KR101892575B1 - 리버스-턴 유사체의 신규한 화합물 및 그 제조방법과 용도 - Google Patents

리버스-턴 유사체의 신규한 화합물 및 그 제조방법과 용도 Download PDF

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Abstract

본 발명은 피라지노트리아지논(Pyrazino-triazinone)을 기본 구조로 갖는, 리버스-턴 유사체의 신규한 화합물 및 이의 제조방법에 관한 것이고, 또한 상기 화합물의 항암효과 등의 질병치료제, 특히 급성 골수성 백혈병의 치료제로서의 용도에 관한 것이다.

Description

리버스-턴 유사체의 신규한 화합물 및 그 제조방법과 용도{NOVEL COMPOUND OF A REVERSE-TURN MIMETIC AND A PRODUCTION METHOD AND USE THEREFOR}
본 발명은 리버스-턴 유사체의 신규한 화합물, 그들의 제조방법, 및 그들의 의료병태, 예를 들면 급성 골수성 백혈병 치료제로서의 용도에 관한 것이다.
치료제로서 가능한 활성을 위한 분자의 무작위 스크리닝은 다년간 수행되어 왔고 그 결과로 수많은 중요한 약들이 발견되었다. 최근에는, 생물학적으로 활성이 있는 단백질이나 펩티드에서 발견되는 리버스-턴의 2차 구조와 유사한 비-펩티드 화합물이 개발되었다. 예를 들면, 칸(Kahn)의 미국등록특허 5,440,013호 및 칸(Kahn)의 공개된 PCT출원 WO94/003494A1, WO 01/000210A1 및 WO 01/016135A2 각각에는 리버스-턴의 2차 구조를 모방한, 입체 형태가 제한된 비-펩티드 화합물이 기술되어 있다. 그 외에, 칸(Kahn)의 미국등록특허 5,929,237호 및 그것의 일부계속(CIP) 미국등록특허 6,013,458호에는 생물학적으로 활성인 펩티드 및 단백질의 리버스-턴 영역의 2차 구조를 모방한 입체 형태가 제한된 화합물이 기술되어 있다. 입체 형태가 제한된, 리버스-턴 유사체의 합성 및 동정, 그리고 그들의 질병에의 적용은 오브레흐트(Obrecht)에 의해서도 리뷰되었다 (Advances in Med. Chem., 4, 1-68, 1999).
상기와 같이, 입체 형태가 제한된 리버스-턴 유사체의 합성 및 동정 기술에 있어 상당한 진보가 있었으며, 또한 펩티드의 2차 구조를 모방한 작은 분자에 대한 라이브러리 구성원을 합성하고 스크리닝 하여 생활성 라이브러리 구성원을 동정하는 연구가 계속되어 왔다. 이에 따라 생물학적으로 활성이 있는 펩티드 및 단백질의 리버스-턴 영역의 2차 구조를 모방한 입체형태가 제한된 화합물 및 생체 내 활성이 높은 화합물을 찾고자 하는 연구가 계속되었다. 예를 들면, PCT출원 WO 04/093828A2, WO 05/116032A2, 및 WO 07/139346A1 각각에는 이들 리버스-턴 유사체 및 제조방법과 생활성 등이 기술되어 있다.
상기와 같이 많은 리버스-턴 유사체들이 제조되었으나, 항암효과 등 질병치료에 이용할 수 있는 가능한 화합물들에 대한 화합물 제조가 계속되고 있다.
특히, 암치료 등에 이용하기 위해서는, Wnt 신호전달을 강하게 억제하며, 이를 통해 Wnt 신호전달 경로가 활성화되어 있는 것으로 알려진 급성골수성백혈병(Acute Myeloid Leukemia) 암세포의 증식을 효과적으로 억제하는 화합물들을 찾고자 하는 노력이 계속되어 왔다.
또한, 생체 내 활성이 높은 화합물을 찾은 경우 이를 경제적으로 대량생산할 수 있는 제조 방법의 개발의 필요성이 있었다.
본 발명의 하나의 목적은 생체 내 활성을 가지는 신규한 화합물, 및 이의 제조방법을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 상기 화합물의 항암효과 등을 가지는 질병치료제, 특히 급성 골수성 백혈병 치료제로서의 용도를 제공하는 것이다.
본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염을 제공한다.
[화학식 I]
Figure 112013021774807-pct00001
상기 화학식 I에서,
Ra는 C1-C6의 알킬기, C2-C6의 알케닐기, 또는 C2-C6의 알키닐기이고;
Rb는
Figure 112013021774807-pct00002
,
Figure 112013021774807-pct00003
,
Figure 112013021774807-pct00004
,
Figure 112013021774807-pct00005
,
Figure 112013021774807-pct00006
,
Figure 112013021774807-pct00007
또는
Figure 112013021774807-pct00008
이며;
상기 R1은 H, C1-C12의 알킬기 또는 치환된 C1-C12의 알킬기이고; R2는 H, 아릴기, 치환된 아릴기, 헤테로아릴기, 치환된 헤테로아릴기, 헤테로사이클로알킬기, 치환된 헤테로사이클로알킬기, C1-C30의 알콕시기, 치환된 C1-C30의 알콕시기, C1-C30의 알킬기, 치환된 C1-C30의 알킬기, 치환 또는 비치환된 알킬아미노기, 치환 또는 비치환된 아릴아미노기, 치환 또는 비치환된 헤테로아릴아미노기, 또는 치환 또는 비치환된 아미노기이며;
상기 R1과 R2는 서로 축합하여 지방족고리, 지방족헤테로고리, 방향족고리 또는 방향족헤테로고리를 형성하거나 스피로 결합을 이룰 수 있고, 상기 고리들은 치환기를 가질 수 있으며;
상기 R3은 C1-C20의 아실기, 치환된 C1-C20의 아실기, 시아노기 또는 설포닐기이며; 상기 R4는 H, 치환 또는 비치환된 아미노기, C1-C20의 아실기 또는 치환된 C1-C20의 아실기이며; 및
Rp는 H 또는 프로드러그 작용기이다.
본 발명의 신규한 화합물들은 급성골수성백혈병(Acute Myeloid Leukemia) 암세포의 시험관내 증식을 효과적으로 억제하고, 급성골수성백혈병 마우스 동물모델에서 종양의 성장을 효과적으로 억제한다. 또한, 본 발명의 화합물들은 낮은 CYP3A4 억제활성을 나타내고, 간대사에서의 안정성이 우수하다.
본 발명의 화합물들은 용해도가 우수하여 프로드러그 형태에 대한 적용이 없이도 약물로서 활용이 가능한 장점을 가진다.
또한, 본 발명의 화합물들은 체내에 투여할 때 보다 적은 양과 적은 투여 횟수로도 우수한 효능을 나타낼 수 있는 장점도 가진다.
본 발명의 화합물을 제조하는 방법을 이용하는 경우, 화학식 I의 화합물뿐만 아니라, 유사한 리버스-턴 구조체를 산업적 규모로 대량 생산하는 것이 가능하게 된다.
발명의 실시를 위한 최선의 형태
이하, 본 발명을 더욱 구체적으로 설명한다.
본 발명은 하기 화학식 I로 표시되는 리버스-턴 유사체의 신규한 화합물 또는 약학적으로 허용되는 그의 염을 제공하며, 이에 의해 급성 골수성 백혈병 치료제로 유용한 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염을 제공한다.
[화학식 I]
Figure 112013021774807-pct00009
상기 화학식 I에서,
Ra는 C1-C6의 알킬기, C2-C6의 알케닐기, 또는 C2-C6의 알키닐기이고;
Rb는
Figure 112013021774807-pct00010
,
Figure 112013021774807-pct00011
,
Figure 112013021774807-pct00012
,
Figure 112013021774807-pct00013
,
Figure 112013021774807-pct00014
,
Figure 112013021774807-pct00015
또는
Figure 112013021774807-pct00016
이며;
상기 R1은 H, C1-C12의 알킬기 또는 치환된 C1-C12의 알킬기이고; R2는 H, 아릴기, 치환된 아릴기, 헤테로아릴기, 치환된 헤테로아릴기, 헤테로사이클로알킬기, 치환된 헤테로사이클로알킬기, C1-C30의 알콕시기, 치환된 C1-C30의 알콕시기, C1-C30의 알킬기, 치환된 C1-C30의 알킬기, 치환 또는 비치환된 알킬아미노기, 치환 또는 비치환된 아릴아미노기, 치환 또는 비치환된 헤테로아릴아미노기, 또는 치환 또는 비치환된 아미노기이며;
상기 R1과 R2는 서로 축합하여 지방족고리, 지방족헤테로고리, 방향족고리 또는 방향족헤테로고리를 형성하거나 스피로 결합을 이룰 수 있고, 상기 고리들은 치환기를 가질 수 있으며;
상기 R3은 C1-C20의 아실기, 치환된 C1-C20의 아실기, 시아노기 또는 설포닐기이며; 상기 R4는 H, 치환 또는 비치환된 아미노기, C1-C20의 아실기 또는 치환된 C1-C20의 아실기이며; 및 Rp는 H 또는 프로드러그 작용기이다.
상기 프로드러그 작용기로는, 프로드러그에서 이용 가능한 것으로 기존에 이용되는 임의의 작용기가 사용될 수 있다. 상기 임의의 작용기의 예로는 포스페이트 작용기, 카르복시 작용기, C1-C6의 알킬아미노 작용기, 아실아미노 작용기 등을 들 수 있으며, 구체적으로는 -PO3H2, -HPO3 - Na+, -PO3 2 -Na2 +, -PO3 2 -K2 +, -PO3 2 -Mg2 +, -PO3 2 -Ca2+,
Figure 112013021774807-pct00017
,
Figure 112013021774807-pct00018
,
Figure 112013021774807-pct00019
등을 들 수 있다.
Ra는 C1-C6의 알킬기, C2-C6의 알케닐기, 또는 C2-C6의 알키닐기이고, 보다 바람직하게는 C1-C6의 알킬기이다.
