KR101911290B1

KR101911290B1 - 애완동물 구강 건강 보조 소재

Info

Publication number: KR101911290B1
Application number: KR1020150146003A
Authority: KR
Inventors: 김도만; 유신혜
Original assignee: 서울대학교산학협력단
Priority date: 2015-10-20
Filing date: 2015-10-20
Publication date: 2018-10-24
Also published as: KR20170045914A

Abstract

본 발명은 애완동물 구강 건강 보조 소재가 개시된다. 본 발명에 따른 애완동물의 구강 건강 보조 소재는 스스로 구강 보건을 유지 할 수 없는 동물들에 대해 물리적인 방법으로 구강 질환 요인을 제거하는 브러싱 외의 방법으로 충치균 및 치석을 포함한 구강 건강에 유해한 요소를 억제 및/또는 해소하는 장점을 갖는다.

Description

애완동물 구강 건강 보조 소재 {ORAL HEALTH CARE MATERIALS FOR PETS}

본 발명은 애완동물 구강 건강 보조 소재에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 본 발명은 구강내 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans) 성장을 억제할 수 있는 균주, 스트렙토코커스 뮤탄스로부터의 불용성 글루칸을 분해할 수 있는 효소, 또는 스트렙토코커스 뮤탄스로부터의 불용성 글루칸 형성 억제 탄수화물을 포함하는 애완동물의 구강 건강 보조 소재에 관한 것이다.

애완동물에 있어 치석이 쌓이지 않게 하거나 쌓인 치석을 제거한다는 것은 건강에 대단히 중요하다. 애완동물의 치태는 치아 전체를 누렇게 만들어 주고, 치석은 잇몸 가까이에서 치태들이 쌓여 일종의 돌이 되어 보기에도 흉하지만 종국에는 치아가 빠지거나 잇몸 질병을 발생시키는 원인으로 작용한다. 특히, 애완동물들은 자신의 치아 및 구강관리를 위해 스스로 양치질을 하지 못함은 물론, 이를 사람이 대신하여 주는 것도 쉬운 일이 아니며 또한, 그 자체를 싫어한다. 설사 어떠한 방법으로 양치를 하였더라도 양치한 치약을 헹구어 내거나 뱉어 내지 못하여 삼켜 버린다. 이러한 치태, 치석을 제거하기 위한 수의과적 치료법으로는 스켈링을 하여야 하는데 이를 위해서는 반드시 마취를 하여야만 가능하다. 이러한 수의과적 치료법은 비용과 시간이 소요되고 마취제의 사용으로 인해 애완동물에게 스트레스를 주는 원인이 되고 있다. 따라서, 애완동물의 치석을 용이하게 제거할 수 있는 소재의 개발이 요구되고 있다.

선행기술문헌

1. 미국등록특허 US4802444B2

2. 대한민국등록특허 KR10-0009988B2

본 발명자들은 무해한 프로바이오틱스 균을 이용한 애완동물의 구강 건강 보조 소재를 제공하고자 한다. 구체적으로, 본 발명자들은 구강내 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans) 성장을 억제할 수 있는 균주, 스트렙토코커스 뮤탄스로부터의 불용성 글루칸을 분해할 수 있는 효소, 또는 스트렙토코커스 뮤탄스로부터의 불용성 글루칸 형성 억제 탄수화물을 포함하는 애완동물의 구강 건강 보조 소재를 제공하고자 한다.

본 명세서에서 사용된 용어 “충치(치아우식)”는 치아, 뮤탄스(mutans) 균 및 탄수화물의 3가지 조건이 존재할 때 발생한다. 특히, 스트렙토코커스 뮤탄스는 치아의 에나멜 층에 증식하여 바이오필름(biofilm)을 형성하며, 자신이 생산하는 글루코실트랜스퍼라제(glucosyltransferase)를 이용해 식이 중의 설탕으로부터 폴리머 형태인 불용성 글루칸(glucan)을 합성한다. 불용성 글루칸은 α1→3 결합으로 구성되어 있으며, 합성된 글루칸은 에나멜 층에 증식하는 세균 간의 결합을 증가시키고, 당질 대사로부터 생성되는 유기산을 생성하여 치아를 부식시켜 충치를 유발하는 원인으로 보고되어 있다.

