KR101922266B1 - 선택적 글리코시다제 억제제 및 그의 용도 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 글리코시다제를 선택적으로 억제하는 화합물, 상기 화합물의 용도, 및 상기 화합물을 포함하는 제약 조성물, 및 O-GlcNAcase의 결핍 또는 과다발현 및/또는 O-GlcNAc의 축적 또는 결핍과 관련된 질환 및 장애의 치료 방법에 관한 것이다.
Description
본원은 글리코시다제를 선택적으로 억제하는 화합물 및 그의 용도에 관한 것이다.
광범위한 세포 단백질, 즉 핵 단백질 및 세포질 단백질 둘 다는 O-글리코시드 연결을 통해 부착되는 모노사카라이드 2-아세트아미도-2-데옥시-β-D-글루코피라노시드 (β-N-아세틸글루코사민)의 부가에 의해 번역후 변형된다.1 이 변형은 일반적으로 O-연결된 N-아세틸글루코사민 또는 O-GlcNAc로서 지칭된다. β-N-아세틸글루코사민 (GlcNAc)을 다수의 핵세포질 단백질의 특정한 세린 및 트레오닌 잔기에 번역후 연결하는 것을 담당하는 효소는 O-GlcNAc 트랜스퍼라제 (OGT)이다.2-5 O-GlcNAcase6,7로서 공지된 제2 효소는 이러한 번역후 변형을 제거하여 단백질을 유리시킴으로써, O-GlcNAc-변형을 단백질의 수명 동안 수회 발생하는 동적 순환으로 만든다.8
O-GlcNAc-변형된 단백질은 예를 들어 전사9 -12, 프로테아솜 분해13 및 세포 신호전달14을 비롯한 광범위한 중요한 세포 기능을 조절한다. O-GlcNAc는 또한 많은 구조 단백질에서 발견된다.15-17 예를 들어, 이것은 신경필라멘트 단백질18 ,19, 시냅신6 ,20, 시냅신-특이적 클라트린 어셈블리 단백질 AP-37 및 안키린G14를 비롯한 수많은 세포골격 단백질 상에서 발견된 바 있다. O-GlcNAc 변형은 뇌에서 풍부한 것으로 밝혀진 바 있다.21,22 이는 또한 알츠하이머병 (AD) 및 암을 비롯한 여러 질환의 병인과 명백히 관련이 있는 단백질 상에서도 발견된 바 있다.
예를 들어, AD 및 수많은 관련 타우병증, 예컨대 다운 증후군, 픽병, C형 니만-픽병 및 근위축성 측삭 경화증 (ALS)은 부분적으로 신경원섬유 엉킴 (NFT)의 발병을 특징으로 한다는 것이 잘 확립되어 있다. 이러한 NFT는 쌍을 이루는 나선형 필라멘트 (PHF)의 응집체이고, 세포골격 단백질 "타우"의 비정상적 형태로 구성되어 있다. 정상적으로, 타우는 뉴런 내에서 단백질 및 영양소의 분배에 필수적인 미세관의 주요한 세포 네트워크를 안정화시킨다. 그러나, AD 환자에서는, 타우가 과인산화되어, 그의 정상적인 기능을 방해하고, PHF를 형성하고, 궁극적으로 응집하여 NFT를 형성한다. 타우의 6가지 이소형이 인간 뇌에서 발견된다. AD 환자에서, 타우의 모든 6가지 이소형이 NFT에서 발견되고, 이들 모두는 명백하게 과인산화되어 있다.23,24 건강한 뇌 조직에서의 타우는 단지 2 또는 3개의 포스페이트 기를 보유하는 반면, AD 환자 뇌에서 발견된 것들은 평균 8개의 포스페이트 기를 보유한다.25,26 AD 환자 뇌에서의 NFT 수준 및 치매의 중증도 사이의 명백한 유사점은 AD에서의 타우 기능장애의 주요한 역할을 강력하게 지지한다.27,28 이러한 타우 과인산화의 정확한 원인은 이해하기 어려운 채로 남아있다. 따라서, a) 타우 과인산화의 분자 생리학적 기초를 확실하게 하는 것29; b) 알츠하이머병의 진행을 중단 또는 심지어 반전시킬 수 있을 것이라는 희망으로 타우 과인산화를 제한할 수 있는 전략을 확인하는 것30 -33에 대해 상당한 노력이 제공되고 있다. 매우 최근에 과인산화에 대한 대안적 기초가 제기되기는 하였지만21, 지금까지 여러 방식의 증거는 다수의 키나제의 상향조절이 타우의 과인산화에 관련될 수 있음21 ,34, 35을 시사한다.
특히, 최근에는 타우의 포스페이트 수준이 타우 상의 O-GlcNAc 수준에 의해 조절된다는 것이 밝혀졌다. 타우 상의 O-GlcNAc의 존재는 O-GlcNAc 수준을 타우 인산화 수준과 상호연관시키는 연구를 촉진하였다. 이 분야의 최근 관심은 O-GlcNAc 변형이 인산화되는 것으로도 공지되어 있는 아미노산 잔기에서 다수의 단백질 상에서 발생하는 것으로 밝혀졌다는 관찰에 기인한다.36-38 이러한 관찰과 일치하도록, 인산화 수준에서의 증가가 감소된 O-GlcNAc 수준을 야기하고, 반대로, 증가된 O-GlcNAc 수준이 감소된 인산화 수준과 상호연관된다는 것이 밝혀졌다.39 O-GlcNAc와 인산화 사이의 이러한 상호 관계는 "음양 가설"40로 명명되며, 효소 OGT4가 단백질로부터 포스페이트 기를 제거하는 작용을 하는 포스파타제와 기능적 복합체를 형성한다는 최근의 발견에 의해 강력한 생화학적 지지를 획득하였다.41 인산화와 같이, O-GlcNAc는 단백질의 수명 동안 수회 제거되고 복원될 수 있는 동적 변형이다. 시사하듯이, O-GlcNAcase를 코딩하는 유전자는 AD와 관련된 염색체좌에 맵핑되어 있다.7,42 인간 AD 뇌에 있는 과인산화 타우는 건강한 인간 뇌에서 발견되는 것보다 현저하게 더 낮은 수준의 O-GlcNAc를 갖는다.21 매우 최근에는, AD에 영향받은 인간 뇌로부터의 가용성 타우 단백질의 O-GlcNAc 수준이 건강한 뇌로부터의 것보다 현저하게 더 낮은 것으로 나타났다.21 추가로, 질환에 걸린 뇌로부터의 PHF는 어떠한 임의의 O-GlcNAc 변형도 완전히 결핍됨을 시사하였다.21 이러한 타우 저글리코실화의 분자 기초는 공지되지 않았지만, 이는 증가된 키나제 활성 및/또는 O-GlcNAc 프로세싱에 관련된 효소 중 하나의 기능장애에 기인할 수 있다. 이 후자의 관점을 지지하면서, 마우스로부터의 PC-12 뉴런 세포 및 뇌 조직 절편 둘 다에서, 비선택적 N-아세틸글루코사미니다제 억제제는 타우 O-GlcNAc 수준을 증가시키는데 사용되었고, 그 때문에 인산화 수준이 감소되었음이 관찰되었다.21 이러한 집합적 결과의 함축은, AD 환자에서 건강한 O-GlcNAc 수준을 유지함으로써, 예컨대 O-GlcNAcase의 작용을 억제함으로써 타우의 과인산화, 및 NFT의 형성 및 하류 효과를 비롯한 타우 과인산화의 모든 연관 효과를 차단할 수 있다는 것이다. 그러나, β-헥소사미니다제의 적절한 기능화가 중요하기 때문에, O-GlcNAcase의 작용을 차단하는, AD의 치료를 위한 임의의 잠재적 치료적 개입은 헥소사미니다제 A 및 B 둘 다의 동반 억제를 피해야만 할 것이다.
뉴런은 글루코스를 저장하지 않으며, 따라서 뇌는 그의 필수적 대사 기능을 유지하기 위해 혈액에 의해 공급되는 글루코스에 의존한다. 특히, 뇌 내에서는 글루코스 흡수 및 대사가 노화에 따라 감소하는 것으로 나타났다.43 AD 환자의 뇌 내에서는, 글루코스 활용에서의 현저한 감소가 발생하고, 이것이 신경변성의 잠재적 원인인 것으로 여겨진다.44 AD 뇌에서의 이러한 글루코스 공급 감소에 대한 기준45 -47은 글루코스 수송 감소48 ,49, 인슐린 신호전달 장애50 ,51 및 혈류 감소52 중 임의의 것에 기인하는 것으로 여겨진다.
이러한 당 대사 장애의 관점에서, 세포 내로 유입되는 모든 글루코스 중, 2-5%가 헥소사민 생합성 경로 내로 단락되어, 이에 따라 이 경로의 최종 생성물, 즉 우리딘 디포스페이트-N-아세틸글루코사민 (UDP-GlcNAc)의 세포내 농도를 조절한다는 것이 주목할 가치가 있다.53 UDP-GlcNAc는 핵세포질 효소 O-GlcNAc 트랜스퍼라제 (OGT)의 기질이고,2-5 이는 다수의 핵세포질 단백질의 특정한 세린 및 트레오닌 잔기에 GlcNAc를 번역후 부가하는 작용을 한다. OGT는 다수의 그의 기질54 ,55 및 결합 파트너41 , 56를 그의 테트라트리코펩티드 반복 (TPR) 도메인을 통해 인식한다.57,58 상기 기재된 바와 같이, O-GlcNAcase6 , 7는 이러한 번역후 변형을 제거하여 단백질을 유리시킴으로써, O-GlcNAc-변형을 단백질의 수명 동안 수회 발생하는 동적 순환으로 만든다.8 O-GlcNAc는 타우 및 신경필라멘트를 비롯한 공지된 인산화 부위10 ,37,38,59 상의 여러 단백질에서 발견된 바 있다.60 추가로, OGT는 비정상적 동역학적 거동이 이를 세포내 UDP-GlcNAc 기질 농도 및 이에 따른 글루코스 공급에 대해 정교하게 민감성이 되는 것으로 나타났다.41
헥소사민 생합성 경로의 공지된 특성, OGT의 효소적 특성, 및 O-GlcNAc와 인산화 사이의 상호 관계와 일치하도록, 뇌에서의 글루코스 유용성 감소가 타우 과인산화로 이어진다는 것이 밝혀졌다.44 따라서, 글루코스 수송 및 대사의 점진적 장애는, 그 원인이 무엇이든지 간에, 감소된 O-GlcNAc 및 타우 (및 다른 단백질)의 과인산화를 유도한다. 따라서, O-GlcNAcase의 억제는 건강한 개체 뿐만 아니라 AD 또는 관련 신경변성 질환을 앓는 환자의 뇌 내에서 글루코스 대사의 연령 관련 장애를 보완하여야 한다.
이러한 결과는 타우 O-GlcNAc 수준을 조절하는 메카니즘에서의 기능부전이 NFT의 형성 및 연관 신경변성에서 극도로 중요할 수 있음을 시사한다. 치료상 유용한 개입으로서의 타우 과인산화 차단에 대한 우수한 지지61는, 인간 타우를 보유하는 트랜스제닉 마우스가 키나제 억제제로 치료되는 경우에, 이들이 전형적인 운동 결함33을 발생시키지 않고, 또 다른 경우에,32 불용성 타우의 감소된 수준을 나타내는 것을 보여주는 최근의 연구로부터 유래된다. 이러한 연구는 이 질환의 뮤린 모델에서 타우 인산화 수준을 낮추는 것과 AD-유사 거동 증상을 완화하는 것 사이의 명백한 연관성을 제공한다. 사실상, 타우 과인산화의 약리학적 조절은 AD 및 다른 신경변성 장애를 치료하기 위한 유효한 치료 전략으로서 광범위하게 인지된다.62
최근 연구63는 AD 및 관련 타우병증의 치료를 위해 타우 과인산화를 제한하는 소분자 O-GlcNAcase 억제제의 치료 잠재력을 지지한다. 구체적으로, O-GlcNAcase 억제제 티아메트-G는 병리학상으로 적절한 부위에서, 배양된 PC-12 세포에서의 타우의 인산화 감소와 관련이 있다.63 게다가, 건강한 스프라그-돌리 래트에게의 티아메트-G의 경구 투여는 래트 피질 및 해마 둘 다에 있는 Thr231, Ser396 및 Ser422에서 타우의 감소된 인산화와 관련이 있다.63
증가된 수준의 O-GlcNAc 단백질 변형이 허혈, 출혈, 고혈량성 쇼크 및 칼슘 패러독스에 의해 야기되는 스트레스를 비롯한 심장 조직에서의 스트레스의 병원성 효과에 대한 보호를 제공한다는 것을 나타내는 대규모의 증거가 또한 존재한다. 예를 들어, 글루코사민의 투여에 의한 헥소사민 생합성 경로 (HBP)의 활성화는 허혈/재관류64 -70, 외상 출혈71 -73, 고혈량성 쇼크74 및 칼슘 패러독스64 ,75의 동물 모델에서 보호 효과를 발휘하는 것으로 입증되었다. 게다가, 강력한 증거는 이러한 심장보호 효과가 상승된 수준의 단백질 O-GlcNAc 변형에 의해 매개된다는 것을 나타낸다.64,65,67,70,72,75-78 또한, O-GlcNAc 변형이 파킨슨병 및 헌팅톤병을 비롯한 다양한 신경변성 질환에서 역할을 한다는 증거가 존재한다.79
인간은 당접합체로부터 말단 β-N-아세틸-글루코사민 잔기를 절단하는 효소를 코딩하는 3종의 유전자를 갖는다. 이들 중 첫번째는 효소 O-당단백질 2-아세트아미도-2-데옥시-β-D-글루코피라노시다제 (O-GlcNAcase)를 코딩한다. O-GlcNAcase는 원핵 병원체에서 인간까지 다양한 유기체로부터의 효소를 포함하는 글리코시드 히드롤라제 중 패밀리 84의 구성원이다 (글리코시드 히드롤라제에 대한 패밀리 분류에 대해서는, [Coutinho, P.M. & Henrissat, B. (1999) Carbohydrate-Active Enzymes server at URL: http://afmb.cnrs-mrs.fr/CAZY/] 참조).27,28 O-GlcNAcase는 번역후 변형된 단백질의 세린 및 트레오닌 잔기의 O-GlcNAc를 가수분해 제거하는 작용을 한다.1,6,7,80,81 많은 세포내 단백질 상에서의 O-GlcNAc의 존재와 일치하도록, 효소 O-GlcNAcase는 제II형 당뇨병14 ,82, AD16 ,21,83 및 암22 , 84을 비롯한 여러 질환의 병인에서 역할을 갖는 것으로 나타난다. O-GlcNAcase가 더 초기에 단리된 것으로 예상되었지만,18,19 약 20년이 경과한 후에야 단백질의 세린 및 트레오닌 잔기로부터 O-GlcNAc를 절단하는 작용을 하는 그의 생화학적 역할이 이해되었다.6 보다 최근에 O-GlcNAcase가 클로닝되고7, 부분적으로 특징규명되고20, 히스톤 아세틸트랜스퍼라제로서의 추가적 활성을 갖는 것20으로 제안되었다. 그러나, 이 효소의 촉매 메카니즘에 대해서는 거의 알려지지 않았다.
다른 2종의 유전자, HEXA 및 HEXB는 당접합체로부터 말단 β-N-아세틸글루코사민 잔기의 가수분해성 절단을 촉매하는 효소를 코딩한다. HEXA 및 HEXB의 유전자 산물은 각각 2종의 이량체 동종효소, 헥소사미니다제 A 및 헥소사미니다제 B를 우세하게 생산한다. 헥소사미니다제 A (αβ)인 이종이량체 동종효소는 α- 및 β-서브유닛으로 구성된다. 헥소사미니다제 B (ββ)인 동종이량체 동종효소는 2개의 β-서브유닛으로 구성된다. 2개의 서브유닛, α- 및 β-는 높은 수준의 서열 동일성을 보유한다. 이들 효소 둘 다는 글리코시드 히드롤라제의 패밀리 20의 구성원으로서 분류되고, 보통 리소솜 내에 국재화된다. 이러한 리소솜 β-헥소사미니다제의 적절한 기능화는 인간 발생에 대해 결정적이고, 이 사실은 각각 헥소사미니다제 A 및 헥소사미니다제 B의 기능장애에 기인하는 비극적 유전 질병, 테이-삭스병 및 샌드호프병에 의해 강조된다.85 이러한 효소 결핍은 리소솜에서의 당지질 및 당접합체 축적의 원인이 되어, 신경학적 손상 및 변형을 생성한다. 유기체 수준에서의 강글리오시드 축적의 유해 효과는 여전히 해결되지 않고 있다.86
이들 β-N-아세틸-글루코사미니다제의 생물학적 중요성의 결과로서, 글리코시다제의 소분자 억제제87 -90는 생물학적 과정 및 잠재적 치료 적응증의 발병에서 이들 효소의 역할을 명료하게 하기 위한 도구로서 둘 다 많은 주목91을 받고 있다. 소분자를 사용하는 글리코시다제 기능의 제어는 신속하게 용량을 변경하거나 또는 전적으로 치료를 중단시키는 능력을 비롯한, 유전적 녹아웃 연구에 대한 여러 이점을 제공한다.
그러나, O-GlcNAcase를 비롯한 포유동물 글리코시다제의 기능을 차단하는 억제제를 개발하는 것에서의 주요 도전은 고등 진핵생물의 조직에 존재하는 다수의 기능상 관련된 효소이다. 따라서, 한 특정한 효소의 세포 및 유기체 생리학적 역할의 연구에 있어서 비-선택적 억제제의 사용은 이러한 기능상 관련된 효소의 동반 억제로부터 복합적 표현형이 발생하기 때문에 복잡해진다. β-N-아세틸글루코사미니다제의 경우에, O-GlcNAcase 기능을 차단하는 작용을 하는 기존 화합물은 비-특이적이고, 리소솜 β-헥소사미니다제의 억제에 강력하게 작용한다.
세포 및 조직 둘 다 내에서 O-GlcNAc 번역후 변형의 연구에서 사용되어 온 β-N-아세틸글루코사미니다제의 몇몇 더 양호한 특징화된 억제제는 스트렙토조토신 (STZ), 2'-메틸-α-D-글루코피라노-[2,1-d]-Δ2'-티아졸린 (NAG-티아졸린) 및 O-(2-아세트아미도-2-데옥시-D-글루코피라노실리덴)아미노 N-페닐카르바메이트 (PUGNAc)이다.14,92-95
STZ는 이것이 β-섬 세포에 대해 특히 유해한 영향을 미치기 때문에 당뇨병유발 화합물로서 오랫동안 사용되어 왔다.96 STZ는 세포 DNA의 알킬화96 , 97 뿐만 아니라 산화질소를 비롯한 라디칼 종의 생성98 둘 다를 통해 그의 세포독성 효과를 발휘한다. 생성된 DNA 가닥 파손은, 세포 NAD+ 수준을 고갈시키고 궁극적으로 세포 사멸로 이어지는 순 효과100 , 101를 갖는 폴리(ADP-리보스) 폴리머라제 (PARP)99의 활성화를 촉진한다. 다른 연구자들은 그 대신, STZ 독성이 β-섬 세포 내에 고도로 발현되는 O-GlcNAcase의 비가역적인 억제의 결과인 것으로 제안한 바 있다.92,102 그러나, 이 가설은 두 독립적 연구 군에 의해 문제시되었다.103,104 단백질 상의 세포 O-GlcNAc 수준이 많은 형태의 세포 스트레스에 대해 증가하기 때문에105, STZ가 O-GlcNAcase에 대한 임의의 특이적 및 직접적 작용을 통해서보다는 오히려 세포 스트레스를 유도함으로써 단백질 상의 O-GlcNAc-변형 수준을 증가시키는 것이 가능한 것으로 보인다. 사실, 하노버(Hanover) 및 동료들은 STZ가 어느 정도 선택적인 불량한 O-GlcNAcase 억제제로서 작용한다는 것을 밝혀냈고106, 다른 연구자들에 의해 STZ가 비가역적으로 O-GlcNAcase를 억제하는 것으로 제안된 바 있으나,107 이러한 작용 모드에 대한 명확한 증거가 존재하지는 않는다. 최근에, STZ가 O-GlcNAcase를 비가역적으로 억제하지 않는다는 것이 밝혀졌다.108
NAG-티아졸린은 패밀리 20 헥소사미니다제90,109 및 더욱 최근에는 패밀리 84 O-GlcNAcases108의 강력한 억제제인 것으로 밝혀졌다. 그의 효능에도 불구하고, 복잡한 생물학적 맥락에서 NAG-티아졸린을 사용하는 것에 대한 단점은 그것이 선택성이 결핍되어 있고, 따라서 다중 세포 과정을 교란시킨다는 것이다.
PUGNAc는, 선택성 결핍의 동일한 문제로부터의 어려움이 있지만, 인간 O-GlcNAcase6,110 및 패밀리 20 인간 β-헥소사미니다제111 둘 다의 억제제로서 여전히 즐겨 사용되고 있는 또 다른 화합물이다. 바셀라(Vasella) 및 그 동료들에 의해 개발된 이 분자는 카나발리아 엔시포르미스(Canavalia ensiformis), 뮤코르 로욱시이(Mucor rouxii)로부터의 β-N-아세틸-글루코사미니다제, 및 소 신장으로부터의 β-헥소사미니다제의 강력한 경쟁적 억제제인 것으로 밝혀졌다.88 외상 출혈의 래트 모델에서 PUGNAc의 투여가 염증유발 시토카인 TNF-α 및 IL-6의 순환 수준을 감소시킨다는 것이 입증되었다.112 림프구 활성화의 세포-기반 모델에서 PUGNAc의 투여가 시토카인 IL-2의 생성을 감소시킨다는 것이 또한 밝혀졌다.113 최근 연구는 PUGNAc가 좌측 관상 동맥 폐쇄 후의 심근 경색 크기를 감소시키기 위해 동물 모델에서 사용될 수 있는 것으로 나타났다.114 특히 중요한 것은 외상 출혈의 래트 모델에서 O-GlcNAcase의 억제제인 PUGNAc의 투여에 의한 O-GlcNAc 수준의 상승이 심장 기능을 개선한다는 사실이다.112,115 또한, 신생아 래트 심실 근세포를 이용하는 허혈/재관류 손상의 세포 모델에서 PUGNAc로의 처리에 의한 O-GlcNAc 수준의 상승은 처리되지 않은 세포와 비교하여 세포 생존율을 개선하고 괴사 및 아폽토시스를 감소시켰다.116
더 최근에는, 선택적 O-GlcNAcase 억제제 NButGT가 허혈/재관류 및 산화 스트레스를 비롯한 세포 스트레스의 세포-기반 모델에서의 보호 활성을 나타낸다는 것이 제안되었다.117 이 연구는 O-GlcNAcase 억제제의 사용이 단백질 O-GlcNAc 수준을 상승시키고, 따라서 심장 조직에서 스트레스의 병원성 효과를 방지한다는 것을 시사한다.
국제 특허 출원 PCT/CA2006/000300 (2006년 3월 1일 출원, 번호 WO 2006/092049 하에 2006년 9월 8일 공개); PCT/CA2007/001554 (2007년 8월 31일 출원, 번호 WO 2008/025170 하에 2008년 3월 6일 공개); PCT/CA2009/001087 (2009년 7월 31일 출원, 번호 WO 2010/012106 하에 2010년 2월 4일 공개); PCT/CA2009/001088 (2009년 7월 31일 출원, WO 2010/012107 하에 2010년 2월 4일 공개); 및 PCT/CA2009/001302 (2009년 9월 16일 출원, 번호 WO 2010/037207 하에 2010년 4월 8일 공개)는 O-GlcNAcase의 선택적 억제제를 기재하고 있다.
본 발명은 글리코시다제를 선택적으로 억제하는 화합물, 상기 화합물의 용도, 및 상기 화합물을 포함하는 제약 조성물, 및 O-GlcNAcase의 결핍 또는 과다발현 및/또는 O-GlcNAc의 축적 또는 결핍과 관련된 질환 및 장애의 치료 방법에 관한 것이다.
본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
<화학식 I>
상기 식에서, 각각의 R은 독립적으로 H 또는 C(O)CH3이고; R1 및 R2는 독립적으로 H, C1 - 6알킬, C2 - 6알케닐, C1 - 6알콕시, -(CH2)n-시클로프로필 및 -(CH2)n-시클로부틸 (여기서, n은 0, 1, 2, 3 또는 4임)로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 연결되어 아제티딘, 피롤리딘, 피페리딘 또는 이속사졸리딘을 형성할 수 있고, 상기 C1-6알킬, C2-6알케닐, C1-6알콕시, -(CH2)n-시클로프로필, -(CH2)n-시클로부틸, 아제티딘, 피롤리딘, 피페리딘 및 이속사졸리딘은 플루오로, 히드록시 및 메틸로 1회 내지 치환기의 최대 개수까지 임의로 치환되고; R3은 C1-8알킬, C2-8알케닐, C2-8알키닐, C3-6시클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이들 각각은 플루오로 및 OH로 1회 내지 치환기의 최대 개수까지 임의로 치환되고; R4는 H, F, C1-8알킬, C2-8알케닐 및 C2-8알키닐로 이루어진 군으로부터 선택되고, 수소를 제외한 이들 각각은 플루오로 및 OH로 1회 내지 치환기의 최대 개수까지 임의로 치환되거나; 또는 R3 및 R4, 및 이들이 부착되어 있는 탄소 원자는 함께 연결되어 비닐 또는 3 내지 7-원 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있고, 상기 3 내지 7-원 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 고리는 이중 결합을 임의로 함유하고 플루오로 및 OH로 1회 내지 치환기의 최대 개수까지 임의로 치환되고; R5는 H, F, OH 및 OC(O)CH3으로부터 선택되며; 단, R4가 F인 경우에, R5는 OH 및 OC(O)CH3 이외의 것이다.
본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다:
<화학식 I>
상기 식에서, 각각의 R은 독립적으로 H 또는 C(O)CH3이고; R1 및 R2는 독립적으로 H, C1 - 6알킬, C1 - 6알콕시, -(CH2)n-시클로프로필 및 -(CH2)n-시클로부틸 (여기서, n은 0, 1, 2, 3 또는 4임)로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 연결되어 아제티딘, 피롤리딘 또는 피페리딘을 형성할 수 있고, 상기 C1-6알킬, C1-6알콕시, -(CH2)n-시클로프로필, -(CH2)n-시클로부틸, 아제티딘, 피롤리딘 및 피페리딘은 플루오로 및 메틸로 1회 내지 치환기의 최대 개수까지 임의로 치환되고; R3은 C1-8알킬, C2-8알케닐, C2-8알키닐, C3-6시클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이들 각각은 플루오로 및 OH로 1회 내지 치환기의 최대 개수까지 임의로 치환되고; R4는 H, F, C1-8알킬, C2-8알케닐 및 C2-8알키닐로 이루어진 군으로부터 선택되고, 수소를 제외한 이들 각각은 플루오로 및 OH로 1회 내지 치환기의 최대 개수까지 임의로 치환되거나; 또는 R3 및 R4, 및 이들이 부착되어 있는 탄소 원자는 함께 연결되어 비닐 또는 3 내지 7-원 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있고, 상기 3 내지 7-원 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 고리는 이중 결합을 임의로 함유하고 플루오로 및 OH로 1회 내지 치환기의 최대 개수까지 임의로 치환되고; R5는 H, F 및 OH로부터 선택되며; 단, R4가 F인 경우에, R5는 OH 이외의 것이다.