Rb는
Figure 112013021774807-pct00020
,
Figure 112013021774807-pct00021
,
Figure 112013021774807-pct00022
,
Figure 112013021774807-pct00023
,
Figure 112013021774807-pct00024
,
Figure 112013021774807-pct00025
또는
Figure 112013021774807-pct00026
이며, 구체적으로는
Figure 112013021774807-pct00027
,
Figure 112013021774807-pct00028
,
Figure 112013021774807-pct00029
,
Figure 112013021774807-pct00030
,
Figure 112013021774807-pct00031
,
Figure 112013021774807-pct00032
,
Figure 112013021774807-pct00033
,
Figure 112013021774807-pct00034
,
Figure 112013021774807-pct00035
또는
Figure 112013021774807-pct00036
중 어느 하나일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 R1은 H, C1-C12의 알킬기 또는 치환된 C1-C12의 알킬기이고; R2는 아릴기, 치환된 아릴기, 헤테로아릴기, 치환된 헤테로아릴기, 헤테로사이클로알킬기, 치환된 헤테로사이클로알킬기, C1-C12의 알콕시기, 치환된 C1-C12의 알콕시기, C1-C12의 알킬기, 치환된 C1-C12의 알킬기, 치환 또는 비치환된 알킬아미노기, 치환 또는 비치환된 아릴아미노기, 치환 또는 비치환된 헤테로아릴아미노기, 또는 치환 또는 비치환된 아미노기이며; 상기 R1과 R2는 서로 축합하여 지방족고리, 지방족헤테로고리, 방향족고리 또는 방향족헤테로고리를 형성하거나 스피로 결합을 이룰 수 있고, 상기 고리들은 치환기를 가질 수 있다. 또한, 상기 R3은 H, C1-C20의 아실기 C1-C20의 치환된 아실기, 치환 또는 비치환된 아미노기, 시아노기 또는 -SO2-기일 수 있다.
본 발명에서 알킬기는 선형(linear), 분지쇄형(branched) 또는 고리형(cyclic) 알킬기를 의미한다.
본 발명에서 알콕시기는 선형(linear), 분지쇄형(branched) 또는 고리형(cyclic) 알콕시기를 의미한다.
상기 아릴렌 또는 아릴기는 탄소수 5 ~ 12의 아릴인 것이 바람직하며, 단일고리(monocyclic) 또는 복수고리(bicyclic or tricyclic) 아릴을 포함하나, 반드시 이에 한정되지는 않는다.
상기 헤테로아릴렌 또는 헤테로아릴기는 탄소수 2 ~ 11의 헤테로아릴인 것이 바람직하며, 단일고리(monocyclic) 또는 복수고리(bicyclic or tricyclic) 헤테로아릴을 포함하나, 반드시 이에 한정되지는 않는다.
상기 헤테로사이클로알킬기는 탄소수 2 ~ 6의 헤테로사이클로알킬기인 것이 바람직하나, 반드시 이에 한정되지는 않는다.
상기 R1, R2, R3 또는 R4 가 치환기로 치환되는 경우, 상기 치환기의 예로는 치환 또는 비치환된 알킬기, 할로겐이 치환된 알킬기, 히드록시기가 치환된 알킬기, 치환 또는 비치환된 아릴기, 치환 또는 비치환된 헤테로아릴기, 치환 또는 비치환된 헤테로사이클로알킬기, 치환 또는 비치환된 아미노기, 치환 또는 비치환된 알콕시기, 치환 또는 비치환된 카르보닐기, 아세틸기, 카르복실기, 시아노기 또는 -SO2-기 등을 들 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.
구체적으로 상기 R1은, H, C1-C5의 알킬기이며, 상기 C1-C5의 알킬기는 하나 이상의 Rq 로 치환될 수 있고;
R2는, H, C1-C10의 알킬기, C3-C10의 사이클로알킬기, 아미노기, C1-C10의 알콕시기, 벤질기,
Figure 112013021774807-pct00037
,
Figure 112013021774807-pct00038
,
Figure 112013021774807-pct00039
,
Figure 112013021774807-pct00040
,
Figure 112013021774807-pct00041
,
Figure 112013021774807-pct00042
또는
Figure 112013021774807-pct00043
일 수 있고, 상기 C1-C10의 알킬기, C3-C10의 사이클로알킬기, 아미노기, C1-C10의 알콕시기 및 벤질기는 하나 이상의 Rq 로 치환될 수 있고;
R1과 R2이 N와 함께 축합하여,
Figure 112013021774807-pct00044
,
Figure 112013021774807-pct00045
,
Figure 112013021774807-pct00046
,
Figure 112013021774807-pct00047
,
Figure 112013021774807-pct00048
,
Figure 112013021774807-pct00049
,
Figure 112013021774807-pct00050
,
Figure 112013021774807-pct00051
,
Figure 112013021774807-pct00052
,
Figure 112013021774807-pct00053
또는
Figure 112013021774807-pct00054
중 어느 하나의 고리를 이룰 수 있으며;
R3은,
Figure 112013021774807-pct00055
,
Figure 112013021774807-pct00056
또는
Figure 112013021774807-pct00057
일 수 있고;
R4는, H, 하나 이상의 Rq 로 치환된 아미노기,
Figure 112013021774807-pct00058
또는
Figure 112013021774807-pct00059
이며;
상기 Rq 는 H, 하나 이상의, C1-C10의 알킬기, 치환된 C1-C10의 알킬기, C1-C10의 사이클로 알킬기, 치환된 C1-C10의 사이클로 알킬기, 아미노기, 치환된 아미노기, C1-C10의 알콕시기, 치환된 C1-C10의 알콕시기, 할로겐, -OH, 벤질기, 치환된 벤질기, 아실기, 치환된 아실기, 페닐기, 치환된 페닐기, BOC(butyl oxy carbonyl),
Figure 112013021774807-pct00060
,
Figure 112013021774807-pct00061
,
Figure 112013021774807-pct00062
,
Figure 112013021774807-pct00063
,
Figure 112013021774807-pct00064
,
Figure 112013021774807-pct00065
,
Figure 112013021774807-pct00066
,
Figure 112013021774807-pct00067
,
Figure 112013021774807-pct00068
,
Figure 112013021774807-pct00069
,
Figure 112013021774807-pct00070
,
Figure 112013021774807-pct00071
또는
Figure 112013021774807-pct00072
이며,
상기, X는 H, 하나 이상의 C1-C10의 알킬기, 치환된 C1-C10의 알킬기, 아실기, C3-C10의 사이클로 알킬기, C1-C10의 알콕시기, 페닐, 치환된 페닐, 벤질, 치환된 벤질, C1-C10의 헤테로 방향족 고리, C3-C10의 헤테로 사이클로 알킬, 치환된 C3-C10의 헤테로 사이클로 알킬, 아미노기, 치환된 아미노기 또는 - OH일 수 있다.
본 발명의 화합물들은 용해도가 우수하여 프로드러그 형태의 개발 없이도 약물로서 활용이 가능한 장점을 가진다.
따라서, 본 발명의 화합물을 포함하는 조성물은 주사제 투여에 적합하다는 장점을 가진다.
본 발명은 또한 상기 화합물을 이용하여 질병 치료, 특히 항암치료, 특히 급성골수성 백혈병을 치료하기 위한 약제를 제조하는 것을 제공한다.
본 발명의 화합물은 (1)약물로서 효능이 좋으면서도 (2)약물 상호작용이 개선되어 약리학적으로 더 우수하고, (3)화합물의 용해도가 우수하여 프로드러그 형태에 대한 적용이 없더라도 약물로서 활용이 가능하며, (4)간대사 안정성이 증가되는 등의 장점을 가진다.
즉, 본 발명의 화합물은 기존의 화합물들에 비하여 더 낮은 CYP3A4 억제활성(더 높은 IC50)을 가지므로, 약물 상호작용이 개선된다. 또한, 본 발명의 화합물은 AML(Acute Myeloid Leukemia) 암세포들에 대하여 기존의 화합물들에 비하여 강한 세포성장 억제활성(더 낮은 GI50)을 가져, 급성 골수성 백혈병 예방 또는 치료에 사용될 수 있다.
본 발명의 신규한 화합물은 구조적인 개선을 통해 이러한 화합물의 용해도를 크게 개선하였으며, 반드시 프로드러그 형태에 대한 적용이 없더라도 약물로서 활용이 가능한 장점이 있다.
뿐만 아니라, 본 발명의 화합물은 간대사 안정성이 증가되어 체내 투여시 보다 적은 양과 적은 투여 횟수로도 기존의 화합물들과 동일하거나 또는 더 우수한 효능을 나타낼 수 있는 장점이 있다.
본 발명에서 제조된 화합물들의 예를 하기 표 1 내지 표 6에 기재하였으나, 본 발명의 화합물이 상기 화합물들로 한정되는 것은 아니다.
[표 1]
Figure 112013021774807-pct00073
Figure 112013021774807-pct00074
[표 2]
Figure 112013021774807-pct00075
Figure 112013021774807-pct00076
Figure 112013021774807-pct00077
Figure 112013021774807-pct00078
Figure 112013021774807-pct00079
Figure 112013021774807-pct00080
Figure 112013021774807-pct00081
Figure 112013021774807-pct00082
Figure 112013021774807-pct00083
Figure 112013021774807-pct00084
Figure 112013021774807-pct00085
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Figure 112013021774807-pct00088
Figure 112013021774807-pct00089
Figure 112013021774807-pct00090
Figure 112013021774807-pct00091
Figure 112013021774807-pct00092
Figure 112013021774807-pct00093
Figure 112013021774807-pct00094
Figure 112013021774807-pct00095
[표 3]
Figure 112013021774807-pct00096
Figure 112013021774807-pct00097
Figure 112013021774807-pct00098
Figure 112013021774807-pct00099
Figure 112013021774807-pct00100
Figure 112013021774807-pct00101
Figure 112013021774807-pct00102
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Figure 112013021774807-pct00104
Figure 112013021774807-pct00105
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Figure 112013021774807-pct00107
Figure 112013021774807-pct00108
Figure 112013021774807-pct00109
[표 4]
Figure 112013021774807-pct00110
Figure 112013021774807-pct00111
Figure 112013021774807-pct00112
Figure 112013021774807-pct00113
Figure 112013021774807-pct00114
Figure 112013021774807-pct00115
Figure 112013021774807-pct00116
Figure 112013021774807-pct00117
Figure 112013021774807-pct00118
Figure 112013021774807-pct00119
Figure 112013021774807-pct00120
Figure 112013021774807-pct00121
Figure 112013021774807-pct00122
[표 5]
Figure 112013021774807-pct00123
Figure 112013021774807-pct00124
Figure 112013021774807-pct00125
Figure 112013021774807-pct00126
Figure 112013021774807-pct00127
Figure 112013021774807-pct00128
Figure 112013021774807-pct00129
Figure 112013021774807-pct00130
Figure 112013021774807-pct00131
Figure 112013021774807-pct00132
Figure 112013021774807-pct00133
Figure 112013021774807-pct00134
[표 6]
Figure 112013021774807-pct00135
Figure 112013021774807-pct00136
Figure 112013021774807-pct00137
특히, 본 발명의 리버스-턴 유사체는
Figure 112013021774807-pct00138
인 화합물(화합물 E-5) 인 것이 바람직하다.
