KR101765304B1 - 바실러스속 씨에비12243-2 균주를 이용한 배추 무름병 방제제 - Google Patents

바실러스속 씨에비12243-2 균주를 이용한 배추 무름병 방제제 Download PDF

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Abstract

본 발명은 새롭게 분리, 동정된 바실러스속 CAB12243-2(Bacillus sp. CAB12243-2)를 유효성분으로 포함하는 배추 무름병 방제용 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)를 유효성분으로 포함하는 펙토박테리움 카로토보룸 종(Pectobacterium carotovorum species)의 증식 억제 또는 사멸용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 바실러스속 CAB12243-2는 배추 무름병 방제를 위한 미생물 농약으로 활용될 수 있고, 항생제 대신 사용될 수 있으므로, 항생제 내성균 출현 가능성을 감소시키고, 환경 안전성을 높일 수 있다.

Description

바실러스속 씨에비12243-2 균주를 이용한 배추 무름병 방제제{Biological control of soft rot on Chinese cabbage using Bacillus sp. CAB12243-2}
본 발명은 배추 무름병 방제 효과를 가지는 새롭게 분리, 동정된 신규 바실러스속 균주 및 이들을 이용한 배추 무름병 방제용 조성물에 관한 것이다.
무름병은 독특한 냄새가 나면서 흐물흐물해져서 썩는 식물의 병해를 지칭하는 것으로, 흔히 연부병(軟腐病)이라고도 한다. 무름병에 걸리면 세포벽 중간층의 펙틴질이 녹아 처음에는 물기가 보이는 것에 그치나, 점차로 물러져 썩고 액체처럼 흐물흐물해진다. 무름병은 배추에 많이 나타나는 병해이나, 그 밖에 토마토, 고구마, 감자에도 많이 나타난다.
배추 무름병은 세균에 의한 병해로 고온다습 조건에서 발병이 잘 되고 발병하면 방제가 매우 어려운 식물병 중 하나이다. 배추 무름병은 최근 기후변화에 의해 고온다습 환경조건이 형성 되면서 배추 농가에 많은 피해를 주고 있다(농촌진흥청, 1997). 배추 무름병에 관연하는 병원균은 펙토박테리움 카로토보룸 아종 카로토보룸(Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum)으로 보고(한국식물병리학회, 2009)되어 있으며, 이러한 병원균은 펙테이트 리아제(pectate lyase)라는 효소를 생산하여 식물체의 세포벽을 붕괴시키는 특성을 가지고 있다. 펙토박테리움 카로토보룸 아종 카로토보룸(Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum)은 생장 적온이 26~28℃이나, 다른 식물 병원 세균과는 달리 상온인 36℃ 정도에서도 잘 자라, 여름철 배추 생산에 가장 큰 장애 요인이다. 무름병균은 배추를 비롯하여 거의 모든 식물에 침입하여 발병할 수 있는데, 한번 침입하면 주변의 다른 채소로 옮겨가 발병을 전파한다.
펙테이트 리아제(pectate lyase)는 일반적으로 효소 분류 EC 4.2.2.2에 속하고 폴리갈락투로네이트 리아제(polygalacturonate lyase) 및 폴리(1,4-α-D-갈락투로나이드)리아제[poly(1,4-α-D-galacturonide)lyase]로도 언급된다. 펙테이트 리아제는 식물 조직의 침용(maceration) 및 무름병과 관련되어 있으며, 화분 발달에 최대한 늦게 발현된다. 펙테이트 리아제 유전자의 화분 발현은 화분 튜브 성장동안 펙틴 분해가 요구되는 것과 관련이 있는 것으로 알려져 있다.
배추 무름병 방제약제로 등록 되어있는 화학농약은 가스가마이신 액제 등 16종이 등록(한국작물보호협회, 2012)되어 있으나, 대부분이 농용항생제가 주성분으로 되어있어 우리가 식품으로 먹는 배추에 장기적인 사용으로 인한 항생제 내성 문제 등이 대두되고 있으며, 무름병에 대한 방제 효과 또한 낮은 점이 농가에서 많은 어려움을 느끼고 있는 부분이다.
