KR101766932B1 - 기억력의 특정 측면을 개선하기 위한 루테인 함유 조성물의 용도 - Google Patents

기억력의 특정 측면을 개선하기 위한 루테인 함유 조성물의 용도 Download PDF

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Abstract

본 발명은 a) 유효량의 루테인 또는 루테인과 제아잔틴의 조합; 및 b) 적합한 담체로 이루어진 조성물을 투여하고; 증진된 연상 기억력, 공간 기억력 또는 스트레스 하의 기억력을 관찰함을 포함하는, 건강한 개인의, 연상 기억력, 공간 기억력 및 스트레스 하의 기억력으로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 기억력의 측면을 증진시키는 방법에 관한 것이다.

Description

기억력의 특정 측면을 개선하기 위한 루테인 함유 조성물의 용도{USE OF LUTEIN CONTAINING COMPOSITIONS TO IMPROVE CERTAIN ASPECTS OF MEMORY}
본 발명은 몇몇 선택적인 기억 작용들, 예를 들어 연상 학습, 연상 기억력, 스트레스 하의 학습 및 기억력, 및 공간(장소) 학습을 개선하기 위한 신규의 루테인 및/또는 제아잔틴 함유 뉴트라슈티컬(nutraceutical) 조성물 또는 식품 조성물에 관한 것이다.
장년층 및 젊은이들 모두의 학습, 기억력 및 각성도를 개선하는데 사용될 수 있는 뉴트라슈티컬 조성물의 개발에 관심이 점점 더 증가하고 있다.
루테인은 인지 감퇴를 개선하는 능력을 갖는 것으로 개시되었다(예를 들어, 루테인이 산화방지제로서 작용하므로 당뇨병이 있는 마우스의 해마를 보호할 수 있음을 시사하는 US 2006/0205826(로메로 등(Romero et al)) 참조).
WO 2006/116755(터프츠 대학의 이사들(Trustees of Tufts College))는 만성 치료(4 개월) 후 루테인 흡수 및 뇌로의 운반에 대한 도코사헥사엔산(DHA)의 상승작용 효과를 보고한다. 상기 조합을 사용하여 인지 장애 또는 치매를 예방하거나 치료하고, 언어 유창성, 단어 목록, 및 MIR(현실 속 기억력) 방 시험에 의해 측정된 바와 같은 기억력 손실을 예방할 수 있다. 루테인의 단독 투여는 단지 언어 유창성 시험에서 현저한 개선을 생성시켰을 뿐이며; 수행된 다른 인지- 또는 기분 평가-시험 중 어느 것에서도 개선이 이루어지지 않았다.
잠재적인 인지 증진제인 카로티노이드 또는 다른 천연 생성물들에 대한 대부분의 연구들은 적어도 이미 치매의 시초 단계(예를 들어 단기 기억 장애) 또는 말기 단계(예를 들어 알쯔하이머병)를 나타내는 사람들의 인지 감퇴의 예방을 수반한다. 건강한 집단에서의 기억력의 선택적인 측면을 증진시키는 루테인 또는 루테인과 제아잔틴의 조합의 능력에 대해서는 그다지 공지되어 있지 않다.
본 발명에 따라, 유일한 활성 성분으로서 또는 제아잔틴과의 조합으로서 투여된 루테인은 기억력의 선택된 측면, 예를 들어 연상 학습 및 기억력, 스트레스 하의 학습 및 기억력, 및 공간 학습 및 기억력을 증진시킬 수 있는 것으로 밝혀졌다.
따라서, 본 발명의 하나의 태양은,
a) 유효량의 루테인 또는 루테인과 제아잔틴의 조합; 및
b) 적합한 담체
로 이루어진 조성물을 투여하고;
증진된 연상 기억력, 공간 기억력 또는 스트레스 하의 기억력을 관찰함
을 포함하는, 건강한 개인의, 연상 기억력, 공간 기억력 및 스트레스 하의 기억력으로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 기억력의 측면을 증진시키는 방법이다.
본 발명의 또 다른 태양은,
a) 스트레스-관련된 학습- 및 기억력-증진 유효량의 루테인 또는 루테인과 제아잔틴의 조합; 및
b) 적합한 담체
로 이루어진 조성물을 투여하고;
스트레스 하의 증진된 학습 및 기억력을 관찰함
을 포함하는, 스트레스 하의 학습 및 기억력의 증진 방법이다.
본 발명의 또 다른 태양은,
a) 공간-관련된 학습- 및 기억력-증진 유효량의 루테인 또는 루테인과 제아잔틴의 조합; 및
b) 적합한 담체
로 이루어진 조성물을 투여하고;
증진된 공간 학습 및 기억력을 관찰함
을 포함하는, 공간 학습 및 기억력의 증진 방법이다.
