KR101715040B1

KR101715040B1 - 효모 사카로마이세스 세레비지애 hdsy-03를 이용하여 제조된, 에스테르 성분이 강화된 증류주

Info

Publication number: KR101715040B1
Application number: KR1020150146785A
Authority: KR
Inventors: 김태완; 김재호; 김혜련; 이장은; 이은정; 안병학; 이애란; 강선희
Original assignee: 한국식품연구원
Priority date: 2015-10-21
Filing date: 2015-10-21
Publication date: 2017-03-10

Abstract

본 발명은 신규한 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) 균주를 이용하여 제조된, 에스테르 성분이 강화된 증류주에 관한 것이다. 본 발명에 따라 제조된 증류주는 알코올 발효시 신규 사카로마이세스 세레비지애 HDSY-03 균주를 이용함으로써 증류주의 주요 향미 기여 성분인 에스테르 성분이 강화되었는바, 식품산업 등 관련 산업분야에서 널리 활용될 수 있다.

Description

효모 사카로마이세스 세레비지애 HDSY-03를 이용하여 제조된, 에스테르 성분이 강화된 증류주{ESTERS-ENHANCED DISTILLED SPIRIT PRODUCED BY USING YEAST SACCHAROMYCES CEREVISIAE HDSY-03}

본 발명은 신규한 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) 균주를 이용하여 제조된, 에스테르 성분이 강화된 증류주에 관한 것이다.

증류주 제조를 위한 효모는 알코올의 생성과 함께, 증류주의 특징을 부여하는 향기 성분 생성에 매우 중요한 요소이다. 위스키, 브랜디, 럼, 진, 보드카, 데킬라와 일본의 을류소주는 모두 엄선된 효모에 의해 제조된 주류이며, 각각의 주류 특성에 맞는 최적 효모를 발굴하여 산업화하는 연구가 계속적으로 이루어지고 있다.

증류주 제조방법과 관련하여, 한국 등록특허공보 제10-0561563호에는 정제 효소를 단계적으로 사용하여 증류식 소주를 제조하는 방법으로서, 소주의 액화, 당화 및 발효 과정에서 국균을 사용하지 않음으로써 제조 시간을 단축하는 방법이 개시되어 있고, 한국 등록특허공보 제10-0415307호에는 곡류에 완두를 혼합한 원료에 백국균을 접종, 번식시켜 만든 발효제를 이용하는 것을 특징으로 하는 증류주 제조방법이 개시되어 있다.

그러나 우리나라의 증류주 제조를 위한 특성화된 효모 연구는 미진한 실정이고, 현재 산업계에서 사용하는 증류주 제조용 효모는 보드카, 위스키, 일본증류소주 제조를 위해 개발된 효모들이 주를 이루고 있으며, 균주를 수입하여 사용하므로 제조비용이 상승하게 된다.

이에 본 발명자들은 증류주 제조를 위한 특성화된 효모에 대한 연구를 거듭한 결과, 신규한 사카로마이세스 세레비지애 HDSY-03 균주가 기존 산업화 균주보다 중요 향미 성분인 에스테르의 생성능이 우수하고, 이를 이용하여 제조된 증류주의 에스테르 성분이 강화된 특성을 확인하여, 본 발명을 완성하였다.

본 발명에서는 에스테르를 생성하는 능력이 우수한 효모와 이를 이용하여 증류주의 관능에 중요 기여 성분인 에스테르 성분이 강화된 증류주를 개발하는 것을 목적으로 한다. 나아가 증류주 제조를 위해 기존의 산업화된 수입 효모를 대체함을 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 사카로마이세스 세레비지애 HDSY-03(Saccharomyces cerevisiae HDSY-03)를 이용한, 에스테르 성분이 강화된 증류주의 제조방법을 제공한다.