따라서 최근에는 배추 무름병에 대한 친환경 방제법 개발이 시급히 요구되고 있는 실정이다. 국내에서의 무름병 친환경 방제법 연구는 미네랄 오일에 의한 방제(Lee et al., 2001) 등이 보고되어 있고, 배추 무름병 생물적 방제 연구로는 3종의 유용세균 Lactobacillus KLF01, Lactococcus KLC02, 그리고 Paenibacillus KPB3 균주를 이용한 생물적 방제연구(Jung et al., 2003) 등이 있을 뿐 아직 많은 연구결과가 보고되지 않고 있다.
Lee, S. H and J. S. Cha. 2001. Efficient induction of bacterial soft rot using mineral oil, Phytopathology 91: S53~S54.
이에 본 발명은 배추 무름병균의 발병을 억제할 수 있는 새로운 바실러스속 균주를 분리하고 이를 함유하는 무름병 억제용 또는 사멸용 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 채소 무름병에 대해 방제 효과를 발휘하는 새롭게 분리, 동정된 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)를 제공한다.
상기 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)는 하기의 특성 중 하나 이상 가질 수 있다:
i) 적정 생육 온도는 15℃~37℃;
ii) 적정 생육 pH는 5~7.5;
iii) 당 이용성에 있어서 글루코오즈(Glucose) 및 트레할로스(Trehalose)를 이용하여 증식하며, 아라비노스(Arabinose), 만니톨(Mannitol), 파라티노스(Paratinose), 람노스(Rhamnose), 수크로오스(Sucrose)를 이용하여 증식하지 못함; 또는
iv) 서열번호 1의 16S rRNA를 포함.
본 발명자들은 충청남도 예산, 아산, 서산, 보령 등 주산단지 중심으로 야산 부엽토, 식물체의 근권토양 중에 존재하는 미생물을 분리, 동정하였으며, 분리된 미생물의 무름병균 항균활성, 생물적 방제 효과 검정 등을 평가하여 우수한 효과를 가지는 미생물을 선별하였고, 이를 바실러스속 CAB12243-2로 명명하였다.
바실러스속 CAB12243-2는 2015년 01월 19일자로 KACC(국립농업과학원 농업유전자원센터)에 기탁하였고, 기탁번호 KACC92027P를 부여받았다.
본 발명자들은 선발 균주의 계통 분석을 위해 16S rRNA의 염기서열을 분석하였으며, 당 이용성을 분석하였다. 그 결과 본 발명의 균주는 바실러스속에 속하는 것으로 확인되었다.
본 발명의 균주는 1,446bp로서, 서열번호 1의 16S rRNA의 염기서열을 나타내는 것을 특징으로 하며, 바실러스속(Bacillus sp.) GQ199726.1 와 99%의 유사도를 갖는다. 본 균주는 클러스탈 방법(CLUSTAL X : Thompson JD et al., Nuc. Acid. Res. 25: 4876-82, 1997)에 의해 계통수를 조사하여 분류학적 위치를 확인할 수 있었다(도 3).
본 발명의 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)는 펙토박테리움 카로토보룸 아종 카로토보룸(Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum)에 대하여 우수한 발병 억제활성 및 생물적 방제 효과가 있다는 사실을 실험을 통해 확인할 수 있었다. 상기 세균은 채소 무름병의 발병 원인이 되고, 특히 배추 무름병의 발병 원인이 된다.
또한, 본 발명은 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P), 균주, 균체, 포자, 이의 배양액, 이러한 배양물의 건조물 또는 이러한 배양물의 추출물을 제공한다.
본 발명의 명세서에 있어서, 용어 '균체'는 균주의 파쇄된 세포벽 분획, 사균, 또는 건조균을 포함하는 의미이다. 배양액 중의 배양배지를 제거하고 농축된 균체만을 회수하기 위해 원심분리 또는 여과과정을 거칠 수 있으며 이러한 단계는 통상의 기술자의 필요에 따라 수행할 수 있다. 농축된 균체는 통상적인 방법에 따라 냉동하거나 냉동 건조하여 그 활성을 잃지 않도록 보존할 수 있다.