본 발명의 또 다른 태양은, a) 연상 학습 및 기억력, b) 스트레스 하의 학습 및 기억력 또는 c) 공간 학습 및 기억력을 증진시키기 위한, 유일한 활성 화합물로서의 루테인 또는 루테인과 제아잔틴의 조합의 용도이다. 본 발명의 또 다른 태양은, a) 연상 학습 및 기억력, b) 스트레스 하의 학습 및 기억력 및/또는 c) 공간 학습 및 기억력을 증진시키는 뉴트라슈티컬 또는 기능성 식품을 제조하기 위한, 기억력 증진에 관하여 활성인 유일한 활성 화합물(들)로서의 루테인 또는 루테인과 제아잔틴의 조합의 용도이다.
본 발명의 또 다른 태양은, 연상 학습 또는 기억력, 스트레스 하의 학습 또는 기억력, 또는 공간 학습 또는 기억력을 증진시키기를 원하는 사람이 사용하기 위한 키트이다. 상기 키트는 루테인 또는 루테인과 제아잔틴의 조합의 투여형, 및 임의로 사용 설명서를 포함한다. 추가로 및 임의로, 다른 활성 성분들의 별도의 투여형들이 존재할 수도 있다.
도 1은 글루타메이트 신경 독성 범례에서의 루테인의 신경보호 효과를 예시하는 그래프이다.
도 2는 인텔리케이지(IntelliCage) 및 그의 기능적 특징부들의 도식적인 표현이다.
도 3은 장소 오류율(틀린 코너에 대한 방문 백분율)을 도시한다. 이 효과는 모듈의 출발부터 관찰되었으며 처음 12 시간(활동기) 전체를 통해 유지되었고, 이는 루테인에 의한 처리가 보다 높은 수준의 주의력 및 개선된 기억력 수행능력을 생성시킴을 입증하였다.
도 4는 편(side) 오류율(올바른 코너의 틀린 편에 대한 노즈포크(nosepoke)의 백분율)을 도시한다. 루테인은 비히클-처리된 대조군에 비해 현저하게 낮은 오류율 퍼센트를 유도하였다.
도 5는 루테인-처리된 마우스가 대조용 마우스보다, 스트레스가 많은 조건 하에서 물에 접근하는 올바른 장소를 발견하는 임무를 훨씬 더 양호하게 해결하였음을 도시한다.
도 6은 동물 사료에 루테인을 보충한 결과 마우스가 공간 실마리(cue)를 사용하여 물의 위치를 발견하기 위해 학습하고 기억하는 것이 현저하게 개선되었음을 도시한다.
정의
루테인은 식물 추출물 또는 올레오레진으로서, 임의의 섭취 가능한 형태의 루테인을 의미한다. 상기 루테인은 모든-E 및 Z 이성질체를 모두 포함한다. 바람직한 것은 약 98%의 루테인(모든-E 및 Z-이성질체) 및 약 2%의 다른 카로티노이드, 이 중에서도 약 0.5 내지 1.5% 제아잔틴을 함유하는 마리골드(Marigold) 추출물인 플로라GLO(FloraGLO)(등록상표) 루테인이다. 루테인을 다양한 오일(잇꽃, 옥수수) 중의 현탁액으로서 사용하거나, 고도로 생체 이용 가능한 비들렛(beadlet) 형태, 예를 들어 액틸레아제(Actilease)(등록상표) 플로라GLO(등록상표) 루테인으로 제형화할 수 있다.
제아잔틴은 제아잔틴, 및/또는 모든-E 및 Z-이성질체뿐만 아니라 SS', SR(메소-제아잔틴), 및 RR' 입체 이성질체를 포함한 그의 이성질체들을 의미한다. 제아잔틴을 다양한 오일(잇꽃, 옥수수) 중의 현탁액으로서 사용하거나, 고도로 생체 이용 가능한 비들렛 형태, 예를 들어 액틸레아제(등록상표) 제형화된 옵티샤프(Optisharp)(등록상표)로 제형화할 수 있다.
제아잔틴은 제아잔틴, 및/또는 통상적으로 사용되는 제아잔틴의 유도체, 예를 들어 메소-제아잔틴을 의미한다.
"연상 학습을 개선/증진시킴"은 훈련된 상황 하에서 신호, 기호의 의미, 규칙, 및 자극에 어떻게 반응하는지에 대한 학습이 개선됨을 의미한다.
"스트레스 하의 학습을 개선/증진시킴"은 피실험자가 스트레스가 많은 조건, 예를 들어 일상 생활/작업 스트레스의 일부로서 경험하는 것과 같은 조건 하에서 새로운 임무가 발생할 때 새로운 기술 또는 새로운 정보의 학습에 있어서 개선을 경험하게 될 것임을 의미한다.
"스트레스 하의 기억력을 개선/증진시킴"은 스트레스가 많은 환경 또는 일상 생활을 경험하는 동안의 정보를 회상하는 피실험자의 능력이 개선됨을 의미한다. 일례로 시험 상황에서 답을 상기하는 것이 있을 수 있다.
"공간 학습 또는 기억력을 개선/증진시킴"은 주변 환경의 다른 부분들에 비해 사물이 있는 곳을 학습하는 피실험자의 능력이 향상됨을 의미한다. 예를 들어, 쇼핑 센터 주변의 길을 더 쉽게 학습할 수 있다. 또 다른 예는 자동차를 주차했거나 열쇠를 둔 곳을 더 잘 기억해내는 것일 수 있다.
