KR101729326B1 - 이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물의 제조방법 - Google Patents
이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물의 제조방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 (a) 콩 초미세 분말에 솔루플러스(soluplus)를 혼합하여 혼합물을 제조하는 단계; (b) 상기 (a)단계의 제조한 혼합물을 압출 성형한 후 건조하는 단계; 및 (c) 상기 (b)단계의 건조한 혼합물을 열수 추출하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물의 제조방법, 상기 방법으로 제조된 콩 추출물 및 상기 콩 추출물을 함유하는 가공식품 및 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 (a) 콩 초미세 분말에 솔루플러스(soluplus)를 혼합하여 혼합물을 제조하는 단계; (b) 상기 (a)단계의 제조한 혼합물을 압출 성형한 후 건조하는 단계; 및 (c) 상기 (b)단계의 건조한 혼합물을 열수 추출하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물의 제조방법, 상기 방법으로 제조된 콩 추출물 및 상기 콩 추출물을 함유하는 가공식품 및 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.
인류역사상 식품 중에 가장 완벽한 식품이라 알려진 콩은 단백질 함량이 매우 높고, 비타민, 칼슘, 레시틴, 이소플라본, 피토에스트로겐, 사포닌, 피니톨 등여러 생리활성 물질을 함유하고 있어 피로 회복 효능, 혈당 저하 효능, 항암 효능, 심혈관 질환의 예방 효능 등이 있는 것으로 알려져 있다. 그러나 난용성인 콩은 물로는 유용성분이 제대로 추출되지 않아 주로 유기용매를 이용하여 추출한 후 사용하고 있는 실정이다.
난용성 약물들의 용해도를 증진시키기 위한 방법 중 하나로 약물의 입자크기를 감소시켜 가용 표면적을 증가시키는 것이 있다. 하지만 분쇄에 의한 입자크기의 감소는 가용분말이 서로 뭉치는 경향을 보이고 공기입자가 오히려 용해를 방해하는 경우를 나타내기도 하였다. 이에 일정 수준으로 용해도를 높일 수 있는 입자크기의 약물에 용해도가 높은 수용성 고분자 전달체를 혼합함으로써 약물의 용해도를 극적으로 상승시키는 연구가 이루어지고 있다.
이처럼 난용성 약물이 수용성 전달체와의 분자수준의 상호작용으로 인해 분산됨으로써 약물의 난용성질을 가용성질로 바꿀 수 있는 기술을 고체분산화로 정의하고 있다. 현재 고체분산체 형성을 위해 이용되는 수용성 고분자 전달체로는 폴리에틸렌글리콜(PEG), 폴리비닐피롤리돈(PVP), 폴리비닐알코올(PVA), 크로스포비돈, 비닐 피롤리돈-바이닐아세테이드 공중합체 (PVP-PVA), 셀룰로오스 유도체 등이 있다. 고분자 전달체의 이용 조건은 무독성으로 약물의 약리효과 및 구조를 저해시키지 않으며 고분자 자체의 약리효과가 없어야 한다.
솔루플러스(Soluplus)는 그래프트 공중합체(graft copolymer)이며 분자량은 9만에서 14만이다. 계면활성제와 유사한 작용을 나타내기 때문에 임계미셀농도를 가지고 있다. 물에서 용해성이 높으며 아세톤(acetone)에서는 50% 이상, 메탄올(MeOH)에서는 54% 이상, 에탄올(EtOH)에서는 25% 이상일 때 용해성을 나타낸다.
압출 공정은 온도, 함수율, 압력, 전단에 의해 단일 공정에서 연속으로 가공하는 방법으로, 압출 공정을 통해 전분, 단백질 등을 포함한 생물 고분자 물질들이 전단력과 열 등에 의해 가공되어 단백질 변성과 같은 수많은 규칙-불규칙 전이 변화를 나타내는 열기계적 공정이다. 압출공정의 가장 큰 장점이자 특징은 간단한 공정을 통해 약물/전달체 혼합물이 동시에 용융 및 혼합되면서 압출이 되고, 환경문제와 경제적인 부분의 이점을 가진 것으로 나타나면서 고체분산체의 제조 방법으로서 높은 잠재성을 가지고 있다고 평가되고 있다.
