JPH07224029A - 抗酸化活性をもつカロチノイド含有エキス、その製造法及び抗酸化剤 - Google Patents
抗酸化活性をもつカロチノイド含有エキス、その製造法及び抗酸化剤Info
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- JPH07224029A JPH07224029A JP6037660A JP3766094A JPH07224029A JP H07224029 A JPH07224029 A JP H07224029A JP 6037660 A JP6037660 A JP 6037660A JP 3766094 A JP3766094 A JP 3766094A JP H07224029 A JPH07224029 A JP H07224029A
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 食品、医薬品、化粧品に好適な安全性が高い
天然由来の優れた抗酸化活性をもつ新規抗酸化剤を提供
する。 【構成】 クラミドモナス属に属する抗酸化活性をもつ
カロチノイドを生産する原生動物（具体例 クラミドモ
ナス ラインハルデイ Chlamydomonas reinhardtii ：
ＡＴＣＣ １８７９８）から優れた抗酸化活性をもつカ
ロチノイド含有エキス、α−カロチン、ルテイン及びネ
オキサンチンを得る
天然由来の優れた抗酸化活性をもつ新規抗酸化剤を提供
する。 【構成】 クラミドモナス属に属する抗酸化活性をもつ
カロチノイドを生産する原生動物（具体例 クラミドモ
ナス ラインハルデイ Chlamydomonas reinhardtii ：
ＡＴＣＣ １８７９８）から優れた抗酸化活性をもつカ
ロチノイド含有エキス、α−カロチン、ルテイン及びネ
オキサンチンを得る
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、クラミドモナス属に属
する原生動物（以下、「原虫」という。）から得られる
優れた抗酸化活性をもつカロチノイド含有エキス、該カ
ロチノイド含有エキスより抽出されるα−カロチン、ル
テイン及びネオキサンチン並びにそれらの製造法に関す
る。本発明に係る坑酸化活性をもつカロチノイド含有エ
キス、α−カロチン、ルテイン及びネオキサンチンは、
その優れた（強い）抗酸化作用を有することから抗酸化
剤として用いることができる。従って、本発明は、食
品、医薬品、化粧品等の各分野に広く利用できるもので
ある。
する原生動物（以下、「原虫」という。）から得られる
優れた抗酸化活性をもつカロチノイド含有エキス、該カ
ロチノイド含有エキスより抽出されるα−カロチン、ル
テイン及びネオキサンチン並びにそれらの製造法に関す
る。本発明に係る坑酸化活性をもつカロチノイド含有エ
キス、α−カロチン、ルテイン及びネオキサンチンは、
その優れた（強い）抗酸化作用を有することから抗酸化
剤として用いることができる。従って、本発明は、食
品、医薬品、化粧品等の各分野に広く利用できるもので
ある。
【０００２】
【従来の技術】周知の通り、食品、医薬品、化粧品等に
用いられている抗酸化剤には、ブチルヒドロキシアニソ
ール（ＢＨＡ）やブチルヒドロキシルトルエン（ＢＨ
Ｔ）に代表される合成系の抗酸化剤と、アスコルビン酸
やトコフェロールに代表される天然由来の抗酸化剤とが
ある。しかし、前者においては、その安全性に問題があ
ることから、上記合成系の抗酸化剤を成分とする各種製
品に対する消費者の拒否反応が強くなりつつあり、その
使用量も減少傾向にある。その結果、安全性が高い後者
への需要が増加しているのが現状である。
用いられている抗酸化剤には、ブチルヒドロキシアニソ
ール（ＢＨＡ）やブチルヒドロキシルトルエン（ＢＨ
Ｔ）に代表される合成系の抗酸化剤と、アスコルビン酸
やトコフェロールに代表される天然由来の抗酸化剤とが
ある。しかし、前者においては、その安全性に問題があ
ることから、上記合成系の抗酸化剤を成分とする各種製
品に対する消費者の拒否反応が強くなりつつあり、その
使用量も減少傾向にある。その結果、安全性が高い後者
への需要が増加しているのが現状である。
【０００３】しかも、近年、活性酸素によって生体内に
生成される過酸化物が、組織細胞の劣化、炎症、発ガン
等の原因となっていることから、生体内における抗酸化
的な防御機能を支援する物質として、安全性が高い天然
由来の抗酸化剤が注目されている。
生成される過酸化物が、組織細胞の劣化、炎症、発ガン
等の原因となっていることから、生体内における抗酸化
的な防御機能を支援する物質として、安全性が高い天然
由来の抗酸化剤が注目されている。
【０００４】一方、従来より、クラミドモナス属に属す
る原虫を用いて有用物質を得る様々な技術が提案されて
いる。例えば、特開平3-183498号公報にはクラミドモナ
ス属に属する各原虫からβ−カロチンを得る技術が開示
されており、また、Biochimica et Biophysica Acta.Vo
l.1075 36-41 : 1991 : Fumio Watanabe,Yoshihisa Na
kano,Yoshiyuki Tamura and Hiroyuki Yamanaka にはク
ラミドモナス属に属する原虫からビタミンＢ12を得る技
術が開示されており、さらに、Biochemical Journal V
ol.275 623-627 : 1991 : Shigeru shigeoka,Toru Tak
eda and Tuyoshi Hanaoka にはクラミドモナス ライン
ハルデイ（Chlamydomonas reinhardtii ：ＡＴＣＣ １
８７９８）をセレン含有培地で培養することにより、グ
ルタチオン ペルオキシダーゼを得る技術が開示されて
いる。
る原虫を用いて有用物質を得る様々な技術が提案されて
いる。例えば、特開平3-183498号公報にはクラミドモナ
ス属に属する各原虫からβ−カロチンを得る技術が開示
されており、また、Biochimica et Biophysica Acta.Vo
l.1075 36-41 : 1991 : Fumio Watanabe,Yoshihisa Na
kano,Yoshiyuki Tamura and Hiroyuki Yamanaka にはク
ラミドモナス属に属する原虫からビタミンＢ12を得る技
術が開示されており、さらに、Biochemical Journal V
ol.275 623-627 : 1991 : Shigeru shigeoka,Toru Tak
