KR101902433B1 - 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치 및 방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명의 실시 예에 따른 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법은 일정농도의 비교입자를 포함하는 검사용 시약을 뇌척수액과 소정비율로 혼합하는 단계와, 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합물을 마이크로칩의 채널에 주입하는 단계와, 채널에 주입된 혼합물의 이미지를 획득하는 단계와, 적혈구와 비교입자의 사이즈 차이에 기초하여 설정된 검출기준에 따라 이미지로부터 비교입자를 검출하여 계수하는 단계와, 검출기준을 적혈구 사이즈에 따라 변경하고, 변경된 검출기준에 따라 이미지로부터 적혈구를 검출하여 계수하는 단계 및 비교입자 수 및 적혈구 수의 비율과 혼합물의 비율에 따라 비교입자의 일정농도를 기준으로 적혈구의 농도를 산출하는 단계를 포함한다.
Description
본 발명은 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치와 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 비교입자를 포함하는 검사용 시약을 뇌척수액과 혼합하고 자동 분석 장치를 통해 일정 농도의 비교입자에 대비하여 세포를 상대적으로 정밀하게 검출함으로써, 뇌척수액 안의 세포를 신속하게 분석할 수 있는 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치 및 방법에 관한 것이다.
정상인의 뇌척수액에는 혈액세포가 거의 존재하지 않지만 기생충, 바이러스, 세균 등에 의해 감염된 환자는 뇌척수액에 백혈구가 존재하고, 뇌출혈 환자의 경우는 뇌척수액 안에 적혈구가 존재하게 된다.
따라서 종래에는 뇌졸중이나 뇌막염 등을 검사하기 위해 뇌척수액 안의 세포를 분석하고자 요추천자에서 추출된 뇌척수액을 neubauer chamber를 이용하여 숙련된 검사자가 적혈구나 백혈구를 세는 방법을 이용하였다.
그러나, 보통 뇌척수액 내에 존재하는 혈구의 수는 매우 낮아 자동 뇌척수액 분석기로는 낮은 농도의 혈구를 측정하기 어렵기 때문에 숙련된 전문가가 neubauer chamber를 이용하여 직접 현미경을 이용하여 세포수를 계수해야 한다.
또한, 감염 종류에 따라 뇌척수액에 존재하는 백혈구의 종류도 그 수가 달라지게 되는데, 종래 기술로는 백혈구를 종류별로 구분하기 어려운 문제가 있다.
백혈구의 종류를 구분하여 계수하기 위해 전문가가 직접 현미경으로 세포를 계수해야하기 때문에 전문가가 부재한 상황의 문제, 측정자마다 또는 변화된 환경에 따라 다른 측정 결과를 나타내고, 측정하는 데에 시간이 많이 소요되는 문제도 존재한다.
따라서 이와 같은 문제를 극복하기 위하여 뇌척수액 내의 세포를 자동으로 신속하게 검출할 수 있는 장치 및 방법이 필요하다.
본 발명은 상술한 종래 기술의 문제점을 극복하기 위한 것으로, 뇌척수액 안의 세포를 신속하게 분석하여 질병을 검사하기 위한 뇌척수액 내 세포 측정 장치 및 방법을 제공하는 것에 목적이 있다.
상기 목적을 달성하기 위해 본 발명의 실시 예에 따른 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법은 일정농도의 비교입자를 포함하는 검사용 시약을 뇌척수액과 소정비율로 혼합하는 단계와, 상기 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합물을 마이크로칩의 채널에 주입하는 단계와, 상기 채널에 주입된 혼합물의 이미지를 획득하는 단계와, 적혈구와 비교입자의 사이즈 차이에 기초하여 설정된 검출기준에 따라 상기 이미지로부터 비교입자를 검출하여 계수하는 단계와, 상기 검출기준을 적혈구 사이즈에 따라 변경하고, 변경된 검출기준에 따라 상기 이미지로부터 적혈구를 검출하여 계수하는 단계 및 상기 비교입자 수 및 적혈구 수의 비율과 혼합물의 비율에 따라 상기 비교입자의 일정농도를 기준으로 상기 적혈구의 농도를 산출하는 단계를 포함한다.
또한, 본 발명의 실시 예에 의한 상기 비교입자를 검출하여 계수하는 단계는, 적혈구보다 큰 비교입자의 사이즈에 따라 설정된 수치의 가로×세로의 사각형 픽셀 내면에 접하는 물질을 비교입자로 검출하여 계수한다.
또한, 본 발명의 실시 예에 의한 상기 변경된 검출기준에 따라 적혈구를 검출하여 계수하는 단계는, 적혈구의 사이즈에 따라 설정된 수치의 소정 수치의 가로×세로의 사각형 픽셀 내면에 접하는 물질을 적혈구로 검출하여 계수한다.
또한, 본 발명의 실시 예에 의한 상기 적혈구의 농도를 산출하는 단계는, 상기 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합비율이 M:N(M 및 N은 자연수)인 경우, 적혈구의 농도를 
를 이용하여 산출한다.
또한, 본 발명의 실시 예에 의한 적혈구의 농도를 산출하는 단계는 상기 비교입자 수 및 적혈구 수의 비율과, 상기 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합 비율을 이용하여 미리 설정된 상기 비교입자의 일정 농도에 대비한 적혈구의 상대적 농도를 산출한다.
본 발명의 다른 실시 예에 의한 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법은 일정농도의 비교입자와, 백혈구를 염색하는 형광 염색액로 구성된 검사용 시약을 뇌척수액과 소정의 혼합비율로 혼합하는 단계와, 상기 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합물을 마이크로칩의 채널에 주입하는 단계와, 상기 채널에 주입된 혼합물의 이미지를 획득하는 단계와, 백혈구와 비교입자의 사이즈 차이에 기초하여 설정된 제1 검출기준에 따라 상기 이미지로부터 비교입자를 검출하여 계수하는 단계와, 상기 형광 염색액에 의한 염색 특성에 기초하여 설정된 제2 검출기준에 따라 상기 이미지로부터 백혈구를 검출하여 계수하는 단계 및 상기 비교입자 수 및 백혈구 수의 비율과 상기 혼합물의 비율에 따라 상기 비교입자의 일정농도를 기준으로 상기 백혈구의 농도를 산출하는 단계를 포함한다.
