KR101667493B1 - 항암효능을 보이는 벤조싸이아제핀 유도체 및 그 용도 - Google Patents
항암효능을 보이는 벤조싸이아제핀 유도체 및 그 용도 Download PDFInfo
- Publication number
- KR101667493B1 KR101667493B1 KR1020150132710A KR20150132710A KR101667493B1 KR 101667493 B1 KR101667493 B1 KR 101667493B1 KR 1020150132710 A KR1020150132710 A KR 1020150132710A KR 20150132710 A KR20150132710 A KR 20150132710A KR 101667493 B1 KR101667493 B1 KR 101667493B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- methoxy
- hydrogen
- ddd
- compound
- thiazepin
- Prior art date
Links
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 title claims abstract description 21
- FHGWEHGZBUBQKL-UHFFFAOYSA-N 1,2-benzothiazepine Chemical compound S1N=CC=CC2=CC=CC=C12 FHGWEHGZBUBQKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 49
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 3
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims description 60
- -1 chalcone compound Chemical class 0.000 claims description 39
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 38
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 38
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 32
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 29
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims description 28
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 22
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 8
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 7
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 4
- 230000030833 cell death Effects 0.000 claims description 4
- VRVRGVPWCUEOGV-UHFFFAOYSA-N 2-aminothiophenol Chemical compound NC1=CC=CC=C1S VRVRGVPWCUEOGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- MVXMNHYVCLMLDD-UHFFFAOYSA-N 4-methoxynaphthalene-1-carbaldehyde Chemical compound C1=CC=C2C(OC)=CC=C(C=O)C2=C1 MVXMNHYVCLMLDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- DQFBYFPFKXHELB-UHFFFAOYSA-N Chalcone Natural products C=1C=CC=CC=1C(=O)C=CC1=CC=CC=C1 DQFBYFPFKXHELB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000005513 chalcones Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 3
- BVLXNPRUOXPBII-UHFFFAOYSA-K bis(trifluoromethylsulfonyloxy)gallanyl trifluoromethanesulfonate Chemical compound [Ga+3].[O-]S(=O)(=O)C(F)(F)F.[O-]S(=O)(=O)C(F)(F)F.[O-]S(=O)(=O)C(F)(F)F BVLXNPRUOXPBII-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 abstract description 12
- 108090000567 Caspase 7 Proteins 0.000 abstract description 10
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 abstract description 4
- 102000004041 Caspase 7 Human genes 0.000 abstract 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 61
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 11
- 125000001637 1-naphthyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C(*)=C([H])C([H])=C([H])C2=C1[H] 0.000 description 10
- 125000001622 2-naphthyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C([H])=C(*)C([H])=C([H])C2=C1[H] 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 101710179684 Poly [ADP-ribose] polymerase Proteins 0.000 description 9
- 102100023712 Poly [ADP-ribose] polymerase 1 Human genes 0.000 description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 description 9
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 8
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 8
- 229920000776 Poly(Adenosine diphosphate-ribose) polymerase Polymers 0.000 description 7
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 7
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 7
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 6
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 5
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108090000397 Caspase 3 Proteins 0.000 description 5
- 102100029855 Caspase-3 Human genes 0.000 description 5
- 102100038902 Caspase-7 Human genes 0.000 description 5
- 239000001828 Gelatine Substances 0.000 description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 5
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 5
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 5
- 238000001052 heteronuclear multiple bond coherence spectrum Methods 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010087230 Sincalide Proteins 0.000 description 4
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 4
- 238000009643 clonogenic assay Methods 0.000 description 4
- 231100000096 clonogenic assay Toxicity 0.000 description 4
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 4
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 4
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 4
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 3
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 3
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 3
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical class [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 3
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical class [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 3
- 150000007657 benzothiazepines Chemical class 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 238000003929 heteronuclear multiple quantum coherence Methods 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 3
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 3
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100026550 Caspase-9 Human genes 0.000 description 2
- 108090000566 Caspase-9 Proteins 0.000 description 2
- 102000005927 Cysteine Proteases Human genes 0.000 description 2
- 108010005843 Cysteine Proteases Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006845 Michael addition reaction Methods 0.000 description 2
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 229940085242 benzothiazepine derivative selective calcium channel blockers with direct cardiac effects Drugs 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 2
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 2
- 150000002304 glucoses Chemical class 0.000 description 2
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 238000004896 high resolution mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 2
- KEQHBVWVKYHDCS-UHFFFAOYSA-N 1-(2-hydroxy-4,5-dimethoxyphenyl)ethanone Chemical compound COC1=CC(O)=C(C(C)=O)C=C1OC KEQHBVWVKYHDCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000021944 Butyrylcholinesterase Human genes 0.000 description 1
- 108010053652 Butyrylcholinesterase Proteins 0.000 description 1
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000011724 DNA Repair Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108010076525 DNA Repair Enzymes Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 108010040476 FITC-annexin A5 Proteins 0.000 description 1
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N Leupeptin Natural products CC(C)CC(NC(C)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 235000019759 Maize starch Nutrition 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000012338 Poly(ADP-ribose) Polymerases Human genes 0.000 description 1
- 108010061844 Poly(ADP-ribose) Polymerases Proteins 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- XCPGHVQEEXUHNC-UHFFFAOYSA-N amsacrine Chemical compound COC1=CC(NS(C)(=O)=O)=CC=C1NC1=C(C=CC=C2)C2=NC2=CC=CC=C12 XCPGHVQEEXUHNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001220 amsacrine Drugs 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000002543 antimycotic Substances 0.000 description 1
- 229940125648 antineoplastic drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000003150 biochemical marker Substances 0.000 description 1
- SXDBWCPKPHAZSM-UHFFFAOYSA-N bromic acid Chemical compound OBr(=O)=O SXDBWCPKPHAZSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 150000001721 carbon Chemical class 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 239000008004 cell lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 230000007541 cellular toxicity Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000002038 chemiluminescence detection Methods 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 235000013681 dietary sucrose Nutrition 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 238000010410 dusting Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 206010015037 epilepsy Diseases 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 1
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 229950006191 gluconic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000703 high-speed centrifugation Methods 0.000 description 1
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 1
- 150000002466 imines Chemical group 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000008011 inorganic excipient Substances 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 229960004903 invert sugar Drugs 0.000 description 1
- 229960000779 irinotecan hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- GURKHSYORGJETM-WAQYZQTGSA-N irinotecan hydrochloride (anhydrous) Chemical compound Cl.C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 GURKHSYORGJETM-WAQYZQTGSA-N 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N leupeptin Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(C)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 108010052968 leupeptin Proteins 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 210000001700 mitochondrial membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- VJMRKWPMFQGIPI-UHFFFAOYSA-N n-(2-hydroxyethyl)-5-(hydroxymethyl)-3-methyl-1-[2-[[3-(trifluoromethyl)phenyl]methyl]-1-benzothiophen-7-yl]pyrazole-4-carboxamide Chemical compound OCC1=C(C(=O)NCCO)C(C)=NN1C1=CC=CC2=C1SC(CC=1C=C(C=CC=1)C(F)(F)F)=C2 VJMRKWPMFQGIPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035407 negative regulation of cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 239000003883 ointment base Substances 0.000 description 1
- 239000008012 organic excipient Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- WLJNZVDCPSBLRP-UHFFFAOYSA-N pamoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC=3C4=CC=CC=C4C=C(C=3O)C(=O)O)=C(O)C(C(O)=O)=CC2=C1 WLJNZVDCPSBLRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 230000007026 protein scission Effects 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 1
- 239000007940 sugar coated tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000001269 time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DQFBYFPFKXHELB-VAWYXSNFSA-N trans-chalcone Chemical group C=1C=CC=CC=1C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 DQFBYFPFKXHELB-VAWYXSNFSA-N 0.000 description 1
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-M triflate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000002601 urease inhibitor Substances 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-CFWMRBGOSA-N vinblastine Chemical compound C([C@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-CFWMRBGOSA-N 0.000 description 1
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D281/00—Heterocyclic compounds containing rings of more than six members having one nitrogen atom and one sulfur atom as the only ring hetero atoms
- C07D281/02—Seven-membered rings
- C07D281/04—Seven-membered rings having the hetero atoms in positions 1 and 4
- C07D281/08—Seven-membered rings having the hetero atoms in positions 1 and 4 condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D281/10—Seven-membered rings having the hetero atoms in positions 1 and 4 condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
- A61K31/554—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having at least one nitrogen and one sulfur as ring hetero atoms, e.g. clothiapine, diltiazem
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/308—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on cancer prevention
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
본 발명은 항암효능을 보이는 벤조싸이아제핀 유도체 및 그 용도에 관한 것으로, 본 발명의 benzothiazepin 유도체들은 카스파제-7 효소 활성을 통하여 암세포의 세포사멸을 유도하여 신규한 항암제 후보물질로 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 항암효능을 보이는 벤조싸이아제핀 유도체 및 그 용도에 관한 것이다.
benzothiazepin은 nitrogen과 sulfur를 동시에 포함하는 heterocycle 화합물의 일종으로 a-glucosidase, butyrylcholinesterase 등과 같은 효소 저해효과를 보임으로써, 당뇨병치료제, 알츠하이머치료제 개발에 활용된다 [European Journal of Medicinal Chemistry (2014), 80, 228]. 또한 urease 저해 효과도 보이기 때문에 urea가 ammonia로 전화되는 것을 저해함으로써 비료를 효능을 조절하는데 활용되기도 한다 [Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry (2009), 24(1), 151]. 이외에도 benzothiazepin은 간질 등의 경련을 방지하는 효능을 보이고 [European Journal of Medicinal Chemistry (1995), 30(12), 925], 항균효과를 보이기도 한다 [Indian Journal of Heterocyclic Chemistry (2007), 17(1), 49]. 그러나, benzothiazepin이 보이는 항암효과에 대해서는 알려진 바가 없다.
[선행 특허 문헌]
대한민국 특허공개번호 제10-2014-0128943호
본 발명은 상기의 필요성에 의하여 안출된 것으로서 본 발명의 목적은 신규한 항암 활성을 가지는 벤조싸이아제핀 화합물 유도체를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기의 유도체의 용도를 제공하는 것이다.
상기의 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 하기 화학식 1 및 화학식 2로 구성된 군으로부터 선택된 항암활성을 가지는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
[화학식 1]
[화학식 2]
상기 화학식 1에서 R1은 수소, R2는 메톡시, R3는 수소, R4는 메톡시, R5는 수소 또는 R1은 메톡시, R2는 메톡시, R3는 메톡시, R4는 수소, 및 R5는 수소이고,
상기 화학식 2에서 R6는 수소, R7은 수소, R8은 수소, R9은 수소 또는
R6는 메톡시, R7은 메톡시, R8은 수소, R9은 수소 또는
R6는 수소, R7은 메톡시, R8은 수소, R9은 수소 또는
R6는 수소, R7은 메톡시, R8은 수소, R9은 메톡시 또는
R6는 메톡시, R7은 메톡시, R8은 수소, R9은 메톡시인 것이 바람직하고,
상기 화합물은 상기 화학식 2에서 R6는 메톡시, R7은 메톡시, R8은 수소, R9은 메톡시인 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 아니한다.
또 본 발명은 상기 본 발명의 화합물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물은 항암 효과를 가지는 것이 바람직하나 이에 한정되지 아니한다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 항암 효과를 가지는 암은 대장암, 위암, 전립선암, 유방암, 신장암, 간암, 뇌종양, 폐암, 자궁암, 결장암, 방광암, 췌장암, 혈액암으로 구성된 그룹에서 선택되는 암인 것이 바람직하나 이에 한정되지 아니한다.
상기 약학조성물은 약학적으로 허용 가능한 1종 이상의 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 것을 특징으로 한다.
상기 약학조성물은 제2의 항암제 또는 항암 보조제를 포함하는 것을 특징으로 한다.