eda and Tuyoshi Hanaoka にはクラミドモナス ライン
ハルデイ（Chlamydomonas reinhardtii ：ＡＴＣＣ １
８７９８）をセレン含有培地で培養することにより、グ
ルタチオン ペルオキシダーゼを得る技術が開示されて
いる。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】前記の通り、食品、医
薬品、化粧品等の各分野においては、安全性が高い天然
由来の抗酸化剤に対する需要が増加しているが、現在、
実用されている天然由来の抗酸化剤の種類は非常に限ら
れており、その使用に当たっても多岐に渡る処方が組み
難いという問題点がある。
薬品、化粧品等の各分野においては、安全性が高い天然
由来の抗酸化剤に対する需要が増加しているが、現在、
実用されている天然由来の抗酸化剤の種類は非常に限ら
れており、その使用に当たっても多岐に渡る処方が組み
難いという問題点がある。
【０００６】本発明は、上記問題点に鑑み、安全性が高
い天然由来の新規抗酸化剤を大量且つ安定して供給でき
る技術手段の提供を技術的課題とする。本発明者等は、
上記課題を達成するために、数多くの微生物を対象とし
て系統的な研究・実験を重ねた結果、クラミドモナス属
に属する原虫が優れた抗酸化活性をもつカロチノイドを
産成するという刮目すべき新知見を得、本発明を完成し
たものである。
い天然由来の新規抗酸化剤を大量且つ安定して供給でき
る技術手段の提供を技術的課題とする。本発明者等は、
上記課題を達成するために、数多くの微生物を対象とし
て系統的な研究・実験を重ねた結果、クラミドモナス属
に属する原虫が優れた抗酸化活性をもつカロチノイドを
産成するという刮目すべき新知見を得、本発明を完成し
たものである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】前記技術的課題は、次の
通りの本発明によって達成できる。
通りの本発明によって達成できる。
【０００８】即ち、本発明に係る優れた抗酸化活性をも
つカロチノイド含有エキスは、クラミドモナス属に属す
る抗酸化活性をもつカロチノイドを生産する原虫から有
機溶媒を用いて抽出してなるものである。また、本発明
に係るα−カロチン、ルテイン又はネオキサンチンは、
クラミドモナス属に属する抗酸化活性をもつカロチノイ
ドを生産する原虫から有機溶媒を用いて抽出した優れた
抗酸化活性をもつカロチノイド含有エキスを抽出源とし
て有機溶媒を用いて抽出してなるものである。また、本
発明に係る抗酸化剤は、上記α−カロチン、ルテイン又
はネオキサンチンを有効成分とするものである。
つカロチノイド含有エキスは、クラミドモナス属に属す
る抗酸化活性をもつカロチノイドを生産する原虫から有
機溶媒を用いて抽出してなるものである。また、本発明
に係るα−カロチン、ルテイン又はネオキサンチンは、
クラミドモナス属に属する抗酸化活性をもつカロチノイ
ドを生産する原虫から有機溶媒を用いて抽出した優れた
抗酸化活性をもつカロチノイド含有エキスを抽出源とし
て有機溶媒を用いて抽出してなるものである。また、本
発明に係る抗酸化剤は、上記α−カロチン、ルテイン又
はネオキサンチンを有効成分とするものである。
【０００９】また、本発明に係る優れた抗酸化活性をも
つカロチノイド含有エキスの製造法は、クラミドモナス
属に属する抗酸化活性をもつカロチノイドを生産する原
虫を培養し、該原虫をエタノール、メタノール及びアセ
トンから選ばれる有機溶媒で抽出し、続いて、該抽出液
を濃縮するものである。
つカロチノイド含有エキスの製造法は、クラミドモナス
属に属する抗酸化活性をもつカロチノイドを生産する原
虫を培養し、該原虫をエタノール、メタノール及びアセ
トンから選ばれる有機溶媒で抽出し、続いて、該抽出液
を濃縮するものである。
【００１０】また、本発明に係るα−カロチンの製造法
は、クラミドモナス属に属する抗酸化活性をもつカロチ
ノイドを生産する原虫を培養し、該原虫をエタノール、
メタノール及びアセトンから選ばれる有機溶媒で抽出
し、該抽出液を濃縮し、続いて、該濃縮液を固定相シリ
カゲル・移動相ｎ−ヘキサンによるクロマトグラフィー
により分画して黄橙色フラクションを溶出させ、さら
に、該黄橙色フラクションを濃縮し、該濃縮液を固定相
オクタドデシルシラン・移動相ジクロロメタン−アセト
ニトリル（２：８）によるクロマトグラフィーにより分
画して黄色フラクションを溶出させ、該黄色フラクショ
ンを濃縮するものである。
は、クラミドモナス属に属する抗酸化活性をもつカロチ
ノイドを生産する原虫を培養し、該原虫をエタノール、
メタノール及びアセトンから選ばれる有機溶媒で抽出
し、該抽出液を濃縮し、続いて、該濃縮液を固定相シリ
カゲル・移動相ｎ−ヘキサンによるクロマトグラフィー
により分画して黄橙色フラクションを溶出させ、さら
に、該黄橙色フラクションを濃縮し、該濃縮液を固定相
オクタドデシルシラン・移動相ジクロロメタン−アセト
ニトリル（２：８）によるクロマトグラフィーにより分
画して黄色フラクションを溶出させ、該黄色フラクショ
ンを濃縮するものである。
【００１１】また、本発明に係るルテインの製造法は、
クラミドモナス属に属する抗酸化活性をもつカロチノイ
ドを生産する原虫を培養し、該原虫をエタノール、メタ
ノール及びアセトンから選ばれる有機溶媒で抽出し、該
抽出液を濃縮し、続いて、該濃縮液を固定相シリカゲル
・移動相ｎ−ヘキサンによるクロマトグラフィーにより
分画して黄橙色フラクションを溶出させた後、残部をエ
ーテルで分画して黄色フラクションを溶出させ、さら
に、該黄色フラクションを濃縮するものである。
クラミドモナス属に属する抗酸化活性をもつカロチノイ
ドを生産する原虫を培養し、該原虫をエタノール、メタ
ノール及びアセトンから選ばれる有機溶媒で抽出し、該
抽出液を濃縮し、続いて、該濃縮液を固定相シリカゲル
・移動相ｎ−ヘキサンによるクロマトグラフィーにより
分画して黄橙色フラクションを溶出させた後、残部をエ
ーテルで分画して黄色フラクションを溶出させ、さら
に、該黄色フラクションを濃縮するものである。
【００１２】また、本発明に係るネオキサンチンの製造
法は、クラミドモナス属に属する抗酸化活性をもつカロ
チノイドを生産する原虫を培養し、該原虫をエタノー
ル、メタノール及びアセトンから選ばれる有機溶媒で抽
出し、該抽出液を濃縮し、続いて、該濃縮液を固定相シ
リカゲル・移動相ｎ−ヘキサンによるクロマトグラフィ