한국등록특허 제0733056호에는 수용성 콩류 추출물의 제조방법이 개시되어 있고, 한국등록특허 제1233115호에는 콩으로부터 클로로필을 다량 수득하는 방법이 개시되어 있으나, 본 발명의 이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물의 제조방법과는 상이하다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명자는 물로는 유효성분이 잘 추출되지 않은 콩의 추출 효율을 향상시키고 영양성분 및 기능성이 증진된 콩 추출물을 제조하기 위해, 콩 초미세 분말에 솔루플러스(soluplus)를 적정량 혼합한 혼합물을 압출성형 처리한 후 물로 추출하여 추출 효율, 이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물과 상기 콩 추출물을 함유하는 가공식품을 제공함으로써 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 (a) 콩 초미세 분말에 솔루플러스(soluplus)를 혼합하여 혼합물을 제조하는 단계; (b) 상기 (a)단계의 제조한 혼합물을 압출 성형한 후 건조하는 단계; 및 (c) 상기 (b)단계의 건조한 혼합물을 열수 추출하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물을 함유하는 가공식품을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 방법으로 제조된 콩 추출물은 솔루플러스(soluplus) 및 압출성형 처리를 통해 물 추출물 내의 이소플라본 함량과 항산화 및 미백 활성과 같은 기능성이 증진되어, 상기 콩 추출물을 가공식품, 화장품 및 의약품 등에 용이하게 사용할 수 있다.
도 1은 가공조건에 따른 농도별 서리태(A) 및 대풍콩(B) 추출물의 DPPH 라디칼 소거능을 비교한 그래프이다.
도 2는 가공조건에 따른 농도별 서리태(A) 및 대풍콩(B) 추출물의 무세포계에서 티로시나아제 활성을 비교한 그래프이다.
도 3은 가공조건에 따른 농도별 서리태(A) 및 대풍콩(B) 추출물의 세포 내 티로시나아제 활성을 비교한 그래프이다.
도 4는 가공조건에 따른 농도별 서리태(A) 및 대풍콩(B) 추출물의 멜라닌 함량을 비교한 그래프이다.
도 1 내지 4의 Control: 무처리, HME 80℃: 초미세 분말을 80℃ 조건에서 압출 성형한 후 물 추출, HME 130℃: 초미세 분말을 130℃ 조건에서 압출 성형한 후 물 추출, soluplus 30%+HME 80℃: 초미세 분말에 솔루플러스를 30% 혼합하고 80℃ 조건에서 압출 성형한 후 물 추출, soluplus 30%+HME 130℃: 초미세 분말에 솔루플러스 30% 혼합하고 130℃ 조건에서 압출 성형한 후 물 추출한 추출물을 의미한다.
도 2는 가공조건에 따른 농도별 서리태(A) 및 대풍콩(B) 추출물의 무세포계에서 티로시나아제 활성을 비교한 그래프이다.
도 3은 가공조건에 따른 농도별 서리태(A) 및 대풍콩(B) 추출물의 세포 내 티로시나아제 활성을 비교한 그래프이다.
도 4는 가공조건에 따른 농도별 서리태(A) 및 대풍콩(B) 추출물의 멜라닌 함량을 비교한 그래프이다.
도 1 내지 4의 Control: 무처리, HME 80℃: 초미세 분말을 80℃ 조건에서 압출 성형한 후 물 추출, HME 130℃: 초미세 분말을 130℃ 조건에서 압출 성형한 후 물 추출, soluplus 30%+HME 80℃: 초미세 분말에 솔루플러스를 30% 혼합하고 80℃ 조건에서 압출 성형한 후 물 추출, soluplus 30%+HME 130℃: 초미세 분말에 솔루플러스 30% 혼합하고 130℃ 조건에서 압출 성형한 후 물 추출한 추출물을 의미한다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은
(a) 콩 초미세 분말에 솔루플러스(soluplus)를 혼합하여 혼합물을 제조하는 단계;
(b) 상기 (a)단계의 제조한 혼합물을 압출 성형한 후 건조하는 단계; 및
(c) 상기 (b)단계의 건조한 혼합물을 열수 추출하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 콩 추출물의 제조방법에서, 상기 (a)단계의 콩은 서리태 또는 대풍콩일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 콩 추출물의 제조방법에서, 상기 기능성의 증진은 항산화 및 미백 활성의 증진 효과일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 콩 추출물의 제조방법에서, 상기 (a)단계의 솔루플러스(soluplus)는 폴리비닐 카프로락탐-폴리비닐 아세테이트-폴리에틸렌 글리콜 그래프트 공중합체(polyvinyl capralactam-polyvinyl acetate-polyethylene glycol graft copolymer)이며, 바람직하게는 중량평균분자량이 90,000 내지 140,000g/mol인 하기 화학식 1의 공중합체이다. 솔루플러스는 초미세 분쇄한 콩의 분산 안전성 및 용해도를 향상시켜 추출 수율을 향상시키고, 이소플라본 함량이 높고 생리활성이 증진된 콩 추출물로 제조할 수 있었다.
