KR101917419B1

KR101917419B1 - Ｃｒｉｆ１을 유효성분으로 포함하는 자가면역질환의 예방 또는 치료용 조성물

Info

Publication number: KR101917419B1
Application number: KR1020160049877A
Authority: KR
Inventors: 조미라; 박성환; 곽승기; 공영윤; 박진실; 김성민
Original assignee: 가톨릭대학교 산학협력단
Priority date: 2016-04-25
Filing date: 2016-04-25
Publication date: 2018-11-09
Also published as: KR20170121449A

Abstract

본 발명은 Crif1을 유효성분으로 포함하는 자가면역질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 Crif1은 류마티스 관절염의 증상 및 발병율 억제와 파골세포 분화 억제 효과를 가지며, 쇼그렌증후군 및 다발성 경화증의 증상을 효과적으로 예방 및 치료할 수 있어, 자가면역질환의 새로운 치료제로 사용될 수 있는 효과가 있다.

Description

Ｃｒｉｆ１을 유효성분으로 포함하는 자가면역질환의 예방 또는 치료용 조성물{Composition for preventing or treating autoimmune disease comprising Crif1}

본 발명은 Crif1을 함유한 자가면역질환의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

면역체계는 해로운 외부물질인 항원(antigen)으로부터 신체를 보호하는 역할을 한다. 이러한 항원의 종류로는 박테리아, 바이러스, 독소, 암세포와 다른 사람 혹은 동물로의 혈액과 조직이 이에 해당된다. 면역체계는 이러한 해로운 물질들을 파괴하기 위하여 항체를 생산하는데, 자가 면역에 이상이 생긴 경우, 면역체계는 자신의 건강한 신체의 장기와 해로운 항원을 구분하지 못하여, 정상적인 조직을 파괴하게 되는데 이러한 반응을 통해 유발하는 질환이 자가면역질환(autoimmune disease)이다.

자가 면역에 이상이 생긴 경우는 신체의 정상적인 조직을 대상으로 반응이 일어나게 되며 면역체계가 신체의 장기와 항원을 구분하지 못하게 되는 원인은 박테리아와 같은 미생물 또는 약물이 자가 면역 질환에 걸리기 쉬운 유전자를 가지고 태어난 사람들에게 병을 유발하는 것이라는 가설이 있다.

자가 면역 반응의 치료는 자가 면역 반응을 조절하고, 신체의 손상된 면역기능을 회복시키는 것을 목적으로 이루어지며, 이는 다양한 자가 면역 질환의 종류에 따라 치료의 방법에 차이가 있다. 예를 들어, 혈액에 문제가 생긴 경우에는 수혈을 해야하며, 뼈, 관절 혹은 근육에 문제가 생긴 경우에는 운동 혹은 다른 기능적인 치료를 받아야 한다. 또한 면역 체계의 반응을 조절하기 위해서 약물이 처방된다. 면역억제약(immunosuppressive medicine)이라고 불리며, 사용되고 있는 면역억제약의 종류에는 코르티코스테로이드(corticosteroids) 약물인 프레드니손(prednisone)과 비스테로이드성(nonsteroid) 약물인 시클로포스파미드(cyclophosphamide), 아자티오프린(azathioprine), 및 타크로리무스(tacrolimus) 등이 있다.

그러나 이러한 치료제들은 체내 부작용을 유발하고 있으며 치료 효과도 우수하지 못하기 때문에 보다 안전하면서도 치료 효과가 우수한 새로운 자가면역질환 치료제의 개발이 필요한 실정이다.

한편, CRIF1은 미토콘드리아에 존재하며 폴리펩티드 탈출구(polypeptide exit tunnel) 근처에 위치된, 큰 미토리포좀(mitoribosomal) 서브유닛과 관련되어 있다. CRIF1의 결핍은 mtDNA-암호화된 신생 OXPHOS 폴리펩티드의 비정상적인 합성 및 미토콘드리아 내막으로의 결함이 있는 삽입과 같은, 다양한 결함을 초래하는 것으로 알려져 있으며(Ryu MJ, et al. 2013 PLoSGenet 9: e1003356), CRIF1의 결핍은 OXPHOS 복합체 I, III 및 IV에서 결합(assembly)의 실패뿐만 아니라 상당히 낮은 수준의 CCCP(carbonyl cyanide m-chloro phenyl hydrazine)-자극된 미토콘드리아의 산소소비량 및 높은 수준의 미토콘드리아 ROS로 인한 미토콘드리아 기능의 저하를 초래하는 것으로 알려져 있다(Kim SJ, et al. 2012 CellMetab 16: 274-283).

