2 2 1 1 - - -
GT12 1 1 2 2 - - -
GT21 2 - - - 2 1 1
GT22 1 - - - 1 2 2
<제조예 3> 환 제조
환의 형태의 제품을 제조하기 위하여 돼지감자(뿌리), 율무(열매), 갈근(뿌리), 울금(뿌리), 명월초(잎) 또는 야콘(잎)을 시료로 사용하였다. 해당 시료들은 초미립분쇄기를 이용하여 미립화하였으며 다양한 비율로 혼합하여 혼합차 또는 선식용 제품으로 개발하였다. 실험에 사용된 시료의 혼합 비율(중량비)은 아래의 <표 2>에 기재하였다. 또한 환 형태로 제조하기 위하여 전분을 부형제로 사용하였으며, 환제조기(미광, 제환기)를 사용하였다.
환 제조의 혼합 비율
시료명 돼지감자 율무 갈근 울금 명월초 야콘잎
PD1 5 5 1 1 - -
PD2 5 5 - - 1 1
<실험예> 항당뇨 활성 확인
<실험예 1> 당뇨병 동물 실험
<실험예 1-1> 당뇨병 동물 모델
당뇨병을 유발된 비만쥐를 이용하여 상기 <실시예 1> 및 <실시예 2>에서 확보한 시료의 항당뇨 활성을 확인하였다. 모든 동물실험과정은 동신대학교 동물실험윤리위원회의 권고에 따라 수행(DSU-2014-017)하였다.
고지방 고탄수화물 식이 비만형 제2형 당뇨병 유발 동물은 만들기 위해 특별한 사료(Surwit's high fat, high sucrose diet(HFD), Research Diets, D12331)를 주문하여 사용하였다. 사료의 성분조성은 <표 3>에 제시되었다. 체중이 16g정도의 5주령 수컷, db/db mice(중앙실험동물, Korea)를 구매하여 40-60%의 습도를 유지하고 stainless-steel cage에서 1주일간 사육하며 적응기를 거쳤다. 그 후에 고지방 고탄수화물 사료를 급여하여 비만형 당뇨병을 증가시켜 실험에 사용하였다.
Figure 112017001386606-pat00007
항당뇨 효과를 확인하기 위하여 당뇨가 유발된 db/db mice를 10마리씩 이용하여 control군(대조군), 메트포르민(metformin) 처리군(양성 대조군) 및 시료 처리군으로 나누어 실험하였다. 파우더형태의 고지방 고탄수화물 사료에 매트포르민 또는 시료(제조된 형태 그대로의 시료)를 첨가하고 기계로 반죽한 후 지름 1.0 cm 크기의 사료를 만든 후 8주간 실험동물이 섭취하도록 유도하였다. 케이지내 물은 항상 충분히 섭취하도록 하였다.
<실험예 1-2> 체중 측정
db/db mice의 체중은 본 실험 실시 전에 측정하였고 차후 매주 1회씩 측정하였다. 무게 측정시 마우스가 움직이지 못하게 제한된 공간에 가두어 정확하게 체중을 측정하였다.
<실험예 1-3> 경구포도당부하검사(OGTT, Oral Glucose Tolerance Test)
정해진 당을 복용한 후 시간 경과에 따른 당 처리 능력을 확인하기 위한 OGTT 검사를 수행하였다. 실험동물을 금식시킨 후 공복 시 혈당을 측정하였으며 포도당(1g/kg body weight)을 증류수에 녹여 경구 투여한 다음 30분, 60분, 90분, 120분, 180분 후 실험동물의 혈액을 채취하여 혈당을 측정(Accu-chek)하였다.
<실험예 1-4> 통계 분석