또한, 본 발명의 실시 예에 의한 상기 비교입자를 계수하는 단계는 상기 백혈구보다 큰 비교입자의 사이즈에 따라 설정된 수치의 가로×세로의 사각형 픽셀 내면에 접하는 물질을 비교입자로 검출하여 계수한다.
또한, 본 발명의 실시 예에 의한 상기 백혈구를 검출하는 단계는 상기 형광성 염색액으로 이용된 PI(propidium iodide: 프로피디움 요오드화물) 또는 SYBR Green에 의해 염색된 적색 또는 녹색 형광 물질을 백혈구로 검출한다.
또한, 본 발명의 실시 예에 의한 상기 백혈구를 검출하는 단계는, 상기 적색 또는 녹색 형광 물질이 상기 제2 검출기준인 형광 면적이 소정 수치의 가로×세로의 사각형으로 설정된 픽셀의 사이즈에 해당하고, 동시에 형광 강도가 임계치 이상인 물질을 백혈구로 검출한다.
또한, 본 발명의 실시 예에 의한 상기 백혈구를 계수하는 단계는 이미지 영상처리를 통해 백혈구를 검출한 이미지로부터 백혈구를 림프구, 단핵구, 호중구, 호산구 및 호염기구로 분리하여 각각 계수하는 단계를 더 포함한다.
또한, 본 발명의 실시 예에 의한 백혈구의 농도를 산출하는 단계는 상기 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합비율이 M:N(M 및 N은 자연수)인 경우, 백혈구의 농도를 
를 이용하여 산출한다.
또한, 본 발명의 실시 예에 의한 백혈구의 농도를 산출하는 단계는, 상기 비교입자 수 및 백혈구 수의 비율과, 상기 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합 비율을 이용하여 미리 설정된 상기 비교입자의 일정 농도에 대비한 백혈구의 상대적 농도를 산출한다.
본 발명의 다른 실시 예에 의한 일정농도의 비교입자를 포함하는 검사용 시약을 소정비율로 뇌척수액과 혼합한 혼합물을 주입하기 위한 마이크로칩의 채널을 구비하는 측정 채널부와, 비교입자와 세포간의 사이즈 차이에 기초하여 설정된 이미지 분석기의 검출기준에 따라 비교입자와 세포수를 순차적으로 검출하여 계수하는 검출부 및 상기 비교입자 수 및 세포 수의 비율과 상기 혼합물의 혼합 비율에 따라 상기 비교입자의 일정농도를 기준으로 상기 세포의 농도를 산출하는 연산부를 포함한다.
또한, 본 발명의 실시 예에 의한 상기 측정 채널부는 상기 뇌척수액에서 적혈구를 검출하기 위해 일정농도의 비교입자를 포함하는 제1 검사용 시약을 제1 비율로 혼합하여 제1 채널에 주입하고, 상기 뇌척수액에서 백혈구를 검출하기 위해 일정 농도를 갖는 비교입자와, 백혈구를 염색하는 형광 염색액을 포함하는 제2 검사용 시약을 제2 비율로 혼합하여 제2 채널에 주입한다.
또한, 본 발명의 실시 예에 의한 상기 검출부는 상기 제1 채널에서, 상기 비교입자와 적혈구 간의 사이즈 차이에 기초하여 설정된 소정 수치의 가로×세로의 사각형인 제1 픽셀 내면에 접하는 물질을 비교입자로 검출하여 계수하고, 다음으로 적혈구 사이즈에 기초하여 설정된 소정수치의 가로×세로의 사각형인 제2 픽셀 내면에 접하는 물질을 적혈구로 검출하여 계수한다.
또한, 본 발명의 실시 예에 의한 상기 검출부는 상기 제2 채널에서, 백혈구 대비 비교입자의 사이즈 차이에 기초하여 설정된 소정 수치의 가로×세로의 사각형인 제1 픽셀 내면에 접하는 물질을 비교입자로 계수하고, 다음으로 형광 염색액에 의해 염색된 적색 또는 녹색 형광 물질의 형광 면적이 소정 수치의 가로×세로의 사각형인 제3 픽셀의 사이즈에 대응하고, 동시에 상기 형광 물질의 형광 강도가 임계치 이상인 물질을 백혈구로 검출한다.
또한, 본 발명의 실시 예에 의한 상기 검출부는 상기 제2 채널에서, 상기 검출된 백혈구를 이미지 영상처리를 통해 림프구, 단핵구, 호중구, 호산구 및 호염기구로 분리하여 각각 계수한다.
또한, 본 발명의 실시 예에 의한 연산부는 상기 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합비율이 M:N(M 및 N은 자연수)인 경우, 백혈구의 농도를 
를 이용하여 산출한다.
상기와 같이 구성된 본 발명에 따른 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치 및 방법에 의하면, 일정농도의 비교입자를 포함하는 검사용 시약을 뇌척수액과 혼합하고, 마이크로 스캐너의 검출기준을 변경하며 일정 농도의 비교입자에 대비하여 세포를 상대적으로 검출함으로써, 신속하게 세포를 검출하여 병을 검사할 수 있는 효과가 있다.
아울러, 본 발명에 따른 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치 및 방법에 의하면, 비교입자를 포함하는 검사용 시약을 이용하여 일정 농도의 비교입자 대비 세포를 상대적으로 검출하여 계수하기 때문에, 측정 채널의 불균일성에 상관없이 정확하게 뇌척수액 세포를 검출할 수 있다.
도 1은 본 발명의 일실시 예에 따른 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치의 개략적인 구성을 도시하는 블록도이다.