"유일한 학습-증진 화합물"은 인지에 도움이 되는 다른 성분들이 조성물 중에 포함되지 않음을 의미한다. 특별히 제외되는 성분들의 예로는 은행나무(추출물 또는 개별적인 활성 성분), 아세틸-L-카르니틴, 비타민 B, C 및 E, 시티콜린, 조효소-Q10(CoQ10), 인삼, 후퍼진 A, 오메가-3 지방산, 예를 들어 도코사헥사엔산(DHA)/에이코사펜타엔산(EPA), 포스파티딜세린, 소나무 껍질 추출물(피크노제놀), 또는 바코파 모니에리(Bacopa monieri) 식물 추출물이 있다.
증진된 인지 측면의 "관찰"은 관찰자가, 피실험자가 개선이 되었는지를 적거나, 피실험자들 자신이 그들이 개선되었는지를 적음을 의미한다. 이러한 개선은 표준화된 측정을 사용하여 정량화할 수도 있지만, 이는 필요하지 않을 수도 있으며, 주관적인 느낌이나 경험만을 근거로 할 수 있다.
"치료"는 또한 예방뿐만 아니라 병용-치료를 포함한다. "예방"은 차후 증상의 완전한 부재로 제한되는 것이 아니라, 하기를 포함함을 의미한다: 개인 또는 집단이 증상을 나타낼 위험의 감소, 특정 병과 관련된 증상의 감소, 특정 병의 발병 시간의 감소, 병의 중증도의 감소, 및 자각증상이 없는 개인이 차후에 병을 나타낼 가능성의 감소.
이러한 개선을 성취하기 위해서, 수일(예를 들어 6일 또는 10일 이상)에 걸친 투여가 권장되며, 수주 간 매일 투여가 일반적으로 바람직하다.
바람직한 실시태양에서, 루테인 또는 루테인 + 제아잔틴을 건강한 피실험자가 섭취한다. "건강한"은 상기 피실험자가 그의 정신 건강을 해치는 어떠한 병도 앓고 있지 않음, 즉 치매, 알쯔하이머 병 등과 같은 기억력 저하, 우울증, 또는 정신분열증과 같이 기억력 및 학습에 영향을 미치는 다른 정신병을 특징으로 하는 병을 앓고 있지 않음을 의미한다.
따라서, 본 발명의 또 다른 태양은 연상 기억력을 개선하기 위한 루테인 또는 루테인과 제아잔틴의 용도일 수 있다.
본 발명의 또 다른 태양은 피실험자가 스트레스 하에 있는 동안 기억력을 개선하기 위한 루테인 또는 루테인과 제아잔틴의 용도일 수 있다. 개선된 스트레스 하의 기억력을 갖는 피실험자들은 하기 중 하나 이상이 관찰될 것이다:
·작업 시 할당된 임무(여러 가지 임무를 수행중인 경우)를 수행하는 것을 잊지 않는다
·대중 연설 동안의 사실 등을 기억한다
·검사 조건 또는 즉시 회상이 요구되는 조건 하에서 보다 양호한 수행능력.
본 발명의 또 다른 태양은 공간 기억력을 개선하기 위한 루테인 또는 루테인과 제아잔틴의 용도일 수 있다. 개선된 공간 기억력을 갖는 피실험자들은 하기 중 하나 이상이 관찰될 것이다:
·열쇠, 안경, 휴대폰 또는 TV 리모컨과 같은 품목들을 덜 "잘못 놓는다"
·예를 들어 집에서, 운전하는 동안 또는 단순히 큰 주차장에서 자동차를 주차한 곳을 기억하는 동안 주변 환경에서 자신을 쉽게 바른 방향을 향하게 하는 능력.
인간을 위한 용도와 별도로, 본 발명의 조성물은 수의학 세계에 추가의 용도를 갖는다. 동물들이 이익이 되는 상황은 특히 특정 목적, 예를 들어 사냥개, 안내견, 경찰견 등, 또는 영화 산업에 사용되는 동물들에 대한 훈련 과정 및 교육이다. 인지 기능의 증진이 유익할 수 있는 동물은 스트레스가 심한 상황이 가해지는 동물들을 포함한다. 상기와 같은 상황은 예를 들어 생포 또는 운송 후 발생하거나, 사육 상황(예를 들어 거주지 또는 주인의 변화)에 기인하거나, 상기 동물들이 유사한 질환을 나타내고 쇠약해지거나 공격성이 되거나, 상투적인 행동, 또는 불안증 및 강박 행동을 나타내는 경우일 수 있다. 스트레스 받기 쉬운 동물들은 또한 경주 동물(예를 들어 개, 말, 낙타)이거나 다양한 스포츠에 사용되거나, 공연을 요하는 동물(예를 들어 서커스 동물 및 무대, 텔레비전 또는 영화에 출현하는 동물) 및 마장마술 및 다른 대단히 훈련이 고된 일상의 과정을 수행하는 말을 포함한다.