본 발명에 있어서, 상기 제조방법은 (a) 증자된 곡류에 백국균을 혼합 및 배양하여 입국을 제조하는 단계; (b) 입국에 효모 배양액 및 물을 혼합하여 발효시켜 1차 발효액을 제조하는 단계; (c) 1차 발효액에 증자된 전분 함유 주원료 및 물을 혼합하여 발효시켜 2차 발효액을 제조하는 단계; (d) 증류단계; 및 (e) 여과단계를 포함하는 것을 특징으로 할 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 (a) 단계의 백국균이 아스퍼질러스 루추엔시스(Aspergillus luchuensis)인 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 있어서, 상기 (b) 단계에서 바람직하게는 입국 100중량부에 대하여 1.5 내지 2.5% 부피부의 효모 배양액을 접종하고, 120 내지 140% 부피부의 물을 혼합하는 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 있어서, 상기 (c) 단계의 전분 함유 주원료가 쌀, 보리, 옥수수, 수수, 밀, 감자 및 고구마로 구성된 군에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 있어서, 상기 (c) 단계에서 바람직하게는 전분 함유 주원료의 중량부에 대하여 160 내지 180% 부피부의 물을 혼합하는 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 있어서, 상기(d) 단계에서 바람직하게는 80 내지 120℃의 온도 및 760 mmHg의 압력, 또는 40 내지 60℃의 온도 및 100 내지 150 mmHg의 압력에서 증류하는 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

나아가 본 발명은 상기 제조방법에 따라 제조된, 에스테르 성분이 강화된 증류주를 제공한다.

본 발명에 있어서, 상기 증류주는 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 적절하게 선택하여 첨가할 수 있는, 당해 분야에서 사용되는 다양한 첨가물을 추가로 포함할 수 있다.

이상에서 설명한 바와 같이, 본 발명에 따라 제조된 증류주는 신규 사카로마이세스 세레비지애 HDSY-03 균주를 이용함으로써 중요 향미 기여 성분인 에스테르 성분이 강화되었는바, 식품산업 등 관련 산업분야에서 널리 활용될 수 있다.

도 1은 본 발명의 일 구현예에 따른 증류주의 제조방법의 흐름도를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 사카로마이세스 세레비지애 HDSY-03와 동일한 종의 기준주 CBS405와 18S rRNA 염기 서열을 비교한 것이다.

이하, 본 발명을 상세히 설명하기로 한다. 다만, 본 발명은 다양한 형태로 변경되어 구현될 수 있으며, 여기에서 설명하는 구현예에 한정되는 것은 아니다.

본 발명자들은 다양한 누룩으로부터 분리된 수많은 효모 균주에서 알코올 발효력이 있고, 에스테르 계통의 향기 성분 생성능이 매우 높은 균주를 선발하였다. 이화학적, 유전학적 특성에 대한 분석을 통해 동정한 결과 동일한 종의 공지 균주 및 산업화되어 이미 사용되고 있는 균주와는 다른 신규한 균주임을 확인하였고, 이를 이용하여 증류주를 제조하였다.

신규한 균주 사카로마이세스 세레비지애 HDSY-03을 2015년 7월 10일자로 한국미생물보존센터에 기탁번호 KCCM11726P로 기탁하였다.

본 발명의 일 구현예에 따른 증류주의 제조방법의 흐름도를 도 1에 나타내었다. 도 1을 참고하여 본 발명의 증류주 제조방법의 일 구현예를 단계별로 설명하면 다음과 같다.

본 발명에 따른 사카로마이세스 세레비지애 HDSY-03 균주를 적용한 증류주를 제조하기 위하여 통상적으로 활용하는 증류주의 제조방법을 따랐다.

먼저 입국을 제조한다. 입국은 통상적인 방법에 따라 쌀 또는 보리 등의 곡류에 아스퍼질러스 루추엔시스(Aspergillus luchuensis) 백국균을 사용하여 증자한 곡류에 접종하고 항온항습기 내에서 온도 33℃, 습도 95%로 유지하면서 48시간 동안 번식시켜 사용하였다.

상기 단계에서 제조한 입국 100중량부에 대하여 120% 내지 140% 부피부의 물을 혼합하고, 1.5% 내지 2.5% 부피부의 효모 배양액을 접종하고 25℃에서 4일 내지 6일간 1차 발효를 진행하였다.

상기 단계에서 제조된 1차 발효액을 증자된 전분 함유 주원료를 혼합하고 발효시켜 술덧을 제조하였다.

상기 단계에서 제조된 1차 발효액에 상기 증자된 전분 함유 주원료를 상기 단계의 1차 발효시의 입국대비 200중량부로 하여 혼합하고, 주원료의 중량부에 대하여 160% 내지 180% 부피부의 물을 혼합한 후 온도를 25℃ 내지 30℃에서 8일 내지 12일간 2차 발효를 진행시켰다.