본 발명에서, 약학적으로 허용되는 염은 의약업계에서 통상적으로 사용되는 염을 의미하며, 예를 들어 염산, 황산, 브롬화수소산 및 인산 및 산 금속 염(예: 오르토인산일수소나트륨 및 황산수소칼륨) 등 일 수 있으며, 열거된 이들 염에 의해 본 발명에서 의미하는 염의 종류가 한정되는 것은 아니다. 바람직하게는 상기 약제학적으로 허용 가능한 염은 염산염 또는 황산염일 수 있다.
또한 본 발명의 리버스-턴 유사체를 경제적으로 대량 생산할 수 있는 제조방법을 제공한다. 본 발명에 따른 화합물은 하기 제조 방법에 따라 제조될 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.
인돌-7-카바알데하이드(Indole-7-carbaldehyde)에서, 시아노기(-CN)를 인돌-7-카바알데하이드(Indole-7-carbaldehyde)의 3번 위치에 도입하는 단계;
이어서 메틸기와 아미노아세탈기를 도입하는 단계;
Cbz-Tyrosine-OtBu와 2-(1-알릴-4-벤질세미카르바지도)아세트산(2-(1-Allyl-4-benzylsemicarbazido)acetic acid)을 입체선택적으로 아마이드 반응을 수행하는 단계;
포름산을 이용하여 고리화 반응을 수행하는 단계; 및
상기 단계를 거쳐 제조된 화합물에서, 시아노기(-CN)를 카르복실기로 변환한 후 아마이드 반응을 수행하는 단계
를 포함하는, 청구항 1에 기재된 화합물의 제조 방법.
또는, 본 발명에 따른 화합물은 하기 제조 방법에 따라 제조될 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.
인돌-7-카바알데하이드(Indole-7-carbaldehyde)에서, 요오드화 반응(Iodination)을 통해 인돌-7-카바알데하이드(Indole-7-carbaldehyde)의 3번 위치에 요오드(Iodine)를 도입하는 단계;
이어서 메틸기와 아미노아세탈기를 도입하는 단계;
Cbz-Tyrosine-OtBu와 2-(1-알릴-4-벤질세미카르바지도)아세트산(2-(1-Allyl-4-benzylsemicarbazido)acetic acid)을 입체선택적으로 아마이드 반응을 수행하는 단계;
포름산을 이용하여 고리화 반응을 수행하는 단계; 및
상기 단계를 거쳐 제조된 화합물에서, 아릴 붕산(aryl boric acid) 유도체와 팔라듐 촉매를 이용한 스즈키 반응(Suzuki reaction)을 수행하는 단계
를 포함하는, 청구항 1에 기재된 화합물의 제조 방법.
상기 제조방법에서 2-(1-알릴-4-벤질세미카바지도)아세트산은 하기의 단계를 포함하는 방법으로 제조될 수 있다:
에틸하이드라지노아세테이트(Ethylhydrazinoacetate) 용액에 TEA(Triehtylamine)를 투입하는 단계;
상기 용액에 알릴 브로마이드(Allyl bromide)를 적가하는 단계; 및
이후 상기 용액에 벤질이소시아네이트(Benzylisocyanate)를 적가하는 단계.
본 발명의 화합물들 중의 대표적인 화합물들에 대한 제조방법의 대략적인 스킴은 다음과 같으나, 이에 한정되지는 않는다.
[제조 스킴 1]
Figure 112013021774807-pct00139
[제조 스킴 2]
Figure 112013021774807-pct00140
Figure 112013021774807-pct00141
[제조 스킴 3]
Figure 112013021774807-pct00142
Figure 112013021774807-pct00143
상기 제조 스킴 2 또는 3에서, 상기 S3은
Figure 112013021774807-pct00144
의 구조를 가지는 화합물이다.
본 발명의 화합물은 피라지노트리아지논(Pyrazino-triazinone)을 기본 구조로 하여 4부분에 다른 작용기들을 갖고 있다. 또한 2개의 키랄성을 가지고 있기 때문에 입체 선택적으로 합성해야 한다.
상기 제조 스킴 1에 따르면, 인돌-7-알데하이드(indol-7-aldehyde)를 출발물질로 하여 인돌(indole)의 3번 위치에 카르복실산이 도입된 화합물을 중간체로 하여, 다양한 종류의 아민을 커플링하는 방법으로 본 발명의 화합물을 제조할 수 있다.
상기 제조 스킴 2 또는 3에 따르면, 인돌-7-알데하이드(indol-7-aldehyde)를 출발물질로 하여 인돌(indole)의 3번 위치에 요오드(Iodine)가 도입된 화합물을 중간체로 하여, 스즈키 반응(Suzuki-reaction)을 이용해 아릴 카르복실기 및 아릴 아민기를 도입하고 커플링 반응 등을 이용하여 본 발명의 화합물을 제조할 수 있다.
또한, 본 발명의 화합물은 다음과 같은 제조 스킴 4 내지 8에 따라 제조될 수 있으며, 이에 한정되지 않는다.
[제조 스킴 4]
Figure 112013021774807-pct00145
제조스킴 1의 화합물 10(인돌산)을 치환된 피페라진과 커플링하여 화합물 E-5를 합성하였다.
[제조 스킴 5]
Figure 112013021774807-pct00146
상기 제조 스킴 1과 같은 방법으로 제조한 인돌산 중간체 화합물(10)을 아민(NHR1R2)와 커플링하여 본 발명의 피라지노-트리아진 유도체(E1)를 제조할 수 있다.
[제조 스킴 6]
Figure 112013021774807-pct00147
상기 제조 스킴 6의 각 단계는 다음과 같다.
1단계: 제조 스킴 2와 같은 방법으로 제조한 인돌 중간체 (P4)와 스즈키 커플링 (Suzuki coupling)하는 단계;
2단계: 상기 스즈키 커플링된 화합물 (F1)을 아실화합물로 제조하는 단계;
3단계: 상기 아실화합물 (F2)을 탈보호하는 단계
[제조 스킴 7]
Figure 112013021774807-pct00148
상기 제조 스킴 7의 각 단계는 다음과 같다.
1단계: 제조 스킴 2와 같은 방법으로 제조한 인돌 중간체 (P4)와 스즈키 커플링 (Suzuki coupling)하는 단계;
2단계: 상기 스즈키 커플링된 화합물 (G1)을 치환된 아민과 커플링하는 단계;
3단계: 상기 아마이드 화합물 (G2)을 탈보호하는 단계
[제조 스킴 8]
Figure 112013021774807-pct00149
상기 제조 스킴 8의 각 단계는 다음과 같다.
1단계: 제조 스킴 2와 같은 방법으로 제조한 인돌 중간체 (P4)와 스즈키 커플링 (Suzuki coupling)하는 단계;
2단계: 상기 스즈키 커플링된 화합물 (H1)을 탈보호하는 단계.
상기 본 발명의 화학식 I로 표시되는 화합물을 포함하는 약학 조성물은 항암치료에 사용될 수 있으며, 특히 급성골수성백혈병 치료에 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 화학식 I로 표시되는 화합물을 포함하는 주사제 조성물은 항암치료에 사용될 수 있으며, 특히 급성골수성백혈병 치료에 사용될 수 있다.
발명의 실시를 위한 형태
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이며, 이에 의하여 본 발명의 범위가 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 화합물들의 제조방법의 구체적인 예시는 다음과 같다.
실시예
실시예 1 ＜화합물 A의 제조＞
제조 스킴 1에 따라 본 발명의 화합물 A를 제조하였다.
(1) 화합물 2(7- formyl -1H- indole -3- carbonitrile )의 합성
50g의 화합물 1을 아세토니트릴(acetonitrile) 1L에 녹인 후 5℃로 냉각한 후, 클로로술포닐이소시아네이트(chlorosulfonylisocynate) 36ml(1.2eq)을 적가하였다. 온도를 상온(25℃)으로 올린 후 2시간 교반하였다. 이 반응물에 과량의 DMF을 넣어 1시간 교반한 후, 과량의 물을 넣어 반응을 종료시키고, EA(Ethylacetate)로 층 분리를 하였다. 그리고 나서, MgSO4로 수분을 제거한 후 여과하고 감압 농축하여 53.5g(91.3％)의 목적물(화합물 2)을 얻었다.
1H NMR(300MHz, DMSO-d6, ppm, δ) 12.58(bs, 1H), 10.20(s, 1H), 8.31(d, J=3.1Hz, 1H), 8.03(d, J=7.94Hz, 1H), 7.97(dd, J=7.72, J=1.13Hz, 1H), 7.49(t, 7.94Hz, 1H)
(2) 화합물 3(7- formyl -1- methyl -1H- indole -3- carbonitrile )의 합성
53.4g의 화합물 2를 600ml의 DMF에 녹이고, 215g(5eq)의 K2CO3과 58ml(3eq)의 CH3I를 투입한 후, 상온에서 15시간 교반하였다. 반응이 종료됨을 확인한 후, H2O 와 EA(Ethylacetate)를 이용하여 층 분리를 한 후, MgSO4로 수분을 제거하고, 여과하여 감압 건조하였다. 생성된 고체를 헥산(Hexane)에서 30분간 슬러리(slurry)한 후, 여과 후 건조하여 35.4g(61.2％)의 목적물(화합물 3)을 얻었다.