바람직한 "동물"은 애완 동물 또는 반려 동물 및 가축이다. 애완 동물의 예는 개, 고양이, 조류, 수족관 물고기, 기니 피그, (잭) 래빗, 산토끼 및 흰 족제비이다. 가축의 예는 물고기 양식 어류, 돼지, 말, 반추동물(소, 양 및 염소) 및 가금류이다.
뉴트라슈티컬 용도/제형/투여량
본 발명에 사용된 바와 같은 "뉴트라슈티컬"이란 용어는 영양 및 약학 적용 분야 모두에서 유용성을 나타낸다. 따라서, 신규의 뉴트라슈티컬 조성물을 식품/사료 및 음료에 대한 보충물로서, 및 고체 제형, 예를 들어 캡슐 또는 정제, 또는 액체 제형, 예를 들어 용액 또는 현탁액일 수 있는 경구 또는 비 경구 용도를 위한 약학 제형으로서 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 뉴트라슈티컬 조성물은 보호용 하이드로콜로이드(예를 들어 검, 단백질, 개질된 전분), 결합제, 필름 형성제, 캡슐화제/물질, 벽/외피 물질, 기질 화합물, 코팅제, 유화제, 표면 활성제, 용해제(오일, 지방, 왁스, 레시틴 등), 흡착제, 담체, 충전제, 보조 화합물, 분산제, 습윤제, 가공 보조제(용매), 유동화제, 맛-가림제, 증량제, 젤리화제, 젤-형성제, 산화방지제 및 항균제를 추가로 함유할 수 있다.
더욱이, 멀티-비타민 및 미네랄 보충제를 본 발명의 뉴트라슈티컬 조성물에 첨가하여 적합한 양의 필수 영양소(일부 식이요법에서 누락된다)를 획득할 수도 있다. 상기 멀티-비타민 및 미네랄 보충제는 또한 질병 예방, 및 생활양식 패턴으로 인한 영양 손실 및 결핍에 대한 보호에 유용할 수 있다.
본 발명에 따른 뉴트라슈티컬 조성물은 신체에 투여하기에 적합한 통상적인 담체 물질을 함유하는 임의의 생약 형태, 특히 경구 투여에 통상적인 임의의 형태, 예를 들어 고체 형태, 예를 들어 식품 또는 사료(용 첨가제/보충제), 식품 또는 사료 예비 배합물, 강화 식품 또는 사료, 정제, 환제, 과립, 당의정, 캡슐 및 발포 제형, 예를 들어 분말 및 정제, 또는 액체 형태, 예를 들어 음료수, 페이스트 및 유질 현탁액과 같은 용액, 유화액 또는 현탁액으로 존재할 수 있다. 상기 페이스트를 경질- 또는 연질-외피 캡슐에 혼입할 수 있으며, 이때 상기 캡슐은 예를 들어 (생선, 돼지, 가금류, 소) 젤라틴, 식물 단백질 또는 리그닌설포네이트의 기질을 특징으로 한다. 다른 적용 형태의 예는 경피, 비 경구 또는 주사 투여를 위한 것들이다. 상기 식이성 및 약학 조성물은 조절된(지연된) 방출 제형의 형태로 존재할 수도 있다.
식품의 예는 유제품, 예를 들어 마가린, 스프레드, 버터, 치즈, 요구르트 또는 우유-음료이다.
강화 식품의 예는 빵, 시리얼 바, 제과 제빵류, 예를 들어 케이크 및 쿠키, 및 감자 칩 또는 크리스프(crisp)이다.
애완동물 사료의 예는 습식 통조림 사료, 트리트(treat) 및 펠릿이다.
음료는 무알콜 및 알콜 음료뿐만 아니라 음료수 및 액체 식품에 첨가되는 액체 제제를 포함한다. 무알콜 음료는 예를 들어 청량 음료, 스포츠용 음료, 과일 주스, 레모네이드, 차 및 우유 함유 음료이다. 액체 식품은 예를 들어 스프 및 유제품이다. 루테인 또는 루테인 + 제아잔틴을 함유하는 뉴트라슈티컬 조성물을, 성인이 하루에 2 ㎎/㎏ 체중까지 소비하도록 청량 음료, 에너지 바, 또는 사탕에 첨가할 수도 있다.
상기 뉴트라슈티컬 조성물이 약학 제형인 경우, 상기 조성물은 약학적으로 허용 가능한 부형제, 희석제 또는 보조제를 추가로 함유한다. 표준 기법, 예를 들어 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 20th edition Williams & Wilkins, PA, USA]에 개시된 기법을 상기 조성물의 제형화에 사용할 수도 있다. 경구 투여를 위해서, 바람직하게는 적합한 결합제, 예를 들어 젤라틴 또는 폴리비닐 피롤리돈, 적합한 충전제, 예를 들어 락토오스 또는 전분, 적합한 윤활제, 예를 들어 마그네슘 스테아레이트, 및 임의로 추가의 첨가제들을 함유하는 정제 및 캡슐을 사용한다.