도 2는 본 발명의 일실시 예에 따른 세포 측정을 위해 준비된 제1 검사용 시약 및 제2 검사용 시약이 담긴 관과, 각 제1 검사용 시약 및 제2 검사용 시약이 뇌척수액과 섞여 주입된 제1 채널 및 제2 채널을 도시한다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 제1 채널에서 적혈구가 측정된 사진을 도시한다.
도 4는 본 발명의 일실시예에 따른 영상 이미지 처리를 통해 백혈구를 분리한 이미지를 도시한다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 제2 채널에서 백혈구가 측정된 사진을 도시한다.
도 6은 본 발명의 일실시예에 따른 마이크로 스캐너를 도시하는 도면이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법을 설명하기 위한 개략적인 순서도이다.
도 8은 본 발명의 일 실시 예에 따른 뇌척수액으로부터 적혈구를 측정하는 방법을 설명하기 위한 순서도이다.
도 9는 본 발명의 일 실시 예에 따른 뇌척수액으로부터 백혈구를 측정하는 방법을 설명하기 위한 순서도이다.
도 2는 본 발명의 일실시 예에 따른 세포 측정을 위해 준비된 제1 검사용 시약 및 제2 검사용 시약이 담긴 관과, 각 제1 검사용 시약 및 제2 검사용 시약이 뇌척수액과 섞여 주입된 제1 채널 및 제2 채널을 도시한다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 제1 채널에서 적혈구가 측정된 사진을 도시한다.
도 4는 본 발명의 일실시예에 따른 영상 이미지 처리를 통해 백혈구를 분리한 이미지를 도시한다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 제2 채널에서 백혈구가 측정된 사진을 도시한다.
도 6은 본 발명의 일실시예에 따른 마이크로 스캐너를 도시하는 도면이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법을 설명하기 위한 개략적인 순서도이다.
도 8은 본 발명의 일 실시 예에 따른 뇌척수액으로부터 적혈구를 측정하는 방법을 설명하기 위한 순서도이다.
도 9는 본 발명의 일 실시 예에 따른 뇌척수액으로부터 백혈구를 측정하는 방법을 설명하기 위한 순서도이다.
본 발명의 실시 예들을 설명하기에 앞서, 기존의 뇌척수액 내 세포수를 검출하는 기법에서 발생하는 문제점들을 검토한 후, 이들 문제점을 해결하기 위해 본 발명의 실시 예들이 채택하고 있는 기술적 수단을 개괄적으로 소개하도록 한다.
보통 뇌척수액 내에 존재하는 혈구의 수는 매우 작아서 자동 뇌척수액 분석기로는 낮은 농도의 혈구를 측정하기 어렵기 때문에 종래에는 뇌척수액을 neubauer chamber를 이용하여 숙련된 검사자가 적혈구나 백혈구를 직접 현미경을 이용하여 계수해야 했다.
그러나 이러한 종래 기술은 전문가가 부재한 상황의 문제, 측정자마다 또는 변화된 환경에 따라 다른 측정 결과를 나타내며, 측정하는 데에 시간이 많이 소요되는 문제도 갖고 있다.
따라서 본 발명에서는 바이오칩을 이용한 세포 이미지 분석법에서 정확한 세포 계수를 위해 개발된 검사용 시약을 이용하고, 검사용 시약에 포함된 일정 농도의 마이크로 파티클(micro particle, 이하 ‘비교입자’라 통칭하기로 함)을 기준으로 세포의 농도를 산출함으로써, 바이오칩의 불균일성이나 환경 변화, 측정자의 변동에 영향을 받지 않으면서 신속하게 자동으로 세포를 검출할 수 있는 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치 및 방법을 제안한다.
이하에서는 도면을 참조하여 본 발명의 실시 예들을 구체적으로 설명하도록 한다. 다만, 하기의 설명 및 첨부된 도면에서 본 발명의 요지를 흐릴 수 있는 공지 기능 또는 구성에 대한 상세한 설명은 생략한다. 또한, 도면 전체에 걸쳐 동일한 구성 요소들은 가능한 동일한 도면 부호로 나타내고 있음에 유의하여야 한다.
도 1은 본 발명의 일실시 예에 따른 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치의 개략적인 구성을 도시하는 블록도이고, 도 2는 본 발명의 일실시 예에 따른 세포 검출을 위해 준비된 제1 검사용 시약 및 제2 검사용 시약이 담긴 관과, 각 제1 검사용 시약 및 제2 검사용 시약이 뇌척수액과 섞여 주입된 제1 채널 및 제2 채널을 도시한다.
도 1을 참조하면, 본 발명의 일실시 예에 따른 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치(100)는 측정 채널부(130), 검출부(150) 및 연산부(170)를 포함하여 구성될 수 있다.
측정 채널부(130)는 뇌척수액 샘플을 채집하고, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하기 위한 검사용 시약을 일정 비율로 혼합하여 혼합물을 준비한다.
본 발명에서 검사용 시약은 적혈구를 검출하기 위해 뇌척수액과 혼합하는 일정 농도의 제1 검사용 시약과, 백혈구를 검출하기 위해 뇌척수액과 혼합하는 일정 농도의 제2 검사용 시약으로 구성된다.
제1 검사용 시약은 적혈구를 계수하기 위해 뇌척수액과 혼합하는 일정 농도의 물질로서, 약 15㎛ 크기 및 3×103㎕ 농도의 마이크로 파티클(이하, 비교입자와 혼용)을 포함한다. 마이크로 파티클은 일정 체적을 갖는 비드(bead)로 구성될 수 있다.