이렇듯 CRIF1은 미토콘드리아의 기능에 영향을 미치는 것이 알려져 있을 뿐, 자가면역질환과의 관련성에 대해서는 거의 연구된 바가 없다.

대한민국 공개특허 제2016-0022628호

이에 본 발명은 Crif1가 자가면역질환을 효과적으로 치료할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서 본 발명의 목적은 Crif1 유전자 또는 상기 유전자로부터 코딩되는 Crif1 단백질을 유효성분으로 포함하는 자가면역질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 Crif1 유전자 또는 상기 유전자로부터 코딩되는 Crif1 단백질을 유효성분으로 포함하는 자가면역질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 Crif1 유전자는 서열번호 1의 염기서열로 이루어진 것일 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 Crif1 단백질은 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어진 것일 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 자가면역질환은 류마티스 관절염 (Rheumatoid Arthritis), 다발성 경화증(Multiple Sclerosis) 또는 쇼그렌 증후군(Sjogren syndrome)일 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 Crif1 유전자는 Crif1 유전자가 작동가능하게 연결된 발현 벡터 내에 함유된 것일 수 있다.

본 발명은 Crif1을 유효성분으로 포함하는 자가면역질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 Crif1 유전자를 과발현시킬 경우, 류마티스관절염, 쇼그렌증후군 및 다발성 경화증과 같은 자가면역질환을 효과적으로 치료할 수 있다.

도 1은 류마티스 관절염 동물모델을 대상으로 Crif1 과발현 벡터 주입에 따른 관절염 지수와 관절염 발병율을 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 류마티스 관절염 동물모델을 대상으로 Crif1 과발현 벡터 주입에 따른 파골세포 분화 정도를 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 쇼그렌 증후군 동물모델을 대상으로 Crif1 과발현 벡터 주입에 따른 타액분비율을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 다발성 경화증 동물모델을 대상으로 Crif1이 결핍된 경우와 결핍되지 않은 경우 대한 질환 증상도와 생존율을 분석한 결과를 나타낸 것이다.

본 발명은 Crif1 유전자 또는 상기 유전자로부터 코딩되는 Crif1 단백질을 유효성분으로 포함하는 자가면역질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공함에 특징이 있다.

한편, 상기 Crif1(CR6 Interacting Factor 1)은 암화 과정에서 발현이 증가하는 것으로 밝혀진 단백질로서 CR6(Gadd45gamma) 단백질과 결합하는 단백질이다. CRIF1의 mRNA는 정상 인체로부터 얻은 말초혈액 단핵세포(PBMC)에서는 그 발현이 관측되지 않는데 비해, 아데노바이러스에 의해 암화된 태아 신장 세포주, 전립선암 세포주, 자궁경부암 세포주, 섬유육종 세포주, 융모암세포주, 인간의 혈액암 세포주, HL-60, K-562, Jurkat, MOLT-4 등에서 그 발현이 증가하는 것으로 알려져 있다. 그러나 아직까지 CRIF1에 대한 연구는 많이 미비한 실정이며, 특히 자가면역질환의 치료제 용도에 대해서는 전혀 연구된 바가 없다.

이러한 점에서 본원발명은 CRIF1가 자가면역질환을 치료할 수 있음을 최초로 규명하였다.

본 발명의 조성물이 치료할 수 있는 상기 자가면역질환은 이에 제한되지는 않으나, 류마티스 관절염(Rheumatoid Arthritis), 다발성 경화증(Multiple Sclerosis) 또는 쇼그렌 증후군(Sjogren syndrome)일 수 있다.