본 발명은 또한 한 부류의 화학식 Ia의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다.
<화학식 Ia>
상기 식에서, R1 및 R2는 독립적으로 H, C1 - 6알킬, C1 - 6알콕시, -(CH2)n-시클로프로필 및 -(CH2)n-시클로부틸 (여기서, n은 0, 1, 2, 3 또는 4임)로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 또는 R1 및 R2는 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 연결되어 아제티딘, 피롤리딘 또는 피페리딘을 형성할 수 있고, 상기 C1 - 6알킬, C1 - 6알콕시, -(CH2)n-시클로프로필, -(CH2)n-시클로부틸, 아제티딘, 피롤리딘 및 피페리딘은 플루오로 및 메틸로 1회 내지 치환기의 최대 개수까지 임의로 치환되고; R3은 C1-8알킬, C2-8알케닐, C2-8알키닐, C3-6시클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이들 각각은 플루오로 및 OH로 1회 내지 치환기의 최대 개수까지 임의로 치환되고; R4는 H, F, C1-8알킬, C2-8알케닐 및 C2-8알키닐로 이루어진 군으로부터 선택되고, 수소를 제외한 이들 각각은 플루오로 및 OH로 1회 내지 치환기의 최대 개수까지 임의로 치환되거나; 또는 R3 및 R4, 및 이들이 부착되어 있는 탄소 원자는 함께 연결되어 비닐 또는 3 내지 7-원 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있고, 상기 3 내지 7-원 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 고리는 이중 결합을 임의로 함유하고 플루오로 및 OH로 1회 내지 치환기의 최대 개수까지 임의로 치환되고; R5는 H, F 및 OH로부터 선택되며; 단, R4가 F인 경우에, R5는 OH 이외의 것이다.
상기 부류 내에, 본 발명은 R1 및 R2가 독립적으로 C1 - 4알킬이고; R3이 C1 - 6알킬이고; R4가 H 및 C1 - 6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; R5가 OH인 제1 하위-부류의 화학식 Ia의 화합물을 포함한다. 제1 하위-부류 내에, 본 발명은 추가로 R1 및 R2가 독립적으로 메틸 또는 에틸이고; R3이 메틸 또는 에틸이고; R4가 H, 메틸 및 에틸로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 화학식 Ia의 화합물을 포함한다.
또한, 상기 부류 내에, 본 발명은 R3 및 R4, 및 이들이 부착되어 있는 탄소 원자가 함께 연결되어 3 내지 7-원 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있고, 상기 3 내지 7-원 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 고리가 이중 결합을 임의로 함유하고 플루오로 및 OH로 1회 내지 치환기의 최대 개수까지 임의로 치환된 것인 제2 하위-부류의 화학식 Ia의 화합물을 포함한다.
또한, 상기 부류 내에, 본 발명은 R1 및 R2가 독립적으로 H, C1 - 6알킬 및 시클로프로필메틸로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 또는 R1 및 R2가 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 연결되어 아제티딘 또는 피롤리딘을 형성할 수 있고, 상기 C1 - 6알킬, 시클로프로필메틸, 아제티딘 또는 피롤리딘이 플루오로 및 메틸로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고; R3이 C1-8알킬, C2-8알케닐, C2-8알키닐 및 C3-6시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이들 각각이 플루오로 및 OH로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고; R4가 H, F, C1-8알킬, C2-8알케닐 및 C2-8알키닐로 이루어진 군으로부터 선택되고, 수소를 제외한 이들 각각이 플루오로 및 OH로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되거나; 또는 R3 및 R4, 및 이들이 부착되어 있는 탄소 원자가 함께 연결되어 이중 결합을 임의로 함유하고 플루오로 및 OH로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된 3- 내지 6-원 카르보시클릭 고리를 형성할 수 있는 것인 제3 하위-부류의 화학식 Ia의 화합물을 포함한다.
또한, 상기 부류 내에, 본 발명은 R3이 CF3이고, R5가 OH인 제4 하위-부류의 화학식 Ia의 화합물을 포함한다.
본 발명은 또한 하기의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다.
본 발명의 한 실시양태는 각각의 R이 H이고, R5가 OH이고, R3이 플루오로 및 히드록시로 1회 내지 치환기의 최대 개수까지 임의로 치환된 C1 - 6알킬이고, R4가 H인 화학식 I의 화합물을 포함한다.
본 발명의 한 실시양태는 각각의 R이 H이고, R5가 H이고, R3이 플루오로 및 히드록시로 1회 내지 치환기의 최대 개수까지 임의로 치환된 C1-6알킬이고, R4가 H 또는 C1 - 6알킬인 화학식 I의 화합물을 포함한다.
본 발명의 한 실시양태는 R1이 히드록시로 1회 내지 치환기의 최대 개수까지 임의로 치환된 C1-6알킬이고, R2가 H인 화학식 I의 화합물을 포함한다.
본 발명의 한 실시양태는 R1이 C2-6알케닐이고, R2가 H인 화학식 I의 화합물을 포함한다.
본 발명의 한 실시양태는 각각의 R이 H이고, R5가 F인 화학식 I의 화합물을 포함한다.
본 발명은 또한 화학식 I 또는 Ia의 화합물을 제약상 허용되는 담체와 조합하여 포함하는 제약 조성물을 포함한다.
본 발명은 또한 O-GlcNAcase의 선택적 억제를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 O-GlcNAcase를 선택적으로 억제하는 방법을 포함한다.
본 발명은 또한 O-GlcNAc의 수준의 상승을 필요로 하는 대상체에게 유효량의 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 O-GlcNAc의 수준을 상승시키는 방법을 포함한다.
본 발명은 또한 O-GlcNAcase에 의해 매개되는 상태의 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 상기 상태를 치료하는 방법을 포함한다. 본 발명의 측면은 상태가 염증성 질환, 알레르기, 천식, 알레르기성 비염, 과민성 폐 질환, 과민성 폐렴, 호산구성 폐렴, 지연형 과민증, 아테롬성동맥경화증, 간질성 폐 질환 (ILD), 특발성 폐 섬유증, 류마티스 관절염과 연관된 ILD, 전신 홍반성 루푸스, 강직성 척추염, 전신 경화증, 쇼그렌 증후군, 다발근염 또는 피부근염, 전신 아나필락시스 또는 과민 반응, 약물 알레르기, 곤충 자상 알레르기, 자가면역 질환, 류마티스 관절염, 건선성 관절염, 다발성 경화증, 길랑-바레 증후군, 전신 홍반성 루푸스, 중증 근무력증, 사구체신염, 자가면역 갑상선염, 이식편 거부, 동종이식편 거부, 이식편-대-숙주 질환, 염증성 장 질환, 크론병, 궤양성 결장염, 척추관절병증, 경피증, 건선, T-세포 매개 건선, 염증성 피부병, 피부염, 습진, 아토피성 피부염, 알레르기성 접촉성 피부염, 두드러기, 혈관염, 괴사성, 피부 및 과민성 혈관염, 호산구성 근염, 호산구성 근막염, 실질 기관 이식 거부, 심장 이식 거부, 폐 이식 거부, 간 이식 거부, 신장 이식 거부, 췌장 이식 거부, 신장 동종이식편, 폐 동종이식편, 간질, 통증, 섬유근육통, 졸중, 신경보호로 이루어진 군 중 하나 이상으로부터 선택된 것인 상기 방법을 포함한다.
본 발명은 또한 신경변성 질환, 타우병증, 암 및 스트레스로 이루어진 군으로부터 선택된 상태의 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 상기 상태를 치료하는 방법을 포함한다. 본 발명의 측면은 상태가 알츠하이머병, 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 인지 장애를 동반한 근위축성 측삭 경화증 (ALSci), 은친화성 입자 치매, 블루이트병, 피질기저 변성 (CBD), 권투선수 치매, 석회화를 동반한 미만성 신경원섬유 엉킴, 다운 증후군, 가족성 영국 치매, 가족성 덴마크 치매, 염색체 17과 연관된 파킨슨증을 동반한 전두측두엽 치매 (FTDP-17), 게르스트만-스트라우슬러-샤잉커병, 과들루프 파킨슨증, 할러보르덴-스파츠병 (제1형 뇌 철 축적을 동반한 신경변성), 다계통 위축, 근긴장성 이영양증, 니만-픽병 (C형), 담창구-교뇌-흑질 변성, 괌의 파킨슨증-치매, 픽병 (PiD), 뇌염후 파킨슨증 (PEP), 프리온 질환 (크로이츠펠트-야콥병 (CJD), 변형 크로이츠펠트-야콥병 (vCJD), 치명적 가족성 불면증 및 쿠루병 포함), 진행성 피질하 교세포증, 진행성 핵상 마비 (PSP), 리차드슨 증후군, 아급성 경화성 범뇌염, 엉킴-단독 치매, 헌팅톤병, 파킨슨병, 정신분열증, 경도 인지 장애 (MCI), 신경병증 (말초 신경병증, 자율 신경병증, 신경염 및 당뇨병성 신경병증 포함) 또는 녹내장으로 이루어진 군 중 하나 이상으로부터 선택된 것인 상기 방법을 포함한다. 본 발명의 또 다른 측면은 스트레스가 심장 장애인 상기 방법을 포함한다. 또 다른 측면에서, 심장 장애는 허혈; 출혈; 저혈량성 쇼크; 심근경색; 중재적 심장 시술; 심장 우회로 수술; 섬유소용해 요법; 혈관성형술; 및 스텐트 설치술로 이루어진 군 중 하나 이상으로부터 선택된다.
본 발명의 화합물은 O-당단백질 2-아세트아미도-2-데옥시-β-D-글루코피라노시다제 (O-GlcNAcase)를 억제할 수 있다. 일부 실시양태에서, O-GlcNAcase는 포유동물 O-GlcNAcase, 예컨대 래트, 마우스 또는 인간 O-GlcNAcase이다. 일부 실시양태에서, β-헥소사미니다제는 포유동물 β-헥소사미니다제, 예컨대 래트, 마우스 또는 인간 β-헥소사미니다제이다.
본 발명의 화합물은 포유동물 β-헥소사미니다제보다 포유동물 O-GlcNAcase의 활성을 선택적으로 억제한다. O-GlcNAcase를 "선택적으로" 억제하는 화합물은 O-GlcNAcase의 활성 또는 생물학적 기능을 억제하지만, β-헥소사미니다제의 활성 또는 생물학적 기능은 실질적으로 억제하지 않는 화합물이다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, O-GlcNAcase의 선택적 억제제는 폴리펩티드로부터의 2-아세트아미도-2-데옥시-β-D-글루코피라노시드 (O-GlcNAc)의 절단을 선택적으로 억제한다. 일부 실시양태에서, O-GlcNAcase의 선택적 억제제는 O-GlcNAcase에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, O-GlcNAcase의 선택적 억제제는 타우 단백질의 과인산화를 억제하고/거나 NFT의 형성을 억제한다. "억제하다", "억제" 또는 "억제하는"은 10% 내지 90%의 임의의 값, 또는 30% 내지 60%의 임의의 정수 값, 또는 100% 초과 값만큼의 감소, 또는 1배, 2배, 5배, 10배 또는 그 초과만큼의 감소를 의미한다. 억제가 완전한 억제를 요구하지는 않는 것으로 이해되어야 한다. 일부 실시양태에서, O-GlcNAcase의 선택적 억제제는 세포, 조직 또는 기관 (예를 들어, 뇌, 근육 또는 심장 (심장성) 조직)에서 및 동물에서, O-GlcNAc 수준, 예를 들어, O-GlcNAc-변형 폴리펩티드 또는 단백질 수준을 상승시키거나 또는 향상시킨다. "상승" 또는 "향상"은 10% 내지 90%의 임의의 값, 또는 30% 내지 60%의 임의의 정수 값, 또는 100% 초과 값만큼의 증가, 또는 1배, 2배, 5배, 10배, 15배, 25배, 50배, 100배 또는 그 초과만큼의 증가를 의미한다. 일부 실시양태에서, O-GlcNAcase의 선택적 억제제는, 본원에 기재된 바와 같이, 10 내지 100000의 범위, 또는 100 내지 100000의 범위, 또는 1000 내지 100000의 범위에서, 또는 적어도 10, 20, 50, 100, 200, 500, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 4500, 5000, 6000, 7000, 10,000, 25,000, 50,000, 75,000, 또는 상기 기재된 범위 내의 임의의 값 또는 상기 기재된 범위의 대략적인 임의의 값의 선택성 비를 나타낸다.
본 발명의 화합물은 O-GlcNAcase 효소와의 상호작용을 통해 특이적으로 생체내 O-GlcNAc-변형된 폴리펩티드 또는 단백질 상의 O-GlcNAc 수준을 상승시키고, O-GlcNAcase 활성의 억제를 요구하거나 또는 이에 반응하는 처리 조건에서 효과적이다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 타우 인산화 및 NFT 형성에서의 감소를 생성하는 작용제로서 유용하다. 일부 실시양태에서, 화합물은 따라서 알츠하이머병 및 관련 타우병증을 치료하는데 유용하다. 일부 실시양태에서, 화합물은 따라서 타우 인산화를 낮추고 NFT 형성을 감소시켜 결과적으로 타우 O-GlcNAc 수준을 증가시킴으로써 알츠하이머병 및 관련 타우병증을 치료할 수 있다. 일부 실시양태에서, 화합물은 O-GlcNAc-변형된 폴리펩티드 또는 단백질 상의 O-GlcNAc 변형의 수준에서의 증가를 생성하고, 따라서 O-GlcNAc 변형의 이러한 증가에 반응하는 장애의 치료에 유용하며; 이러한 장애는 신경변성, 염증성, 심혈관 및 면역조절 질환을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 화합물은 또한 글리코시다제 효소의 활성을 억제하는 그의 능력과 관련된 다른 생물학적 활성의 결과로서 유용하다. 대안적 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 세포 및 유기체 수준에서 O-GlcNAc의 생리학적 역할을 연구함에 있어서 가치있는 도구이다.
대안적 실시양태에서, 본 발명은 동물 대상체, 예컨대 수의학적 및 인간 대상체에서 단백질 O-GlcNAc 변형 수준을 향상시키거나 상승시키는 방법을 제공한다. 대안적 실시양태에서, 본 발명은 동물 대상체, 예컨대 수의학적 및 인간 대상체에서 O-GlcNAcase 효소를 선택적으로 억제하는 방법을 제공한다. 대안적 실시양태에서, 본 발명은 동물 대상체, 예컨대 수의학적 및 인간 대상체에서 타우 폴리펩티드의 인산화를 억제하거나 또는 NFT의 형성을 억제하는 방법을 제공한다.
본 발명은 또한 본원에 기재된 하나 이상의 질환 또는 상태를 치료하기 위한 본 발명의 화합물의 용도를 포함한다. 본 발명은 또한 본원에 기재된 하나 이상의 질환 또는 상태 치료용 의약의 제조를 위한 본 발명의 화합물의 용도를 포함한다.
당업자에 의해 인지될 것과 같이, 상기 화학식 I은 또한 대안적으로 다음과 같이 나타낼 수 있다:
본원에 사용된 단수 형태는 문맥에 달리 명확하게 지시되지 않는 한 복수 지시어를 포함한다. 예를 들어, "화합물"은 하나 이상의 이러한 화합물을 지칭하는 한편, "효소"는 특정한 효소 뿐만 아니라 당업자에게 공지된 다른 패밀리 구성원 및 그의 등가물을 포함한다.
본원 전체에 걸쳐, 용어 "화합물" 또는 "화합물들"이 본원에 논의된 화합물을 지칭하고, 화합물의 전구체 및 유도체, 예컨대 아실-보호된 유도체, 및 화합물, 전구체 및 유도체의 제약상 허용되는 염을 포함한다. 본 발명은 또한 화합물의 전구약물, 화합물 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물, 및 화합물의 전구약물 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 모든 화합물은 1개 이상의 키랄 중심을 함유한다. 일부 실시양태에서, 본 발명에 따른 화합물을 포함하는 제형, 제제 및 조성물은 입체이성질체의 혼합물, 개별 입체이성질체, 및 거울상이성질체 혼합물, 및 다중 입체이성질체의 혼합물을 포함한다. 일반적으로, 화합물은 임의의 바람직한 정도의 키랄 순도로 공급될 수 있다.
"알킬"은, 탄소 및 수소 원자만으로 구성되고, 불포화를 전혀 함유하지 않고, 예를 들어 1 내지 10개의 탄소 원자, 예컨대 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개의 탄소 원자를 포함하고, 단일 결합에 의해 분자의 나머지에 부착되는, 직쇄형 또는 분지형 탄화수소 쇄 기를 지칭한다. 명세서에 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 알킬 기는 본원에 기재된 바와 같이 1개 이상의 치환기에 의해 임의로 치환될 수 있다. 본원에 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 치환이 알킬 기의 임의의 탄소 상에서 발생할 수 있는 것으로 이해된다.
"알케닐"은, 탄소 및 수소 원자만으로 구성되고, 1개 이상의 이중 결합을 함유하고, 예를 들어 2 내지 10개의 탄소 원자, 예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개의 탄소 원자를 포함하고, 단일 결합 또는 이중 결합에 의해 분자의 나머지에 부착되는, 직쇄형 또는 분지형 탄화수소 쇄 기를 지칭한다. 명세서에 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 알케닐 기는 본원에 기재된 바와 같이 1개 이상의 치환기에 의해 임의로 치환될 수 있다. 본원에 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 치환이 알케닐 기의 임의의 탄소 상에서 발생할 수 있는 것으로 이해된다.
"알키닐"은, 탄소 및 수소 원자만으로 구성되고, 1개 이상의 삼중 결합을 함유하고, 예를 들어 2 내지 10개의 탄소 원자를 포함하는, 직쇄형 또는 분지형 탄화수소 쇄 기를 지칭한다. 명세서에 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 알키닐 기는 본원에 기재된 바와 같이 1개 이상의 치환기에 의해 임의로 치환될 수 있다.
"아릴"은, 탄소 원자만을 함유하고, 예를 들어, 6-14원을 포함하는 모노- 또는 비시클릭 방향족 고리를 의미한다. 아릴의 예는 페닐, 나프틸, 인다닐, 인데닐, 테트라히드로나프틸, 2,3-디히드로벤조푸라닐, 디히드로벤조피라닐, 1,4-벤조디옥사닐 등을 포함한다. 본원에 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 용어 "아릴"은 본원에 기재된 바와 같이 1개 이상의 치환기에 의해 임의로 치환된 아릴 기를 포함하는 것으로 의도된다.
"헤테로아릴"은, 고리 내에 1개 이상의 헤테로원자, 예를 들어 N, O, S를 함유하고, 예를 들어, 5-14원, 예컨대 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 또는 14원을 포함하는, 단일 또는 융합된 방향족 고리 기를 지칭한다. 헤테로아릴 기의 예는 푸란, 티오펜, 피롤, 옥사졸, 티아졸, 이미다졸, 피라졸, 이속사졸, 이소티아졸, 1,2,3-옥사디아졸, 1,2,3-트리아졸, 1,2,4-트리아졸, 1,3,4-티아디아졸, 테트라졸, 피리딘, 피리다진, 피리미딘, 피라진, 1,3,5-트리아진, 이미다졸, 벤즈이미다졸, 벤족사졸, 벤조티아졸, 인돌리진, 인돌, 이소인돌, 벤조푸란, 벤조티오펜, 1H-인다졸, 퓨린, 4H-퀴놀리진, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 신놀린, 프탈라진, 퀴나졸린, 퀴녹살린, 1,8-나프티리딘, 프테리딘을 포함한다. 본원에 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 용어 "헤테로아릴"은 본원에 기재된 바와 같이 1개 이상의 치환기에 의해 임의로 치환된 헤테로아릴 기를 포함하는 것으로 의도된다.
"시클로알킬"은, 탄소 및 수소 원자만으로 구성되고, 예를 들어 3 내지 15개의 탄소 원자를 갖고, 포화되고 단일 결합에 의해 분자의 나머지에 부착되는, 안정한 1가 모노시클릭, 비시클릭 또는 트리시클릭 탄화수소 기를 지칭한다. 본원에 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 용어 "시클로알킬"은 본원에 기재된 바와 같이 임의로 치환된 시클로알킬 기를 포함하는 것으로 의도된다.
용어 "3 내지 7-원 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 고리"는 3 내지 7개 원자의 모노시클릭 탄소 고리, 또는 O, N 및 S로부터 선택된 1개 이상의 헤테로원자를 함유하는 3 내지 7개 원자의 모노시클릭 고리를 의미한다.
"임의적" 또는 "임의로"는, 이 후에 기재된 상황의 사건이 일어날 수도 있고 일어나지 않을 수도 있으며, 상기 기재가 상기 사건 또는 상황이 일어나는 경우 및 일어나지 않는 경우를 포함함을 의미한다. 예를 들어, "임의로 치환된 알킬"은 알킬 기가 치환될 수도 있고 치환되지 않을 수도 있으며, 상기 기재가 치환된 알킬 기, 및 치환이 없는 일킬 기 둘 다를 포함함을 의미한다. 임의로 치환된 알킬 기의 예는 비제한적으로 메틸, 에틸, 프로필 등을 포함하고, 시클로알킬, 예컨대 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸 등을 포함하고; 임의로 치환된 알케닐 기의 예는 알릴, 크로틸, 2-펜테닐, 3-헥세닐, 2-시클로펜테닐, 2-시클로헥세닐, 2-시클로펜테닐메틸, 2-시클로헥세닐메틸 등을 포함한다. 일부 실시양태에서, 임의로 치환된 알킬 및 알케닐 기는 C1-6 알킬 또는 알케닐을 포함한다.
"할로"는 브로모, 클로로, 플루오로, 아이오도 등을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 적합한 할로겐은 플루오린 또는 염소를 포함한다.
임의로 치환된 카르보닐 기 또는 술포닐 기의 예는 본원에 기재된 바와 같이 다양한 히드로카르빌, 예컨대 알킬, 알케닐 및 5- 내지 6-원 모노시클릭 방향족 기 (예를 들어, 페닐, 피리딜 등)로부터 형성된 이러한 기의 임의로 치환된 형태를 포함한다.
치료 적응증
본 발명은 O-GlcNAcase 효소 또는 O-GlcNAc-변형 단백질 수준에 의해 직접 또는 간접적으로 조절되는 상태, 예를 들어 O-GlcNAcase 효소의 억제 또는 O-GlcNAc-변형 단백질 수준의 상승에 의해 이익을 얻는 상태를 치료하는 방법을 제공한다. 이러한 상태는 녹내장, 정신분열증, 타우병증, 예컨대 알츠하이머병, 신경변성 질환, 심혈관 질환, 염증과 연관된 질환, 면역억제와 연관된 질환 및 암을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 본 발명의 화합물은 또한 O-GlcNAcase의 결핍 또는 과다발현 또는 O-GlcNAc의 축적 또는 고갈과 관련된 질환 또는 장애의 치료, 또는 글리코시다제 억제 요법에 반응하는 임의의 질환 또는 장애의 치료에 유용하다. 이러한 질환 및 장애는 녹내장, 정신분열증, 신경변성 장애, 예컨대 알츠하이머병 (AD) 또는 암을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 이러한 질환 및 장애는 또한 효소 OGT의 축적 또는 결핍과 관련된 질환 또는 장애를 포함할 수 있다. O-GlcNAc 잔기에 의해 변형되고 이러한 변형의 조절이상이 질환 또는 병리상태를 일으키는 단백질을 발현하는 표적 세포를 보호하거나 치료하는 방법이 포함된다. 본원에 사용된 용어 "치료하는"은 치료, 예방 및 개선을 포함한다.
대안적 실시양태에서, 본 발명은 동물 대상체, 예컨대 수의학적 및 인간 대상체에서 단백질 O-GlcNAc 변형 수준을 향상시키거나 상승시키는 방법을 제공한다. O-GlcNAc 수준의 이러한 상승은 알츠하이머병의 예방 또는 치료; 다른 신경변성 질환 (예를 들어 파킨슨병, 헌팅톤병)의 예방 또는 치료; 신경보호 효과의 제공; 심장 조직에 대한 손상의 방지; 및 염증 또는 면역억제와 연관된 질환의 치료 방법을 제공한다.
대안적 실시양태에서, 본 발명은 동물 대상체, 예컨대 수의학적 및 인간 대상체에서 O-GlcNAcase 효소를 선택적으로 억제하는 방법을 제공한다.
대안적 실시양태에서, 본 발명은 동물 대상체, 예컨대, 수의학적 및 인간 대상체에서 타우 폴리펩티드의 인산화를 억제하거나 또는 NFT의 형성을 억제하는 방법을 제공한다. 따라서, 본 발명의 화합물은 AD 및 다른 타우병증을 연구하고 치료하는데 사용될 수 있다.
일반적으로, 본 발명의 방법은 본 발명에 따른 화합물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여함으로써, 또는 세포 또는 샘플을 본 발명에 따른 화합물, 예를 들어, 치료 유효량의 화학식 I 또는 Ia에 따른 화합물을 포함하는 제약 조성물과 접촉시킴으로써 달성된다. 보다 상세하게는, 이들은 O-GlcNAc 단백질 변형의 조절이 관련된 장애, 또는 본원에 기재된 바와 같은 임의의 상태의 치료에 유용하다. 관심있는 질환 상태는 알츠하이머병 (AD) 및 관련 신경변성 타우병증을 포함하고, 여기서 미세관-연관 단백질 타우의 비정상적 과인산화는 질환 발병기전에 관련된다. 일부 실시양태에서, 화합물은 타우 상에서 O-GlcNAc의 상승된 수준을 유지함으로써 타우의 과인산화를 차단하고, 이에 따라 치료 이익을 제공하는데 사용될 수 있다.
독성 타우 종의 축적과 연관된 병리상태 (예를 들어, 알츠하이머병 및 다른 타우병증)의 치료에서 본 화합물의 유효성은 확립된 세포 모델118 -120 및/또는 질환에 걸린 트랜스제닉 동물 모델32 ,33에서 독성 타우 종의 형성을 차단하는 화합물의 능력을 시험함으로써 확인될 수 있다.
