KR101924315B1 - 송이버섯 균사체 배양용 배지 및 그의 제조방법 - Google Patents

송이버섯 균사체 배양용 배지 및 그의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 송이버섯 균사체 배양용 배지 및 그의 제조방법에 관한 것으로, 상세하게는 소나무 열수 추출물, 전분, 대두분 및 황산 마그네슘을 포함하는 송이버섯 균사체 배양용 배지에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 상기 송이버섯 균사체 배양용 배지에 고체배지에서 배양된 송이버섯의 포자를 접종하여 배양하면 송이버섯 균사체를 대량으로 생산할 수 있을 뿐 아니라, 송이버섯 균사체에서 생리활성물질을 대량 생산하여 건강기능식품, 의약품, 화장품 등의 기능성 제품개발에 유용하게 이용될 수 있다.

Description

송이버섯 균사체 배양용 배지 및 그의 제조방법 {Medium for culturing pine mushroom mycelium and method for manufacturing thereof}
본 발명은 송이버섯 균사체 배양용 배지 및 그의 제조방법에 관한 것으로, 상세하게는 소나무 열수 추출물, 전분, 대두분 및 황산 마그네슘을 포함하는 송이버섯 균사체 배양용 배지에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 상기 송이버섯 균사체 배양용 배지에 고체배지에서 배양된 송이버섯의 포자를 접종하여 배양하면 송이버섯 균사체를 대량으로 생산할 수 있을 뿐 아니라, 송이버섯 균사체에서 생리활성물질을 대량 생산하여 건강기능식품, 의약품, 화장품 등의 기능성 제품개발에 유용하게 이용될 수 있다.
최근 고령화 인구 증가 추세에 따른 현대인의 건강에 대한 관심이 증대하면서 기능성 식품과 천연물에 대한 관심이 높아지고 있다. 이에 따라, 항산화, 항암, 면역력 강화 등 천연물의 기능성과 천연물의 생리활성 효과에 대한 연구가 많이 수행되고 있으며, 특히, 질병의 치료 및 예방에 효과가 있는 천연물로 버섯이 주목받고 있다. 그 중에서도 송이버섯은 항암활성 및 면역강화, 콜레스테롤 억제 등의 다양한 생리활성이 있어, 기능성 식품 및 의약품 소재로 크게 주목받고 있다.
송이버섯(Pine mushroom, Tricholoma matsutake)은 담자균에 속한 버섯으로, 영양성분을 살펴보면 식용버섯 중에는 수분 함량이 88.5%로 적은 편이며, 단백질 2.4%, 지방 0.8%, 탄수화물 6.7%, 섬유질 0.8% 및 무기질 0.8%가 포함되어 있으며, 비타민 D1의 전구체인 에르고스테롤, 비타민 B2, 니아신도 많이 포함되어 있다.
송이버섯의 생태를 살펴보면, 주로 소나무, 솔송나무, 가문비나무 등 침엽수 군락주변에서 채집된다고 알려져 있고, 우리나라에서는 소나무 군락에서 채집되고 있다. 송이버섯은 포자를 이용하여 번식하는데, 소나무 근처에서 발아된 송이의 포자가 균사를 형성한 후 소나무의 잔뿌리에 착생하면, 균사가 착생된 소나무의 잔뿌리는 백색 또는 담황색에서 흑갈색으로 변하면서 균근을 형성하게 된다. 형성된 균근은 땅속에서 생육 번식하면서 백색의 뜸(소집단)을 형성하며 고리 모양으로 둥글게 퍼져 나가는데, 이를 균환이라 한다. 균환이 형성된 땅속 온도가 5~7일간, 19℃ 이하로 지속되면, 균사로부터 자실체인 송이버섯의 원기가 형성되어 땅위로 성장하게 되고, 성장이 종료되면 원기는 송이버섯이 된다. 이때, 송이버섯의 포자로부터 형성된 균사는 생육에 필요한 영양성분을 소나무의 뿌리로부터 공급받음과 동시에 토양으로부터 각종 무기물을 흡수하고 이를 소나무 뿌리로 전달한다.