또한 본 발명의 약학적 조성물에 포함되는 CRIF1 단백질은 상기 단백질과 실질적으로 동등한 생리 활성을 갖는 단백질을 포함한다. 실질적으로 동등한 생리 활성을 갖는 CRIF1 단백질에는 상기 단백질과 그 기능적 동등물(functional equivalent) 및 기능적 유도체(functional derivative)가 포함된다. 상기“기능적 동등물”에는 천연형 단백질 아미노산 중 일부 또는 전부가 치환되거나, 아미노산의 일부가 결실 또는 부가된 아미노산 서열 변형체로서 천연형 CRIF1 단백질과 실질적으로 동등한 생리활성을 갖는 것을 말한다. 상기“기능적 유도체”는 상기 CRIF1 단백질의 물리 화학적 성질을 증가 또는 감소시키기 위한 변형을 가한 단백질로서 천연형 CRIF1 단백질과 실질적으로 동등한 생리 활성을 갖는 것을 의미한다.

바람직하게 상기 CRIF1 단백질은 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열을 가지는 단백질을 말한다.

또한 상기 CRIF1 유전자는 CRIF1 단백질을 코딩하는 DNA 또는 RNA를 포함할 수 있으며, 바람직하게는 서열번호 1로 표시되는 DNA 서열을 갖는다.

여기서 상기 유전자, 즉 폴리뉴클레오티드는 플라스미드 또는 바이러스 벡터와 같은 발현 벡터 내로 공지의 방법에 의해 도입시킨 후 상기 발현 벡터를 당업계에 공지된 다양한 방법으로 감염(infection) 또는 형질도입(transduction)에 의해 발현형으로 표적 세포 내에 도입시킬 수 있다.

플라스미드 발현 벡터는 사람에게 사용할 수 있는 FDA의 승인된 유전자 전달방법으로 사람 세포에 직접적으로 플라스미드 DNA를 전달하는 방법이다(Nabel, E. G., et al., Science, 249:1285-1288, 1990). 플라스미드 DNA는 바이러스 벡터와는 달리 균질하게 정제될 수 있는 장점이 있다. 본 발명에서 사용할 수 있는 플라스미드 발현 벡터로는 당업계에 공지된 포유동물 발현 플라스미드를 사용할 수 있다. 예를 들면, 이에 한정되지는 않으나 pRK5(유럽특허 제307,247호), pSV16B(국제특허공개 제91/08291호) 및 pVL1392(PharMingen) 등이 대표적이다.

본 발명에 따른 폴리뉴클레오티드를 포함하는 플라스미드 발현 벡터(plasmid expression vector)는 당업계에 공지된 방법, 예를 들어 이에 한정되지는 않으나, 일시적 형질감염(transient transfection), 미세주사, 형질도입(transduction), 세포융합, 칼슘 포스페이트 침전법, 리포좀 매개된 형질감염(liposome-mediated transfection), DEAE 덱스트란-매개된 형질감염(DEAE Dextran- mediated transfection), 폴리브렌-매개된 형질감염(polybrene-mediated trans fection), 전기침공법(electropora tion), 유전자 건(gene gun) 및 세포 내로 DNA를 유입시키기 위한 다른 공지의 방법에 의해 세포 내로 도입할 수 있다(Wu et al., J. Bio. Chem., 267:963-967, 1992; Wu and Wu, J. Bio. Chem., 263:14621-14624, 1988).

상기 CRIF1을 발현시킬 수 있는 벡터는 공지의 방법에 의해 투여될 수 있다. 예를 들면, 국소적으로, 비경구, 경구, 비강, 정맥, 근육 내, 피하 내 또는 다른 적절한 수단에 의해 투여될 수 있다.

본 발명에서 상기 치료란, 달리 언급되지 않는 한, 상기 용어가 적용되는 질환 또는 질병, 또는 상기 질환 또는 질병의 하나 이상의 증상을 역전시키거나, 완화시키거나, 그 진행을 억제하거나, 또는 예방하는 것을 의미하며, 본원에서 사용된 상기 치료란 용어는치료하는이 상기와 같이 정의될 때 치료하는 행위를 말한다. 따라서 포유동물에 있어서 자가면역질환의 치료또는 치료요법은 하기의 하나 이상을 포함할 수 있다:

(1) 자가면역질환의 성장을 저해함, 즉, 그 발달을 저지시킴,

(2) 자가면역질환의 확산을 예방함, 즉, 전이를 예방함,

(3) 자가면역질환을 경감시킴.

(4) 자가면역질환의 재발을 예방함, 및

(5) 자가면역질환의 증상을 완화함(palliating)

본 발명에 따른 자가면역질환의 예방 또는 치료용 조성물은 약학적으로 유효한 양의 CRIF1을 단독으로 포함하거나 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다. 상기에서 약학적으로 유효한 양이란 자가면역질환의 증상을 예방, 개선 및 치료하기에 충분한 양을 말한다.