제1구현예에 따르면,

구강내 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans) 성장을 억제할 수 있는 균주를 포함하는 애완동물의 구강 건강 보조 소재가 제공된다.

본 발명에 따른 애완동물의 구강 건강 보조 소재에 있어서, 상기 스트렙토코커스 뮤탄스 성장을 억제할 수 있는 균주는 전통발효식품으로부터 유래할 수 있다. 상기 전통발효식품은 간장, 된장, 고추장 및 청국장을 포함할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 따른 애완동물의 구강 건강 보조 소재에 있어서, 상기 스트렙토코커스 뮤탄스 성장을 억제할 수 있는 균주는 바실러스속(Bacillus) 균주일 수 있다. 상기 바실러스속 균주는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 또는 균주는 바실러스 서큘란스(Bacillus circulans), 바람직하기는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 일 수 있다. 상기 바실러스 서브틸리스는 서열번호 1로 표시된 뉴클레오티드를 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 애완동물의 구강 건강 보조 소재에 있어서, 상기 스트렙토코커스 뮤탄스 성장을 억제할 수 있는 균주는 엔테로코커스속(Enterococcus) 균주일 수 있다. 상기 엔테로코커스속 균주는 엔테로코커스 페시움(Enterococcus faecium) 또는 엔테로코커스 피칼리스(Enterococcus faecalis), 바람직하기는 엔테로코커스 페시엄(Enterococcus faecium)일 수 있다. 상기 엔테로코커스 페시엄은 서열번호 2로 표시된 뉴클레오티드를 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 애완동물의 구강 건강 보조 소재에 있어서, 상기 소재는 동물용 사료, 약제, 치약, 구강청결제, 껌 또는 놀이기구로부터 선택될 수 있다.

제2구현예에 따르면,

스트렙토코커스 뮤탄스로부터의 불용성 글루칸을 분해할 수 있는 효소를 포함하는 애완동물의 구강 건강 보조 소재가 제공된다.

본 발명에 따른 애완동물의 구강 건강 보조 소재에 있어서, 상기 스트렙토코커스 뮤탄스로부터의 불용성 글루칸을 분해할 수 있는 효소는 덱스트라나아제(dextranase)일 수 있다.

본 발명에 따른 애완동물의 구강 건강 보조 소재에 있어서, 상기 덱스트라나아제는 페니실리움속(Penicillium), 아스페르길루스속(Aspergillus), 푸사리움속(Fusarium), 캐토미움속(Chaetomium), 락토바실러스속(Lactobacillus), 스트렙토코커스속(Streptococcus), 플라보박테리움속(Flavobacterium), 써모마이세스속(Thermomyces), 랑귀노스속(Lanuginosus), 패실로마이세스속(Paecilomyces) 및 리포마이세스속(Lipomyces)을 포함하는 미생물로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.

제3구현예에 따르면,

스트렙토코커스 뮤탄스로부터의 불용성 글루칸 형성 억제 탄수화물을 포함하는 애완동물의 구강 건강 보조 소재가 제공된다.

본 발명에 따른 애완동물의 구강 건강 보조 소재에 있어서, 상기 스트렙토코커스 뮤탄스로부터의 불용성 글루칸 형성 억제 탄수화물은 사이클로덱스트란(cyclodextran), 알파사이클로덱스트린(α-cyclodextrin) 또는 베타사이클로덱스트린(β-cyclodextrin), 바람직하기는 사이클로덱스트란으로부터 선택될 수 있다.