본 발명의 명세서에 있어서, 용어 '배양물의 추출물'은 배양물을 다양한 유기용매를 이용해 다양한 생리활성물질이 포함되도록 추출한 것을 의미하며, 이에 한정되는 것은 아니지만, C1-4 알코올(예를 들어, 메탄올, 에탄올, 부탄올 등), 아세톤 및 에틸아세테이트로 이루어진 군으로부터 선택된 유기용매를 단독으로 사용하거나 2종 이상을 순차적으로 사용하여 추출을 수행할 수 있다.
본 발명의 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P) 균주는 통상적인 바실러스 속 미생물의 배양법에 의해 대량으로 배양할 수 있다. 배양 배지로는 탄소원, 질소원, 비타민 및 미네랄로 구성된 배지를 사용할 수 있다. 상기 배양을 위한 배지에는 고체배지 및 액체배지가 모두 포함될 수 있다. 예를 들어, NA(Nutrient Agar) 또는 TSA(Tryptic Soy Agar)와 같은 고체배지를 사용할 수 있으며, 액체 배지로는 균주가 포함되어 있는 NB(Nutrient Broth), KB(King's medium B Broth), PSB(Peptone Sucrose Broth), TSB(Tryptic Soy Broth)를 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. 바람직한 배지로는 PSB 배지를 사용할 수 있다. 상기 PSB 배지는 박토-펩톤(bacto-Peptone) 7 내지 13 g/l, 수크로오스(Sucrose) 7 내지 13 g/l, 및 소듐 글루타메이트(Sodium glutamate) 0.5 내지 1.5 g/l 을 포함할 수 있으며, 바람직하게는 박토-펩톤(bacto-Peptone) 8 내지 12 g/l, 수크로오스(Sucrose) 8 내지 12 g/l, 및 소듐 글루타메이트(Sodium glutamate) 0.8 내지 1.2 g/l 을 포함할 수 있다. 배양은 통상의 배양 조건으로 수행할 수 있으며, 예를 들어, 27℃에서 48시간 이상 동안 배양할 수 있고, 바람직하게는 96시간 이상 배양할 수 있으며, 가장 바람직하게는 96시간 이상 240시간 이하 동안 배양할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 본 발명은 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)를 유효성분으로 포함하는 무름병 방제용 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 조성물에 있어서, 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)의 균주, 균체, 포자, 이의 배양액, 이러한 배양물의 건조물 또는 이러한 배양물의 추출물이 상기 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)를 대체하거나 또는 상기 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)에 추가하여 처리될 수 있다. 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)의 생균, 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)의 균주, 균체, 포자, 이의 배양액, 이러한 배양물의 건조물 또는 이러한 배양물의 추출물 중 어느 것을 하나 이상 선택하여 처리할지 여부는 육묘 환경, 대상 식물의 종류 또는 경제성 등을 고려하여, 통상의 기술자가 적절히 선택할 수 있다.
본 발명에 따른 무름병 방제용 조성물은 무름병이 발생할 수 있는 채소 및 과일들, 예를 들어, 상추, 무, 배추, 양배추, 마늘, 양파, 파, 토마토, 고구마, 감자 등에 이용될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 특히, 본 발명은 펙토박테리움 카로토보룸 아종 카로토보룸(Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum)으로 인해 발병되는 배추 또는 상추의 무름병 방제에 효과적이다.
또한, 본 발명은 채소 무름병 방제용 조성물을 살포 또는 도포하는 단계를 포함하는 채소 무름병 방제 방법을 제공한다.