ーにより分画して黄橙色フラクションを溶出させ、引続
きエーテルで分画して黄色フラクションを溶出させた
後、残部をアセトン−エーテルで分画してレモン色フラ
クションを溶出させ、さらに、該レモン色フラクション
を濃縮するものである。
法は、クラミドモナス属に属する抗酸化活性をもつカロ
チノイドを生産する原虫を培養し、該原虫をエタノー
ル、メタノール及びアセトンから選ばれる有機溶媒で抽
出し、該抽出液を濃縮し、続いて、該濃縮液を固定相シ
リカゲル・移動相ｎ−ヘキサンによるクロマトグラフィ
ーにより分画して黄橙色フラクションを溶出させ、引続
きエーテルで分画して黄色フラクションを溶出させた
後、残部をアセトン−エーテルで分画してレモン色フラ
クションを溶出させ、さらに、該レモン色フラクション
を濃縮するものである。
【００１３】上記各発明におけるクラミドモナス属に属
する優れた抗酸化活性をもつカロチノイドを生産する原
虫の具体例は、クラミドモナス ラインハルデイ（Chla
mydomonas reinhardtii：ＡＴＣＣ １８７９８）であ
る。
する優れた抗酸化活性をもつカロチノイドを生産する原
虫の具体例は、クラミドモナス ラインハルデイ（Chla
mydomonas reinhardtii：ＡＴＣＣ １８７９８）であ
る。
【００１４】次に、本発明の構成をより詳しく説明す
る。本発明において用いるクラミドモナス属に属する抗
酸化活性をもつカロチノイドを生産する原虫は、例え
ば、K 2 HPO 4 、KH2 PO4 、NH4 NO3 、MgSO4 ・7H2O
、CaCl2 ・2H2 O 、FeCl3 ・6H2 O 、微量金属（ZnSO
4 ・7H2 O 、MnSO4 ・4H2 O 、CoCl2 ・6H2 O 、Na2 Mo
O 4 ・2H2 O 、CuSO4 ・5H2 O ）及び trsodiumcitrate
・2H2 O からなる培養液（pH7.2 ）を用いて、１０〜
３０℃、好ましくは２０〜２５℃の明・暗環境下で５〜
７日間培養することにより、大量に培養することができ
る。また、前出特開平3-183498号公報に開示されている
培養方法、即ち、300ml のＴＡＰ培養液（１リットル当
たり NH4 Cl 0.4g、CaCl2 0.0385g、MgSO4 ・7H2 O
0.1g 、K 2 HPO 4 0.119g 、KH2 PO4 0.06g、EDTA
50mg、ZnSO4 ・7H2O 22mg 、H 3 BO3 11.4mg 、MnCl2
・7H2 O 5.06mg 、FeSO4 ・7H2 O 4.99mg 、CaCl2
・6H2 O 1.61mg 、CuSO4 ・5H2 O 1.57mg 、(NH 4 )
6 Mo7 O 24・4H2 O 1.1mg、トリス 2.42g 酢酸 1ml
を水に溶解し、ｐＨ6.8 に調整したもの）に細胞濃度が
５×１０5 ／mlになるよう播種し、これを7,000 ルクス
の白色光の下、２５℃で回転振盪培養することにより得
ることもできる。培養した原虫の集虫、洗浄は常法に従
って行えばよい。
る。本発明において用いるクラミドモナス属に属する抗
酸化活性をもつカロチノイドを生産する原虫は、例え
ば、K 2 HPO 4 、KH2 PO4 、NH4 NO3 、MgSO4 ・7H2O
、CaCl2 ・2H2 O 、FeCl3 ・6H2 O 、微量金属（ZnSO
4 ・7H2 O 、MnSO4 ・4H2 O 、CoCl2 ・6H2 O 、Na2 Mo
O 4 ・2H2 O 、CuSO4 ・5H2 O ）及び trsodiumcitrate
・2H2 O からなる培養液（pH7.2 ）を用いて、１０〜
３０℃、好ましくは２０〜２５℃の明・暗環境下で５〜
７日間培養することにより、大量に培養することができ
る。また、前出特開平3-183498号公報に開示されている
培養方法、即ち、300ml のＴＡＰ培養液（１リットル当
たり NH4 Cl 0.4g、CaCl2 0.0385g、MgSO4 ・7H2 O
0.1g 、K 2 HPO 4 0.119g 、KH2 PO4 0.06g、EDTA
50mg、ZnSO4 ・7H2O 22mg 、H 3 BO3 11.4mg 、MnCl2
・7H2 O 5.06mg 、FeSO4 ・7H2 O 4.99mg 、CaCl2
・6H2 O 1.61mg 、CuSO4 ・5H2 O 1.57mg 、(NH 4 )
6 Mo7 O 24・4H2 O 1.1mg、トリス 2.42g 酢酸 1ml
を水に溶解し、ｐＨ6.8 に調整したもの）に細胞濃度が
５×１０5 ／mlになるよう播種し、これを7,000 ルクス
の白色光の下、２５℃で回転振盪培養することにより得
ることもできる。培養した原虫の集虫、洗浄は常法に従
って行えばよい。
【００１５】原虫から優れた抗酸化活性をもつカロチノ
イド含有エキスを抽出するための溶媒としてはメタノー
ル、エタノール、アセトン、クロロフォルム、ジクロロ
メタン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン又はジメチル
スルフォキサイド等の有機溶媒を用いればよいが、メタ
ノール、エタノール又はアセトンは親水性であるため抽
出効率がよく、また、不要な分解物が生成しにくいので
より好ましい。また、抽出温度は０〜６０℃、好ましく
は１０〜３０℃とする。なお、抽出液としてアセトンを
用いた場合においての抽出温度は２０〜３０℃が特に好
ましい。
イド含有エキスを抽出するための溶媒としてはメタノー
ル、エタノール、アセトン、クロロフォルム、ジクロロ
メタン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン又はジメチル
スルフォキサイド等の有機溶媒を用いればよいが、メタ
ノール、エタノール又はアセトンは親水性であるため抽
出効率がよく、また、不要な分解物が生成しにくいので
より好ましい。また、抽出温度は０〜６０℃、好ましく
は１０〜３０℃とする。なお、抽出液としてアセトンを
用いた場合においての抽出温度は２０〜３０℃が特に好
ましい。
【００１６】アセトンを用いて抽出した抽出液は、ｎ-
ヘキサン−エーテル（１：１）と水とで分配して、ｎ-
ヘキサン−エーテル溶液を得る。また、酢酸エチル−水
により分配してもよい。なお、原虫を水により抽出して
も水抽出分画には抗酸化活性は認められない。
ヘキサン−エーテル（１：１）と水とで分配して、ｎ-
ヘキサン−エーテル溶液を得る。また、酢酸エチル−水
により分配してもよい。なお、原虫を水により抽出して