인간을 포함한 동물의 경우 본 발명의 목적을 위해서 루테인 또는 루테인 + 제아잔틴의 적합한 1일 투여량은 하루에 0.15 ㎎/㎏ 체중 내지 약 10 ㎎/㎏ 체중의 범위 이내일 수 있다.
하기의 비 제한적인 실시예들을 본 발명의 보다 양호한 예시를 위해 제공한다.
실시예 1
시험관 내 신경 독성의 모델에서의 루테인의 효과
글루타메이트는 중추 신경계의 주요한 흥분성 아미노산 중 하나이며 그 자체가 정상적인 생리기능에 중요한 역할을 한다. 글루타메이트 작용의 정상적인 조절 기전의 동요는 뇌에서 글루타메이트 수용체들의 과도한, 신경 독성 활성화에 이르게 할 수 있으며, 이는 정상 및 노화 중인 뇌에서 학습 및 기억 수행능력에 유해할 수도 있다. 뉴런의 1차 배양물을 사용하여, 이러한 상황을 글루타메이트 중독에 의해 재현할 수 있다. 배양된 뉴런에 대한 영향은 상기 뉴런의 신경 미세섬유 세포 골격 네트워크의 형태적 변화에 의해 표시되었다.
단일 화합물 및 화합물들의 조합의 신경 보호 효과를, 성숙한 뉴런 신경돌기에 특이적인 항-신경 미세섬유 항체(중쇄 200 kD)에 의한 표지를 사용하여 네트워크 밀도를 분석함으로써 평가하였다.
릴루졸(Riluzole)(약물학적 신경보호제) 및 MK801을 신경돌기의 성장을 생성시키는 글루타메이트의 신경 독성 효과를 방해하는 억제 화합물로서 사용하였다. 억제성 MK801(NMDA-유형 글루타메이트 수용체의 완전한 봉쇄)은 강력하였으며 중독 후 100% 회복을 이끌어 내었다.
루테인의 신경보호 작용을 하기 나타낸 스케줄을 사용하여 시험하였다:
Figure 112012045222798-pct00001
5일째에, 배양 배지를 대조용 배양 배지 또는 생리학적 범위 내의 루테인(3개 농도)(농도당 n = 6)을 함유하는 배지로 대체하였다. 상기 배지의 절반을 매 2 내지 3일마다 교환하였다. 12일째에, 세포를 6 시간 동안 250 μM의 글루타메이트로 중독시켰다.
대조용 배양물(임의의 추가적인 화합물 부재 하의 글루타메이트 중독)의 신경돌기 길이를 100%로서 설정하였다. 이들 실험은 루테인 전처리(모든 농도 사용, p<0.05 및 <0.01)가 뉴런을 흥분 독성 글루타메이트 신경-독성으로부터 현저하게 보호함을 입증하였다(도 1 참조).
실시예 2
학습 및 기억력에 대한 새로운, 완전히 자동화된 설치류 모델에서의 루테인 및/또는 제아잔틴의 효과
루테인 및/또는 제아잔틴으로 처리된 마우스의 인지 수행능력을 인텔리케이지(등록상표)(자기 우리와 같은 환경에서 마우스의 자발적인 행동 및 학습 행동의 자동화된 모니터링을 가능하게 하는 시스템이다)(스위스 취리히 소재의 뉴비해비어 아게(NewBehavior AG), www.newbehavior.com; 문헌[Galsworthy et al. 2005, Behav Brain Res 157: 211-217]; 문헌[Onishchenko et al. 2007, Toxicol Sci 97: 428-437]; 문헌[Mechan et al., 2009, J. Neurosci. Methods, 180:43-51])에서 비히클-처리되고, 연령-합치된 대조군의 경우와 비교하였다. 개별적인 마우스를 상기 마우스의 목덜미에 이식된 전파중계기(transponder)(기준 식별 태그)를 판독하는 상기 인텔리케이지 코너 내의 센서에 의해 인지한다.
각각의 인텔리케이지(등록상표)는 4 개의 기록(작동) 챔버를 포함하는 필수적으로 큰 우리(37.5 x 55 x 20.5 ㎝)이며, 이 안에 금속 프레임이 놓여 있다. 상기 기록 챔버들은 상기 우리의 각 코너에 들어맞으며, 각각의 챔버는 바닥 면적의 15 x 15 x 21 ㎝ 직각 삼각형 영역을 덮고 있다. 우리 안의 안테나는 각각의 개별적인 마우스의 코너 방문의 자동 모니터링을 가능하게 하며; 각 코너 내의 광전자 광선은 개별적인 노즈포크 및 물병 주둥이 핥기의 자동 기록을 가능하게 한다. 4 개의 삼각형 마우스 쉘터가 상기 우리의 중앙에 놓여 있으며, 그 위에 사료 호퍼가 위치하고 있어, 사료에 대한 자유로운 접근을 가능하게 한다.