식 중, l은 10 내지 10,000이며, 바람직하게는 100 내지 900이다. 또한, m은 20 내지 20,000이며, 바람직하게는 150 내지 1,500이다. 또한, n은 30 내지 30,000이며, 바람직하게는 300 내지 3,000이다.
또한, 본 발명의 콩 추출물의 제조방법에서, 상기 (a)단계의 혼합물은 바람직하게는 콩 분말에 콩 분말 중량대비 솔루플러스(soluplus)를 25~35% 첨가한 후 혼합하여 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 콩 분말에 콩 분말 중량대비 솔루플러스(soluplus)를 30% 첨가한 후 혼합하여 제조할 수 있다. 상기와 같은 방법으로 제조된 혼합물을 압출 성형한 후 추출할 경우, 기능성이 증진되어 품질이 우수한 콩 추출물로 제조할 수 있었다.
또한, 본 발명의 콩 추출물의 제조방법에서, 상기 (b)단계의 압출 성형은 바람직하게는 110~150℃의 온도로 조절된 압출성형기를 이용하여 압출 성형할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 130℃의 온도로 조절된 압출성형기를 이용하여 압출 성형할 수 있다. 상기와 같은 온도 조건에서 압출성형하는 것이 제조된 콩 추출물의 유효성분과 항산화 및 미백 활성 등과 같은 기능성을 더욱 향상시킬 수 있었다.
본 발명의 콩 추출물의 제조방법은 보다 구체적으로는
(a) 콩 초미세 분말에 콩 분말 중량대비 솔루플러스(soluplus)를 25~35% 첨가한 후 혼합하여 혼합물을 제조하는 단계;
(b) 상기 (a)단계의 제조한 혼합물을 스크류 회전속도 200~300 rpm 및 110~150℃의 온도로 조절된 압출성형기를 이용하여 압출 성형한 후 건조하는 단계; 및
(c) 상기 (b)단계의 건조한 혼합물을 70~90℃에서 1~3시간 동안 1~3회 열수 추출하는 단계를 포함할 수 있으며,
더욱 구체적으로는
(a) 1~100 ㎛의 크기로 초미세 분쇄한 콩 초미세 분말에 콩 분말 중량대비 솔루플러스(soluplus)를 25~35% 첨가한 후 혼합하여 혼합물을 제조하는 단계;
(b) 상기 (a)단계의 제조한 혼합물을 스크류 회전속도 200~300 rpm 및 110~150℃의 온도로 조절된 압출성형기를 이용하여 압출 성형한 후 35~45℃에서 건조하는 단계; 및
(c) 상기 (b)단계의 건조한 혼합물을 70~90℃에서 1~3시간 동안 1~3회 열수 추출하는 단계를 포함할 수 있으며,
가장 구체적으로는
(a) 1~100 ㎛의 크기로 초미세 분쇄한 콩 초미세 분말에 콩 분말 중량대비 솔루플러스(soluplus)를 30% 첨가한 후 혼합하여 혼합물을 제조하는 단계;
(b) 상기 (a)단계의 제조한 혼합물을 스크류 회전속도 250 rpm 및 130℃의 온도로 조절된 압출성형기를 이용하여 압출 성형한 후 40℃에서 건조하는 단계; 및
(c) 상기 (b)단계의 건조한 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 2회 열수 추출하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명의 콩 추출물의 제조방법에서, 상기 (a)단계의 초미세 분쇄 시 -16~-20℃의 온도 조건에서 초미세 분쇄할 수 있다. 상기와 같이 낮은 온도에서 파쇄하는 것이 초미세 파쇄 시 콩이 뭉치는 현상과 영양소 파괴를 최소화하면서 용이하게 분말화할 수 있었다. 또한, 상기와 같은 입경 크기를 지니는 콩 분말을 이용할 경우 용해도가 우수하고 인체에 영양성분 흡수가 용이하며, 추출물 제조 시 유효성분의 추출 효율을 더욱 향상시킬 수 있었다.