も水抽出分画には抗酸化活性は認められない。
【００１７】分配したｎ- ヘキサン−エーテル溶液を、
温度３０〜６０℃の下で減圧濃縮すれば優れた抗酸化活
性をもつカロチノイド含有エキスが得られる。
温度３０〜６０℃の下で減圧濃縮すれば優れた抗酸化活
性をもつカロチノイド含有エキスが得られる。
【００１８】このようして、原虫から抽出した上記カロ
チノイド含有エキスからα−カロチン、ルテイン及びネ
オキサンチンを得るに当たっての濃縮・分画手段自体
は、例えば、吸着剤としてアルミナ、シリカゲル、珪藻
土、澱粉或いはイオン交換樹脂粉末等や濾紙を用いたカ
ラムクロマトグラフィー又はガスクロマトグラフィーに
よって、常法に従って行えばよい。従って、例えば、上
記カロチノイド含有エキスを固定相シリカゲル・移動相
ｎ- ヘキサンによるクロマトグラフィーにより分画して
黄橙色フラクションを溶出させ、該黄橙色フラクション
を濃縮した後、該濃縮液を固定相オクタドデシルシラン
・移動相ジクロロメタン−アセトニトリルを用いた高速
液体クロマトグラフィーで分画して黄色フラクションを
得て、該黄色フラクションを濃縮することよりα−カロ
チンを得ることができる。また、上記黄橙色フラクショ
ンを溶出させた後の残部を、エーテルで分画して黄色フ
ラクションを溶出させ、該黄色フラクションを濃縮する
ことよりルテインを得ることができる。さらに、上記エ
ーテルで分画して黄色フラクションを溶出させた後の残
部を、アセトン−エーテル（１：１）を用いてレモン色
フラクションを溶出させ、該レモン色フラクションを濃
縮することよりネオキサンチンを得ることができる。
チノイド含有エキスからα−カロチン、ルテイン及びネ
オキサンチンを得るに当たっての濃縮・分画手段自体
は、例えば、吸着剤としてアルミナ、シリカゲル、珪藻
土、澱粉或いはイオン交換樹脂粉末等や濾紙を用いたカ
ラムクロマトグラフィー又はガスクロマトグラフィーに
よって、常法に従って行えばよい。従って、例えば、上
記カロチノイド含有エキスを固定相シリカゲル・移動相
ｎ- ヘキサンによるクロマトグラフィーにより分画して
黄橙色フラクションを溶出させ、該黄橙色フラクション
を濃縮した後、該濃縮液を固定相オクタドデシルシラン
・移動相ジクロロメタン−アセトニトリルを用いた高速
液体クロマトグラフィーで分画して黄色フラクションを
得て、該黄色フラクションを濃縮することよりα−カロ
チンを得ることができる。また、上記黄橙色フラクショ
ンを溶出させた後の残部を、エーテルで分画して黄色フ
ラクションを溶出させ、該黄色フラクションを濃縮する
ことよりルテインを得ることができる。さらに、上記エ
ーテルで分画して黄色フラクションを溶出させた後の残
部を、アセトン−エーテル（１：１）を用いてレモン色
フラクションを溶出させ、該レモン色フラクションを濃
縮することよりネオキサンチンを得ることができる。
【００１９】なお、α−カロチン（化１）、ルテイン
（化２）及びネオキサンチン（化３）並びに比較物質と
してのβ−カロチン（化４）の同定は、紫外・可視部吸
収スペクトル、質量分析スペクトル（EI-MS ）、及び水
素核磁気共鳴スペクトル( 1 H-NMR)によって行った。
（化２）及びネオキサンチン（化３）並びに比較物質と
してのβ−カロチン（化４）の同定は、紫外・可視部吸
収スペクトル、質量分析スペクトル（EI-MS ）、及び水
素核磁気共鳴スペクトル( 1 H-NMR)によって行った。
【００２０】
【化１】
【００２１】
【化２】
【００２２】
【化３】
【００２３】
【化４】
【００２４】本発明に係る優れた抗酸化活性をもつカロ
チノイド含有エキス、α−カロチン、ルテイン及びネオ
キサンチンは、アスコルビン酸やトコフェロールを用い
る場合と同様の使用態様によって、抗酸化剤として用い
ることができる。
チノイド含有エキス、α−カロチン、ルテイン及びネオ
キサンチンは、アスコルビン酸やトコフェロールを用い
る場合と同様の使用態様によって、抗酸化剤として用い
ることができる。
【００２５】
【作用】本発明者等は、クラミドモナス属に属する抗酸
化活性をもつカロチノイドを生産する原虫のもつ抗酸化
活性物質産成機構については、未だ充分解明していない
が、該原虫から優れた抗酸化活性をもつカロチノイド含
有エキス、α−カロチン、ルテイン及びネオキサンチン
が確実に得られることを保証できる。何故なら、本発明
者等は、クラミドモナス ラインハルデイ（Chlamydomo
nasreinhardtii：ＡＴＣＣ １８７９８）の有機溶媒抽
出物に強い抗酸化作用が認められたので、さらに進んで
該抽出物について、クロマトグラフィーによる活性物質
の検索を行った結果、強い抗酸化活性をもつα−カロチ
ン、ルテイン及びネオキサンチンを得ているからであ
る。
化活性をもつカロチノイドを生産する原虫のもつ抗酸化
活性物質産成機構については、未だ充分解明していない
が、該原虫から優れた抗酸化活性をもつカロチノイド含
有エキス、α−カロチン、ルテイン及びネオキサンチン
が確実に得られることを保証できる。何故なら、本発明
者等は、クラミドモナス ラインハルデイ（Chlamydomo
nasreinhardtii：ＡＴＣＣ １８７９８）の有機溶媒抽
出物に強い抗酸化作用が認められたので、さらに進んで
該抽出物について、クロマトグラフィーによる活性物質
の検索を行った結果、強い抗酸化活性をもつα−カロチ
ン、ルテイン及びネオキサンチンを得ているからであ
る。
【００２６】本発明に係るα−カロチン、ルテイン及び
ネオキサンチンの抗酸化作用は同じ原虫より得たβ−カ
ロチンのそれよりも強い。
ネオキサンチンの抗酸化作用は同じ原虫より得たβ−カ
ロチンのそれよりも強い。
【００２７】
【実施例】実施例によって、本発明の構成、作用を具体
的に説明すれば、次の通りである。 実施例１． （原虫の培養）K 2 HPO 4 100mg、KH2 PO4 100mg、NH
4 NO3 300mg、MgSO4 ・7H2 O 300mg、CaCl2 ・2H2 O
40mg 、FeCl3 ・6H2 O 10mg 、微量金属溶液（ZnSO4
・7H2O 10mg 、MnSO4 ・4H2 O 10mg 、CoCl2 ・6H2 O
4mg、Na2 MoO 4 ・2H2 O 2mg、CuSO4 ・5H2 O 0.4m
gを蒸留水 100ml に溶解させたもの） 10ml及びtriso
dium citrate ・2H2 O 500mgを蒸留水に加え全量を1,0
00ml にし、１ＮのHClでpH7.2 に調整した培養液を用い