1H NMR(300MHz, DMSO-d6, ppm, δ): 10.42(s, 1H), 8.38(s, 1H), 7.98(d, J=8.07, 1H), 7.95(dd, J=7.55, 1.12, 1H), 7.46(d, J=7.62, 1H), 4.15(S, 3H)
(3) 화합물 4(7-(((2,2- diethoxyethyl ) amino ) methyl )-1- methyl -1H- indole -3-carbonitrile)의 합성
49g의 화합물 3을 CH3OH(1L)/THF(1L) 혼합용매에 현탁(suspension)시킨 후, 상온에서 42.4ml(1.1eq)의 디에틸 아미노아세탈(Diethyl aminoacetal)과 22.8ml(1.5eq)의 아세트산(Acetic acid)을 투입한 후, 50℃로 가온하여 녹지 않은 화합물 3을 완전히 녹인 후 상온에서 1시간 동안 교반하였다. 18.4g(1.1eq)의 NaCNBH4을 상온에서 투입한 후 1시간 교반하고, H2O와 EA(Ethylacetate)를 이용하여 층 분리를 하였다. MgSO4로 수분을 제거하고, 여과하여 감압 건조한 후, 크루드(crude)한 목적물을 얻었다. 컬럼 크로마토그래피(column chromatography)를 이용해 정제하여 70g(87.3％)의 목적물(화합물 4)을 얻었다.
1H NMR(300MHz, DMSO-d6, ppm, δ): 9.37(bs, 1H), 8.28(s, 1H), 7.69(d, J=7.58, 1H), 7.49(bs, 1H), 7.31(t, J=8.05, 1H), 4.90(bs, 1H), 4.63(bs, 2H), 4.15(s, 3H), 3.60(m, 4H), 3.15(bs, 2H), 1.15(t, J=6.98, 6H)
(4) 화합물 5((S)-(9H-fluoren-9-yl)methyl(3-(4-(tert-butoxy)phenyl)-1-(((3- cyano -1- methyl -1H- indol -7- yl ) methyl )(2,2- diethoxyethyl ) amino )-1-oxopropan-2-yl)carbamate)의 합성
70g의 화합물 4와 106.8g(1.0eq)의 Fmoc-Tyr(OtBu)OH을 2L의 DCM(dichloromethane)에 녹인 후 상온에서 106g(1.2eq)의 HATU(O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate)과 97ml(2.4eq)의 DIPEA(Diisopropylethylamine)을 투여하였다. 상온에서 3시간 동안 교반한 후, H2O와 DCM(dichloromethane)을 이용하여 층 분리하였다. MgSO4로 수분을 제거하고, 여과하여 감압 건조한 후, 크루드(crude)한 목적물을 얻었다. 컬럼 크로마토그래피(Column chromatography)를 이용해 정제하여 140g(81％)의 목적물(화합물 5)을 얻었다.
1H NMR(300MHz, CDCl3, ppm, δ): 7.75(d, J=7.31, 2H), 7.70~7.48(m, 3H), 7.47~7.36(m, 3H), 7.30(t, J=7.75, 2H), 7.21~7.05(m, 2H), 6.98~6.66(m, 4H), 5.58~5.32(m, 1H), 5.14~4.87(m, 1H), 4.73~4.61(m, 1H), 4.44~4.05(m, 5H), 3.95(d, J=18.76, 2H), 3.79~3.64(m, 1H), 3.61~3.40(m, 3H), 3.38~3.16(m, 2H), 3.15~2.85(m, 3H), 1.28(m, 9H), 1.10(m, 6H)
(5)화합물 6((S)-2- amino -3-(4-( tert - butoxy ) phenyl )-N-((3- cyano -1- methyl -1H-indol-7-yl)methyl)-N-(2,2-diethoxyethyl)propanamide)의 합성
70g의 화합물 5를 700ml의 DCM(dichloromethane)에 녹인 후 상온에서 70ml의 피페라진(piperazine)을 투여하였다. 상온에서 2시간 동안 교반하고, H2O를 넣어 층 분리를 한 후, 감압 하에 DCM(dichloromethane)과 피페라진(piperazine)을 제거하였다. 얻어진 크루드(Crude) 화합물을 컬럼 크로마토그래피(column chromatography)를 이용해 정제하여 50g(quant. Yield)의 목적물(화합물 6)을 얻었다.
1H NMR(300MHz, DMSO-d6, ppm, δ): 8.17(s, 1H), 7.50(d, J=7.89, 1H), 7.14(m, 2H), 6.99(d, J=8.35, 1H), 6.83(m, 3H), 5.13(m, 2H), 4.53(t, J=4.91, 0.5H), 4.33(t, J=5.34, 0.5H), 4.04(m, 4H), 3.5~3.15(m, 10H), 1.26(s, 9H), 1.02(m, 6H)
(6) 화합물 7((S)-2-allyl-N-benzyl-2-(2-((3-(4-(tert-butoxy)phenyl)-1-(((3- cyano -1- methyl -1H- indol -7- yl ) methyl )(2,2- diethoxyethyl ) amino )-1-oxopropan-2-yl)amino)-2-oxoethyl)hydrazinecarboxamide)의 합성
49g의 화합물 6, 33.9g(1.2eq)의 하이드라진 산(hydrazine acid) 및 53.5g(1.5eq)의 HBTU(O-Benzotriazole-N,N,N',N'-tetramethyl-uronium-hexafluoro-phosphate)을 1L의 DCM(dichloromethane)에 녹인 후, 상온에서 49.2ml(3eq)의 DIPEA(Diisopropylethylamine)을 투여하였다. 상온에서 15시간 동안 교반한 후, 반응종료를 확인하고, H2O를 넣어 층 분리를 하였다. MgSO4로 수분을 제거 한 후 여과하고 감압 건조하였다. 얻어진 크루드(crude) 화합물을 컬럼 크로마토그래피(column chromatography)를 이용해 정제하여 55g(77.2％)의 목적물(화합물 7)을 얻었다.
1H NMR(300MHz, DMSO-d6, ppm, δ): 8.64(m, 1H), 8.16(m, 2H), 7.50(d, J=7.22, 1H), 7.35~7.05(m, 9H), 6.86~6.60(m, 3H), 5.84(m, 1H), 5.28~5.03(m, 4H), 4.80~4.10(m, 2H), 4.03(s, 3H), 3.61(m, 4H), 3.5~2.8(m, 10H), 1.25(m, 9H), 1.05(m, 6H)
(7) 화합물 8((6S,9aS)-2-allyl-N-benzyl-8-((3-cyano-1-methyl-1H-indol-7- yl ) methyl )-6-(4- hydroxybenzyl )-4,7- dioxooctahydro -1H- pyrazino [2,1-c][1,2,4]triazine-1-carboxamide)의 합성
55g의 화합물 7을 1L의 포름산(Formic acid)에 녹인 후 60℃에서 2시간 동안교반하였다. 감압 하에 포름산(Formic acid)를 제거한 후, H2O와 EA(Ethylacetate)로 층 분리 하였다. MgSO4로 수분을 제거한 후, 여과하여 감압 건조하였다. 얻어진 크루드(crude) 화합물을 컬럼 크로마토그래피(column chromatography)를 이용해 정제하여 14.8g(33.3％)의 목적물(화합물 8)을 얻었다.
1H NMR(300MHz, DMSO-d6, ppm, δ): 9.30(s, 1H), 8.18(s, 1H), 7.81(t, J=6.56, 1H), 7.53(d, J=7.67, 1H), 7.33~7.12(m, 6H), 6.89(d, J=8.34, 2H), 6.75(d, J=6.82, 1H), 6.62(d, J=7.80, 2H), 5.81(m, 1H), 5.40(d, J=10.74, 2H), 5.11~5.05(m, 3H), 4.90(d, J=16.09, 1H), 4.20(m, 2H), 4.07(s, 3H), 3.70(t, J=11.37, 1H), 3.61~3.55(m, 3H), 3.41~3.09(m, 3H), 3.02(dd, J=11.85, 3.48, 1H)
(8) 화합물 9(ethyl7-(((6S,9aS)-2-allyl-1-(benzylcarbamoyl)-6-(4- hydroxybenzyl )-4,7- dioxohexahydro -1H- pyrazino [2,1-c][1,2,4]triazin-8(2H)-yl)methyl)-1-methyl-1H-indole-3-carboxylate)의 합성
14.8g의 화합물 8을 900ml의 에탄올(EtOH)에 녹인 후 5℃로 냉각하고, 27.23g(14.8ml)의 H2SO4를 적가한 후, 98℃에서 3일간 교반하였다. 상온으로 냉각한 후 H2O와 EA(Ethylacetate)로 층 분리를 하였다. MgSO4로 수분을 제거한 후, 여과하여 감압 건조하였다. 얻어진 크루드(crude) 화합물을 컬럼 크로마토그래피(column chromatography)를 이용해 정제하여 7.2(45.2％)의 목적물(화합물 9)을 얻었다.
1H NMR(300MHz, DMSO-d6, ppm, δ): 9.27(s, 1H), 8.05(s, 1H), 7.96(d, J=7.69, 1H), 7.80(t, J=6.22, 1H), 7.30~7.12(m, 5H), 7.10(t, J=7.66, 1H), 6.88(d, J=8.40, 2H), 6.70(d, J=7.24, 1H), 6.62(d, J=8.38, 2H), 5.79(m, 1H), 5.43~5.37(m, 2H), 5.10~5.02(m, 3H), 4.90(d, J=15.93, 1H), 4.27~4.20(m, 4H), 4.07(s, 3H), 3.70(t, J=11.31, 1H), 3.63~3.53(m, 3H), 3.19~3.01(m, 4H), 1.32(t, J=6.88, 3H)
(9) 화합물 10(7-(((6S,9aS)-2-allyl-1-(benzylcarbamoyl)-6-(4- hydroxybenzyl )-4,7- dioxohexahydro -1H- pyrazino [2,1-c][1,2,4]triazin-8(2H)-yl)methyl)-1-methyl-1H-indole-3-carboxylic acid )의 합성
7.18g의 화합물 9를 540ml의 디옥산(dioxane)에 녹인 후 5℃로 냉각한 후 1M-LiOH 540ml(50eq)을 적가하였다. 상온에서 15시간 동안 교반한 후, 감압 하에 디옥산(dioxane)을 제거하였다. 에테르(Ether)를 넣어 층 분리를 한 후, 수용액층을 5℃로 냉각하고, c-HCl으로 pH를 2로 하였다. EA(Ethylacetate)를 넣어 층분리 한 후 MgSO4로 수분을 제거한 후, 여과하여 감압 건조하였다. 그 후, 6.4g(78.5％)의 목적물(화합물 10)을 얻었다.