상기 제2의 항암제는 인터페론(interferon), 인터루킨-2(interleukin-2), 파클리탁셀(paclitaxel), 빈크리스틴(vincristine), 빈블라스틴(vinblastin), 독소루비신(doxorrubicin), 에토포시드(etoposide), 이리노테칸 히드로클로라이드(irinotecan hydrochloride), 시스플라틴(cisplatin), 암사크린(amsacrine), 사이토신 아라비노시드(cytosine arabinoside), 플루오로우라실(fluoro uracil) 및 탁솔(taxol)로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 상기 화합물은 약학적으로 허용 가능한 염의 형태인 유도체의 형태로 사용할 수 있다.
상기 염으로는 약학적으로 허용 가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산부가염이 유용하다. 즉, 상기 본 발명의 화합물은 당해 기술분야에서 통상적인 방법에 따라 약학적으로 허용되는 산부가염으로 형성될 수 있다. 유리산으로는 무기산과 유기산을 사용할 수 있으며, 무기산으로는 염산, 브롬산, 황산, 인산, 등을 사용할 수 있고,유기산으로는 구연산, 초산, 젖산, 말레산, 푸마린산, 글루콘산, 메탄설폰산, 아세트산, 글리콘산, 석신산,타타르산, 4-톨루엔설폰산, 칼룩투론산, 엠본산, 글루탐산 또는 아스파르트산등을 사용할 수 있다. 바람직하게는,무기산으로는 염산, 유기산으로는 메탄설폰산을 사용할 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 상기 유도체는 약학적으로 허용 가능한 염뿐만 아니라, 통상의 방법에 의해 제조될 수 있는 모든 염, 수화물, 용매화물을 모두 포함할 수 있다.
임상적 사용을 위해, 본 발명에 따른 상기 화합물 또는 그들의 염 형태 등은 단독으로 투여될 수 있으나, 부형제, 결합제, 활택제, 붕해제, 코팅 물질, 유화제, 현탁제, 용매, 안정화제, 흡수 촉진제 및/또는 연고 기재를 혼합함으로써 특정 사용 및 바람직한 목적에 적당하도록 제형화된 약제학적 혼합물의 형태로 일반적으로 투여될 수 있다. 상기 혼합물은 경구용, 주사용, 직장용 또는 외용 투여용으로 사용될 수 있다.
더욱 상세하게는, 앞서 언급한 바와 같이, 상기 화합물 또는 그들의 염을 함유하는 상기 약제학적 항암용 조성물은 경구적으로 투여될 수 있으며, 예를 들어, 정제, 코팅 정제, 드라지(dragees), 경질 또는 연질젤라틴 캡슐제, 액제, 유화제 또는 현탁제 같은 제형일 수 있다. 투여는 또한 직장으로 투여, 예를 들어, 좌제를 사용하여 투여될 수 있으며; 국소적 또는 경피적으로 투여, 예를 들어, 연고, 크림, 겔 또는 액제로 사용하여 투여될 수 있으며; 또는 비경구적으로 투여, 예를 들어, 주사용 용액을 사용하여 투여될 수 있다.
정제, 코팅 정제, 드라지(dragees), 경질 또는 연질 젤라틴 캡슐제의 제조를 위해, 본 발명의 화합물은 약제학적으로 불활성인 무기 또는 유기 부형제(약제학적으로 허용되는 담체)와 함께 혼합될 수 있다. 정제, 코팅정제, 드라지(dragees), 경질 젤라틴 캡슐제에 적당한 부형제의 예에는 락토오즈, 메이즈(maize) 전분 또는 그들의 유도체, 탈크 또는 스테아르산 또는 그들의 염들이 포함된다. 연질 젤라틴 캡슐제에 사용되는 적당한 부형제에는 예를 들어 식물성 오일, 왁스, 지방, 반-고형(semi-solid) 또는 액체 폴리올 등이 포함된다. 그러나 활성 성분의 성질에 따라 연질 젤라틴 캡슐제에 어떠한 부형제도 필요하지 않는 경우가 있을 수 있다. 액제 및 시럽제의 제조를 위해, 사용될 수 있는 부형제에는 예를 들어, 물, 폴리올, 사카로오즈, 전화당(invert sugar) 및 글루코오즈가 포함된다. 주사용 용액의 제조를 위해, 사용될 수 있는 부형제는 예를 들어,물 알코올, 폴리올,글리세린 및 식물성 오일이 포함된다. 좌제 및 국소 또는 경피 적용용의 제조를 위해, 사용될 수 있는 부형제에는 예를 들어, 천연 오일 또는 경화유, 왁스, 지방 및 반-고형 또는 액체 폴리올이 포함된다.
상기 약제학적 조성물은 또한 보존제, 용해제, 안정화제, 습윤제, 유화제, 감미제, 색소, 방향제, 삼투압 조절용 염, 완충제, 코팅제 또는 항산화제를 포함할 수 있고, 그들은 또한 다른 치료학적으로 가치있는 약제를 포함 할 수도 있다.
결과적으로, 경구 투여용 약제학적 제형은 과립제, 정제, 당 코팅 정제, 캡슐제, 환제(pill), 현탁제 또는 유화제일 수 있으며, 비경구용 제형으로 예를 들어, 정맥내, 근육내 또는 피하 제형용으로는 멸균 수용액의 제형이 사용될 수 있으며 이는 등장성용액을 만들기 위하여 다른 물질 예를 들어, 염들 또는 글루코오즈를 포함할 수 있다. 항 종양제는 또한 좌제 또는 페서리(pessary)의 제형으로 투여될 수 있으며, 또는 로션, 용액, 크림, 연고 또는 더스팅 파우더(dusting powder)의 형태로 외용적으로 적용될 수 있다.
본 발명의 화합물 1일 용량 수준은 경구 또는 비경구용으로 투여될 때 5 내지 2000 mg이다. 1 회 투여 또는 적절한 2 회 이상의 분할투여가 가능하다.
그러나, 실제 투여량은 투여 경로, 환자의 연령, 성별 및 체중, 및 질환의 중증도 등의 여러 관련 인자에 비추어 결정되어야 하는 것으로 이해되어야 하며, 따라서, 상기 투여량은 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.
또한, 본 발명은 상기 본 발명의 화합물 및 식품학적으로 허용 가능한 식품
보조 첨가제를 포함하는 암 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.
상기 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 형태인 것을 특징으로 한다.
또 본 발명은 2'-하이드록시-4,5-디메톡시아세토페논과 4-메톡시-1-나프타알데히드를 알코올에서 혼합하고 이것을 수산화칼륨을 처리하고 혼합하여 반응시킨 후 그 침전물을 여과하여 칼콘(chalcone) 화합물을 생성하고 여기에 갈륨(III) 트리플루오로메탄설포네이트를 더하여 알코올에 녹인 후 2-아미노싸이오페놀을 첨가하여 반응하는 단계를 포함하는 하기 화학식 2의 화합물 제조방법을 제공한다.
[화학식 2]
상기 화학식 2에서 R6는 메톡시, R7은 메톡시, R8은 수소, R9은 메톡시인 ㄱ것이 바람직하나 이에 한정되지 아니한다.
이하 본 발명을 설명한다.
본 발명자들은 수십 종의 benzothiazepin 유도체들을 디자인하고 합성하여서 항암효과를 보이는지 확인하고자 하였고, 그 결과 수 uM 수준에서 항암효과를 보이는 결과를 얻었다.
항암효과를 측정하기 위한 다양한 방법이 있는데 그 중 하나는 암세포주에 약물을 처리하여서 암세포주의 성장을 효과적으로 저해하는지를 보는 방법이다.
clonogenic assay는 암세포주를 약 7일 정도 성장시키면서 약물의 세포주 성장 저해효과를 보는 방법이므로 유사한 구조를 가진 유도체들에 대해서도 세포주 성장 저해효과를 효과적으로 관찰할 수 있기 때문에 근래에 항암효과 측정방법으로 널리 사용되고 있다 [Nature Protocol 1, 2315 - 2319 (2006)]. 본 발명자들은 총 27종의 benzothiazepin 유도체들을 합성하였고 이들에 대한 clonogenic assay를 사람 대장암 세포주에서 수행하여 이들의 half maximal cell growth inhibitory concentration (GI50) 값을 측정하였고 27종의 유도체들은 사람 대장암 세포주를 4.4uM부터 43.0uM 수준의 낮은 농도에서 생장 저해하는 것을 확인하였다.
본 발명을 통하여 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 benzothiazepin 유도체 20을 포함한 유도체들은 카스파제-7 효소 활성을 통하여 대장암세포의 세포사멸을 유도하여 신규한 항암제 후보물질로 사용될 수 있다.
도 1은 benzothiazepin 유도체들의 합성 방법을 나타낸 그림,
도 2는 핵자기공명분광법을 이용한 benzothiazepin 유도체들의 구조 규명
도 3은 benzothiazepin 유도체에 의해 HCT116 대장암세포의 증식이 저해되었음을 시사하는 그림으로, 0, 0.5, 1, 10, 20uM의 농도로 대장암 세포주에 처리한 결과이다.
도 4는 본 발명의 유도체의 대장암에 대한 clonogenic assay 결과를 나타내는 그래프,
도 5는 benzothiazepin 유도체 20에 의해 HCT116 사람 대장암 세포주의 세포독성 (cytotoxicity) 효과를 측정한 것,
도 6a는 benzothiazepin 유도체 20에 의해 HCT116 대장암세포의 표면에 Annexin V 발현이 증가되는 사실을 유세포분석기로 측정한 것이고, 도 6b는 카스파제-3 효소 활성에 의해 89-kDa과 24-kDa 크기의 PARP 단편 조각이 증가되는 사실을 웨스턴 블롯 분석(Western blot analysis)으로 나타낸 것,
도 7 내지 9는 유도체 7의 핵자기공명 분광 실험과 질량분석실험에 대한 raw data,
도 10 내지 12는 유도체 8의 핵자기공명 분광 실험과 질량분석실험에 대한 raw data,
도 13 내지 15는 유도체 12의 핵자기공명 분광 실험과 질량분석실험에 대한 raw data,
도 16 내지 18은 유도체 13의 핵자기공명 분광 실험과 질량분석실험에 대한 raw data,
도 19 내지 21은 유도체 16의 핵자기공명 분광 실험과 질량분석실험에 대한 raw data,
도 22 내지 24는 유도체 17의 핵자기공명 분광 실험과 질량분석실험에 대한 raw data,
도 25 내지 27은 유도체 20의 핵자기공명 분광 실험과 질량분석실험에 대한 raw data.
도 2는 핵자기공명분광법을 이용한 benzothiazepin 유도체들의 구조 규명
도 3은 benzothiazepin 유도체에 의해 HCT116 대장암세포의 증식이 저해되었음을 시사하는 그림으로, 0, 0.5, 1, 10, 20uM의 농도로 대장암 세포주에 처리한 결과이다.
도 4는 본 발명의 유도체의 대장암에 대한 clonogenic assay 결과를 나타내는 그래프,
도 5는 benzothiazepin 유도체 20에 의해 HCT116 사람 대장암 세포주의 세포독성 (cytotoxicity) 효과를 측정한 것,
도 6a는 benzothiazepin 유도체 20에 의해 HCT116 대장암세포의 표면에 Annexin V 발현이 증가되는 사실을 유세포분석기로 측정한 것이고, 도 6b는 카스파제-3 효소 활성에 의해 89-kDa과 24-kDa 크기의 PARP 단편 조각이 증가되는 사실을 웨스턴 블롯 분석(Western blot analysis)으로 나타낸 것,
도 7 내지 9는 유도체 7의 핵자기공명 분광 실험과 질량분석실험에 대한 raw data,
도 10 내지 12는 유도체 8의 핵자기공명 분광 실험과 질량분석실험에 대한 raw data,
도 13 내지 15는 유도체 12의 핵자기공명 분광 실험과 질량분석실험에 대한 raw data,
도 16 내지 18은 유도체 13의 핵자기공명 분광 실험과 질량분석실험에 대한 raw data,
도 19 내지 21은 유도체 16의 핵자기공명 분광 실험과 질량분석실험에 대한 raw data,
도 22 내지 24는 유도체 17의 핵자기공명 분광 실험과 질량분석실험에 대한 raw data,
도 25 내지 27은 유도체 20의 핵자기공명 분광 실험과 질량분석실험에 대한 raw data.