본 발명에 따른 애완동물의 구강 건강 보조 소재는 스스로 구강 보건을 유지 할 수 없는 동물들에 대해 물리적인 방법으로 구강 질환 요인을 제거하는 브러싱 외의 방법으로 충치균 및 치석을 포함한 구강 건강에 유해한 요소를 억제 및/또는 해소하는장점을 갖는다.

도 1은 본 발명의 실시예 1에 따른 S. mutans의 성장을 억제하는 균주 확인에 사용한 배지를 나타낸다.
도 2는 본 발명의 실시예 3에 따른 재조합 벡터에 삽입된 유전자 서열을 나타낸다.
도 3은 본 발명의 실시예 3에 따른 재조합 CITase와 덱스트란의 반응을 통해 생산된 사이클로덱스트란을 나타낸다. (Lane 1&5: 2% 사이클로덱스트란, Lane 2: 이소말토올리고당, Lane 3: 2% 덱스트란, Lane 4: CITase 반응물, Lane 6: CITase
도 4는 본 발명의 실험예 1에 따른 대조군 대비 혼합배양시 S. mutans 생균수를 비교한 그래프를 나타낸다.
도 5는 본 발명의 실험예 2에 따른 덱스트라나아제 처리시 와이어에 형성되는 뮤탄을 나타낸다 (A: mutansucrase + 2% 설탕, B: mutansucrase + 2% 설탕 + dextranase).
도 6은 본 발명의 실험예 2에 따른 형성된 덱스트라나아제 처리시 뮤탄의 제거 효율을 나타낸다 (A: mutan + 물, B: mutan + dextranase).
도 7은 본 발명의 실험예 3에 따른 불용성 글루칸 형성 억제 결과를 나타낸다 (sample C: mutansucrase + 2% 설탕, sample 1: mutansucrase + 2% 설탕 + cyclodextran, sample 2: mutansucrase + 2% 설탕 + α-cyclodextrin, sample 3: mutansucrase + 2% 설탕 + β-cyclodextrin).
도 8은 본 발명의 실험예 3에 따른 바이오필름형성 억제 결과를 나타낸다 (sample C: mutansucrase + 2% 설탕, sample 1: mutansucrase + 2% 설탕 + cyclodextran, sample 2: mutansucrase + 2% 설탕 + α-cyclodextrin, sample 3: mutansucrase + 2% 설탕 + β-cyclodextrin).

이하, 발명의 이해를 돕기 위해 다양한 실시예를 제시한다. 하기 실시예는발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐 발명의 보호범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

< 실시예 >

실시예 1. 스트렙토코커스 뮤탄스 성장 억제 균주의 선별

사용된 균주 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)는 한국미생물보존센터에서 분양 받았으며, 뮤탄스 균의 성장을 억제하는 균은 전통발효식품인 된장과 청국장으로부터 분리하였다. 전통 발효 식품 0.1g을 칭량하여 0.85 % NaCl 900 ㎕ 를 넣어 교반한 후, MRS(de Man, Rogosa and Sharpe) 배지에 도말하여 37 ℃에서 24시간 동안 배양하여 균주를 분리하였다. 분리된 균주들을 2%의 sucrose가 함유된 BHI(Brain Heart Infusion) 배지에 2차 계대배양하였다. 먼저, 스트렙토코커스 뮤탄스의 성장을 억제하는 균주를 선발하기 위해 BHI배지에 액체 배양된 스트렙토코커스 뮤탄스 균주를 도말 한 후, 각각의 분리한 균주를 접종하여 도 1과 같이 접종 균 주위의 스트렙토코커스 뮤탄스 클리어 존 (clear zone)을 확인하고, 클리어 존의 크기를 측정하였다. 클리어 존의 크기는 자를 이용해 총 5군데에서 측정하여 선별하였다. 선별된 각각의 클리어 존은 하기의 표 1과 같다.