1H NMR(300MHz, DMSO-d6, ppm, δ): 11.96(bs, 1H), 9.28(bs, 1H), 7.98~7.96(m, 2H), 7.80(t, J=6.56, 1H), 7.31~7.17(m, 5H), 7.07(t, J=7.64, 1H), 7.89(d, J=8.23, 2H), 6.70(d, J=7.77, 1H), 6.62(d, J=7.85, 2H), 5.79(m, 1H), 5.45~5.37(m, 2H), 5.09~5.02(m, 3H), 4.95(d, J=16.03, 1H), 4.20~4.01(m, 5H), 3.59(t, J=11.13, 1H), 3.62~3.51(m, 4H), 3.27~2.96(m, 3H)
(10) 화합물 A ((6S,9aS)-2-allyl-N-benzyl-6-(4-hydroxybenzyl)-8-((1- methyl -3-((6-( pyrrolidin -1- yl ) pyridin -3- yl ) carbamoyl )-1H- indol -7- yl ) methyl )-4,7-dioxooctahydro-1H-pyrazino[2,1-c][1,2,4]triazine-1-carboxamide)의 합성
30mg의 화합물 10을 디클로로메탄(dichloromethane) 10ml에 녹인 후, 0.02ml(2.4eq)의 DIPEA(Diisopropylethylamine)와 21mg(1.2eq)의 HATU(O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate)를 투여하고 30분간 교반하였다. 6-(피롤리딘-1-닐)피리딘-3-아민(6-(pyrrolidin-1-yl)pyridin-3-amine)를 9.1mg(1.2eq) 넣고 상온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 확인한 후, H2O를 넣어 층 분리를 하였다. Na2SO4로 수분을 제거한 후, 여과하여 감압 건조하였다. 얻어진 크루드(crude) 화합물을 컬럼 크로마토그래피(column chromatography)를 이용해 정제하여 10mg(27％)의 목적물(화합물 A)을 얻었다.
1H NMR(300MHz, CDCl3-d, ppm, δ): 8.10~8.06(m, 3H), 8.03~7.99(m, 1H), 7.38(d, J=0.6Hz,, 1H), 7.31~7.22(m, 2H), 7.15(d, J=6.9Hz, 2H), 7.07(t, J=7.8Hz, 1H), 6.98(d, J=4.8Hz, 2H), 6.86(d, J=7.2Hz, 1H), 6.75~6.68(m, 4H), 5.61~5.52(m, 1H), 5.31~5.27(m, 2H), 5.07(d, J=10.2Hz, 2H), 4.96~4.83(m, 1H), 4.37~4.17(m, 2H), 3.78(s, 3H), 3.49~3.22(m, 12H), 3.17~3.12(m, 1H).
실시예 2 ＜화합물 B의 제조＞
제조 스킴 2에 따라 본 발명의 화합물 B를 제조하였다.
(1) S3 (2-(1- allyl -4- benzylsemicarbazido ) acetic acid )의 합성
제조 스킴 2에서의 S3의 제조 방법은 하기와 같다.
Figure 112013021774807-pct00150
67g의 에틸하이드라지노아세테이트(Ethylhydrazinoacetate)를 673mL의 THF(Tetrahydrofuran)에 녹인 후, 121ml의 TEA(Triehtylamine)를 투입하였다. 반응용액에 41mL의 알릴 브로마이드(Allyl bromide)를 20분 동안 적가하였다. 이 용액을 5시간 동안 교반하고, 반응액을 여과하였다. 여과한 용액에 53mL의 벤질이소시아네이트(Benzylisocyanate)를 15분 동안 적가하고, 30분 동안 상온에서 교반하였다. 교반이 완료된 후, 48g의 KOH(Potassiumhydroxide)을 정제수 673mL에 녹여서 적가한 후 30분 동안 교반하였다. 교반이 완료된 후 403mL의 MC(Dichloromethane) 와 269mL의 헥산(Hexane)을 투입하여 교반한 후 층분리를 하고, 수층을 201mL의 MC(Dichloromethane)를 사용하여 한번 더 씻어주었다. 수층에 진한염산 100mL를 사용하여 pH를 3으로 조절하였고, 이 용액을 30분 동안 교반한 후, 1009mL의 MC(Dichloromethane)를 사용하여 추출하였다. 추출한 MC(Dichloromethane)층을 269g의 Na2SO4을 사용하여 탈수 처리하고, 여과한 후 감압 농축하였다. 감압 농축한 잔사에 134mL의 EA(Ethylacetate)와 269mL의 헥산(Hexane)을 사용하여 결정화하여 여과하였다. 여과한 고체를 134mL의 EA(Ethylacetate)를 사용하여 슬러리(slurry)하여 0℃에서 여과하고, 진공건조기를 사용하여 진공 건조하여, 백색 고체(white solid)의 S3을 40g (수율 35％) 얻었다.
1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 10.84 (bs, 1H), δ 7.90 (s, 1H), δ 7.4-7.3 (m, 5H), δ 6.42 (t, J=5.0 Hz, 1H), δ 5.85-5.72 (m, 1H), δ 5.28 (dd, J=28.5, 2.0 Hz, 1H), δ 5.19 (d, J=17 Hz, 1H), δ 4.47-4.42 (m, 2H), δ 3.70 (dd, J=40.0, 2.5Hz, 1H).
(2) P10 (3- Iodo -1H- indole -7- carbaldehyde )의 합성
출발물질(Indole-7-carbaldehyde)에 I2 24g을 DMF(Dimethylforamide) 125ml에 넣고 교반하면서 KOH 5.3g를 투입한 후 반응시켰다. 반응 종결은 얇은막 크로마토그래피(TLC)로 확인이 가능하며, 반응이 완결된 후에는 EA(Ethylacetate) 354ml와 정제수 354ml을 사용하여 층 분리 하였다. 유기층을 10％ Na2S2O3 수용액으로 씻고, Na2SO4(Sodium sulfate)로 건조하고 여과한 후 40℃에서 농축하여 P10을 농축 잔사로 얻었다.
1H-NMR (CDCl3, 300MHz) δ 10.3 (bs, 1H), 10.2 (s, 1H), 7.79 (d, 1H, J=7.8 Hz), 7.75 (d, 1H, J=7.2 Hz), 7.44 (d, 1H, J=2.1 Hz), 7.37 (t, 1H, J=7.2 Hz); m/z 272.14 [M+1]+
(3) P9 (3- Iodo -1- methyl -1H- indole -7- carbaldehyde )의 합성
17g의 P10을 DMF(dimethylformamide) 100ml에 녹여 교반하였다. 10℃로 냉각하여 K2CO3(Potassium carbonate) 18g를 투입하고, CH3I(Methyliodide) 6ml를 적가 투입하였다. 상온으로 승온시켜 5시간 교반한 후 출발물질이 사라진 것을 확인한 후, K2CO3을 여과하고 헥산으로 결정화하여 P9을 얻었다.
1H-NMR (CDCl3, 300MHz) δ 10.2 (s, 1H), 7.76 (td, 1H, J=7.8, 1.2 Hz), 7.31(t, 1H, J=7.8 Hz), 7.12 (s, 1H), 4.14 (s, 3H)
(4) P8 의 합성
18g의 P9를 CH3OH(methanol) 600ml에 녹여 아세트산(Acetic acid) 0.4ml를 투입하였다. 상온에서 아미노아세트알데하이드 디에틸아세탈(aminoacetaldehyde diethylacetal) 14ml를 투입하여 4시간 교반하였다. 10℃로 냉각하여, 환원제인 NaCNBH3(Sodiumcyanoborohydride) 3.3g을 천천히 투입하였다 (수소 기체가 발생하고, 발열이 일어나기 때문에 주의해서 투입한다). 상온에서 1시간 동안 교반한 후 반응종결을 확인하고 EA(Ethylacetate) 354ml와 정제수 354ml을 사용하여 층분리를 하였다. 유기층을 Na2SO4(Sodium sulfate) 141g을 이용하여 탈수한 후, 헥산으로 결정화하여 P8을 얻었다.
(5) P7 의 합성
Fmoc-Tyr(OtBu) 27g을 MC(Dichloromethane) 200ml에 녹여 교반하였다. 상온에서 HATU(O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate) 23g, DIPEA (Diisopropylethylamine) 20ml를 적가 투입하였다. 2시간 동안 교반한 후에 15.8g의 P9을 투입한 뒤, 3시간 동안 교반하였다. 반응종결 후, 정제수를 투입하여 층분리를 하였다. 유기층을 5％ 시트릭산(citric acid) 수용액 898ml, 5％ NaHCO3 수용액 898ml을 이용하여 세척하고, Na2SO4 (Sodium sulfate)으로 탈수하고 농축하여, P7를 농축 잔사로 얻었다.
(6) P6 의 합성
34g의 P7을 MC(Dichloromethane) 400ml에 녹인 후 피페리딘(Piperidine) 20ml을 투입하고, 반응완료 후 농축하였다. MC(Dichloromethane) 400ml와 정제수 800ml 사용하여 층분리를 한 후, 유기층을 5％ 시트릭산(citric acid) 수용액 850ml와 5％ NaHCO3 수용액 850ml을 이용하여 세척하고 농축하여 P6를 얻었다.
(7) P5 의 합성
상기 (1)에서 제조한 S3 13g을 MC(Dichloromethane) 400ml에 녹인 후 HATU(O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate)) 19g와 DIPEA (Diisopropylethylamine) 16ml를 상온에서 적가 투입하였다. 3시간 동안 교반한 후 18g의 P6를 MC(Dichloromethane) 200ml에 녹여 적가 투입한 후, 상온에서 2시간 교반하였다. 반응종결을 확인한 후 MC(Dichloromethane) 300ml와 정제수 200ml을 사용하여 층분리를 하였다. 유기층은 5％ 시트릭산(citric acid) 수용액 200ml와 5％ NaHCO3 수용액 200ml로 세척하고, Na2SO4(Sodium sulfate) 340g으로 탈수하고 농축하여, P5를 농축 잔사로 얻었다.