제2 검사용 시약은 백혈구를 계수하기 위해 뇌척수액과 혼합하는 일정 농도의 물질로서, 약 15㎛ 크기 및 3×103㎕ 농도의 비교입자와 백혈구를 염색하는 형광 염색액을 포함한다. 여기서, 검사용 시약은 적혈구를 제거하고 백혈구를 염색하기 위한 용해 버퍼(Lysing buffer)를 의미하는 적혈구 용해성분을 더 포함할 수 있다. 백혈구를 염색하는 형광 염색액은 PI(Propidium iodide: 프로피디움 요오드화물(아이오딘화물)) 또는 SYBR Green 중 적어도 하나로 구성될 수 있다. 형광 염색액과 용해 버퍼는 1:1 로 혼합되어 구비될 수 있다. 경우에 따라서는 제2 검사용 시약은 용해버퍼를 포함하지 않고, 백혈구를 염색하는 형광 염색액만 포함하여 구비될 수 있다. 적혈구가 섞여 있는 상태이더라도 형광 염색액이 백혈구만 염색하기 때문에 염색된 백혈구만을 계수 측정할 수 있다.
용해 버퍼는 1 liter의 H2O와 8.26g의 ammonium chloride(NH4Cl), 1g의 pottasium bicarbonate(KHCO3) 및 0.037g의 EDTA 중 적어도 하나의 혼합으로 구비될 수 있다.
여기서, PI는 Synonym: 3,8-Diamino-5-(3-diethylaminopropyl)-6-phenylphenanthridinium iodide methiodide,3,8-Diamino-5-[3-(diethylmethylammonio)propyl]-6-phenylphenanthridinium, diiodide 중 적어도 하나를 1mg/ml in water의 농도로 구비할 수 있다.
SYBR Green은 C32H37N4S+의 화학식을 갖는 N',N'-dimethyl-N-[4-[(E)-(3-methyl-1,3-benzothiazol-2-ylidene)methyl]-1-phenylquinolin-1-ium-2-yl]-N-propylpropane-1,3-diamine을 의미하고 10x에서 3x의 농도를 의미한다.
측정 채널부(130)는 도 2에 도시된 바와 같이 관이나 실린더를 구비할 수 있고, 마개를 구비하며, 교반기를 이용하여 관을 흔들어 검사용 시약과 뇌척수액을 혼합할 수 있다.
도 2에 도시된 제1 샘플 채집부(111)에는 제1 검사용 시약이 구비되어 있고, 제2 샘플 채집부(113)에는 제2 검사용 시약이 구비되어 있다.
제2 샘플 채집부(113)에 제2 검사용 시약을 뇌척수액과 1:1로 섞고 백혈구가 염색되도록 약 10분간 상온에서 인큐베이션 한 뒤 제2 채널(133)에 주입한다.
측정 채널부(130)는 제1 검사용 시약과 혼합된 뇌척수액이 주입되는 제1 채널(131)과, 제2 검사용 시약과 혼합된 뇌척수액이 주입되는 제2 채널(133)을 구비한다. 측정 채널부(130)의 채널은 측정 대상이나 목적에 따라 그 개수를 구비할 수 있다. 제1 채널(131) 및 제2 채널(133)은 도 2에 도시된 것과 같이 하나의 마이크로칩에 서로 분리되어 구비될 수 있다.
검출부(150)는 광학 검사장비에서 검출하고자 하는 세포의 고유 특성에 따라 픽셀과 임계치를 측정기준으로서 설정할 수 있고, 비교입자나 세포의 종류에 따라 측정기준을 순차적으로 변경할 수 있다. 상기 측정기준은 물질의 사이즈에 기초하여 설정된 소정 수치의 가로×세로의 사각형인 픽셀의 사이즈에 대응하는 물질만 검출하도록 설정될 수 있다. 즉, 픽셀 내면에 접하는 물질을 검출하도록 설정될 수 있다.
또한, 상기 측정기준은 염색된 물질의 형광 면적 및 형광 강도의 임계치에 해당하는 물질만 검출하도록 설정될 수 있다. 아울러, 검출부(150)는 물질 계수를 위해 광학 검사장비의 LED 광원과 필터를 설계자의 설정에 따라 자동 변경할 수 있다.
구체적으로, 검출부(150)는 제1 채널(131)에서 비교입자와 적혈구 간의 사이즈 차이에 기초하여 설정된 소정 수치의 가로×세로의 사각형인 제1 픽셀의 내면에 접하는 물질을 비교입자로 검출하여 계수하고, 그 다음으로 적혈구 고유 특성에 기초하여 재설정된 소정 수치의 가로×세로의 사각형인 제2 픽셀의 내면에 접하는 물질을 적혈구로 검출하여 계수한다.
도 3은 제1 채널(131)에서 검출부(150)에 의해 적혈구(RBC)가 검출된 사진을 도시한다. 광학 검사장비는 도 3과 같은 이미지에서 제2 픽셀 사이즈에 해당하는 적혈구(RBC)만을 검출하여 계수할 수 있다.
제2 채널(133)에서 비교입자와 백혈구 간의 사이즈 차이에 기초하여 설정된 제1 검출기준에 따라 소정 수치의 가로×세로의 사각형인 제1 픽셀의 내면에 접하는 물질을 비교입자로 검출하여 계수하고, 다음 제2 검출기준에 따라 백혈구의 형광 면적이 소정 수치의 가로×세로의 사각형인 제3 픽셀의 내면에 접하고, 동시에 형광 강도가 임계치 이상인 물질을 백혈구로 검출한다. 여기서, 비교입자를 검출하여 계수한 후, 검출부(150)는 광학 검사장비의 LED 광원과 필터를 각각 그린, 레드로 바꾸어 도 4에 도시된 바와 같이 PI 또는 SYBR Green로 염색된 백혈구를 제3 기준인 픽셀과 임계치에 따라 검출한다.
도 5는 제2 채널(133)에서 검출부(150)에 의해 백혈구(WBC)가 검출된 사진을 도시한다. 광학 검사장비는 도 5의 좌측 이미지에서 제3 픽셀 사이즈에 해당하고, 우측 이미지에서 형광 면적 및 형광 강도가 임계치에 해당하는 세포를 백혈구(WBC)로 검출하여 계수할 수 있다.