본 발명의 화합물로 치료될 수 있는 타우병증은 다음을 포함한다: 알츠하이머병, 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 인지 장애를 동반한 근위축성 측삭 경화증 (ALSci), 은친화성 입자 치매, 블루이트병, 피질기저 변성 (CBD), 권투선수 치매, 석회화를 동반한 미만성 신경원섬유 엉킴, 다운 증후군, 가족성 영국 치매, 가족성 덴마크 치매, 염색체 17과 연관된 파킨슨증을 동반한 전두측두엽 치매 (FTDP-17), 게르스트만-스트라우슬러-샤잉커병, 과들루프 파킨슨증, 할러보르덴-스파츠병 (제1형 뇌 철 축적을 동반한 신경변성), 다계통 위축, 근긴장성 이영양증, 니만-픽병 (C형), 담창구-교뇌-흑질 변성, 괌의 파킨슨증-치매, 픽병 (PiD), 뇌염후 파킨슨증 (PEP), 프리온 질환 (크로이츠펠트-야콥병 (CJD), 변형 크로이츠펠트-야콥병 (vCJD), 치명적 가족성 불면증 및 쿠루병 포함), 진행성 피질하 교세포증, 진행성 핵상 마비 (PSP), 리차드슨 증후군, 아급성 경화성 범뇌염, 엉킴-단독 치매 및 녹내장.
본 발명의 화합물은 또한, 세포를 자극하거나 또는 세포의 분화를 촉진하는 조직 손상 또는 스트레스와 연관된 상태의 치료에 유용하다. 따라서, 일부 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 허혈; 출혈; 저혈량성 쇼크; 심근경색; 중재적 심장 시술; 심장 우회로 수술; 섬유소용해 요법; 혈관성형술; 및 스텐트 설치술을 포함하나 이에 제한되지는 않는, 심장 조직에서 스트레스와 관련된 다양한 상태 또는 의학 절차에서 치료 이익을 제공하는데 사용될 수 있다.
세포 스트레스와 연관된 병리상태 (허혈, 출혈, 저혈량성 쇼크, 심근경색 및 다른 심혈관 장애 포함)를 치료하는 화합물의 유효성은, 확립된 세포 스트레스 검정에서 세포 손상105 ,116,117을 방지하고, 허혈-재관류70 ,114 및 외상-출혈72 ,112,115의 동물 모델에서 조직 손상을 방지하고 기능적 복구를 촉진하는 화합물의 능력을 시험함으로써 확인될 수 있다.
O-GlcNAcase 활성을 선택적으로 억제하는 화합물은 염증성 또는 알레르기성 질환, 예컨대 천식, 알레르기성 비염, 과민성 폐 질환, 과민성 폐렴, 호산구성 폐렴, 지연형 과민증, 아테롬성동맥경화증, 간질성 폐 질환 (ILD) (예를 들어, 특발성 폐 섬유증, 또는 류마티스 관절염과 연관된 ILD, 전신 홍반성 루푸스, 강직성 척추염, 전신 경화증, 쇼그렌 증후군, 다발근염 또는 피부근염); 전신 아나필락시스 또는 과민 반응, 약물 알레르기, 곤충 자상 알레르기; 자가면역 질환, 예컨대 류마티스 관절염, 건선성 관절염, 다발성 경화증, 길랑-바레 증후군, 전신 홍반성 루푸스, 중증 근무력증, 사구체신염, 자가면역 갑상선염, 이식편 거부, 예컨대 동종이식편 거부 또는 이식편-대-숙주 질환; 염증성 장 질환, 예컨대 크론병 및 궤양성 결장염; 척추관절병증; 경피증; 건선 (T-세포 매개 건선 포함) 및 염증성 피부병, 예컨대 피부염, 습진, 아토피성 피부염, 알레르기성 접촉성 피부염, 두드러기; 혈관염 (예를 들어, 괴사성, 피부 및 과민성 혈관염); 호산구성 근염, 호산구성 근막염; 및 암을 포함하나 이에 제한되지는 않는, 염증과 연관된 질환의 치료에 사용될 수 있다.
또한, 단백질 O-GlcNAc 변형의 수준에 영향을 미치는 화합물은, 예컨대 화학요법, 방사선 요법, 증진된 상처 치유 및 화상 치료, 자가면역 질환을 위한 요법 또는 다른 약물 요법 (예를 들어, 코르티코스테로이드 요법), 또는 자가면역 질환 및 이식편/이식 거부의 치료에 사용된 종래 약물 (면역억제의 원인이 됨)의 조합 요법을 받는 개체에서의 면역억제와 연관된 질환; 또는 수용체 기능의 선천성 결핍 또는 다른 원인으로 인한 면역억제와 연관된 질환의 치료에 사용될 수 있다.
본 발명의 화합물은 파킨슨병 및 헌팅톤병을 비롯한 신경변성 질환의 치료에 유용할 수 있다. 치료될 수 있는 다른 상태는 O-GlcNAc 번역후 단백질 변형의 수준으로 유발되거나, 이에 영향을 받거나 또는 임의의 다른 방법으로 이와 상호관련된 것이다. 본 발명의 화합물이 이러한 상태, 특히, 이에 제한되지는 않지만, 단백질 상의 O-GlcNAc 수준과의 연관성이 확립된 하기의 상태: 이식편 거부, 특히 이에 제한되지는 않지만, 실질 기관 이식, 예컨대 심장, 폐, 간, 신장 및 췌장 이식 (예를 들어 신장 및 폐 동종이식편); 암, 특히 이에 제한되지는 않지만, 유방, 폐, 전립선, 췌장, 결장, 직장, 방광, 신장, 난소의 암; 뿐만 아니라 비-호지킨 림프종 및 흑색종; 간질, 통증, 섬유근육통 또는 졸중의 치료, 예를 들어, 졸중 후 신경보호에 유용할 수 있는 것으로 기대된다.
제약 조성물 & 수의학적 조성물, 투여량 및 투여
본 발명에 따른 또는 본 발명에 따라 사용하기 위한 화합물을 포함하는 제약 조성물은 본 발명의 범위 내에 포함되는 것으로 예상된다. 일부 실시양태에서, 유효량의 화학식 I 또는 Ia의 화합물을 포함하는 제약 조성물이 제공된다.
화학식 I 또는 Ia의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염, 입체이성질체, 용매화물 및 유도체는 이들이 인간을 비롯한 동물에서 약리 활성을 가지고 있기 때문에 유용하다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 투여되는 경우에, 본 발명에 따른 화합물은 혈장 중에서 안정하다.
일부 실시양태에서, 본 발명에 따른 또는 본 발명에 따라 사용하기 위한 화합물은 임의의 다른 활성제 또는 제약 조성물과 조합하여 제공될 수 있고, 여기서 이러한 조합 요법은 O-GlcNAcase 활성의 조절, 예를 들어 신경변성, 염증성, 심혈관 또는 면역조절 질환 또는 본원에 기재된 임의의 상태의 치료에 유용하다. 일부 실시양태에서, 본 발명에 따른 또는 본 발명에 따라 사용하기 위한 화합물은 알츠하이머병의 예방 또는 치료에 유용한 하나 이상의 작용제와 조합하여 제공될 수 있다. 이러한 작용제의 예는 하기를 포함하나 이에 제한되지는 않는다:
-아세틸콜린 에스테라제 억제제 (AChEI), 예컨대 아리셉트(Aricept)® (도네페질), 엑셀론(Exelon)® (리바스티그민), 라자딘(Razadyne)® (라자딘 ER®, 레미닐(Reminyl)®, 니발린(Nivalin)®, 갈란타민), 코그넥스(Cognex)® (타크린), 디메본, 후페르진 A, 펜세린, 데비오-9902 SR (ZT-1 SR), 자나페질 (TAK0147), 간스티그민, NP7557 등;
-NMDA 수용체 길항제, 예컨대 나멘다(Namenda)® (악수라(Axura)®, 아카티놀(Akatinol)®, 에빅사(Ebixa)®, 메만틴), 디메본, SGS-742, 네라멕산, 데비오-9902 SR (ZT-1 SR) 등;
감마-세크레타제 억제제 및/또는 조절제, 예컨대 플루리잔(Flurizan)™ (타렌플루르빌, MPC-7869, R-플루르비프로펜), LY450139, MK 0752, E2101, BMS-289948, BMS-299897, BMS-433796, LY-411575, GSI-136 등;
-베타-세크레타제 억제제, 예컨대 ATG-Z1, CTS-21166 등;
-알파-세크레타제 활성화제, 예컨대 NGX267 등;
-아밀로이드-β 응집 및/또는 피브릴화 억제제, 예컨대 알츠헤메드(Alzhemed)™ (3APS, 트라미노프로세이트, 3-아미노-1-프로판술폰산), AL-108, AL-208, AZD-103, PBT2, 세레악트, ONO-2506PO, PPI-558 등;
-타우 응집 억제제, 예컨대 메틸렌 블루 등;
미세관 안정화제, 예컨대 AL-108, AL-208, 파클리탁셀 등;
-RAGE 억제제, 예컨대 TTP488 등;
-5-HT1a 수용체 길항제, 예컨대 크살리프로덴, 레코조탄 등;
-5-HT4 수용체 길항제, 예컨대 PRX-03410 등;
-키나제 억제제, 예컨대 SRN-003-556, 암푸린다미드, LiCl, AZD1080, NP031112, SAR-502250 등;
-인간화 모노클로날 항-Aβ 항체, 예컨대 바피뉴주맙 (AAB-001), LY2062430, RN1219, ACU-5A5 등;
-아밀로이드 백신, 예컨대 AN-1792, ACC-001;
-신경보호제, 예컨대 세레브롤리신, AL-108, AL-208, 후페르진 A 등;
-L-유형 칼슘 채널 길항제, 예컨대 MEM-1003 등;
-니코틴성 수용체 길항제, 예컨대 AZD3480, GTS-21 등;
-니코틴성 수용체 효능제, 예컨대 MEM 3454, 네피라세탐 등;
-퍼옥시솜 증식자-활성화 수용체 (PPAR) 감마 효능제, 예컨대 아반디아(Avandia)® (로스글리타존) 등;
-포스포디에스테라제 IV (PDE4) 억제제, 예컨대 MK-0952 등;
-호르몬 대체 요법, 예컨대 에스트로겐 (프레마린) 등;
-모노아민 옥시다제 (MAO) 억제제, 예컨대 NS2330, 라사길린 (아질렉트(Azilect)®), TVP-1012 등;
-AMPA 수용체 조절제, 예컨대 암팔렉스 (CX 516) 등;
신경 성장 인자 또는 NGF 강화제, 예컨대 CERE-110 (AAV-NGF), T-588, T-817MA 등;
- 뇌하수체에 의한 황체화 호르몬 (LH)의 방출을 방지하는 작용제, 예컨대 류프롤리드 (VP-4896) 등;
-GABA 수용체 조절제, 예컨대 AC-3933, NGD 97-1, CP-457920 등;
벤조디아제핀 수용체 역 효능제, 예컨대 SB-737552 (S-8510), AC-3933 등;
-노르아드레날린-방출제, 예컨대 T-588, T-817MA 등.
본 발명에 따른 또는 본 발명에 따라 사용하기 위한 화합물과, 알츠하이머 작용제와의 조합물이 본원에 기재된 예로 제한되지는 않지만, 알츠하이머병의 치료에 유용한 임의의 작용제와의 조합을 포함한다는 것이 이해되어야 한다. 본 발명에 따른 또는 본 발명에 따라 사용하기 위한 화합물 및 다른 알츠하이머 작용제의 조합물은 개별적으로 또는 함께 투여될 수 있다. 하나의 작용제의 투여는 다른 작용제(들)의 투여 이전에, 이와 공동으로 또는 그 후에 일어날 수 있다.
대안적 실시양태에서, 화합물은 대상체에게 투여 후에 화합물을 방출하는 "전구약물" 또는 보호 형태로서 공급될 수 있다. 예를 들어, 화합물은 체액 중에서, 예를 들어, 혈류 중에서 가수분해에 의해 분리되어, 이에 따라 활성 화합물을 방출할 수 있는 보호기를 수반할 수 있거나, 또는 체액 중에서 산화되거나 환원되어 화합물을 방출한다. 따라서, "전구약물"은 생리 조건 하에서 또는 가용매분해에 의해 생물학적으로 활성인 본 발명의 화합물로 전환될 수 있는 화합물을 나타낸다. 따라서, 용어 "전구약물"은 제약상 허용되는 본 발명의 화합물의 대사 전구체를 지칭한다. 전구약물은 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 때는 불활성일 수 있으나, 생체내에서 본 발명의 활성 화합물로 전환된다. 전구약물은 전형적으로 신속하게 생체내, 예를 들어, 혈액 중에서 가수분해에 의해 변형되어 본 발명의 모 화합물을 생성한다.
전구약물 화합물은 종종 대상체에서 용해도, 조직 호환성 또는 지연 방출의 이점을 제공한다.
용어 "전구약물"은 또한, 이러한 전구약물이 대상체에게 투여되는 경우에 본 발명의 활성 화합물을 생체내 방출하는 임의의 공유 결합된 담체를 포함하는 것으로 의도된다. 본 발명의 화합물의 전구약물은 본 발명의 화합물에 존재하는 관능기를 변형시킴으로써 제조될 수 있고, 변형은 통상적인 조작법으로 또는 생체내에서 본 발명의 모 화합물로 절단된다. 전구약물은, 본 발명의 화합물의 전구약물이 포유동물 대상체에게 투여되는 경우에, 히드록시, 아미노 또는 메르캅토 기가 절단되어 각각 유리 히드록시, 유리 아미노 또는 유리 메르캅토 기를 형성하는 임의의 기에 결합되어 있는 본 발명의 화합물을 포함한다. 전구약물의 예는, 본 발명의 화합물에 있는 알콜의 아세테이트, 포르메이트 및 벤조에이트 유도체, 및 아민 관능기의 아세트아미드, 포름아미드 및 벤즈아미드 유도체 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
전구약물의 논의는 문헌 ["Smith and Williams' Introduction to the Principles of Drug Design," H.J. Smith, Wright, Second Edition, London (1988); Bundgard, H., Design of Prodrugs (1985), pp. 7-9, 21-24 (Elsevier, Amsterdam); The Practice of Medicinal Chemistry, Camille G. Wermuth et al., Ch 31, (Academic Press, 1996); A Textbook of Drug Design and Development, P. Krogsgaard-Larson and H. Bundgaard, eds. Ch 5, pgs 113 191 (Harwood Academic Publishers, 1991); Higuchi, T., et al., "Pro-drugs as Novel Delivery Systems," A.C.S. Symposium Series, Vol. 14; 또는 Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987]에서 발견될 수 있으며, 이들 모두는 그 전문이 본원에서 참고로 포함된다.
본 발명에 따른 또는 본 발명에 따라 사용하기 위한 화합물은 단독으로, 또는 리포솜, 아주반트 또는 임의의 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제의 존재 하에 다른 화합물과 조합하여 대상체, 예컨대 포유동물, 예를 들어 인간, 소, 양 등으로의 투여에 적합한 형태로 제공될 수 있다. 원하는 경우에, 본 발명에 따른 화합물을 사용한 치료는 본원에 기재된 치료 적응증에 대한 보다 전통적인 기존 요법과 조합될 수 있다. 본 발명에 따른 화합물은 만성적으로 또는 간헐적으로 제공될 수 있다. "만성" 투여는 급성 방식과는 반대로, 연장된 기간 동안 초기 치료 효과 (활성)를 유지하도록 하는 연속 방식으로 화합물(들)을 투여하는 것을 지칭한다. "간헐적" 투여는 중단 없이 연속하여 수행되지는 않지만, 오히려 성질상 주기적인 치료이다. 본원에 사용된 용어 "투여", "투여가능한" 또는 "투여하는"은 본 발명의 화합물을 치료를 필요로 하는 대상체에게 제공하는 것을 의미하는 것으로 이해되어야 한다.
"제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제"는 인간 또는 가축에 사용하기 위해 허용된 바와 같은, 예를 들어, 미국 식품 의약품국 또는 다른 정부 기관에 의해 승인받은 임의의 아주반트, 담체, 부형제, 활택제, 감미제, 희석제, 보존제, 염료/착색제, 향미 증진제, 계면활성제, 습윤제, 분산제, 현탁화제, 안정화제, 등장화제, 용매 또는 유화제를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 화합물은 제약상 허용되는 염의 형태로 투여될 수 있다. 이러한 경우에, 본 발명에 따른 제약 조성물은 이러한 화합물의 염, 바람직하게는 당업계에 공지된 생리학상 허용되는 염을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 사용된 용어 "제약상 허용되는 염"은 그의 염 형태로 사용되는 화학식 I 또는 Ia의 화합물을 포함하는 활성 성분을 의미하며, 특히 여기서 염 형태는 활성 성분의 유리 형태 또는 다른 이전에 개시된 염 형태와 비교하여 개선된 약동학적 특성을 활성 성분 상에 부여한다.
"제약상 허용되는 염"은 산 및 염기 부가염 둘 다를 포함한다. "제약상 허용되는 산 부가염"은, 생물학적으로 또는 달리 바람직하고, 무기 산, 예컨대 염산, 브로민화수소산, 황산, 질산, 인산 등, 및 유기 산, 예컨대 아세트산, 트리플루오로아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 옥살산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 신남산, 만델산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, p-톨루엔술폰산, 살리실산 등으로 형성된, 유리 염기의 생물학적 유효성 및 특성을 보유하는 염을 지칭한다.
"제약상 허용되는 염기 부가염"은 생물학적으로 또는 달리 바람직한, 유리 산의 생물학적 유효성 및 특성을 보유하는 염을 지칭한다. 이들 염은 무기 염기 또는 유기 염기를 유리 산에 첨가함으로써 제조된다. 무기 염기로부터 유래된 염은 나트륨, 칼륨, 리튬, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망가니즈, 알루미늄 염 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 바람직한 무기 염은 암모늄, 나트륨, 칼륨, 칼슘 및 마그네슘 염이다. 유기 염기로부터 유래된 염은 1급, 2급 및 3급 아민, 치환된 아민, 예컨대 자연 발생적 치환된 아민, 시클릭 아민 및 염기성 이온 교환 수지, 예컨대 이소프로필아민, 트리메틸아민, 디에틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민, 에탄올아민, 2-디메틸아미노에탄올, 2-디에틸아미노에탄올, 디시클로헥실아민, 리신, 아르기닌, 히스티딘, 카페인, 프로카인, 히드라바민, 콜린, 베타인, 에틸렌디아민, 글루코사민, 메틸글루카민, 테오브로민, 퓨린, 피페라진, 피페리딘, N-에틸피페리딘, 폴리아민 수지 등의 염을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 용어 "제약상 허용되는 염"은 아세테이트, 락토비오네이트, 벤젠술포네이트, 라우레이트, 벤조에이트, 말레이트, 비카르보네이트, 말레에이트, 비술페이트, 만델레이트, 비타르타레이트, 메실레이트, 보레이트, 메틸브로마이드, 브로마이드, 메틸니트라이트, 에데트산칼슘, 메틸술페이트, 캄실레이트, 뮤케이트, 카르보네이트, 나프실레이트, 클로라이드, 니트레이트, 클라불라네이트, N-메틸글루카민, 시트레이트, 암모늄 염, 디히드로클로라이드, 올레에이트, 에데테이트, 옥살레이트, 에디실레이트, 파모에이트 (엠보네이트), 에스톨레이트, 팔미테이트, 에실레이트, 판토테네이트, 푸마레이트, 포스페이트/디포스페이트, 글루셉테이트, 폴리갈락투로네이트, 글루코네이트, 살리실레이트, 글루타메이트, 스테아레이트, 글리콜릴아르사닐레이트, 술페이트, 헥실레소르시네이트, 서브아세테이트, 히드라바민, 숙시네이트, 히드로브로마이드, 탄네이트, 히드로클로라이드, 타르트레이트, 히드록시나프토에이트, 테오클레이트, 아이오다이드, 토실레이트, 이소티오네이트, 트리에티오다이드, 락테이트, 파노에이트, 발레레이트 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는 모든 허용되는 염을 포함한다.
본 발명의 화합물의 제약상 허용되는 염은 용해도 또는 가수분해 특성을 변형하기 위한 투여량으로서 사용될 수 있거나, 또는 지속 방출 또는 전구약물 제제로 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 화합물의 제약상 허용되는 염은 양이온, 예컨대 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 아연으로부터 형성된 염, 및 염기, 예컨대 암모니아, 에틸렌디아민, N-메틸-글루타민, 리신, 아르기닌, 오르니틴, 콜린, N,N'-디벤질에틸렌-디아민, 클로로프로카인, 디에탄올아민, 프로카인, N-벤질페네틸-아민, 디에틸아민, 피페라진, 트리스(히드록시메틸)아미노메탄 및 테트라메틸암모늄 히드록시드로부터 형성된 염을 포함할 수 있다.
제약 제제는 전형적으로 주사, 흡입, 국소 투여, 세척 또는 선택 치료에 적합한 다른 방식에 의해 이루어지는 제제의 투여 방식에 허용되는 하나 이상 담체를 포함한다. 적합한 담체는 이러한 투여 방식에 사용하기 위해 당업계에 공지된 것들이다.
적합한 제약 조성물은 당업계에 공지된 수단, 및 숙련된 진료의에 의해 결정된 투여 방식 및 용량에 따라 제제화될 수 있다. 비경구 투여를 위해, 화합물은 멸균수 또는 염수, 또는 비-수용성 화합물의 투여에 사용되는 제약상 허용되는 비히클, 예컨대 비타민 K를 위해 사용되는 것들 중에 용해될 수 있다. 경장 투여를 위해, 화합물은 정제, 캡슐로 투여되거나, 또는 액체 형태로 용해될 수 있다. 정제 또는 캡슐은 장 코팅될 수 있거나, 또는 지속 방출을 위한 제제일 수 있다. 방출하려는 화합물을 캡슐화하는 중합체 또는 단백질 마이크로입자, 연고, 겔, 히드로겔 또는 용액을 비롯한 많은 적합한 제제가 공지되어 있으며, 이들은 화합물을 국소적으로 또는 국재적으로 투여하기 위해 사용될 수 있다. 지속 방출 패치 또는 이식물은 장기간에 걸쳐 방출을 제공하기 위해 사용될 수 있다. 숙련된 진료의에게 공지된 많은 기술은 문헌 [Remington: the Science & Practice of Pharmacy by Alfonso Gennaro, 20th ed., Williams & Wilkins, (2000)]에 기재되어 있다. 비경구 투여를 위한 제제는 예를 들어 부형제, 폴리알킬렌 글리콜, 예컨대 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 기원의 오일 또는 수소화 나프탈렌을 함유할 수 있다. 생체적합성, 생분해성 락티드 중합체, 락티드/글리콜리드 공중합체 또는 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 공중합체는 화합물의 방출을 제어하는데 사용될 수 있다. 조절 화합물을 위한 다른 잠재적으로 유용한 비경구 전달 시스템은 에틸렌-비닐 아세테이트 공중합체 입자, 삼투성 펌프, 이식성 주입 시스템 및 리포솜을 포함한다. 흡입을 위한 제제는 부형제, 예를 들어, 락토스를 포함할 수 있거나, 또는 예를 들어 폴리옥시에틸렌-9-라우릴 에테르, 글리코콜레이트 및 데옥시콜레이트를 함유하는 수용액일 수 있거나, 또는 점비액 형태로의 투여를 위한 또는 겔로서의 유성 용액일 수 있다.
본 발명에 따른 화합물 또는 제약 조성물은 경구 또는 비-경구, 예를 들어, 근육내, 복강내, 정맥내, 수조내 주사 또는 주입, 피하 주사, 경피 또는 경점막 경로에 의해 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 발명에 따른 또는 본 발명에서 사용하기 위한 화합물 또는 제약 조성물은 의료 장치 또는 기구, 예컨대 이식물, 이식편, 보철물, 스텐트 등에 의해 투여될 수 있다. 이러한 화합물 또는 조성물을 함유하고 방출하도록 의도된 이식물이 고안될 수 있다. 그 예는 기간에 걸쳐 화합물을 방출하도록 적용된 중합체 물질로 제조된 이식물일 것이다. 화합물은 단독으로, 또는 제약상 허용되는 담체와의 혼합물로서, 예를 들어 고체 제제, 예컨대 정제, 캡슐, 과립, 분말 등; 액체 제제, 예컨대 시럽, 주사 등; 주사, 소적제, 좌제, 페사리로서 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 발명에 따른 또는 본 발명에서 사용하기 위한 화합물 또는 제약 조성물은 흡입 스프레이, 비강, 질, 직장, 설하 또는 국소 경로에 의해 투여될 수 있고, 각각 투여 경로에 적절한 종래 비-독성 제약상 허용되는 담체, 아주반트 및 비히클을 함유하는 적합한 투여량 단위 제제에서 단독으로 또는 함께 제제화될 수 있다.
본 발명의 화합물은 마우스, 래트, 말, 소, 양, 개, 고양이 및 원숭이를 비롯한 동물을 치료하는데 사용될 수 있다. 그러나, 본 발명의 화합물은 또한 다른 유기체, 예컨대 조류 종 (예를 들어, 닭)에서도 사용될 수 있다. 본 발명의 화합물은 또한 인간에 사용하기에 효과적일 수 있다. 용어 "대상체" 또는 대안적으로 본원에 "환자"로서 언급된 용어는 치료, 관찰 또는 실험의 객체가 되는 동물, 바람직하게는 포유동물, 가장 바람직하게는 인간을 지칭하는 것으로 의도된다. 그러나, 본 발명의 화합물, 방법 및 제약 조성물은 동물의 치료에 사용될 수 있다. 따라서, 본원에 사용된 "대상체"는 인간, 비-인간 영장류, 래트, 마우스, 소, 말, 돼지, 양, 염소, 개, 고양이 등일 수 있다. 대상체는 O-GlcNAcase 활성의 조절이 요구되는 상태를 가질 것으로 의심되거나 또는 가질 위험성이 있을 수 있다.