(8) P4 의 합성
P5를 톨루엔(Toluene) 100ml로 녹인 후, p-TsOH.H2O 289mg을 투입하고 80℃까지 승온시켰다. 30분 동안 같은 온도에서 교반한 후, 상온으로 냉각하여 농축하였다. EA(ethylacetate) 200ml와 정제수 200ml를 사용하여 층분리를 하였다. 유기층은 5％ 시트릭산(citric acid) 수용액 200ml와 5％ NaHCO3 수용액 200ml로 세척하고, Na2SO4 (Sodium sulfate) 340g으로 탈수하고 농축하여, P4를 농축 잔사로 얻었다.
1H-NMR (CDCl3, 300MHz) δ 7.43~7.27 (m, 3H), 7.23~7.21 (m, 2H), 7.12 (t, 1H, J=7.2Hz), 7.08 (s, 1H), 7.05 (d, 2H, J=7.8 Hz), 6.97 (d, 1H, J=7.2 Hz), 6.90 (d, 2H, J=8.4 Hz), 6.59 (t, 1H, J=6.0 Hz), 5.62 (dd, 1H, J=10.2, 4.8 Hz), 5.53~5.39 (m, 3H), 5.37 (t, 1H, J=6.0 Hz), 5.02 (d, 1H, J=10.2 Hz), 4.93 (d, 1H, J=16.5 Hz), 4.77 (d, 1H, J=17.1 Hz), 4.44 (dd, 1H, J=15.0, 6.3 Hz), 4.32 (dd, 1H, J=15.0, 6.0 Hz), 3.97 (s, 3H), 3.49~3.19 (m, 8H), 1.33 (s, 9H)
(9) 화합물 12((6S,9aS)-2-allyl-8-((3-(4-aminophenyl)-1-methyl-1H-indol-7- yl ) methyl )-N- benzyl -6-(4-( tert - butoxy ) benzyl )-4,7- dioxooctahydro -1H-pyrazino[2,1-c][1,2,4]triazine-1-carboxamide)의 합성
상기 제조된 화합물 P4의 1.0g을 1,4-dioxane/H2O(2/1)의 20mL에 녹인 후에, 4-아미노페닐 보론산 피나콜 에스테르(4-aminophenyl boronic acid pinacol ester) 465mg(1.5eq)과 K3PO4 872mg(3.0 eq)를 가한 후에 온도를 서서히 올리고, 80℃가 되었을 때 Pd(PPh3)4 312mg(0.2eq)를 즉시 가한 후에 2시간 동안 환류하였다. 반응이 종료됨을 확인한 후, H2O 와 EA(ethylacetate)를 이용해 층분리를 하고, Na2SO4로 수분을 제거한 후 여과하여 감압 건조하였다. NH 실리카겔 크로마토그래피(Silicagel chromatography)(CH2Cl2/CH3OH=40/1)를 이용해 정제하여 목적물 400mg(39％)을 얻었다.
(10) 화합물 B ((6S,9 aS )-2- allyl - N-benzyl-6-(4-hydroxybenzyl)-8-((3-(4-(3-(6- methoxypyridin -3- yl ) ureido ) phenyl )-1- methyl -1H- indol -7- yl ) methyl )-4,7-dioxooctahydro-1H-pyrazino[2,1-c][1,2,4]triazine-1-carboxamide)의 합성
상기 화합물 12의 30mg을 1,4-디옥산(1,4-dioxane) 5mL에 녹인 후에 4-니트로페닐 클로로포메이트(4-nitrophenyl chloroformate) 13mg(1.5 eq)를 넣고 65℃에서 2시간 동안 교반하였다. 3-아미노-6-메톡시피리딘(3-amino-6-methoxypyridine) 6.1mg(1.2 eq)과 DIPEA 10mg(2.0 eq)을 가한 후에 온도를 90℃로 올리고 18시간 동안 교반하였다. 반응종결을 확인한 후에 감압 농축하고 실리카겔 크로마토그래피(Silicagel chromatography)(CH2Cl2/CH3OH=9/1)를 이용해 정제하여 목적물을 얻었다. 얻어진 목적 화합물을 CH2Cl2 5mL에 녹이고 TFA 4 mg(5.0 eq)를 가하고 5시간 동안 교반한 후에 반응이 종료됨을 확인하고 감압 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피(Silicagel chromatography)(CH2Cl2/ CH3OH=9/1)를 이용해 정제하여 목적물 6.8mg(20％)을 얻었다.
(CDCl3, 300MHz) δ 11.66 (bs, 1H), 8.43(s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.77 (m, 2H), 7.64 (d, 2H, J=7.8 HZ), 7.38 (m, 2H), 7.24 ~7.19 (m, 2H), 7.14 (m, 1H), 7.07 (s, 1H), 7.04 (d, 2H, J=8.4 Hz), 6.90 (d, 2H, J=7.2 Hz), 6.75 (d, 2H, J=8.4 Hz), 6.70 (t, 1H, J=5.7 Hz), 5.57 (m, 1H), 5.42~5.34 (m, 3H), 5.29 (d, 1H, J=15.0 Hz), 5.18 (d, 1H, J=15.0 Hz), 5.08 (d, 1H, J=10.2 Hz), 4.90 (d, 1H, J=17.1 Hz), 4.44 (dd, 1H, J=15.0, 8.3 Hz), 4.32 (dd, 1H, J=15.0, 6.0 Hz), 3.98 (s, 3H), 3.54~3.22 (m, 9H)
실시예 3
제조 스킴 3에 따라 본 발명의 화합물 C를 제조하였다.
(1) S3 (2-(1- allyl -4- benzylsemicarbazido ) acetic acid )의 합성
상기 실시예 2에서와 같다.
(2) P10 내지 P4 의 합성
상기 실시예 2에서와 같다.
(3) 화합물 14((6S,9aS)-2-allyl-8-((3-(6-aminopyridin-3-yl)-1-methyl-1H- indol -7- yl ) methyl )-N- benzyl -6-(4-( tert - butoxy ) benzyl )-4,7- dioxooctahydro -1H-pyrazino[2,1-c][1,2,4]triazine-1-carboxamide)의 합성
상기 제조된 화합물 P4의 1.1g을 1,4-dioxane/H2O(2/1) 28mL에 녹인 후에 2-아미노피리딘-5-보론산 피나콜 에스테르(2-aminopyridine-5-boronic acid pinacol ester) 516mg(1.5eq)과 K3PO4 961mg(3.0 eq)를 가한 후에 온도를 서서히 올렸다. 80℃가 되었을 때 Pd(PPh3)4 349mg(0.2eq)를 즉시 가한 후에 2시간 동안 환류하였다. 반응이 종료됨을 확인한 후, H2O 와 EA(ethylacetate)를 이용해 층분리를 한 후, Na2SO4로 수분을 제거한 후 여과하여 감압 건조하였다. NH 실리카겔 크로마토그래피(Silicagel chromatography)(CH2Cl2/CH3OH=20/1)를 이용해 정제하여 목적물 250mg(23％)을 얻었다.
(4) 화합물 C ((6S,9 aS )-2- allyl - N-benzyl-6-(4-hydroxybenzyl)-8-((1- methyl -3-(6-(3- phenylureido ) pyridine -3- yl )-1H- indol -7- yl ) methyl )-4,7-dioxooctahydro-1H-pyrazino[2,1-c][1,2,4]triazine-1-carboxamide)의 합성
상기 제조된 화합물 14의 25mg을 CH2Cl2 5mL에 녹인 후에 페닐이소시아네이트(phenylisocyanate) 6.1mg(1.5 eq)과 Et3N 6.9mg(2.0 eq)를 가하고, 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응이 종료됨을 확인한 후에 감압 농축하고, 실리카겔 크로마토그래피(Silicagel chromatography)(CH2Cl2/CH3OH=15/1)를 이용해 정제하여 목적물을 얻었다. 얻어진 목적 화합물을 CH2Cl2 5mL에 녹이고 TFA 5 mg(5.0 eq)를 가하고, 5시간 동안 교반한 후에 반응이 종료됨을 확인하고 감압 농축하였다. 실리카겔 크로마토그래피(Silicagel chromatography)(CH2Cl2/CH3OH=15/1)를 이용 정제하여 목적물 7.5mg(27％)을 얻었다.
(CDCl3, 300MHz) δ 8.01~7.87(m, 3H), 7.75 (d, 1H, J=8.1 Hz), 7.39~7.18 (m, 2H), 7.12(s, 1H), 7.08~6.99 (m, 3H), 7.04 (d, 2H, J=8.1 Hz), 6.95 (d, 2H, J=10.5 Hz), 6.83~6.71 (m, 3H) 6.76 (s, 1H), 6.73 (d, 2H, J=8.1 Hz), 5.61~5.47 (m, 3H), 5.44 (t, 1H, J=4.8 Hz), 5.39~5.25 (m, 3H), 5.03~4.97 (m, 3H), , 4.83 (d, 1H, J=17.1 Hz), 4.43 (dd, 1H, J=14.7, 6.3 Hz), 4.32 (dd, 1H, J=15.6, 5.7 Hz), 3.94 (s, 3H), 3.91 (s, 3H), 3.56~3.18 (m, 9H)
실시예 4
화합물 E-5((6S,9aS)-2-allyl-N-benzyl-8-((3-(4-ethylpiperazine-1-carbonyl)-1-methyl-1H-indol-7-yl)methyl)-6-(4-hydroxybenzyl)-4,7-dioxooctahydro-1H-pyrazino[2,1-c][1,2,4]triazine-1-carboxamide)의 제조
상기 실시예 1에서 합성된 화합물 10(15.6g)을 디클로로메탄 160mL에 녹인 후, 10.2mL (2.4eq)의 DIPEA(diisopropylethylamine)와 11.1g(1.2eq)의 HATU(O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N' ,N' -tetramethyluronium hexafluorophosphate)를 투여하고 30분간 교반하였다. N-ethyl peperazine을 2.9mL (0,95eq)넣고 상온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 확인 한 후, H2O를 넣어 층 분리를 하였다. Na2SO4로 수분을 제거한 후, 여과하여 감압 건조하였다. 얻어진 크루드(crude)화합물을 컬럼 크로마토그래피를 이용해 정제하여 10.7g(59％)의 목적물(화합물 E-5)을 얻었다.