각각의 기록 챔버는 (1) 상기 챔버 내로의 입구로서 작용하고 코너 방문을 기록하는 환상 안테나를 수용하는 플라스틱 고리(내부 직경 30 ㎜); (2) 마우스가 일단 상기 챔버에 들어가면 앉는 격자 바닥; (3) 물병 주둥이에의 접근을 가능하게 하는 2 개의 환상 구멍(직경 13 ㎜); 각각의 구멍은 노즈포크를 기록하는 광전자 광선에 의해 교차되어 있다; (4) 상기 물병 주둥이에의 접근을 허용하거나(문 개방) 금지하는(문 폐쇄) 2 개의 동력화된 문; (5) 2 개의 물병; (6) 에어-퍼프가 혐오 자극으로서 전달될 수 있는 튜빙; (7) 실험 조절에 사용될 수 있는, 상이한 착색 광 다이오드를 포함한다(문헌[Mechan et al., 2009 J Neurosci Methods 180:43-51]). 도 2를 참조하시오.
실험 단계:
연구는 2 개의 시험 그룹(n = 12 내지 14/그룹)을 포함하였다: 비히클(대조군), 루테인(9 ㎎/㎏ BW). (플로라GLO(등록상표) 루테인, 약 98% 루테인(모든-E 및 Z-이성질체) 및 약 2%의 다른 카오테노이드, 이 중에서도 약 1 내지 1.5% 제아잔틴을 함유하는 마리골드 추출물).
루테인을 통상적인 동물 사료에 포함시켰다. 모든 마우스에게 상기 인텔리케이지 연구 12일 전 및 4 주 연구 전체를 통해 사료 중에 시험 물질 또는 위약(50 ㎎/㎏ 사료)을 투여하였다.
초기 적응 기간(9일) 동안 마우스는 모든 코너, 물 및 사료에 자유롭게 접근하였고 우리를 자유로이 탐험할 수 있었다. 후속적으로, 마우스는 노즈포크를 적용하도록 학습해야 했으며(노즈포크 적응 모듈, 2일); 모든 문을 처음에는 닫았고(물로의 접근이 금지되었다) 마우스는 문을 열어 물병 주둥이에 도달하기 위해 노즈포크를 수행해야 했다. 수집된 데이터는 여러 가지 매개변수들, 예를 들어 각각의 개별적인 마우스의 가장 좋아하지 않는 코너를 포함하였으며, 이는 다음 모듈의 프로그래밍을 위해 기록되었다.
노즈포크 적응 후에, 하기의 임무들을 수행하였다:
- 편(side) 식별 범례: 연상 학습과 기억력 및 기억력과 주의력의 시험
- 연상 기억력 범례: 부정적인 강화(스트레스)를 갖는 연상 학습 및 기억력의 시험
- 장소 학습 범례: 공간 학습 및 기억력 및 배향의 시험
편 식별 범례:
본 모듈은 주의력과 연상 기억력을 시험하기 위해 디자인되었다. 하나의 올바른 코너를 각각의 마우스에게 할당하였다. 이 코너에서 오직 한 편(둘 중)만이 올바른 것으로서 지정되었고 녹색 LED에 의해 동물들에게 암시되었다. 상기 올바른 편에서 동물들은 노즈포크를 할 수 있었으며 후속적으로 물병으로부터 물을 마실 수 있었다. 이 모듈 중에 장소 오류(즉 틀린 코너에 대한 방문 백분율) 및 편 오류(즉 올바른 코너의 틀린 편에서 노즈포크의 백분율)를 기록하였다.
이들 데이터는 상기 장소 오류율(도 3) 및 편 오류율(도 4) 모두가 상기 시험의 활동기 동안 비히클-그룹의 경우보다 현저하게 더 낮았기 때문에 만성적인 루테인 처리에 따른 개선된 주의력을 가리킨다.
요약하면, 상기 자동화된 인텔리케이지(등록상표) 연구로부터의 결과는 루테인으로 처리한 결과, 비히클-처리된 한배 새끼에 비해, 마우스의 학습과 기억력의 현저한 개선이 이루어져, 물에 접근하기 위해 단기간(2초) 동안 발광 신호의 존재를 올바른 코너 및 상기 코너의 올바른 편과 연상시킴을 입증한다.
연상 기억력 범례
본 모듈에서, 올바른 코너가 각각의 마우스에게 할당되었고 3초 간의 발광 표시에 의해 암시되었다. 따라서, 상기 올바른 코너에서의 노즈포크는 문을 열었고 마우스는 상기 특정 코너 내에서 물에 접근한 반면, 임의의 틀린 코너에 대한 각각의 방문은 공기 퍼프 벌(스트레스)이 주어졌다. 결과를 도 5에 나타내었으며, 이는 루테인에 의해 처리된 마우스가 비히클-처리된 한배 새끼에 비해 물을 받는(및 결과적으로 벌을 피하는) 장소를 학습하고 기억하는 것을 현저하게 더 잘 수행하였음을 가리킨다.