이하 비한정적인 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다. 단 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 의도로 기재한 것으로서 본 발명의 범위는 하기 실시예에 의하여 제한되는 것으로 해석되지 아니한다.
실시예
1.
benzothiazepin
유도체들의 합성 방법
총 27종 benzothiazepin 유도체들의 구조와 이름은 아래 표1-3와 같다.
| derivative | R1 | R2 | R3 | R4 | R5 | name |
| 1 | OCH3 | H | H | H | H | (E)-2-(2-(2-methoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 2 | OCH3 | OCH3 | H | H | H | (E)-2-(2-(2,3-dimethoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 3 | H | H | H | H | H | (E)-2-(2-phenyl-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 4 | H | OCH3 | H | H | H | (E)-2-(2-(3-methoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 5 | H | H | OCH3 | H | H | (E)-2-(2-(4-methoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 6 | OCH3 | H | OCH3 | H | H | (E)-2-(2-(2,4-dimethoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 7 | H | OCH3 | H | OCH3 | H | (E)-2-(2-(3,5-dimethoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 8 | OCH3 | OCH3 | OCH3 | H | H | (E)-2-(2-(2,3,4-trimethoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 9 | OCH3 | H | OCH3 | OCH3 | H | (E)-2-(2-(2,4,5-trimethoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 10 | OCH3 | H | OCH3 | H | OCH3 | (E)-2-(2-(2,4,6-trimethoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 11 | H | OCH3 | OCH3 | H | H | (E)-2-(2-(3,4-dimethoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| derivative | R6 | R7 | R8 | R9 | name |
| 12 | H | H | H | H | (E)-2-(2-(naphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 13 | OCH3 | OCH3 | H | H | (E)-4,5-dimethoxy-2-(2-(naphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 14 | OCH3 | H | OCH3 | H | (E)-3,5-dimethoxy-2-(2-(naphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 15 | OCH3 | H | H | H | (E)-5-methoxy-2-(2-(naphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 16 | H | OCH3 | H | H | (E)-4-methoxy-2-(2-(naphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 17 | H | OCH3 | H | OCH3 | (E)-4-methoxy-2-(2-(4-methoxynaphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 18 | H | H | OCH3 | OCH3 | (E)-3-methoxy-2-(2-(4-methoxynaphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 19 | H | H | H | OCH3 | (E)-2-(2-(4-methoxynaphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 20 | OCH3 | OCH3 | H | OCH3 | (E)-4,5-dimethoxy-2-(2-(4-methoxynaphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 21 | OCH3 | H | H | OCH3 | (E)-5-methoxy-2-(2-(4-methoxynaphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| derivative | R6 | R7 | R8 | name |
| 22 | H | H | H | (E)-2-(2-(naphthalen-2-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 23 | OCH3 | OCH3 | H | (E)-4,5-dimethoxy-2-(2-(naphthalen-2-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 24 | OCH3 | H | H | (E)-5-methoxy-2-(2-(naphthalen-2-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 25 | OCH3 | H | OCH3 | (E)-3,5-dimethoxy-2-(2-(naphthalen-2-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 26 | H | H | OCH3 | (E)-3-methoxy-2-(2-(naphthalen-2-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 27 | H | OCH3 | H | (E)-4-methoxy-2-(2-(naphthalen-2-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
benzothiazepin 유도체들은 도 1과 같은 방법으로 합성하였다. 유도체 20의 합성 방법을 대표적인 방법으로 다음과 같이 기술하고자 한다. 2'-hydroxy-4,5-dimethoxyacetophenone (도 1에서 I로 표기, 5 mmol, 980 mg)와 4-methoxy-1-naphthaldehyde (도 1에서 II로 표기, 5 mmol, 930 mg)을 에탄올 50 mL에서 더하고 이것을 수산화칼륨 수용액 (50% w/v, 5 mL)에 더하였다. 24시간 동안 섞은 용액을 잘 저어주었다. 침전물을 여과하고 물과 메탄올로 세척하면 chalcone 화합물이 생성되었다 (도 1에서 III,로 표기 yield: 40 %, M.P: 181-184℃). 여기에 gallium (III) trifluoromethanesulfonate을 더하여 에탄올 15 mL에 녹인 후 2-Aminothiophenol (도 1에서 IV로 표기, 1.2 mmol, 150 mg, d: 1.17 g/mL)을 더하였다. 이 혼합물을 85C에서 6시간 동안 reflux하였다. 실온까지 식힌 후 침전이 형성된 것을 여과하여 건조시켰는데 이 결과물이 유도체 20이었다 (도 1에서 20로 표기, yield : 67 %, M.P: 213-21℃).
기타 다른 본 발명의 유도체도 상기의 도 1에 기재된 과정과 기본적으로 동일하고 시작물질 등만 차이를 두어서 합성하였다.
실시예
2.
핵자기공명분광법을
이용한
benzothiazepin
유도체들의 구조 규명
합성한 benzothiazepin 유도체의 확인을 위해서 핵자기공명분광법(nuclear magnetic resonance spectroscopy)을 적용하였는데 사용한 기기는 Bruker Avance 400 (Bruker, Karlsruhe, Germany)을 사용하였다. benzothiazepin 유도체들을 27번만 중수소-디메틸설폭사이드(dimethylsulfoxide-d6, DMSO-d6)에 녹였고 나머지 유도체들은 중수소-클로로폼 (chloroform-d, CDCl3)에 녹여서 2.5-mm NMR tube에 넣은 후 실온에서 NMR data를 얻었다. 자세한 실험 방법은 논문에 발표된 방법을 사용하였다 [Magn. Reson. Chem. 51:593]. 3개의 methoxylated된 유도체 8의 NMR data를 갖고 assign한 방법은 다음과 같다. 가장 downfield된 탄소 peak 172.0 ppm은 imine form을 갖는 ketone으로 assign하였다. Chalcone은 2-aminothiol과 1,4-Michael addition을 통해 seven-membered ring을 형성한다. 그 결과, α,β-unsaturated hydrogens이 2-aminothiol과 Michael-addition하여 생성되는 α-position의 CH2,β-position의 CH가 upfield된 doublet of doublet peak의 형태로 관찰된다. 이 peak들과의 long-range coupled을 이루는 5.48, 3.54, and 2.95 ppm HMBC spectrum을 통해 172.0 ppm을 결정할 수 있었다 (named as C-Bz4). 이렇게 확인된 C=N 탄소 peak과 long-range coupled을 이루는 7.63 ppm을 A-ring의 H-8로 assigned할 수 있었다. HMQC spectrum으로부터 7.63 ppm과 correlation을 이루는 124.27 ppm 탄소 peak을 C-8로 assign하고 COSY and HMQC spectrum으로부터 H-7/C-7을 assign할 수 있었다. 같은 방식으로 A-ring의 나머지 position들도 모두 assign할 수 있었다. 또한 8.55 ppm과 long-range coupled를 이루는 168.46 ppm 탄소 peak을 hydroxylate된 carbon으로 (named as C-2) assign할 수 있었다. 2-aminothiol로부터 fused된 C-ring의 assign은 다음과 같이 하였다. 먼저 sulfur로 연결되어 있는 125.9 ppm (named as C-Bz7) carbon peak을 long-ranged couple을 이루는 5.48 ppm을 HMBC spectrum을 통해 확인하여 assign할 수 있었다. 125.9 ppm과 long-range coupled를 이루는 peak으로 7.39 and 7.25 ppm을 HMBC spectrum에서 확인할 수 있다. 이것의 구체적인 position을 assign하기 위해서 COSY spectrum을 확인하였다. 7.39 ppm은 7.49 ppm과의 COSY peak이 확인되고, 7.25 ppm의 경우에는 7.73 ppm and 7.49 ppm 두 개의 COSY peak이 확인된다. 또한, 7.39 ppm은 doublet of doublet의 coupling이 일어나고, 7.73 ppm의 경우에는 doublet of doublet of doublet의 coupling이 일어나는 것을 통해서도 7.39 ppm을 H-Bz6a로, 7.73 ppm을 H-Bz7b로 각각 assign할 수 있다. 마지막으로, methoxy group 3개가 치환되어 있는 B-ring의 경우에는, 앞서 assign한 C-Bz3 peak과의 long-ranged couple를 이루는 7.21 ppm peak을 H-6’로 assign할 수 있다. COSY spectrum은 7.21 ppm과의 correlation을 나타내는 6.65 ppm을 H-5’로 assign할 수 있도록 peak을 나타내었다. HMQC spectrum을 통해 61.46 ppm과 4.04 ppm, 61.0 ppm과 3.94 ppm, 그리고 56.2 ppm을 3.87 ppm 각각 짝지을 수 있다. HMBC spectrum을 통해서는 153.5 ppm과 4.04 ppm, 149.9 ppm과 3.87 ppm, 그리고 142.0 ppm과 3.94 ppm의 long-ranged couple peak을 얻을 수 있다. 이들의 구체적인 position은 같은 지금까지와 같은 방식으로 HMBC spectrum을 통해 얻어지는 149.9 ppm과 5.48 ppm (named as H-Bz2)의 long-ranged couple peak을 통해 C-2’ position을 assign할 수 있다. C-3’ and C-4’ position 역시 같은 방식으로 하여 153.5 ppm과 7.21 ppm and 142.0 ppm과 6.65 ppm을 C-4’/H-4’ and C-3’/H-3’로 각각 assign 할 수 있다. 이 결과를 유도체 8의 구조에 화살표로 나타내면 도 2와 같다.
유사한 방식으로 다른 유도체들의 1H-NMR data를 모두 assign하였고 27종 benzothiazepin 유도체들의 1H-NMR data는 아래 표와 같이 요약된다.