본 발명의 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)는 예컨대 식물 전체에의 처리, 식물근(root) 처리, 식물 종자 처리, 번식기 중의 식물 조직 처리, 또는 식물 파종이나 식수 전후에 식물 병해 방제용 매체에 포함시켜 처리하는 방법이 포함될 수 있으며, 이에 제한되지 않고, 당업계 공지된 다양한 방법으로 상기 식물 내지 식물 주변 토양에 처리될 수 있다. 또한, 상기 식물 내지 식물 주변 토양에의 처리는 살포, 도포, 관주, 인필트레이션, 분무, 주사, 코팅, 더스팅 또는 침지 등 당업계 공지된 다양한 방법으로 수행될 수 있으며, 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)의 상태, 육묘 환경, 계절, 대상 식물의 종류, 대상 병원균의 종류 또는 경제성 등을 고려하여 통상의 기술자가 적절히 선택할 수 있다.
한편, 본 발명의 조성물은 실제 포장에서 사용하기 적합한 안정적인 제제화를 목적으로 생화학 농약으로 사용가능한 계면활성제 또는 증량제 등을 사용하여 수화제, 입상수화제, 액상수화제, 액제, 수용제, 수용성입제 또는 캡슐화제의 형태로 제조될 수 있다.
또한, 본 발명은 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P) 균주를 배양하는 단계를 포함하는 채소 무름병 방제용 조성물의 제조 방법을 제공한다. 상기 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P) 균주의 배양 방법 및 식물의 종자 전염병 방제용 조성물의 제조 방법은 당업계에 공지된 임의의 방법을 이용할 수 있으며, 특정 방법에 특별히 제한되는 것은 아니나, 바람직하게는 상기 배양은 PSB(Peptone Sucrose Broth) 배지에서 48시간 이상 배양하는 것을 특징으로 하며, 더욱 바람직하게는 PSB(Peptone Sucrose Broth) 배지에서 96시간 이상 배양할 수 있고, 더더욱 바람직하게는 96시간 이상 240시간 이하 배양할 수 있다.
상기에서 살펴본 바와 같이 본 발명에서 새롭게 분리한 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)는 무름병에 방제 효과가 있어 수확 후 농산물의 유통 및 저장 중 부패에 의한 손실을 막을 수 있고, 농작물의 무름병 방제를 위한 미생물 농약으로도 활용될 수 있다.
또한, 본 발명의 무름병균 생육 억제 또는 사멸능이 있는 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)는 항생제 대신 사용될 수 있으므로, 항생제 사용 절감을 통해 항생제 내성균 출현 가능성을 감소시키고, 환경 안전성을 높일 수 있다.
도 1은 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)가 배추 무름병균의 펙틴분해 작용을 불활성화 시키는 것을 나타낸 사진이다.
도 2는 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)의 16S rRNA gene의 염기서열을 나타낸 것이다.
도 3은 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)의 16S rRNA gene의 계통학적 위치를 나타낸 것이다.
도 4는 배지의 종류에 따른 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)의 항균활성을 검정한 결과를 나타낸 사진이다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
<실시예 1>
배추 무름병균 억제 미생물 분리 및 선발
배추 무름병이 발생한 식물이 재배되고 있는 토양으로부터 배추 무름병균에 대한 미생물을 분리하고자 하였다. 미생물의 분리를 위해 토양시료는 야산 부엽토, 식물체의 근권토양 등을 채집하여 분리하였고, 미생물의 선발은 배추 무름병균과의 대치배양에 의한 길항력 검정에 의해 1차 선발하였다. 길항력 검정에 의해 1차로 선발된 미생물을 NB(Nutrient Broth) 배지에 약 48~72 시간 배양한 후 배양여액을 원심분리하여 멤브레인 필터(pore size 0.2 ㎕)로 여과하여 PAY(Polygalacturonic acid Yeast-extract Agar) 배지에 100 ㎕를 도말한 후 원형 여과지(paper disc)에 펙토박테리움 카로토보룸 아종 카로토보룸(Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum)을 접종하여 중앙에 올려놓고 27℃에서 약 48~72 시간 배양한 후 원형 여과지(paper disc) 주변에 클리어 존(clear zone)이 형성되지 않는 미생물을 최종 선발하였다.