상기 단계에서 제조된 2차 발효액을 증류하여 증류주를 제조하였다. 상기 증류는 일반적으로 사용되는 단식 증류기를 이용하여 증류온도 80℃ 내지 120℃에서 증류압력 760mmHg(상압, 대기압)으로 증류할 수 있고, 40℃ 내지 60℃에서 증류압력 100mmHg 내지 150mmH에서 감압으로 증류할 수 있다.

본 발명에 따라 제조된 증류주는 알코올 발효시 신규 사카로마이세스 세레비지애 HDSY-03를 이용함으로써 중요 향미 기여 성분인 에스테르(Esters)의 강화로 관능적인 특성이 우수하였다.

하기의 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명의 내용을 구체화하기 위한 것일 뿐 실시예에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.

[ 실시예 ]

실시예 1. 균주의 일반적인 특성 비교

2,000㎖ 용량으로 담금을 실시하여 증류주 효모로서의 일반적인 특징인 알코올 발효력과 최종 술덧의 잔당량을 기존의 산업화되어 활용되고 있는 일본소주효모(양조협회 소주2호), 위스키효모(Fermentis M1), 보드카효모(Fermentis Ethanol Red) 균주들과 비교하였다. 2차 발효말 술덧의 알코올, pH, 산도, 잔여당의 분석 결과(3회 반복 측정하여 평균값을 나타냄), 실험 균주인 HDSY-03의 경우 산업화 균주들과 큰 차이를 보이지 않았고, 증류주 제조를 위한 발효말 술덧의 일반분석 양상을 나타냄을 확인할 수 있었다.

최종발효술덧 일반분석			실험균주	대조균주
최종발효술덧 일반분석			HDSY-03	일본소주효모	위스키효모	보트카효모
알코올 (15%이상)	%	평균	16.02	16.08	16.01	17.02
		1	15.21	16.21	16.10	17.16
		2	16.63	16.40	15.38	16.88
		3	16.23	15.64	16.54	17.02
pH (3.2~4.0)	-	평균	3.8	3.9	3.9	3.9
		1	3.8	3.9	3.8	3.9
		2	3.9	3.9	3.8	3.9
		3	3.8	3.9	3.9	3.9
산도 (4~10)	㎖	평균	8.2	8.1	7.6	7.7
		1	8.5	7.8	7.1	7.6
		2	7.6	7.6	8.2	8.0
		3	8.6	8.8	7.4	7.4
잔당 (85이하)	g/ℓ	평균	53.7	52.2	73.0	37.3
		1	59.4	51.9	72.5	23.4
		2	48.5	44.4	80.1	46.4
		3	53.3	60.2	66.4	42.2

실시예 2. 균주의 에스테르 생성능 비교

증류주의 주요한 향기 기여 성분인 에스테르는 효모의 알코올 발효시 생성되는 물질로서, 균주별로 기질 대사과정에서 알코올-아세틸-전환 효소(Alcohol Acetyl Transferase; AAT 효소)의 활성도(Activity)에 따라 그 생성량이 다르며, 증류를 통해 유출되어 증류주를 특징짓는 매우 중요한 향기 성분이 된다.

균주의 바람직한 향기성분 생성능을 확인하기 위하여, 아세틸코엔자임A(Acetyl-CoA) 기질과 아이소아밀알코올을 첨가한 인산완충액(phosphate buffer)을 준비하고, 배양효모를 접종 후 25℃에서 60분간 배양하였다. 그 후 염화나트륨(sodium chloride)을 첨가해 반응을 종료시킨 후 원심분리 후 상등액을 취해 생성된 아이소아밀아세테이트(i-amylacetate, 바나나향)의 양을 정량하였다. 생성된 1마이크로몰(μmol)의 이소아밀아세테이트의 양을 1유닛(unit)의 알코올-아세틸전환효소 활성도(alcohol acetyl transferase activity)로 정의하였다. 동일 발효 조건에서 유닛의 값이 크다는 것은 알코올을 에스테르로 전환시키는 효소의 활성이 크다는 의미이며, 결과적으로 에스테르가 발효액에 많이 생성되게 되고, 결과적으로 증류주에 주요 향미 기여 성분인 에스테르의 함량을 증가시킨다. 효모의 알코올-아세틸전환효소 활성도를 측정한 결과(3회 반복 측정하여 평균값을 나타냄), HDSY-03 균주의 효소 활성도가 가장 높았고, 위스키효모(Fermentis M1), 보드카(Fermentis Ethanol Red), 일본소주효모(양협 소주2호)의 순으로 높은 활성도를 보였다.