| position | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| H-Bz2 | 5.57(dd, 12.6, 4.4) | 5.54(dd, 12.6, 4.4) | 5.08(dd, 12.1, 4.7) | 4.92(dd, 12.0, 4.7) | 5.05(dd, 11.8, 4.7) | 5.49(dd, 12.4, 4.4) |
| H-Bz3a | 2.92(dd, 13.0, 12.6) | 2.94(dd, 13.0, 12.6) | 3.14(dd, 13.3, 12.1) | 3.00(dd, 13.3, 12.0) | 3.10(dd, 13.3, 11.8) | 2.91(dd, 13.1, 12.4) |
| H-Bz3b | 3.57(dd, 13.0, 4.4) | 3.55(dd, 13.0, 4.4) | 3.53(dd, 13.3, 4.7) | 3.40(dd,13.3, 4.7) | 3.47(dd, 13.3, 4.8) | 3.52(dd, 13.1, 4.4) |
| H-Bz6a | 7.36(dd, 7.9, 1.4) | 7.36(dd, 7.9, 1.3) | 7.40(dd, 7.9, 1.4) | 7.27(dd, 7.9, 1.3) | 7.38(dd, 8.1, 1.3) | 7.36(dd, 7.9, 1.4) |
| H-Bz6b | 7.46(ddd, 7.9, 7.6, 1.4 ) | 7.48(ddd, 7.9, 7.6, 1.4) | 7.52(ddd, 7.9, 7.4, 1.3) | 7.39(ddd, 7.9, 7.5, 1.4) | 7.49(ddd, 7.9, 7.6, 1.5) | 7.46(ddd, 7.9, 7.5, 1.4) |
| H-Bz7b | 7.23(ddd, 7.7, 7.6, 1.4) | 7.24(ddd, 7.7, 7.6, 1.4) | 7.27(ddd, 7.7, 7.4, 1.4) | 7.14(ddd, 7.7, 7.5, 1.3) | 7.24(ddd, 7.7, 7.6, 1.4) | 7.22(ddd, 7.7, 7.5, 1.4) |
| H-Bz7a | 7.73(dd, 7.7, 1.4) | 7.74(dd, 7.7, 1.3) | 7.69(dd, 7.7, 1.3) | 7.57(dd, 7.7, 1.4) | 7.65(dd, 7.7, 1.6) | 7.71(dd, 7.7, 1.3) |
| H2 | - | - | - | - | - | - |
| H3 | 8.53(d, 8.0) | 8.52(dd, 8.2, 1.2) | 8.55(d, 8.2) | 8.42(dd, 8.2, 1.3) | 8.52(dd, 8.2, 1.2) | 8.52(dd, 8.2, 1.1) |
| H4 | 7.48(ddd, 8.3, 7.0, 1.2) | 7.48(ddd, 8.2, 6.9, 1.2) | 7.52(ddd, 8.2, 6.9, 1.3) | 7.40(ddd, 8.2, 7.0, 1.5) | 7.49(ddd, 8.2, 6.8, 1.3) | 7.48(ddd, 8.1, 7.0, 1.1) |
| H5 | 7.57(ddd, 8.2, 7.0, 1.3) | 7.57(ddd, 8.1, 6.8, 1.3) | 7.60(ddd, 8.1, 6.9, 1.3) | 7.48(ddd, 8.0, 7.0, 1.3) | 7.58(ddd, 8.1, 6.8, 1.5) | 7.56(ddd, 8.1, 7.0, 1.1) |
| H6 | 7.70(d, 8.2) | 7.71(dd, 8.0, 1.2) | 7.72(d, 8.1) | 7.60(dd, 8.0, 1.5) | 7.70(dd, 8.1, 1.3) | 7.67(d, 8.1) |
| H7 | 7.15(d, 9.0) | 7.16(d, 9.1) | 7.14(d, 9.0) | 7.02(d, 9.0) | 7.10(d, 9.1) | 7.16(d, 9.0) |
| H8 | 7.64(d, 9.0) | 7.68(d, 9.1) | 7.43(d, 9.1) | 7.31(d, 9.0) | 7.39(d, 9.1) | 7.61(d, 9.0) |
| H1' | - | - | - | - | - | - |
| H2' | - | - | 7.37(m) | 6.81(d, 1.1) | 7.26(ddd, 8.7, 3.1, 2.2) | - |
| H3' | 6.91(dd, 8.2, 1.0) | - | 7.37(m) | - | 6.85(ddd, 8.7, 3.0, 2.0) | 6.49(d, 2.3) |
| H4' | 7.27(ddd, 8.2, 7.6, 1.6) | 6.86(dd, 8.1, 1.3) | 7.33(m) | 7.27(dd, 7.9, 1.3) | - | - |
| H5' | 6.94(ddd, 7.6, 7.6, 0.9) | 7.04(dd, 8.1, 7.8) | 7.37(m) | 7.15(dd, 8.0, 7.9) | 6.85(ddd, 8.7, 3.0, 2.0) | 6.45(dd, 8.4, 2.3) |
| H6' | 7.55(dd, 7.6, 1.6) | 7.15(d, 7.8) | 7.37(m) | 6.73(ddd, 8.0, 2.5, 1.1) | 7.26(ddd, 8.7, 3.1, 2.2) | 7.42(d, 8.4) |
| 2'-OCH3 | 3.92(s) | 3.95(s) | - | - | - | 3.89(s) |
| 3'-OCH3 | - | 3.89(s) | - | 3.65(s) | - | - |
| 4'-OCH3 | - | - | - | - | 3.79(s) | 3.79(s) |
| 5'-OCH3 | - | - | - | - | - | - |
| 6'-OCH3 | - | - | - | - | - | - |
| 2-OH | 16.74(s) | 16.67(s) | 16.78(s) | 16.65(s) | 16.76(s) | 16.75(s) |
| position | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 |
| H-Bz2 | 4.97(dd, 11.7, 4.8) | 5.45(dd, 12.3, 4.5) | 5.55(dd, 11.8, 4.7) | 5.87(dd, 13.2, 3.7) | 5.05(dd, 11.0, 5.0) |
| H-Bz3a | 3.12(dd, 13.4, 11.7) | 2.92(dd, 13.0, 12.3) | 2.89(dd, 13.0, 11.8) | 3.26(dd, 12.9, 3.7) | 3.12(dd, 13.3, 11.0) |
| H-Bz3b | 3.48(dd, 13.3, 4.8) | 3.51(dd, 13.0, 4.5) | 3.51(dd, 13.0, 4.7) | 3.57(dd, 13.2, 12.9) | 3.46(dd, 13.3, 5.0) |
| H-Bz6a | 7.36(dd, 7.9, 1.3) | 7.36(dd, 7.9, 1.4) | 7.36(dd, 7.9, 1.3) | 7.35(dd, 7.8, 1.5) | 7.37(dd, 7.9, 1.3) |
| H-Bz6b | 7.49(ddd, 7.9, 7.3, 1.2) | 7.46(ddd, 7.9, 7.7, 1.4) | 7.47(ddd, 7.9, 7.6, 1.5) | 7.51(ddd, 7.8, 7.4, 1.5) | 7.49(ddd, 7.9, 7.7, 1.4) |
| H-Bz7b | 7.23(ddd, 7.5, 7.3, 1.4) | 7.22(ddd, 7.7, 7.7, 1.5) | 7.23(ddd, 7.7, 7.6, 1.4) | 7.18(ddd, 7.7, 7.4, 1.5) | 7.23(ddd, 7.7, 7.6, 1.4) |
| H-Bz7a | 7.68(dd, 7.5, 1.3) | 7.70(dd, 7.7, 1.3) | 7.73(dd, 7.7, 1.3) | 7.63(dd, 7.7, 1.5) | 7.66(dd, 7.7, 1.4) |
| H2 | - | - | - | - | - |
| H3 | 8.51(dd, 8.2, 1.3) | 8.52(dd, 8.2, 1.4) | 8.51(dd, 8.2, 1.3) | 8.51(dd, 8.4, 1.5) | 8.51(dd, 8.2, 1.3) |
| H4 | 7.49(ddd, 8.2, 7.0, 1.1) | 7.48(ddd, 8.2, 6.9, 1.2) | 7.48(ddd, 8.2, 6.9, 1.2) | 7.42(ddd, 8.4, 6.9, 1.5) | 7.49(ddd, 8.2, 7.0, 1.6) |
| H5 | 7.57(ddd, 8.1, 7.0, 1.3) | 7.56(ddd, 8.1, 6.9, 1.4) | 7.56(ddd, 8.1, 6.9, 1.3) | 7.48(ddd, 8.3, 6.9, 1.5) | 7.57(ddd, 8.1, 7.0, 1.3) |
| H6 | 7.69(d, 8,1) | 7.70(d, 8.1) | 7.69(d, 8.1) | 7.68(dd, 8.3, 1.5) | 7.68(dd, 8.1, 1.5) |
| H7 | 7.11(d, 9.0) | 7.15(d, 9.0) | 7.13(d, 9.1) | 7.11(d, 9.0) | 7.08(d, 9.0) |
| H8 | 7.39(d, 9.0) | 7.60(d, 9.0) | 7.58(d, 9.1) | 7.50(d, 9.0) | 7.34(d, 9.0) |
| H1' | - | - | - | - | - |
| H2' | 6.49(d, 2.2) | - | - | - | 6.88(d, 2.0) |
| H3' | - | - | 6.52(s) | 6.12(s) | - |
| H4' | 6.38(dd, 2.2, 2.2) | - | - | - | - |
| H5' | - | 6.62(d, 8.7) | - | 6.12(s) | 6.85(dd, 8.2, 2.0) |
| H6' | 6.49(d, 2.2) | 7.18(d, 8.7) | 7.13(s) | - | 6.79(d, 8.2) |
| 2'-OCH3 | - | 3.84(s) | 3.89(s) | 3.67(br s) | - |
| 3'-OCH3 | 3.73(s) | 3.91(s) | - | - | 3.86(s) |
| 4'-OCH3 | - | 4.01(s) | 3.88(s) | 3.81(s) | 3.73(s) |
| 5'-OCH3 | 3.73(s) | - | 3.73(s) | - | - |
| 6'-OCH3 | - | - | - | 3.67(br s) | - |
| 2-OH | 16.72(s) | 16.74(s) | 16.73(s) | 16.79(s) | 16.78(s) |
| position | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 |
| H-Bz2 | 5.95(dd, 12.3, 4.3) | 6.01(dd, 10.5, 4.8) | 6.13(dd, 12.4, 4.0) | 5.90(dd, 12.1, 4.3) | 5.99(dd, 11.6, 4.5) |
| H-Bz3a | 3.27(dd, 13.0, 12.3) | 3.18(dd, 13.3, 10.5) | 3.24(dd, 12.4, 12.1) | 3.24(dd, 13.1, 12.1) | 3.25(dd, 13.1, 11.6) |
| H-Bz3b | 3.51(dd, 13.0, 4.3) | 3.37(dd, 13.4, 4.8) | 3.72(dd, 12.1, 4.0) | 3.43(dd, 13.1, 4.3) | 3.45(dd, 13.1, 4.5) |
| H-Bz6a | 7.34(dd, 7.9, 1.3) | 7.29(dd, 7.9, 1.4) | 7.30(dd, 7.4, 1.4) | 7.31(dd, 7.9, 1.3) | 7.33(dd, 7.9, 1.3) |
| H-Bz6b | 7.49(ddd, 7.9, 7.6, 1.4) | 7.47(ddd, 7.9, 7.7, 1.4) | 7.46(ddd, 7.6, 7.4, 1.5) | 7.47(ddd, 7.9, 7.7, 1.3) | 7.49(ddd, 7.9, 7.7, 1.5) |
| H-Bz7b | 7.18(ddd, 7.6, 1.4) | 7.19(ddd, 7.7, 7.7, 1.4) | 7.15(ddd, 7.6, 7.3, 1.4) | 7.16(ddd, 7.8, 7.7, 1.3) | 7.20(ddd, 7.9, 7.7, 1.3) |
| H-Bz7a | 7.57(dd, 7.6, 1.4) | 7.66(dd, 7.7, 1.4) | 7.41(dd, 7.3, 1.5) | 7.55(dd, 7.8, 1.3) | 7.63(dd, 7.7, 1.5) |
| H1 | - | - | - | - | - |
| H2 | 7.59(d, 7.5) | 7.79(d, 7.7) | 7.47(d, 7,5) | 7.58(d, 7.5) | 7.68(d, 7.5) |