본 발명은 또한, 상기 방법으로 제조된 이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물을 제공한다.
본 발명은 또한, 상기 이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물을 함유하는 가공식품을 제공한다. 상기 가공식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 떡류, 누룽지, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 가공식품을 모두 포함한다.
본 발명은 또한, 상기 이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 피부 미백용 화장료 조성물은 유효 성분으로서 상기 이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수 (스킨), 영양 화장수 (밀크로션), 영양 크림, 맛사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
1. 실험 재료
본 실험에 이용한 서리태와 대풍콩 품종은 강원도에서 2012년 수확한 후 사용하였다. 이소플라본 함량 측정을 위한 다이진(daidzin), 글리시틴(glycitin), 제니스틴(genistin), 다이제인(daidzein), 글리시테인(glycitein), 제니스테인(genistein)은 SIGMA사(Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA))에서 구입하여 이용하였다.
2.
초미분쇄
공정을 통한 콩의 초미세
분말화
서리태, 대풍콩의 초미세 분말화는 유체 에너지 밀(fluid energy mill) 타입 시스템(Low temperature ultra fine pulverizer, Korea energy technical, Korea)을 이용하여 투입속도 15 mHz, 분쇄속도 42 mhz, 진공속도 45 mhz, 냉각온도 -18℃ 조건으로 1~100 ㎛ 이내로 초미세 분쇄하였다.
3. 수용성 고분자 전달체 첨가
실험에 이용한 수용성 고분자 전달체는 솔루플러스(soluplus)를 이용하였다. 서리태, 대풍콩 각각의 초미세 분말에 솔루플러스(soluplus)를 무게 대비 30%의 비율로 혼합하였다.
4. 압출 공정 조건
압출 공정 조건은 스크류 구성은 2 로브로 스크류 길이와 직경비(L/D ratio)는 29:1이었고 사출구는 직경이 3.0 mm인 것을 사용하였다. 압출성형 공정변수는 배럴온도이며 배럴의 온도는 80℃, 130℃로 2조건을 이용하였고, 수분 함수율은 0%로 하였다. 스크류 회전 속도는 250 rpm, 원료 사입량은 80 g/min으로 고정하였다. 제조된 시료는 40℃에서 열풍 건조하였다.
5. 용매별 콩 추출물 제조
서리태, 대풍콩 종실 3 g을 각각 추출용매를 증류수, 메탄올로 달리하여 80℃에서 2시간 동안 2회 반복 추출하였다. 각 추출물은 회전식 증발농축기(EYELA, N-1000, Tokyo, Japan)로 농축한 후 동결건조(EYELA, FDU-1200, Tokyo, Japan) 후 실험에 이용하였다.
6. 이소플라본 함량 측정
이소플라본 함량 측정을 위해 분석용 시료는 HPLC용 메탄올에 용해한 후 0.45 ㎛ 시린지 필터(Toyo Roshi Kaisha, Japan)로 여과하여 분석하였으며, HPLC 분석기기는 Shimadzu LC system(CBM-20A; Shimadzu Co, Ltd., Kyoto, Japan)을 이용하였다. 컬럼은 C18 컬럼(Synergi 4u MAX-RY, 150 × 4.6 mm, 4 micron Phenomenex. Inc., Torrance, CA, USA)을 사용하였다. 유속은 1.0 ㎖/min으로 흡광도 280 nm에서 측정하였다.
7.