AAT 효소 활성		HDSY-03	일본소주효모	위스키효모	보드카효모
Unit	평균	10.29	5.85	7.07	6.26
	1	10.42	5.35	6.90	5.96
	2	9.88	5.90	7.35	6.31
	3	10.56	6.30	6.95	6.50

실시예 3. 증류주의 제조

HDSY-03 균주와 산업화효모 3균주(일본소주효모, 위스키효모, 보드카효모)를 이용하여 증류주를 제조하였다. 증류주 제조를 위한 발효 술덧의 제조는 상기에서 설명한 통상의 방법을 따랐다.

1차 발효를 위해 제조 입국 256g 및 물 333g을 섞은 후 입국 당화액에서 배양하여 10⁸/㎖ 이상의 수가 됨을 확인한 효모를 5㎖ 접종하였다. 상기 혼합액을 25℃에서 5일간 발효시켜 1차 발효액을 제조하였다.

2차 발효를 위해 준비된 쌀 513g을 세척하고 침지하여 증자한 후 냉각하여 상기에서 제조된 1차 발효액에 물 897g과 함께 첨가 혼합하고, 25℃에서 10일간 발효시켜 쌀 술덧 2,000g을 제조하였다.

상기 발효 술덧을 스테인리스로 디자인한 단식 증류기를 사용하여 내부온도 40℃에서 110mmHg로 감압 증류하였다. 감압 펌프는 다이아프램 펌프를 이용하였다. 증류 실험을 위한 증류기는 스테인리스재 5ℓ 용량의 라운드형으로 히팅맨틀 가열이 가능하게 제작하였고, 일체식 증류컬럼과 증류관, 냉각사관, 유출액을 포집하는 리시버, 감압관 트랩으로 구성하였다. 증류를 위한 초기 발효액량은 2ℓ, 초기 발효액 온도는 20 내지 25℃, 유출 증기의 냉각을 위한 냉각기의 설정 온도는 10℃가 되게 하여 15ℓ/분의 속도로 순환하게 하였다. 증류가 진행되는 중에 냉각기를 통과한 유출액의 온도는 20 내지 25℃를 정상적으로 하고, 최대 유출액 온도가 30℃가 넘지 않도록 조절하였다. 증류주는 초류를 끊지 않고 본류에 포함시켜 알코올 분이 45% 내외가 되도록 하였다. 이에 따라 알코올분 45%의 증류원액을 얻었다.

실시예 4. 증류주의 주요 에스테르(Esters) 향기 성분 분석

향기 성분 분석은 GC-MS를 이용하였다. 향기 성분이 피크 면적비율로 표시 되기 때문에, 향기 성분 함량의 비교를 위해 증류액 알코올을 20% (v/v)로 일괄 희석 후 동일한 알코올 농도로 하여 분석을 진행하였다. 시료 20㎖을 60℃에서 평형 후 SPME (Solid phase micro extraction) 방법으로 향을 포집하여 Stabilwax^ⓡ-DA column(길이 30 m × 내경 0.25 mm I.d × 필름두께 0.25 ㎛: 미국 Restek Corp. 제조)이 장착된 Hewlett-Packard 7890A GC / HP-5973N mass selective detector (MSD) (미국 Hewlett-Packard Co. 제조)를 이용하여 분석하였다. GC의 오븐 온도는 50℃에서 200℃까지 상승시켰고, 인젝터 온도는 250℃였으며, 캐리어 가스로 헬륨을 사용하였다. MSD 조건은 캐필러리 직접 계면 온도(capillary direct interface temperature)를 250℃, 이온 공급원 온도(ion source temperature) 230℃, 이온화 전압(ionization voltage)이 70eV, 질량 범위(mass range)가 33-350 a.m.u. 그리고 스캔 속도(scan rate)는 2.2 scan/sec이었다. 휘발성 향기 성분은 체류시간(retention time, RT) 40분까지 탐지(detect)된 성분들로서, 성분의 동정은 체류지수(retention indices, RI), 질량 스펙트럼(mass spectra)과 향기 특성(aroma properties)을 비교하여 확인하였다. 증류주의 주요 향기 기여 에스테르(Esters) 성분들과 관능특징 그리고 분석된 결과(단위 피크 면적 %)를 하기 표 3에 나타내었다. 그 결과, HDSY-03 효모를 이용하여 제조된 증류주의 에틸 아세테이트, 에틸 카프로에이트 등의 에스테르 성분 함량이 현저히 높은 것을 확인할 수 있었다.