본 발명에 따른 화합물의 "유효량"은 치료 유효량 또는 예방 유효량을 포함한다. "치료 유효량"은 투여량에서 및 필요한 시간 동안, 목적하는 치료 결과, 예컨대 O-GlcNAcase의 억제, O-GlcNAc 수준의 상승, 타우 인산화의 억제, 또는 본원에 기재된 임의의 상태의 치료를 달성하는 유효량을 지칭한다. 화합물의 치료 유효량은 인자, 예컨대 질환 상태, 개체의 연령, 성별 및 체중, 및 개체에서 목적하는 반응을 도출하는 화합물의 능력에 따라 다양할 수 있다. 투여 요법은 최적 치료 반응을 제공하기 위해 조절될 수 있다. 치료 유효량은 또한 치료학상 유익한 효과가 화합물의 임의의 독성 또는 유해한 효과를 능가하는 양이다. "예방 유효량"은 투여량에서 및 필요한 시간 동안, 목적하는 예방 결과, 예컨대 O-GlcNAcase의 억제, O-GlcNAc 수준의 상승, 타우 인산화의 억제, 또는 본원에 기재된 임의의 상태의 예방을 달성하는 유효량을 지칭한다. 전형적으로, 예방 용량은 질환의 초기 단계 이전에 또는 초기 단계에 대상체에서 사용되어, 예방 유효량이 치료 유효량 미만일 수 있도록 한다. 화합물의 치료 또는 예방 유효량을 위한 적합한 범위는 0.1 nM-0.1M, 0.1 nM-0.05M, 0.05 nM-15μM 또는 0.01 nM-10μM로부터의 임의의 정수일 수 있다.
대안적 실시양태에서, O-GlcNAcase 활성의 조절을 필요로 하는 상태의 치료 또는 예방에서, 적절한 투여량 수준은 일반적으로 1일당 대상체 체중 kg당 약 0.01 내지 500 mg일 것이고, 단일 또는 다중 용량으로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 투여량 수준은 1일당 약 0.1 내지 약 250 mg/kg일 것이다. 임의의 특정한 환자에 대한 특정한 용량 수준 및 투여 빈도가 다양해질 수 있고, 사용된 구체적인 화합물의 활성, 그 화합물의 대사 안정성 및 작용 길이, 연령, 체중, 전반적 건강, 성별, 식이상태, 투여 방식 및 시간, 배출 비율, 약물 조합물, 특정한 상태의 중증도 및 환자가 경험한 요법을 비롯한 다양한 인자에 따라 좌우될 것으로 이해될 것이다.
투여량 값은 완화시키려는 상태의 중증도에 따라 달라질 것임을 유념해야 한다. 임의의 특정한 대상체에 대하여, 구체적인 투여 요법은 개별적인 필요성, 및 조성물을 투여하거나 조성물의 투여를 관리하는 사람의 전문적인 판단에 따라 시간에 걸쳐 조정될 수 있다. 본원에 설명된 투여량 범위는 단지 예시적인 것이고, 의학 진료의에 의해 선택될 수 있는 투여량 범위를 제한하지는 않는다. 조성물 중 활성 화합물(들)의 양은 대상체의 질환 상태, 연령, 성별 및 체중과 같은 인자에 따라 달라질 수 있다. 투여 요법은 최적의 치료 반응을 제공하기 위해 조절될 수 있다. 예를 들어, 단일 볼루스가 투여될 수 있거나, 여러 분할 용량이 시간에 따라 투여될 수 있거나, 또는 용량이 치료 상황의 긴급성에 따라 정해지는 바에 비례하게 감소 또는 증가될 수 있다. 비경구 조성물을 투여의 용이성 및 투여량의 균일성을 위해 투여량 단위 형태로 제제화하는 것이 유리할 수 있다. 일반적으로, 본 발명의 화합물은 실질적 독성을 일으키지 않고 사용되어야 하며, 본원에 기재된 바와 같이, 화합물은 치료 용도를 위한 적합한 안전성 프로파일을 나타내어야 한다. 본 발명의 화합물의 독성은 표준 기술을 이용하여, 예를 들어, 세포 배양 또는 실험 동물에서 시험하고 치료 지수, 즉 LD50 (집단의 50% 치사 용량) 및 LD100 (집단의 100% 치사 용량) 사이의 비를 결정함으로써 결정될 수 있다. 그러나, 일부 상황에서, 예컨대 중증 질환 상태에서, 상당히 과량의 조성물을 투여하는 것이 필요할 수 있다.
화학식 I 또는 Ia의 화합물에서, 원자는 그의 천연 동위원소 존재량을 나타낼 수 있거나, 또는 1개 이상의 원자는 동일한 원자 번호를 갖지만 자연에서 우세하게 발견되는 원자 질량 또는 질량수와는 상이한 원자 질량 또는 질량수를 갖는 특정한 동위원소로 인공적으로 풍부화될 수 있다. 본 발명은 화학식 I 또는 Ia의 화합물의 모든 적합한 동위원소 변형을 포함하는 것으로 의도된다. 예를 들어, 수소 (H)의 다양한 동위원소 형태는 경수소 (1H), 중수소 (2H) 및 삼중수소 (3H)를 포함한다. 경수소는 자연에서 발견되는 우세한 수소 동위원소이다. 중수소를 풍부화시키는 것은 특정의 치료 이점, 예컨대 생체내 반감기의 증가 또는 투여량 요건의 감소를 제공할 수 있거나, 또는 생물학적 샘플의 특성화를 위한 표준물로서 유용한 화합물을 제공할 수 있다. 화학식 I 또는 Ia 내의 동위원소-풍부화 화합물은 당업자에게 널리 공지되어 있는 통상의 기술에 의해, 또는 적절한 동위원소-풍부화 시약 및/또는 중간체를 사용하여 본원의 반응식 및 실시예에 기재된 것과 유사한 방법에 의해 과도한 실험 없이 제조될 수 있다.
기타 용도 및 검정
화학식 I 또는 Ia의 화합물은 글리코시다제 효소, 바람직하게는 O-GlcNAcase 효소의 활성을 조절하는 화합물에 대한 스크리닝 검정에 사용될 수 있다. 모델 기질로부터 O-GlcNAc의 O-GlcNAcase-의존성 절단을 억제하는 시험 화합물의 능력은 본원에 기재되거나 당업자에게 공지된 바와 같은 임의의 검정을 이용하여 측정될 수 있다. 예를 들어, 당업계에 공지된 형광 또는 UV-기반 검정이 이용될 수 있다. "시험 화합물"은 임의의 자연 발생 또는 인공적 유래의 화학적 화합물이다. 시험 화합물은 펩티드, 폴리펩티드, 합성 유기 분자, 자연 발생 유기 분자 및 핵산 분자를 포함할 수 있으나 이에 제한되지는 않는다. 시험 화합물은 예를 들어 O-GlcNAc의 O-GlcNAcase-의존성 절단의 억제를 방해함으로써 또는 화학식 I 또는 Ia의 화합물에 의해 유도되는 임의의 생물학적 반응을 방해함으로써 공지된 화합물, 예컨대 화학식 I 또는 Ia의 화합물과 "경쟁"할 수 있다.
일반적으로, 시험 화합물은 화학식 I 또는 Ia의 화합물 또는 다른 참조 화합물과 비교하는 경우에 10% 내지 200%의 임의의 값, 또는 500% 초과 값만큼의 조절을 나타낼 수 있다. 예를 들어, 시험 화합물은 적어도 10% 내지 200%의 임의의 양수 또는 음수만큼의 조절, 또는 적어도 30% 내지 150%의 임의의 양수 또는 음수만큼의 조절 또는 적어도 60% 내지 100%의 임의의 양수 또는 음수만큼의 조절, 또는 100% 초과의 임의의 양수 또는 음수만큼의 조절을 나타낼 수 있다. 음성 조절제인 화합물은 일반적으로 공지된 화합물에 비해 조절을 감소시킬 것인 반면, 양성 조절제인 화합물은 일반적으로 공지된 화합물에 비해 조절을 증가시킬 것이다.
일반적으로, 시험 화합물은 천연 생성물 또는 합성 (또는 반합성) 추출물 둘 다의 큰 라이브러리 또는 당업계에 공지된 방법에 따른 화학물질 라이브러리로부터 확인된다. 약물 발견 및 개발 분야의 숙련자는 시험 추출물 또는 화합물의 정확한 공급원이 본 발명의 방법(들)에 중요하지 않음을 이해할 것이다. 따라서, 실질적으로 임의의 개수의 화학적 추출물 또는 화합물이 본원에 기재된 예시적인 방법을 이용하여 스크리닝될 수 있다. 이러한 추출물 또는 화합물의 예는 식물-, 진균-, 원핵- 또는 동물-기재 추출물, 발효 브로쓰 및 합성 화합물, 뿐만 아니라 기존 화합물의 변형을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 다수의 방법이 또한, 사카라이드-, 지질-, 펩티드- 및 핵산-기재 화합물을 포함하나 이에 제한되지는 않는 임의의 개수의 화학적 화합물의 랜덤 또는 직접 합성 (예를 들어, 반합성 또는 전합성)을 생성하기 위해 이용가능하다. 합성 화합물 라이브러리는 상업적으로 입수가능하다. 대안적으로, 박테리아, 진균, 식물 및 동물 추출물 형태의 천연 화합물의 라이브러리는 바이오틱스(Biotics) (영국 서섹스), 제노바(Xenova) (영국 슬라우), 하버 브란치 오셔노그라픽 인스티튜트(Harbor Branch Oceanographic Institute) (미국 플로리다주 포트 피어스) 및 파마마(PharmaMar) (미국 매사추세츠주)를 비롯한 수많은 공급원으로부터 상업적으로 입수가능하다. 또한, 천연 및 합성 제조 라이브러리는, 원하는 경우에, 당업계에 공지된 방법에 따라, 예를 들어, 표준 추출 및 분별 방법에 의해 제조된다. 또한, 원하는 경우에, 임의의 라이브러리 또는 화합물은 표준 화학적, 물리적 또는 생화학적 방법을 이용하여 용이하게 변형된다.
조 추출물이 O-GlcNAc의 O-GlcNAcase-의존성 절단의 억제 또는 화학식 I 또는 Ia의 화합물에 의해 유도되는 임의의 생물학적 반응을 조절하는 것으로 밝혀진 경우에, 양성 주요 추출물의 추가적 분별은 관찰된 효과를 담당하는 화학적 구성성분을 단리하기 위해 필요하다. 따라서, 추출, 분별 및 정제 방법의 목적은 O-GlcNAcase-억제 활성을 갖는 조 추출물 내에 있는 화학 물질의 주의깊은 특성화 및 확인이다. 화합물의 혼합물에서 활성을 검출하기 위한 본원에 기재된 동일한 검정은 활성 성분을 정제하고 그의 유도체를 시험하기 위해 이용될 수 있다. 이러한 불균질 추출물의 분별 및 정제 방법은 당업계에 공지되어 있다. 원하는 경우에, 치료에 유용한 작용제인 것으로 나타난 화합물은 당업계에 공지된 방법에 따라 화학적으로 변형된다. 치료, 예방, 진단 또는 다른 가치가 있는 것으로 확인된 화합물은 당업계에 공지된, 본원에 기재된 바와 같은 적합한 동물 모델을 이용하여 추후에 분석될 수 있다.
일부 실시양태에서, 화합물은 O-GlcNAcase의 결핍, O-GlcNAcase의 과다발현, O-GlcNAc의 축적, O-GlcNAc의 고갈과 관련된 질환 또는 장애의 연구, 및 O-GlcNAcase의 결핍 또는 과다발현 또는 O-GlcNAc의 축적 또는 고갈과 관련된 질환 및 장애의 치료 연구를 위한 동물 모델의 개발에 유용하다. 이러한 질환 및 장애는 신경변성 질환, 예컨대 알츠하이머병 및 암을 포함한다.
본 발명의 다양한 대안적 실시양태 및 실시예는 본원에 기재되어 있다. 이러한 실시양태 및 실시예는 예시적이고, 본 발명의 범주를 제한하는 것으로서 해석되지는 않아야 한다.
실시예
다음의 실시예는 본 발명의 실시양태를 설명하기 위한 것이고, 제한 방식으로 해석되는 것으로 의도되지는 않는다.
약어
AIBN = 2,2'-아조비스이소부티로니트릴
DAST = (디에틸아미노)황 트리플루오라이드
DCM = 디클로로메탄
DIBAL-H = 디이소부틸알루미늄 히드라이드
DMAP = 4-디메틸아미노피리딘
DMF = N,N-디메틸포름아미드
DMP = 데스-마르틴 퍼아이오디난
DMSO = 디메틸 술폭시드
EDC = 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드
NBS = N-브로모숙신이미드
PMBBr = 파라-메톡시 벤질 브로마이드
TBAB = 테트라-n-부틸암모늄 브로마이드
TBAF = 테트라-n-부틸암모늄 플루오라이드
TEA = 트리에틸아민
TEAF = 테트라에틸암모늄 플루오라이드
TEMPO = 2,2,6,6-테트라메틸-피페리딘-1-옥시 자유 라디칼
TFA = 2,2,2-트리플루오로아세트산
THF = 테트라히드로푸란
중간체 (5)의 합성
1,3,4,6-테트라-O-아세틸-2-데옥시-2-이소티오시아네이트-β-D-글루코피라노스 (5)
<반응식 I>
(2S,3R,4R,5S,6R)-6-(아세톡시메틸)-3-아미노-테트라히드로-2H-피란-2,4,5-트리일 트리아세테이트 히드로클로라이드 (4)를 화합물 1로부터 문헌: [D. J. Silva etc. J. Org. Chem., 1999, 64(16), 5926-5929]에 따라 제조하였다.
(2S,3R,4R,5S,6R)-6-(아세톡시메틸)-3-이소티오시아네이토-테트라히드로-2H-피란-2,4,5-트리일 트리아세테이트 (5)를 화합물 4로부터 문헌: [M.V. Gonzalez etc. Carbohydrate Research, 1986, 154, 49-62]에 따라 제조하였다.
실시예 1
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
<반응식 II>
단계 1
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(아세톡시메틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디일 디아세테이트 (6): 디클로로메탄 (20 mL) 중 (3R,4R,5S,6R)-6-(아세톡시메틸)-3-이소티오시아네이토-테트라히드로-2H-피란-2,4,5-트리일 트리아세테이트 (2 g, 5.14 mmol)의 용액에 5~10℃에서 디메틸아민 히드로클로라이드 (460 mg, 5.64 mmol) 및 트리에틸아민 (675 mg, 6.68 mmol)을 첨가하였다. 3시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 TFA (1.6 g, 14 mmol)로 실온에서 밤새 처리하였다. 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 (50 mL)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 1 % MeOH로 용리시키면서 정제하여 화합물 6 (1.65 g, 85 %)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (7): 메탄올 (20 mL) 중 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(아세톡시메틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디일 디아세테이트 (1.65 g, 4.41 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (25 mg, 0.18 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하여 고체를 수득하였다. 이것을 여과에 의해 수집하고, 차가운 메탄올로 세척하고, 건조시켰다. 생성물 7 (1.05 g, 94 %)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
단계 3
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (8): DMF (50mL) 중 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (1 g, 4.03 mmol), DMAP (49.2 mg, 0.40 mmol) 및 트리에틸아민 (611 mg, 6.05 mmol)의 용액에 tert-부틸클로로디메틸실란 (665 mg, 4.43 mmol)을 첨가하였다. 50℃에서 밤새 교반한 후, 생성된 혼합물을 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 2 -5 % MeOH로 용리시키면서 정제하여 화합물 8 (1.0 g, 65 %)을 황색 고체로서 수득하였다.
단계 4
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-N,N-디메틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-아민 (9): DMF (20 mL) 중 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (1 g, 2.76 mmol)의 용액에 수소화나트륨 (568 mg, 16.6 mmol, 70 %)을 15℃에서 첨가하고, 이어서 1-(브로모메틸)-4-메톡시벤젠 (2.22 g, 11.0 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 냉수 (50 mL)를 첨가하여 켄칭하고, 디클로로메탄 (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10 -25 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 9 (1.2 g, 64 %)를 황색 오일로서 수득하였다.
단계 5
((3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)메탄올 (10): THF (100 mL) 중 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-N,N-디메틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-아민 (9.5 g, 15.8 mmol)을 TBAF (8.27 g, 31. 6 mmol)로 실온에서 밤새 처리하였다. 생성된 용액을 염수 (200 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x200 mL)로 추출하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 용매를 제거한 후, 잔류물을 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 1 -2.5 % MeOH로 용리시키면서 정제하여 화합물 10 (7.0 g, 86 %)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 6
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-카르브알데히드 (11): 디클로로메탄 (25 mL) 및 H2O (5 mL) 중 ((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)메탄올 (500 mg, 1.0 mmol), TBAB (16.5 mg, 0.05 mmol), KHCO3 (461 mg, 4.6 mmol) 및 TEMPO (8 mg, 0.05 mmol)의 혼합물에 15℃에서 NBS (201 mg, 1.13 mmol)를 첨가하였다. 30분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 포화 Na2SO3 (5 mL)에 의해 켄칭하였다. 유기 층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 응축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 20 -30 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 11 (320 mg, 75 % 순도)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 7
1-((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에탄올 (12): THF (10 mL) 중 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-카르브알데히드 (260 mg, 0.53 mmol)의 용액에 메틸마그네슘 브로마이드 (0.3 mL, THF 중 3M)를 첨가하였다. 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 포화 NH4Cl (수성, 20 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 1 -2 % MeOH로 용리시키면서 정제하여 화합물 12 (250 mg, 74 %, 2종의 부분입체이성질체, 더 빠르게 이동하는 것:더 느리게 이동하는 것 = 1:5)를 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 8
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (13a) 및 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (13, 실시예 1): 디클로로메탄 (20 mL) 중 1-((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에탄올 (315 mg, 0.63 mmol, 2종의 부분입체이성질체의 1:5 혼합물)의 용액을 TFA (2 mL)로 실온에서 1시간 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 [(3#-애질런트(Agilent) 1200 정제용 HPLC): 칼럼, 선파이어(SunFire) 정제용 C18,19*50mm 5um; 이동상, 0.03 % NH4OH 및 CH3CN (10분 동안 10 % CH3CN에서 45 %까지)을 갖는 물; 검출기, UV 220nm] 하에 정제하여 더 빠르게 용리하는 이성질체 (13a, 6.9 mg, 4.2 %)를 백색 고체로서:
및 더 느리게 용리하는 이성질체 (13, 실시예 1, 52.8 mg, 32 %)를 백색 고체로서:
수득하였다.
실시예 2
(3aR, 5R, 6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시에틸)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
<반응식 III>
단계 1
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(아세톡시메틸)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디일 디아세테이트 (14): 디클로로메탄 (500 mL) 중 (3R,4R,5S,6R)-6-(아세톡시메틸)-3-이소티오시아네이토-테트라히드로-2H-피란-2,4,5-트리일 트리아세테이트 (59 g, 151 mmol)의 용액에 프로판-1-아민 (9.4 g, 159 mmol)을 0℃에서 교반하면서 적가하였다. 1시간 동안 교반한 후, 반응 용액을 트리플루오로아세트산 (130 g, 1.34 mol)으로 실온에서 밤새 처리하였다. 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 (300 mL)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 1 % MeOH로 용리시키면서 정제하여 화합물 14 (50 g, 84 %)를 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(히드록시메틸)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (15): 메탄올 (800 mL) 중 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(아세톡시메틸)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디일 디아세테이트 (100 g, 257 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (18 g, 130 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 40℃에서 밤새 교반한 다음 0℃로 냉각시켜 고체를 수득하였다. 이를 여과에 의해 수집하고, 차가운 메탄올로 세척하고, 건조시켰다. 생성물 15 (50 g, 74 %)를 백색 고체로서 수득하였다.
단계 3
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-디히드록시-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(프로필)카르바메이트 (16): 메탄올 (800 mL) 중 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(히드록시메틸)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (67.6 g, 258 mmol)의 용액에 (Boc)2O (83 g, 384 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 3시간 동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 1 % MeOH로 용리시키면서 정제하여 화합물 16 (53 g, 46 %)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 4
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-6,7-디히드록시-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(프로필)카르바메이트 (17): 디클로로메탄 (300 mL) 중 tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-디히드록시-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(프로필)카르바메이트 (45 g, 124 mmol), DMAP (760 mg, 6 mmol) 및 트리에틸아민 (25.1 g, 248 mmol)의 교반 용액에 tert-부틸클로로디메틸실란 (22.4 g, 149 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 6시간 동안 교반한 후, 혼합물을 응축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10 -30 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 17 (43 g 65 %)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 5
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(프로필)카르바메이트 (18): DMF (300 mL) 중 tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-6,7-디히드록시-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(프로필)카르바메이트 (20 g, 42 mmol)의 용액에 수소화나트륨 (10 g, 417 mmol)을 15℃에서 부분씩 첨가한 다음, 1-(브로모메틸)-4-메톡시벤젠 (33.8 g, 168 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 1.5시간 동안 교반하고, 냉수 (100 mL)를 첨가하여 켄칭하고, 디클로로메탄 (5x100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10 -25 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 18 (20 g, 64.8 %)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 6
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(히드록시메틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(프로필)카르바메이트 (19): 테트라히드로푸란 (100 mL) 중 tert-부틸 (5R,6S,7R)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(프로필)카르바메이트 (19 g, 26.50 mmol)의 용액에 실온에서 밤새 TBAF (13.8 g, 53 mmol)로 처리하였다. 생성된 용액을 염수 (200 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x200 mL)로 추출하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 용매를 제거한 후, 잔류물을 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10-30 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 19 (14.5 g, 91 %)를 황색 오일로서 수득하였다.
단계 7
tert-부틸 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-포르밀-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(프로필)카르바메이트 (20): 디클로로메탄 (60 mL) 및 H2O (12 mL) 중 tert-부틸 (5R,6S,7R)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(프로필) 카르바메이트 (2 g, 3.32 mmol), KHCO3 (1.49bg, 15 mmol), TBAB (53 mg, 0.16 mmol) 및 TEMPO (26 mg, 0.17 mmol)의 혼합물에 15℃에서 NBS (592 mg, 3.33 mmol)를 첨가하였다. 30분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 포화 Na2SO3 (10 mL)에 의해 켄칭하였다. 유기 층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 응축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 20 -30 % AcOEt로 용리시키면서 정제하여 화합물 20 (1.2 g, 순도 60 %)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 8
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-1-히드록시에틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(프로필)카르바메이트 (21): 테트라히드로푸란 (20 mL) 중 tert-부틸 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5-포르밀-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(프로필)카르바메이트 (600 mg, 1.00 mmol, 60 % 순도)의 용액에 메틸마그네슘 브로마이드 (1 mL, THF 중 3M, 3 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 10분 동안 교반한 후, 반응물을 포화 NH4Cl (수성, 20 mL)로 켄칭하고, 디클로로메탄 (4x10 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 30 % AcOEt로 용리시키면서 정제하여 화합물 21 (300 mg, 81 %, 2종의 부분입체이성질체, 더 빠르게 이동하는 것:더 느리게 이동하는 것 = 1:3)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 9
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시에틸)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (22): 20 mL 디클로로메탄 중 tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(프로필)카르바메이트 (300 mg, 0.49 mmol, 2종의 부분입체이성질체의 혼합물, 더 빠르게 이동하는 것:더 느리게 이동하는 것 = 1:3)의 용액을 2 mL TFA로 처리하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 생성된 혼합물을 진공 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 [(애질런트 1200 검출), 칼럼, 19*150mm; 이동상, 0.03% NH4OH 및 CH3CN (10분 내에 10% CH3CN에서 45 %까지)을 갖는 물; 검출기, 254nm 220nm]을 사용하여 정제하여 화합물 22 (실시예 2) (TFA 염, 143.1 mg, 75 %)를 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 3
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(2-히드록시프로판-2-일)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
<반응식 IV>
단계 1
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(아세톡시메틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디일 디아세테이트 (23): CH3CN (1 L) 중 (3R,4R,5S,6R)-2,4,5-트리아세톡시-6-(아세톡시메틸)-테트라히드로-2H-피란-3-아미늄 클로라이드 (100 g, 261 mmol)의 용액에 메틸 이소티오시아네이트 (21 g, 287 mmol), 트리에틸아민 (29 g, 287 mmol)을 첨가하였다. 60℃에서 12시간 동안 교반한 후, 생성된 용액을 TFA (110 g, 0.96 mol)로 실온에서 밤새 처리한 다음, 포화 중탄산나트륨 (1 L)으로 세척하였다. 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 1 % MeOH로 용리시키면서 정제하여 화합물 23 (150 g, 87 %)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(히드록시메틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올(24): 메탄올 (1 L) 중 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(아세톡시메틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디일 디아세테이트 (150 g, 417 mmol)의 용액을 탄산칼륨 (11.5 g, 83 mmol)으로 처리하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하여 고체를 수득하였다. 이를 여과에 의해 수집하고, 차가운 메탄올로 세척하고, 건조시켰다. 생성물 24 (85 g, 87 %)를 황색 고체로서 수득하였다.
단계 3
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-디히드록시-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (25): 메탄올 (600 mL) 중 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(히드록시메틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (85 g, 363 mmol)의 용액을 Boc2O (117.7 g, 540 mmol) 및 트리에틸아민 (73.3 g, 726 mmol)으로 처리하였다. 생성된 용액을 45℃에서 밤새 교반한 다음, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 2.5 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 화합물 25 (90 g, 74 %)를 황색 고체로서 수득하였다.
단계 4
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-6,7-디히드록시-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (26): 디클로로메탄 (200 mL) 중 tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-디히드록시-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (30 g, 90 mmol), DMAP (550 mg, 4.5 mmol) 및 트리에틸아민 (18.2 g, 180 mmol)의 혼합물에 0℃에서 tert-부틸클로로디메틸실란 (16.3 g, 108 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 4시간 동안 교반한 다음, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 1 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 화합물 26 (20 g, 50 %)을 백색 고체로서 수득하였다.
단계 5
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (27): DMF (150 mL) 중 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-6,7-디히드록시-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (20 g, 45 mmol)의 용액에 수소화나트륨 (10.7 g, 446 mmol)을 0℃에서 부분씩 첨가하고, 이어서 1-(브로모메틸)-4-메톡시벤젠 (36 g, 179 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 냉수 (200 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 x 500 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (5 x 200 mL)로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 27 (21 g, 68 %)을 황색 액체로서 수득하였다.
단계 6
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(히드록시메틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (28): THF (30 mL) 중 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (1.54 g, 2.24 mmol)의 용액을 TBAF (1.17 g, 4.5 mmol)로 실온에서 밤새 처리하였다. 생성된 용액을 염수 (20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 용매를 제거한 후, 잔류물을 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 20 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 28 (0.8 g, 62 %)을 황색 고체로서 수득하였다.
단계 7
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(tert-부톡시카르보닐(메틸)아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-카르복실산 (29): 디클로로메탄 (30 mL) 및 H2O (6 mL) 중 tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(히드록시메틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (1 g, 1.74 mmol), KHCO3 (780 mg, 7.8 mmol), TBAB (28 mg, 0.09 mmol) 및 TEMPO (14 mg, 0.09 mmol)의 혼합물을 NBS (620 mg, 3.5 mmol)로 실온에서 밤새 처리하였다. 반응 혼합물을 염산을 사용하여 산성 (pH 3)으로 조정한 다음, 디클로로메탄 (3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 20~50 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 29 (600 mg, 58 %)를 백색 고체로서 수득하였다.