て、クラミドモナス ラインハルデイ（Chlamydomonas
reinhardtii：ＡＴＣＣ １８７９８）を、２５℃で振
とうし、12時間は7,000 ルクスの蛍光灯で照射下、12時
間は暗黒下のサイクルを少なくとも12時間繰り返しなが
ら１週間培養した。次に、上記培養液を1,000rpm、５
℃、５mim の条件で遠心分離して原虫を集め、該原虫を
50mM MOPS(Good's buffer) pH7.2を用いて洗浄して原虫
40g （湿重量）を得た。なお、HCl のかわりに１ＮのNa
OHを用いてもよい。
的に説明すれば、次の通りである。 実施例１． （原虫の培養）K 2 HPO 4 100mg、KH2 PO4 100mg、NH
4 NO3 300mg、MgSO4 ・7H2 O 300mg、CaCl2 ・2H2 O
40mg 、FeCl3 ・6H2 O 10mg 、微量金属溶液（ZnSO4
・7H2O 10mg 、MnSO4 ・4H2 O 10mg 、CoCl2 ・6H2 O
4mg、Na2 MoO 4 ・2H2 O 2mg、CuSO4 ・5H2 O 0.4m
gを蒸留水 100ml に溶解させたもの） 10ml及びtriso
dium citrate ・2H2 O 500mgを蒸留水に加え全量を1,0
00ml にし、１ＮのHClでpH7.2 に調整した培養液を用い
て、クラミドモナス ラインハルデイ（Chlamydomonas
reinhardtii：ＡＴＣＣ １８７９８）を、２５℃で振
とうし、12時間は7,000 ルクスの蛍光灯で照射下、12時
間は暗黒下のサイクルを少なくとも12時間繰り返しなが
ら１週間培養した。次に、上記培養液を1,000rpm、５
℃、５mim の条件で遠心分離して原虫を集め、該原虫を
50mM MOPS(Good's buffer) pH7.2を用いて洗浄して原虫
40g （湿重量）を得た。なお、HCl のかわりに１ＮのNa
OHを用いてもよい。
【００２８】（抗酸化活性物質の分離）上記クラミドモ
ナス ラインハルデイ原虫40g （湿重量）を室温下で、
500mlのアセトンにより２回抽出し、該抽出液を濾過し
た後、ｎ- ヘキサン−エーテル溶液 1,000mlと水 2,000
mlとで分配し、さらに、分配されたｎ- ヘキサン−エー
テル溶液を水 2,000mlで２回水洗いする。続いて、この
ｎ- ヘキサン−エーテル溶液を約３７℃で減圧濃縮して
黄緑色の抽出エキス（ｎ- ヘキサン−エーテルエキス）
５g を得た。
ナス ラインハルデイ原虫40g （湿重量）を室温下で、
500mlのアセトンにより２回抽出し、該抽出液を濾過し
た後、ｎ- ヘキサン−エーテル溶液 1,000mlと水 2,000
mlとで分配し、さらに、分配されたｎ- ヘキサン−エー
テル溶液を水 2,000mlで２回水洗いする。続いて、この
ｎ- ヘキサン−エーテル溶液を約３７℃で減圧濃縮して
黄緑色の抽出エキス（ｎ- ヘキサン−エーテルエキス）
５g を得た。
【００２９】ここで得たｎ- ヘキサン−エーテルエキス
の抗酸化活性を後出の方法によって測定したところ、ED
TAを含むTris-HCl緩衝液中でFe2+によるリノール酸メチ
ルエステルの過酸化を50％抑制する濃度は、α−トコフ
ェロール 0.064 ％に対してｎ- ヘキサン−エーテル
0.013 ％であり、α−トコフェロールより約５倍強い抗
酸化活性を示した。
の抗酸化活性を後出の方法によって測定したところ、ED
TAを含むTris-HCl緩衝液中でFe2+によるリノール酸メチ
ルエステルの過酸化を50％抑制する濃度は、α−トコフ
ェロール 0.064 ％に対してｎ- ヘキサン−エーテル
0.013 ％であり、α−トコフェロールより約５倍強い抗
酸化活性を示した。
【００３０】上記ｎ- ヘキサン−エーテルエキス４g
を、直径３cm・長さ30cmのシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィーを用いてｎ- ヘキサン、エーテル、ｎ- ヘキサ
ン−エーテル及びアセトン−エーテルの各溶媒によって
精密に順次溶出分画した。
を、直径３cm・長さ30cmのシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィーを用いてｎ- ヘキサン、エーテル、ｎ- ヘキサ
ン−エーテル及びアセトン−エーテルの各溶媒によって
精密に順次溶出分画した。
【００３１】まず、ｎ- ヘキサンで溶出した黄橙色フラ
クションを、オクタドデシルシランを固定相としてジク
ロロメタン−アセトニトリル（２：８）による高速液体
クロマトグラフィーによって分画した後、約３５℃で減
圧濃縮して黄色物質４mgと黄橙色物質５mgとを得た。上
記各物質は、紫外・可視部吸収スペクトル（図１及び４
参照）、質量分析スペクトル（エレクトロンインパクト
・マススペクトル）（図２及び５参照）及び水素核磁気
共鳴スペクトル（図３及び６参照）の解析結果から、黄
色物質はα−カロチン、黄橙色はβ−カロチンと同定で
きた。
クションを、オクタドデシルシランを固定相としてジク
ロロメタン−アセトニトリル（２：８）による高速液体
クロマトグラフィーによって分画した後、約３５℃で減
圧濃縮して黄色物質４mgと黄橙色物質５mgとを得た。上
記各物質は、紫外・可視部吸収スペクトル（図１及び４
参照）、質量分析スペクトル（エレクトロンインパクト
・マススペクトル）（図２及び５参照）及び水素核磁気
共鳴スペクトル（図３及び６参照）の解析結果から、黄
色物質はα−カロチン、黄橙色はβ−カロチンと同定で
きた。
【００３２】続いて、上記黄橙色フラクションを溶出さ
せた後の残部からノルマンヘキサン−エーテル（１：
１）溶媒により緑色不純物を取り除き、エーテルで分画
して黄色フラクションを溶出させ、該黄色フラクション
を同様に減圧濃縮して黄色物質15mgを得た。この黄色物
質を上記と同様の手法により検討した結果（図７，８及
び９参照）、ルテインと同定できた。
せた後の残部からノルマンヘキサン−エーテル（１：
１）溶媒により緑色不純物を取り除き、エーテルで分画
して黄色フラクションを溶出させ、該黄色フラクション
を同様に減圧濃縮して黄色物質15mgを得た。この黄色物
質を上記と同様の手法により検討した結果（図７，８及
び９参照）、ルテインと同定できた。
【００３３】さらに、上記黄色フラクションを溶出させ
た後の残部をアセトン−エーテル（１：１）で分画して
レモン色フラクションを溶出させ、該レモン色フラクシ
ョンを同様に減圧濃縮してレモン色物質４mgを得た。こ