| H3 | 7.41(dd, 8.2, 7.5) | 7.40(dd, 7.7, 7.7) | 7.37(dd, 7.7, 7.5) | 7.40(dd, 8.2, 7.5) | 7.41(dd, 8.2, 7.5) |
| H4 | 7.80(d, 8.2) | 7.79(d, 7.7) | 7.77(d, 7.7) | 7.79(d, 8.2) | 7.80(d, 8.2) |
| H5 | 7.91(dd, 8.3, 1.3) | 7.90(dd, 7.3, 2.0) | 7.89(dd, 8.0, 1.5) | 7.90(dd, 8.1, 1.3) | 7.90(dd, 7.9, 1.5) |
| H6 | 7.54(ddd,8.3,6.9,1.3) | 7.52(m) | 7.52(ddd, 8.0, 6.8, 1.2) | 7.53(ddd, 8.0, 6.8, 1.2) | 7.53(ddd, 7.9, 6.8, 1.2) |
| H7 | 7.60(ddd, 8.5, 6.9, 1.4) | 7.55(m) | 7.57(ddd, 8.5, 6.8, 1.5) | 7.59(ddd, 8.4, 6.8, 1.3) | 7.57(ddd, 8.3, 6.8, 1.5) |
| H8 | 8.04(d,8.5) | 8.07(dd, 7.2, 2.4) | 8.13(d, 8.4) | 8.02(d, 8.4) | 8.07(d, 8.3) |
| H1' | - | - | - | - | - |
| H2' | - | - | - | - | - |
| H3' | 7.10(dd, 8.3, 1.1) | 6.57(s) | 6.20(d, 2.4) | 6.58(d, 2.6) | 7.03(d, 1.4) |
| H4' | 7.41(ddd, 8.3, 7.1, 1.4) | - | - | - | 7.03(d, 1.4) |
| H5' | 6.87(ddd, 8.2, 7.1, 1.1) | - | 5.93(d, 2.4) | 6.41(dd, 8.9, 2.6) | - |
| H6' | 7.56(dd,8.2,1.4) | 6.71(s) | - | 7.41(d, 8.9) | 6.98(dd, 1.4, 1.4) |
| 4-OCH3 | - | - | - | - | - |
| 4'-OCH3 | - | 3.91(s) | 3.63(s) | 3.85(s) | - |
| 5'-OCH3 | - | 3.54(s) | - | - | 3.63(s) |
| 6'-OCH3 | - | - | 3.83(s) | - | - |
| 2'-OH | 14.54(s) | 15.01(s) | 16.81(s) | 15.10(s) | 14.07(s) |
| position | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 |
| H-Bz2 | 5.93(dd, 11.3, 4.5) | 6.16(dd, 12.4, 4.1) | 5.88(dd, 12.1, 4.3) | 5.95(dd, 9.9, 4.9) | 5.83(dd, 11.8, 4.2) |
| H-Bz3a | 3.19(dd, 13.1, 11.3) | 3.25(dd, 12.4, 12.2) | 3.24(dd, 13.0, 12.1) | 3.16(dd, 13.2, 9.9) | 3.20(dd, 13.1, 11.8) |
| H-Bz3b | 3.42(dd, 13.1, 4.5) | 3.67(dd, 12.2, 4.1) | 3.48(dd, 13.0, 4.3) | 3.34(dd, 13.2, 4.9) | 3.40(dd, 13.1, 4.2) |
| H-Bz6a | 7.32(dd, 7.9, 1.3) | 6.74(dd, 7.9, 1.3) | 7.34(dd, 7.9, 1.4) | 7.28(dd, 7.7, 1.4) | 7.30(dd, 7.8, 1.4) |
| H-Bz6b | 7.48(ddd, 7.9, 7.7, 1.4) | 7.47(ddd, 7.9, 7.5, 1.4) | 7.48(ddd, 7.9, 7.6, 1.5) | 7.45(ddd, 7.7, 7.7, 1.4) | 7.45(ddd, 7.8, 7.5, 1.4) |
| H-Bz7b | 7.19(ddd, 7.7, 7.7, 1.3) | 7.15(ddd, 7.9, 7.5, 1.3) | 7.18(ddd, 7.9, 7.6, 1.4) | 7.18(ddd, 7.7, 7.7, 1.4) | 7.15(ddd, 7.8, 7.5, 1.4) |
| H-Bz7a | 7.62(dd, 7.7, 1.4) | 7.32(dd, 7.9, 1.4) | 7.53(dd, 7.9, 1.1) | 7.65(dd, 7.7, 1.4) | 7.55(dd, 7.5, 1.4) |
| H1 | - | - | - | - | - |
| H2 | 7.58(d, 8.1) | 7.48(d, 8.1) | 7.48(d, 8.1) | 7.69(d, 8.1) | 7.49(d, 8.0) |
| H3 | 6.73(d, 8.1) | 6.71(d, 8.1) | 6.72(d, 8.1) | 6.72(d, 8.1) | 6.72(d, 8.1) |
| H4 | - | - | - | - | - |
| H5 | 8.36(dd, 8.3, 1.5) | 8.36(dd, 8.3, 1.3) | 8.37(dd, 8.3, 1.4) | 8.35(dd, 8.0, 1.6) | 8.35(dd, 8.2, 1.2) |
| H6 | 7.52(ddd, 8.3, 6.9, 1.2) | 7.52(ddd, 8.3, 6.9, 1.3) | 7.56(ddd, 8.3, 6.8, 1.4) | 7.51(ddd, 8.0, 6.8, 1.2) | 7.52(ddd, 8.2, 6.9, 1.1) |
| H7 | 7.58(ddd, 8.3, 6.9, 1.5) | 7.60(ddd, 8.4, 6.9, 1.3) | 7.61(ddd, 8.4, 6.8 1.4) | 7.56(ddd, 8.3, 6.8, 1.6) | 7.60(ddd, 8.1, 6.9, 1.2) |
| H8 | 7.99(d, 8.3) | 8.08(d, 8.4) | 7.97(d, 8.4) | 7.99(d, 8.3) | 7.95(dd, 8.1, 1.1) |
| H1' | - | - | - | - | - |
| H2' | - | - | - | - | - |
| H3' | 7.02(d, 1.6) | 6.39(d, 8.1) | 7.09(dd, 8.3, 1.1) | 6.55(s) | 6.56(d, 2.5) |
| H4' | 7.02(d, 1.6) | 7.29(dd, 8.2, 8.1) | 7.40(ddd, 8.3, 7.0, 1.2) | - | - |
| H5' | - | 7.32(d, 8.2) | 6.85(ddd, 8.2, 7.0, 1.1) | - | 6.40(dd, 8.9, 2.5) |
| H6' | 6.94(dd, 1.6, 1.6) | - | 7.57(dd, 8.2, 1.2) | 6.65(s) | 7.39(d, 8.9) |
| 4-OCH3 | 3.97(s) | 3.97(s) | 3.98(s) | 3.95(s) | 3.98(s) |
| 4'-OCH3 | - | - | - | 3.90(s) | 3.84(s) |
| 5'-OCH3 | 3.60(s) | - | - | 3.49(s) | - |
| 6'-OCH3 | - | 3.69(s) | - | - | - |
| 2'-OH | 14.08(s) | 15.74(s) | 14.55(s) | 15.05(s) | 15.15(s) |
| position | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 |
| H-Bz2 | 5.21(dd, 12.5, 4.6) | 5.24(dd, 10.8, 5.0) | 5.16(dd, 12.3, 4.6) | 5.39(dd, 12.6, 4.2) | 5.48(dd, 12.6, 4.4) | 5.51(dd, 12.3, 4.7) |
| H-Bz3a | 3.21(dd, 13.1, 12.5) | 3.19(dd, 13.3, 10.8) | 3.17(dd, 13.1, 12.3) | 3.04(dd, 12.6, 12.2) | 3.07(dd, 12.6, 12.2) | 3.09(dd, 13.2, 12.3) |
| H-Bz3b | 3.47(dd, 13.1, 4.6) | 3.33(dd, 13.3, 5.0) | 3.40(dd, 13.1, 4.7) | 3.71(dd, 12.2, 4.2) | 3.67(dd, 12.2, 4.4) | 3.65(dd, 13.2, 4.7) |
| H-Bz6a | 7.33(dd, 7.9, 1.4) | 7.30(dd, 7.9, 1.4) | 7.18(dd, 7.9, 1.3) | 7.28(dd, 7.9, 1.3) | 7.31(dd, 7.9, 1.4) | 7.39(dd, 7.8, 1.2) |
| H-Bz6b | 7.50(ddd, 7.9, 7.6, 1.4) | 7.47(ddd, 7.9, 7.6, 1.4) | 7.37(ddd, 7.9, 7.8, 1.4) | 7.46(dd, 7.6, 1.4) | 7.49(ddd,7.9,7.7,1.6) | 7.59(ddd, 7.8, 7.6, 1.4) |
| H-Bz7b | 7.23(ddd, 7.9, 7.6, 1.4) | 7.18(ddd, 7.7, 7.6, 1.4) | 7.08(ddd, 7.8, 7.7, 1.3) | 7.20(ddd, 7.7, 7.6 1.1) | 7.22(ddd, 7.7, 7.5, 1.4) | 7.29(ddd, 7.7, 7.6, 1.4) |
| H-Bz7a | 7.66(dd, 7.7, 1.4) | 7.64(dd, 7.7, 1.4) | 7.51(dd, 7.7, 1.4) | 7.65(dd, 7.7, 1.4) | 7.66(dd, 7.7, 1.4) | 7.62(dd, 7.7, 1.2) |
| H1 | 7.70(d, 2.0) | 7.72(d, 2.2) | 7.57(d, 1.9) | 7.68(d, 2.1) | 7.69(d, 1.8) | 7.85(d, 1.5) |
| H2 | - | - | - | - | - | - |
| H3 | 7.45(dd, 8.7, 2.0) | 7.46(dd, m, 2.2) | 7.32(dd, 8.7, 1.9) | 7.42(dd, 8.5, 2.1) | 7.43(dd, 8.5, 1.8) | 7.48(dd, 8.6, 1.5) |
| H4 | 7.81(d, 8.7) | 7.80(m) | 7.68(d, 8.7) | 7.79(d, 8.5) | 7.84(d, 8.5) | 7.89(d, 8.6) |
| H5 | 7.79(m) | 7.76(m) | 7.67(m) | 7.78(dm, 8.5, m) | 7.82(dm, 8.7, m) | 7.84(m) |
| H6 | 7.49(m) | 7.45(m) | 7.35(m) | 7.47(ddd, 8.5, 6.8, 2.1) | 7.50(ddd, 8.7, 6.9, 1.8) | 7.51(m) |
| H7 | 7.48(m) | 7.45(m) | 7.33(m) | 7.46(ddd, 8.5, 6.8, 1.5) | 7.48(ddd, 8.5, 6.9, 1.8) | 7.51(m) |
| H8 | 7.80(m) | 7.81(m) | 7.66(m) | 7.80(dm, 8.5, m) | 7.82(d, 8.5) | 7.89(m) |
| H1' | - | - | - | - | - | - |
| H2' | - | - | - | - | - | - |
| H3' | 7.09(dd, 8.3, 1.1) | 6.57(s) | 6.41(d, 2.6) | 6.19(d, 2.4) | 6.43(dd, 8.3, 1.0) | 6.96(d, 9.0) |
| H4' | 7.41(ddd, 8.5, 7.2, 1.6) | - | - | - | 7.30(dd, 8.3, 8.3) | 7.11(dd, 9.0, 3.0) |
| H5' | 6.91(ddd, 8.2, 7.3, 1.2) | - | 6.34(dd, 8.9, 2.6) | 5.97d, 2.4) | 6.70(dd, 8.3, 1.0) | - |
| H6' | 7.63(dd, 8.1, 1.4) | 6.82(s) | 7.39(d, 8.9) | - | - | 7.30(d, 3.0) |
| 4-OCH3 | - | - | - | - | - | - |
| 4'-OCH3 | - | 3.91(s) | 3.72(s) | 3.84(s) | - | - |
| 5'-OCH3 | - | 3.60(s) | - | - | - | 3.71(s) |
| 6'-OCH3 | - | - | - | 3.87(s) | 3.93(s) | - |
| 2'-OH | 14.50(s) | 14.96(s) | 15.05(s) | 16.72(s) | 15.69(s) | 13.75(s) |
27종 benzothiazepin 유도체들의 13C-NMR data는 아래 표와 같이 요약된다.