본 발명에 따른 CRIF1의 약학적으로 유효한 양은 각각 0.5 ~ 100 mg/day/체중kg, 바람직하게는 0.5 ~ 5 mg/day/체중kg이다. 그러나 상기 약학적으로 유효한 양은 자가면역질환 증상의 정도, 환자의 연령, 체중, 건강상태, 성별, 투여 경로 및 치료기간 등에 따라 적절히 변화될 수 있다.

또한, 상기에서 “약학적으로 허용되는”이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 위장 장애, 현기증과 같은 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 조성물을 말한다. 상기 담체, 부형제 및 희석제의 예로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 또한, 충진제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 포유동물에 투여된 후 활성 성분의 신속, 지속 또는 지연된 방출을 제공할 수 있도록 당업계에 공지된 방법을 사용하여 제형화될 수 있다. 제형은 분말, 과립, 정제, 에멀젼, 시럽, 에어로졸, 연질 또는 경질 젤라틴 캅셀, 멸균 주사용액, 멸균 분말의 형태일 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 자가면역질환의 예방 또는 치료용 조성물은 경구, 경피, 피하, 정맥 또는 근육을 포함한 여러 경로를 통해 투여될 수 있으며, 활성 성분의 투여량은 투여 경로, 환자의 연령, 성별, 체중 및 환자의 중증도 등의 여러 인자에 따라 적절히 선택될 수 있고, 본 발명에 따른 자가면역질환의 예방 또는 치료용 조성물은 자가면역질환의 증상을 예방, 개선 또는 치료하는 효과를 가지는 공지의 화합물과 병행하여 투여할 수 있다.

이하 본원을 하기 실시예에 의해 구체적으로 설명하나, 본원은 어떤 이유로든 이로 제한되지 않는다.

< 실시예 1>

Crif1 과발현 재조합 벡터제조

본 발명자들은 Crif1이 자가면역질환의 치료 효과가 있는지 확인하기 위해, Crif1을 과발현 시키는 벡터를 제조하였다. 구체적으로 Crif1 과발현 벡터(pcDNA3.1(+)-DYK mCrif1)는 TGenscript사에서 구입한 것을 사용하였는데, 상기 벡터는 CMV 프로모터를 가지고 있고, Target ORF는 Mus musculus(House mouse)의 Crif1(Gadd45gipq)의 mRNA가 사용되었으며 Stop codon을 삭제시켜 C-terminal의 DYK tagging gene(DYKDDDK)이 발현되도록 하였다(진 뱅크 Accession No. NM_183358.4).

< 실시예 2>

Crif1 과발현에 따른 류마티스 관절염 치료효과 분석

본 발명자들은 Crif1이 류마티스 관절염의 치료 효과가 있는지 여부를 알아보기 위하여 콜라겐으로 유도된 관절염 마우스 모델을 제조하고 하기와 같은 실험을 수행하였다. 이때 실험에 사용된 각 마우스의 무게(체중)는 25g 인 마우스를 사용하였다.

<1-1> 실험동물 준비 및 관절염 지수 평가

시험동물은 6주령의 수컷 DBA/1J계 마우스를 사용하였으며, 관절염 동물모델을 제조하기 위해, 제 2형 콜라겐 (Cll) 을 4㎎/ml이 되도록 0.1N 아세트산 용액에 녹인 후 투석 완충액 (dialysis buffer, 50mM Tris, 0.2N Nacl) 으로 투석하여 M. 투베르쿨로시스 (tuberculosis) 를 함유하는 complete Freund's adjuvant (CFA, Chondrex) 와 동량으로 섞은 후 상기 마우스의 꼬리 기저부에 피하 주사하여 면역원을 마리당 100㎕ (즉 100㎍/100㎕) 으로 주사하였다. 이로부터 2주 후 동일한 CII를 동량의 incomplete Freud's adjuvant (IFA, Chondrex) 와 섞은 후 100㎕ (즉 100㎍/100㎕)를 한쪽 뒷다리(발바닥(foot pad))에 주사하였다. DBA1/J 마우스에 제 2형 콜라겐을 피내 주사하여 관절염을 유도한 다음 관절염 유도 후 8일째에 Hydrodynamic injection 기법을 이용하여 Crif1 유전자를 포함하고 있는 상기에서 제조한 과발현 재조합 벡터와 대조군인 MOCK 벡터를 hydrodynamic injection 및 electroporation 방법으로 각각 동물에 주입하였다.