실시예 5
상기 제조스킴 4 내지 8에 따라, 각각 표 2 내지 6에 기재된 화합물을 각각 합성하였다.
실험예
상기 실시예 1 내지 3에서 제조된 화합물 A 내지 C 및 실시예 4, 5에서 제조된 (표 2 내지 표 6 기재된)화합물의 GI50, IC50, TDI, 대사 안정성 및 PKa 를 측정하였으며, 그 측정 결과를 하기 표 7 내지 표 10에 나타내었다.
(1) MV -4-11의 GI50 측정
본 발명의 화합물들의 AML(Acute Myeloid Leukemia) 암세포들에 대한 세포성장 억제활성(세포성장 억제 분석)에 관한 측정을 위한 것이다. MV-4-11의 GI50은 AML 암세포들에 대하여 세포성장 억제활성을 나타낸다. GI50 값이 낮을수록 더 높은 억제활성을 의미한다.
세포성장억제 분석은 본 발명의 화합물들에 의한 세포증식억제율을 조사하기 위하여 수행되었다. MV-4-11(인간, 급성 골수성 백혈병 세포주) 세포들을 10％ 우태아혈청(FBS), 1x 페니실린/스트렙토마이신(10,000 units/ml 페니실린, 0.85％ NaCl 중의 10,000 g/ml 스트렙토마이신)을 포함하는 IMDM(Iscove' s modified Dulbecco' s medium) 배지에서 배양하였다. IMDM 배지에서 MV-4-11 세포들을 수확하고, 5 x 104 세포/웰을 96웰 배양 플레이트들(Nunc, #167008)의 각각의 웰에 옮겼다.
상기 실시예 1 내지 5에서 제조된 본 발명의 화합물들을 계열희석(serial dilution) 처리하고, 각각의 농도로 복제하였다. 상기 계열희석을 위하여, 상기 본 발명의 화합물들을 같은 부피의 배지를 사용하여 96-웰 어세이 블록(costar, #3956)으로 반복적으로 희석시켰다. 상기 희석 후에, 각각의 화합물을 각각의 웰에 첨가하였다.
또한, 배경 흡광도(background absorbance)는, 상기 테스트 화합물들의 처리 동안 음성 대조군 플레이트에 테스트 화합물을 대신하여 IMDM 배지를 첨가하는 것에 의해 측정되었다. 상기 플레이트들은 37℃, 5％ CO2를 함유하는 습식 인큐베이터(humidified incubator) 내에서 3일(72시간) 동안 배양되었다. 마지막 날, 20L의 셀틸터(CellTiter) 96 Aqueous One Solution(Promega #G3581)을 각각의 웰 내의 배양물에 첨가하고, 상기 플레이트들을 37℃, 5％ CO2를 함유하는 습식 인큐베이터 내에서 몇 시간 동안 배양하였다. 상기 배양 후, 각각의 세포의 흡광도를 EnVision(Perkinelmer, USA)를 사용하여 490nm에서 측정하였다.
GI50 값을 Prism 3.0프로그램을 사용하여 계산하였다. 그 결과를 표 9 및 표 10에 나타내었으며, 상기 결과들은 상기 본 발명의 화합물들이 상기 세포 증식에 영향을 미치고, AML 암세포들의 성장을 억제시킨다는 것을 나타내었다.
(2) CYP ( P450 CYP3A4 의 IC50 )의 측정
본 발명의 화합물들이 더 낮은 P450 CYP3A4 억제활성(더 높은 IC50)을 가지는 것을 측정하기 위한 것이다. 더 낮은 CYP3A4 억제활성은, 본 발명의 화합물들이 부작용의 관점에서 약리학적으로 더 좋다는 것을 의미한다.
이의 분석은 cDNA-발현 인간 간(hepatic)의 CYP3A4(supersome, BD GentestTM #456202)을 사용하여 96-웰 마이크로타이터(microtiter) 플레이트들에서 200L 부피로 수행되었다. CYP3A4에 대한 기질로서 7-벤질옥시-4-트리플루오로메틸-쿠마린(BFC)을 사용하였다. 실시예 1 내지 5에서 제조된 본 발명의 화합물들 및 기질 BFC를 100％ 아세토니트릴에 용해하였다. 상기 배양 혼합물에서 아세토니트릴의 최종 부피는 1％(volume/volume) 미만이었다. 칼륨 포스페이트 버퍼(pH 7.4, 최종 농도 0.1M), MgCl2(최종 농도 8.3mM), EDTA(최종 농도 1.67mM), 본 발명의 화합물 저장 용액, CYP3A4 supersome 및 NADPH(최종 농도 0.25mM)를 각각의 웰에 첨가하였다. 상기 반응을 37℃에서 기질(BFC, 최종 농도 30M)을 첨가하여 시작하고, 20분의 배양 후, 75 μL의 아세토니트릴: 0.5 M tris-base = 4 : 1(부피/부피)의 첨가에 의해 종료시켰다.
그 후에, 형광광도계(fluorometer)를 사용하여 형광 신호를 측정하였다. BFC 대사물질, 7-히드록시-4-트리플루오로메틸-쿠마린은 409 nm의 여기파장과 530 nm의 방출파장을 사용하여 측정되었다. 그 결과를 표 9 및 표 10에 나타내었다.
(3) TDI ( Time depend inhibition ; 시간의존적 저해작용)
상기 (2)의 IC50 측정과 동일한 방법의 시험에서, 화합물 A, B, C를 대상으로,상기 반응을 37℃에서 10분의 예비 배양 후 기질(BFC, 최종 농도 30 M)의 첨가에 의해 시작하였다. 37℃에서 20분의 배양 후, 상기 반응을 75 μL의 아세토니트릴: 0.5 M tris-base = 4 : 1(부피/부피)의 첨가에 의해 종료시켰다. 그 후에, 형광광도계(fluorometer)를 사용하여 형광 신호를 측정하였다. BFC 대사물질, 7-히드록시-4-트리플루오로메틸-쿠마린은 409 nm의 여기파장과 530 nm의 방출파장을 사용하여 측정되었다. 그 결과를 표 9에 나타내었다.
(4) MLM (간 대사안정성)의 측정
신약탐색연구에 있어서 약효 유지 및 부작용을 예방하기 위하여는 간대사에서의 안정성 정도가 매우 중요하다. 간대사 안정성은 보통 마이크로솜(microsome)이나 S9을 이용하는데, 본 시험에서는 신체에서 대사에 가장 많을 역할을 하는 CYP450이 주성분인 마이크로솜(microsome)을 대사안정성의 평가에 이용하였다.
이의 분석은 활성 측정을 완료한 마우스 간(hepatic)의 대사효소(microsome)를 사용하여 13 ml-반응유리튜브(glass tube)에서 200L 부피로 수행되었다.
실시예 1내지 5에서 제조된 본 발명의 화합물들을 먼저 DMSO(dimethyl sulfoxide)로 녹여 25 mM 저장용액을 제조하고 50％ 아세토니트릴로 희석하여 시험하였다. 칼륨 포스페이트 버퍼(pH 7.4, 최종 농도 0.1M), MgCl2(최종 농도 0.1M), 본 발명의 화합물 저장 용액 희석액(최종 농도 1mM), 마우스 대사효소(최종 농도 5mg/ml)를 반응유리튜브에 첨가하였다. 상기 반응을 37℃에서 3분의 예비 배양 후 반응보조인자(cofactor)인 NADPH(최종농도 12.5mM)의 첨가에 의해 시작하였다. 37℃에서 10분, 30분의 반응 후, 상기 반응을 1000ul의 아세토니트릴을 첨가하여 반응을 종료시키고, 잔여 본 발명의 화합물을 추출해 내었다. 3000rpm 에서 10분간 원심분리 후 상층액을 건조시키고 50％ 아세토니트릴 150ul에 재용해하여 HPLC 분석에 의한 정량을 실시하였다. 반응 시간 0분, 30분 후 본 발명의 화합물 양을 비교하여 대사안정성 정도를 평가하였다. 그 결과를 표 9 및 표 10에 나타내었다.
(5)용해도
1) 화합물 A, B, C의 용해도 평가
본 발명의 화합물들의 생리식염수(saline) 용액에서 용해도 측정을 위한 것이다. 용해도가 높을수록 투여 및 흡수에서 약물동태학적으로 이점을 지니고 있음을 의미한다.
이의 분석을 위해 본 발명의 화합물들을 약 0.5 mg 이 되도록 무게를 잰 다음, 1.5 ml 에펜도르프 튜브(eppendorf tube)에 1 mg/ml 의 농도가 되도록 saline을 첨가하였다. 37℃에서 10분간 초음파분해(sonication) 후 15000rpm 에서 5분간 원심분리하였다. 이 중 200μL를 취하여 여과 튜브(filter ulatrafree-MC centrifugal filter unit의 filter tube)로 옮기고 5000rpm 에서 5분간 원심분리하여 여과하였다. 여과액 100μL에 100μL의 100％ 아세토니트릴을 첨가하고 HPLC 분석에 의한 정량을 실시하여 용해도를 평가하였다.
2) 화합물 E-5의 용해도 평가
화합물 E-5, 화합물 E-5·HCl 화합물 E-5·H2SO4를 각각 10mg씩 정량하여, 0.25mL의 생리 식염수를 첨가 한 후, vortex mixing 하였다. 그 후, 상층에 취해 0.22μm filter로 거른 후 HPLC 로 정량 하였다. 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다.
[표 7]
Figure 112013021774807-pct00151
(6) 화합물 E-5투여시, 혈중 약물농도 정량
SD rat 에 화합물 E-5을 12.5mg/kg되게 정맥 주사 한 후, 투여후 5, 15, 30, 30, 120, 240, 1140분에 혈액을 취하여 분석기기 HPLC/MS/MS를 사용하여 혈액 중의 약물 농도를 정량하였다.