Unit % Area				실험균주	대조균주
성분 (Compound)	관능향	RI	RT	HDSY-03	일본소주효모	위스키효모	보드카효모
에틸 아세테이트 (Ethyl Acetate)	솔벤트	<1100	3.44	2.41	0.54	0.92	0.63
이소부틸 아세테이트 (Isobutyl acetate)	라즈베리	1123	5.56	0.12	0.05
이소아밀 아세테이트 (Isoamyl acetate)	바나나	1218	7.94	1.09	0.38	0.92	0.39
에틸 카프로에이트 (Ethyl Caproate)	꽃향기	1319	10.92	17.57	0.25	0.56	0.34
에틸 카프릴레이트 (Ethyl Caprylate)	꽃향기	1494	16.36	4.04	3.50	5.54	3.63
에틸 카프레이트 (Ethyl Caprate)	꽃향기	1669	21.69	5.17	10.91	11.05	10.13
페네틸 아세테이트 (Phenethyl Acetate)	아카시아	1809	25.61		0.17	0.23	0.18
에틸 라우레이트 (Ethyl Laurate)	비누	1834	26.26	10.75		9.69	10.3
페네틸 알코올 (Phenethyl alcohol)	장미꽃	1884	27.58		0.15	0.19	0.24
소계				41.15	15.95	29.1	25.84
다른 성분들(Other componds)				58.85	84.05	70.9	74.16
계				100	100	100	100

실시예 5. 균주의 동정

에스테르 성분이 강화된 증류주 제조 특성을 갖는 균주인 HDSY-03의 18S rRNA 염기서열(ITS1, ITS4 프라이머를 이용)을 분석한 결과, 사카로마이세스 세레비지애(Gen bank accession number CP006441.1)와 99%의 상동성을 나타내어 사카로마이세스 세레비지애로 동정되었다. 사카로마이세스 세레비지애의 기준주(Type strain)인 CBS405와 HDSY-03 균주 간의 18S rRNA 염기 서열을 비교한 결과를 도2에 나타내었다. 또한, HDSY-03 균주의 18S rRNA 서열을 서열 번호 1에 나타내었다.

지금까지 예시적인 실시 태양을 참조하여 본 발명을 기술하여 왔지만, 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자는 본 발명의 범주를 벗어나지 않고서도 다양한 변화를 실시할 수 있으며, 그의 요소들을 등가물로 대체할 수 있음을 알 수 있을 것이다. 또한, 본 발명의 본질적인 범주를 벗어나지 않고서도 많은 변형을 실시하여 특정 상황 및 재료를 본 발명의 교시내용에 채용할 수 있다. 따라서, 본 발명이 본 발명을 실시하는데 계획된 최상의 양식으로서 개시된 특정 실시 태양으로 국한되는 것이 아니며, 본 발명이 첨부된 특허청구의 범위에 속하는 모든 실시 태양을 포함하는 것으로 해석되어야 한다.