DPPH
자유
라디칼
소거능
각각의 추출물은 80% 메탄올을 이용하여 농도별로 용해하여 이용하였다. 각 추출물 용액 1 ㎖을 시험관에 첨가한 후 0.15 mM DPPH 용액(80% MeOH에 용해) 4 ㎖을 가하여 균일하게 혼합한 다음 실온에서 30분 방치한 후 517 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. DPPH 라디칼 소거능(%)은 시료첨가구와 무첨가구의 흡광도 차를 백분율(%)로 표시하였다.
DPPH 라디칼 소거능(%) = [(1-A/B) × 100]
A: 시료의 흡광도, B: 대조구의 흡광도
8. 총 폴리페놀 함량 측정
총 폴리페놀 화합물의 함량은 페놀성 물질이 인몰리브덴산(phosphomolybdate)과 반응하여 청색을 나타내는 현상을 이용한 Folin-Denis법을 약간 변형시켜 측정하였다. 시료 추출물 0.2 ㎖을 시험관에 취하여 증류수 1.8 ㎖를 첨가하여 잘 혼합하고 3분간 실온에서 방치하였다. Na2CO3 포화용액 0.4 ㎖를 첨가하여 혼합하고 증류수 1.4 ㎖를 첨가하여 총 4 ㎖로 만든 후, 실온에서 1시간 방치하여 상층액을 725 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 총 폴리페놀 화합물은 탄닌산을 이용하여 작성한 표준곡선으로부터 함량을 구하였다.
9. 티로시나아제(
무세포계
) 활성
티로시나아제 효소 활성은 0.1M 인산완충액(pH 6.8) 0.2 ㎖, 5mM L-DOPA 용액 0.2 ㎖ 및 시료 물 추출물 0.5 ㎖의 혼합액에 티로시나아제(250 U/㎖) 0.1 ㎖를 첨가하여 35℃에서 2분간 반응시킨 다음 475 nm에서 측정하였다.
10. 세포 배양
마우스 흑색종 세포(B16BL6 melanoma cells)와 인간 피부 세포(CCD-986sk)를 한국 세포주 은행에서 분양받은 뒤 25mM HEPES, 25mM NaHCO3, MEM(Mininum essential) 90%와 열 불활성화 FBS(heat inactivated fetal bovine serum) 10%를 배양액으로 37℃의 CO2 인큐베이터에서 배양하였다.
11. 세포 내 티로시나아제 활성 측정
세포를 24-웰 플레이트에 1×105 cells/㎖로 분주한 뒤 24시간 동안 배양하였다. 24시간 후 FBS와 항생제가 첨가되지 않은 배지에 콩 추출물을 농도별로 제조하여 세포에 처리하였고 24시간 동안 더 배양하였다.
시료 처리 배지를 제거한 뒤 pH 6.8의 PBS(phosphate-buffer saline)로 세척하였고, 1% Triton X-100가 함유된 PBS를 웰에 첨가한 뒤 셀 스크랩퍼(cell scraper)로 웰에 붙어 있는 세포를 떼어내어 1.5 ㎖ 튜브에 모아 -70℃에 급속 냉동시킨 후 해동시켰으며 이와 같은 방법을 3번 반복하여 세포막을 파괴하였다. 10,000×g에서 10분간 원심분리한 후 상층액을 티로시나아제 활성 측정을 위한 효소원과 단백질 측정을 위한 시료로 사용하였다. Bio-Rad protein kit로 단백질 정량을 하였으며, 티로시나아제 활성 측정은 10 mM L-dopa 200 ㎕와 0.1 M PBS(pH 6.8) 500 ㎕, 티로시나아제 효소원(세포로부터 얻은 상층액) 300 ㎕를 첨가한 후 35℃에서 1시간 배양한 후 475 nm에서 흡광도를 측정하였다.
12. 멜라닌 함량 측정
마우스 흑색종 세포(B16BL6 melanoma cells)를 24-웰 플레이트에 1×106으로 분주한 뒤 24시간 동안 배양한 후 시료 추출물을 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 배지에 함유된 시료 추출물을 제거한 후 1N NaOH를 500 ㎕ 분주하여 24시간 동안 세포를 녹인 후 100℃에서 30분간 끓인 후 450 nm에서 흡광도를 측정하였다.