단계 8
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-메틸 6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-2-(tert-부톡시카르보닐)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-카르복실레이트 (30): 메탄올 (30 mL) 중 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(tert-부톡시카르보닐(메틸)아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-카르복실산 (600 mg, 1.02 mmol)의 용액을 EDC (392 mg, 2.04 mmol)로 실온에서 2시간 동안 처리하였다. 용매를 제거한 후, 잔류물을 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 20 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 30 (510 mg, 83 %)을 수득하였다.
단계 9
tert-부틸 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5-(2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (31) 및 2-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)프로판-2-올 (31a): THF (20 mL) 중 화합물 30 (510 mg)을 메틸마그네슘 클로라이드 (1 mL, THF 중 3M)로 실온에서 2시간 동안 처리하였다. 반응물을 염수 (20 mL)로 켄칭하고, 디클로로메탄 (3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 20 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 31 (308 mg, 57 %)을 황색 오일로서 수득하였고;
이어서, 디클로로메탄 중 1% MeOH로 용리시키면서 정제하여 31a (152 mg, 31%)를 백색 고체로서 수득하였다.
단계 10
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(2-히드록시프로판-2-일)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (32): DCM (20 mL) 중 tert-부틸 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(2-히드록시프로판-2-일)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (200 mg, 0.33 mmol)의 용액을 트리플루오로아세트산 (2 mL)으로 실온에서 밤새 처리하였다. 반응 혼합물을 응축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 [(3#-애질런트 1200 검출 정제용 HPLC): 칼럼, C18, 19*150mm, 5um; 이동상, 0.03% 암모니아 및 CH3CN (10분 내에 10 % CH3CN에서 45 %까지)을 갖는 물; 검출기, UV220nm]을 사용하여 정제하여 화합물 32 (실시예 3) (67.9 mg, 78 %)를 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 4
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
<반응식 V>
단계 1
1-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에타논 (33): 디클로로메탄 (25 mL) 중 1-((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에탄올 (700 mg, 1.39 mmol, 부분입체이성질체의 혼합물: 더 빠르게 이동하는 것:더 느리게 이동하는 것 = 1:5)의 용액을 DMP (1.18 g, 2.78 mmol)로 실온에서 2시간 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 포화 Na2S2O4 (25 mL) 및 포화 NaHCO3 (25 mL)에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (2 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 10 % AcOEt를 사용하여 정제하여 화합물 33 (550 mg, 71 %)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2
2-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)프로판-2-올 (34): THF (20 mL) 중 1-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에타논 (500 mg, 1.00 mmol)의 용액을 메틸마그네슘 브로마이드 (1 mL, THF 중 3M)로 실온에서 1시간 동안 처리한 다음, 염수 (50 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 1 % 메탄올을 사용하여 정제하여 화합물 34 (480 mg, 84 %)를 황색 오일로서 수득하였다.
단계 3
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (그의 TFA 염으로서의 35): 디클로로메탄 (20 mL) 중 2-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)프로판-2-올 (480 mg, 0.93 mmol)의 용액을 TFA (2 mL)로 실온에서 1시간 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 [(3#-애질런트 1200 정제용 HPLC): 칼럼, 선파이어 정제용 C18,19*50mm 5um; 이동상, 0.03 % NH4OH 및 CH3CN (10분 내에 10 % CH3CN에서 45 %까지)를 갖는 물; 검출기, UV 220nm]을 사용하여 정제하여 화합물 35 (실시예 4) (TFA 염, 238 mg, 92 %)를 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 5
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(2-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
<반응식 VI>
단계 1
(3aR,5R,6R,7R,7aR,E)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5-(2-메톡시비닐)-N,N-디메틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-아민 (37): THF (30 mL) 중 Ph3PCH2OCH3Br (2.0 g, 5.90 mmol)의 용액을 t-BuOK (645 mg, 5.76 mmol)로 -10℃에서 30분 동안 처리하고, 이어서 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-카르브알데히드 (700 mg, 1.37 mmol)를 첨가하였다. 0℃에서 3시간 동안 교반한 후, 생성된 용액을 빙수 (20 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10 - 50 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 생성물 37 (100 mg, 14 %)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2
2-((3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에탄올 (38): -5℃에서 아세토니트릴 (20 mL) 중 37 (100 mg, 0.18 mmol)의 차가운 용액에 물 (10 mL) 중 Hg(OAc)2 (68 mg, 0.21 mmol)의 용액을 적가하였다. 0℃에서 4시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 물 (1.6 mL) 중 아이오딘화칼륨 (40 mg, 0.24 mmol)으로 10분 동안 처리하였다. 반응 용액을 물로 켄칭하고, 디클로로메탄 (40 mL)으로 추출하고, MgSO4 상에서 건조시켰다. 용매를 제거하여 조 2-((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)아세트알데히드를 수득하였다. 건조 THF (20 mL) 중 조 생성물의 용액에 NaBH4 (16 mg, 0.42 mmol)를 0℃에서 부분씩 첨가하였다. 0℃에서 밤새 교반한 후, 반응 용액을 물 (25 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 포화 수성 NH4Cl로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 20 - 50 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 생성물 38 (50 mg, 48 %)을 밝은 황색 오일로서 수득하였다.
단계 3
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(2-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (39): 디클로로메탄 (20 mL) 중 2-((3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3, 2-d]티아졸-5-일)에탄올 (100 mg, 0.18 mmol)의 용액을 TFA로 실온에서 밤새 처리하였다. 용매를 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건: (애질런트 1200 정제용 HPLC: 칼럼, 선 파이어 정제용 C18; 이동상, 0.03 % 트리플루오로아세트산 및 CH3CN (시간 10 내에 10 %에서 20 %까지)을 갖는 물; 검출기, 220 nm.)을 사용하여 정제하여 생성물 39 (실시예 5) (5.0 mg, 11 %)를 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 6 & 7
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-에틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 및 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-비닐-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
<반응식 VII>
단계 1
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-N,N-디메틸-5-비닐-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-아민 (40): THF (70 mL) 중 메틸트리페닐포스포늄 브로마이드 (5.9 g, 16.5 mmol)의 현탁액에 n-BuLi (5.9 ml, THF 중 2.5 M)로 0℃에서 30분 동안 처리하고, 이어서 THF (10 mL) 중 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-카르브알데히드 (1.6 g, 3.29 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 켄칭하고, 디클로로메탄 (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 유기 상을 합하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 30 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 40 (520 mg, 순도 57 %, LC-MS에 의함)을 황색 오일로서 수득하였다. 이 물질을 후속 단계에 추가의 정제 없이 사용하였다.
단계 2
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-에틸-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-N,N-디메틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-아민 (41): 상기 조 화합물 2의 용액 (300 mg, 순도 57 %, LC - MS에 의함)을 에탄올 (20 mL) 중에 용해시키고, 라니(Ranney) Ni (200 mg)로 H2 분위기 하에 실온에서 밤새 처리하였다. 여과한 후, 유기 용액을 농축시켜 조 화합물 41 (260 mg, 순도 54 %, LC-MS에 의함)을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가의 정제 없이 사용하였다.
단계 3
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-에틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (42): 디클로로메탄 (10 mL) 중 상기 조 생성물 41 (260 mg, 순도 54 %, LC - MS에 의함)의 용액을 TFA (1 mL)으로 실온에서 4시간 동안 처리하였다. 용액을 NH4OH를 사용하여 pH를 8로 조정한 다음, 응축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 (애질런트 1200 정제용 HPLC: 칼럼, 선파이어 정제용 C18,19*50mm 5um; 이동상, 0.03 % NH4OH 및 CH3CN (10분 내에 10 % CH3CN에서 45 %까지)을 갖는 물; 검출기, UV 220nm)을 사용하여 정제하여 화합물 42 (실시예 6) (38 mg)를 백색 고체로서 수득하였다.
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-비닐-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (43): 디클로로메탄 (10 mL) 중 상기 조 생성물 40 (220 mg, 순도 57 %, LC-MS에 의함)의 용액을 TFA (1 mL)로 실온에서 4시간 동안 처리하였다. 용액을 NH4OH를 사용하여 pH를 8로 조정한 다음, 응축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 (애질런트 1200 정제용 HPLC: 칼럼, 선파이어 정제용 C18,19*50mm 5um; 이동상, 0.03 % NH4OH 및 CH3CN (10분 내에 10 % CH3CN에서 45 %까지)을 갖는 물; 검출기, UV 220nm)을 사용하여 정제하여 화합물 43 (실시예 7) (35.7 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 8
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-에틸-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
<반응식 VIII>
단계 1
tert-부틸 (3aR,5R,6R,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5-비닐-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (45): 테트라히드로푸란 중 메틸트리페닐포스포늄 브로마이드 (1.85 g, 5.18 mmol)의 현탁액 (35 mL)을 n-BuLi (1.9 ml, 2.5M)로 0℃에서 30분 동안 처리하고, 이어서 THF (5 mL) 중 tert-부틸 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-포르밀-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (44) (10에서 11로의 전환에 대해 기재된 바와 동일한 절차에 의해 화합물 28로부터 제조됨) (0.6 g, 1.05 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하고, 물 (25 mL)로 켄칭하고, 디클로로메탄 (3 x 25 ml)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 20 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 조 화합물 45 (220 mg, 순도 50 %, LC-MS에 의함)를 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2
tert-부틸 (3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-에틸-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (46): 상기 조 화합물 45 (220 mg, 순도 50 %)의 용액을 에탄올 (15 mL) 중에 용해시키고, 라니 Ni (100 mg)로 H2 분위기 하에 실온에서 밤새 처리하였다. 여과한 후, 유기 용액을 농축시켜 조 화합물 46 (200 mg, 순도 48 %, LC-MS에 의함)을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가의 정제 없이 사용하였다.
단계 3
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-에틸-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (47): 디클로로메탄 (10 mL) 중 상기 조 생성물 46 (200 mg, 순도 48 %, LC-MS에 의함)의 용액을 TFA (1 mL)로 실온에서 4시간 동안 처리하였다. 용액을 NH4OH를 사용하여 pH를 8로 조정한 다음, 응축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 (애질런트 1200 정제용 HPLC: 칼럼, 선파이어 정제용 C18,19*50mm 5um; 이동상, 0.03 % NH4OH 및 CH3CN (10분 내에 10 % CH3CN에서 45 %까지)을 갖는 물; 검출기, UV 220nm)을 사용하여 정제하여 표제 화합물 47 (실시예 8) (7.6 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 9
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
<반응식 IX>
단계 1
1-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에타논 (33): 디클로로메탄 (20 mL) 중 1-((3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일) 에탄올 (450 mg, 0.90 mmol, 부분입체이성질체의 혼합물, 더 빠르게 용리하는 이성질체:더 느리게 용리하는 이성질체 = 1:5, HPLC 및 1H NMR에 의함)의 용액을 데스-마르틴(Dess-Martin) 시약 (760 mg, 1.80 mmol)으로 실온에서 2시간 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 Na2S2O3 용액 (20 mL) 및 포화 수성 NaHCO3 용액 (20 mL)에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (2 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 2 - 3 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 화합물 33 (400 mg, 88 %)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 2
(R)-1-((3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에탄올 (48) 및 (S)-1-((3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에탄올 (48a): 메탄올 (10 mL) 중 1-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에타논 (400 mg, 0.80 mmol)의 용액을 NaBH4 (150 mg, 3.95 mmol)로 실온에서 1시간 동안 처리하였다. 반응물을 물 (10 mL)에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 키랄-HPLC에 의해 헥산 중 20 % 에탄올로 용리시키면서 정제하여 화합물 48 (키랄-HPLC에 의해, 더 느리게 용리하는 이성질체, 270 mg, 67 %)을 밝은 황색 오일로서
및 화합물 48a (키랄-HPLC에 의해, 더 빠르게 용리하는 이성질체, 113 mg, 28 %)를 밝은 황색 오일로서
수득하였다.
단계 3
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-플루오로에틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-N,N-디메틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-아민 (50): 디클로로메탄 (10 mL) 중 (R)-1-((3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에탄올 (280 mg, 0.56 mmol)의 용액을 DAST (900 mg, 5.59 mmol)로 -78℃에서 10분 동안 및 0℃에서 1시간 동안 처리하였다. 반응물을 포화 수성 Na2CO3 용액 (30 mL)에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (2 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 1 - 2 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 화합물 50 (240 mg, 85 %)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 4
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (51): 디클로로메탄 (20 mL) 중 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-플루오로에틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-N,N-디메틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-아민 (240 mg, 0.48 mmol)의 용액을 TFA (2 mL)로 실온에서 1시간 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 [(애질런트 1200 정제용 HPLC): 칼럼, 선파이어 정제용 C18, 19 * 50 mm 5 um; 이동상, 0.03 % NH4OH 및 CH3CN (10분 내에 10 % CH3CN에서 45 %까지)을 갖는 물; 검출기, UV 220nm] 하에 정제하여 화합물 51 (실시예 9) (30 mg, 24 %)을 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 10 및 11
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 및 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
<반응식 X>
단계 1
1-((3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)-2,2,2-트리플루오로에탄올 (52, 2종의 부분입체이성질체의 혼합물): THF (20 mL) 중 TBAF (107 mg, 0.41 mmol) 및 4Å 분자체의 교반 혼합물에 THF (5 mL) 중 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-카르브알데히드 (1) (400 mg, 0.82 mmol) 및 TMS-CF3 (230 mg, 1.64 mmol)의 용액을 0℃에서 첨가하였다. 0℃에서 4시간 동안 교반한 후, 반응물을 염수 (30 mL)에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 2 - 3 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 화합물 52 (300 mg, 65 %, 부분입체이성질체의 혼합물, 더 빠르게 용리하는 이성질체:더 느리게 이동하는 이성질체 = 1:2, 키랄-HPLC에 의함)를 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 2
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (53) 및 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (54): 디클로로메탄 (20 mL) 중 1-((3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)-2,2,2-트리플루오로에탄올 (52, 이전 단계로부터의 2종의 부분입체이성질체의 혼합물) (400 mg, 0.72 mmol)의 용액을 TFA (2 mL)로 실온에서 1시간 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 [(애질런트 1200 정제용 HPLC): 칼럼, 선파이어 정제용 C18, 19 * 50 mm 5 um; 이동상, 0.03 % NH4OH 및 CH3CN (10분 내에 10 % CH3CN에서 45 %까지)을 갖는 물; 검출기, UV 220nm] 하에 정제하여 화합물 53 (실시예 10) (더 빠르게 용리하는 이성질체, 62 mg, 27 %)을 백색 고체로서:
및 화합물 54 (실시예 11) (더 느리게 용리하는 이성질체, 55 mg, 24 %)를 백색 고체로서:
수득하였다.
실시예 12
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(1,1-디플루오로에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
<반응식 XI>
단계 1
(S)-1-((3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에탄올 (55): 디클로로메탄 (10 mL) 중 1-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에타논 (280 mg, 0.56 mmol)의 용액을 (디에틸아미노)황 트리플루오라이드 (451 g, 2.80 mol) 및 에탄올 (5.2 mg, 0.11 mmol)로 실온에서 밤새 처리하였다. 이어서, 반응물을 포화 수성 탄산나트륨 용액 (50 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 응축시켜 조 생성물 55 (140 mg)를 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가의 정제 없이 사용하였다.
단계 2
1-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에타논 (56): 디클로로메탄 (10 mL) 중 조 생성물 2 (140 mg, 0.27 mmol, 1.00 당량)의 용액을 TFA (1 mL)로 실온에서 2시간 동안 처리하고, 이어서 응축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 [(정제용 HPLC): 칼럼, 19*150mm; 이동상, 0.03% 암모니아 및 CH3CN (10분 내에 10 % CH3CN에서 35 %까지)을 갖는 물; 검출기, 220nm.]을 사용하여 정제하여 표제 화합물 56 (실시예 12) (76.3 mg, 40 %)을 백색 고체로서 수득하였다.
다음의 실시예를 상기 요약된 반응식 및 실시예와 유사한 절차에 따라 합성하였다.
표 1
실시예 137 및 138
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(1-히드록시시클로펜틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 및 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(1-히드록시시클로펜트-3-에닐)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
<반응식 XII>
단계 1
4-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)헵타-1,6-디엔-4-올. THF (15 mL) 중 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-메틸 2-(tert-부톡시카르보닐(메틸)아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-카르복실레이트 (1.0 g, 1.66 mmol)의 용액을 알릴마그네슘 클로라이드 (8.0 mL, THF 중 0.5 M)로 실온에서 1시간 동안 처리하였다. 반응물을 수성 NH4Cl (20 mL)에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 1 % 메탄올을 사용하여 정제하여 표제 화합물 (0.75 g, 81 %)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2
1-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)시클로펜트-3-에놀. 디클로로메탄 (10 mL) 중 화합물 57 (0.60 g, 1.08 mmol)의 용액에 질소 분위기 하에 그럽스 촉매 (0.19 g, 0.22 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 12시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 30 % - 40 % 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 화합물 58 (0.35 g, 61 %)을 회색 오일로서 수득하였다.
단계 3
1-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)시클로펜탄올. 메탄올 (20 mL) 중 화합물 58 (0.35 g, 0.67 mmol) 및 Pd/C (0.10 g)의 혼합물을 수소 분위기 하에 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 30 % - 40 % 에틸 아세테이트로 정제하여 조 화합물 59 (300 mg)를 황색 오일로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가의 정제 없이 사용하였다.
단계 4
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(1-히드록시시클로펜틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올: 디클로로메탄 (5 mL) 중 상기 화합물 59 (100 mg)의 용액을 TFA (0.5 mL)로 실온에서 4시간 동안 처리하였다. 반응 용액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 [(애질런트 1200 정제용 HPLC): 칼럼, 선파이어 정제용 C18,19 * 50 mm 5 um; 이동상, 0.03 % NH4OH 및 CH3CN (10분 내에 10 % CH3CN에서 45 %까지)을 갖는 H2O; 검출기, UV 220 nm]을 사용하여 정제하여 화합물 60 (실시예 137) (5.0 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
단계 5
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(1-히드록시시클로펜트-3-에닐)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올: 디클로로메탄 (5 mL) 중 화합물 58 (100 mg, 0.19 mmol)의 용액을 TFA (0.5 mL)로 실온에서 4시간 동안 처리하였다. 반응 용액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 [(애질런트 1200 정제용 HPLC): 칼럼, 선파이어 정제용 C18,19 * 50 mm 5 um; 이동상, 0.03 % NH4OH 및 CH3CN (10분 내에 10 % CH3CN에서 45 %까지)을 갖는 H2O; 검출기, UV 220 nm]을 사용하여 정제하여 화합물 61 (실시예 138) (15.0 mg, 27 %)을 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 139 및 140
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(2-플루오로프로판-2-일)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 및 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(메틸아미노)-5-(프로프-1-엔-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올.
<반응식 XIII>
단계 1
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(2-플루오로프로판-2-일)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-N-메틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-아민 및 (3aR,5R,6R,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-N-메틸-5-(프로프-1-엔-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-아민. 디클로로메탄 (20 mL) 중 2-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)프로판-2-올 (450.0 mg, 0.90 mmol)의 용액에 -78℃에서 DAST (720.0 mg, 4.47 mmol)를 첨가하였다. 0℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응물을 수성 탄산칼륨에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (2 x 50 mL)으로 추출하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 62와 63의 혼합물 (400.0 mg)을 황색 오일로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가의 정제 없이 사용하였다:
단계 2
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(2-플루오로프로판-2-일)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 및 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(메틸아미노)-5-(프로프-1-엔-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올. 디클로로메탄 (20 mL) 중 상기 조 생성물 (400.0 mg)의 용액을 트리플루오로아세트산 (2 mL)으로 실온에서 2시간 동안 처리하였다. 휘발성 물질을 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 [(애질런트 1200 정제용 HPLC): 칼럼, 선파이어 정제용 C18,19 * 50 mm 5 um; 이동상, 0.03 % TFA 및 CH3CN (10분 내에 10 % CH3CN에서 45 %까지)을 갖는 H2O; 검출기, UV 220 nm]을 사용하여 정제하여 화합물 64 (실시예 139) (50.0 mg)를 그의 TFA 염으로서 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 141
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(2-플루오로에틸아미노)-5-((S)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
<반응식 XIV>
단계 1
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(아세톡시메틸)-2-(2-플루오로에틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디일 디아세테이트 (66): 디클로로메탄 (100 mL) 중 (2S,3R,4R,5S,6R)-6-(아세톡시메틸)-3-이소티오시아네이토-테트라히드로-2H-피란-2,4,5-트리일 트리아세테이트 (30 g, 77 mmol)의 용액을 2-플루오로에틸아민 히드로클로라이드 (8.4 g, 84 mmol) 및 트리에틸아민 (11.7 mL, 115 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음 응축시켜 밝은 황색 발포체를 수득하였으며, 이를 디클로로메탄 (100 mL) 중에 용해시키고, 2,2,2-트리플루오로아세트산 (75.6 g, 663 mmol)으로 실온에서 밤새 처리하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 탄산나트륨 (500 mL)에 의해 켄칭하고, 염화나트륨 (3 x 50 mL)으로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 50 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 66 (24 g, 70 %)을 밝은 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(2-플루오로에틸아미노)-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (67): 메탄올 (200 mL) 중 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(아세톡시메틸)-2-(2-플루오로에틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디일 디아세테이트 (29 g, 74 mmol)의 용액을 탄산칼륨 (1 g, 7 mmol)으로 실온에서 밤새 처리하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고, 디클로로메탄 (3 x 50 mL)으로 세척하여 화합물 67 (18 g, 92 %)을 백색 고체로서 수득하였다.
단계 3
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-디히드록시-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(2-플루오로에틸)카르바메이트 (68): 메탄올 (100 mL) 중 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(2-플루오로에틸아미노)-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (13.7 g, 51 mmol)의 용액에 디-tert-부틸 디카르보네이트 (22 g, 102 mmol) 및 트리에틸아민 (8.6 mL)을 첨가하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 생성된 혼합물을 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 20 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 화합물 68 (16 g, 85 %)을 백색 시럽으로서 수득하였다.
단계 4
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-6,7-디히드록시-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(2-플루오로에틸)카르바메이트 (69): 디클로로메탄 (100 mL) 중 tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-디히드록시-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(2-플루오로에틸)카르바메이트 (16 g, 43.7 mmol)의 용액에 tert-부틸클로로디메틸실란 (7.6 g, 50.7 mmol), 4-디메틸아미노피리딘 (530 mg, 4.34 mmol) 및 트리에틸아민 (6.6 g, 65 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 6시간 동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 에틸 아세테이트 중 20 % 석유로 용리시키면서 정제하여 화합물 69 (10 g, 48 %)를 연황색 오일로서 수득하였다.
단계 5
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(2-플루오로에틸)카르바메이트 (70): N,N-디메틸포름아미드 (30 mL) 중 tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-6,7-디히드록시-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(2-플루오로에틸)카르바메이트 (2.0 g, 4.2 mmol)의 용액을 수소화나트륨 (510 mg, 21 mmol)으로 질소 분위기 하에 10℃에서 10분 동안 처리하고, 이어서 1-(브로모메틸)벤젠 (2.2 g, 13 mmol)을 첨가하였다. 15분 동안 교반한 후, 반응물을 포화 수성 NH4Cl로 켄칭하고, 디클로로메탄 (3 x 30 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 1.5 - 3 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 70 (0.7 g, 25 %)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 6
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(2-플루오로에틸)카르바메이트 (71): THF (30 mL) 중 tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(2-플루오로에틸)카르바메이트 (1.36 g, 2.06 mmol)의 용액을 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (1.1 g, 4.2 mmol)로 실온에서 2시간 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 H2O (10 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10 % - 20 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 71 (600 mg, 53 %)을 연황색 오일로서 수득하였다.
단계 7
tert-부틸 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-포르밀-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(2-플루오로에틸)카르바메이트 (72): 디클로로메탄 (17 mL) 및 물 (2mL) 중 tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(2-플루오로에틸)카르바메이트 (600 mg, 1.10 mmol), KHCO3 (495 mg, 4.95 mmol), TBAB (18 mg, 0.06 mmol) 및 TEMPO (9 mg, 0.06 mmol)의 혼합물을 NBS (215 mg, 1.21 mmol)로 10 - 15℃에서 15분 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 Na2SO3 (5 mL)에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (3 x 15 mL)으로 추출하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 20 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 72 (0.4 g, 67 %)를 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 8
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-(1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(2-플루오로에틸)카르바메이트 (73): THF (20 mL) 중 tert-부틸 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-포르밀-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(2-플루오로에틸)카르바메이트 (400 mg, 0.73 mmol)의 용액에 메틸마그네슘 클로라이드 (1 mL, THF 중 3M)를 첨가하였다. 0-5℃에서 3시간 동안 교반한 후, 생성된 용액을 포화 수성 NH4Cl (10 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 x 30 mL)로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 20 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 73 (0.37 g, 90 %, 부분입체이성질체의 비는 1:4임)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 9
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(2-플루오로에틸아미노)-5-((S)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 2,2,2-트리플루오로아세테이트 (74): 디클로로메탄 (7 mL) 중 tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-(1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(2-플루오로에틸)카르바메이트 (250 mg, 0.45 mmol)의 용액을 BCl3 (7 mL, 디클로로메탄 중 1M)으로 -20 - -10℃에서 2시간 동안 처리하였다. 반응물을 메탄올로 켄칭하고, 진공 하에 농축시켜 조 생성물 (0.25 g)을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC (애질런트 1200 정제용 HPLC; 칼럼, X-브리지 19*150mm 5um; 이동상, 0.05 % 트리플루오로아세트산 및 CH3CN (시간 10 내에 10 %에서 20 %까지)을 갖는 물; 검출기 220 nm.)에 의해 정제하여 화합물 74 (실시예 141) (55.7 mg, 45 %)를 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 142
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(3-플루오로프로필아미노)-5-((S)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
표제 화합물을 실시예 141과 유사한 절차에 따라 합성하였다.