그리고, 검출부(150)는 도 4에 도시된 바와 같이, 제2 채널에서 이미지 영상처리를 통해 이미지로부터 백혈구를 림프구, 단핵구, 호중구, 호산구 및 호염기구로 분리하여 각각 계수한다. 이를 위한 이미지 영상처리는 림프구, 단핵구, 호중구, 호산구 및 호염기구에 대해 각 모양, 사이즈, 명암 등과 같은 고유 특징 정보가 미리 저장된 데이터베이스로부터 일치 여부를 확인하여 자동으로 분리할 수 있다. 백혈구를 림프구, 단핵구, 호중구, 호산구 및 호염기구로 분리하여 검출함으로써, 병명의 검사를 보다 자세히 할 수 있다.
연산부(170)는 검출부(150)에서 계수된 비교입자 수, 세포수 및 뇌척수액과 검사용 시약을 섞은 소정 비율에 따라 비교입자의 일정 농도를 산술연산 처리하여 세포의 농도를 산출한다.
구체적으로, 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합비율이 M:N(M 및 N은 자연수)인 경우, 적혈구의 농도를 
를 이용하여 산출할 수 있다.
예를 들어, 뇌척수액과 제1 검사용 시약을 1:1 비율로 혼합하여 주입한 제1 채널(151)에서 적혈구의 농도를 
로 계산한다.
계수된 비교입자수가 5개이고 계수된 적혈구의 수가 5개라면 적혈구는 비교입자의 농도와 동일하기 때문에 뇌척수액 안의 적혈구 농도는 비교입자의 농도와 동일한 3×103㎕ 라는 것을 알 수 있다.
그리고, 연산부(170)는 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합비율이 M:N(M 및 N은 자연수)인 경우, 백혈구의 농도를 
를 이용하여 산출한다.
예를 들어, 뇌척수액과 제2 검사용 시약의 혼합 비율이 1:1이면, 백혈구의 농도를 
로 계산한다. 계수된 비교입자수가 6개이고, 백혈구의 수가 2개라면 백혈구의 농도는 비교입자 농도의 1/3인 1×103㎕ 라는 것을 알 수 있다.
한편, 검출부(150) 및 연산부(170)는 도 6에 도시된 마이크로 스캐너(200)의 형태로 구비될 수 있고, 마이크로 스캐너(200)의 일편에 마이크로칩을 주입하는 입구(210)를 포함할 수 있다. 그리고, 마이크로 스캐너(200)에 내재된 검출부(150)가 제1 채널로부터 적혈구를 검출하기 위해 앞서 설명한 과정을 순차적으로 자동 진행하고, 동시에 제2 채널로부터 백혈구를 검출하기 위해 앞서 설명한 제1 검출기준 및 제2 검출기준을 순차적으로 적용하며 자동 진행할 수 있다.
도 7은 본 발명의 실시 예에 따른 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법을 설명하기 위한 개략적인 순서도이다.
도 7을 참조하여 본 발명의 실시 예에 따른 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법을 설명하면, 먼저 일정농도의 비교입자를 포함하는 검사용 시약을 소정 비율로 뇌척수액과 혼합한다(S610).
구체적으로, 적혈구를 검출하기 위해 일정 농도의 비교입자를 포함하는 제1 검사용 시약을 뇌척수액과 일정 비율로 혼합하여 제1 채널에 주입한다. 제1 검사용 시약은 적혈구를 계수하기 위한 제1 검사용 시약으로서, 예를 들어 약 15㎛ 크기 및 3×103㎕ 농도의 비교입자(bead)를 포함한다.
백혈구를 검출하기 위해 일정 농도의 비교입자와, 백혈구를 염색하는 형광 염색액을 포함하는 제2 검사용 시약을 뇌척수액과 일정 비율로 혼합하여 제2 채널에 주입한다. 제2 검사용 시약은 예를 들어, 약 15㎛ 크기 및 3×103㎕ 농도의 비교입자와 백혈구를 염색하는 형광 염색액을 포함할 수 있다. 제2 검사용 시약은 적혈구 용해시키며, 백혈구를 염색하기 위한 용해 버퍼(Lysing buffer)인 적혈구 용해성분을 더 포함할 수 있다. 그리고, 백혈구를 염색하는 형광 염색액으로서 PI(Propidium iodide: 프로피디움 요오드화물(아이오딘화물)) 또는 SYBR Green를 이용할 수 있다.
다음으로, 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합물을 마이크로칩의 채널에 주입하고(S620), 채널에 주입된 혼합물의 이미지를 획득한다(S630).
다음으로, 비교입자와 세포 간의 사이즈에 기초하여 설정된 광학 검사장비의 검출기준에 따라 상기 이미지로부터 비교입자를 검출하여 계수한다(S640).
구체적으로, 제1 채널에서는 소정 수치의 가로×세로의 사각형으로 설정된 제1 픽셀의 사이즈를 제1 기준으로 하여 제1 기준에 대응하는 세포를 비교입자로 계수한다. 제2 채널에서는 소정 수치의 가로×세로의 사각형으로 설정된 제1 픽셀의 사이즈를 제1 기준으로 하여 제1 기준에 대응하는 세포를 비교입자로 계수한다.
다음으로, 세포의 고유 특성에 기초하여 검출기준을 변경하며 이미지로부터 세포를 검출하여 계수한다(S650).
구체적으로, 제1 채널에서는 소정 수치의 가로×세로의 사각형으로 설정된 제2 픽셀의 내면에 접하는 물질을 적혈구로 계수한다. 제2 채널에서는 제1 기준을 염색된 백혈구 고유 특성에 기초하여 변경한 제3 기준으로서, 염색된 백혈구의 형광 면적이 소정 수치의 가로×세로의 사각형으로 설정된 제3 픽셀의 내면에 접하고, 동시에 형광 강도가 임계치 이상임을 제3 기준으로 하여 제3 기준에 해당하는 물질을 백혈구로 검출한다. 앞서 S630 단계의 제2 채널에서 비교입자를 계수한 이후, 광학 검사장비의 LED 광원과 필터를 각각 그린, 레드로 바꾸어 도 4에 도시된 바와 같이 PI 또는 SYBR Green로 염색된 백혈구가 제3 기준인 픽셀과 임계치에 따라 검출되게 한다.