のレモン色物質を上記と同様の手法により検討した結果
（図１０，１１及び１２参照）、ネオキサンチンと同定
できた。
た後の残部をアセトン−エーテル（１：１）で分画して
レモン色フラクションを溶出させ、該レモン色フラクシ
ョンを同様に減圧濃縮してレモン色物質４mgを得た。こ
のレモン色物質を上記と同様の手法により検討した結果
（図１０，１１及び１２参照）、ネオキサンチンと同定
できた。
【００３４】なお、上記ｎ- ヘキサン−エーテルエキス
の抗酸化活性の測定方法は以下の方法により行なった。 試薬：EDTA溶液（200mM Tris-HCl Buffer pH=6.0 に50
mM EDTA-2Na 200mMを溶かしたもの）、FeSO4 溶液（E
DTA溶液に500mM FeSO 4 ・7H2 O を溶かしたもの）、
0.01mM ，0.1mM のトコフェロールのアセトン溶液及びL
inoleic acidmethyl ester溶液（Linoleic acid methyl
ester 10 μｌにアセトン 500μｌとTween20 500μｌ
を加えたもの）を使用した。 分析装置：FID 検出器及びヘッドスペースサンプリング
装置（HS-6）付きガスクロマトグラフィー（パーキンエ
ルマー社製：8700型）（以下、「HS-GC 」という。）を
使用した。 カラム：長さ 30m 、I.D. 0.25mm、膜厚 1.5 μm
（GLサイエンス社製：NB-5）を使用した。 分析条件：カラム温度 100 ℃、FID 温度 200 ℃、ガ
ス圧 ５気圧、ヘッドスペースサンプリング装置の温度
90℃で30分間加熱。
の抗酸化活性の測定方法は以下の方法により行なった。 試薬：EDTA溶液（200mM Tris-HCl Buffer pH=6.0 に50
mM EDTA-2Na 200mMを溶かしたもの）、FeSO4 溶液（E
DTA溶液に500mM FeSO 4 ・7H2 O を溶かしたもの）、
0.01mM ，0.1mM のトコフェロールのアセトン溶液及びL
inoleic acidmethyl ester溶液（Linoleic acid methyl
ester 10 μｌにアセトン 500μｌとTween20 500μｌ
を加えたもの）を使用した。 分析装置：FID 検出器及びヘッドスペースサンプリング
装置（HS-6）付きガスクロマトグラフィー（パーキンエ
ルマー社製：8700型）（以下、「HS-GC 」という。）を
使用した。 カラム：長さ 30m 、I.D. 0.25mm、膜厚 1.5 μm
（GLサイエンス社製：NB-5）を使用した。 分析条件：カラム温度 100 ℃、FID 温度 200 ℃、ガ
ス圧 ５気圧、ヘッドスペースサンプリング装置の温度
90℃で30分間加熱。
【００３５】操作：反応容器はセプタム付バイヤルを用
いた。 Linoleic acid methyl ester溶液 20μｌに比較のため
の標準物質トコフェロールのアセトン溶液または被検物
質のアセトン溶液を加え、次いで50mM EDTA溶液 1,78
0 μｌ、最後にFeSO4 溶液 100 μｌを加えて、上記容
器を密閉し、37℃で60分間反応させた後、生じたヘキサ
ナールの量をHS-GC にて分析した。なお、被分析液中の
アセトンの総量は100 μｌとなるようにした。
いた。 Linoleic acid methyl ester溶液 20μｌに比較のため
の標準物質トコフェロールのアセトン溶液または被検物
質のアセトン溶液を加え、次いで50mM EDTA溶液 1,78
0 μｌ、最後にFeSO4 溶液 100 μｌを加えて、上記容
器を密閉し、37℃で60分間反応させた後、生じたヘキサ
ナールの量をHS-GC にて分析した。なお、被分析液中の
アセトンの総量は100 μｌとなるようにした。
【００３６】抗酸化能の表示方法：トコフェロールを加
えないヘキサナールの生成量を100％とし、各測定値の
阻害％を算出。対数正規確率紙の対数目盛りに濃度、正
規確率目盛りに阻害％をブロックし、50％阻害濃度を求
めた。
えないヘキサナールの生成量を100％とし、各測定値の
阻害％を算出。対数正規確率紙の対数目盛りに濃度、正
規確率目盛りに阻害％をブロックし、50％阻害濃度を求
めた。
【００３７】（抗酸化活性の検定）脂溶性アゾ化合物AM
VN：2,2'-azobis （2,4-dimethylvaleronitrile ）によ
り誘導されるリノール酸メチルの過酸化反応に対する抑
制作用（脂質ペルオキシラジカルＬＯＯ・による脂質の
過酸化抑制効果）について。 対照区として、0.8Mリノール酸メチルのｎ−ヘキサン−
２−プロパノール（１：１）ｖ／ｖ溶液１mlに100mM A
MVN のｎ−ヘキサン溶液0.1ml を加え、遮光下、37℃で
浸とうしながら、インキュベートする。インキュベート
中の反応溶液を、経時的に10μｌ宛を取り、各反応溶液
について高速液体クロマトグラフィーによってリノール
酸メチルヒドロペルオキサイドの含量を測定した。
VN：2,2'-azobis （2,4-dimethylvaleronitrile ）によ
り誘導されるリノール酸メチルの過酸化反応に対する抑
制作用（脂質ペルオキシラジカルＬＯＯ・による脂質の
過酸化抑制効果）について。 対照区として、0.8Mリノール酸メチルのｎ−ヘキサン−
２−プロパノール（１：１）ｖ／ｖ溶液１mlに100mM A
MVN のｎ−ヘキサン溶液0.1ml を加え、遮光下、37℃で
浸とうしながら、インキュベートする。インキュベート
中の反応溶液を、経時的に10μｌ宛を取り、各反応溶液
について高速液体クロマトグラフィーによってリノール
酸メチルヒドロペルオキサイドの含量を測定した。
【００３８】一方、0.8Mリノール酸メチルのｎ−ヘキサ
ン−２−プロパノール（１：１）ｖ／ｖ溶液１mlに、あ
らかじめ抗酸化力を検定する物質として、ここに得たα
−カロチンを0.8 μM 添加し、５分間インキュベートし
た以外は、上記と同条件によってリノール酸メチルヒド
ロペルオキサイドの含量を測定し、対照区と比較して抑
制作用を検定した。
ン−２−プロパノール（１：１）ｖ／ｖ溶液１mlに、あ
らかじめ抗酸化力を検定する物質として、ここに得たα
−カロチンを0.8 μM 添加し、５分間インキュベートし
た以外は、上記と同条件によってリノール酸メチルヒド
ロペルオキサイドの含量を測定し、対照区と比較して抑
制作用を検定した。
【００３９】また、ここに得たルテイン及びネオキサン
チンについても、上記と全く同様にして抑制作用を検定
