KR101652070B1 - 질려자 추출물을 함유하는 피부 볼륨 증진 또는 주름, 탄력 개선용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 지방전구세포로부터 지방세포로의 분화를 촉진하는 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 질려자 추출물을 유효성분으로 함유하여 지방전구세포를 지방세포로의 분화를 촉진시킴으로써, 지방을 생성하여 피부의 볼륨을 증가시키고, 콜라겐과 엘라스틴 합성을 촉진시켜 주름을 개선시키고 탄력을 증진시키는 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 피부의 볼륨을 증가시켜주고, 주름과 탄력을 개선시킬 수 있는 조성물에 관한 것으로, 노화로 인한 피부 볼륨 감소와 주름 및 탄력 개선에 효과가 있는 조성물에 관한 것이다.
피부는 인체의 외부를 덮고 있는 기관으로 표피(epidermis), 진피(dermis), 피하지방층(hypodermis)의 3개의 층으로 구성되어 있다. 진피 아래에 존재하는 피하지방층은 지방전구세포와 지방전구세포가 분화하여 만들어지는 성숙한 지방세포로 구성되어 있으며, 지방세포들은 섬유성 결체조직(fibrous connective tissue)인 중격(septa)에 의해 소엽(lobule)으로 분리되며, 중격에는 혈관, 림프관, 신경이 존재한다. 피하지방층은 열 손상을 방지하고 외부의 충격을 흡수하여 몸을 보호하는 기능을 하며, 영양성분을 중성지방(triglyceride)의 형태로 지방소체(lipid droplet)에 저장하여 필요시 에너지원으로 사용하며, 피부의 볼륨을 유지하는 지지체(scaffold)로 미용의 기능도 수행하고 있다.
나이가 들어가면서 호르몬 분비와 생화학적 변화 등 내부 원인에 의해 표피와 피하지방층이 얇아지며 표피-진피 경계부의 망상조직 굴곡(rete ridge pattern)이 평평해진다. 어린 아기의 얼굴은 전체적으로 둥글고 부드러운 느낌을 준다. 탄력 있는 피부와 풍부한 피하지방층, 그리고 부드러운 코와 귀의 연골이 이러한 얼굴 윤곽을 만든다. 사춘기에 이르면 얼굴 뼈와 코, 귀의 연골은 거의 성인의 크기로 자라게 된다. 개인적, 인종적 차이는 있지만 20대 중반 이후부터 나이에 따른 얼굴의 변화가 시작된다. 초기에는 미세한 피부의 노화가 진행되며 이러한 피부의 변화는 자외선, 흡연 등 외부의 요인이 주된 원인이 된다. 20대 후반에서 30대에는 눈썹을 포함한 이마의 하강이 시작되며 이로 인해 눈이 작아 보이게 된다. 30대 중반부터는 눈꺼풀 피부의 탄력이 떨어지고 눈가 지방이 처져 보이게(pseudoherniation) 된다. 또한, 미간 주름(glabellar frown lines)과 입가 주름(nasolabial folds)이 두드러지기 시작한다. 40대에는 이마 주름이 깊어지며 눈가 주름(crow's-feet), 깊은 미간 주름(glabel-lar furrows)이 생기고 눈꺼풀은 탄력을 잃어 처지게 된다. 또한, 입과 턱 주변에 불규칙한 선이 생긴다. 50대에는 입 주변과 목의 주름이 확연히 보이고 코끝이 쳐지고 외안각이 아래로 쳐진다. 이마와 눈가의 주름들은 더욱 깊어지고 인상을 쓰고 있지 않을 때도 관찰된다. 얼굴 중앙부의 구조들이 쳐지면서 눈 아래의 지방이 내려오고 입가 주름이 깊어진다. 60대 이후에는 피부가 얇아지며 피하 지방의 감소로 얼굴 전체에 깊은 주름이 생기게 된다(J. Rhinol. 2012, 19(2), 87-90). 즉, 나이가 듦에 따라 지방전구세포가 지방세포로의 분화가 감소하여 피하지방의 지방 생성 능력이 감소하고, 피부의 볼륨이 감소한다고 알려져있다.
최근 이러한 노화에 의한 피하지방의 감소에 동반되는 피부 볼륨의 소실을 개선하고자 자가 지방이식술이 널리 사용되고 있다. 자가 지방이식술은 자신의 허벅지 또는 복부 등에서 지방을 채취해서, 전처리 과정을 거친 후 피부 볼륨이 감소한 이마, 턱, 볼 및 코에 성형의 목적으로 주입하거나, 약물치료로 인한 지방위축 부위, 암 절제 수술로 인한 함몰 피부 등에 적용하여 피부 볼륨을 증가시키는데 활용되고 있다.