즉, 송이버섯의 인공재배를 하기 위해서는 송이균근의 형성, 균환의 형성, 송이버섯의 원기 형성, 원기의 생장 등 전 과정을 고려하여야 하고, 숙주가 되는 소나무, 토양환경 및 기후 조건도 함께 고려되어야 한다.
우리나라에서 송이버섯의 인공재배와 증수에 관한 연구는 1970년대를 시작으로 현재까지 이루어지고 있다. 송이버섯의 재배에 관한 연구의 일 예로, 대한민국 등록특허 제10-0390048호가 있는데, 이는 송이균주와 소나무 무균 발아묘목의 공동배양에 의한 소나무 송이균 감염묘목 형성방법에 관한 것으로, 송이버섯의 자실체에서 분리된 송이균주에 펄라이트, 스페그넘 피트모스의 혼합 상토와 K-액상배지를 가하고, 소나무 종자를 무균 발아시켜 얻은 무균 발아묘목을 상기 혼합 상토에 치상한 다음, 상기 송이균주와 공동 배양하여 송이균근이 형성된 소나무 묘목을 수득하는 단계를 포함하는 소나무 송이균 감염묘 형성방법 및 상기 방법으로 수득한 송이균근이 형성된 소나무 묘목을 재배하여 송이버섯을 생산하는 방법이 개시되어 있다.
다른 일 예로, 대한민국 등록특허 제10-1169751호가 있는데, 이는 송이 균사체를 고체매질에서 배양하여 균사체를 생산하는 방법에 관한 것으로, 송이의 균사체를 인공으로 조성된 고체매질에서 배양하여 송이 균사체를 대량으로 생산하는 방법을 개시하고 있다.
그러나, 송이균근이 형성된 소나무 묘목을 재배하더라도 송이균근이 송이버섯으로 자랄 확률이 낮고, 송이 균사체를 대량생산하여 소나무에 접종하더라도 균사체의 균환 형성율이 낮다는 문제점이 있다.
일반적으로 송이버섯을 인공재배하기 위해서는 씨앗에 해당하는 송이버섯의 2차 균사인 균사체가 사용된다. 종래의 연구 보고에 따르면 송이버섯 균사체에는 자실체처럼 다양한 생리활성물질이 포함되어 있어 유용한 물질 생산의 가능성이 알려져 있다. 최근에는 이러한 송이버섯 균사체를 송이버섯의 대체상품으로 이용하려는 추세이나, 송이버섯의 시장규모에 비해 균사체 및 생리활성물질의 대량생산을 위한 액체배양기술에 대한 연구는 저조한 실정이다.
이에, 본 발명은 송이버섯 균사체의 생산성을 향상시키기 위해, 고체배지에서 배양된 송이버섯 포자를 접종하여 송이버섯 균사체로 배양하는 송이버섯 균사체 배양용 배지를 제공하는데 목적이 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 소나무 열수 추출물, 전분, 대두분 및 황산 마그네슘을 포함하는 송이버섯 균사체 배양용 배지를 제공한다.
또한, 본 발명은 송이버섯 균사체 배양용 배지의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 송이버섯 균사체 배양용 배지를 이용하면, 송이버섯 균사체의 배양 및 생육이 향상되어 송이버섯 균사체를 대량으로 수득할 수 있다.
이하, 본 발명에 대해 상세하게 설명하고자 한다.
본 발명은 소나무 열수 추출물, 전분, 대두분 및 황산 마그네슘을 포함하는 송이버섯 균사체 배양용 배지를 제공한다.
상기 송이버섯 균사체 배양용 배지는 소나무 열수 추출물, 전분, 대두분 및 황산 마그네슘을 포함하며, 보다 상세하게는 송이버섯 균사체 배양용 배지 총 중량대비 소나무 열수 추출물 0.2 내지 1 중량%, 전분 0.2 내지 4 중량%, 대두분 0.3 내지 2 중량%, 황산 마그네슘 0.05 내지 0.1 중량% 및 잔량으로서 음용수를 포함하는 것이 바람직하다.