source	name	Clear zone
된장1 (T)	T2	0.3 cm
된장1 (T)	T7	0.1 cm
된장2 (D)	D8	0.2 cm
된장2 (D)	D45	0.1 cm
청국장 (N)	N1	0.4 cm
	N2	0.1 cm
	N3	0.3 cm
	N4	0.2 cm
	N5	0.2 cm

상기 표 1로부터 알 수 있는 바와 같이, 선별된 각 균들은 일정범위의 클리어 존을 형성하는 것으로 나타났으며, 상기 균주 중 T2 및 T7을 동정하였다. 동정 방법은 16S rDNA 시퀀싱을 이용하였으며, 동정된 T2 및 T7의 서열을 각각 서열번호 1 및 2에 나타내었다. 상기 서열번호 1 및 2는 각각 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 및 엔테로코커스 페시움(Enterococcus faecium)으로 확인되었다.

상기 바실러스 서브틸리스 및 엔테로코커스 페시움의 생화학적 특성을 하기의 표 2에 나타내었다.

Chemical	T7	T2
Negative control	-	-
Dextrin	++	+
Maltose	++	+
D-Trehalose	++	++
D-Cellobiose	++	-
Gentiobiose	++	-
Sucrose	++	+
D-Turanose	-	++
Stachyose	-	-
Positive control	++	++
pH 6.0	++	++
pH 5.0	+	++
D-Raffinose	-	-
α-D-Lactose	++	-
D-Melibiose	++	-
3-methyl-D-glucoside	++	+
D-Salicin	++	-
N-Acetyl-D-glucosamine	++	+
N-Acetyl-D-Mannosamine	+	-
N-Acetyl-D-galactosamine	++	-
N-Acetyl-neuraminic acid	-	-
1% Nacl	++	++
4% Nacl	++	++
8% Nacl	+	++
α-D-glucose	++	++
D-Manose	++	++
D-Fructose	++	++
D-Galactose	++	-
3-Methy glucose	+	-
D-Fucose	+	-
L-Fucose	+	-
L-Ramnose	+	+
Inosine	+	+
1% Sodium Lactate	++	++
Fusidic acid	-	-
D-Serine	-	-
D-Sorbitol	-	++
D-Mannitol	++	++
L-Arabitol	-	-
Myo-inositol	-	+
Glycerol	-	++
D-glucose-6-phosphate	-	-
D-Fructose-6-phdsphate	+	+
D-Aspartic acid	-	-
D-Serine	-	-
Troleandomycin	-	-
Rifamycin SV	++	-
Minocycline	-	-
Gelatin	-	+
Glycyl-L-proline	-	-
L-Alanine	-	+
L-Arginine	+	+
L-Aspartic acid	-	+
L-Glutamic acid	-	+
L-Histidine	-	-
L-Pyroglutamic acid	-	+
L-Serine	-	+
Lincomycin	-	-
Guanidine hydrochloride	++	+
Niaproof 4	-	-
Pectin	+	++
D-Galacturonic acid	-	+
L-Galactonic acid-γ-lactone	-	+
D-Gluconic acid	++	++
D-Glucuronic acid	-	-
Glucuronamide	+	+
Mucic acid	-	-
Quinic acid	-	-
D-saccharic acid	-	-
Vancomycin	-	-
Tetrazolium violet	++	+
Tetrazolium blue	+	-
4-Hydroxyphenyl acetic acid	-	-
Pyruric acid methyl ester	-	+
D-Lactic acid methyl ester	-	-
L-Lactic acid	-	++
Citric acid	-	+
α-Ketoglutaric acid	-	-
D-Malic acid	-	-
L-Malic acid	-	++
Bromosuccinic acid	-	-
Nalidixic acid	++	-
Lithium chloride	-	++
Potassium iellurite	++	++
Tween 40	-	-
γ-Amino-N-butiric acid	-	-
α-Hydroxybutiric acid	-	-
β-Hydroxybutiric acid	-	-
α-Ketobutyric acid	+	-
Acetoacetic acid	+	+
Propionic acid	-	-
Acetic acid	-	-
Formic acid	-	+
Aztreonam	++	++
Sodium butyrate	++	++
Sodium Bromate	+	++