13. 통계처리
실험에서 얻어진 결과의 통계적 유의성은 SPSS(statitical package for social sciences, Version 10.0, Chicago, USA) 프로그램을 이용하여 독립적인 3회 반복 실험값을 mean±SD로 표시하였고, 두 그룹간의 차이는 unpaired two-tailed t-tests로 분석하였으며 두 그룹 이상 비교는 one-way ANOVA test 후에 Duncan’s multiple range test에 의해 p<0.05 수준에서 각 실험군 간의 유의성을 검증하였다.
실시예
1: 추출 용매별 콩 추출물의 이소플라본 추출 효율 측정
콩이 함유하고 있는 12종의 이소플라본은 다양한 극성도를 지니고 있기에, 이를 모두 효과적으로 추출하기 위한 연구가 계속적으로 진행되고 있다. 많은 연구자들은 다양한 용매와 추출 기술 등을 이용하여 콩으로부터 이소플라본 추출을 하고 있지만, 효과적인 이소플라본 추출을 위해 기존의 연구에서는 대부분 유기용매를 이용하였다.
본 발명에서는 분쇄한 서리태, 대풍콩의 추출 용매에 따른 이소플라본 함량 비교 결과, 서리태, 대풍콩 2품종 모두 총 이소플라본 함량은 메탄올 추출물에서 높게 나타났다. 특히 대풍콩의 경우는 약 2배 이상의 함량 차이를 나타냈다(표 1). 이러한 결과는 물이 유기용매에 비해 추출 시 콩 내부로의 침투가 어렵고, 이소플라본 자체가 물에 대한 용해도가 낮기 때문에 메탄올보다 적게 용출되는 것으로 사료된다. 따라서 이후 실시예에서는 물에서 낮은 추출 함량을 나타냈던 콩의 이소플라본 함량을 증가시키기 위하여 서리태와 대풍콩에 다양한 가공 조건에 따른 함량 변화를 통해 최적의 조건을 탐색하고자 하였다.
실시예
2: 가공 처리에 따른
서리태
및
대풍콩
추출물의 이소플라본 함량
고체분산체 형성을 위한 압출공정은 간단한 공정을 통해 약물/전달체 혼합물이 동시에 용융 및 혼합되면서 압출이 되고, 환경문제와 경제적인 부분의 이점을 가진 것으로 나타나면서 고체분산체의 제조 방법으로서 높은 잠재성을 가지고 있다고 평가되고 있다. 이때 이용되는 전달체는 높은 온도에 안정성을 나타내야 하는데 가장 많이 쓰이는 전달체 중 하나인 PEG의 경우 대다수의 약물과 상용성이 좋으나, 특정 물질의 경우 압출 방법에 의하여 제조할 때 안정성의 문제가 제기되기도 하였다. 실험에 이용된 솔루플러스(soluplus)는 양친매성 화학구조를 가진 고분자 가용화제로써 고체 분산체 형성에 이용되는데 특히 낮은 유리전이 온도와 높은 온도에서 열 안정성을 나타내는 특징을 가지고 있어 압출 공정을 이용한 고체 분산체 제조에 적합하다고 보고되고 있다.
초미세 분쇄한 서리태 및 대풍콩 분말에 솔루플러스를 30% 첨가한 후 압출성형하고 물 추출하여 제조된 추출물의 이소플라본 함량 실험 결과, 무처리구인 대조구(control)에 비해 총 이소플라본 함량이 증가한 것을 확인하였으며, 서리태와 대풍콩 모두 80℃보다 130℃의 온도에서 압출성형하는 것이 더 높은 함량을 나타냈다. 특히, 물 추출시에 낮은 함량이 나타나거나 검출이 되지 않았던 배당체(glycoside) 형태의 이소플라본 함량이 증가하였다(표 2).
실시예
3: 콩 추출물의
DPPH
자유라디칼
소거능
각각의 가공 처리에 따른 콩 추출물의 DPPH 라디칼 억제 능력을 측정한 결과, 콩 분말에 30%의 솔루플러스(soluplus)를 혼합 후 130℃로 압출 공정을 거쳐 제조한 추출물이 가장 높은 DPPH 라디칼 억제능력을 나타냈다. 대조군(Control)으로 이용된 무처리 콩 분말의 경우 2 ㎎/㎖의 농도에서 서리태는 34.1%, 대풍콩은 32.1%의 낮은 소거 능력을 나타냈지만, 솔루플러스 혼합 후 압출공정을 통하여 고체분산체를 제조하였을 경우 2 ㎎/㎖에서 서리태는 70.8%, 대풍콩은 82.5%까지 DPPH 라디칼 억제능력이 증가하였다(도 1). 이러한 결과는 수용성 고분자 전달체에 의한 용해도의 증가로 인해 항산화 성분의 추출율의 증가 혹은 고압력, 고열에 의한 식물체 내부의 고분자 화합물이 저분자로 유리되면서 유용성분 및 생리활성의 효능이 증가한 것으로 사료된다.