다음으로, 각 채널별로 계수된 비교입자 수 및 세포 수의 비율과 혼합물의 혼합 비율에 따라 비교입자의 일정농도를 기준으로 세포의 농도를 산출한다(S660).
구체적으로, 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합비율이 M:N(M 및 N은 자연수)인 경우, 세포의 농도를 
로 산출한다. 예를 들어, 세포액과 검사용 시약이 혼합된 일정 비율이 1:1인 경우, 적혈구의 농도는 
로 산출한다. 제2 채널에서 뇌척수액과 제2 검사용 시약을 1:1 비율로 섞은 경우, 백혈구의 농도는 
로 산출한다.
도 8은 본 발명의 일실시 예에 따른 뇌척수액으로부터 적혈구를 측정하는 방법을 설명하기 위한 순서도이다. 앞서 도 6을 참조하여 설명한 내용과 동일한 부분에 대해서는 상세한 설명을 생략하기로 한다.
도 8을 참조하여, 본 발명의 일실시 예에 따른 뇌척수액으로부터 적혈구를 측정하기 위해 먼저, 일정 농도의 비교입자를 포함하는 검사용 시약을 뇌척수액과 소정비율로 혼합한다(S710).
검사용 시약과 뇌척수액의 혼합물을 마이크로칩의 채널에 주입하고(S720), 마이크로 칩의 채널에 주입된 혼합물의 이미지를 획득한다(S730).
다음으로, 비교입자와 세포 간의 사이즈 차이에 기초하여 설정된 광학 검사장비의 검출기준에 따라 혼합물의 이미지로부터 비교입자를 검출하여 계수한다(S740). 이를 위해, 적혈구보다 큰 비교입자의 사이즈에 따라 설정된 수치의 가로×세로의 사각형 픽셀 내면에 접하는 물질을 비교입자로 검출하여 계수한다.
다음으로, 상기 검출기준을 적혈구 고유 특성에 기초하여 변경하고, 변경된 검출기준에 따라 혼합물의 이미지로부터 적혈구를 검출하여 계수한다(S750). 이를 위해 적혈구의 사이즈에 따라 설정된 수치의 소정 수치의 가로×세로의 사각형 픽셀 내면에 접하는 물질을 적혈구로 검출하여 계수한다.
다음으로, 비교입자 수 및 적혈구 수의 비율과 혼합물을 혼합한 소정비율에 따라 비교입자의 일정농도를 기준으로 적혈구의 농도를 산출한다(S760). 구체적으로, 검사용 시약과 혈액의 혼합비율이 M:N(M 및 N은 자연수)인 경우, 적혈구의 농도를 
를 이용하여 산출한다.
도 9는 본 발명의 일실시 예에 따른 뇌척수액으로부터 백혈구를 측정하는 방법을 설명하기 위한 순서도이다. 앞서 도 6을 참조하여 설명한 내용과 동일한 부분에 대해서는 상세한 설명을 생략하기로 한다.
도 9를 참조하여, 본 발명의 일실시 예에 따른 뇌척수액으로부터 백혈구를 측정하기 위해 먼저, 일정 농도를 갖는 비교입자와, 백혈구를 염색하는 형광 염색액을 포함하는 검사용 시약을 뇌척수액과 소정의 혼합비율로 혼합한다(S810).
검사용 시약과 뇌척수액의 혼합물을 마이크로칩의 채널에 주입하고(S820), 채널에 주입된 혼합물의 이미지를 획득한다(S830).
구체적으로, 검사용 시약은 미리 설정된 크기와 일정 농도의 비교입자와 및 백혈구를 염색하는 형광 염색액을 포함하는 검사용 시약이다. 여기서, 검사용 시약은 적혈구를 제거하고 백혈구를 염색하기 위한 용해 버퍼(Lysing buffer)를 의미하는 적혈구 용해성분을 더 포함할 수 있고, 백혈구를 염색하는 형광 염색액으로는 PI(Propidium iodide: 프로피디움 요오드화물(아이오딘화물)) 또는 SYBR Green를 이용한다.
다음으로, 비교입자와 세포 간의 사이즈 차이에 기초하여 설정된 광학 검사장비의 제1 검출기준에 따라 상기 혼합물의 이미지로부터 비교입자를 검출하여 계수한다(S840). 제1 검출기준으로서 소정 수치의 가로×세로의 사각형으로 설정된 픽셀의 내면에 접하는 물질을 비교입자로 검출하여 계수한다.
다음으로, 제1 검출기준을 염색된 백혈구 고유 특성에 기초하여 변경한 제2 검출기준에 따라 상기 혼합물의 이미지로부터 백혈구를 검출하여 계수한다(S850). 이를 위해, 염색된 백혈구의 형광 면적이 소정 수치의 가로×세로의 사각형으로 설정된 픽셀 내면에 접하고, 동시에 형광 강도가 임계치 이상임을 제2 검출기준으로 하여 제2 검출기준에 해당하는 물질을 백혈구로 검출하여 계수한다.
그리고, 이미지 영상처리를 통해 이미지로부터 백혈구를 림프구, 단핵구, 호중구, 호산구 및 호염기구로 분리하여 각각 계수하는 단계를 더 포함할 수 있다.
다음으로, 계수된 비교입자 수, 백혈구 수 및 혼합물의 혼합 비율에 따라 비교입자의 일정 농도를 기준으로 백혈구의 농도를 산출한다(S860). 예를 들어, 제2 비율이 M:N(M 및 N은 자연수)인 경우, 백혈구의 농도를 
를 이용하여 산출한다.
이처럼 본 발명의 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치 및 방법에 의하면, 뇌척수액으로부터 적혈구와 백혈구를 자동으로 신속하게 분석할 수 있다.