그러나 지방이식수술 이후에 이식 부위의 40~60%가 다시 인체 내에 흡수되어 장기간의 효과를 발휘하지 못하고 지속적인 효과를 위해서는 추가 시술이 필요하다는 단점이 제기되어 왔다. 이외에도, 이식부위에 만성적인 부종, 여드름, 감각 장애 등의 발생하는 부작용뿐만 아니라, 피부가 얇고 피하지방이 적은 부위에서는 지방이식 후 지방세포 덩어리가 만져지는 등의 문제가 제기되어 왔다. 따라서, 이러한 문제점들이 있는 지방이식수술을 대체하면서 피하지방층을 충분히 증가 및 유지시킬 수 있는 조성물에 대한 요구가 증가하는 추세이다.
질려자(Tribuli Fructus)는 남가새과(Zygophyllaceae)의 남가새(Tribulus terrestris L.)의 열매로 5개의 분과가 방사상으로 배열한 5각 별모양이고, 지름 0.7~1.2 cm이며 소분과는 도끼 모양이고 길이 0.3~0.6 cm이다. 등 부위는 황록색이고 융기되어 있으며 세로로 달리는 모서리 및 다수의 작은 가시가 있다. 가시는 긴 가시와 작은 가시가 대칭으로 한 쌍씩 있다. 두 측면은 거칠고 그물무늬가 있으며 회백색이다. 질은 단단하고 거의 냄새가 없으며 맛은 처음에는 부드럽고 후에 쓰다. 성질은 한쪽으로 치우치지 않고 평하다. 질려자는 간 기운의 상승으로 인한 어지럼증, 두통, 헛것이 보이는 증상, 고혈압, 흉협부의 동통, 생리불순, 유즙분비, 유방염, 안충혈, 백태, 습지, 풍진, 신경성피부염, 가려움증에 사용한다. 약리작용으로 혈압강하, 이뇨, 진해, 거담, 평천작용이 보고되었다. 다른 이름으로 굴인(屈人), 방통(旁通), 백질려자(白藜子), 승추((升推), 시우(豺羽), 자(茨), 지행(止行), 자질려(刺藜), 즉려(卽藜), 승추(升推) 등이 있다.
한국 공개특허공보 제2013-0124107호에는 질려자 추출물을 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 한국 공개특허공보 제2012-0064845호에는 알러지 및 아토피성 질환에 효능을 가진 질려자 주정추출물이 개시되는 등 주로 염증과 관련되어 보고되고 있다. 또한, 한국 공개특허공보 제2014-0070687호에는 남가새 추출물을 포함하는 비만 치료 및 개선용 조성물이 개시되어 있다. 하지만, 남가새의 열매인 질려자의 피부 볼륨 증가 및 주름, 탄력 개선과 관련된 효능에 관해서는 전혀 보고된 바 없다.
따라서, 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 지방조직을 이루는 지방세포의 분화를 촉진시킴으로써 근본적으로 피부의 볼륨감을 증가시켜 줄 수 있는 성분을 개발하기 위한 것이다.
보다 구체적으로, 본 발명의 목적은 피부의 볼륨을 증가시켜주고, 피부 주름과 탄력을 개선시킬 수 있는 조성물 및 이의 제법에 관한 것으로, 다양한 원인 중 특히 노화로 인한 피부 볼륨 감소, 탄력 감소, 주름의 개선, 방지 및 치료 등에 효과가 있는 조성물을 제공하는 것이다.
상술한 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 질려자 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 제공한다.
일 양태로, 본 발명은 질려자 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 외용제 조성물을 제공한다.
또 다른 양태로, 본 발명은 질려자 추출물을 유효성분으로 포함하는 생체외(ex vivo) 또는 시험관내(in vitro) 조건에서 지방전구세포에서 지방세포로의 분화 촉진용 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명은 질려자 추출물을 유효성분으로 포함하는 생체외(ex vivo) 또는 시험관내(in vitro) 조건에서 지방전구세포를 지방세포로 분화시키는 방법을 제공한다.
보다 구체적으로, 본 발명에 따른 조성물은 지방전구세포에서 지방세포로의 분화를 촉진하는 작용을 한다. 본 발명에 따른 조성물의 지방전구세포에서 지방세포로의 분화 촉진 작용은 생체내(in vivo), 생체외(ex vivo) 또는 시험관내(in vitro) 조건에서 일어날 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 섬유아세포에서 콜라겐 합성을 촉진하는 작용 및/또는 섬유아세포에서 엘라스틴 생성을 촉진하는 작용을 한다. 이들 작용을 통해, 본 발명에 따른 피부 조성물은 피부를 보호할 수 있으며, 피부 외용제로 사용될 수 있다.
이에, 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 피부 보호, 특히 피부 볼륨 증진, 피부 탄력, 주름 개선 용도를 가질 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 화장료 조성물, 약학적 조성물, 건강식품 조성물 등으로 전용될 수 있다.
본 발명자들은 여러 생약재를 대상으로 피부의 볼륨 증가 효과 및 피부의 주름 및 상술한 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 질려자 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 제공한다.
일 양태로, 본 발명은 질려자 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 외용제 조성물을 제공한다.