실시예
4: 콩 추출물의 총 폴리페놀 함량 측정
총 폴리페놀 측정 결과, 서리태와 대풍콩 모두 가공 처리에 따라 무처리구에 비하여 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 서리태 무처리 시 5.40 ㎎/g이었지만, 압출 공정 시 80℃, 130℃의 온도에서 각각 6.52 ㎎/g, 6.60 ㎎/g으로 증가하였고, 솔루플러스 혼합 후 압출 시 80℃, 130℃에서 각각 8.71 ㎎/g, 9.82 ㎎/g으로 증가하였다. 대풍콩 역시 비슷한 경향을 나타내면서 무처리 시 9.02 ㎎/g이었지만, 압출 공정 시 80℃, 130℃에서 각각 13.40 ㎎/g, 15.83 ㎎/g으로 증가하였고, 솔루플러스 혼합 후 압출 시 80℃, 130℃에서 각각 20.10 ㎎/g, 26.29 ㎎/g으로 증가하였다(표 3). 이러한 결과는 DPPH 라디칼 억제 능력 결과와 비슷한 경향을 나타냈는데, 총 폴리페놀 함량에서 나타났듯이 이소플라본 이외에 콩이 함유하고 있는 카페인산(caffeic acid), 클로로겐산류(chlorogenic acids) 또는 토코페놀(tocoferol)과 같은 페놀계 물질들의 증가에 기인한 것으로 사료된다.
실시예
5: 콩 추출물의 티로시나아제(
무세포계
) 활성
천연의 식물 추출물을 대상으로 미백 기능성 화장품에 이용 가능한 유효추출물을 찾아내는 것이 중요하기에, 본 발명을 통해 가공 제조된 콩 추출물을 이용하여 티로시나아제 저해도, 멜라닌 함량 등을 측정하여 기능성 화장품 소재로의 이용 가능성을 확인하고자 하였다.
서리태와 대풍콩의 조파쇄 분말을 대조구(control)로 하여 압출 공정 단독 처리구, 솔루플러스와 압출 공정 혼합 처리구의 티로시나아제 활성 억제를 알아본 결과는 도 2와 같다. 서리태의 경우 무처리군인 대조구(control)의 티로시나아제(tyrosinase) 활성이 100%일 때 1 ㎎/㎖의 농도에서 압출 공정 단독 처리구는 80℃, 130℃의 압출 온도에서 각각 91%, 87%의 활성을 나타냈으며 솔루플러스와 압출 공정 혼합 처리구는 더 낮은 87%, 83%의 활성을 나타냈다.
대풍콩도 서리태와 비슷한 경향을 나타냈는데 1 ㎎/㎖의 농도에서 압출 공정 단독 처리구는 80℃, 130℃의 압출 온도에서 각각 90%, 83%의 활성을 나타냈으며 솔루플러스와 압출 공정 혼합 처리구는 더 낮은 82%, 77%의 활성을 나타내면서 서리태에 비해서는 티로시나아제 저해 능력이 더 높은 것으로 나타났다. 하지만 추출물의 농도가 0.5 ㎎/㎖로 낮아졌을 경우는 대풍콩의 솔루플러스와 압출 공정 혼합 처리구 중 130℃로 처리하였을 경우만 89%의 활성을 나타냈고, 다른 추출물의 경우는 활성을 나타내지 않았다.