아울러, 본 발명에 따른 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치 및 방법에 의하면, 일정농도의 비교입자를 포함하는 검사용 시약을 뇌척수액과 혼합하고, 마이크로 스캐너의 검출기준을 변경하며 일정 농도의 비교입자에 대비하여 세포를 상대적으로 검출함으로써, 신속하게 세포를 검출하여 병을 검사할 수 있는 효과가 있다.
더불어, 본 발명에 따른 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치 및 방법에 의하면, 비교입자를 포함하는 검사용 시약을 이용하여 일정 농도의 비교입자 대비 세포를 상대적으로 검출하여 계수하기 때문에, 측정 채널의 불균일성에 상관없이 정확하게 세포를 검출할 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치 및 방법에 의하면, 종래기술로는 정확히 구분하지 못했던 뇌척수액으로부터 적혈구, 백혈구를 종류별로 계수하여 질병의 원인이 무엇인지 정확히 유추할 수 있다.
한편, 본 발명의 실시 예들은 컴퓨터로 읽을 수 있는 기록 매체에 컴퓨터가 읽을 수 있는 코드로 구현하는 것이 가능하다. 컴퓨터가 읽을 수 있는 기록 매체는 컴퓨터 시스템에 의하여 읽혀질 수 있는 데이터가 저장되는 모든 종류의 기록 장치를 포함한다.
컴퓨터가 읽을 수 있는 기록 매체의 예로는 ROM, RAM, CD-ROM, 자기 테이프, 플로피디스크, 광 데이터 저장장치 등의 형태로 구현하는 것을 포함한다. 또한, 컴퓨터가 읽을 수 있는 기록 매체는 네트워크로 연결된 컴퓨터 시스템에 분산되어, 분산 방식으로 컴퓨터가 읽을 수 있는 코드가 저장되고 실행될 수 있다. 그리고 본 발명을 구현하기 위한 기능적인(functional) 프로그램, 코드 및 코드 세그먼트들은 본 발명이 속하는 기술 분야의 프로그래머들에 의하여 용이하게 추론될 수 있다.
이상에서 본 발명에 대하여 그 다양한 실시 예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명에 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 고유 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시 예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허 청구 범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.
100: 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치
130: 측정 채널부
150: 검출부
170: 연산부
200: 마이크로 스캐너
130: 측정 채널부
150: 검출부
170: 연산부
200: 마이크로 스캐너
Claims (20)
- 일정농도의 비교입자를 포함하는 검사용 시약을 뇌척수액과 소정비율로 혼합하는 단계;
상기 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합물을 마이크로칩의 채널에 주입하는 단계;
상기 채널에 주입된 혼합물의 이미지를 획득하는 단계;
적혈구와 비교입자의 사이즈 차이에 기초하여 설정된 검출기준에 따라 상기 이미지로부터 비교입자를 검출하여 계수하는 단계;
상기 검출기준을 적혈구 사이즈에 따라 변경하고, 변경된 검출기준에 따라 상기 이미지로부터 적혈구를 검출하여 계수하는 단계; 및
상기 비교입자 수 및 적혈구 수의 비율과 상기 혼합물의 비율에 따라 상기 비교입자의 일정농도를 기준으로 상기 적혈구의 농도를 산출하는 단계;를 포함하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법. - 제 1 항에 있어서,
상기 비교입자를 검출하여 계수하는 단계는,
적혈구보다 큰 비교입자의 사이즈에 따라 설정된 수치의 가로×세로의 사각형 픽셀 내면에 접하는 물질을 비교입자로 검출하여 계수하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법. - 제 1 항에 있어서,
상기 변경된 검출기준에 따라 적혈구를 검출하여 계수하는 단계는,
적혈구의 사이즈에 따라 설정된 수치의 소정 수치의 가로×세로의 사각형 픽셀 내면에 접하는 물질을 적혈구로 검출하여 계수하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법. - 제 1 항에 있어서,
상기 적혈구의 농도를 산출하는 단계는,
상기 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합비율이 M:N(M 및 N은 자연수)인 경우, 적혈구의 농도를의 수식을 이용하여 산출하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법.
- 제 1 항에 있어서,
상기 적혈구의 농도를 산출하는 단계는,
상기 비교입자 수 및 적혈구 수의 비율과, 상기 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합 비율을 이용하여 미리 설정된 상기 비교입자의 일정 농도에 대비한 적혈구의 상대적 농도를 산출하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법. - 일정농도의 비교입자 및 백혈구를 염색하는 형광 염색액으로 구성된 검사용 시약을 뇌척수액과 소정의 혼합비율로 혼합하는 단계;
상기 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합물을 마이크로칩의 채널에 주입하는 단계;
상기 채널에 주입된 혼합물의 이미지를 획득하는 단계;
백혈구와 비교입자의 사이즈 차이에 기초하여 설정된 제1 검출기준에 따라 상기 이미지로부터 비교입자를 검출하여 계수하는 단계;
상기 형광 염색액에 의한 염색 특성에 기초하여 설정된 제2 검출기준에 따라 상기 이미지로부터 백혈구를 검출하여 계수하는 단계; 및
상기 비교입자 수 및 백혈구 수의 비율과 상기 혼합물의 비율에 따라 상기 비교입자의 일정농도를 기준으로 상기 백혈구의 농도를 산출하는 단계;를 포함하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법. - 제 6 항에 있어서,
상기 비교입자를 계수하는 단계는,
상기 백혈구보다 큰 비교입자의 사이즈에 따라 설정된 수치의 가로×세로의 사각형 픽셀 내면에 접하는 물질을 비교입자로 검출하여 계수하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법. - 제 6 항에 있어서,
상기 백혈구를 검출하는 단계는,
상기 형광 염색액으로 이용된 PI(propidium iodide: 프로피디움 요오드화물) 또는 SYBR Green에 의해 염색된 적색 또는 녹색 형광 물질을 백혈구로 검출하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법. - 제 8 항에 있어서,
상기 백혈구를 검출하는 단계는,
상기 적색 또는 녹색 형광 물질이 상기 제2 검출기준인 형광 면적이 소정 수치의 가로×세로의 사각형으로 설정된 픽셀의 내면에 접하고, 동시에 형광 강도가 임계치 이상인 물질을 백혈구로 검출하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법. - 제 6 항에 있어서,
상기 백혈구를 계수하는 단계는,
상기 백혈구를 검출한 이미지로부터 이미지 광학처리를 통해 백혈구를 림프구, 단핵구, 호중구, 호산구 및 호염기구로 분리하여 각각 계수하는 단계를 더 포함하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법. - 제 6 항에 있어서,
백혈구의 농도를 산출하는 단계는,
상기 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합비율이 M:N(M 및 N은 자연수)인 경우, 백혈구의 농도를로 산출하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법.