또 다른 양태로, 본 발명은 질려자 추출물을 유효성분으로 포함하는 생체외(ex vivo) 또는 시험관내(in vitro) 조건에서 지방전구세포에서 지방세포로의 분화 촉진용 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명은 질려자 추출물을 유효성분으로 포함하는 생체외(ex vivo) 또는 시험관내(in vitro) 조건에서 지방전구세포를 지방세포로 분화시키는 방법을 제공한다.
보다 구체적으로, 본 발명에 따른 조성물은 지방전구세포에서 지방세포로의 분화를 촉진하는 작용을 한다. 본 발명에 따른 조성물의 지방전구세포에서 지방세포로의 분화 촉진 작용은 생체내(in vivo), 생체외(ex vivo) 또는 시험관내(in vitro) 조건에서 일어날 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 섬유아세포에서 콜라겐 합성을 촉진하는 작용 및/또는 섬유아세포에서 엘라스틴 생성을 촉진하는 작용을 한다. 이들 작용을 통해, 본 발명에 따른 피부 조성물은 피부를 보호할 수 있으며, 피부 외용제로 사용될 수 있다.
이에, 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 피부 보호, 특히 피부 볼륨 증진, 피부 탄력, 주름 개선 용도를 가질 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 화장료 조성물, 약학적 조성물, 건강식품 조성물 등으로 전용될 수 있다.
본 발명자들은 여러 생약재를 대상으로 피부의 볼륨 증가 효과 및 피부의 주름 및 탄력을 개선하는 효과를 갖는 물질에 대한 연구를 거듭한 결과, 질려자 추출물이 지방분화를 촉진하여 피부 볼륨을 증가시키는 효과뿐만 아니라, 피부 탄력 및 주름 개선 효과가 있음을 발견하고, 본 발명을 완성하였다.
이에, 일 양태로 본 발명은 질려자 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 볼륨 증진 또는 피부 탄력, 주름 개선용 피부 외용제 조성물을 제공한다.
본 발명에 있어서, 용어 '피부'는 인체의 외부를 덮고 있는 기관으로, 상기 인체에는 얼굴 또는 바디를 포함한다.
본 발명에 따른 조성물은, 지방세포의 분화를 촉진한다. 지방세포의 분화 촉진 작용이 생체 내에서 일어남으로써, 피부 볼륨을 증진시킬 수 있고, 또한, 피부 탄력 및 주름을 개선시킬 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은, 콜라겐 생성을 촉진하고 콜라겐 분해를 억제하며, 엘라스틴 생성을 촉진하고 엘라스틴 분해를 억제함으로써, 피부 볼륨을 증진시킬 수 있고, 또한, 피부 탄력 및 주름을 개선시킬 수 있다.
본 발명에 있어서, 용어 '지방세포(의) 분화'는 동물, 바람직하게는 인간의 지방전구세포 또는 중간엽줄기세포가 지방세포로 분화하는 것을 의미한다. 바람직하게, 지방전구세포가 지방세포로 분화하는 것을 의미한다.
본 발명에 있어서, 문구 '피부 볼륨(을) 증진(증가)'은 피부 지방조직의 부피를 증가시키는 것을 의미하고, 이로써 피부의 탱탱함 또는 탄력을 유지, 개선 또는 향상시키고, 피부의 탱탱함 또는 탄력이 소실되는 것을 방지 혹은 저지할 수 있으며, 피부 탄력의 손실에 따른 주름 생성 등과 같은 피부 노화 현상을 방지, 저지, 혹은 개선할 수 있다.
볼륨의 증진 내지 탄력, 주름의 개선이 요구되는 부위에 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물을 도포하면, 볼륨이 증진되고 탄력, 주름이 개선된다. 볼륨 또는 탄력의 증진이 요구되는 부위는 노화 등으로 인해 함몰된 부위일 수 있다. 예를 들어, 노화로 인해 함몰된 볼살 등을 들 수 있다. 함몰된 볼에 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물을 도포하면, 지방세포 분화를 촉진함으로써 볼륨 또는 탄력이 증진될 수 있다. 또한, 볼륨 또는 탄력의 증진이 요구되는 부위의 다른 예로서, 가슴과 둔부를 들 수 있다. 가슴과 둔부에 본 발명에 따른 조성물을 도포하면 가슴과 둔부가 풍만해지는 효과가 있다. 볼륨 또는 탄력의 증진, 주름의 개선이 요구되는 부위는 볼륨 또는 탄력의 감소 내지 주름의 생성이 가시적으로 진행 중인 부위뿐만 아니라 가시적인 결과는 나타나지 않았지만 진행 중인 부위, 그리고 진행이 예상되는 부위까지 포함될 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 조성물은, 얼굴 또는 바디의 라인을 개선할 수 있다. 지방세포의 분화를 촉진함으로써 얼굴과 바디의 볼륨 또는 탄력을 증진시키고, 주름을 개선하고, 콜라겐 및/또는 엘라스틴의 생합성을 촉진하고 콜라겐 및/또는 엘라스틴의 분해를 억제하며, 노화 등의 원인으로 인해 손상된 얼굴과 바디의 라인을 개선시킬 수 있다.