장소 학습 범례
본 학습 임무에서 마우스는 물에 접근하기 위해 올바른 코너에 들어가서 상기 코너의 어느 한 편에서 노즈포크를 수행해야 했다. 코너를 선행 노즈포크 적응 모듈 중에 상기 동물의 방문 행동에 따라 지정하였으며, 적용 가능한 경우 가장 좋아하지 않는 코너를 각 마우스에게 올바른 코너로서 지정하였다. 추가적인 신호(예를 들어 빛)는 제공하지 않았으며, 따라서 상기 마우스를 그의 주변 및/또는 우리 중의 공간적 실마리를 근거로 물에 접근하도록 상기 코너의 위치를 기억하기 위한 학습을 시도하게 하였다. 도 6은 상기 시험의 결과를 요약하며, 이는 루테인-처리된 마우스가 그의 위약-공급된 한배 새끼보다 현저하게 더 잘 수행함을 입증한다.
요약하면, 상기 자동화된 인텔리케이지(등록상표) 연구의 결과는 수주 간 루테인으로 처리한 결과 비히클-처리된 한배 새끼에 비해 마우스의 다양한 유형의 학습 및 기억력이 현저하게 개선됨을 입증한다.
두 번째 실험 세트에서, 다양한 용량의 루테인(8 ㎎/㎏/d, 16 ㎎/㎏/d 및 30 ㎎/㎏/d) 또는 루테인과 제아잔틴의 조합(각각 15 및 16 ㎎/㎏/d)을 상술한 학습 및 기억력 범례에서 시험하였다. 중간 루테인 용량을 보충한 동물들은 대조군에 비해 연상 기억력 임무에서, 장소 오류 및 편 오류 모두에 대해 현저한 수행능력 개선을 나타내었다. 더욱이, 루테인과 제아잔틴을 공급한 동물들은 편 오류에 대해 우수한 수행능력을 가졌다.
이들 실험을 처음 실험 세트보다 2 내지 3 개월 더 어린 동물에서 실행하였으며 이는 유리한 루테인 효과가 사용된 연령 및 인지 범례에 따라 다양할 수 있음을 암시한다.
실시예 3
연질 젤라틴 캡슐의 제조
하기 성분들을 포함하는 연질 젤라틴 캡슐을 제조할 수 있다:
Figure 112012045222798-pct00002
3 개월 동안 하루에 2 개의 캡슐을 성인 인간에게 투여할 수도 있다.
실시예 4
인스턴트 착향 청량 음료의 제조
Figure 112012045222798-pct00003
모든 성분들을 혼합하고 500 ㎛ 체를 통해 체질한다. 생성 분말을 적합한 용기에 넣고 20 분 이상 관상 혼합기에서 혼합한다. 상기 음료를 제조하기 위해서, 상기 수득된 혼합된 분말 840 g을 1 리터의 음료를 제조하기에 충분한 물과 혼합한다.
상기 바로 마실 수 있는 청량 음료는 1 회분당 약 12 ㎎(250 ㎖)의 루테인을 함유한다. 강화제로서 및 일반적인 건강을 위해서 하루에 1 회분(250 ㎖)을 마실 수 있다. 스트레스 하의 기억력이 개선되는 것으로 보인다.
실시예 5
강화된 굽지 않는( non - baked ) 시리얼 바의 제조
Figure 112015103405249-pct00011
상기 루테인 및 제아잔틴을 탈지 분유와 예비 혼합하고 유성형 볼 믹서에 넣는다. 콘플레이크와 쌀 크리스프를 첨가하고 전체를 부드럽게 혼합한다. 이어서 상기 말린 절단 사과를 첨가한다. 하나의 조리 용기에서, 물과 소금을 상기 제공된 양으로 혼합한다(용액 1). 두 번째 조리 용기에서, 글루코스-, 전화당- 및 솔비톨-시럽들을 상기 제공된 양으로 혼합한다(용액 2). 지방 상은 베이킹 지방, 팜 속 지방, 레시틴 및 유화제의 혼합물을 구성한다. 용액 1을 110 ℃로 가열한다. 용액 2를 113 ℃로 가열하고 이어서 저온 수욕에서 냉각시킨다. 후속적으로, 용액 1 및 2를 합한다. 상기 지방 상을 수욕 중에서 75 ℃에서 용융시키고, 상기 용액 1 및 2를 합한 혼합물에 첨가한다. 사과향과 시트르산을 상기 액체 당/지방 혼합물에 첨가한다. 상기 액체 덩어리를 상기 건조 성분들에 첨가하고 상기 유성형 볼 믹서에서 잘 혼합한다. 상기 덩어리를 대리석 판 위에 놓고 목적하는 두께로 만다. 상기 덩어리를 실온으로 냉각시키고 조각으로 절단한다. 상기 굽지 않는 시리얼 바는 1 회분(20 g) 당 약 10 ㎎의 루테인 및 2 ㎎의 제아잔틴을 함유한다.