모든 데이터는 통계 프로그램인 CoStat software(CoHort Software, Monterey, USA)를 사용하여 변이들을 분석하였으며, 모든 실험은 5번 반복하여 수행하였다. 각 처리 및 시료군에 대한 유의차 검정은 분산분석을 실시한 후 p<0.05 수준에서 최소유의차 검정[least significant difference(LSD)]을 실시하였다. 표(Table)와 그림(Figure)에서 각각의 수치는 평균 ± 표준에러(mean±S.D, S.E.)로 표시하였다.
<실혐예 2> 항당뇨 실험 결과
<실험예 2-1> 분리 화합물의 혈당 강하 효과
감국 및 명월초에서 분리한 플라보노이드의 혈당강화 효과를 당뇨 모델쥐(db/db 마우스)의 경구포도당부하검사를 통하여 확인하였다.
감국에서 분리된 susquiterpene계 화합물1 및 화합물 2와 명월초에서 분리된 플라보노이드 물질(화합물 3)을 각각 5mg, 20mg의 농도로 db/db 마우스에 사료와 함께 투여하였으며 OGTT 실험을 수행한 결과를 <도 1>에 나타내었다.
<도 18>에서 확인되는 바와 같이, 화합물 1(3,8-hydroxy-10-guaien-12,6-olide)은 포도당 투여 후 30분후에 시료 무처리구에 비하여 14%정도 낮은 혈당강하 능력을 발휘하였으며, 60분후에는 28.7%정도의 혈액내 혈당을 분해하였다. 또한 화합물 2(tulirinol)는 포도당처리 후 30분에서 11%, 60분에서는 25%정도의 혈당 강하 효과를 나타내었다.
또한 명월초에서 분리한 화합물 3(etrahydro-6-hydroxy-4,4,8-trimethyl-benzofuranone)은 대조군에 비하여 5-10% 의 혈당강하 효과를 나타내었다.
이처럼, 감국에서 분리한 2개의 화합물과 명월초에서 분리한 1개가 화합물 모두에서 혈당강하 효과가 입증되었다.
<실험예 2-2> 잎차의 혈당 강하 효과
상기 <제조예 1>에 따라 제조한 개똥쑥, 오가피, 명월초, 작두콩 또는 야콘 잎차의 혈당 강하 효과를 db/db 마우스의 경구포도당부하검사를 통하여 확인하였으며 그 결과를 <도 19>에 나타내었다.
약용식물의 어린잎을 채취하고 유산균과 황국균의 균주 팩를 넣어 짧은 시간안에 발효를 효과적으로 수행하였으며, 이후 발효된 숙성잎차를 열수 추출하여 비만 당뇨질환 db/db 마우스에 사료와 함께 투여하고 혈액내 혈당을 시간에 따라 조사하였다. 실험에 사용된 잎차의 양은 10 mg이었으며 양성 대조군으로는 경구용 당뇨병 치료제인 메트포르민 투여군(20mg/kg)을 사용하였다. 모든 실험은 5회 반복 수행되었다.
<도 19>에 보이듯이, 발효잎차와 일반 잎차(열수 추출물)의 효과를 확인하였을 때, 대조군에 비하여 10% 내지 50% 가량의 혈당 강하 효과가 확인되었으며 특히 발효한 경우 일반잎차보다 효과가 5-15%정도 더 우수하게 나타났다. 특히 명월초의 발효잎차와 오가피 발효잎차는 양성대조군으로 사용한 매트포르민과 대등한 효능을 지니고 있음을 확인할 수 있었다.
<실험예 2-3> 과립차의 혈당 강하 효과
상기 <제조예 2>에 따라 제조한 과립차 형태의 GT11, GT12, GT21 및 GT22 시료의 혈당 강하 효과를 경구포도당부하검사를 통하여 확인하였으며 <도 20>에 나타내었다.