실시예 2. 불용성 글루칸분해 효소의 선별

대한민국 등록특허 10-0358376에 개시된 리포마이세스 스타키아이(Lipomyces starkeyi) KSM22(기탁번호: KFCC-11077)를 LMS 배양액(1% 전분, 0.3% KH₂PO₄, 0.3% 이스트 추출물)에서 배양 후 원심분리(4000xg，10분)하여 균을 수집했다. 수집된 균은 0.1M MgS0₄를 초기배지양의 0.5배로 넣어 현탁하고，현탁액을 페트리 접시(petri dish)에 옮겨 담아 교반시키면서 자외선(UV)에 노출시켰다. 사용된 자외선 파장은 253.7nm로 30cm 거리에서 자외선을 30초간 조사했으며 사멸률은 93%였다. 조사 후 희석해 LMSM(LMS배지 + 12% MgS0₄ _·H₂0，0.1% NaCl，0.1% FeS0₄ _·H₂0, 0.1% MnSO₄，0.13% CaCl₂.2H₂0) 고체배지에 도말하였으며, 고체배지에서 자란 균을 LMS 고체배지에 옮겨 길러주고 전분분해효소 생산성과 덱스트라나아제 효소 생산성이 우수한 균을 확인하여 KDM21 균을 선발하였다. 선발된 균은 3일간 LMS 배지에서 배양 후 배양액을 LMS에 1%로 재접종하여 28℃, pH 5.5에서 배양 후 4℃에서 원심분리(10000xg, 15분)하여 상층액(supernatant)을 수집해 효소액을 수득하였다. 돌연변이 하여 제조된 균으로부터 얻어진 효소액의 덱스트라나아제(dextranase) 활성은 모균의 160%로 나타났으며, 아밀라아제(amylase) 활성은 모균의 170%로 나타났다. 상기 리포마이세스 스타키아이 KDM21 균을 한국미생물보존센터에 KCCM11765P로 기탁하였다.

실시예 3. 불용성 글루칸 형성 억제 탄수화물의 선별

본 발명에서 불용성 글루칸 형성 억제 탄수화물은 사이클로덱스트란으로 사이클로덱스트란(cyclodextran; CI)을 제조하기 위해 pPICZaA 벡터의 다중 클로닝 위치에 사이클로덱스트란 합성 효소(cyclodextran glucanotransferase; CITase) 유전자를 도입하여 재조합 벡터를 제작하였다. 재조합 벡터(pPICZαA-CITA)는 pPICZαA 벡터의 다중 클로닝 위치에 사이클로덱스트란 합성 효소 유전자를 도입하여 제작하였으며, pPICZαA 벡터에 도입된 유전자 서열은 도 2와 같다. 재조합 벡터 pPICZαA-CITA는 효모균(Pichia pastoris X-33)에 형질전환 후, 배양한 배양물을 원심 분리하였으며, 회수된 상등액에서 CITase 활성을 확인했다. 회수된 사이클로덱스트란을 합성하는 조효소로 사용하였으며, 덱스트란 T2000 2% 용액과의 반응에서 얻어진 산물은 사이클로덱스트란을 합성하는 조효소로 되었으며,덱스트란 T2000 2% 용액과의 반응에서 얻어진 산물은 도 3과 같다.