실험 결과를 하기 표 8에 나타내었다.
[표 8]
Figure 112013021774807-pct00152
[표 9]
Figure 112013021774807-pct00153
[표 10]
Figure 112013021774807-pct00154
Figure 112013021774807-pct00155
Figure 112013021774807-pct00156
Figure 112013021774807-pct00157
Figure 112013021774807-pct00158
Figure 112013021774807-pct00159
Figure 112013021774807-pct00160
Figure 112013021774807-pct00161
Figure 112013021774807-pct00162
상기 표 9 및 표 10을 살펴보면, 본 발명의 화합물들은 nM 수준의 GI50을 나타내며, 이는 본 발명의 화합물들이 AML 암세포들에 대하여 강한 억제활성을 갖는다는 것을 의미한다.
또한, 상기 표 9 및 표 10을 살펴 보면, 본 발명의 화합물들은 낮은 CYP3A4 억제활성(더 높은 IC50)을 갖는다는 것을 알 수 있다. 더 낮은 CYP3A4 억제활성은 본 발명의 화합물들이 부작용의 관점에서 약리학적으로 더 좋다는 것을 의미한다.
뿐만 아니라, 본 발명의 화합물들은 기존의 리버스 턴 유사체 구조 화합물보다 간대사 안정성이 증가되어 체내 투여시 보다 적은 양과 적은 투여 횟수로도 동일 또는 우수한 효능을 나타낼 수 있는 장점이 있다.
산업상 이용가능성
본 발명의 신규한 화합물들은 급성골수성백혈병(Acute Myeloid Leukemia) 암세포의 시험관내 증식을 효과적으로 억제하고, 급성골수성백혈병 마우스 동물모델에서 종양의 성장을 효과적으로 억제한다. 또한, 본 발명의 화합물들은 낮은CYP3A4 억제활성을 나타내고, 간대사에서의 안정성이 우수하다.

Claims (14)

  1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염:
    [화학식 I]
    Figure 112018039154746-pct00163

    상기 화학식 I에서,
    Ra는 C1-C6의 알킬기, C2-C6의 알케닐기, 또는 C2-C6의 알키닐기이고;
    Rb는
    Figure 112018039154746-pct00164
    ,
    Figure 112018039154746-pct00165
    ,
    Figure 112018039154746-pct00166
    ,
    Figure 112018039154746-pct00167
    ,
    Figure 112018039154746-pct00168
    ,
    Figure 112018039154746-pct00169
    또는
    Figure 112018039154746-pct00170
    이며;
    상기 R1은 H, C1-C5의 알킬기이며, 상기 C1-C5의 알킬기는 하나 이상의 Rq 로 치환될 수 있고;
    상기 R2는 H, C1-C10의 알킬기, C3-C10의 사이클로알킬기, 아미노기, C1-C10의 알콕시기, 벤질기,
    Figure 112018039154746-pct00222
    ,
    Figure 112018039154746-pct00223
    ,
    Figure 112018039154746-pct00224
    ,
    Figure 112018039154746-pct00225
    ,
    Figure 112018039154746-pct00226
    ,
    Figure 112018039154746-pct00227
    또는
    Figure 112018039154746-pct00228
    일 수 있고, 상기 C1-C10의 알킬기, C3-C10의 사이클로알킬기, 아미노기, C1-C10의 알콕시기 및 벤질기는 하나 이상의 Rq 로 치환될 수 있고;
    상기 R1과 R2는 N와 함께 축합하여,
    Figure 112018039154746-pct00229
    ,
    Figure 112018039154746-pct00230
    ,
    Figure 112018039154746-pct00231
    ,
    Figure 112018039154746-pct00232
    ,
    Figure 112018039154746-pct00233
    ,
    Figure 112018039154746-pct00234
    ,
    Figure 112018039154746-pct00235
    ,
    Figure 112018039154746-pct00236
    ,
    Figure 112018039154746-pct00237
    ,
    Figure 112018039154746-pct00238
    또는
    Figure 112018039154746-pct00239
    중 어느 하나의 고리를 이룰 수 있으며;
    상기 R3은
    Figure 112018039154746-pct00240
    ,
    Figure 112018039154746-pct00241
    또는
    Figure 112018039154746-pct00242
    일 수 있고;
    상기 R4는 H, 하나 이상의 Rq 로 치환된 아미노기,
    Figure 112018039154746-pct00243
    또는
    Figure 112018039154746-pct00244
    이며;
    상기 Rq 는 H, 하나 이상의, C1-C10의 알킬기, C1-C10의 사이클로 알킬기, 아미노기, C1-C10의 알콕시기, 할로겐, -OH, 벤질기, 아실기, 페닐기, BOC(butyl oxy carbonyl),
    Figure 112018039154746-pct00245
    ,
    Figure 112018039154746-pct00246
    ,
    Figure 112018039154746-pct00247
    ,
    Figure 112018039154746-pct00248
    ,
    Figure 112018039154746-pct00249
    ,
    Figure 112018039154746-pct00250
    ,
    Figure 112018039154746-pct00251
    ,
    Figure 112018039154746-pct00252
    ,
    Figure 112018039154746-pct00253
    ,
    Figure 112018039154746-pct00254
    ,
    Figure 112018039154746-pct00255
    ,
    Figure 112018039154746-pct00256
    또는
    Figure 112018039154746-pct00257
    이고;
    상기 X는 H, 하나 이상의 C1-C10의 알킬기, 아실기, C3-C10의 사이클로 알킬기, C1-C10의 알콕시기, 페닐, 벤질, C1-C10의 헤테로 방향족 고리, C3-C10의 헤테로 사이클로 알킬, 아미노기 또는 - OH이며;
    상기 C1-C10의 헤테로 방향족 고리 및 C3-C10의 헤테로 사이클로 알킬은 O 및 N으로부터 선택되는 하나 또는 둘의 헤테로 원소를 포함하는 것이고; 및
    Rp는 H, -PO3H2, -HPO3 -Na+, -PO3 2-Na2 +, -PO3 2-K2 +, -PO3 2-Mg2+, -PO3 2-Ca2+,
    Figure 112018039154746-pct00258
    ,
    Figure 112018039154746-pct00259
    또는
    Figure 112018039154746-pct00260
    이다.
  2. 청구항 1에 있어서,
    Ra는 C1-C6의 알킬기 또는 C2-C6의 알케닐기이고; Rp는 H인 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염.
  3. 청구항 1에 있어서, Ra는 메틸기인 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염.
  4. 청구항 1에 있어서,
    Rb는
    Figure 112013021774807-pct00171
    ,
    Figure 112013021774807-pct00172
    ,
    Figure 112013021774807-pct00173
    ,
    Figure 112013021774807-pct00174
    Figure 112013021774807-pct00175
    ,
    Figure 112013021774807-pct00176
    ,
    Figure 112013021774807-pct00177
    ,
    Figure 112013021774807-pct00178
    ,
    Figure 112013021774807-pct00179
    ,
    Figure 112013021774807-pct00180
    또는
    Figure 112013021774807-pct00181
    중 어느 하나인 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염.
  5. 삭제
  6. 삭제
  7. 청구항 1에 있어서,
    Figure 112013021774807-pct00221
    인 화합물(화합물 E-5) 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염.
  8. 청구항 1 내지 4 및 7 중 한 항의 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염을 포함하는 약학 조성물로서, 항암 치료에 사용하기 위한 약학 조성물.
  9. 청구항 8에 있어서, 상기 약학 조성물은 급성골수성백혈병 치료에 사용하기 위한 약학 조성물.
  10. 청구항 1 내지 4 및 7 중 한 항의 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염을 포함하고, 항암 치료에 사용하는 주사제 조성물.
  11. 청구항 10에 있어서, 상기 주사제 조성물은 급성 골수성 백혈병 치료에 사용하는 주사제 조성물.
  12. 인돌-7-카바알데하이드(Indole-7-carbaldehyde)에서, 시아노기(-CN)를 인돌-7-카바알데하이드(Indole-7-carbaldehyde)의 3번 위치에 도입하는 단계;
    이어서 메틸기와 아미노아세탈기를 도입하는 단계;
    Cbz-Tyrosine-OtBu와 2-(1-알릴-4-벤질세미카르바지도)아세트산(2-(1-Allyl-4-benzylsemicarbazido)acetic acid)을 입체선택적으로 아마이드 반응을 수행하는 단계;
    포름산을 이용하여 고리화 반응을 수행하는 단계; 및
    상기 단계를 거쳐 제조된 화합물에서, 시아노기(-CN)를 카르복실기로 변환한 후 아마이드 반응을 수행하는 단계
    를 포함하는, 청구항 1에 기재된 화합물의 제조 방법.
  13. 인돌-7-카바알데하이드(Indole-7-carbaldehyde)에서, 요오드화 반응(Iodination)을 통해 인돌-7-카바알데하이드(Indole-7-carbaldehyde)의 3번 위치에 요오드(Iodine)를 도입하는 단계;
    이어서 메틸기와 아미노아세탈기를 도입하는 단계;
    Cbz-Tyrosine-OtBu와 2-(1-알릴-4-벤질세미카르바지도)아세트산(2-(1-Allyl-4-benzylsemicarbazido)acetic acid)을 입체선택적으로 아마이드 반응을 수행하는 단계;
    포름산을 이용하여 고리화 반응을 수행하는 단계; 및
    상기 단계를 거쳐 제조된 화합물에서, 아릴 붕산(aryl boric acid) 유도체와 팔라듐 촉매를 이용한 스즈키 반응(Suzuki reaction)을 수행하는 단계
    를 포함하는, 청구항 1에 기재된 화합물의 제조 방법.
  14. 청구항 12 또는 13에 있어서, 상기 2-(1-알릴-4-벤질세미카르바지도)아세트산(2-(1-Allyl-4-benzylsemicarbazido)acetic acid)의 제조는 하기의 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법:
    에틸하이드라지노아세테이트(Ethylhydrazinoacetate) 용액에 TEA(Triehtylamine)를 투입하는 단계;
    상기 용액에 알릴 브로마이드(Allyl bromide)를 적가하는 단계; 및
    이후 상기 용액에 벤질이소시아네이트(Benzylisocyanate)를 적가하는 단계.
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