기탁기관명 : 한국미생물보존센터(국외)

수탁번호 : KCCM11726P

수탁일자 : 2015710

<110> Korea Food Research Institute <120> ESTERS-ENHANCED DISTILLED SPIRIT PRODUCED BY USING YEAST SACCHAROMYCES CEREVISIAE HDSY-03 <130> IPDB-55664 <160> 1 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 765 <212> DNA <213> Saccharomyces cerevisiae <400> 1 tttttttttt cccccttccg cttttgggga ccctcgaagg atcattaaag aaatttaata 60 attttgaaaa tggaattttt tttttttgtt ttggcaagag catgagagct tttactgggc 120 aagaagacaa gagatggaga gtccagccgg gcctgcgctt aagtgcgcgg tcttgctagg 180 cttgtaagtt tctttcttgc tattccaaac ggtgagagat ttctgtgctt ttgttatagg 240 acaattaaaa ccgtttcaat acaacacact gtggagtttt catatctttg caactttttc 300 tttgggcatt cgagcaatcg gggcccagag gttaacaaac acaaacaatt ttatctattc 360 attaaatttt tgtcaaaaac aagaattttc gtaactggaa attttaaaat attaaaaact 420 ttcaacaacg gatctcttgg ttctcgcatc gatgaagaac gcagcgaaat gcgatacgta 480 atgtgaattg cagaattccg tgaatcatcg aatctttgaa cgcacattgc gccccttggt 540 attccagggg gcatgcctgt ttgagcgtca tttccttctc aaacattctg tttggtagtg 600 agtgatactc tttggagtta acttgaaatt gctggccttt tcattggatg ttttttttcc 660 aaagagaggt ttctctgcgt gcttgaggta taatgcaagt acggtcgttt taggttttac 720 caactgcggc taatcttttt ttatactgag cgtattggaa cgtta 765

Claims

에스테르 성분이 강화된 증류주의 제조방법으로서,
상기 제조방법은 사카로마이세스 세레비지애 HDSY-03(Saccharomyces cerevisiae HDSY-03, 수탁번호 KCCM11726P)를 이용하고,
상기 에스테르 성분은 에틸 아세테이트(Ethyl Acetate), 이소부틸 아세테이트(Isobutyl acetate), 이소아밀 아세테이트(Isoamyl acetate), 에틸 카프로에이트(Ethyl Caproate), 에틸 카프릴레이트(Ethyl Caprylate), 에틸 카프레이트(Ethyl Caprate) 및 에틸 라우레이트(Ethyl Laurate)를 모두 포함하는, 에스테르 성분이 강화된 증류주의 제조방법.
제1항에 있어서, 하기 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 에스테르 성분이 강화된 증류주의 제조방법:
(a) 증자된 곡류에 백국균을 혼합 및 배양하여 입국을 제조하는 단계;
(b) 입국에 사카로마이세스 세레비지애 HDSY-03(Saccharomyces cerevisiae HDSY-03, 수탁번호 KCCM11726P) 균주 배양액 및 물을 혼합하여 발효시켜 1차 발효액을 제조하는 단계;
(c) 1차 발효액에 증자된 전분 함유 주원료 및 물을 혼합하여 발효시켜 2차 발효액을 제조하는 단계;
(d) 증류단계; 및
(e) 여과단계.
제2항에 있어서, 상기 (a) 단계의 백국균이 아스퍼질러스 루추엔시스(Aspergillus luchuensis)인 것을 특징으로 하는, 에스테르 성분이 강화된 증류주의 제조방법.
제2항에 있어서, 상기 (b) 단계에서 입국 100중량부에 대하여 1.5 내지 2.5% 부피부의 사카로마이세스 세레비지애 HDSY-03(Saccharomyces cerevisiae HDSY-03, 수탁번호 KCCM11726P) 균주 배양액을 접종하고, 120 내지 140% 부피부의 물을 혼합하는 것을 특징으로 하는, 에스테르 성분이 강화된 증류주의 제조방법.
제2항에 있어서, 상기 (c) 단계의 전분 함유 주원료가 쌀, 보리, 옥수수, 수수, 밀, 감자 및 고구마로 구성된 군에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 에스테르 성분이 강화된 증류주의 제조방법.
제2항에 있어서, 상기 (c) 단계에서 전분 함유 주원료의 중량부에 대하여 160 내지 180% 부피부의 물을 혼합하는 것을 특징으로 하는, 에스테르 성분이 강화된 증류주의 제조방법.
제2항에 있어서, 상기(d) 단계에서 80 내지 120℃의 온도 및 760 mmHg의 압력, 또는 40 내지 60℃의 온도 및 100 내지 150 mmHg의 압력에서 증류하는 것을 특징으로 하는, 에스테르 성분이 강화된 증류주의 제조방법.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 제조방법에 따라 제조된, 에스테르 성분이 강화된 증류주.