실시예 143
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(3-히드록시프로필)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
<반응식 XV>
단계 1
(E)-에틸 3-((3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(tert-부톡시카르보닐(메틸)아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)아크릴레이트 (76): 톨루엔 (20 mL) 중 44 (420 mg, 0.51 mmol)의 용액을 (카르브에톡시메틸렌)트리페닐포스포란 (280 mg, 0.81 mmol)으로 80℃에서 밤새 처리하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 76 (231 mg, 70 %)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
단계 2
에틸 3-((3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(tert-부톡시카르보닐(메틸)아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)프로파노에이트 (77): 메탄올 (10 mL) 중 화합물 76 (100 mg, 0.16 mmol) 및 라니 Ni (20 mg)의 혼합물을 수소 분위기 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 고체를 제거한 후, 용액을 진공 하에 농축시켜 77 (80 mg, 76 %)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 3
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(3-히드록시프로필)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (79): THF (10 mL) 중 화합물 77 (150 mg, 0.23 mmol)의 용액을 LiAlH4 (26.6 mg, 0.70 mmol)로 실온에서 3시간 동안 처리하였다. 이어서, 반응 혼합물을 포화 수성 NH4Cl (20 mL)에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (3 x 30 mL)으로 추출하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 여과물을 진공 하에 농축시켜 조 화합물 78 (90 mg)을 황색 오일로서 수득하였으며, 이를 디클로로메탄 (10 mL) 중에 용해시키고, TFA (1 mL)로 실온에서 밤새 처리하였다. 휘발성 물질을 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건: [(애질런트 1200 정제용 HPLC: 칼럼, 선 파이어 정제용 C18; 이동상, 0.03 % 트리플루오로아세트산 및 CH3CN (시간 10 내에 10 %에서 20 %까지)을 갖는 물; 검출기, 220 nm.)]을 사용하여 정제하여 표제 화합물 79 (실시예 143) (10.8 mg, 23 %)를 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 144
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-(2-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
<반응식 XVI>
단계 1
tert-부틸 (3aR,5R,6R,7R,7aR)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5-((E)-2-메톡시비닐)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(에틸)카르바메이트 (81): THF (20 mL) 중 Ph3PCH2OCH3Cl (613 mg, 1.79 mmol)의 용액을 칼륨 t-부톡시드 (191 mg, 1.71 mmol)로 질소 분위기 하에 0℃에서 30분 동안 처리하고, 이어서 THF (5 mL) 중 80 (500 mg, 0.85 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 25℃에서 3시간 동안 교반한 다음, 포화 수성 NH4Cl (20 mL)에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2 x 20 mL)로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 30 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 81 (200 mg, 38 %)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
단계 2
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-(2-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올: CH3CN (10 mL) 및 물 (10 mL) 중 화합물 81 (200 mg, 0.33 mmol)의 용액을 Hg(OAc)2 (128 mg, 0.40 mmol)로 -5℃에서 4시간 동안 처리하고, 이어서 KI (277 mg, 1.67 mmol) 및 NaBH4 (50.67 mg, 1.33 mmol)를 순차적으로 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 밤새 교반한 다음, 포화 수성 NH4Cl (20 mL)에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2 x 20 mL)로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 응축시켜 조 화합물 82를 황색 발포체로서 수득하였으며, 이를 디클로로메탄 (10 mL) 중에 용해시키고, TFA (1 mL)로 실온에서 밤새 처리하였다. 휘발성 물질을 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 [(정제용 HPLC): 칼럼, 19*150 mm; 이동상, 0.03 % NH3H2O 및 CH3CN (10분 내에 10 % CH3CN에서 45 %까지)을 갖는 물; 검출기, 220 nm.]을 사용하여 정제하여 표제 화합물 83 (실시예 144) (8.1 mg, 28 %)을 황색 고체로서 수득하였다.
다음의 실시예 145를 실시예 144와 유사한 방식으로 제조하였다.
실시예 145
실시예 146
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(2-플루오로프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
<반응식 XVII>
단계 1
(S)-1-((3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에탄올 (12): THF (10 mL) 중 11 (600 mg, 1.23 mmol)의 용액을 메틸마그네슘 염소 (0.82 mL, THF 중 3M)로 실온에서 2시간 동안 처리한 다음, 포화 수성 NH4Cl (20 mL)에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 1 - 2 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 화합물 (12) (500 mg, 81 %, 부분입체이성질체 비는 ~ 1:4임)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 2
1-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에타논 (84): 디클로로메탄 (20 mL) 중 12 (450 mg, 0.90 mmol)의 용액을 데스-마르틴 시약 (760 mg, 1.80 mmol)으로 실온에서 2시간 동안 처리한 다음, 포화 수성 Na2S2O3 (20 mL) 및 포화 수성 NaHCO3 (20 mL)에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (2 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 2 - 3 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 화합물 (84) (400 mg, 88 %)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 3
2-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)프로판-2-올 (85): THF (10 mL) 중 화합물 84 (100 mg, 0.2 mmol)의 용액을 메틸마그네슘 염소 (0.5 mL, THF 중 3M)로 실온에서 2시간 동안 처리한 다음, 포화 수성 NH4Cl (20 mL)에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산마그네슘, 진공 하에 농축시키고, 건조시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 1 - 2 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 화합물 (85) (100 mg, 97 %)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 4
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(2-플루오로프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (87): 디클로로메탄 (10 mL) 중 85 (100 mg, 0.19 mmol)의 용액을 DAST (156 mg, 0.97 mmol)로 -78℃에서 30분 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 실온으로 서서히 가온되도록 하였다. 추가 30분 동안 교반한 후, 반응물을 포화 수성 Na2CO3 (10 mL)으로 켄칭하고, 디클로로메탄 (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 화합물 86 (100 mg)을 황색 오일로서 수득하였으며, 이를 디클로로메탄 (10 mL) 중에 용해시키고, TFA (1 mL)로 실온에서 1시간 동안 처리하였다. 휘발성 물질을 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 [(애질런트 1200 검출 정제용 HPLC): 칼럼, 선파이어 정제용 C18; 이동상, 0.03% 암모니아 및 CH3CN을 갖는 물; 검출기, UV220nm]을 사용하여 정제하여 표제 화합물 87 (실시예 146) (34.8 mg, 65 %)을 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 147
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(1,1-디플루오로에틸)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
<반응식 XVIII>
단계 1
tert-부틸 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-아세틸-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(프로필)카르바메이트 (88): 디클로로메탄 (10 mL) 중 21 (450 mg, 0.72 mmol)의 용액을 데스-마르틴 시약 (780 mg, 1.83 mmol)으로 실온에서 1시간 동안 처리한 다음, 포화 수성 Na2S2O3 (20 mL) 및 포화 수성 NaHCO3 수성 (20 mL)에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (2 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 석유 에테르 중 30 % 에틸 아세테이트에 의해 정제하여 화합물 88 (210 mg, 47 %)을 밝은 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(1,1-디플루오로에틸)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (90): 디클로로메탄 (10 mL) 중 88 (200 mg, 0.33 mmol)의 용액을 DAST (262 mg, 1.63 mmol)로 실온에서 밤새 처리한 다음, 포화 수성 Na2CO3 (10 mL)에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (3 x 10 mL 포함)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 진공 하에 농축시켜 조 화합물 89 (100 mg)를 황색 발포체로서 수득하였으며, 이를 디클로로메탄 (5 mL) 중에 용해시키고, TFA (0.5 mL)로 실온에서 3시간 동안 처리하였다. 휘발성 물질을 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 [(애질런트 1200 정제용 HPLC): 칼럼, 선파이어 정제용 C18,19 * 50 mm 5 um; 이동상, 0.03 % NH4OH 및 CH3CN (10분 내에 10% CH3CN에서 45 %까지)을 갖는 H2O; 검출기, UV 220 nm]을 사용하여 정제하여 표제 화합물 90 (실시예 147) (21.8 mg, 21.8 %)을 황색 고체로서 수득하였다.
다음의 화합물을 실시예 147과 유사한 방식으로 제조하였다.
실시예 148
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(1,1-디플루오로에틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
실시예 149 & 150
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-((S)-2,2-디플루오로-1-히드록시에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (실시예 149) & (3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-((R)-2,2-디플루오로-1-히드록시에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (실시예 150):
<반응식 XIX>
단계 1.
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-(벤질옥시메틸)-N,N-디메틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-아민 (92): DMF (600 mL) 중 7 (100 g, 0.4 mol)의 용액을 NaH (110 g, 3.2 mol, 광유에 의해 70%로 분산됨)로 0℃에서 30분 동안 처리한 다음, BnBr (410 g, 2.4 mol)을 적가하였다. 실온에서 추가 2시간 동안 유지한 후에, 혼합물을 빙수 (1.5 kg)에 천천히 붓고, 에틸 아세테이트 (3 x 500 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수 (3 x 300 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10 % - 30 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 92 (166 g, 80%)를 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2.
((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)메탄올 (94): Ac2O (1 L) 및 AcOH (100 mL) 중 92 (166 g, 0.3 mol)의 용액에 무수 ZnCl2 (353 g, 2.6 mol)를 0℃에서 첨가하였다. 실온에서 추가 2시간 동안 유지한 후에, 반응물을 빙냉 H2O (1.5 kg)에 천천히 붓고, 디클로로메탄 (3 x 500 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수 (3 x 200 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 휘발성 물질을 고진공에 의해 증류시켜 조 93 (160g, (ES, m/z) [M+H]+ 471.0)을 갈색 오일로서 수득하였다. 메탄올 (1 L) 중 상기 조 93의 용액을 K2CO3 (18 g, 0.13 mol)으로 30℃에서 8시간 동안 처리하고, 여과 후, 용매를 진공 하에 증류시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 20 % - 30% 에틸 아세테이트로 정제하여 표제 화합물 (94) (108 g, 79% 2 단계)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 3.
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-카르브알데히드 (95). 디클로로메탄 (300 mL) 중 DMSO (14.6 g, 187 mmol)의 용액을 옥살릴 디클로라이드 (17.7 g, 140 mmol)로 -78℃에서 1시간 동안 처리한 다음, 디클로로메탄 (30 mL) 중 ((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)메탄올 (10 g, 23 mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 생성된 용액을 -20℃에서 4시간 동안 유지한 다음, 트리에틸아민 (28.3 g, 280 mmol)을 -78℃에서 첨가하였다. -50℃에서 추가 1시간 후, 반응물을 물 (300 mL)에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (2x200 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수 (3x100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 20 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 95 (8.1 g, 80 %)를 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 4.
(R)-((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)(1,3-디티안-2-일)메탄올 (96). THF (100 mL) 중 1,3-디티안 (14.1 g, 117 mmol)의 용액을 n-BuLi (44.9 mL, 112 mmol, 헥산 중 2.5M)로 0℃에서 1시간 동안 처리한 다음, THF (20 mL) 중 상기 알데히드 95의 용액을 -50℃에서 첨가하였다. 0℃에서 추가 1시간 동안 유지한 후에, 반응물을 포화 수성 NH4Cl (150 mL)에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x80 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 중 20% - 50% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물 (6.4 g, 62%, 2개의 에피머 비는 1H NMR에 의해 1:1임)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 5.
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-((R)-벤질옥시(1,3-디티안-2-일)메틸)-N,N-디메틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-아민 (97). DMF (40 mL) 중 96 (3.3 g, 6 mmol)의 용액을 수소화나트륨 (830 mg, 24 mmol, 70% 광유 분산됨)으로 실온에서 30분 동안 처리한 다음, (브로모메틸)벤젠 (2.1 g, 12 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 추가 1시간 후에, 반응물을 물 (100 mL)에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x40 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (5x30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10% - 30% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 97 (2.8 g, 73%)을 갈색 시럽으로서 수득하였다.
단계 6.
(R)-2-(벤질옥시)-2-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)아세트알데히드 (98). 아세톤 (16 mL) 및 물 (4 mL) 중 97 (3 g, 4.7 mmol)의 용액에 CaCO3 (4.7 g, 47 mmol) 및 CH3I (13.2 g, 94 mmol)를 첨가하였다. 50℃에서 20시간 동안 유지한 후에, 생성된 용액을 디클로로메탄 (30 mL)으로 희석하고, 여과하고, 디클로로메탄 (2 x 30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 98을 수득하였으며, 이를 후속 단계 직접 사용하였다.
단계 7.
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-((R)-1-(벤질옥시)-2,2-디플루오로에틸)-N,N-디메틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-아민 (99). 디클로로메탄 (20 mL) 중 상기 조 98의 용액에 질소 분위기 하에 -78℃에서 DAST (2.9 g, 18 mmol)를 첨가하였다. 0℃에서 추가 2시간 후, 반응물을 물 (10 mL)로 켄칭하고, 포화 수성 탄산나트륨으로 중화시켰다. 생성된 용액을 디클로로메탄 (3x20 mL)으로 추출하고, 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10% - 50% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 99 (1.1 g, 41%)를 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 8.
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-((S)-2,2-디플루오로-1-히드록시에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (실시예 149) & (3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-((R)-2,2-디플루오로-1-히드록시에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (실시예 150). 디클로로메탄 (20 mL) 중 99 (600 mg, 1 mmol)의 용액을 BCl3 (10 mL, 10 mmol, 디클로로메탄 중 1 M)으로 -78℃에서 1시간 동안 처리한 다음, 메탄올 (20 mL)로 켄칭하였다. 휘발성 물질을 증류시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 진한 NH4OH (2 ml, 26% 수용액)로 중화시켰다. 농축시킨 후, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 10 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 2종의 에피머의 혼합물을 수득하고; 2종의 에피머를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건: (애질런트 정제용 1200 검출): 칼럼, 선파이어 정제용 C18; 이동상, 0.05% 암모니아 및 CH3CN (8분 내에 5% CH3CN에서 40%까지)을 갖는 물; 검출기, 220nm)을 사용하여 분리하여 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-((S)-2,2-디플루오로-1-히드록시에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (14.4 mg, 5%)을 밝은 황색 고체, 더 빠르게 용리하는 이성질체로서;
및 (3aR,5S,6S,7R,7aR 포함)-5-((S)-2,2-디플루오로-1-히드록시에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (53.9 mg, 17.4%)을 밝은 황색 고체, 더 느리게 용리하는 이성질체로서;
수득하였다.
실시예 151 & 152
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1,2-디히드록시에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (실시예 151) & (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1,2-디히드록시에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (실시예 152):
<반응식 XX>
단계 1
(S)-2-(벤질옥시)-2-((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에탄올 (102): 98 (1.5 g, 2.7 mmol) (실시예 149 및 150, 단계 6)의 합성에 따라 제조됨)의 용액을 NaBH4 (504 mg, 13 mmol)로 0℃에서 1시간 동안 처리하였다. 생성된 용액을 H2O (60 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3x30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 20% - 50% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 102 (1.2 g, 80%)를 갈색 시럽으로서 수득하였다.
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1,2-디히드록시에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (실시예 152) & (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1,2-디히드록시에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (실시예 151): 디클로로메탄 (20 mL) 중 102 (500 mg, 0.9 mmol)의 용액을 -60℃에서 질소 하에 30분 동안 BCl3 (9 ml, 9 mmol, 디클로로메탄 중 1 M)으로 처리하였다. 이어서, 반응물을 메탄올 (20 mL)로 켄칭하였다. 휘발성 물질을 증류시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 진한 NH4OH (2 ml, 26% 수용액)로 중화시켰다. 농축시킨 후, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 10 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 2종의 에피머의 혼합물을 수득하고; 2종의 에피머를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건: 애질런트 정제용 1200 검출): 칼럼, 선파이어 정제용 C18; 이동상, 0.05% 암모니아 및 CH3CN (8분 내에 5% CH3CN에서 60%까지)을 갖는 물; 검출기, 220nm)을 사용하여 분리하여 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1,2-디히드록시에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (23.1 mg, 9%)을 백색 고체, 더 빠르게 용리하는 이성질체로서;
및 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1,2-디히드록시에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (37.5 mg, 13%)을 백색 고체, 더 느리게 용리하는 이성질체로서;
수득하였다.
실시예 153 & 154
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-2-플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (실시예 153) & (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-2-플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (실시예 154):
<반응식 XXI>
단계 1
(S)-2-(벤질옥시)-2-((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에틸 메탄술포네이트 (103): 디클로로메탄 (30 mL) 중 102 (1.2 g, 2.2 mmol) (실시예 151 및 152, 단계 1의 합성에 따라 제조됨)의 용액에 TEA (664 mg, 6.6 mmol) 및 MsCl (499 mg, 4.4 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 실온에서 2시간 유지한 후에, 반응물을 물 (100 mL)에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (3x30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10% - 30% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 표제 화합물 (1.1 g, 80%)을 갈색 시럽으로서 수득하였다.
단계 2
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-((R)-1-(벤질옥시)-2-플루오로에틸)-N,N-디메틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-아민 (104): CH3CN (20 mL) 중 103 (1 g, 1.6 mmol)의 용액을 TEAF (2.38 g, 16 mmol)로 환류 하에 20시간 동안 처리한 다음, 실온으로 냉각시키고, 물 (100 mL)에 붓고, 디클로로메탄 (3x50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 20% - 50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 표제 화합물 (400 mg 46%)을 밝은 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 3
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-2-플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (실시예 153) & (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-2-플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (실시예 154): 디클로로메탄 (15 mL) 중 104 (400 mg, 0.7 mmol)의 용액을 BCl3 (7 mL, 7 mmol, 디클로로메탄 중 1M)으로 -60℃에서 30분 동안 처리한 다음, 메탄올 (20 mL)로 켄칭하였다. 휘발성 물질을 증류시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 진한 NH4OH (2 ml, 26% 수용액)로 중화시켰다. 농축시킨 후, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 10 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 2종의 에피머의 혼합물을 수득하였고; 2종의 에피머를 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건: (애질런트 정제용 1200 검출): 칼럼, 선파이어 정제용 C18; 이동상, 0.05% 암모니아 및 CH3CN (8분 내에 5% CH3CN에서 100%까지)을 갖는 물, 검출기, 220nm)을 사용하여 분리하여 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-2-플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (46.3 mg, 23%)을 백색 고체, 더 빠르게 용리하는 이성질체로서;
및 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-2-플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (64 mg, 31%)을 백색 고체, 더 느리게 용리하는 이성질체로서;
수득하였다.
실시예 155
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(2-플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올:
<반응식 XXII>
단계 1
((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)메틸 메탄술포네이트 (105). 디클로로메탄 (50 mL) 중 ((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)메탄올 (94) (8 g, 18 mmol) (실시예 149, 단계 2의 합성에 따라 제조됨)의 용액에 0℃에서 메탄술포닐 클로라이드 (4.3 g, 37 mmol) 및 트리에틸아민 (3.8 g, 37 mmol)을 첨가하였다. 25℃에서 2시간 동안 유지한 후에, 반응물을 물 (50 mL)에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (3x50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 20% - 30% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물 (8.5 g, 90%)을 갈색 시럽으로서 수득하였다.
단계 2
2-((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)아세토니트릴 (106). DMF (80 mL) 중 105 (8.5 g, 17 mmol), KCN (2.7 g, 42 mmol) 및 KI (282 mg, 1.7 mmol)의 혼합물을 65℃로 2시간 동안 가열한 다음, 물 (200 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (5x40 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (4x30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10% - 30% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물 (4.3 g, 55%)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 3
2-((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)에탄올 (107). 톨루엔 (20 mL) 중 106 (400 mg, 0.9 mmol)의 용액을 DIBAL-H (2.3 mL, 2.3 mmol, 톨루엔 중 1M)로 -25℃에서 1시간 동안 처리하였다. 이어서, 반응물을 빙수 (50 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x40 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 알데히드를 수득하였으며, 이를 메탄올 (20 mL) 중에 용해시키고, NaBH4 (105 mg, 2.7 mmol)로 25℃에서 1시간 동안 처리하였다. 이어서, 반응물을 물 (50 mL)에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 20% - 40% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 107 (270 mg, 67%)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 4
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-(2-플루오로에틸)-N,N-디메틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-아민 (108). 디클로로메탄 (20 mL) 중 107 (250 mg, 0.6 mmol)의 용액을 DAST (550 mg, 3.4 mmol)로 0℃에서 2시간 동안 처리하였다. 이어서, 반응물을 포화 수성 NaHCO3 (30 mL)에 의해 켄칭하고, 수성 층을 디클로로메탄 (2x20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 3% - 5% 메탄올로 용리시키면서 정제하여 108 (135 mg, 45%)을 백색 고체로서 수득하였다.
단계 5
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(2-플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올. 디클로로메탄 (20 mL) 중 108 (300 mg, 0.7 mmol)의 용액을 BCl3 (7 mL, 7 mmol, 디클로로메탄 중 1 M)으로 -60℃에서 2시간 동안 처리한 다음, 메탄올 (10 mL)을 첨가하여 켄칭하였다. 휘발성 물질을 진공 하에 증류시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 진한 NH4OH (2 ml, 26% 수용액)로 중화시켰다. 농축시킨 후, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 10 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물 (35 mg, 20%)을 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 156
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(2,2-디플루오로에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올:
<반응식 XXIII>
단계 1
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-(2,2-디플루오로에틸)-N,N-디메틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-아민 (109). 톨루엔 (20 mL) 중 106 (400 mg, 0.9 mmol) (실시예 155, 단계 2의 합성에 따라 제조됨)의 용액을 DIBAL-H (2.3 mL, 2.3 mmol, 톨루엔 중 1M)로 -25℃에서 1시간 동안 처리하였다. 이어서, 반응물을 빙수 (50 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x40 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 알데히드를 수득하였으며, 이를 디클로로메탄 (20 mL) 중에 용해시키고, DAST (370 mg, 2.3 mmol)로 -78℃에서 질소 하에 30분 동안 처리하였다. 0℃에서 추가 2시간 후, 반응을 포화 수성 탄산나트륨 (10 mL)으로 켄칭하고, 수성 층을 디클로로메탄 (3x20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10% - 40% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물 (110 mg, 48%)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 2
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(2,2-디플루오로에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올. 디클로로메탄 (20 mL) 중 109 (270 mg, 0.6 mmol)의 용액을 BCl3 (6 mL, 6 mmol, 디클로로메탄 중 1M)으로 -60℃에서 2시간 동안 처리한 다음, 반응물을 메탄올 (20 mL)로 켄칭하였다. 휘발성 물질을 진공 하에 증류시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 진한 NH4OH (2 ml, 26% 수용액)로 중화시켰다. 농축시킨 후, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 10 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물 (41 mg, 25%)을 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 157
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(2,2,2-트리플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올:
<반응식 XXIV>
단계 1
(R)-1-((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)-2,2,2-트리플루오로에탄올 (110): THF (60 mL) 중 알데히드 (95) (3.0g, 7 mmol) (실시예 149 단계 3의 합성에 따라 제조됨), TBAF (1.06 g 3 mmol) 및 4Å 분자체 (2.0 g)의 혼합물을 30분 동안 교반하고, 이어서 CF3SiMe3 (5.8 g, 40mmol)을 -30℃에서 첨가하였다. 혼합물을 밤새 실온에서 밤새 유지하고, 추가의 TBAF (20 g, 63 mmol)를 첨가하였다. 추가 1시간 동안 교반한 후에, 반응물을 염수 (40 mL)에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수 (3x50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 5% - 25% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 110 (1.7g, 49%)을 밝은 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 2
O-(R)-1-((3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)-2,2,2-트리플루오로에틸 S-메틸 카르보노디티오에이트 (111): 테트라히드로푸란 (50 mL) 중 화합물 110 (1.5 g, 3 mmol), CS2 (8 mL) 및 CH3I (8 mL)의 용액을 수소화나트륨 (242 mg, 6 mmol, 60% 광유 분산됨)으로 0 - 5℃에서 1.5시간 동안 처리한 다음, 반응물을 물 (50 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (3x40 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수 (2x30 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 15% - 30 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 111 (1.4 g, 79%)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 3
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-N,N-디메틸-5-(2,2,2-트리플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-아민 (112): 톨루엔 (40 mL) 중 화합물 111 (1.4 g, 2 mmol)의 용액에 트리부틸스탄난 (3.5 g, 12 mmol) 및 AIBN (20 mg, 0.1 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 생성된 용액을 100℃에서 1시간 동안 유지한 다음, 실온으로 냉각시키고, 물 (50 mL)로 켄칭하였다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트 (2x30mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 여과한 후, 여과물을 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10% - 20 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 화합물 112 (1.0 g, 87%)를 밝은 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 4
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(2,2,2-트리플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올: 디클로로메탄 (10 mL) 중 화합물 112 (300 mg, 0.6 mmol)의 용액에 BCl3 (3 mL, 3 mmol, 디클로로메탄 중 1M)을 -78℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 -20℃에서 1시간 동안 유지한 다음, 메탄올 (10 mL)을 첨가하여 켄칭하였다. 휘발성 물질을 진공 하에 증류시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 진한 NH4OH (2 ml, 26% 수용액)로 중화시켰다. 농축시킨 후, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 10 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물 (94.2 mg, 49%)을 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 158 & 159
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(메틸아미노)-5-((S)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 & (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(메틸아미노)-5-(1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올:
<반응식 XXV>
단계 1
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(알릴옥시)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (114): DMF (250 mL) 중 26 (35 g, 78 mmol) (실시예 3, 단계 4의 합성에 따라 제조됨)의 용액을 NaH (70%, 8 g, 233 mmol)로 5℃에서 30분 동안 처리한 다음, 알릴-Br (28 g, 233 mmol)을 천천히 첨가하였다. 15℃에서 1.5시간 동안 교반한 후, 반응물을 H2O (300 mL)에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x200 mL)로 추출하였다. 유기 층을 수집하고, 염수 (5x100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 5 % ~ 10 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물 (32 g, 78 %)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(알릴옥시)-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (115): THF (700 mL) 중 114 (104 g, 197 mmol)의 용액을 TBAF (77 g, 296 mmol)로 20℃에서 6시간 동안 처리한 다음, 반응물을 물 (500 mL)에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (5x300 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수 (2x150 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 5% ~ 30% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 표제 화합물 (72 g, 88%)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 3
tert-부틸 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(알릴옥시)-5-포르밀-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (116): 디클로로메탄 (450 mL) 중 DMSO (45 g, 580 mmol)의 용액을 옥살릴 디클로라이드 (55 g, 435 mmol)로 -78℃에서 1시간 동안 처리한 다음, 디클로로메탄 (100 mL) 중 115 (30 g, 72 mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 생성된 용액을 -20℃에서 4시간 동안 교반하고, 이어서 트리에틸아민 (73 g, 725 mmol)을 -78℃에서 첨가하였다. -20℃에서 추가 1시간 동안 교반한 후, 반응물을 물 (600 mL)에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (2x300 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수 (2x150 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 116을 황색 시럽으로서 수득하였으며, 후속 단계에 추가의 정제 없이 사용하였다.