상기 소나무 열수 추출물은 소나무 목재 분말을 음용수에 혼합하여 열수 추출한 것이 바람직하다. 상세하게는 소나무 목재 분말과 음용수를 1 : 4 ~ 6의 중량비로 혼합하여 90 내지 100 ℃에서 20 내지 60분 동안 열수 추출한 후, 200 내지 400메쉬의 필터로 부유물을 여과하여 제조하는 것이 바람직하다.
상기 소나무 열수 추출물에 있어서, 소나무 목재 분말 대비 음용수의 중량비가 4 중량비 미만이면, 소나무 목재 분말이 상대적으로 많아 소나무 목재 분말과 음용수의 혼합물이 충분히 가열되지 않고, 소나무 목재 분말 대비 음용수의 중량비가 6 중량비 초과이면, 음용수가 상대적으로 많아 소나무 목재 분말과 음용수의 혼합물을 가열하는데 소요되는 시간이 길어져, 추출의 효율이 떨어진다.
상기 송이버섯 균사체 배양용 배지 및 소나무 열수 추출물에 포함되는 음용수는 상수 또는 필터로 여과된 지하수를 사용하는 것이 바람직하다.
상기 전분은 본 발명의 배양용 배지의 탄소원으로 사용한 것으로, 탄소원은 균류의 생장에서 에너지원 및 세포의 구성요소로 사용된다. 상기 전분의 함량이 송이버섯 균사체 배양용 배지 총 중량대비 0.2 중량% 미만이면, 탄소원의 부족으로 균사체의 생육이 원활하지 못하게 되고, 4 중량% 초과이면, 과다 영양원으로 인한 균사체의 생육 저하가 발생한다.
상기 대두분은 본 발명의 배양용 배지의 질소원으로 사용한 것으로, 질소원은 균류의 생장에서 각종 아미노산이나 효소 등을 합성하는데 필수 성분이다. 상기 대두분의 함량이 송이버섯 균사체 배양용 배지 총 중량대비 0.3 중량% 미만이면, 질소원이 부족하여 송이버섯을 구성하는 단백질의 합성이 저해되어 송이버섯 균사체의 생육이 저해되고, 2 중량% 초과이면, 대두분의 함량 증가에 따른 송이버섯 균사체의 생육이 증대되는 정도가 미미하다.
상기 황산 마그네슘은 본 발명의 배양용 배지의 무기염류로 사용한 것으로, 무기염류는 균류의 생장에서 균체의 구성성분으로 이용되며, 배지의 pH 및 삼투압을 조절한다. 상기 황산 마그네슘의 함량이 송이버섯 균사체 배양용 배지 총 중량대비 0.05 중량% 미만이면, 균사의 대사에 이상이 생겨 송이버섯 균사체의 생장이 불리해지고, 0.1 중량% 초과이면, 배양용 배지의 pH가 낮아져 송이버섯 균사체의 생장이 저해된다.
상기 송이버섯 균사체 배양용 배지의 pH는 5 ~ 7로 유지하는 것이 바람직하다. 상기 송이버섯 균사체 배양용 배지의 pH가 5 미만이거나, 7 초과이면 송이버섯 균사체의 생장이 저해된다.
본 발명은 소나무 열수 추출물, 전분, 대두분 및 황산 마그네슘을 포함하는 송이버섯 균사체 배양용 배지의 제조방법을 제공한다.
상기 송이버섯 균사체 배양용 배지의 제조방법은 (a) 소나무 목재 분말을 음용수에 혼합한 후 90 내지 100 ℃에서 20 내지 60분 동안 추출하여 열수 혼합물을 제조하는 단계; (b) 상기 (a)단계의 열수 혼합물을 200 내지 400 메쉬의 필터로 부유물을 제거하여 소나무 열수 추출물을 제조하는 단계; 및 (c) 상기 (b)단계의 소나무 열수 추출물에 전분, 대두분, 황산 마그네슘 및 음용수를 혼합한 후 100 내지 130℃에서 30 내지 90분 동안 멸균하는 단계(c)를 포함한다.