| position | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 |
| C-Bz2 | 52.7 | 52.3 | 59.1 | 55.4 | 55.5 | 52.6 | 55.5 | 52.4 | 52.6 | 48.6 | 56.0 |
| C-Bz3 | 35.3 | 36.3 | 36.8 | 36.7 | 37.0 | 35.5 | 36.6 | 36.1 | 36.0 | 33.1 | 36.9 |
| C-Bz4 | 172.2 | 172.1 | 171.5 | 171.5 | 171.4 | 172.1 | 171.5 | 172.0 | 172.1 | 172.4 | 171.5 |
| C-Bz6 | 146.4 | 146.6 | 146.3 | 146.3 | 146.1 | 146.3 | 146.3 | 146.4 | 146.4 | 144.9 | 146.2 |
| C-Bz6a | 125.5 | 125.6 | 125.6 | 125.6 | 125.5 | 125.5 | 125.6 | 125.5 | 125.6 | 125.4 | 125.6 |
| C-Bz6b | 130.0 | 130.2 | 130.3 | 130.3 | 130.2 | 129.9 | 130.4 | 130.1 | 130.1 | 129.6 | 130.3 |
| C-Bz7b | 126.7 | 126.8 | 126.9 | 126.9 | 126.9 | 126.7 | 126.9 | 126.7 | 126.7 | 126.1 | 126.8 |
| C-Bz7a | 135.7 | 135.7 | 135.6 | 135.5 | 135.6 | 135.7 | 135.5 | 135.6 | 135.4 | 135.4 | 135.4 |
| C-Bz7 | 126.3 | 125.8 | 125.8 | 125.8 | 125.7 | 125.6 | 125.7 | 125.9 | 126.4 | 128.4 | 126.2 |
| C1 | 110.3 | 110.3 | 110.1 | 110.1 | 110.1 | 110.3 | 110.1 | 110.3 | 110.3 | 112.6 | 110.2 |
| C2 | 168.7 | 168.4 | 168.7 | 168.6 | 168.8 | 168.8 | 168.6 | 168.5 | 168.7 | 169.9 | 168.9 |
| C3 | 125.1 | 125.0 | 125.1 | 125.0 | 125.1 | 125.1 | 125.0 | 125.0 | 125.0 | 125.1 | 125.1 |
| C4 | 125.6 | 125.6 | 125.7 | 125.7 | 126.9 | 126.5 | 125.9 | 125.6 | 125.6 | 125.3 | 125.7 |
| C5 | 129.7 | 129.7 | 129.8 | 129.8 | 129.8 | 129.7 | 129.8 | 129.7 | 129.7 | 128.9 | 129.8 |
| C6 | 127.4 | 127.4 | 127.4 | 127.4 | 127.4 | 127.4 | 127.4 | 127.4 | 127.4 | 127.3 | 127.4 |
| C7 | 117.0 | 119.0 | 117.2 | 118.6 | 117.1 | 116.9 | 117.2 | 117.1 | 117.0 | 116.5 | 117.1 |
| C8 | 124.4 | 124.3 | 124.0 | 124.0 | 125.5 | 124.4 | 124.0 | 124.3 | 124.5 | 124.4 | 124.2 |
| C9 | 128.0 | 127.9 | 127.9 | 127.9 | 130.0 | 127.8 | 127.9 | 127.9 | 127.9 | 129.2 | 128.0 |
| C10 | 136.9 | 136.9 | 136.8 | 136.8 | 136.8 | 136.9 | 136.8 | 136.8 | 136.9 | 136.9 | 136.8 |
| C1' | 131.6 | 137.3 | 143.7 | 145.2 | 136.0 | 124.3 | 145.8 | 129.3 | 123.0 | 110.0 | 136.0 |
| C2' | 155.5 | 144.9 | 128.3 | 112.2 | 127.5 | 156.6 | 104.6 | 149.9 | 149.7 | 161.0 | 109.8 |
| C3' | 110.6 | 152.7 | 129.1 | 160.0 | 114.3 | 98.7 | 161.2 | 142.0 | 97.4 | 90.8 | 149.1 |
| C4' | 129.1 | 111.9 | 126.4 | 117.2 | 159.5 | 160.7 | 99.9 | 153.5 | 149.4 | 161.0 | 149.3 |
| C5' | 121.0 | 124.6 | 129.1 | 130.1 | 114.3 | 104.5 | 161.2 | 107.5 | 143.2 | 90.8 | 111.2 |
| C6' | 127.2 | 117.2 | 128.3 | 113.5 | 127.5 | 128.0 | 104.6 | 121.5 | 111.7 | 161.0 | 118.5 |
| C2'-OCH3 | 55.7 | 61.3 | - | - | - | 55.7 | - | 56.2 | 56.5 | 55.6 | - |
| C3'-OCH3 | - | 56.0 | - | 59.0 | - | - | 59.2 | 61.0 | - | - | 59.2 |
| C4'-OCH3 | - | - | - | - | 58.7 | 55.6 | - | 61.5 | 56.4 | 55.6 | 56.2 |
| C5'-OCH3 | - | - | - | - | - | - | 59.2 | - | 56.7 | - | - |
| C6'-OCH3 | - | - | - | - | - | - | - | - | - | 55.6 | - |
| position | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 |
| C-Bz2 | 54.6 | 54.7 | 53.4 | 54.3 | 54.9 | 55.0 | 54.0 | 54.7 | 54.8 | 54.4 | 60.4 | 60.2 | 59.8 | 59.8 | 60.3 | 59.3 |
| C-Bz3 | 35.2 | 36.0 | 39.7 | 35.1 | 35.7 | 35.8 | 40.3 | 35.2 | 36.2 | 35.2 | 36.8 | 37.0 | 36.5 | 41.5 | 42.1 | 36.1 |
| C-Bz4 | 173.7 | 172.3 | 172.9 | 172.8 | 173.3 | 173.3 | 173.8 | 173.7 | 172.5 | 172.9 | 173.3 | 172.1 | 172.2 | 172.6 | 173.5 | 174.0 |
| C-Bz6 | 149.1 | 149.1 | 147.6 | 149.1 | 149.3 | 149.2 | 148.2 | 149.0 | 149.0 | 149.0 | 149.0 | 149.0 | 148.6 | 147.5 | 148.1 | 149.7 |
| C-Bz6a | 125.9 | 125.8 | 126.0 | 125.8 | 125.7 | 125.8 | 125.8 | 125.8 | 125.7 | 125.7 | 125.9 | 125.8 | 125.5 | 125.8 | 125.7 | 125.5 |
| C-Bz6b | 130.2 | 130.1 | 130.0 | 130.1 | 130.2 | 130.0 | 129.9 | 130.0 | 130.0 | 130.0 | 130.2 | 130.2 | 129.9 | 130.0 | 130.0 | 130.5 |
| C-Bz7b | 126.6 | 126.2 | 126.2 | 126.1 | 126.6 | 126.5 | 126.2 | 126.5 | 126.1 | 126.1 | 126.6 | 126.2 | 126.1 | 126.1 | 126.2 | 126.7 |
| C-Bz7a | 135.6 | 135.4 | 135.6 | 135.5 | 135.5 | 135.5 | 135.6 | 135.5 | 135.4 | 135.5 | 135.4 | 135.3 | 135.1 | 135.4 | 135.4 | 135.1 |
| C-Bz7 | 125.0 | 124.5 | 125.7 | 125.0 | 125.0 | 125.2 | 125.3 | 125.2 | 125.6 | 125.3 | 124.4 | 124.9 | 124.3 | 126.2 | 124.6 | 123.5 |
| C1 | 138.8 | 138.4 | 140.0 | 138.8 | 138.6 | 130.5 | 130.9 | 130.8 | 130.1 | 130.8 | 124.5 | 125.0 | 124.2 | 124.3 | 126.0 | 124.3 |
| C2 | 123.4 | 125.3 | 123.0 | 123.4 | 123.9 | 123.3 | 123.1 | 123.7 | 123.4 | 123.7 | 141.1 | 140.6 | 140.8 | 142.3 | 142.2 | 140.9 |
| C3 | 125.7 | 125.8 | 125.7 | 125.6 | 125.9 | 103.4 | 103.5 | 103.3 | 103.5 | 103.3 | 124.6 | 124.7 | 124.2 | 124.6 | 124.3 | 124.7 |
| C4 | 128.7 | 128.7 | 128.2 | 128.6 | 128.7 | 155.5 | 155.2 | 155.5 | 155.5 | 155.5 | 129.2 | 129.1 | 129.7 | 129.0 | 129.0 | 128.5 |
| C5 | 129.5 | 129.6 | 129.3 | 129.4 | 129.5 | 124.2 | 123.2 | 123.3 | 124.8 | 123.3 | 127.9 | 127.9 | 127.8 | 128.1 | 127.9 | 127.9 |
| C6 | 126.2 | 126.1 | 126.1 | 126.2 | 126.2 | 125.5 | 126.1 | 125.5 | 125.4 | 125.4 | 126.7 | 126.7 | 126.4 | 126.5 | 126.6 | 126.5 |
| C7 | 127.0 | 126.9 | 126.6 | 126.9 | 126.9 | 127.4 | 127.1 | 127.4 | 127.3 | 127.4 | 126.4 | 126.5 | 126.1 | 126.2 | 126.4 | 126.2 |
| C8 | 122.5 | 122.0 | 122.8 | 122.5 | 122.3 | 122.1 | 122.6 | 122.3 | 121.9 | 122.3 | 128.2 | 128.1 | 128.8 | 127.9 | 128.1 | 127.6 |
| C9 | 129.9 | 129.9 | 129.9 | 129.9 | 129.9 | 130.8 | 132.0 | 130.8 | 130.9 | 130.9 | 133.3 | 133.3 | 133.0 | 133.4 | 133.4 | 132.7 |
| C10 | 134.2 | 134.1 | 134.2 | 134.2 | 134.2 | 126.1 | 126.1 | 126.1 | 126.1 | 126.1 | 133.2 | 133.2 | 132.8 | 133.0 | 133.0 | 132.5 |
| C1' | 118.6 | 110.3 | 103.9 | 112.2 | 118.2 | 118.3 | 110.2 | 118.6 | 110.2 | 112.2 | 118.5 | 110.0 | 117.8 | 104.0 | 110.1 | 118.0 |
| C2' | 163.1 | 160.6 | 168.6 | 164.3 | 157.2 | 157.2 | 160.6 | 163.0 | 160.6 | 165.8 | 163.0 | 160.7 | 164.0 | 168.4 | 160.6 | 155.8 |
| C3' | 119.0 | 101.7 | 94.9 | 102.0 | 119.6 | 119.5 | 111.7 | 118.9 | 101.6 | 102.0 | 118.9 | 101.7 | 101.7 | 94.8 | 111.8 | 118.5 |
| C4' | 133.9 | 154.7 | 164.5 | 165.0 | 121.3 | 121.2 | 133.4 | 133.8 | 154.6 | 164.3 | 133.9 | 154.9 | 165.3 | 164.5 | 133.5 | 121.1 |
| C5' | 118.8 | 141.9 | 90.7 | 107.2 | 152.0 | 151.9 | 101.0 | 118.8 | 141.9 | 107.1 | 118.8 | 141.9 | 106.9 | 90.7 | 101.0 | 151.6 |
| C6' | 128.6 | 110.1 | 161.9 | 129.9 | 112.1 | 112.2 | 164.6 | 128.6 | 110.4 | 129.9 | 128.6 | 111.3 | 127.6 | 161.9 | 164.5 | 113.2 |
| C4-OCH3 | - | - | - | - | - | 55.9 | 55.8 | 55.7 | 55.7 | 55.7 | - | - | - | - | - | - |
| C4'-OCH3 | - | 56.2 | 55.6 | 55.6 | - | - | - | - | 56.2 | 55.6 | - | 56.2 | 55.4 | 55.6 | - | - |
| C5'-OCH3 | - | 56.5 | - | - | 56.0 | 55.7 | - | - | 56.4 | - | - | 57.0 | - | - | 55.6 | |
| C6'-OCH3 | - | - | 55.7 | - | - | - | 55.7 | - | - | - | - | - | - | 55.8 | 55.9 | - |
실시예
3. 고분해능질량분석법을 이용한
benzothiazepin
유도체들의 구조 규명
27종의 benzothiazepin 유도체들의 고분해능 질량을 분석하기 위하여 ultraperformance liquid chromatography-hybrid quadrupole-time-of-flight mass spectrometry Waters Acquity UPLC system (Waters Corp., Milford, MA)를 사용하였고 아래와 같은 결과를 얻었는데 아래 표의 왼쪽 값은 이론값(calcd)이고 오른쪽 값은 고분해능질량분석 결과로 얻은 질량값(found)이다.