실시예
6: 콩 추출물의 세포 내 티로시나아제 활성
가공 제조한 서리태, 대풍콩 추출물이 마우스 흑색종 세포(B16BL6 melanoma cells)에서의 티로시나아제 활성에 미치는 영향을 알아보았다. 측정 결과 서리태 추출물은 솔루플러스 처리와 80℃ 및 130℃에서 압출성형 시 1 ㎎/㎖의 농도에서 각각 81%, 79%의 활성을, 0.5 ㎎/㎖의 농도에서 각각 82%, 86%의 활성을 나타냈다. 대풍콩의 경우는 130℃ 압출 공정 단독 처리 추출물과 솔루플러스 및 130℃ 압출 공정 혼합 처리 추출물의 1 ㎎/㎖ 농도에서 78%, 0.5 ㎎/㎖의 농도에서 각각 82, 83%의 활성을 나타냈다. 이러한 결과는 머쉬룸 티로시나아제의 활성 억제율보다는 낮은 활성을 나타냈다(도 3).
실시예
7: 콩 추출물의 멜라닌 함량
가공 제조한 서리태, 대풍콩 추출물이 마우스 흑색종 세포(B16BL6 melanoma cells)에서의 멜라닌 함량에 미치는 영향을 조사하였다. 멜라닌 함량은 티로시나아제 활성과 비슷한 경향을 나타내면서 서리태, 대풍콩 모두 솔루플러스와 압출 공정 혼합 처리 추출물이 가장 낮은 멜라닌 함량을 나타냈다. 서리태의 경우 무처리구가 100%일 때 솔루플러스와 130℃ 압출 공정 혼합 처리 추출물 1 ㎎/㎖의 농도에서 88%를 나타냈고, 대풍콩 역시 86%로 가장 낮은 함량을 나타냈다. 또한, 솔루플러스와 압출 공정 혼합 처리 추출물의 경우는 다른 처리군에 비하여 0.5 ㎎/㎖의 농도에서 멜라닌 생성을 저해하는 것으로 나타났다(도 4).
이전 실시예에서 가공 제조한 서리태, 대풍콩 추출물이 마우스 흑색종 세포에서의 티로시나아제 활성을 억제한 결과를 확인하였는데 티로시나아제에 의해 생합성되는 멜라닌의 함량 역시 이와 비슷한 결과를 나타내는 것을 확인하였다.
Claims (11)
- (a) 1~100 ㎛의 크기로 초미세 분쇄한 콩 초미세 분말에 콩 분말 중량대비 솔루플러스(soluplus)를 25~35% 첨가한 후 혼합하여 혼합물을 제조하는 단계;
(b) 상기 (a)단계의 제조한 혼합물을 스크류 회전속도 200~300 rpm 및 110~150℃의 온도로 조절된 압출성형기를 이용하여 압출 성형한 후 35~45℃에서 건조하는 단계; 및
(c) 상기 (b)단계의 건조한 혼합물을 70~90℃에서 1~3시간씩 1~3회 열수 추출하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 이소플라본 함량과 항산화 활성 및 미백 활성의 기능성이 증진된 콩 추출물의 제조방법. - 삭제
- 제1항에 있어서, 상기 (a)단계의 솔루플러스(soluplus)는 폴리비닐 카프로락탐-폴리비닐 아세테이트-폴리에틸렌 글리콜 그래프트 공중합체(polyvinyl capralactam-polyvinyl acetate-polyethylene glycol graft copolymer)인 것을 특징으로 하는 이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물의 제조방법.
- 제3항에 있어서, 상기 폴리비닐 카프로락탐-폴리비닐 아세테이트-폴리에틸렌 글리콜 그래프트 공중합체는 하기 화학식 1의 공중합체인 것을 특징으로 하는 이소플라본 함량 및 기능성이 증진된 콩 추출물의 제조방법:
[화학식 1]
(식 중, l은 10 내지 10,000이며, m은 20 내지 20,000이며, n은 30 내지 30,000이다). - 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
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| JP2002238481A (ja) | 2001-02-16 | 2002-08-27 | Fuji Oil Co Ltd | イソフラボンを含有する麺類及びその製造法 |
| KR101380289B1 (ko) * | 2012-12-26 | 2014-04-02 | 대구가톨릭대학교산학협력단 | 검은콩, 하수오, 감태 및 다시마의 미세분말을 함유하는 용해성이 증진된 과립 또는 타블렛의 제조방법 |
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| KR20160085526A (ko) | 2016-07-18 |
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