상기 (a)단계에서 추출온도는 90 내지 100 ℃인 것이 바람직하다. 추출 온도가 90℃ 미만이면, 충분히 가열되지 않아 소나무 목재 분말에서 송이버섯 균사체의 배양에 필요한 소나무의 유효성분이 추출되지 않으며, 추출 온도가 100℃ 초과이면, 음용수가 증발되어 음용수를 추가로 투입하게 되는 한계가 있다.
상기 (b)단계에서 부유물을 여과하는 필터의 구멍 크기는 200 내지 400 메쉬인 것이 바람직하다. 필터의 구멍 크기가 200 메쉬 미만이면, 부유물이 충분히 제거되지 않아 송이버섯 균사체 배양용 배지를 오염시키며, 필터의 구멍 크기가 400 메쉬 초과이면, 부유물이 필터의 구멍을 막아 열수 혼합물의 여과가 중단되는 문제가 발생한다.
상기 (c)단계에서 멸균 온도는 100 내지 130℃이고, 멸균 시간은 30 내지 90분인 것이 바람직하다. 멸균 온도가 100℃ 미만이거나, 멸균시간이 30분 미만이면, 송이버섯 균사체 배양용 배지에 미생물이 잔존하여 송이버섯 균사체의 배양을 저해하고, 멸균 온도가 130℃ 초과이거나, 멸균시간이 90분 초과이면, 온도 및 시간의 증가에 따른 멸균되는 정도가 크게 증대되지 않는다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
< 제조예 1> 소나무 열수 추출물의 제조
음용수와 소나무 목재 분말을 5 : 1 의 중량비로 혼합한 후, 95℃에서 40분 동안 추출하여 열수 혼합물을 제조한 후, 상기 열수 혼합물을 300메쉬의 필터로 여과하여 부유물을 제거한 후, 소나무 열수 추출물의 제조를 완성하였다.
< 제조예 2> 균주의 분리 및 원균의 준비
자연산 송이버섯을 세척한 후 20분간 건조시킨 다음, 무균상자 내에서 송이버섯의 갓의 주름부위를 잘라 PDA 고체배지(감자 추출물 200g/L, 덱스트로스 20g/L, 한천 20g/L, pH 5.0)에 이식하여 25℃의 항온배양기에서 3주간 배양한 다음, 배양된 송이버섯의 포자를 4℃에서 보존하였다. 배양된 송이버섯의 포자를 본 발명의 원균으로 사용하였다.
< 실시예 1 내지 15> 기본 배지의 제조
송이버섯 균사체의 생육을 위한 최적의 전분, 대두분 및 황산 마그네슘의 함량을 조사하기 위해, 하기 표 1의 조성에 따라, 전분, 대두분, 황산 마그네슘 및 음용수를 혼합한 후, 120℃에서 60분 동안 멸균하여 기본 배지를 제조하였다.
성분( 중량% ) 실시예 1 실시예 2 실시예 3 실시예 4 실시예 5
전분 0.1 0.2 2 4 5
대두분 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3
황산 마그네슘 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05
음용수 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량
성분( 중량% ) 실시예 6 실시예 7 실시예 8 실시예 9 실시예 10
전분 2 2 2 2 2
대두분 0.2 0.3 1 2 3
황산 마그네슘 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05
음용수 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량
성분( 중량% ) 실시예 11 실시예 12 실시예 13 실시예 14 실시예 15
전분 2 2 2 2 2
대두분 1 1 1 1 1
황산 마그네슘 0.03 0.05 0.07 0.1 0.13
음용수 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량
< 실시예 16 내지 30> 기본 배지를 이용한 송이버섯 균사체의 배양
상기 실시예 1 내지 15에서 제조한 기본 배지에 제조예 2에서 수득한 원균을 0.4 ㎠ 크기로 절단하여 접종하고, 21 내지 24 ℃의 온도에서 25일간 배양하여, 실시예 16 내지 30의 송이버섯 균사체 배양액을 수득하였다.