<실시예 2>
선발 미생물의 특성 및 동정
선발 미생물의 생육온도를 온도구배장치(Temperature Gradient Incubator 수2148, Advantec.)를 이용하여 조사한 결과, 15~37℃에서 생육이 가능하며 폭넓은 온도 범위인 25~30℃에서 잘 생장하였으며, pH 5.0~7.5 범위에서 생육이 가능하였으며 최적 pH는 5.5~6.5 이다.
선발 미생물의 동정은 DNA를 분리하여 16S rDNA gene의 염기서열을 규명하여 계통 분류학적 위치를 확인하였다. 길항미생물 바실러스속 CAB12243-2의 16S rRNA를 증폭하기 위해 하기 표 1에 기재된 프라이머를 사용하였다. 16S rRNA 유전자의 염기서열은 NCBI GeneBank의 데이터베이스와 상동성 검색을 수행하였고, 계통학적 위치를 확인하였다. 또한, 아라비노스(Arabinose), 글루코오즈(Glucose), 만니톨(Mannitol), 파라티노스(Paratinose), 람노스(Rhamnose), 수크로오스(Sucrose) 및 트레할로스(Trehalose) 등에 대한 당 이용성을 조사하였다.
구분 프라이머 서열
27F (서열번호 2) 5'-GTG CTG CAG AGA GTT TGA TCC TGG CTC AG-3'
1492r (서열번호 3) 5'-CAC GGA TCC TAC GGG TAC CTT GTT ACG ACT T-3'
16S rRNA gene의 계통학적 위치 확인에 의한 방법으로 선발된 미생물을 동정한 결과, 본 발명의 균주는 1,446bp로서, 서열번호 1의 16S rRNA의 염기서열을 나타내는 것을 특징으로 하며(도 2), 바실러스속(Bacillus sp.)과 높은 유사도를 갖음을 확인할 수 있었다. 본 균주는 클러스탈 방법 (CLUSTAL X : Thompson JD et al., Nuc. Acid. Res. 25: 4876-82, 1997)에 의해 계통수를 조사하여 분류학적 위치를 확인할 수 있었다(도 3). 또한, 선발 미생물의 당 이용성 검정결과 글루코오즈(Glucose)와 트레할로스(Trehalose)를 이용하여 증식하는 특성을 가지고 있었으나, 아라비노스(Arabinose), 만니톨(Mannitol), 파라티노스(Paratinose), 람노스(Rhamnose), 수크로오스(Sucrose) 등을 이용하지 못하는 특성을 가지고 있었다(표 2).
Figure 112015028877888-pat00001
이와 같이 얻은 미생물은 펙토박테리움 카로토보룸 아종 카로토보룸(Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum)에 특이적으로 발병 억제 효과가 우수하고, 이를 바실러스속 CAB12243-2(Bacillus sp. CAB12243-2)로 명명하였으며, KACC(국립농업과학원 농업유전자원센터)에 2015년 01월 19일자로 기탁하여 기탁번호 KACC92027P를 부여받았다.
<실시예 3>
선발 미생물의 항균활성 검정
선발 미생물의 항균활성 검정을 위하여 선발 미생물을 NB(Nutrient Broth, BD DifcoTM 234000, USA), KB(King's medium B Broth, Proteos peptone 20 g/l, K2HPO4 1.5 g/l, MgSO4·7H2O 1.5 g/l, Glycerol 10 ml/l), PSB(Peptone Sucrose Broth, bacto-Peptone 7 내지 13 g/l, Sucrose 7 내지 13 g/l, Sodium glutamate 0.5 내지 1.5 g/l), TSB(Tryptic Soy Broth, DifcoTM 211825, USA) 배지에 24, 48, 72, 96시간 배양하면서 24시간 간격으로 E-tube 에 배양액을 500 ㎕ 취하여 같은 양의 클로로포름(Chloroform)을 혼합하여 충분히 흔든 후, 클로로포름 층을 50 ㎕ 취하여 원형 여과지(paper disc)를 처리한 후 미리 준비된 펙토박테리움 카로토보룸 아종 카로토보룸(Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum)을 도말해 놓은 NA 배지 중앙에 원형 여과지(paper disc)를 올려놓고 24~48 시간 배양한 후 원형 여과지(paper disc) 주변의 클리어 존(clear zone) 형성 여부로 항균활성 검정을 수행하였다.