| derivative | mass (calcd./found) |
name |
| 1 | 411.1293/412.1396 | (E)-2-(2-(2-methoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 2 | 441.1399/442.1524 | (E)-2-(2-(2,3-dimethoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 3 | 381.1187/382.1277 | (E)-2-(2-phenyl-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 4 | 411.1293/412.1367 | (E)-2-(2-(3-methoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 5 | 411.1293/410.1232 | (E)-2-(2-(4-methoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 6 | 441.1399/442.1468 | (E)-2-(2-(2,4-dimethoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 7 | 441.1399/442.1474 | (E)-2-(2-(3,5-dimethoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 8 | 471.1504/470.1437 | (E)-2-(2-(2,3,4-trimethoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 9 | 471.1504/472.1548 | (E)-2-(2-(2,4,5-trimethoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 10 | 471.1504/472.1603 | (E)-2-(2-(2,4,6-trimethoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| 11 | 441.1399/442.1485 | (E)-2-(2-(3,4-dimethoxyphenyl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)naphthalen-1-ol |
| derivative | mass (calcd./found) |
name |
| 12 | 381.1177/382.1274 | (E)-2-(2-(naphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 13 | 441.1399/442.1477 | (E)-4,5-dimethoxy-2-(2-(naphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 14 | 441.1399/442.1462 | (E)-3,5-dimethoxy-2-(2-(naphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 15 | 411.1293/412.1367 | (E)-5-methoxy-2-(2-(naphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 16 | 411.1293/410.1293 | (E)-4-methoxy-2-(2-(naphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 17 | 441.1399/442.1484 | (E)-4-methoxy-2-(2-(4-methoxynaphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 18 | 441.1399/442.1446 | (E)-3-methoxy-2-(2-(4-methoxynaphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 19 | 411.1293/410.1217 | (E)-2-(2-(4-methoxynaphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 20 | 471.1504/472.1561 | (E)-4,5-dimethoxy-2-(2-(4-methoxynaphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 21 | 441.1399/442.1472 | (E)-5-methoxy-2-(2-(4-methoxynaphthalen-1-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| derivative | mass (calcd./found) |
name |
| 22 | 381.1187/382.1267 | (E)-2-(2-(naphthalen-2-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 23 | 441.1399/442.1488 | (E)-4,5-dimethoxy-2-(2-(naphthalen-2-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 24 | 411.1293/412.1378 | (E)-5-methoxy-2-(2-(naphthalen-2-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 25 | 441.1399/442.1469 | (E)-3,5-dimethoxy-2-(2-(naphthalen-2-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 26 | 411.1293/412.1394 | (E)-3-methoxy-2-(2-(naphthalen-2-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
| 27 | 411.1293/412/1361 | (E)-4-methoxy-2-(2-(naphthalen-2-yl)-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]thiazepin-4-yl)phenol |
실시예
4.
benzothiazepin
유도체들의 사람 대장암 세포주 성장 저해 효능시험
HCT116 사람 대장암세포를 ATTC(American Type Culture Collection)로부터 구입하여 10% FBS (Fetal Bovine Serum, Invitrogen Life Technologies), Antibiotic-Antimycotic solution (Invitrogen Life Technologies) 포함한 DMEM (Invitrogen Life Technologies) 배양액을 2일에 한 번씩 100-mm 세포배양접시에 1 x 106의 접종 밀도(seed density)로 계대하면서 37℃, 5% CO2 배양기에서 배양하였다. benzothiazepin 유도체에 의한 암세포의 콜로니 형성능 (Colonogenic assay) 효과를 분석함으로써 세포증식 억제 효과를 측정하였다. HCT116 세포를 24-well 배양접시에 well 당 6000개 세포로 분주한 후 benzothiazepin 유도체를 처리하고, 7일 후 6% 글루타르알데하이드 (glutaraldehyde)와 0.5% 크리스탈바이올렛 (crystal violet) 용액을 1:1로 섞어준 혼합액을 세포에 첨가한 후 15분 동안 반응시켜 남아있는 세포를 염색하였다. 본 발명의 benzothiazepin 유도체에 의한 HCT116 대장암 세포의 성장 억제능은 CCK-8 키트 (Cell Counting Kit-8; Dojindo 회사, 일본)를 이용하여 측정하였다. HCT116 대장암세포를 96-well 세포 배양판에 1 x 104 개 되도록 분주한 후 benzothiazepin 유도체를 처리하고 각각 24 시간과 48 시간 후에 CCK-8 용액 10 ㎕를 첨가하였다. 2 시간 후에 세포배양액의 흡광도를 450 nm에서 측정하여 세포 생존능을 분석하였다. 아무 처리하지 않은 대조 세포군에서는 세포 성장능이 시간에 따라 증가하였지만, benzothiazepin 유도체를 처리한 세포군에서는 처리 농도에 의존적으로 세포 성장이 감소되었다. 이러한 결과는 benzothiazepin 유도체에 의해 HCT116 대장암세포의 증식이 저해되었음을 시사하는 것이다. 0, 0.5, 1, 10, 20uM의 농도로 대장암 세포주에 처리한 결과는 도 3과 같다.
clonogenic assay 결과를 desitometry를 이용하여 정량적으로 분석한 결과는 아래 표와 같다.
| 유도체 | 1차 (GI50) |
2차 (GI50) |
3차 (GI50) |
평균 (GI50) |
표준편차 | p(GI50) |
| 1 | 25.360 | 29.864 | 31.345 | 28.857 | 3.117 | 4.540 |
| 2 | 15.105 | 15.191 | 15.790 | 15.362 | 0.373 | 4.814 |
| 3 | 20.486 | 21.018 | 22.277 | 21.260 | 0.920 | 4.672 |
| 4 | 19.968 | 18.188 | 23.590 | 20.582 | 2.753 | 4.687 |
| 5 | 18.217 | 17.935 | 18.238 | 18.130 | 0.169 | 4.742 |
| 6 | 42.618 | 42.214 | 44.297 | 43.043 | 1.105 | 4.366 |
| 7 | 7.310 | 6.527 | 6.270 | 6.702 | 0.542 | 5.174 |
| 8 | 6.129 | 6.198 | 6.060 | 6.129 | 0.069 | 5.213 |
| 9 | 21.428 | 20.784 | 19.900 | 20.704 | 0.767 | 4.684 |
| 10 | 41.305 | 31.956 | 36.551 | 36.604 | 4.675 | 4.436 |
| 11 | 17.879 | 16.216 | 17.471 | 17.189 | 0.867 | 4.765 |
| 12 | 7.132 | 6.651 | 5.517 | 6.433 | 0.829 | 5.192 |
| 13 | 5.869 | 6.420 | 6.171 | 6.153 | 0.276 | 5.211 |
| 14 | 43.879 | 47.342 | 43.528 | 44.916 | 2.108 | 4.348 |
| 15 | 8.110 | 8.295 | 8.865 | 8.423 | 0.394 | 5.075 |
| 16 | 6.655 | 6.157 | 6.108 | 6.307 | 0.302 | 5.200 |
| 17 | 7.092 | 6.800 | 7.062 | 6.985 | 0.160 | 5.156 |
| 18 | 53.573 | 49.107 | 56.641 | 53.107 | 3.789 | 4.275 |
| 19 | 17.715 | 17.559 | 17.657 | 17.643 | 0.079 | 4.753 |
| 20 | 4.089 | 4.709 | 4.487 | 4.429 | 0.314 | 5.354 |
| 21 | 28.850 | 27.039 | 26.375 | 27.421 | 1.281 | 4.562 |
| 22 | 10.644 | 8.023 | 10.128 | 9.598 | 1.389 | 5.018 |
| 23 | 14.135 | 14.324 | 13.575 | 14.011 | 0.389 | 4.854 |
| 24 | 24.529 | 24.722 | 23.109 | 24.120 | 0.881 | 4.618 |
| 25 | 40.903 | 38.346 | 40.134 | 39.794 | 1.312 | 4.400 |
| 26 | 20.920 | 20.633 | 21.725 | 21.093 | 0.566 | 4.676 |
| 27 | 19.081 | 18.294 | 16.262 | 17.879 | 1.455 | 4.748 |
이 결과를 그림으로 나타내면 아래와 같은데 사람 대장암 세포주 성장을 가장 잘 억제하는 benzothiazepin 유도체는 20번으로 4.4uM의 half maximal cell growth inhibitory concentration (GI50)을 보이고 가장 미약한 효능을 보인 6번 유도체도 43.0uM의 GI50 값을 보였기 때문에 본 발명의 benzothiazepin 유도체들은 모두 사람 대장암 세포주의 성장을 효과적으로 저해함으로써 항암효과를 보이는 결과를 얻었다.
실시예 5. 사람 대장암 세포주의 성장을 가장 효과적으로 저해하는 benzothiazepin 유도체 20의 암세포 독성 효과
benzothiazepin 유도체 20의 암억제 활성 효과를 확인하기 위하여, HCT116 대장암 세포의 세포독성 효과를 CCK-8 키트 (Cell Counting Kit-8; Dojindo 회사, 일본)를 이용하여 측정하였다. HCT116 대장암세포를 96-well 세포 배양판에 1 x 104 개 되도록 분주한 후 0, 5, 10, 20, 40 μM 농도의 benzothiazepin 유도체 20을 처리하고 각각 24 시간 후에 CCK-8 용액 10 ㎕를 첨가하였다. 2 시간 후에 세포배양액의 흡광도를 450 nm에서 측정하여 세포 생존능(cell viability)을 분석하였다.
도 5에 나타난 바와 같이 아무 처리하지 않은 대조 세포군의 생존율을 100%로 하였을때 benzothiazepin 유도체 20을 5, 10, 20, 40 μM 농도로 처리한 세포군에서는 각각 96.3%, 50.4%, 42.1%, 34.8%로 세포 생존률이 감소되었다. 이러한 결과는 본 발명의 benzothiazepin 유도체 20이 HCT1160 대장암세포에서 독성 유도 효과가 있음을 시사하는 것이다.
실시예
6.
benzothiazepin
유도체 20의 사람 대장암 세포자기사멸(
apoptosis
) 유도 효과
본 발명의 benzothiazepin 유도체 20이 대장암 세포주에서 나타나는 세포독성 효과가 세포사멸(apoptosis)에 의해 유도되는 것인지 여부를 분석하였다. 일반적으로 세포사멸이 유도되는 세포에서는 세포막 내부에 존재하는 인지질 phosphatidylserine (PS)이 바깥쪽 세포막으로 이동한다. Annexin V 단백질은 PS와 강한 친화력을 보이는 단백질로서 세포와 반응시키면 세포사멸이 일어나고 있는 세포에만 결합한다. 이러한 원리를 이용하여 형광을 붙인 Annexin V 단백질 (Anexin V-FITC)과 약물을 처리한 세포를 반응시키고, 형광을 측정하면 세포자기사멸이 일어난 세포를 정량적으로 분석할 수 있게 된다. 본 발명의 benzothiazepin 유도체 20의 세포자기사멸 유도 효과를 측정하기 위하여 HCT116 대장암세포에 20 μM 농도의 benzothiazepin 유도체 20을 처리하고 2일 후 1% 트립신-EDTA 용액을 첨가해 배양 용기에 부착되어 있던 세포를 떼어내어 세포를 수확하였다. 수확된 세포에 10 μg/ml 농도의 PI (Propidium Iodide)와 Annexin V-FITC (덴마크 Chemometec 회사에서 구입) 용액 2 μl 를 첨가한 후 15분간 반응시키고 유세포 분리측정기 (NucleoCounter NC-3000, Chemometec 회사, 덴마크)를 이용하여 형광이 나타나는 세포를 측정하였다.