した。さらに、比較のため、ここに得たβ−カロチンに
ついても、上記と全く同様にして抑制作用を検定した。
以上の各検定結果を図１３にまとめて示す。同図によっ
て、ここに得たα−カロチン、ルテイン及びネオキサン
チンが強い抗酸化活性をもっていることが確認できる。
チンについても、上記と全く同様にして抑制作用を検定
した。さらに、比較のため、ここに得たβ−カロチンに
ついても、上記と全く同様にして抑制作用を検定した。
以上の各検定結果を図１３にまとめて示す。同図によっ
て、ここに得たα−カロチン、ルテイン及びネオキサン
チンが強い抗酸化活性をもっていることが確認できる。
【００４０】
【発明の効果】本発明によれば、実施例にも示した通
り、安全性が高い天然由来の優れた抗酸化活性をもつ新
規抗酸化剤が提供できる。そして、本発明によって提供
される新規抗酸化剤は、単独で使用できることは勿論、
既存の天然由来の各種抗酸化剤と組み合わせて使用する
こともできるから、食品、医療品、化粧品等の各対象物
に応じた多岐に渡る処方を組むことが可能となる。さら
に、本発明に用いる原虫は、大量培養が容易であり低コ
ストで行えるから、各目的物を比較的安価に得ることが
できる。従って、本発明の産業上の利用性は非常に大き
いといえる。
り、安全性が高い天然由来の優れた抗酸化活性をもつ新
規抗酸化剤が提供できる。そして、本発明によって提供
される新規抗酸化剤は、単独で使用できることは勿論、
既存の天然由来の各種抗酸化剤と組み合わせて使用する
こともできるから、食品、医療品、化粧品等の各対象物
に応じた多岐に渡る処方を組むことが可能となる。さら
に、本発明に用いる原虫は、大量培養が容易であり低コ
ストで行えるから、各目的物を比較的安価に得ることが
できる。従って、本発明の産業上の利用性は非常に大き
いといえる。
【図１】本発明に係るα−カロチンの可視部吸収スペク
トル図である。
トル図である。
【図２】本発明に係るα−カロチンのエレクトロンイン
パクト・マススペクトル（EI-MS ）図である。
パクト・マススペクトル（EI-MS ）図である。
【図３】本発明に係るα−カロチンの水素核磁気共鳴ス
ペクトル図( 1 H-NMR)である。
ペクトル図( 1 H-NMR)である。
【図４】実施例において比較のために得たβ−カロチン
の可視部吸収スペクトル図である。
の可視部吸収スペクトル図である。
【図５】実施例において比較のために得たβ−カロチン
のエレクトロンインパクト・マススペクトル（EI-MS ）
図である。
のエレクトロンインパクト・マススペクトル（EI-MS ）
図である。
【図６】実施例において比較のために得たβ−カロチン
の水素核磁気共鳴スペクトル図( 1 H-NMR)である。
の水素核磁気共鳴スペクトル図( 1 H-NMR)である。
【図７】本発明に係るルテインの可視部吸収スペクトル
図である。
図である。
【図８】本発明に係るルテインのエレクトロンインパク
ト・マススペクトル（EI-MS ）図である。
ト・マススペクトル（EI-MS ）図である。
【図９】本発明に係るルテインの水素核磁気共鳴スペク
トル図( 1 H-NMR)である。
トル図( 1 H-NMR)である。
【図１０】本発明に係るネオキサンチンの可視部吸収ス
ペクトル図である。
ペクトル図である。
【図１１】本発明に係るネオキサンチンのエレクトロン
インパクト・マススペクトル（EI-MS ）図である。
インパクト・マススペクトル（EI-MS ）図である。
【図１２】本発明に係るネオキサンチンの水素核磁気共
鳴スペクトル図( 1 H-NMR)である。
鳴スペクトル図( 1 H-NMR)である。
【図１３】脂溶性ラジカル発生剤AMVNにより誘導される
リノール酸メチルの過酸化反応に対する抑制作用を示す
グラフである。
リノール酸メチルの過酸化反応に対する抑制作用を示す
グラフである。
なし。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成６年４月６日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正内容】
【００３８】一方、０．８Ｍリノール酸メチルのｎ−ヘ
キサン−２−プロパノール（１：１）ｖ／ｖ溶液１ｍｌ
に、あらかじめ抗酸化力を検定する物質として、ここに
得たα−カロチンを０．８μｍｏｌ添加し、５分間イン
キュベートした以外は、上記と同条件によってリノール
酸メチルヒドロペルオキサイドの含量を測定し、対照区
と比較して抑制作用を検定した。
キサン−２−プロパノール（１：１）ｖ／ｖ溶液１ｍｌ
に、あらかじめ抗酸化力を検定する物質として、ここに
得たα−カロチンを０．８μｍｏｌ添加し、５分間イン
キュベートした以外は、上記と同条件によってリノール
酸メチルヒドロペルオキサイドの含量を測定し、対照区
と比較して抑制作用を検定した。
【手続補正２】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１３
【補正方法】変更
【補正内容】
【図１３】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ２３Ｌ 3/349 (Ｃ１２Ｐ 23/00 Ｃ１２Ｒ 1:90）
Claims (15)
- 【請求項１】クラミドモナス属に属する抗酸化活性をも
つカロチノイドを生産する原生動物から有機溶媒を用い
て抽出したことを特徴とする抗酸化活性をもつカロチノ
イド含有エキス。 - 【請求項２】クラミドモナス属に属する抗酸化活性をも
つカロチノイドを生産する原生動物が、クラミドモナス
ラインハルデイ（Chlamydomonas reinhardtii ：ＡＴ
ＣＣ １８７９８）である請求項１記載の抗酸化活性を
もつカロチノイド含有エキス。 - 【請求項３】クラミドモナス属に属する抗酸化活性をも
つカロチノイドを生産する原生動物から有機溶媒を用い
て抽出してなる抗酸化活性をもつカロチノイド含有エキ
スを抽出源として有機溶媒を用いて抽出したことを特徴
とするα−カロチン。 - 【請求項４】クラミドモナス属に属する抗酸化活性をも
つカロチノイドを生産する原生動物が、クラミドモナス
ラインハルデイ（Chlamydomonas reinhardtii ：ＡＴ
ＣＣ １８７９８）である請求項３記載のα−カロチ
ン。 - 【請求項５】クラミドモナス属に属する抗酸化活性をも
つカロチノイドを生産する原生動物から有機溶媒を用い
て抽出してなる抗酸化活性をもつカロチノイド含有エキ
スを抽出源として有機溶媒を用いて抽出したことを特徴