- 제 6 항에 있어서,
상기 백혈구의 농도를 산출하는 단계는,
상기 비교입자 수 및 백혈구 수의 비율과, 상기 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합 비율을 이용하여 미리 설정된 상기 비교입자의 일정 농도에 대비한 백혈구의 상대적 농도를 산출하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법. - 제 6 항에 있어서,
상기 검사용 시약은 적혈구 용해성분을 더 포함하여, 상기 뇌척수액에 포함된 적혈구를 용해시키는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 방법. - 일정농도의 비교입자를 포함하는 검사용 시약을 소정비율로 뇌척수액과 혼합한 혼합물을 주입하기 위한 마이크로칩의 채널을 구비하는 측정 채널부;
비교입자와 세포 간의 사이즈 차이에 기초하여 설정된 이미지 분석기의 검출기준에 따라 비교입자와 세포수를 순차적으로 검출하여 계수하는 검출부; 및
상기 비교입자 수 및 세포 수의 비율과 상기 혼합물의 혼합 비율에 따라 상기 비교입자의 일정농도를 기준으로 상기 세포의 농도를 산출하는 연산부;를 포함하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치. - 제 14 항에 있어서,
상기 측정 채널부는,
상기 뇌척수액에서 적혈구를 검출하기 위해 일정농도의 비교입자를 포함하는 제1 검사용 시약을 제1 비율로 혼합하여 제1 채널에 주입하고,
상기 뇌척수액에서 백혈구를 검출하기 위해 일정 농도를 갖는 비교입자와, 백혈구를 염색하는 형광 염색액을 포함하는 제2 검사용 시약을 제2 비율로 혼합하여 제2 채널에 주입하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치. - 제 15 항에 있어서,
상기 제2 검사용 시약은 적혈구 용해 성분을 더 포함하여 상기 뇌척수액으로부터 적혈구를 용해시키는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치. - 제 15 항에 있어서,
상기 검출부는 상기 제1 채널에서,
상기 비교입자와 적혈구 간의 사이즈 차이에 기초하여 설정된 소정 수치의 가로×세로의 사각형인 제1 픽셀 내면에 접하는 물질을 비교입자로 계수하고,
다음으로 적혈구 사이즈에 기초하여 설정된 소정수치의 가로×세로의 사각형인 제2 픽셀 내면에 접하는 물질을 적혈구로 검출하여 계수하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치. - 제 15 항에 있어서,
상기 검출부는 상기 제2 채널에서,
백혈구 대비 비교입자의 사이즈 차이에 기초하여 설정된 소정 수치의 가로×세로의 사각형인 제1 픽셀 내면에 접하는 물질을 비교입자로 계수하고,
다음으로 형광 염색액에 의해 염색된 적색 또는 녹색 형광 물질의 형광 면적이 소정 수치의 가로×세로의 사각형인 제3 픽셀의 사이즈에 대응하고, 동시에 상기 적색 또는 녹색 형광 물질의 형광 강도가 임계치 이상인 물질을 백혈구로 검출하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치. - 제 15 항에 있어서,
상기 검출부는 상기 제2 채널에서,
상기 검출된 백혈구를 이미지 영상처리를 통해 림프구, 단핵구, 호중구, 호산구 및 호염기구로 분리하여 각각 계수하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치. - 제 14 항에 있어서,
상기 연산부는,
상기 검사용 시약과 뇌척수액의 혼합비율이 M:N(M 및 N은 자연수)인 경우, 백혈구의 농도를의 수식을 이용하여 산출하는, 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020170056223A KR101902433B1 (ko) | 2017-05-02 | 2017-05-02 | 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치 및 방법 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020170056223A KR101902433B1 (ko) | 2017-05-02 | 2017-05-02 | 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치 및 방법 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR101902433B1 true KR101902433B1 (ko) | 2018-11-07 |
Family
ID=64363214
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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| KR1020170056223A KR101902433B1 (ko) | 2017-05-02 | 2017-05-02 | 뇌척수액으로부터 세포를 검출하는 장치 및 방법 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR101902433B1 (ko) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000503404A (ja) | 1996-11-04 | 2000-03-21 | シーナ・バイオテク，インコーポレイテッド | 基準微小粒子を使用する検定 |
| KR100844350B1 (ko) | 2007-01-09 | 2008-07-07 | 주식회사 디지탈바이오테크놀러지 | 부유 혼합 미세입자 중 특정 미세입자를 광학적인 방법으로계수하기 위한 미세채널 칩 및 이를 이용한 미세입자 계수방법 |
-
2017
- 2017-05-02 KR KR1020170056223A patent/KR101902433B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (2)
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| JP2000503404A (ja) | 1996-11-04 | 2000-03-21 | シーナ・バイオテク，インコーポレイテッド | 基準微小粒子を使用する検定 |
| KR100844350B1 (ko) | 2007-01-09 | 2008-07-07 | 주식회사 디지탈바이오테크놀러지 | 부유 혼합 미세입자 중 특정 미세입자를 광학적인 방법으로계수하기 위한 미세채널 칩 및 이를 이용한 미세입자 계수방법 |
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