이후 관절염을 유도한 후 8주 동안 관절염의 진행 정도 및 발병 정도를 분석하였다.

분석 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이, Crif1의 과발현 벡터 주입으로 체내에서 Crif1을 과발현시켰을 경우, 대조군(MOCK 벡터 주입군)에 비해 관절염 지수가 유의적으로 감소한 것으로 나타났고, 관절염 발병율도 현저하게 감소한 것으로 나타났다.

<1-2> 파골세포 분화억제 효과분석

Crif1이 파골세포의 분화를 억제할 수 있는지 확인하기 위해 다음과 같은 실험을 수행하였다. 상기 실시예 <1-1>에서 류마티스 관절염 발병 마우스를 제조하는 과정 중에, 1차 immunization 후 8주 뒤에 각 마우스를 치사시켜 골수세포를 분리하였다. 이후 수득한 골수세포에 M-CSF 및 RANKL(10ng/ml, 30ng/ml)을 처리하여 세포를 자극하여 파골세포로의 분화를 유도하였다. 이후 성숙한 파골세포의 분화 정도를 TRAP 염색을 통해 확인하였다.

분석 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이, 파골세포로의 분화 정도가 본 발명의 Crif1을 과발현 시킨 군에서 대조군에 비해 억제되는 것으로 나타났다.

따라서 상기 결과를 통해 본 발명자들은 Crif1의 골관절 파괴를 야기하는 파골세포의 분화를 억제할 수 있는 작용이 있음을 알 수 있었다.

< 실시예 3>

Crif1 과발현에 따른 쇼그렌 증후군 치료효과 분석

Crif1이 쇼그렌 증후군을 치료하는 효과가 있는지 분석을 위해, 21주령 NOD 마우스를 대상으로 상기 실시예에서 제조한 Crif1의 과발현 재조합 벡터 및 대조군 MOCK 벡터를 주 1회 각각 주입하면서 타액 분비물(salivary flow rate ) 정도를 측정하였다.

분석결과, 도 3에 나타낸 바와 같이 쇼그렌 증후군의 증상인 타액 분비물의 감소가 Crif1의 과발현에 의해 억제되는 것을 확인함에 따라 Crif1을 쇼그렌 증후군 개선 및 치료를 위한 치료제로 사용할 수 있음을 알 수 있었다.

< 실시예 4>

Crif1 과발현에 따른 다발성 경화증 치료효과 분석

CD19+ 세포에서 Crif1이 결핍된 동물모델에 MOG 펩타이드와 CFA 동량을 PBS에 섞어 마우스에 피하주사하였고, 동시에 pertussis toxin 200 ng/ml을 복강주사하였다(1차 immunization). 그 다음날 pertussis toxin 200 ng/ml을 다시 복강주사 하였다. 1차 immunization 후 일주일 뒤에 2차 immunization을 동일하게 진행하였으며, 그 다음날 pertussis toxin 200 ng/ml을 2차 복강주사하여 experimental autoimmune encephalomyelitis(EAE) 동물모델을 유도하였다. 1차 immunization 후부터 질환 발달 정도와 생존율을 평하였다.

분석 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이 대조군에 비해 CD19에서 Crif1이 결핍된 동물모델에서 다발성 경화증의 발달 정도가 약화되는 것을 확인할 수 있었다.

참고로, 최근 연구를 통해 수초에 반응하는 자가항체가 중추신경계에 존재하는 포식세포를 촉진하여 수초 항원의 양을 증가시킬 수 있음이 밝혀지고 있으며, 수초에 반응하는 T 세포에 항원을 제시할 수 있는 능력이 증가하여 결국 활성화된 T 세포가 질환의 발달을 촉진할 수 있음이 보고되고 있다. 또한 autoreactive CD19+B220- 형질세포가 EAE 발달을 촉진할 수 있음이 보고되고 있다. 따라서 Crif1이 결핍된 CD19를 갖는 EAE 모델에서 질환이 악화된다는 것은 Crif1이 질환 조절에 있어 중요한 인자라는 것을 증명하는 것이다.