과립차를 제조하기 위하여 추출물의 함량, 스테비아 및 구연산 함량, 그리고 유당의 함량을 1.0:0.01:2.0을 기준으로 조절하였으며 약용식물 추출물을 다양한 비율로 혼합하였다. 경구포도당부하검사를 수행한 결과, GT11처리구가 양성대조구인 매트포르민과 유사한 패턴을 보여 명월초, 야콘, 오가피 및 개똥쑥이 2 : 2 : 1 :1의 비율로 혼합된 조합이 효과가 가장 좋은 것으로 확인되었다. GT11은 30분대에서 당뇨병 유발쥐보다 35%정도 더 혈액내 혈당을 분해하는 것으로 조사되었고, 60분대에서도 34%대의 혈당강하능력을 발휘하였다. 대부분의 결과에서 당뇨에 좋은 명월초를 기본으로 하고 다른 약용식물을 조합한 것이 효과가 매우 큰 것으로 확인되었다.
<실험예 2-3> 환 형태 제품의 혈당 강하 효과
상기 <제조예 3>에 따라 제조한 선식 또는 환 형태의 PD1과 PD2 시료의 항당뇨 효과를 확인하기 위하여 비만 당뇨병 유발쥐의 체중 감소 효과와 혈당 강하 효과를 확인하였다.
PD1은 돼지감자, 율무, 갈근 및 울금을 5:5:1:1의 비율로 혼합하여 제조하였으며, PD2는 돼지감자, 율무, 명월초 및 아콘을 5:5:1:1을 비율로 혼합하여 제조하였다. ICR 마우스를 10마리씩 그룹지어 고지방 고탄수화물 사료에 PD1 또는 PD2를 5%비율로 혼합하여 8주간 급여하였다. 양성 대조군으로는 매트포르민을 0.5%의 비율로 혼합한 고지방 고탄수화물 사료를 이용하였다. 매주 마우스의 무게를 측정하여 비만정도 등을 조사한 결과, PD1 또는 PD2를 처리한 경우 당뇨병 유발 비만형 쥐(대조군)에 비하여 체중이 감소하였으며 8주차에서는 PD1과 PD2에서 약 10%이상 감소하였다. 해당 결과는 <표 4>에 나타내었다.
PD1와 PD2의 처리간에는 5.3%의 차이가 있었으나 통계적 차이는 없는 것으로 조사되었다. 그러나 평균 결과값은 PD2가 양성 대조군 보다도 낮은 것으로 나타나 우수한 효과를 지님을 확인하였다.
고지방 고탄수화물 식이 체중변화 결과(총 8주)
처리군 Body weight(g/week/head)
0 1 2 3 4 5 6 7 8 합계
대조군 10.9 19.0 23.5 26.5 31.1 33.1 36.7 39.2 45.5 265.5
양성
대조군		 11.9 20.1 24.1 27.2 30.0 32.7 35.0 36.9 39.5 257.4
PD1 12.1 16.2 22.8 26.8 29.7 31.1 38.6 40.3 41.4 259.0
PD2 11.0 18.4 22.0 24.1 27.6 31.4 36.2 36.8 37.7 245.2
고지방 고탄수화물로 유도된 ICR 당뇨 마우스의 혈액을 매주 1회 8주간 꼬리정맥에서 채취하여 test machine 측정 키트를 이용하여 혈당을 측정하였다. 고지방 고탄수화물을 섭취한 대조군(control)에서 기존 정상 마우스(normal군)보다 2주 이상에서 혈당이 급속도로 상승하여 인슐린에 문제가 생기기 시작하였다. 정상군과 0.5% 매트포르민을 처리한 처리군에서는 혈당이 유사한 수준으로 유지되었다. PD1과 PD2를 처리한 당뇨 유발쥐는 대조군에 비하여 8주째에 18 내지 24%정도 당함량이 낮았으며 이에 따라 PD1과 PD2의 우수한 혈당 강하 효과를 확인하였다<도 21>.