검정을 수행한 결과, 선발 미생물 바실러스속 CAB12243-2(Bacillus sp. CAB12243-2)는 PSB 배지에서 96시간 이상 배양하였을 때 가장 좋은 항균활성을 나타냈다(도 4). 이러한 결과는 선발 미생물 바실러스속 CAB12243-2(Bacillus sp. CAB12243-2) 균주를 대량배양할 때 PSB 배지에서 96시간 이상 배양하여 농가에 보급하면 방제 효과가 더욱 높아질 것으로 판단된다.
<실시예 4>
생물적 방제 효과 검정
생물적 방제 효과를 검정하기 위하여 펙토박테리움 카로토보룸 아종 카로토보룸(Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum)을 NB 배지에서 72시간 배양하여 병원균의 농도를 108 세포수/㎖ 이상으로 조정하여 배추에 상처접종한 후 선발 미생물(109 세포수/㎖ 이상)을 10배로 희석한 후 10일 간격으로 3회 엽면살포하여 방제 효과를 조사하였다. 방제 효과 검정은 봄배추와 가을배추에 2회 실시하였고, 봄배추에서는 미생물 처리방법에 따른 방제효과를 검정하였으며, 가을배추에서는 봄배추에서 효과가 우수한 처리방법을 선택하여 방제 효과 검정시험을 수행하였다.
검정시험을 수행한 결과, 봄배추에서의 미생물 처리방법에 따른 생물적 방제 효과 검정결과 선발된 바실러스속 CAB12243-2(Bacillus sp. CAB12243-2)는 무름병 발병 전·후 처리시 무처리 대비 방제효과가 73.0%로 가장 양호하였으나, 발병 후 처리의 방제효과 61.6%와 통계처리 결과 유의차가 없어 경제적으로 발병 후 처리가 유리할 것으로 판단되었다(표 3).
[수학식]
방제가(%) = {(1-처리구의 병반면적율/무처리구의 병반면적율)×100}
Figure 112015028877888-pat00002
또한 가을배추에서의 생물적 방제 효과 검정결과 선발된 바실러스속 CAB12243-2(Bacillus sp. CAB12243-2)의 가을배추 무름병 방제효과는 68.9%로 조사되었다(표 4).
Figure 112015028877888-pat00003
국립농업과학원 농업유전자원센터 KACC92027P 20150119
<110> CHUNGCHEONGNAMDO(PROVINCE) <120> Biological control of soft rot on Chinese cabbage using Bacillus sp. CAB12243-2 <130> P14-411 <160> 3 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 1040 <212> DNA <213> Bacillus sp. CAB12243-2 <400> 1 ccaaaacttg tcaccttagg cggctggctc cataaaggtt accccaccga cttcgggtgt 60 tacaaactct cgtggtgtga cgggcggtgt gtacaaggcc cgggaacgta ttcaccgcgg 120 catgctgatc cgcgattact agcgattcca gcttcatgta ggcgagttgc agcctacaat 180 ccgaactgag aacggtttta tgagattagc tccacctcgc ggtcttgcag ctctttgtac 240 cgtccattgt agcacgtgtg tagcccaggt cataaggggc atgatgattt gacgtcatcc 300 ccaccttcct ccggtttgtc accggcagtc accttagagt gcccaactta atgatggcaa 360 ctaagatcaa gggttgcgct cgttgcggga cttaacccaa catctcacga cacgagctga 420 cgacaaccat gcaccacctg tcactctgct cccgaaggag aagccctatc tctagggttt 480 tcagaggatg tcaagacctg gtaaggttct tcgcgttgct tcgaattaaa ccacatgctc 540 caccgcttgt gcgggccccc gtcaattcct ttgagtttca gccttgcggc cgtactcccc 600 aggcggagtg cttaatgcgt taacttcagc actaaagggc ggaaaccctc taacacttag 660 cactcatcgt ttacggcgtg gactaccagg gtatctaatc ctgtttgctc cccacgcttt 720 cgcgcctcag tgtcagttac agaccagaaa gtcgccttcg ccactggtgt tcctccatat 780 ctctacgcat ttcaccgcta cacatggaat tccactttcc tcttctgcac