배양 조건
실시예 16 실시예 1의 기본 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 17 실시예 2의 기본 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 18 실시예 3의 기본 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 19 실시예 4의 기본 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 20 실시예 5의 기본 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 21 실시예 6의 기본 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 22 실시예 7의 기본 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 23 실시예 8의 기본 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 24 실시예 9의 기본 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 25 실시예 10의 기본 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 26 실시예 11의 기본 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 27 실시예 12의 기본 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 28 실시예 13의 기본 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 29 실시예 14의 기본 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 30 실시예 15의 기본 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
< 시험예 1> 기본 배지의 최적 함량
실시예 16 내지 30에서 수득한 송이버섯 균사체 배양액을 4500 내지 5000rpm 속도로 원심분리한 후, 송이버섯 균사체를 분리하여 수득하고, 건조기에서 12시간 동안 건조한 다음 무게를 측정하여, 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
실시예 16 실시예 17 실시예 18 실시예 19 실시예 20
균사체 중량(g/L) 0.31 1.23 1.59 1.55 0.82
실시예 21 실시예 22 실시예 23 실시예 24 실시예 25
균사체 중량(g/L) 0.84 2.60 3.02 2.89 1.84
실시예 26 실시예 27 실시예 28 실시예 29 실시예 30
균사체 중량(g/L) 0.87 2.99 3.11 2.94 0.92
실시예 16 내지 20을 비교해보면, 대두분과 황산 마그네슘의 함량을 고정한 상태에서 전분의 함량을 변화시킨 배지에서 송이버섯 균사체를 배양한 결과, 전분의 함량이 2 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 건조중량이 1.59 g/L로 가장 많음을 확인할 수 있었으며, 전분의 함량이 0.2 중량인 배지와 4 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 함량이 각각 1.23 g/L, 1.55 g/L로 송이버섯 균사체의 생육이 원활함을 알 수 있었으며, 전분의 함량이 0.1 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 건조중량이 가장 적은 것을 확인할 수 있었다.
실시예 16과 17을 비교해보면, 전분의 함량이 0.1 중량%인 배지보다 전분의 함량이 0.2 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 함량이 현저하게 상승하고, 실시예 19와 20을 비교해보면, 전분의 함량이 4 중량%인 배지보다 전분의 함량이 5 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 건조중량이 현저하게 줄어듬을 확인할 수 있었다.
따라서, 송이버섯 균사체 배양용 배지에 포함된 전분이 0.2 중량% 미만이면 탄소원의 부족으로 송이버섯 균사체의 생육이 저하되고, 4 중량% 초과이면 탄소원 과다로 인해 송이버섯 균사체의 생육이 저해됨을 알 수 있다.
실시예 21 내지 25를 비교해보면, 전분과 황산 마그네슘의 함량을 고정한 상태에서 대두분의 함량을 변화시킨 배지에 송이버섯 균사체를 배양한 결과, 대두분의 함량이 1 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 건조중량이 3.02 g/L로 가장 많음을 확인할 수 있었으며, 대두분의 함량이 0.3 중량%인 배지와 2 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 함량이 각각 2.60 g/L, 2.89 g/L로 송이버섯 균사체의 생육이 원활함을 알 수 있었으며, 대두분의 함량이 0.2 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 건조중량이 가장 적음을 확인할 수 있었다. 또한, 실시예 21과 22를 비교해보면, 대두분의 함량이 0.2 중량%인 배지보다 대두분의 함량이 0.3 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 함량이 현저하게 상승하고, 실시예 24와 25를 비교해보면, 대두분의 함량이 3 중량%인 배지는 대두분의 함량이 2 중량%인 배지보다 송이버섯 균사체의 건조중량이 현저하게 적음을 확인할 수 있었다.