Claims (3)

  1. 아래의 <화학식 2>의 화합물을 유효성분으로 포함하는 항당뇨 조성물:
    <화학식 2>
    Figure 112018084656990-pat00029

  2. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 항당뇨 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는 항당뇨 조성물.


KR1020170001709A 2017-01-05 2017-01-05 명월초에서 분리한 화합물 등을 이용한 항당뇨 조성물 KR101926075B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020170001709A KR101926075B1 (ko) 2017-01-05 2017-01-05 명월초에서 분리한 화합물 등을 이용한 항당뇨 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020170001709A KR101926075B1 (ko) 2017-01-05 2017-01-05 명월초에서 분리한 화합물 등을 이용한 항당뇨 조성물

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020180012782A Division KR20180081012A (ko) 2018-02-01 2018-02-01 명월초에서 분리한 화합물 등을 이용한 항당뇨 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20180080770A KR20180080770A (ko) 2018-07-13
KR101926075B1 true KR101926075B1 (ko) 2018-12-06

Family

ID=62913621

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020170001709A KR101926075B1 (ko) 2017-01-05 2017-01-05 명월초에서 분리한 화합물 등을 이용한 항당뇨 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101926075B1 (ko)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102096090B1 (ko) 2018-07-11 2020-04-01 현대모비스 주식회사 차량의 제동 장치

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011085979A1 (en) * 2010-01-14 2011-07-21 Intermed Discovery Gmbh Use of tricyclic sesquiterpene lactones in the treatment of obesity and related diseases and non-therapeutic treatable conditions

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20120004658A (ko) * 2010-07-07 2012-01-13 순천대학교 산학협력단 야콘 잎 발효차의 추출물을 함유하는 제2형 당뇨병 예방 또는 치료용 조성물
KR20140096437A (ko) * 2013-01-25 2014-08-06 강원대학교산학협력단 당대사 관련 효소의 활성을 촉진하는 명월초 물 추출물

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011085979A1 (en) * 2010-01-14 2011-07-21 Intermed Discovery Gmbh Use of tricyclic sesquiterpene lactones in the treatment of obesity and related diseases and non-therapeutic treatable conditions

Also Published As

Publication number Publication date
KR20180080770A (ko) 2018-07-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101615199B1 (ko) 숙취해소 및 간 보호기능 개선용 건강기능성 조성물, 이를 포함하는 건강기능성 식품 및 식품첨가제
KR20150120880A (ko) 피스타시아 웨인마니폴리아 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 화합물을 포함하는 만성폐쇄성 폐질환(copd) 예방 또는 치료용 약학적 조성물
KR101413132B1 (ko) 항산화 고활성 수수
KR101162761B1 (ko) 비만 예방 또는 치료용 조성물
KR101976941B1 (ko) 토종 보리수 추출물을 포함하는 당뇨병 예방 및 치료용 조성물
KR102036962B1 (ko) 감태 추출물 등을 이용한 항당뇨 조성물
KR101926075B1 (ko) 명월초에서 분리한 화합물 등을 이용한 항당뇨 조성물
KR102254572B1 (ko) 향유 추출물을 이용한 만성폐쇄성폐질환 개선용 조성물
KR100504351B1 (ko) 식물 추출물을 함유하는 숙취해소용 식품 조성물
KR20170024877A (ko) 발효 숙성 야콘 잎차 추출물을 이용한 혈당 강하용 조성물
KR102531295B1 (ko) 곤드레 착즙액을 포함하는 면역기능 증진용 식품 조성물의 제조방법 및 이에 따른 면역기능 증진용 식품 조성물
US5344648A (en) Central nervous system activator and taste enhancing food additive
KR20230036758A (ko) 수면유도 및 불면증 치료용 효소처리 초고압 혼합추출물
KR20180081012A (ko) 명월초에서 분리한 화합물 등을 이용한 항당뇨 조성물
KR102273066B1 (ko) 나한송 추출물을 이용한 만성폐쇄성폐질환 개선용 조성물
KR101651924B1 (ko) 배암차즈기 잎 추출물 및 발효 삼채 뿌리의 추출물을 포함하는 천식 치료용조성물
KR102151003B1 (ko) 숙성새싹삼 추출물의 발효물을 유효성분으로 포함하는 숙취해소용 조성물
KR101350826B1 (ko) 센티페드그라스 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 및 치료용 조성물
EP3838282A1 (en) Composition for alleviating asthma or chronic obstructive pulmonary disease by using epilobium pyrricholophum extract and like
KR20150083327A (ko) 화살나무 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 천식의 예방 또는 치료용 조성물
KR101935200B1 (ko) 패에서 분리한 신규 화합물 헥사데카플로레톨 및 그 화합물을 이용한 항당뇨 조성물
KR20140083493A (ko) 참모자반 추출물 또는 괭생이모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 조성물
KR101696342B1 (ko) 항당뇨 조성물
KR102171987B1 (ko) 나도하수오 추출물을 이용한 항알러지 개선용 조성물
KR102256880B1 (ko) 갯대추나무 추출물을 이용한 호흡기 질환 개선용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
A107 Divisional application of patent
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right