본 발명에 따른 질려자 추출물에는 질려자에서 유래하여 얻어진 물질이라면, 추출하는 방법, 성분의 종류 등과 무관하게 모두 포함될 수 있다. 바람직하게, 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올, 아세톤, 에테르, 벤젠, 클로로포름, 에틸아세테이트, 디클로로메탄, n-헥산, 염산, 초산, 포름산, 구연산, 디에틸에테르 및 사이클로헥산으로 이루어진 군 중에서 선택되는 하나 이상의 추출 용매를 첨가하여 용매 추출에 의해 수득할 수 있다. 바람직하게, 상기 추출 용매 중에서 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올을 첨가하여 추출할 수 있다. 가장 바람직하게, 상기 추출 용매는 에탄올일 수 있다. 상기 탄소수 1 내지 4의 알코올은 10 내지 90%(v/v) 알코올일 수 있으며, 바람직하게는 50 내지 80%(v/v) 알코올일 수 있고, 더욱 바람직하게는 70 내지 80%(v/v) 알코올일 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 상기 질려자 추출물을 전체 조성물 총 중량의 0.0001 내지 20 중량%로 포함할 수 있으며, 바람직하게는 0.001 내지 15 중량%, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 10 중량%로 포함할 수 있다. 상기 질려자 추출물의 함량이 0.0001 중량% 미만인 경우에는 뚜렷한 효과를 기대할 수 없고, 20 중량%를 초과하는 경우에는 포함량의 증가에 비해 효과의 증가가 미치지 못할 수 있다.
본 발명의 유효성분을 함유하는 피부외용제 조성물로부터 제조되는 제품은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조할 수 있다. 유화 제형의 제품으로는 영양화장수, 크림, 에센스 등이 있으며, 가용화 제형의 제품으로는 유연화장수가 있다. 또한, 피부학적으로 허용된 매질 또는 기제를 함유함으로써 피부학 분야에서 통상적으로 사용되는 국소 적용 또는 전신 적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수도 있다.
본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 예를 들어, 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀), 비이온형의 소낭 분산제의 형태, 스프레이, 에어로졸, 콘실 스틱(conceal stick), 폼, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 화장수, 유연 화장수, 영양 화장수, 에센스, 오일, 크림, 영양 크림, 마사지 크림, 아이 크림, 클렌징 크림, 파우더, 팩, 파우더, 파운데이션, 메이크업베이스, 스틱 또는 외용연고로 제형화 될 수 있으나, 이에 제한되지 않고 통상적인 경피 투여용 제제로 제형화될 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 유효성분과 당업계 공지된 바를 기초로 피부학적으로 허용 가능한 담체 1종 이상을 추가로 포함할 수 있으며, 상기 피부학적으로 허용된 담체는 예를 들면 유분, 물, 왁스, 지방산, 지방산 알코올, 지방산 에스테르, 계면활성제, 흡습제(humectant), 증점제(thickening agent), 항산화제, 점도 안정화제(viscosity stabilizer), 킬레이트제, 완충제, 방부제, 저급 알코올 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되지 아니하며, 그 종류와 농도는 다양하고, 통상의 기술자가 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 수정 및 변경할 수 있는 부분을 포함한다. 필요에 따라 미백제, 보습제, 항염증제, 항박테리아제, 항진균제, 비타민, 자외선 차단제, 항생제, 여드름 방지제, 향수, 염료가 포함될 수도 있으며, 이들은 피부 외용제 분야에서 통상적으로 사용되는 양으로 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물에 포함될 수 있다. 조성물 총 중량 당 0.001 내지 50 중량%가 바람직하다.