단계 4
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(알릴옥시)-5-((S)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (117): 무수 THF (300 mL) 중 조 116의 용액을 메틸마그네슘 염소 (48 mL, THF 중 3M, 145 mmol)로 10℃에서 밤새 처리한 다음, 포화 수성 NH4Cl (300 mL)에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x200 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수 (2x100 mL)로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 3% ~ 25% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 117 (18 g, 58% 2 단계)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 5
tert-부틸 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-아세틸-6,7-비스(알릴옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (118): 디클로로메탄 (500 mL) 중 DMSO (52 g, 672 mmol)의 용액을 옥살릴 디클로라이드 (64 g, 505 mmol)로 -78℃에서 1시간 동안 처리한 다음, 디클로로메탄 (150 mL) 중 117 (36 g, 84 mmol)의 용액을 첨가하였다. 생성된 용액을 -20℃에서 4시간 동안 교반하고, 이어서 트리에틸아민 (85 g, 841 mmol)을 -78℃에서 첨가하였다. -20℃에서 추가로 1시간 동안 교반한 후, 반응물을 물 (600 mL)로 켄칭하고, 디클로로메탄 (2x300 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수 (2x200 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 3% ~ 20% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 118 (26 g, 73%)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 6
tert-부틸 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(알릴옥시)-5-((S)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일(메틸)카르바메이트 (119): THF (200 mL) 중 TBAF (3.7 g, 14 mmol) 및 4Å 분자 체의 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 THF (80 mL) 중 118 (15 g, 35 mmol) 및 TMS-CF3 (20 g, 141 mmol)의 용액을 첨가하였다. 25℃에서 추가 12시간 동안 교반한 후, 추가의 TBAF (14 g, 54 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 염수 (200 mL)에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x150 mL)로 추출하고, 유기 층을 합하고, 염수 (3x100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 5% ~ 25% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 119 (12 g, 69%)를 황색 오일로서 수득하였다.
단계 7
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(메틸아미노)-5-((S)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 & (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(메틸아미노)-5-(1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올: 1,4-디옥산 (50 mL) 중 119 (4.5 g, 9 mmol)의 용액에 N2 분위기 하에 25℃에서 Pd(PPh3)4 (2.1 g, 1.8 mmol), Et3N (2.3 g, 22.7 mmol) 및 HCOOH (0.8 g, 18 mmol)를 첨가하였다. 60℃에서 20분 후, 추가의 HCOOH (6.3 g, 136 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 추가 12시간 동안 교반한 다음, H2O (60 mL)에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (2x40 mL)으로 추출하여 유기 불순물을 제거하였다. 수성 상의 pH 값을 포화 수성 NaHCO3에 의해 7-8로 조정한 다음, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 2% ~ 10% 메탄올로 용리시키면서 정제하여 2종의 에피머의 혼합물을 수득하였다. 정제용 HPLC [(애질런트 1200 정제용 HPLC): 칼럼, 선 파이어 정제용 C18*50mm 5um; 이동상, CH3CN (10분 내에 5% CH3CN에서 40%까지)을 갖는 물; 검출기, UV, 220nm]에 의해 추가로 분리하여 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(메틸아미노)-5-((S)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (730 mg, 25.4%)을 백색 고체, 더 빠르게 용리하는 이성질체로서;
및 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(메틸아미노)-5-((S)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (810 mg, 28.2%)을 백색 고체, 더 느리게 용리하는 이성질체로서;
수득하였다.
실시예 160 및 161
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 및 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올:
<반응식 XXVI>
단계 1-2
tert-부틸 N-에틸-N-[(1R,2R,6R,8R,9S)-8-(히드록시메틸)-11,12-디메톡시-11,12-디메틸-7,10,13-트리옥사-5-티아-3-아자트리시클로[7.4.0.0[2,6]]트리데크-3-엔-4-일]카르바메이트 (123): D-(+)-10-캄포르술폰산 (112 g, 0.48 mol)을 무수 메탄올 (2 L) 중 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (121) (문헌 [Yuzwa, et al., Nature Chemical Biology, 2008, 4, 483] 및 2008년 3월 6일 공개된 WO 2008/025170) (100 g, 0.4 mol), 비아세틸 (173 g, 2 mol) 및 트리메틸 오르토포르메이트 (427 g, 4 mol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 환류 하에 72시간 동안 가열하고, 이어서 트리에틸아민 (53 g, 0.53 mol)을 실온에서 첨가하였다. 조 122를 함유하는 혼합물을 Boc 무수물 (170 g, 0.78 mol)로 처리하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 디클로로메탄 (1 L) 중에 용해시키고, 염수 (5x100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10 % - 20 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 123 (92 g, 49 %)을 갈색 시럽으로서 1H NMR을 기반으로 2종의 이성질체의 1:1 혼합물로서 수득하였다.
단계 3
tert-부틸 N-에틸-N-[(1R,2R,6R,8S,9S)-8-포르밀-11,12-디메톡시-11,12-디메틸-7,10,13-트리옥사-5-티아-3-아자트리시클로[7.4.0.0[2,6]]트리데크-3-엔-4-일]카르바메이트 (124): 무수 디클로로메탄 (1.5 L) 중 DMSO (40 g, 0.52 mol)의 용액을 옥살릴 디클로라이드 (49 g, 0.39 mol)로 -78℃에서 1시간 동안 처리한 다음, 123 (30 g, 65 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 -30℃에서 4시간 동안 교반한 다음, -78℃로 다시 냉각시키고, 이때 트리에틸아민 (86 g, 0.85 mol)을 첨가하였다. -50℃에서 1시간 후, 반응 혼합물을 H2O (500 mL)에 의해 켄칭하고, 염수 (3x100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 짧은 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 30 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 124 (18 g, 60 %)를 갈색 시럽으로서 수득하였다.
단계 4-5
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올: THF (100 mL) 중 124 (21 g, 45 mmol) 및 CF3TMS (41 g, 290 mmol)의 용액을 THF (400 mL) 중 TBAF (6.6 g, 25 mmol) 및 4Å 분자체의 혼합물에 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 추가의 TBAF (26.4 g, 100 mmol)를 첨가하였다. 추가 1시간 후, 여과를 수행하고, 여과물을 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 디클로로메탄 (500 mL) 중에 용해시키고, 염수 (3x100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 125 (TLC 및 LCMS를 기반으로 4종의 이성질체)를 갈색 시럽으로서 수득하였으며, 이를 TFA (100 ml, 디클로로메탄 중 90 %, v/v)로 실온에서 밤새 처리하였다. 휘발성 물질을 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 메탄올 (50 mL) 중에 용해시키고, 진한 NH4OH (10 mL)로 중화시켰다. 감압 하에 농축시킨 후, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 1 % - 10 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 실시예 160 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (2.41 g, 16 %, HPLC에 의해 더 빠르게 용리하는 이성질체)을 백색 고체로서
및 실시예 161 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (2.48 g, 17 %, HPLC에 의해 더 느리게 용리하는 이성질체)을 백색 고체로서
수득하였다.
실시예 162 및 163
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시에틸)-2-(2-히드록시에틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 & (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시에틸)-2-(2-히드록시에틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올:
<반응식 XXVII>
단계 1
2-(2-히드록시에틸)이소인돌린-1,3-디온 (126): 톨루엔 (300 mL) 중 2-아미노에탄올 (41 g, 0.67 mol) 및 이소벤조푸란-1,3-디온 (100 g, 0.52 mol)의 용액을 12시간 동안 환류하였다. 휘발성 물질을 증류시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 클로로포름/헥산 (v/v, 1:6)으로부터 재결정화에 의해 정제하여 126 (110 g, 85 %) 을 백색 고체로서 수득하였다.
단계 2
2-(2-(벤질옥시)에틸)이소인돌린-1,3-디온 (127): DMF (50 mL) 중 126 (5 g, 26 mmol)의 용액을 수소화나트륨 (1.1 g, 32 mmol, 광유 중 70 %로 분산됨)으로 실온에서 30분 동안 처리한 다음, BnBr (6.7 g, 39 mmol)을 첨가하였다. 추가 1시간 후, 반응물을 물 (200 mL)에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (4x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3x50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10 % - 20 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 127 (4.8 g, 65 %)을 백색 고체로서 수득하였다.
단계 3
2-(벤질옥시)에탄아민 (128): 에탄올 (200 mL) 중 127 (10 g, 35 mmol)의 용액을 히드라진 (84 g, 71 mmol, 물 중 80 %)으로 환류 하에 12시간 동안 처리하였다. 여과 후, 여과물을 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 5 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 128 (4 g, 74 %)을 밝은 황색 오일로서 수득하였다.
단계 4
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(아세톡시메틸)-2-(2-(벤질옥시)에틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디일 디아세테이트 (129): 디클로로메탄 (100 mL) 중 (2S,3R,4R,5S,6R)-6-(아세톡시메틸)-3-이소티오시아네이토-테트라히드로-2H-피란-2,4,5-트리일 트리아세테이트 (9.8 g, 25 mmol)의 용액에 0℃에서 128 (4 g, 26 mmol)을 첨가하였다. 2시간 동안 교반한 후, 트리플루오로아세트산 (15.4 g, 159 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 12시간 동안 교반한 다음, 빙수 (200 mL)로 켄칭하고, NaHCO3 (26 g, 318 mmol)을 첨가하여 중화시켰다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 디클로로메탄 (3x100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10 % - 50 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 129 (9.8 g, 77 %)를 백색 시럽으로서 수득하였다.
단계 5
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(2-(벤질옥시)에틸아미노)-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (130): 메탄올 (40 mL) 중 129 (4.5 g, 9.4 mmol)의 용액을 탄산칼륨 (260 mg, 2 mmol)으로 실온에서 3시간 동안 처리한 다음, 아세트산 (0.5 mL)을 첨가하여 중화시켰다. 휘발성 물질을 증류시켜 잔류물을 수득하였으며, 이는 에틸 아세테이트로부터 고체화되었다. 고체를 에틸 아세테이트 (3x20 mL)로 세척하여 130 (2.58 g, 80 %)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
단계 6
tert-부틸 2-(벤질옥시)에틸((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-디히드록시-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일)카르바메이트 (131): 메탄올 (30 mL) 중 130의 용액에 Boc2O (3.1 g, 14 mmol) 및 트리에틸아민 (1.9 g, 19 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 5시간 동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 1 % - 5 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 131 (3.1 g, 73 %)을 백색 고체로서 수득하였다.
단계 7
tert-부틸 2-(벤질옥시)에틸((3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-6,7-디히드록시-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일)카르바메이트 (132): 디클로로메탄 (40 mL) 중 131 (2.8 g, 6.2 mmol), DMAP (150 mg, 1.2 mmol), 트리에틸아민 (930 g, 9.2 mol) 및 tert-부틸클로로디메틸실란 (1.1 g, 7.5 mmol)의 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반한 다음, 포화 수성 NaHCO3 용액 (30 mL)으로 켄칭하였다. 수성 층을 디클로로메탄 (2x40 mL)으로 추출하고, 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 1 % - 3 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 132 (2.6 g, 75 %)를 백색 고체로서 수득하였다.
단계 8
tert-부틸 2-(벤질옥시)에틸((3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일)카르바메이트 (133): DMF (60 mL) 중 132 (12 g, 21 mmol)의 용액을 수소화나트륨 (2.9 g, 84 mmol, 광유에 의해 70 % 분산됨)로 0℃에서 30분 동안 처리한 다음, PMBBr (25 g, 126 mmol)을 첨가하였다. 15℃에서 추가 1.5시간 후, 반응물을 물 (200 mL)로 켄칭하고, 디클로로메탄 (3x100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3x50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 5 % - 20 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 133 (8.5g, 50 %)을 밝은 황색 오일로서 수득하였다.
단계 9
tert-부틸-2-(벤질옥시)에틸((3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(히드록시메틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일)카르바메이트 (134): THF (30 mL) 중 133 (7.5 g, 9.3 mmol)의 용액을 TBAF (4.9 g, 18.6 mmol)로 실온에서 3시간 동안 처리하였다. 반응물을 물 (100 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 3 % - 10 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 134 (5.8 g, 90 %)를 밝은 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 10
tert-부틸 2-(벤질옥시)에틸((3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시에틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일)카르바메이트 (136): 디클로로메탄 (50 mL) 및 H2O (10 mL) 중 134 (1.5 g, 2.2 mmol), KHCO3 (970 mg, 9.7 mmol), TBAB (70 mg, 0.2 mmol), TEMPO (31 mg, 0.2 mmol)의 용액에 NBS (423 mg, 2.4 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 실온에서 30분 동안 교반한 후, 반응물을 물 (50 mL)로 희석하고, 수성 층을 디클로로메탄 (2x30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 조 135를 수득하였으며, 이를 THF (20 mL) 중에 용해시켰다. THF 중 135의 용액에 MeMgBr (3 mL, 6 mmol, THF 중 2M)을 실온에서 첨가하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 포화 수성 NH4Cl 용액 (10 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (4x20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 잔류물을 실리카 겔 칼럼에 의해 석유 에테르 중 10 % - 20 % 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 136 (0.95 g, 63 %, 2종의 에피머, 비는 1H NMR에 의해 1:4로 결정됨)을 밝은 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 11
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시에틸)-2-(2-히드록시에틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 및 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시에틸)-2-(2-히드록시에틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올: 디클로로메탄 (15 mL) 중 136 (1 g, 1.5 mmol)의 용액을 BCl3 (15 mL, 15 mmol, 디클로로메탄 중 1M)으로 -78℃에서 3시간 동안 처리한 다음, 메탄올 (10 mL)을 첨가하여 켄칭하였다. 휘발성 물질을 증류시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 진한 NH4OH (2 mL)로 중화시켰다. 감압 하에 농축시킨 후, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 5 % - 20 % 메탄올로 용리시키면서 정제하여 상기 2종의 화합물의 혼합물을 수득하였다. 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 (칼럼, 선 파이어 정제용 C18; 이동상, 0.03 % NH4OH 및 CH3CN을 갖는 물 (10분 동안 10 %에서 45 %까지); 검출기, UV 220nm)을 사용하여 분리하여 실시예 162 (35 mg, 8.3 %, 더 빠르게 용리하는 이성질체)를 백색 고체로서
및 실시예 163 (200 mg, 47.7 %, 더 느리게 용리하는 이성질체)
을 수득하였다.
실시예 164 및 165
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-[(1S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-6,7-디올 및 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-[(1R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-6,7-디올:
<반응식 XXVIII>
단계 1
tert-부틸 N-[(3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-[[(tert-부틸디메틸실릴)옥시]메틸]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-2-일]-N-(프로프-2-엔-1-일)카르바메이트 (138): DMF (80 mL) 중 tert-부틸 N-[(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-[[(tert-부틸디메틸실릴)옥시]메틸]-6,7-디히드록시-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-2-일]-N-(프로프-2-엔-1-일)카르바메이트 137 (단계 1에서 프로필 일아민 대신 아릴 아민을 대체한 것을 제외하고는, 화합물 17, 실시예 2 단계 1-4와 유사한 방식으로 제조됨) (9 g, 19 mmol)의 용액에 0℃에서 수소화나트륨 (3.1 g, 92 mmol, 광유에 의해 70%로 분산됨)을 첨가하였다. 추가 30분 후, 벤질 브로마이드 (5.2 mL, 48 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 15℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 포화 수성 NH4Cl 용액 (200 mL)을 첨가하여 켄칭하고, 디클로로메탄 (3x50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3x50 mL)로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 1% - 5% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 138 (9.5 g, 77%) 을 밝은 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2
tert-부틸 N-[(3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-(히드록시메틸)-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-2-일]-N-(프로프-2-엔-1-일)카르바메이트 (139): THF (50 mL) 중 138 (10 g, 15 mmol)의 용액을 TBAF (8.5 g, 32 mmol)로 실온에서 1.5시간 동안 처리하였다. 이어서, 반응물을 물 (100 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 5% - 10% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 139 (6 g, 73%)를 밝은 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 3
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-2-[메틸(프로프-2-엔-1-일)아미노]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-5-카르브알데히드 (140): 건조 디클로로메탄 (70 mL) 중 DMSO (4.1 g, 52 mmol)의 용액을 (COCl)2 (4.9 g, 40 mmol)로 -78℃에서 30분 동안 처리한 다음, 디클로로메탄 (10 mL) 중 139 (3 g, 6.6 mmol)를 천천히 첨가하였다. 생성된 용액을 -30℃에서 3시간 동안 교반한 다음, -78℃로 다시 냉각시키고, 트리에틸아민 (10 g, 90 mmol)을 첨가하였다. -50℃에서 추가 30분 후, 생성된 혼합물을 물 (50 mL)에 의해 켄칭하고, 수성 층을 디클로로메탄 (3x30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 표제 화합물을 밝은 황색 시럽으로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가의 정제 없이 사용하였다.
단계 4
tert-부틸 N-[(3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-(2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-2-일]-N-(프로프-2-엔-1-일)카르바메이트 (141): THF (30 mL) 중 TBAF (500 mg, 2 mmol) 및 4Å 분자체 (3 g)의 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 THF (30 mL) 중 조 140 및 CF3TMS (3.7 g, 26 mmol)의 혼합물을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2.5시간 동안 교반하고, 이어서 추가의 TBAF (3 g, 11 mmol)를 첨가하였다. 1시간 후, 이어서 반응물을 물 (20 mL)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 여과를 수행하고, 여과물을 에틸 아세테이트 (3x20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x20 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 10% - 20 % 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 표제 화합물 (1.8 g, 53%, 2종의 이성질체, 비는 1H NMR에 의해 1:1로 결정됨)을 밝은 황색 오일로서 수득하였다.
단계 5
tert-부틸 N-[(3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-(2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-2-일]카르바메이트 (142): 1,4-디옥산 (20 mL) 중 141 (1.6 g, 2.6 mmol)의 용액에 Pd(PPh3)4 (760 mg, 0.6 mmol), 트리에틸아민 (664 mg, 6.5 mmol) 및 포름산 (242 mg, 5.2 mmol)을 질소 분위기 하에 실온에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃로 20분 동안 가열하고, 이어서 추가의 포름산 (605 mg, 26 mmol)을 첨가하였다. 60℃에서 밤새 교반한 후, 휘발성 물질을 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 디클로로메탄 (50 mL) 중에 용해시키고, 포화 수성 NaHCO3 용액 (30 mL)으로 중화시켰다. 수성 층을 디클로로메탄 (3x30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 20% - 30 % 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 142 (1.1 g, 77%)를 무색 오일로서 수득하였다.
단계 6
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-[(1S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-6,7-디올 및 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-[(1R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-6,7-디올: 디클로로메탄 (30 mL) 중 142 (1 g, 1.7 mmol)의 용액을 BCl3 (17 mL, 17 mmol, 1M 디클로로메탄)으로 -78℃에서 4시간 동안 처리하였다. 반응물을 메탄올 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 휘발성 물질을 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 진한 NH4OH (2 mL)로 중화시켰다. 감압 하에 농축시킨 후, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 5% - 20% 메탄올로 용리시키면서 정제하여 상기 2종의 화합물의 혼합물을 수득하였다. 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 (칼럼, 선 파이어 정제용 C18; 이동상, 0.03 % NH4OH 및 CH3CN (10분 내에 10 %에서 45 %까지)을 갖는 물; 검출기, UV 220nm)을 사용하여 분리하여 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-[(1S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-6,7-디올 실시예 164 (49 mg, 20%, 더 빠르게 용리하는 이성질체)을 밝은 황색 고체로서;
및 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-[(1S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-6,7-디올 (74 mg, 30%, 더 느리게 용리하는 이성질체)을 밝은 황색 고체로서;
수득하였다.
하기 표에 열거된 다음의 화합물을 이전 실시예에 대해 실질적으로 상기 기재된 바와 같은 방법에 의해 제조하였다.
표
실시예 175 및 176
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-[(2S)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-6,7-디올 및 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-[(2R)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-6,7-디올:
<반응식 XXIV>
단계 1
tert-부틸 N-[(3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-(1-히드록시에틸)-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-2-일]-N-(프로프-2-엔-1-일)카르바메이트 (143): 건조 디클로로메탄 (70 mL) 중 DMSO (9.2 g, 118 mmol)의 용액을 (COCl)2 (11.6 g, 92 mmol)으로 -78℃에서 30분 동안 처리한 다음, 디클로로메탄 (15 mL) 중 tert-부틸 N-[(3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-(히드록시메틸)-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-2-일]-N-(프로프-2-엔-1-일)카르바메이트 (8 g, 15 mmol)를 천천히 첨가하였다. 생성된 용액을 -30℃에서 3시간 동안 교반한 다음, -78℃로 다시 냉각시킨 후에, 트리에틸아민 (20 g, 180 mmol)을 첨가하였다. -50℃에서 추가 30분 후, 생성된 혼합물을 물 (50 mL)에 의해 켄칭하고, 수성 층을 디클로로메탄 (3x50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 140을 밝은 황색 시럽으로서 수득하였으며, 이를 무수 THF (100 mL) 중에 용해시켰다. 용액을 브로모(메틸)마그네슘 (20 ml, 40 mmol, THF 중 2M)로 0℃에서 밤새 처리하였다. 이어서, 반응물을 포화 수성 NH4Cl 용액 (100 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x50 mL)로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 10% - 20 % 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 143 (7 g, 87%, 2종의 이성질체, 비는 1H NMR에 의해 1:3.8로 결정됨)을 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 2
tert-부틸 N-[(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-아세틸-6,7-비스(벤질옥시)-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-2-일]-N-(프로프-2-엔-1-일)카르바메이트 (144): 디클로로메탄 (120 mL) 중 143 (6 g, 11 mmol)의 용액에 DMP (6.9 g, 16 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 1.5시간 동안 교반한 다음, 포화 수성 중탄산나트륨 용액 (80 mL)에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (3x100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x50 mL)로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 5% - 10 % 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 144 (4 g, 67%) 를 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 3
tert-부틸 N-[(3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-(1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-2-일]-N-(프로프-2-엔-1-일)카르바메이트 (145): THF (40 mL) 중 TBAF (1.1, 4.2 mmol) 및 4Å 분자체 (4 g)의 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 THF (40 mL) 중 144 (4.6 g, 8.3 mmol) 및 CF3TMS (5.9 g, 42 mmol)의 혼합물을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 추가의 TBAF (6 g, 22 mmol)를 첨가하였다. 1시간 후, 이어서 반응물을 물 (80 mL)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 여과를 수행하고, 여과물을 에틸 아세테이트 (3x50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x30 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 6% - 12% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 표제 화합물 (3.5 g, 68%, 2종의 이성질체, 비는 1H NMR에 의해 1:1로 결정됨)을 갈색 시럽으로서 수득하였다.
단계 4
tert-부틸 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-6,7-비스(벤질옥시)-5-((S)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일카르바메이트 (146): 1,4-디옥산 (50 mL) 중 145 (1.7 g, 2.7 mmol)의 용액에 질소 분위기 하에 Pd(PPh3)4 (643 mg, 0.5 mmol), 포름산 (260 mg, 5.6 mmol) 및 트리에틸아민 (702 mg, 7.0 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃로 20분 동안 가열하고, 이어서 추가의 포름산 (1.3 g, 28 mmol)을 첨가하였다. 60℃에서 밤새 교반한 후, 휘발성 물질을 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 디클로로메탄 (50 mL) 중에 용해시키고, 포화 수성 NaHCO3 용액 (30 mL)으로 중화시켰다. 수성 층을 디클로로메탄 (3x30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 15% - 30% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 표제 화합물 (1.4 g, 86%)을 오렌지색 시럽으로서 수득하였다.
단계 5
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-[(2S)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-6,7-디올 및 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-[(2R)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-6,7-디올: 디클로로메탄 (20 mL) 중 146 (0.9 g, 1.5 mmol)의 용액을 BCl3 (15 mL, 15 mmol, 1M 디클로로메탄)으로 -78℃에서 4시간 동안 처리하였다. 반응물을 메탄올 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 휘발성 물질을 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 진한 NH4OH (2 mL)로 중화시켰다. 감압 하에 농축시킨 후, 조 생성물을 실리카 겔 칼럼에 의해 디클로로메탄 중 5% - 20% 메탄올로 용리시키면서 정제하여 상기 2종의 화합물의 혼합물을 수득하였다. 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건 (칼럼, 선 파이어 정제용 C18; 이동상, 0.03 % NH4OH 및 CH3CN (20분 내에 15%에서 30%까지)을 갖는 물; 검출기, UV 220nm)을 사용하여 분리하여 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-[(2S)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-6,7-디올 (35.2 mg, 8%, 더 빠르게 용리하는 이성질체)을 백색 고체로서
및 (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-[(2R)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-6,7-디올 (35.1 mg, 8%, 더 느리게 용리하는 이성질체)을 백색 고체로서
수득하였다.
실시예 177 및 178
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-비닐-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 & (3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-에틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올:
<반응식 XXX>
단계 1
tert-부틸 알릴((3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일)카르바메이트 (147): DMF (300 mL) 중 tert-부틸 알릴((3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-6,7-디히드록시-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일)카르바메이트 137 (단계 1에서 프로필 일아민 대신 알릴 아민을 대체한 것을 제외하고는, 화합물 17, 실시예 2 단계 1-4와 유사한 방식으로 제조됨) (20 g, 42 mmol)의 용액을 수소화나트륨 (5.8 g, 168 mmol, 광유에 의해 70%로 분산됨)으로 0℃에서 30분 동안 처리한 다음, PMBBr (34 g, 168 mmol)을 첨가하였다. 15℃에서 추가 1.5시간 후, 반응물을 물 (300 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3x150 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 5% - 20% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 표제 화합물 (16 g, 53%)을 밝은 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2
tert-부틸 알릴((3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(히드록시메틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일)카르바메이트 (148): THF (100 mL) 중 147 (15 g, 21 mmol)의 용액을 TBAF (8.4 g, 32 mmol)로 실온에서 3시간 동안 처리하였다. 반응물을 물 (150 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3x100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x50 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 10% - 30% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 148 (11.3 g, 90%)을 밝은 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 3
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(히드록시메틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일카르바메이트 (149): 1,4-디옥산 (100 mL) 중 148 (10.5 g, 18 mmol)의 용액에 Pd(PPh3)4 (4.2 g, 3.6 mmol), Et3N (4.6 g, 45 mmol) 및 포름산 (4.9 g, 107 mmol)을 N2 분위기 하에 실온에서 첨가하였다. 60℃에서 20분 후, 추가의 포름산 (24.5 g, 535 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 60℃에서 추가 3시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 디클로로메탄 (100 mL) 중에 용해시키고, 포화 수성 NaHCO3 용액 (30 mL)으로 중화시켰다. 수성 층을 디클로로메탄 (3x50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 10% - 50% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 표제 화합물 (6.4 g, 65%)을 백색 시럽으로서 수득하였다.