とするルテイン。 - 【請求項６】クラミドモナス属に属する抗酸化活性をも
つカロチノイドを生産する原生動物菌が、クラミドモナ
ス ラインハルデイ（Chlamydomonas reinhardtii ：Ａ
ＴＣＣ １８７９８）である請求項５記載のルテイン。 - 【請求項７】クラミドモナス属に属する抗酸化活性をも
つカロチノイドを生産する原生動物から有機溶媒を用い
て抽出してなる抗酸化活性をもつカロチノイド含有エキ
スを抽出源として有機溶媒を用いて抽出したことを特徴
とするネオキサンチン。 - 【請求項８】クラミドモナス属に属する抗酸化活性をも
つカロチノイドを生産する原生動物が、クラミドモナス
ラインハルデイ（Chlamydomonas reinhardtii ：ＡＴ
ＣＣ １８７９８）である請求項７記載のネオキサンチ
ン。 - 【請求項９】請求項３又は４記載のα−カロチンを有効
成分とする抗酸化剤。 - 【請求項１０】請求項５又は６記載のルテインを有効成
分とする抗酸化剤。 - 【請求項１１】請求項７又は８記載のネオキサンチンを
有効成分とする抗酸化剤。 - 【請求項１２】クラミドモナス属に属する抗酸化活性を
もつカロチノイドを生産する原生動物を培養し、該原生
動物をエタノール、メタノール及びアセトンから選ばれ
る有機溶媒で抽出し、続いて、該抽出液を濃縮すること
を特徴とする抗酸化活性をもつカロチノイド含有エキス
の製造法。 - 【請求項１３】クラミドモナス属に属する抗酸化活性を
もつカロチノイドを生産する原生動物を培養し、該原生
動物をエタノール、メタノール及びアセトンから選ばれ
る有機溶媒で抽出し、該抽出液を濃縮し、続いて、該濃
縮液を固定相シリカゲル・移動相ｎ−ヘキサンによるク
ロマトグラフィーにより分画して黄橙色フラクションを
溶出させ、さらに、該黄橙色フラクションを濃縮し、該
濃縮液を固定相オクタドデシルシラン・移動相ジクロロ
メタン−アセトニトリル（２：８）によるクロマトグラ
フィーにより分画して黄色フラクションを溶出させ、該
黄色フラクションを濃縮することを特徴とするα−カロ
チンの製造法。 - 【請求項１４】クラミドモナス属に属する抗酸化活性を
もつカロチノイドを生産する原生動物を培養し、該原生
動物をエタノール、メタノール及びアセトンから選ばれ
る有機溶媒で抽出し、該抽出液を濃縮し、続いて、該濃
縮液を固定相シリカゲル・移動相ｎ−ヘキサンによるク
ロマトグラフィーにより分画して黄橙色フラクションを
溶出させた後、残部をエーテルで分画して黄色フラクシ
ョンを溶出させ、さらに、該黄色フラクションを濃縮す
ることを特徴とするルテインの製造法。 - 【請求項１５】クラミドモナス属に属する抗酸化活性を
もつカロチノイドを生産する原生動物を培養し、該原生
動物をエタノール、メタノール及びアセトンから選ばれ
る有機溶媒で抽出し、該抽出液を濃縮し、続いて、該濃
縮液を固定相シリカゲル・移動相ｎ−ヘキサンによるク
ロマトグラフィーにより分画して黄橙色フラクションを
溶出させ、引続きエーテルで分画して黄色フラクション
を溶出させた後、残部をアセトン−エーテルで分画して
レモン色フラクションを溶出させ、さらに、該レモン色
フラクションを濃縮することを特徴とするネオキサンチ
ンの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6037660A JPH07224029A (ja) | 1994-02-09 | 1994-02-09 | 抗酸化活性をもつカロチノイド含有エキス、その製造法及び抗酸化剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6037660A JPH07224029A (ja) | 1994-02-09 | 1994-02-09 | 抗酸化活性をもつカロチノイド含有エキス、その製造法及び抗酸化剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07224029A true JPH07224029A (ja) | 1995-08-22 |
Family
ID=12503803
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6037660A Ceased JPH07224029A (ja) | 1994-02-09 | 1994-02-09 | 抗酸化活性をもつカロチノイド含有エキス、その製造法及び抗酸化剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07224029A (ja) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001051648A3 (en) * | 2000-01-10 | 2002-01-10 | Univ Arizona | Method of producing purified carotenoid compounds |
| WO2006077433A1 (en) * | 2005-01-21 | 2006-07-27 | Promar As | Sunscreen compositions comprising carotenoids |
| JP2013510129A (ja) * | 2009-11-09 | 2013-03-21 | ディーエスエム アイピー アセッツ ビー．ブイ． | 記憶の一部側面を増強するためのルテイン含有組成物の使用 |
| JP2014529607A (ja) * | 2011-08-26 | 2014-11-13 | ピーティーティー グローバル ケミカル パブリック カンパニー リミテッド | 天然物質からルテイン／キサントフィルを抽出する方法、並びにこの方法により得られる高度精製ルテイン／キサントフィル |
| JP2015189742A (ja) * | 2014-03-28 | 2015-11-02 | 大阪瓦斯株式会社 | Ｐｐａｒ活性組成物及びエネルギー生産設備 |
| WO2017065302A1 (ja) * | 2015-10-15 | 2017-04-20 | サントリーフラワーズ株式会社 | 新規マンデビラ属植物及びその作出方法 |
-
1994
- 1994-02-09 JP JP6037660A patent/JPH07224029A/ja not_active Ceased
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