보다 구체적으로, 상기 유분으로는 수소화 식물성유, 파마자유, 면실유, 올리브유, 야자인유, 호호바유, 아보카도유가 이용될 수 있고, 왁스로는 밀랍, 경랍, 카르나우바, 칸델릴라, 몬탄, 세레신, 액체 파라핀, 라놀린이 이용될 수 있다. 지방산으로는 스테아르산, 리놀레산, 리놀렌산, 올레산이 이용될 수 있고, 지방산 알코올로는 세틸 알코올, 옥틸 도데칸올, 올레일 알코올, 판텐올, 라놀린 알코올, 스테아릴 알코올, 헥사데칸올이 이용될 수 있으며, 지방산 에스테르로는 이소프로필 미리스테이트, 이소프로필 팔미테이트, 부틸 스테아레이트 등이 이용될 수 있지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 계면활성제의 예로는 소듐 스테아레이트, 소듐 세틸설페이트, 폴리옥시에틸렌 라우릴에테르 포스페이트, 소듐 N-아실 글루타메이트와 같은 음이온 계면활성제; 스테아릴디메틸벤질암모늄 클로라이드 및 스테아릴트리메틸암모늄 클로라이드와 같은 양이온 계면활성제; 알킬아미노에틸글리신 하이드로클로라이드 및 레시틴과 같은 양성 계면활성제; 글리세린 모노스테아레이트, 소르비탄 모노스테아레이트, 프로필렌 글리콜 모노스테아레이트, 폴리옥시에틸렌 올레일에테르, 폴리에틸렌 글리콜 모노스테아레이트, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노팔미테이트, 폴리옥시에틸렌 코코넛 지방산 모노에탄올아르니드(monoethaolarnide), 폴리옥시프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌 캐스터유, 폴리옥시에틸렌 라놀린과 같은 비이온성 계면활성제 등이 포함된다. 흡습제에는 글리세린, 1,3-부틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜이 이용될 수 있으며, 저급 알코올로는 에탄올, 이소프로판올이 이용 가능하다. 증점제의 예에는 알긴산 나트륨, 카제인산 나트륨, 젤라틴 한천, 크산탄 고무, 전분, 셀룰로오스 에테르 (예, 하이드록시에틸 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 카르복시메틸 셀룰로오스, 하이드록시 프로필메틸 셀룰로오스), 폴리비닐 피롤리돈, 폴리비닐 알코올, 폴리에틸렌 글리콜 및 소듐 카르복시메틸 셀룰로오스 등이 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 항산화제로는 부틸레이티드 하이드록시톨루엔, 부틸레이티드 하이드록시아니솔, 프로필 갈레이트, 시트르산, 에톡시퀸(ethoxyquin)이 이용 가능하고, 킬레이트제로는 디소듐 에데테이트, 에탄하이드록시 디포스페이트가 이용 가능하며, 완충제로는 시트르산, 소듐 시트레이트, 붕산, 보랙스(borax), 디소듐 하이드로젠 포스페이트가 이용 가능하고, 방부제로는 메틸 파라하이드록시벤조에이트, 에틸 파라하이드록시벤조에이트, 디하이드로아세트산, 살리실산, 벤조산이 이용 가능하지만, 이에 제한되는 것은 아니다.
아울러, 본 발명의 조성물에 포함되는 피부학적으로 허용가능한 담체는 제형에 따라 수정 또는 변경될 수 있다.
동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명에 따른 피부외용제 조성물의 적합한 투여량은 대상의 상태 및 체중, 질병의 정도, 제형 형태 및 기간 등 여러 가지 요인에 따라 다르지만, 통상의 기술자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 투여는 증상에 따라 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회에 나누어 투여할 수도 있다.
본 발명에 따른 질려자 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물은 피부의 지방세포 분화를 촉진하고, 콜라겐 생성을 촉진할 뿐만 아니라 엘라스틴 생성을 촉진하는 효과를 가진다.
본 발명에 따른 질려자 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물은 피부의 볼륨을 증진하고, 피부의 주름 및 탄력을 개선하는 효과를 가진다.
본 명세서에 첨부되는 다음의 도면들은 본 발명의 바람직한 실시예를 예시하는 것이며, 전술한 발명의 내용과 함께 본 발명의 기술사상을 더욱 이해시키는 역할을 하는 것이므로, 본 발명은 그러한 도면에 기재된 사항에만 한정되어 해석되어서는 아니된다.
도 1은 질려자 추출물을 농도를 달리하여 처리하였을 때 지방전구세포에서 지방세포로의 분화되는 정도를 확인한 데이터이다.
도 2는 질려자 추출물을 농도를 달리하여 처리하였을 때 콜라겐 합성 증진에 미치는 효과를 확인한 데이터이다.
도 3은 질려자 추출물을 농도를 달리하여 처리하였을 때 엘라스틴 생성 증진에 미치는 효과를 확인한 데이터이다.
도 1은 질려자 추출물을 농도를 달리하여 처리하였을 때 지방전구세포에서 지방세포로의 분화되는 정도를 확인한 데이터이다.
도 2는 질려자 추출물을 농도를 달리하여 처리하였을 때 콜라겐 합성 증진에 미치는 효과를 확인한 데이터이다.
도 3은 질려자 추출물을 농도를 달리하여 처리하였을 때 엘라스틴 생성 증진에 미치는 효과를 확인한 데이터이다.
이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실시예 및 실험예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예 및 실험예는 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 아래에서 상술하는 실시예 및 실험예에 한정되는 것으로 해석 되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예 및 실험예는 당 업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해서 제공되는 것이다.
재료 준비
본 발명의 실시예 및 비교예에 이용된 생약재는 (주)지유본초에서 구입하여 사용하였으며, 각 시약은 1급 제품을 이용하였다.
실시예 제조
<실시예>
질려자 50g을 추출기에 넣고, 추출용매로서 75%(v/v) 에탄올 수용액 1L를 가하여, 90℃에서 4시간씩 2회 반복 환류 냉각 추출하였다. 얻어진 추출물을 25℃로 냉각시킨 후 여과하여 여액과 잔사를 분리하여 얻어진 추출 여액을 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60℃로 감압 농축하였다.
상기 실시예의 추출수율은 하기 표 1에 나타내었다.