단계 4
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시-2-(트리메틸실릴)에틸)-6,7-비스(4-메톡시벤질옥시)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일카르바메이트 (51): 디클로로메탄 (50 mL) 및 H2O (10 mL) 중 3 (2 g, 3.6 mmol), KHCO3 (1.6 g, 16 mmol), TBAB (105 mg, 0.4 mmol), TEMPO (62 mg, 0.4 mmol)의 혼합물에 NBS (695 mg, 3.9 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 실온에서 30분 동안 교반한 후, 반응물을 물 (50 mL)로 희석하고, 수성 층을 디클로로메탄 (2x40 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 조 알데히드 150을 수득하였으며, 이를 THF (20 mL) 중에 용해시켰다. 용액을 ((트리메틸실릴)메틸)마그네슘 클로라이드 (7.2 mL, 7.2 mmol, 에테르 중 1M)로 처리하였다. 10℃에서 2시간 후, 반응물을 포화 수성 NH4Cl 용액 (40 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (4x20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x30 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 5% - 30% 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 151 (1.1 g, 48 %, 2종의 에피머, 비는 1H NMR에 의해 1:3으로 결정됨)을 밝은 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 5
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-디히드록시-5-비닐-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일카르바메이트 (6): 디클로로메탄 (20 mL) 중 151 (900 mg, 1.4 mmol)의 용액을 BF3 (0.1 mL, 0.1 mmol, 에테르 중 1M)으로 10℃에서 20분 동안 처리하였다. 휘발성 물질을 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 디클로로메탄 (20 mL) 중에 용해시키고, 포화 수성 NaHCO3 용액 (10 mL)으로 중화시켰다. 수성 층을 디클로로메탄 (5x20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 1% - 10% 메탄올을 사용하여 정제하여 152 (240 mg, 55%)를 밝은 황색 시럽으로서 수득하였다.
단계 6
tert-부틸 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-에틸-6,7-디히드록시-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-2-일카르바메이트 (7): 메탄올 (20 mL) 중 152 (160 mg, 0.5 mmol) 및 Pd/C (16 mg, 10% w/w)의 혼합물을 H2 분위기 (1 atm) 하에 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 여과한 후, 용매를 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 2% - 10% 메탄올을 사용하여 정제하여 153 (130 mg, 81%)을 백색 시럽으로서 수득하였다.
단계 7
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-비닐-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올: 디클로로메탄 (10 mL) 중 152 (65 mg, 0.2 mmol)의 용액에 TFA (1 mL)를 첨가하였다. 실온에서 2시간 후, 휘발성 물질을 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 진한 NH4OH (1 mL)로 중화시켰다. 감압 하에 농축시킨 후, 조 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 5% - 30% 메탄올을 사용하여 정제하여 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-비닐-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (30 mg, 68 %)을 백색 고체로서 수득하였다.
단계 8
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-에틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올: 디클로로메탄 (10 mL) 중 153 (70 mg, 0.2 mmol)의 용액에 TFA (1 mL)를 첨가하였다. 실온에서 2시간 후, 휘발성 물질을 제거하여 잔류물을 수득하였으며, 이를 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 진한 NH4OH (1 mL)로 중화시켰다. 감압 하에 농축시킨 후, 조 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 5% - 30% 메탄올을 사용하여 정제하여 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-에틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (33 mg, 69 %)을 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 179 및 180
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-1-플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 & (3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올:
<반응식 XXXI>
단계 1
((3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-6,7-디히드록시-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-5-일)메틸 벤조에이트 (154): 피리딘 (150 mL) 중 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(히드록시메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 (5 g, 20 mmol)의 용액에 디클로로메탄 (10 mL) 중 벤조일 클로라이드 (3.4 g, 24 mmol)의 용액을 0℃에서 10분 내에 첨가한 다음, 얼음/염 조에서 0℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 수성 NaHCO3 용액 (100 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, 디클로로메탄 (3x100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 2 % - 5 % 메탄올을 사용하여 정제하여 표제 화합물 (4.5 g, 63%)을 회백색 고체로서 수득하였다.
단계 2
[(1R,2R,6R,8R,9S)-4-(디메틸아미노)-11,11-디메틸-7,10,12-트리옥사-5-티아-3-아자트리시클로[7.3.0.0{2,6}]도데스-3-엔-8-일]메틸 벤조에이트 (155): DMF (20 mL) 중 154 (3.0 g, 8.5 mmol)의 용액에 4-메틸벤젠술폰산 수화물 (3.2 g, 17 mmol) 및 2-메톡시프로프-1-엔 (6.1 g, 85 mmol)을 순차적으로 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 15분 동안 교반한 후에, 반응물을 포화 수성 중탄산나트륨 용액 (20 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, 이어서 이를 디클로로메탄 (3x20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 석유 에테르 중 1 % - 10 % 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 155 (1.6 g, 48%)를 회백색 고체로서 수득하였다.
단계 3
[(1R,2R,6R,8R,9S)-4-(디메틸아미노)-11,11-디메틸-7,10,12-트리옥사-5-티아-3-아자트리시클로[7.3.0.0{2,6}]도데스-3-엔-8-일]메탄올 (156): 메탄올 (30 mL) 중 155 (4.0 g, 10 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (704 mg, 5.1 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반한 후에, 반응물을 물 (20 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, 이어서 이를 디클로로메탄 (3x20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 1 % -5 % 메탄올을 사용하여 정제하여 표제 화합물 (2.6 g, 88%)을 백색 고체로서 수득하였다.
단계 4
(1R,2R,6R,8S,9S)-4-(디메틸아미노)-11,11-디메틸-7,10,12-트리옥사-5-티아-3-아자트리시클로[7.3.0.0{2,6}]도데스-3-엔-8-카르브알데히드 (157): 디클로로메탄 (20 mL) 및 물 (5 mL) 중 156 (500 mg, 1.7 mmol)의 용액에 2,2,6,6-테트라메틸피페리디노옥시 (13 mg, 0.08 mmol), 테트라부틸암모늄 브로마이드 (27 mg, 0.08 mmol), 중탄산칼륨 (788 mg, 7.9 mmol) 및 N-브로모숙신이미드 (342 mg, 1.9 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 30분 동안 교반한 후에, 반응물을 포화 수성 아황산나트륨 용액 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, 이어서 이를 디클로로메탄 (2x10 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 10 % 에틸 아세테이트를 사용하여 정제하여 157 (300 mg, 54%)을 회백색 고체로서 수득하였다.
단계 5
(1S)-1-[(1R,2R,6R,8R,9S)-4-(디메틸아미노)-11,11-디메틸-7,10,12-트리옥사-5-티아-3-아자트리시클로[7.3.0.0{2,6}]도데스-3-엔-8-일]에탄-1-올 (5) & (1R)-1-[(1R,2R,6R,8R,9S)-4-(디메틸아미노)-11,11-디메틸-7,10,12-트리옥사-5-티아-3-아자트리시클로[7.3.0.0{2,6}]도데스-3-엔-8-일]에탄-1-올 (159): THF (30 mL) 중 157 (1.0 g, 3.1 mmol)의 교반 용액에 0℃에서 MeMgCl (4.6 mL, 4.6 mmol, THF 중 1M 용액)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반한 후에, 반응물을 10 % 수성 NH4Cl 용액 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, 이어서 이를 에틸 아세테이트 (3x20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 잔류물을 키랄 정제용 HPLC에 의해 다음의 조건: (키랄팩 IC(SFC)2*25cm, 5um키랄-P(IC)002S09IC00CJ-MI001, 220 nm, 이동상: 에탄올/헥산=1/1, 실행 14 분)을 사용하여 정제하여 158 (230 mg, 23%, 더 느리게 용리하는 이성질체)을 회백색 고체로서
및 160 (270 mg, 30%, 더 빠르게 용리하는 이성질체)을 회백색 고체로서
수득하였다.
단계 6
(1R,2R,6R,8S,9S)-8-[(1R)-1-플루오로에틸]-N,N,11,11-테트라메틸-7,10,12-트리옥사-5-티아-3-아자트리시클로[7.3.0.0{2,6}]도데스-3-엔-4-아민 (159): 디클로로메탄 (10 mL) 중 158 (230 mg, 1 mmol)의 용액에 DAST (0.6 mL, 5.0 mmol)로 -20℃에서 1시간 동안 및 실온에서 추가 1시간 동안 처리하였다. 반응물을 포화 수성 중탄산나트륨 용액 (10 mL)으로 켄칭하고, 이어서 이를 디클로로메탄 (2x10 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2x5 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 1 % - 5 % 메탄올을 사용하여 정제하여 표제 화합물 (160 mg, 34%)을 백색 고체로서 수득하였다.
(1R,2R,6R,8S,9S)-8-[(1S)-1-플루오로에틸]-N,N,11,11-테트라메틸-7,10,12-트리옥사-5-티아-3-아자트리시클로[7.3.0.0{2,6}]도데스-3-엔-4-아민 (161): 단계 6과 동일한 절차를 사용하여, 160을 표제 화합물로 전환시켰다. 화합물 161 (160 mg, 30%)을 백색 고체로서 수득하였다.
단계 7
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-1-플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올: 메탄올 (10 mL) 중 159 (150 mg, 0.16 mmol)의 용액을 진한 수성 HCl (1 mL)로 실온에서 1시간 동안 처리한 다음, 생성된 용액을 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 진한 NH4OH (1 mL)로 중화시켰다. 모든 용매를 제거한 후, 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 10 % 메탄올을 사용하여 정제하여 표제 화합물 (50.1 mg, 38%)을 백색 고체로서 수득하였다.
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올 실시예 180. 화합물 161을 단계 7에 상기 기재된 바와 동일한 절차를 이용하여 표제 화합물로 전환시켰다. 표제 화합물 (30 mg, 23%)을 백색 고체로서 수득하였다.
생물학적 활성
O-GlcNAcase 활성의 억제에 대한 KI 값의 결정을 위한 검정
동역학적 분석을 위한 실험 절차
효소적 반응을 ddH2O 중에 용해된 2 mM 4-메틸움벨리페릴 N-아세틸-β-D-글루코사미니드 2수화물 (시그마(Sigma) M2133)을 기질로서 사용하여 50mM NaH2PO4, 100 mM NaCl 및 0.1% BSA (pH 7.0)를 함유한 반응물 중에서 수행하였다. 반응에 사용된 정제된 인간 O-GlcNAcase 효소의 양은 0.7 nM이었다. 다양한 농도의 시험 화합물을 효소에 첨가한 다음, 반응을 개시하였다. 반응을 실온에서 96-웰 플레이트에서 수행하고, 기질 첨가에 의해 개시하였다. 형광 생성물의 생성을 45분 동안 매 60초마다 355nm에서의 여기 및 460nm에서 검출되는 방출을 갖는 테칸 인피니트(Tecan Infinite) M200 플레이트-판독기를 이용하여 측정하였고, 4-메틸움벨리페론 (시그마 M1381)을 사용하여 표준 곡선을 생성하였다. S자형 용량 반응 곡선에 대한 표준 곡선 적합화 알고리즘을 이용하여, 생성물 생성의 기울기를 각 농도의 시험 화합물에 대해 결정하고 플로팅하였다. 데이터의 4 파라미터 로지스틱 곡선 적합화에 대한 값을 결정하였다.
Ki 값을 쳉-프루소프(Cheng-Prusoff) 방정식을 이용하여 결정하고; 기질에 대한 O-GlcNacase의 Km은 0.2 mM이었다.
실시예 1 내지 218을 상기 기재된 검정에서 시험하였고, 0.1 nM - 10 μM 범위의 O-GlcNAcase의 억제에 대한 KI 값을 나타내었다.
β-헥소사미니다제 활성 억제에 대한 KI 값의 결정을 위한 검정
동역학적 분석을 위한 실험 절차
효소적 반응을 ddH2O 중에 용해된 2 mM 4-메틸움벨리페릴 N-아세틸-β-D-글루코사미니드 2수화물 (시그마 M2133)을 기질로서 사용하여 50mM NaH2PO4, 100 mM NaCl 및 0.1% BSA (pH 7.0)를 함유한 반응물 중에서 수행하였다. 반응에 사용된 정제된 인간 β 헥소사미니다제 효소의 양은 24 nM이었다. 다양한 농도의 시험 화합물을 효소에 첨가한 다음, 반응을 개시하였다. 반응을 실온에서 96-웰 플레이트에서 수행하고, 기질 첨가에 의해 개시하였다. 형광 생성물의 생성을 45분 동안 매 60초마다 355nm에서의 여기 및 460nm에서 검출되는 방출을 갖는 테칸 인피니트 M200 플레이트-판독기를 이용하여 측정하였고, 4-메틸움벨리페론 (시그마 M1381)을 사용하여 표준 곡선을 생성하였다. S자형 용량 반응 곡선에 대한 표준 곡선 적합화 알고리즘을 이용하여, 생성물 생성의 기울기를 각 농도의 시험 화합물에 대해 결정하고 플로팅하였다. 데이터의 4 파라미터 로지스틱 곡선 적합화에 대한 값을 결정하였다.
Ki 값을 쳉-프루소프 방정식을 이용하여 결정하였다.
이 검정에서 시험되는 경우, 본원에 기재된 다수의 화합물은 10 nM 내지 100 μM 초과의 범위의 β-헥소사미니다제의 억제에 대한 KI 값을 나타내었다.
β-헥소사미니다제에 비한 O-GlcNAcase의 억제의 선택성 비는 여기서 다음과 같이 규정된다:
KI (β-헥소사미니다제)/KI (O-GlcNAcase)
일반적으로, 본원에 기재된 화합물은 약 10 내지 100000의 범위의 선택성 비를 나타내었다. 따라서, 본 발명의 다수의 화합물은 β-헥소사미니다제에 비해 O-GlcNAcase의 억제에 대해 높은 선택성을 나타낸다.
O-GlcNAcase 활성을 억제하는 화합물에 대한 세포 활성의 결정을 위한 검정
세포 단백질로부터 O-GlcNAc를 제거하는 O-GlcNAcase의 억제는 세포에서 O-GlcNAc화 단백질의 수준을 증가시킨다. O-GlcNAc화 단백질의 증가는 O-GlcNAc화 단백질에 결합하는 항체, 예컨대 RL-2에 의해 측정될 수 있다. O-GlcNAc화 단백질:RL2 항체 상호작용의 양은 효소 결합 면역흡착 검정 (ELISA) 절차에 의해 측정될 수 있다.
내인성 수준의 O-GlcNAcase를 발현하는 다양한 조직 배양 세포주가 사용될 수 있고; 그 예는 래트 PC-12, 및 인간 U-87 또는 SK-N-SH 세포를 포함한다. 세포를 대략 10,000개 세포 / 웰로 96-웰 플레이트에 플레이팅하였다. 시험하려는 화합물을 DMSO (2 또는 10 mM 원액) 중에 용해시키고, 이어서 테칸 워크스테이션을 이용하는 2단계 방법으로 DMSO 및 물로 희석하였다. 세포를 희석된 화합물로 24시간 동안 처리하여 (200 μL l 웰 부피에 5.4 μL), 화합물 농도 의존성 반응을 측정하기에 바람직한 최종 농도의 억제제에 도달하게 하였고, 전형적으로, 10 μM에서 출발하는 10개의 3배 희석 단계를 농도 반응 곡선을 결정하기 위해 사용하였다. 세포 용해물을 제조하기 위해, 화합물 처리된 세포로부터 배지를 제거하고, 세포를 포스페이트 완충 염수 (PBS)로 1회 세척하고, 이어서 실온에서 5분 동안 프로테아제 억제제 및 PMSF를 함유한 포스포세이프(Phosphosafe) 시약 (노바젠 인크(Novagen Inc), 위스콘신주 매디슨) 50 μL 중에 용해시켰다. 세포 용해물을 수집하고, 새로운 플레이트에 옮기고, 이어서 이를 검정 플레이트에 직접적으로 코팅하거나, 또는 ELISA 절차에 사용될 때까지 -80℃에서 동결시켰다. 원하는 경우에, 샘플의 모든 단백질 농도를 BCA 방법을 이용하여 샘플 20 μL를 사용하여 결정하였다.
검정의 ELISA 부분을 100 μL/웰의 세포 용해물 (프로테아제 억제제, 포스파타제 억제제 및 PMSF를 함유한 PBS를 사용한 1:10 희석 용해물)로 4℃에서 밤새 코팅된 흑색 맥시소르프(Maxisorp) 96-웰 플레이트에서 수행하였다. 다음날, 웰을 300 μL/웰의 세척 완충제 (0.1% 트윈 20을 함유한 트리스-완충 염수)로 3회 세척하였다. 웰을 100 μL/웰의 블로킹 완충제 (트리스 완충 염수 w/0.05% 트윈 20 및 2.5% 소 혈청 알부민)로 블로킹하였다. 이어서, 각 웰을 300 ul/웰의 세척 완충제로 2회 세척하였다. 블로킹 완충제 중 1:1000로 희석된 항 O-GlcNAc 항체 RL-2 (압캠(Abcam), 매사추세츠주 캠브리지)를 100 ul/웰로 첨가하였다. 플레이트를 밀봉하고, 부드럽게 진탕시키면서 37℃에서 2시간 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 웰을 300 ul/웰의 세척 완충제로 3회 세척하였다. RL-2 결합된 양고추냉이 퍼옥시다제 (HRP)의 양을 검출하기 위해, 접합된 염소 항-마우스 2차 항체 (블로킹 완충제 중에 1:3000으로 희석됨)를 100 μL/웰로 첨가하였다. 플레이트를 부드럽게 진탕시키면서 37℃에서 60분 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 각 웰을 300 ul/웰의 세척 완충제로 3회 세척하였다. 검출 시약, 100 μL/웰의 암플렉스 울트라 레드(Amplex Ultra RED) 시약 (10 mM 암플렉스 울트라 레드 원액 30 μL를 3% 과산화수소, H2O2 18 μL를 함유한 PBS 10 ml에 첨가함으로써 제조됨)을 첨가하였다. 검출 반응물을 실온에서 15분 동안 인큐베이션하고, 이어서 530 nm에서의 여기 및 590 nm에서의 방출로 판독하였다.
ELISA 검정에 의해 검출된 바와 같은 O-GlcNAc화 단백질의 양을 S자형 용량 반응 곡선에 대한 표준 곡선 적합화 알고리즘을 이용하여 시험 화합물의 각 농도에 대해 플로팅하였다. 데이터의 4 파라미터 로그 곡선 적합화에 대한 값을 결정하였고, 여기서 곡선의 변곡점은 시험 화합물의 효능 값이다.
상기 기재된 결합 및 세포-기반 검정으로부터의 대표적인 데이터는 하기 표에 나타내었다. 본 발명의 특정 화합물은 WO 2006/092049 및 WO 2008/025170에 개시된 화합물과 비교하여 이러한 검정 중 하나 이상에서 보다 더 우수한 효능을 나타내었다.
참고문헌
Claims (21)
- 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
<화학식 I>
상기 식에서,
각각의 R은 독립적으로 H 또는 C(O)CH3이고;
R1 및 R2는 독립적으로 C1-4알킬이고;
R3은 C1-6알킬 또는 CF3이고;
R4는 H 및 C1-6알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R5는 OH이다. - 제1항에 있어서, 화학식 Ia의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
<화학식 Ia>
- 제1항에 있어서,
R1 및 R2가 독립적으로 메틸 또는 에틸이고;
R3이 메틸 또는 에틸이고;
R4가 H, 메틸 및 에틸로 이루어진 군으로부터 선택된 것인
화합물. - 제1항에 있어서, R3이 CF3이고, R5가 OH인 화합물.
- 하기 군:
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시에틸)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(2-히드록시프로판-2-일)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(2-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-에틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-비닐-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-에틸-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(1,1-디플루오로에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시에틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시에틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시프로필)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시프로필)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(1-히드록시-2-메틸프로필)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(시클로프로필(히드록시)메틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(히드록시(피리딘-3-일)메틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(히드록시(페닐)메틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시알릴)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시알릴)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시-2-메틸알릴)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시부트-3-에닐)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시부트-3-에닐)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((R)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((S)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-시클로프로필(히드록시)메틸)-2-(에틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-(1-히드록시-2-메틸프로필)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-(히드록시(페닐)메틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((R)-1-히드록시알릴)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((S)-1-히드록시알릴)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-(2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((R)-1-히드록시-2-메틸알릴)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((R)-1-히드록시부틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((S)-1-히드록시부틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((R)-1-히드록시펜틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((S)-1-히드록시펜틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((R)-1-히드록시부트-3-에닐)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((S)-1-히드록시부트-3-에닐)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(2-히드록시프로판-2-일)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시알릴)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시부틸)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시부틸)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시펜틸)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시펜틸)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(1-히드록시프로필)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시부트-3-에닐)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시부트-3-에닐)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시에틸)-2-(메톡시(메틸)아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시에틸)-2-(메톡시(메틸)아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(시클로프로필메틸아미노)-5-((R)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(시클로프로필메틸아미노)-5-((S)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸(메틸)아미노)-5-((S)-1-히드록시부트-3-에닐)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸(메틸)아미노)-5-((R)-1-히드록시부트-3-에닐)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(에틸(메틸)아미노)-5-(2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸(메틸)아미노)-5-(1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸(메틸)아미노)-5-((R)-1-히드록시프로필)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸(메틸)아미노)-5-(1-히드록시프로필)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(에틸(메틸)아미노)-5-((R)-1-히드록시알릴)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(에틸(메틸)아미노)-5-(1-히드록시알릴)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-히드록시프로필)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-히드록시알릴)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-1-히드록시-2-메틸알릴)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-히드록시-2-메틸알릴)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-1-히드록시부트-3-에닐)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-히드록시부트-3-에닐)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-1-히드록시부틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-히드록시부틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-1-히드록시펜틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-히드록시펜틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-히드록시헥실)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-1-히드록시헵틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-히드록시헵틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-((R)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-((S)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-(2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-((S)-1-히드록시프로필)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-((R)-1-히드록시알릴)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-((S)-1-히드록시알릴)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-((R)-1-히드록시부트-3-에닐)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-((S)-1-히드록시부트-3-에닐)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(2-히드록시프로판-2-일)-2-(메틸(프로필)아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(1-히드록시프로필)-2-(메틸(프로필)아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시에틸)-2-(메틸(프로필)아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시알릴)-2-(메틸(프로필)아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시알릴)-2-(메틸(프로필)아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시부트-3-에닐)-2-(메틸(프로필)아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시부트-3-에닐)-2-(메틸(프로필)아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(2-히드록시프로판-2-일)-2-(피롤리딘-1-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시에틸)-2-(피롤리딘-1-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시프로필)-2-(피롤리딘-1-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시프로필)-2-(피롤리딘-1-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시알릴)-2-(피롤리딘-1-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(메틸아미노)-5-((R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(프로필아미노)-5-((R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(메톡시(메틸)아미노)-5-((R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(메틸아미노)-5-((S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(프로필아미노)-5-((S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(메톡시(메틸)아미노)-5-((S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((S)-1-플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((S)-1-히드록시프로필)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((R)-1-히드록시프로필)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-플루오로에틸)-2-(피롤리딘-1-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시부틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시부틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시펜틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시펜틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시헥실)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시헥실)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시에틸)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(시클로프로필메틸아미노)-5-((S)-1-히드록시-2-메틸알릴)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(시클로프로필메틸아미노)-5-((R)-1-히드록시프로필)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(시클로프로필메틸아미노)-5-((S)-1-히드록시프로필)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(시클로프로필메틸아미노)-5-((R)-1-히드록시부트-3-에닐)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(시클로프로필메틸아미노)-5-(1-히드록시부트-3-에닐)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(시클로프로필메틸아미노)-5-((S)-1-히드록시알릴)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(2-시클로프로필에틸아미노)-5-((R)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(2-시클로프로필에틸아미노)-5-((S)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(2-시클로프로필에틸아미노)-5-(2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸(메틸)아미노)-5-((R)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸(메틸)아미노)-5-((S)-1-히드록시부틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸(메틸)아미노)-5-((S)-1-히드록시펜틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-1-히드록시헥실)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시부틸)-2-(피롤리딘-1-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시펜틸)-2-(피롤리딘-1-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(1,1-디플루오로에틸)-2-(메톡시(메틸)아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-에틸-2-(에틸(메틸)아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-에틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-비닐-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-에틸-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-에틸-2-(에틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-비닐-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(1-히드록시시클로펜틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(1-히드록시시클로펜트-3-에닐)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(2-플루오로프로판-2-일)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(메틸아미노)-5-(프로프-1-엔-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(2-플루오로에틸아미노)-5-((S)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(3-플루오로프로필아미노)-5-((S)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(3-히드록시프로필)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-(2-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(2-히드록시에틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(2-플루오로프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(1,1-디플루오로에틸)-2-(프로필아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-(1,1-디플루오로에틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-((S)-2,2-디플루오로-1-히드록시에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-((R)-2,2-디플루오로-1-히드록시에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1,2-디히드록시에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1,2-디히드록시에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-2-플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-2-플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(2-플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(2,2-디플루오로에틸)-2-(디메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(2,2,2-트리플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(메틸아미노)-5-((S)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(메틸아미노)-5-(1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시에틸)-2-(2-히드록시에틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시에틸)-2-(2-히드록시에틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-[(1S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-[(1R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(알릴아미노)-5-((S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(알릴아미노)-5-((R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(알릴아미노)-5-((R)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(알릴아미노)-5-((S)-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(알릴아미노)-5-((S)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(알릴아미노)-5-(1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(2-히드록시에틸아미노)-5-((R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(알릴아미노)-5-(2-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(알릴아미노)-5-(2,2-디플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-[(2S)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-[(2R)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일]-3aH,5H,6H,7H,7aH-피라노[3,2-d][1,3]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-비닐-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-아미노-5-에틸-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-1-플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1-플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-플루오로에틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-((R)-1-플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1,2,2,2-테트라플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-플루오로에틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-((S)-1-플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-1,2,2,2-테트라플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-((R)-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-((S)-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-((R)-2,2-디플루오로-1-히드록시에틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-((S)-2-플루오로-1-히드록시에틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-5-((R)-2-플루오로-1-히드록시에틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(2-플루오로에틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(2,2-디플루오로에틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(메틸아미노)-5-(2,2,2-트리플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-(2,2,2-트리플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(프로필아미노)-5-(2,2,2-트리플루오로에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-((S)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-((R)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((R)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-((S)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((S)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((R)-1,1,1-트리플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((R)-1-히드록시에틸)-2-(이속사졸리딘-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시에틸)-2-(이속사졸리딘-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(에틸아미노)-5-((S)-1-히드록시프로필)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-((S)-1-히드록시헵틸)-2-(메틸아미노)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(에틸(메틸)아미노)-5-((S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(에틸(메틸)아미노)-5-((R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-((S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(아제티딘-1-일)-5-((R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(2-플루오로에틸아미노)-5-((R)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(2-플루오로에틸아미노)-5-((S)-2,2,2-트리플루오로-1-히드록시에틸)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-2-(디메틸아미노)-5-(1,1,1,3,3,3-헥사플루오로-2-히드록시프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올;
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(메틸아미노)-5-((R)-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올; 및
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(메틸아미노)-5-((S)-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)-5,6,7,7a-테트라히드로-3aH-피라노[3,2-d]티아졸-6,7-디올
로부터 선택된 화합물 또는 상기 화합물 중 어느 하나의 제약상 허용되는 염. - 삭제
- 유효량의 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는, 신경변성 질환 및 암으로 이루어진 군으로부터 선택된 상태의 치료를 필요로 하는 대상체에서 상기 상태를 치료하기 위한 제약 조성물.
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