따라서, 송이버섯 균사체 배양용 배지에 포함된 대두분이 0.3 중량% 미만이면, 질소원의 부족으로 송이버섯 균사체의 생육이 활발하지 못하고, 2 중량% 초과이면 질소원의 함량 증가에 따라 송이버섯 균사체의 생육이 증대되지 않음을 알 수 있다.
실시예 26 내지 30을 비교해보면, 전분과 대두분의 함량을 고정한 상태에서 대두분의 함량을 변화시킨 배지에 송이버섯 균사체를 배양한 결과, 황산 마그네슘의 함량이 0.07 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 건조중량이 3.11 g/L로 가장 많음을 확인할 수 있었다. 또한, 황산 마그네슘의 함량이 0.05 중량%인 배지와 0.1 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 건조중량이 각각 2.99 g/L, 2.94 g/L로 송이버섯 균사체의 생육이 원활함을 알 수 있었으며, 황산 마그네슘의 함량이 0.03 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 건조중량이 가장 적음을 확인할 수 있었다. 또한, 실시예 26과 27를 비교해보면, 황산 마그네슘의 함량이 0.03 중량%인 배지보다 황산 마그네슘의 함량이 0.05 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 중량이 현저하게 많음을 확인할 수 있었고, 실시예 29와 30을 비교해보면, 황산 마그네슘의 함량이 0.13 중량%인 배지는 0.1 중량%인 배지보다 배양된 송이버섯 균사체의 건조중량이 현저하게 적음을 확인할 수 있었다.
따라서, 송이버섯 균사체 배양용 배지에 포함된 황산 마그네슘이 0.05 중량% 미만이거나, 0.1 중량% 초과이면, 송이버섯 균사체의 생장이 저해됨을 알 수 있다.
또한, 각 성분별로 송이버섯 균사체의 배양에 가장 적합한 함량은 전분 2 중량%, 대두분 1 중량%, 황산 마그네슘 0.07 중량%임을 확인할 수 있었다.
< 실시예 31 내지 35> 송이버섯 균사체 배양용 배지의 제조
소나무 열수 추출물, 전분, 대두분, 황산 마그네슘 및 음용수를 혼합하여 120℃에서 60분 동안 멸균하여 송이버섯 균사체 배양용 배지를 제조하였다. 상기 전분, 대두분 및 황산 마그네슘의 함량은 상기 시험예 1에서 얻은 결과를 토대로, 전분 2 중량%, 대두분 1 중량% 및 황산 마그네슘 0.07 중량%로 구성하고, 소나무 열수 추출물의 함량을 달리하여 송이버섯 균사체 배양용 배지를 제조하였다.
성분( 중량% ) 실시예 31 실시예 32 실시예 33 실시예 34 실시예 35
소나무 열수 추출물 0.1 0.2 0.5 1 1.5
전분 2 2 2 2 2
대두분 1 1 1 1 1
황산 마그네슘 0.07 0.07 0.07 0.07 0.07
음용수 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량
< 실시예 36 내지 40> 송이버섯 균사체 배양용 배지를 이용한 송이버섯 균사체의 배양
상기 실시예 31 내지 35에서 제조한 송이버섯 균사체 배양용 배지에 제조예 2에서 수득한 원균을 0.4 ㎠ 크기로 절단하여 접종하고, 21 내지 24 ℃의 온도에서 25일간 배양하여, 실시예 36 내지 40의 송이버섯 균사체 배양액을 수득하였다.
배양 조건
실시예 36 실시예 31의 배양용 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 37 실시예 32의 배양용 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 38 실시예 33의 배양용 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 39 실시예 34의 배양용 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
실시예 40 실시예 35의 배양용 배지에 제조예 2의 원균을 접종하여 균사체 배양함.
< 시험예 2> 송이버섯 균사체의 생육 측정
실시예 36 내지 40에서 수득한 송이버섯 균사체 배양액을 4500 내지 5000rpm 속도로 원심분리하여 송이버섯 균사체를 분리 및 수득하고, 건조기에서 12시간 동안 건조한 후 무게를 측정하여, 그 결과를 하기 표 6에 나타내었다.