구분 | 추출수율(%) |
실시예 | 8.66 |
<실험예 1>
지방전구세포의 지방세포로의 분화촉진 효능 실험
지방전구세포(pre-adipocytes)인 3T3-L1 세포를 10% 소혈청(bovine calf serum)이 들어있는 DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium, Hyclone Lab., USA)에서 배양한 후, 24-웰 플레이트에 1×104세포/웰의 밀도로 37℃, 5% 농도의 CO2 배양기에서 48시간 배양하였다. 48시간 동안 배양 한 다음, 10 μg/mL 인슐린(insulin), 0.5 mM 3-아이소부틸-1 메틸잔틴 (isobutylmethylxanthine), 0.25 μM 덱사메타손(dexamethasone), 10% 우태아혈청(fetal bovine serum, FBS)이 포함된 DMEM 배지로 갈아주고 성숙한 지방세포로의 분화를 유도하였다. 이때 실험군으로는 질려자 추출물을 디메틸설폭사이드(dimethylsulfoxide, DMSO)에 녹인 후 농도별로 처리하였으며, 대조군은 DMSO를 처리하였다. 분화유도를 시작하고 48시간 후에 10 μg/mL 인슐린(insulin)이 포함된 10% FBS/DMEM 배지로 교환하면서 추출물 시료도 다시 처리하였다. 72시간 후 추출물 시료가 포함된 10% FBS/DMEM 배지로 교환하고, 지방세포로의 분화를 시작한지 7일이 되었을 때, 지질 성분만을 선택적으로 빨간색으로 염색시키는 Oil-red O 염색을 통해 생성된 지방을 확인하였다. 즉, 세포배양액을 제거하고 세포를 PBS로 세척한 후 10% 포르말린(formalin)을 넣고 실온에서 1시간 동안 고정시켰다. 1시간 후 10% 포르말린(formalin)을 제거하고 증류수로 두 번 세척한 뒤 Oil-red O 염색 시약을 넣고 실온에서 1시간 동안 염색하였다. 염색 후 염색시약을 걷어낸 후, 증류수로 세척한 뒤, 이미지를 스캔하고, 염색된 세포에 100% 이소프로판올(isopropanol)을 넣고 염색된 Oil-red O을 용출시켜 540 nm 파장에서 흡광도를 측정하여 지방축적 정도를 평가하였다. 이때 로지글리타존(rosiglitazone)을 양성대조군으로 사용하였다. 그 결과를 표 2 및 도 1에 나타내었으며, 실험은 각각 3회씩 수행하여 평균값 ± 표준오차로 나타내었다.
시료농도(μg/mL) | 지방축적(%) |
0 | 100 |
10 | 125.765 ± 10.847 |
50 | 136.888 ± 8.035 |
100 | 156.346 ± 8.831 |
Rosiglitazone (1 μM) | 220.655 ± 15.525 |
상기 표 2 및 도 1에 나타난 바와 같이, 질려자 추출물은 지방전구세포의 지방세포로의 분화를 농도 의존적으로 촉진한다는 것을 확인할 수 있었다.
<실험예 2>
섬유아세포에서의 콜라겐 합성 촉진 효과 실험
상기 실시예에서 제조한 질려자 추출물의 피부 주름 억제 및 개선 효과를 검정하고자, 콜라겐 합성 촉진 효과를 섬유아세포의 배양에 의해 측정하였다.
정상 사람 섬유아세포를 24-웰 플레이트에 1×105 세포/웰의 밀도로 접종시키고 37℃, 5% 농도의 CO2 배양기에서 24시간 배양하였다. 상기 실시예 추출물 시료를 농도별로 시럼(serum)이 함유되지 않은 DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium, HyClone Lab., USA) 배지에 희석하여 24시간 동안 배양하였다. 콜라겐 합성량은 콜라겐 측정 키트(Procollagen Type I C peptide EIA kit, Takara, Japan)를 이용하여 프로콜라겐(procollagen) 타입 I C-펩타이드(Type I C-peptide, PICP)의 양을 측정하였다. 그 결과를 표 3 및 도 2에 나타내었으며, 실험은 각각 3회씩 수행하여 평균값 ± 표준오차로 나타내었다. 이때 시료를 처리하지 않은 세포 배양액의 흡광도를 대조군 100%로 하였다.
시료농도(μg/mL) | 콜라겐 합성 효과(%) |
0 | 100 |
10 | 98.869 ±16.995 |
50 | 118.474 ±10.953 |
100 | 135.015 ±12.335 |
상기 표 3 및 도 2에 의하면, 질려자 추출물은 농도 의존적으로 우수한 콜라겐 합성 증가 효과를 보이고 있어, 이를 통한 피부 주름 예방 및 개선 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
<실험예 3>
섬유아세포에서의 엘라스틴 생성 효과 실험
상기 실시예에서 제조한 질려자 추출물의 피부 탄력 개선 효과 검정하고자 엘라스틴 생성 촉진 효과를 섬유아세포의 배양에 의해 측정하였다.