이제까지 본 발명에 대하여 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

<110> Industry Academic Cooperation Foundation of Catholic University <120> Composition for preventing or treating autoimmune disease comprising Crif1 <130> pn1604-130 <160> 2 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 669 <212> DNA <213> Crif1 cDNA sequence <400> 1 atggcggcgc tcgcaatgcg gagtggctat ctcctgcggc tctctgtggc tctgggtccc 60 aggtcccgca gctaccgtgc gcccccgccc ccgcgccgcc gtcccgggcc ccactcgcca 120 gacccggaga acctgctgac cccgcgatgg cagctaacgc cccgctatgt ggccaagcag 180 ttcggacgac atggcgccat ctccggggtg cccccggcct ccctgtggcc caccccagag 240 cagctgcgcg agttggaggc cgaggagcaa gaatggtacc cgagcttagc gaccatgcaa 300 gagtcgctgc gcttgcagca gcaggccttg gaggcaaggc gccaagccag ggagcagcgt 360 atcgcagagt gcatggccaa gatgccacaa atgattgaaa actggcgaaa gcagaagcga 420 gaacgctggg agaaaattca ggctgacaag gagcggaggg cccggttaca ggctgaggcc 480 caggaacgcc tgggctacca cgtggaccca aggagtgctc gcttccagga actattacag 540 gacctagaca agcagcaacg aaagcgccta aaggaagaaa gacaacgaca gaagaaggag 600 gcacgaattg ctgctatggc ctctgctgaa gcccaggact cagcagtgtc tggtgaaccc 660 agctcctga 669 <210> 2 <211> 222 <212> PRT <213> Crif1 aminoacid sequence <400> 2 Met Ala Ala Leu Ala Met Arg Ser Gly Tyr Leu Leu Arg Leu Ser Val 1 5 10 15 Ala Leu Gly Pro Arg Ser Arg Ser Tyr Arg Ala Pro Pro Pro Pro Arg 20 25 30 Arg Arg Pro Gly Pro His Ser Pro Asp Pro Glu Asn Leu Leu Thr Pro 35 40 45 Arg Trp Gln Leu Thr Pro Arg Tyr Val Ala Lys Gln Phe Gly Arg His 50 55 60 Gly Ala Ile Ser Gly Val Pro Pro Ala Ser Leu Trp Pro Thr Pro Glu 65 70 75 80 Gln Leu Arg Glu Leu Glu Ala Glu Glu Gln Glu Trp Tyr Pro Ser Leu 85 90 95 Ala Thr Met Gln Glu Ser Leu Arg Leu Gln Gln Gln Ala Leu Glu Ala 100 105 110 Arg Arg Gln Ala Arg Glu Gln Arg Ile Ala Glu Cys Met Ala Lys Met 115 120 125 Pro Gln Met Ile Glu Asn Trp Arg Lys Gln Lys Arg Glu Arg Trp Glu 130 135 140 Lys Ile Gln Ala Asp Lys Glu Arg Arg Ala Arg Leu Gln Ala Glu Ala 145 150 155 160 Gln Glu Arg Leu Gly Tyr His Val Asp Pro Arg Ser Ala Arg Phe Gln 165 170 175 Glu Leu Leu Gln Asp Leu Asp Lys Gln Gln Arg Lys Arg Leu Lys Glu 180 185 190 Glu Arg Gln Arg Gln Lys Lys Glu Ala Arg Ile Ala Ala Met Ala Ser 195 200 205 Ala Glu Ala Gln Asp Ser Ala Val Ser Gly Glu Pro Ser Ser 210 215 220

Claims

Crif1 유전자 또는 상기 유전자로부터 코딩되는 Crif1 단백질을 유효성분으로 포함하는 류마티스 관절염 (Rheumatoid Arthritis), 다발성 경화증 (Multiple Sclerosis) 또는 쇼그렌 증후군(Sjogren syndrome)의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 1 항에 있어서,
상기 Crif1 유전자는 서열번호 1의 염기서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항에 있어서,
상기 Crif1 단백질은 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 조성물.
삭제
제 1 항에 있어서,
상기 Crif1 유전자는 Crif1 유전자가 작동가능하게 연결된 발현 벡터 내에 함유된 것을 특징으로 하는 조성물.