실시예 6
루테인을 함유하는 건식 개 사료
상업적인 개용 기초 사료(예를 들어 메라 도그 "브로큰"(Mera Dog "Brocken"), 독일 데-47625 케벨라에르-베텐 마리엔스트라쎄 80-84 소재의 메라-티에르나룽 게엠베하(MERA-Tiernahrung GmbH))를, 산화방지제, 예를 들어 비타민 C(예를 들어 ROVIMIX(등록상표) C-EC, 스위스 카이저아우그스트 소재의 디에스엠 뉴트리셔널 프로덕츠 리미티드(DSM Nutritional Products Ltd) 제품) 또는 그의 유도체, 즉 나트륨 아스코빌 모노포스페이트(예를 들어 STAY-C(등록상표) 50, 스위스 카이저아우그스트 소재의 디에스엠 뉴트리셔널 프로덕츠 리미티드 제품) 또는 나트륨/칼슘 L-아스코르베이트의 트라이-, 다이- 및 모노-포스페이트 에스터의 혼합물(예를 들어 ROVIMIX(등록상표) STAY-C(등록상표) 35, 스위스 카이저아우그스트 소재의 디에스엠 뉴트리셔널 프로덕츠 리미티드 제품)과 함께 루테인의 용액, 루테인, 예를 들어 플로라GLO(등록상표) 루테인 5% 옥수수 오일로 사료 1 ㎏ 당 약 5 ㎎ 루테인을 투여하기에 충분한 양으로 분무한다. 보다 무거운 개의 경우, 상기 사료 예비 배합물을 상응하게 제조한다.
실시예 7
루테인을 함유하는 습식 고양이 사료
상업적인 고양이용 기초 사료(예를 들어 해피 캣 "어덜트"(Happy Cat "Adult"), 독일 데-86517 베링겐 쉬들리케 하우프트스트라쎄 38 소재의 티에르파인나룽(Tierfeinnahrung))를, 산화방지제, 예를 들어 비타민 C(예를 들어 ROVIMIX(등록상표) C-EC, 스위스 카이저아우그스트 소재의 디에스엠 뉴트리셔널 프로덕츠 리미티드 제품) 또는 그의 유도체, 즉 나트륨 아스코빌 모노포스페이트(예를 들어 STAY-C(등록상표) 50, 스위스 카이저아우그스트 소재의 디에스엠 뉴트리셔널 프로덕츠 리미티드 제품) 또는 나트륨/칼슘 L-아스코르베이트의 트라이-, 다이- 및 모노-포스페이트 에스터의 혼합물(예를 들어 ROVIMIX(등록상표) STAY-C(등록상표) 35, 스위스 카이저아우그스트 소재의 디에스엠 뉴트리셔널 프로덕츠 리미티드 제품)과 함께 루테인의 용액, 예를 들어 플로라GLO(등록상표) 루테인 5% 옥수수 오일과 사료 1 ㎏ 당 3 ㎎ 루테인의 1일 용량을 고양이에게 투여하기에 충분한 양으로 혼합한다. 상기 사료 조성물을 약 90 중량%의 건조 물질을 함유하도록 건조시킨다.

Claims (6)

  1. 삭제
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 루테인과 제아잔틴의 조합을 유일한 활성 화합물로서 포함하되, 은행나무의 추출물, 아세틸-L-카르니틴, 비타민 B, C 및 E, 시티콜린, 조효소-Q10(CoQ10), 인삼, 후퍼진 A, 도코사헥사엔산(DHA), 에이코사펜타엔산(EPA), 오메가-3 지방산, 포스파티딜세린, 소나무 껍질 추출물(피크노제놀) 및 바코파 모니에리(Bacopa monieri) 식물 추출물을 제외하는, a) 연상 학습 및 기억력, b) 스트레스 하의 학습 및 기억력 또는 c) 공간 학습 및 기억력을 증진시키기 위한 약학 조성물.
  5. 루테인과 제아잔틴의 조합을 기억력에 영향을 미치는 유일한 활성 화합물로서 포함하되, 은행나무의 추출물, 아세틸-L-카르니틴, 비타민 B, C 및 E, 시티콜린, 조효소-Q10(CoQ10), 인삼, 후퍼진 A, 도코사헥사엔산(DHA), 에이코사펜타엔산(EPA), 오메가-3 지방산, 포스파티딜세린, 소나무 껍질 추출물(피크노제놀) 및 바코파 모니에리(Bacopa monieri) 식물 추출물을 제외하는, a) 연상 학습 및 기억력, b) 스트레스 하의 학습 및 기억력 또는 c) 공간 학습 및 기억력을 증진시키기 위한 기능성 식품.
  6. 루테인과 제아잔틴의 조합을 기억력에 영향을 미치는 유일한 활성 화합물로서 포함하되, 은행나무의 추출물, 아세틸-L-카르니틴, 비타민 B, C 및 E, 시티콜린, 조효소-Q10(CoQ10), 인삼, 후퍼진 A, 도코사헥사엔산(DHA), 에이코사펜타엔산(EPA), 오메가-3 지방산, 포스파티딜세린, 소나무 껍질 추출물(피크노제놀) 및 바코파 모니에리(Bacopa monieri) 식물 추출물을 제외하는, a) 연상 학습 및 기억력, b) 스트레스 하의 학습 및 기억력 또는 c) 공간 학습 및 기억력을 증진시키기 위한 뉴트라슈티컬(nutraceutical) 조성물.
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