tcaagtctcc 840 cagtttccaa tgaccctcca cggttgagcc gtgggctttc acatcagact taagaaacca 900 cctgcgcgcg ctttacgccc aataattccg gataacgctt gccacctacg tattaccgcg 960 gctgctggca cgtagttagc cgtggctttc tggttaggta ccgtcaaggt gccagcttat 1020 tcaactagca cttgttcttc 1040 <210> 2 <211> 29 <212> DNA <213> primer <400> 2 gtgctgcaga gagtttgatc ctggctcag 29 <210> 3 <211> 31 <212> DNA <213> primer <400> 3 cacggatcct acgggtacct tgttacgact t 31

Claims (11)

  1. 채소 무름병에 대해 방제 효과를 발휘하며,
    당 이용성에 있어서 글루코오즈(Glucose) 및 트레할로스(Trehalose)를 이용하여 증식하며, 아라비노스(Arabinose), 만니톨(Mannitol), 파라티노스(Paratinose), 람노스(Rhamnose), 수크로오스(Sucrose)를 이용하여 증식하지 못하는 특성을 갖는 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P).
  2. 제1항에 있어서 상기 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P)는 하기의 특성 중 하나 이상 갖는 것을 특징으로 하는 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P):
    i) 적정 생육 온도는 15℃~37℃;
    ii) 적정 생육 pH는 5~7.5; 또는
    iii) 서열번호 1의 16S rRNA를 포함.
  3. 당 이용성에 있어서 글루코오즈(Glucose) 및 트레할로스(Trehalose)를 이용하여 증식하며, 아라비노스(Arabinose), 만니톨(Mannitol), 파라티노스(Paratinose), 람노스(Rhamnose), 수크로오스(Sucrose)를 이용하여 증식하지 못하는 특성을 갖는 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P) 균주 또는 그의 배양액을 유효성분으로 포함하는 채소 무름병 방제용 조성물.
  4. 제3항에 있어서,
    상기 채소는 배추인 것을 특징으로 하는 채소 무름병 방제용 조성물.
  5. 제3항에 있어서,
    상기 채소 무름병은 펙토박테리움 카로토보룸(Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum)으로 인해 발병되는 것을 특징으로 하는 채소 무름병 방제용 조성물.
  6. 삭제
  7. 당 이용성에 있어서 글루코오즈(Glucose) 및 트레할로스(Trehalose)를 이용하여 증식하며, 아라비노스(Arabinose), 만니톨(Mannitol), 파라티노스(Paratinose), 람노스(Rhamnose), 수크로오스(Sucrose)를 이용하여 증식하지 못하는 특성을 갖는 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P) 균주 또는 그의 배양액을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 펙토박테리움 카로토보룸(Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum) 증식 억제 또는 사멸용 조성물.
  8. 제3항의 채소 무름병 방제용 조성물을 살포 또는 도포하는 단계를 포함하는 채소 무름병 방제 방법.
  9. 제3항에 기재된 바실러스속 CAB12243-2(KACC92027P) 균주를 배양하는 단계를 포함하는 채소 무름병 방제용 조성물의 제조 방법.
  10. 제9항에 있어서,
    상기 배양은 PSB(Peptone Sucrose Broth) 배지에서 96시간 이상 배양하는 것을 특징으로 하는 채소 무름병 방제용 조성물의 제조 방법.
  11. 제10항에 있어서,
    상기 PSB(Peptone Sucrose Broth) 배지는 박토-펩톤(bacto-Peptone) 7 내지 13 g/l, 수크로오스(Sucrose) 7 내지 13 g/l, 및 소듐 글루타메이트(Sodium glutamate) 0.5 내지 1.5 g/l 을 포함하는 것을 특징으로 하는 채소 무름병 방제용 조성물의 제조 방법.
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