< 실험예 >

실험예 1. 실시예 1에 따라 선별된 균주의 스트렙토코커스 뮤탄스 성장 억제 활성 측정

실시예 1을 통해 선별된 균주의 스트렙토코커스 뮤탄스 생장 억제(Growth Inhibition) 활성을 측정하기 위하여, 스트렙토코커스 뮤탄스와 상기 실시예 1에서 선별된 T7 균주를 각각 BHI 브로스에 접종하여 계대배양 하였다. 동일한 CFU/ml 값을 맞춰준 후, 두 균주를 BHI 브로스에 10:0, 3:1, 1:1, 1:3 (S. mutans : T7) 비율로 혼합 배양하였다. 대조군은 분리균 T7 대신 같은 양의 0.85% NaCl을 넣어주었다. 혼합배지로부터 2시간, 10시간 배양 후에 각각 100 ㎕ 를 BHI 고체 배지에 도말하고, 48시간 배양하여 생균수를 측정 및 비교하였다. 배양액의 상등액은 Thin Layer Chromatography (TLC)를 이용하여 스트렙토코커스 뮤탄스의 수크로오스의 소비량을 확인하여 도 4에 나타내었다.

도 4를 참고하면, 본 발명에 따른 T7(E. faecium) 균의 양이 증가함에 따라 스트렙토코커스 뮤탄스의 성장 억제가 일어남을 확인하였다.

실험예 2. 실시예 2에 따라 선별된 효소의 불용성 글루칸 분해 활성 측정

플라그의 주 성분인 불용성 글루칸을 기질로 사용하기 위해 설탕 2%를 함유한 50mM Sodium acetate (pH 6.0) 버퍼에 뮤탄수크라아제를 0.01 U/ml 로 처리하였다. 각 바이알에 일정한 길이의 교정용 와이어를 고정시켜 뮤탄수크라아제에 의해 생성되는 불용성 글루칸이 바이오필름을 형성하도록 하였다. 여기에 실시예 2에서 선별된 덱스트라나아제를 0.03 U/ml, 0.06 U/ml씩 처리하였으며, 대조군은 덱스트라나아제 대신 같은 양의 증류수를 넣어주었다. 각 바이알은 37℃ 인큐베이터에서 12시간 효소 반응을 시켰다.

도 5를 참조하면, 뮤탄수크라아제와 덱스트라나아제를 함께 처리한 경우 뮤탄수크라아제에 의해 생성되는 불용성 글루칸의 양은 대조군에 비해 약 20% 정도 감소함이 확인되었다. 한편, 뮤탄수크라아제와 덱스트라나아제를 함께 처리한 경우 뮤탄은 대조군에 비해 작은 분자로 생성되어 와이어에 바이오필름을 형성하지 못함을 확인하였다. 또한, 도 6에서와 같이 이미 생성된 바이오필름에 덱스트라나아제를 처리한 경우, 생성된 뮤탄이 쉽게 제거됨을 확인하였다.

실험예 3. 실시예 3에 따라 선별된 탄수화물의 불용성 글루칸 형성 억제 활성 측정

설탕 2%를 함유한 50mM Sodium acetate (pH 6.0) 버퍼에 뮤탄수크라아제를 0.01 U/ml 로 처리하여 불용성 글루칸을 형성하게 조건을 만든 바이알에 사이클로덱스트란(CI), 알파사이클로덱스트린(α-CD) 및 베타사이클로덱스트린(β-CD)을 각각 0.2%씩 처리하였다. 대조군으로는 상기 CI, α-CD 및 β-CD대신 같은 양의 증류수를 넣어 37℃에서 12시간 동안 반응시키고, 구강내 플라그 염색에 사용하는 염색방법으로 염색한 결과를 도 7에 나타내었다.

도 7을 참고하면, 본 발명에 따른 사이클로덱스트란, 알파사이클로덱스트린 및 베타사이클로덱스트린을 처리한 경우 글루칸의 형성이 대조군에 비해 억제된다는 것이 확인되었다. 특히, 사이클로덱스트란을 처리한 경우 가장 우수한 글루칸 형성 억제 효과를 나타내었다.