도 6A에 나타낸 바와 같이, 정상적으로 성장하고 있는 HCT116 대장암세포에서는 전체 세포의 약 6%에서 Annexin V와 반응하였지만, 본 발명의 benzothiazepin 유도체 20을 처리한 세포에서는 거의 대부분의 세포에서 Annexin V와 결합하였다. 이러한 실험 결과는 benzothiazepin 유도체 20이 HCT116 대장암세포의 세포자기사멸을 유도시킨다는 사실을 의미하는 것이다.
세포자기사멸(apoptosis)은 씨스테인 단백분해 효소의 일종인 카스파제 (Caspase)의 활성에 의해 유도된다 (Cell (1996) 87;171, Biochem J (1997) 326;1-16). 카스파제는 현재까지 10종류 이상이 발견되었다. 그중에서 세포사멸을 유도하는 세포자극에 의해 미토콘리아막에 존재하는 씨토크롬-씨 (Cytochrome-C)가 분비되면 카스파제-9이 활성되고, 활성 카스파제-9은 카스파제-3과 카스파제-7을 절단하여 활성 시킨다. 활성된 카스파제-3과 카스파제-7는 세포 활성에 중요한 여러 가지 단백질을 분해시킴으로써 세포자기사멸을 유도시킨다. PARP(Poly (ADP-Ribose) Polymerase)는 손상된 DNA를 복구시켜주는 113 kDa 크기의 DNA 수복 효소이다. PARP 단백질은 세포자기사멸 과정 중 카스파제-3과 카스파제-7 효소에 의해 89-kDa과 24-kDa 크기의 단편으로 잘려지기 때문에, PARP 단백질의 89-kDa과 24-kDa 단편의 생성 현상은 세포자기사멸 과정을 검증하는 주요 생화학적 표지로 간주 되고 있다 (Nature (1994) 371:346-347).
이에 본 발명에서는 benzothiazepin 유도체 20을 처리한 후 카스파제-7과 PARP의 조각 단편 생성 정도를 웨스턴 블롯 분석법을 이용하여 조사하였다. HCT116 세포를 60-mm 세포배양접시에 1 x 106의 접종 밀도(seed density)로 계대하면서 37℃, 5% CO2 배양기에서 배양하였다. 배양된 세포에 0, 10, 20 μM 농도의 benzothiazepin 유도체 20을 처리하고, 24 시간 경과 후 세포를 수확하였다. 수확된 세포에 20mM HEPES(pH 7.2), 1% Triton X-100, 10% glycerol, 150 mM NaCl, 10 μg/ml leupeptin, 1mM PMSF가 함유된 세포용해액(cell lysis buffer)을 첨가하여 30분 동안 반응시켜 세포를 용해시킨 후, 고속원심분리하여 세포 용해액을 수확하고, 동량의 단백질이 포함하도록 제조된 단백질 용해액을 SDS-폴리아크릴아마이드 겔(SDS-polyacrylamide gel) 전기영동을 실시하여 세포에 존재하는 단백질들을 분리하였다. 전기영동으로 분리된 단백질을 폴리스틸렌 막 (polystyrene membrane)으로 옮긴 후, PARP 단백질과 절단형의 카스파제-7 단백질과 결합하는 일차 항체(Cell Signaling Technology 회사에서 구입)와 대조군으로서 단백질 발현이 변화되지 않는 GAPDH를 인지하는 일차항체 (Santa Cruz technology 회사에서 구입)를 각각 5시간 반응 시킨 후, 일차항체를 인자하는 이차항체 (Cell Signaling Technology 회사에서 구입)를 1시간동안 반응시켰다. 화학형광감지 시스템 (Chemiluminescence detection system; Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ)을 이용하여 X-ray 필름상에서 각 단백질들의 발현 변화를 분석하였다.
도 6B에 나타낸 바와 같이 benzothiazepin 유도체 20을 HCT116 대장암 세포에 처리하면 89-kDa 크기의 PARP 조각 단편이 생성되는 것이 관찰되었다. PARP 단백질 절단은 씨스테인 단백분해 효소 (cystein protease)인 카스파제-3 혹은 카스파제-7 효소 활성에 의해 유도된다. 카스파제-3과 카스파제-7 효소는 통상 비활성형의 전구체로 존재하다가 세포사멸 자극 신호가 전달되면 절단되어 활성형이 된다. benzothiazepin 유도체 20에 의한 PARP 절단이 카스파제 효소 활성에 의해 유도 되었는지를 알아보기 위하여, 상기의 웨스턴 블롯법을 이용하여 활성형의 카스파제-7 단편 생성 여부를 조사하였다. HCT116 대장암세포에 benzothiazepin 유도체 20을 처리한 경우 대조 단백질인 GAPDH의 양은 변하지 않았으나 절단형 카스파제-7 단백질은 benzothiazepin 유도체 20을 농도 의존적으로 증가된다는 사실을 확인하였다.
Claims (10)
- 하기 화학식 1 및 화학식 2로 구성된 군으로부터 선택된 항암활성을 가지는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
.
[화학식 1]
[화학식 2]
상기 화학식 1에서 R1은 수소, R2는 메톡시, R3는 수소, R4는 메톡시, R5는 수소 또는
R1은 메톡시, R2는 메톡시, R3는 메톡시, R4는 수소, 및 R5는 수소이고,
상기 화학식 2에서 R6는 수소, R7은 수소, R8은 수소, R9은 수소 또는
R6는 메톡시, R7은 메톡시, R8은 수소, R9은 수소 또는
R6는 수소, R7은 메톡시, R8은 수소, R9은 수소 또는
R6는 수소, R7은 메톡시, R8은 수소, R9은 메톡시 또는
R6는 메톡시, R7은 메톡시, R8은 수소, R9은 메톡시임. - 제1항에 있어서, 상기 화합물은 상기 화학식 2에서 R6는 메톡시, R7은 메톡시, R8은 수소, R9은 메톡시인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
- 제1항에 있어서, 상기 화합물은 대장암에 대한 항암활성을 가지는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
- 제1항의 화합물을 유효성분으로 포함하는 항암용 약학 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 화합물은 대장암에 대한 항암활성을 가지는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 화합물은 암세포의 세포자기사멸을 유도시키는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
- 제1항의 화합물을 유효성분으로 포함하는 암 개선용 식품 조성물.
- 제7항에 있어서, 상기 화합물은 대장암에 대한 항암활성을 가지는 것을 특징으로 하는 식품 조성물.
- 제7항에 있어서, 상기 화합물은 암세포의 세포자기사멸을 유도시키는 것을 특징으로 하는 식품 조성물.
- 2'-하이드록시-4,5-디메톡시아세토페논과 4-메톡시-1-나프타알데히드를 알코올에서 혼합하고 이것을 수산화칼륨을 처리하고 혼합하여 반응시킨 후 그 침전물을 여과하여 칼콘(chalcone) 화합물을 생성하고 여기에 갈륨(III) 트리플루오로메탄설포네이트를 더하여 알코올에 녹인 후 2-아미노싸이오페놀을 첨가하여 반응하는 단계를 포함하는 하기 화학식 2의 화합물 제조방법.
[화학식 2]
상기 화학식 2에서 R6는 메톡시, R7은 메톡시, R8은 수소, R9은 메톡시임.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020150132710A KR101667493B1 (ko) | 2015-09-18 | 2015-09-18 | 항암효능을 보이는 벤조싸이아제핀 유도체 및 그 용도 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020150132710A KR101667493B1 (ko) | 2015-09-18 | 2015-09-18 | 항암효능을 보이는 벤조싸이아제핀 유도체 및 그 용도 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR101667493B1 true KR101667493B1 (ko) | 2016-10-18 |
Family
ID=57244162
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020150132710A KR101667493B1 (ko) | 2015-09-18 | 2015-09-18 | 항암효능을 보이는 벤조싸이아제핀 유도체 및 그 용도 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR101667493B1 (ko) |
-
2015
- 2015-09-18 KR KR1020150132710A patent/KR101667493B1/ko active IP Right Grant
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Analele Universitatii Bucuresti, Chimie., Vol.20, No.2., pp 141-147 * |
| International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences., 2010.06., Vol.2, No.2., pp 27-29 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR102159442B1 (ko) | 체크포인트 키나아제 1(chk1) 억제제로서 유용한 3,5-이치환된 피라졸, 및 이의 제조 및 적용 | |
| Malebari et al. | β-Lactam analogues of combretastatin A-4 prevent metabolic inactivation by glucuronidation in chemoresistant HT-29 colon cancer cells | |
| WO2008134474A2 (en) | Compositions and methods including cell death inducers and procaspase activation | |
| Shareef et al. | Investigation of podophyllotoxin esters as potential anticancer agents: synthesis, biological studies and tubulin inhibition properties | |
| Yee et al. | Synthesis of novel isoflavene–propranolol hybrids as anti-tumor agents | |
| US9108941B2 (en) | Griseofulvin analogues for the treatment of cancer by inhibition of centrosomal clustering | |
| US20230295162A1 (en) | Synthesis of novel imipridone derivatives and their evaluation for their anticancer activity | |
| Song et al. | Discovery of bazedoxifene analogues targeting glycoprotein 130 | |
| KR101667493B1 (ko) | 항암효능을 보이는 벤조싸이아제핀 유도체 및 그 용도 | |
| KR20170043958A (ko) | 항암효능을 보이는 나프탈레닐페닐피라조린 유도체 | |
| CN110028477B (zh) | 一类布雷菲德菌素a的4-位拼合氮芥衍生物的制备方法和用途 | |
| KR20190043842A (ko) | 피리미딘-2-아민 유도체, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 항암제 | |
| KR101457638B1 (ko) | 피라졸릴나프탈레놀 유도체, 그 제법 및 그것을 포함하는 항암 조성물 | |
| CN110028478B (zh) | 一类布雷菲德菌素a的4,7-位拼合氮芥衍生物的制备方法和用途 | |
| CN101230015B (zh) | 含酰胺取代基的取代桂皮酸衍生物及其肿瘤细胞毒性 | |
| KR102061458B1 (ko) | 피리미딘-2-아민 유도체, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 항암제 | |
| KR101457637B1 (ko) | 디히드로피라졸카르보티오아미드 유도체 및 그 제법 및 그 유도체를 포함하는 항암제 조성물 | |
| KR101890993B1 (ko) | 항암효능을 보이는 다이페닐나프틸피라조리닐카보티오아미드 유도체 | |
| KR101333734B1 (ko) | 벤조히드록시메톡시칼콘을 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물 | |
| KR101690665B1 (ko) | 신규한 2-하이드록시 커큐미노이드 유도체, 이의 제조 방법 및 이를 포함하는 항암제 조성물 | |
| JP2017503026A (ja) | 水溶性４−アザポドフィルロトキシン類似体 | |
| KR101446279B1 (ko) | 메톡시크로메닐칼콘 유도체 및 그 제법 및 항암제로서의 용도 | |
| RU2814738C1 (ru) | Средство на основе производного арглабина, обладающее селективным цитотоксическим действием | |
| KR101540033B1 (ko) | 신규한 벤조칼콘 유도체 및 그 화합물을 포함하는 항암 조성물 | |
| RU2814259C1 (ru) | Средство на основе производного арглабина, обладающее селективным цитотоксическим действием |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant | ||
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20191001 Year of fee payment: 4 |