정상 사람 섬유아세포를 12-웰 플레이트에 2×105 세포/웰의 밀도로 접종시키고 37℃, 5% 농도의 CO2 배양기에서 24시간 배양한 후, 상기 실시예 추출물 시료를 농도별로 시럼이 함유되지 않은 DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium, HyClone Lab., USA) 배지에 희석하여 처리하였다. 섬유아세포가 새롭게 합성한 엘라스틴의 양을 상업적으로 입수 가능한 엘라스틴 키트(FastinTM elastin assay kit)를 이용하여 측정하였다. 그 결과를 표 4 및 도 3에 나타내었으며, 실험은 각각 3회씩 수행하여 평균값 ± 표준오차로 나타내었다. 이때 시료를 처리하지 않은 세포 배양액의 흡광도를 대조군 100%로 하였다.
시료농도(μg/mL) | 엘라스틴 합성 효과(%) |
0 | 100 |
10 | 112.613 ± 4.872 |
20 | 117.236 ± 11.137 |
50 | 122.994 ± 5.821 |
100 | 123.460 ± 7.268 |
상기 표 4 및 도 3에 의하면, 질려자 추출물은 농도 의존적으로 우수한 엘라스틴 합성 증가 효과를 보이고 있어 이를 통한 피부 탄력 개선 효과가 있음을 확인할 수 있다.
제형예 1(화장수) 및 비교 제형예 1
상기 실시예에 따른 유효성분 물질을 함유한 피부 볼륨 증가 및 주름, 탄력 개선용 화장수의 성분구성을 하기 표 5와 같이 구성하여 제조하였다. 이때, 성분함량의 단위는 중량%이다. 한편, 하기 표 5의 각 성분 번호로 구별된 성분 중에서, 먼저 성분 1(정제수)에 성분 2와 3을 교반 분산시킨 후, 성분 4 내지 6을 가하고, 성분 8 내지 10을 성분 7에 용해시킨 물질과 성분 11을 차례로 가하여 혼합하는 방식으로 제조하였다. 비교 제형예로서는 성분 11을 제외한 나머지 성분 구성이나 그 제조방법은 동일하게 진행하여 제조하였다.
단위 (중량 %) |
성 분 | 제형예 1 | 비교 제형예 1 |
1 | 정제수 | 잔량 | 잔량 |
2 | 카보머 | 0.1 | 0.1 |
3 | 하이드록시에칠셀루로오스 | 0.1 | 0.1 |
4 | 부틸렌글라이콜 | 2.0 | 2.0 |
5 | 글리세린 | 1.0 | 1.0 |
6 | 피이지-1500 | 0.5 | 0.5 |
7 | 에탄올 | 8.0 | 8.0 |
8 | 폴리옥시에칠렌경화피마자유 | 0.2 | 0.2 |
9 | 트리에탄올아민 | 0.1 | 0.1 |
10 | 방부제 | 미량 | 미량 |
11 | 실시예에 따른 유효성분 물질 | 2.0 | - |
제형예 2(로션) 및 비교 제형예 2
상기 실시예에 따른 유효성분 물질을 함유한 피부 볼륨 증가 및 주름, 탄력 개선용 로션의 성분구성을 하기 표 6과 같이 구성하여 제조하였다. 이때, 성분함량의 단위는 중량%이다. 한편, 하기 표 6의 각 성분 번호로 구별된 성분 중에서, 먼저 성분 1 내지 7을 70℃의 온도에서 가열 용해시킨 다음, 성분 8 내지 11을 성분 12에 용해 분산시켜 70℃로 가열한 것에 유화한다. 이후, 상기 유화한 것을 성분 13으로 중화하고, 56℃의 온도로 냉각한 후, 성분 14를 가하여 교반하고 실온으로 냉각하여 제조하였다.
단위 (중량 %) |
성 분 | 제형예 2 | 비교 제형예 2 |
1 | 세테아릴알코올 | 1.0 | 1.0 |
2 | 글리세릴스테아레이트/피이지-100스테아레이트 | 1.0 | 1.0 |
3 | 폴리소르베이트 60 | 1.0 | 1.0 |
4 | 소르비탄세스퀴올리에이트 | 0.3 | 0.3 |
5 | 세틸옥타노에이트 | 6.0 | 6.0 |
6 | 스쿠알란 | 4.0 | 4.0 |
7 | 아프리코드커넬오일 | 4.0 | 4.0 |
8 | 글리세린 | 5.0 | 5.0 |
9 | 카보머 | 0.1 | 0.1 |
10 | 산탄검 | 0.03 | 0.03 |
11 | 방부제 및 향 | 미량 | 미량 |
12 | 정제수 | 잔량 | 잔량 |
13 | 아르기닌 | 0.1 | 0.1 |
14 | 실시예에 따른 유효성분 물질 | 5.0 | - |
제형예 3(크림) 및 비교 제형예 3
상기 실시예에 따른 유효성분 물질을 함유한 피부 볼륨 증가 및 주름, 탄력 개선용 크림의 성분구성을 하기 표 7과 같이 구성하여 제조하였다. 이때, 성분함량의 단위는 중량%이다. 한편, 하기 표 7의 각 성분 번호로 구별된 성분 중에서, 먼저 성분 1 내지 7을 70℃의 온도에서 가열 용해시킨 다음, 성분 9 내지 12를 성분 13에 용해 분산시켜 70℃로 가열한 것에 유화한다. 이후, 상기 유화한 것을 56℃의 온도로 냉각한 후, 성분 14를 가하여 교반하고 실온으로 냉각하여 제조하였다.