또한, 상기와 동일한 조건의 각 바이알에 일정한 길이의 교정용 와이어를 고정시켜 뮤탄수크라아제에 의해 생성되는 불용성 글루칸이 바이오필름을 형성하도록 하고, 사이클로덱스트란(CI), 알파사이클로덱스트린(α-CD) 및 베타사이클로덱스트린(β-CD)을 각각 0.2%씩 처리하였다. 대조군으로는 상기 CI, α-CD 및 β-CD대신 같은 양의 증류수를 넣어주었다. 각 바이알은 37 ℃에서 12시간 동안 반응시킨 후 구강내 플라그 염색에 사용하는 염색방법으로 염색한 결과를 도 8에 나타내었다.

도 8을 참고하면, 본 발명에 따른 사이클로덱스트란, 알파사이클로덱스트린 및 베타사이클로덱스트린을 처리한 경우 바이오필름의 형성이 대조군에 비해 억제된다는 것이 확인되었다. 특히, 사이클로덱스트란을 처리한 경우 가장 우수한 바이오필름 억제 효과를 나타내었다.

이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

<110> Seoul National University R&DB Foundation <120> ORAL HEALTH CARE MATERIALS FOR PETS <130> 2015-PP-30640 <160> 2 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 1397 <212> DNA <213> Bacillus subtilis <400> 1 gcagtcgagc gggcagatgg gagcttgctc cctgatgtta gcggcggacg ggtgagtaac 60 acgtgggtaa cctgcctgta agactgggat aactccggga aaccggggct aataccggat 120 ggttgtttga accgcatggt tcaaacataa aaggtggctt cggctaccac ttacagatgg 180 acccgcggcg cattagctag ttggtgaggt aacggctcac caaggcgacg atgcgtagcc 240 gacctgagag ggtgatcggc cacactggga ctgagacacg gcccagactc ctacgggagg 300 cagcagtagg gaatcttccg caatggacga aagtctgacg gagcaacgcc gcgtgagtga 360 tgaaggtttt cggatcgtaa agctctgttg ttagggaaga acaagtaccg ttcgaatagg 420 gcggtacctt gacggtacct aaccagaaag ccacggctaa ctacgtgcca gcagccgcgg 480 taatacgtag gtggcaagcg ttgtccggaa ttattgggcg taaagggctc gcaggcggtt 540 tcttaagtct gatgtgaaag cccccggctc aaccggggag ggtcattgga aactggggaa 600 cttgagtgca gaagaggaga gtggaattcc acgtgtagcg gtgaaatgcg tagagatgtg 660 gaggaacacc agtggcgaag gcgactctct ggtctgtaac tgacgctgag gagcgaaagc 720 gtggggagcg aacaggatta gataccctgg tagtccacgc cgtaaacgat gagtgctaag 780 tgttaggggg tttccgcccc ttagtgctgc agctaacgca ttaagcactc cgcctgggga 840 gtacggtcgc aagactgaaa ctcaaaggaa ttgacggggg cccgcacaag cggtggagca 900 tgtggtttaa ttcgaagcaa cgcgaagaac cttaccaggt cttgacatcc tctgacaatc 960 ctagagatag gacgtcccct tcgggggcag agtgacaggt ggtgcatggt tgtcgtcagc 1020 tcgtgtcgtg agatgttggg ttaagtcccg caacgagcgc aacccttgat cttagttgcc 1080 agcattcagt tgggcactct aaggtgactg ccggtgacaa accggaggaa ggtggggatg 1140 acgtcaaatc atcatgcccc ttatgacctg ggctacacac gtgctacaat ggacagaaca 1200 aagggcagcg aaaccgcgag gttaagccaa tcccacaaat ctgttctcag ttcggatcgc 1260 agtctgcaac tcgactgcgt gaagctggaa tcgctagtaa tcgcggatca gcatgccgcg 1320 