실시예 36 실시예 37 실시예 38 실시예 39 실시예 40
균사체 중량(g/L) 1.45 3.5 3.79 3.46 2.76
실시예 36 내지 40을 비교해보면, 전분, 대두분 및 황산 마그네슘의 함량을 고정한 상태에서 소나무 열수 추출물의 함량을 변화시킨 배지에 송이버섯 균사체를 배양한 결과, 소나무 열수 추출물의 함량이 0.5 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 건조중량이 가장 많음을 확인할 수 있었다. 또한, 소나무 열수 추출물의 함량이 0.2 중량%인 배지와 1 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 건조중량은 각각 3.5 g/L, 3.46 g/L를 나타났으며, 소나무 열수 추출물의 함량이 0.1 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 건조중량이 가장 적음을 확인할 수 있었다. 또한, 실시예 36과 37를 비교해보면, 소나무 열수 추출물의 함량이 0.1 중량%인 배지보다 0.2 중량%인 배지에서 배양된 송이버섯 균사체의 건조중량이 현저하게 증가함을 확인할 수 있었고, 실시예 39와 40을 비교해보면, 소나무 열수 추출물의 함량이 각각 1 중량%인 배지와 1.5 중량%인 배지에서 송이버섯 균사체가 배양이 되나, 소나무 열수 추출물의 함량이 1 중량%를 초과하면 소나무 열수 추출물 증가에 따른 송이버섯 균사체의 생육이 증대되지 않는 것을 확인할 수 있었다.
따라서, 소나무 열수 추출물의 함량이 0.2 중량% 미만이거나, 1 중량%를 초과하면, 송이버섯 균사체의 생육이 저해됨을 알 수 있다.

Claims (6)

  1. 소나무 열수 추출물 0.2 내지 1 중량%, 전분 0.2 내지 4 중량%, 대두분 0.3 내지 2 중량%, 배지의 pH 및 삼투압 조절을 위해 황산 마그네슘 0.05 내지 0.1 중량% 및 잔량으로서 상수 또는 필터로 여과된 지하수인 음용수를 포함하되, 상기 소나무 열수 추출물은 음용수와 소나무 목재 분말을 4 ~ 6 : 1 의 중량비로 혼합하여 열수 추출된 것을 특징으로 하는 송이버섯 균사체 배양용 배지.
  2. 삭제
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 송이버섯 균사체 배양용 배지의 pH는 5 ~ 7인 것을 특징으로 하는 송이버섯 균사체 배양용 배지.
  4. 삭제
  5. (a) 소나무 목재 분말을 상수 또는 필터로 여과된 지하수인 음용수에 혼합한 후 90 내지 100 ℃에서 20 내지 60분 동안 추출하여 열수 혼합물을 제조하는 단계;
    (b) 상기 (a)단계의 열수 혼합물을 200 내지 400 메쉬의 필터로 부유물을 제거하여 소나무 열수 추출물을 제조하는 단계; 및
    (c) 상기 (b)단계의 소나무 열수 추출물 0.2 내지 1 중량%, 전분 0.2 내지 4 중량%, 대두분 0.3 내지 2 중량%, 황산 마그네슘 0.05 내지 0.1 중량% 및 잔량으로서 음용수를 혼합한 후 100 내지 130 ℃에서 30 내지 90분 동안 멸균하는 단계를 포함하되, 송이버섯 균사체 배양용 배지의 pH는 5 ~ 7인 것을 특징으로 하는 송이버섯 균사체 배양용 배지의 제조방법.
  6. 삭제
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KR100420782B1 (ko) * 2001-11-23 2004-03-02 삼해상사주식회사 송이 버섯 균사체의 배양 방법
WO2004038009A1 (ja) 2002-10-25 2004-05-06 Kureha Chemical Industry Co., Ltd. マツタケ菌糸体の製造方法

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