단위 (중량 %) |
성 분 | 제형예 3 | 비교 제형예 3 |
1 | 세테아릴알코올 | 1.0 | 1.0 |
2 | 글리세릴스테아레이트/피이지-100스테아레이트 | 1.0 | 1.0 |
3 | 폴리소르베이트 60 | 1.0 | 1.0 |
4 | 소르비탄세스퀴올리에이트 | 0.3 | 0.3 |
5 | 세틸옥타노에이트 | 6.0 | 6.0 |
6 | 스쿠알란 | 8.0 | 8.0 |
7 | 아프리코드커넬오일 | 4.0 | 4.0 |
8 | 디메치콘 | 2.0 | 2.0 |
9 | 글리세린 | 5.0 | 5.0 |
10 | 마그네슘알루미늄실리케이트 | 0.4 | 0.4 |
11 | 산탄검 | 0.03 | 0.03 |
12 | 방부제 및 향 | 미량 | 미량 |
13 | 정제수 | 잔량 | 잔량 |
14 | 실시예에 따른 유효성분 물질 | 10.0 | - |
<실험예 4>
피부 볼륨 증진 및 주름 개선 효과 측정
본 발명에 따른 피부 볼륨 증가 및 주름, 탄력 개선용 피부 외용제 조성물의 피부 볼륨 증가 및 주름, 탄력 개선 효과를 평가하기 위하여, 상기 제형예 3과 비교 제형예 3에서 제조된 피부 크림을 이용하여 평가를 실시하였다.
구체적으로, 제형예 3과 비교 제형예 3의 크림을 피부에 각각 도포했을 때 피부 볼륨 증가 및 주름, 탄력 개선 효과를 측정하기 위하여 40세에서 55세 연령의 여성 20명에게 12주 동안 코 옆주름 부위 왼쪽 부분에는 제형예 3의 크림(시험군)을, 오른쪽 부분에는 비교 제형예 3의 크림(대조군)을 1일 2회 지속적으로 사용하게 하였다.
피부 볼륨 증가의 정도 및 주름, 탄력 개선 효과 항목에 대하여 비교 제형예 3의 크림을 기준으로 제형예 3의 크림이 나타내는 효과를 상대 평가하였다. 평가는 매우 우수(5점), 우수(4점), 보통(3점), 나쁨(2점), 매우 나쁨(1점)의 오점법 기준에 의거하여 수행하였으며, 그 결과를 하기 표 8에 나타내었다.
번호 | 피부 볼륨 증가 | 주름 개선 효과 | 탄력 개선 효과 |
1 | 4 | 4 | 5 |
2 | 5 | 5 | 5 |
3 | 5 | 5 | 5 |
4 | 4 | 4 | 4 |
5 | 4 | 4 | 4 |
6 | 5 | 5 | 4 |
7 | 4 | 4 | 4 |
8 | 5 | 5 | 4 |
9 | 4 | 4 | 5 |
10 | 5 | 5 | 5 |
11 | 4 | 4 | 4 |
12 | 5 | 5 | 5 |
13 | 5 | 5 | 4 |
14 | 5 | 5 | 5 |
15 | 4 | 4 | 4 |
16 | 5 | 5 | 5 |
17 | 4 | 5 | 4 |
18 | 5 | 5 | 4 |
19 | 4 | 4 | 4 |
20 | 4 | 4 | 5 |
평균 | 4.50 | 4.55 | 4.45 |
상기 표 8에 나타낸 바와 같이, 비교 제형예 3 대비 제형예 3의 조성물이 가진 상대적 피부 볼륨 증가 및 주름, 탄력 개선 효과는 평가점수가 4.50점, 4.55점, 4.45점으로 개선 정도가 매우 우수함을 알 수 있었다.
Claims (5)
- 질려자를 에탄올 및 물의 혼합물을 이용해 용매 추출한 질려자 추출물을 유효성분으로 포함하는, 피부 지방전구세포로부터 지방세포로의 분화를 촉진하는 작용을 통한 피부 볼륨 증가 피부 외용제 화장료 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 질려자 추출물을 조성물의 총 중량에 대하여 0.0001~20중량%로 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 외용제 화장료 조성물.
- 질려자를 에탄올 및 물의 혼합물을 이용해 용매 추출한 질려자 추출물을 유효성분으로 포함하는 생체외(ex vivo) 또는 시험관내(in vitro) 조건에서 지방전구세포로부터 지방세포로의 분화 촉진용 조성물.
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- 2015-12-07 KR KR1020150173279A patent/KR101652070B1/ko active IP Right Grant
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