gtgaatacgt tcccgggcct tgtacacacc gcccgtcaca ccacgagagt ttgtaacacc 1380 cgaagtcggt gaggtaa 1397 <210> 2 <211> 1309 <212> DNA <213> Enterococcus faecium <400> 2 tgcaagtcgt acgctggctt tttccaccgg agcttgctcc accggaaaaa gaagagtggc 60 gaacgggtga gtaacacgtg ggtaacctgc ccatcagaag gggataacac ttggaaacag 120 gtgctaatac cgtataacaa tcgaaaccgc atggttttga tttgaaaggc gctttcgggt 180 gtcgctgatg gatggacccg cggtgcatta gctagttggt gaggtaacgg ctcaccaagg 240 ccacgatgca tagccgacct gagagggtga tcggccacat tgggactgag acacggccca 300 aactcctacg ggaggcagca gtagggaatc ttcggcaatg gacgaaagtc tgaccgagca 360 acgccgcgtg agtgaagaag gttttcggat cgtaaaactc tgttgttaga gaagaacaag 420 gatgagagta actgttcatc ccttgacggt atctaaccag aaagccacgg ctaactacgt 480 gccagcagcc gcggtaatac gtaggtggca agcgttgtcc ggatttattg ggcgtaaagc 540 gagcgcaggc ggtttcttaa gtctgatgtg aaagcccccg gctcaaccgg ggagggtcat 600 tggaaactgg gagacttgag tgcagaagag gagagtggaa ttccatgtgt agcggtgaaa 660 tgcgtagata tatggaggaa caccagtggc gaaggcggct ctctggtctg taactgacgc 720 tgaggctcga aagcgtgggg agcaaacagg attagatacc ctggtagtcc acgccgtaaa 780 cgatgagtgc taagtgttgg agggtttccg cccttcagtg ctgcagctaa cgcattaagc 840 actccgcctg gggagtacga ccgcaaggtt gaaactcaaa ggaattgacg ggggcccgca 900 caagcggtgg agcatgtggt ttaattcgaa gcaacgcgaa gaaccttacc aggtcttgac 960 atcctttgac cactctagag atagagcttc cccttcgggg gcaaagtgac aggtggtgca 1020 tggttgtcgt cagctcgtgt cgtgagatgt tgggttaagt cccgcaacga gcgcaaccct 1080 tattgttagt tgccatcatt cagttgggca ctctagcaag actgccggtg acaaaccgga 1140 ggaaggtggg gatgacgtca aatcatcatg ccccttatga cctgggctac acacgtgcta 1200 caatgggaag tacaacgagt tgcgaagtcg cgaggctaag ctaatctctt aaagcttctc 1260 tcagttcgga ttgcaggctg caactcgcct gcatgaagcc ggaatcgct 1309

Claims

스트렙토코커스 뮤탄스로부터의 불용성 글루칸을 분해할 수 있는 효소를 포함하는 애완동물의 구강 건강 보조용 조성물로서,
상기 스트렙토코커스 뮤탄스로부터의 불용성 글루칸을 분해할 수 있는 효소는 리포마이세스 스타키아이 (KCCM11765P)로부터 유래한 것을 특징으로 하는 것인, 애완동물의 구강 건강 보조용 조성물.
제1항에 있어서,
동물용 사료에 사용하기 위한 것인, 애완동물의 구강 건강 보조용 조성물.
제1항에 있어서,
동물용 약제에 사용하기 위한 것인, 애완동물의 구강 건강 보조용 조성물.
제1항에 있어서,
동물용 치약에 사용하기 위한 것인, 애완동물의 구강 건강 보조용 조성물.
제1항에 있어서,
동물용 구강청결제에 사용하기 위한 것인, 애완동물의 구강 건강 보조용 조성물.
제1항에 있어서,
동물용 껌에 사용하기 위한 것인, 애완동물의 구강 건강 보조용 조성물.
제1항에 있어서,
동물용 놀이기구에 사용하기 위한 것인, 애완동물의 구강 건강 보조용 조성물.
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