KR101638664B1 - 5-아미노레불린산을 포함하는 피부감염증 예방 또는 치료용 약학 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 5-아미노레불린산 또는 그의 유도체를 유효성분으로 포함하는 피부감염증 예방 또는 치료용 약학 조성물, 5-아미노레불린산 또는 그의 유도체를 유효성분으로 포함하는 피부감염증 개선용 화장료 조성물, 상기 피부감염증 개선용 화장료 조성물을 포함하는 기능성 화장품 및 5-아미노레불린산을 이용하여 인터루킨 12의 발현을 촉진시키는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 5-아미노레불린산을 유효성분으로 포함하는 조성물은 피부감염증의 원인균이 아닌 피부조직내의 수지상 세포에 작용하여 IL-12의 분비를 촉진함으로써, 피부감염증을 간접적으로 치료하는 효과를 나타내어, 부작용을 나타내지 않으므로, 피부감염증의 효과적인 예방, 치료 또는 개선에 널리 활용될 수 있을 것이다.

Description

5-아미노레불린산을 포함하는 피부감염증 예방 또는 치료용 약학 조성물{Pharmaceutical composition for preventing or treating infectious diseases of skin comprising 5-Aminolevulinic acid}
본 발명은 5-아미노레불린산을 포함하는 피부감염증 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로, 본 발명은 5-아미노레불린산 또는 그의 유도체를 유효성분으로 포함하는 피부감염증 예방 또는 치료용 약학 조성물, 5-아미노레불린산 또는 그의 유도체를 유효성분으로 포함하는 피부감염증 개선용 화장료 조성물, 상기 피부감염증 개선용 화장료 조성물을 포함하는 기능성 화장품 및 5-아미노레불린산을 이용하여 인터루킨 12의 발현을 촉진시키는 방법에 관한 것이다.
인간의 피부는 인체 내에서 외부 환경과 가장 밀접하게 접하고 있는 신체 기관으로, 인체 내부를 보호하는 생화학적이고 물리적인 기능을 가지고 있는 아주 중요한 기관이다. 피부는 표피(epidermis), 진피(dermis), 피하지방(hypodermis)으로 크게 3부분으로 나눌 수 있고, 시간이 지남에 따라 자외선이나, 상처, 환경 오염 등에 의해 주름과 기미, 검버섯 등 노화 현상의 대표적인 증상이 나타나게 된다.
특히, 인간의 각종 피부질환은 대부분 특정 병원 미생물에 의해 야기되는 것으로 알려져 있으며 감염 미생물의 종류에 따라 농가진, 여드름, 아토피증과 같은 세균감염증, 및 무좀, 백선, 완선, 전신감염과 같은 진균 감염증으로 구분된다. 이러한 피부질환은 발병부위 및 발병정도가 매우 다양하며, 특히 생명에 위협을 줄 수도 있는 기회성 및 전신 감염증은, 항암제의 장기간 사용, 장기 및 골수 이식에 따른 면역 억제제의 사용, HIV 감염에 의한 면역 결핍환자의 증가, 인구의 고령화 등에 의한 체내 면역체계의 저하로 인해 점차 증가추세에 있는 실정이다.
특히, 대표적인 피부감염증으로 알려진 농가진은 주로 여름철에 소아나 영유아의 피부에 잘 발생하는 얕은 화농성 감염으로서, 물집 농가진 (포도알균 농가진, bullous impetigo)과 비수포 농가진 (접촉전염 농가진, impetigo contagiosa)의 두 가지 형태로 나타난다. 황색 포도알균이 주 원인균이며 피부에 상처가 있는 부위를 통해 세균이 침입한다. 피부감염에 의한 농가진 등은 학령기 이전의 소아에 잘 발생하고 전염력이 매우 강해서 주변에 쉽게 전염된다. 팔, 다리, 얼굴, 몸통 어디에나 발생하고 가려운 증상이 있어서 자주 긁게 되고 이 때문에 신체 여러 부위로 전염되어 새로운 병소가 계속 발생하는 경우가 많다. 보통 전신 증상은 없으나 심하면 합병증으로 드물게 패혈증, 폐렴, 뇌막염으로 발전하여 사망할 수도 있다.
종래는 이러한 피부감염증의 원인세균들을 살균시킬 목적으로 트리클로카반(Triclocarban), 트리클로산(Triclosan) 등의 화학 살균제를 사용하였으나, 내성균 유발, 피부자극 등의 부작용을 초래할 뿐만 아니라, 그람 음성 세균과 진균에는 상대적으로 효과가 미약하다는 단점이 있어, 그 사용이 제한적일 수밖에 없었다.
이러한 단점을 개선하기 위하여, 폴리엔계 항생제(amphotericin B, nystatin, natamycin), 아졸계 항생제(fluconazole, ketoconazole, itraconazole), 리포펩타이드계 화합물(cilofungin), 키틴합성 저해제(polyoxine, nikomycin), 핵산 유사체(5-fluorocytosine) 등의 진균 감염증 치료제가 개발되었으나, 항생물질의 광범위한 사용과 내성균주의 빈번한 출현, 불규칙한 흡수 등 약물 동태학적 취약점 및 화학 살균제의 낮은 특이성으로 인해, 부작용이 최소화되면서 다양한 병원미생물 감염에 사용할 수 있는 새로운 피부감염증 치료제 개발이 절실히 요구되고 있다.
이러한 배경하에서, 본 발명자들은 부작용을 최소화 할 수 있는 피부감염증 치료제를 개발하기 위하여 예의 연구노력한 결과, 여드름을 치료하는 PDT(Photo Dynamic Therapy) 치료요법에 사용되고 있는 5-아미노레불린산(5-Aminolevulinic acid, ALA) 또는 그의 유도체가 피부세포에 존재하는 수지상 세포를 자극하여 인터루킨 12의 분비를 촉진하고, 이에 의해 분비된 인터루킨 12에 의해 피부감염증을 치료할 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 하나의 목적은 5-아미노레불린산 또는 그의 유도체를 유효성분으로 포함하는 피부감염증 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 5-아미노레불린산 또는 그의 유도체를 유효성분으로 포함하는 피부감염증 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 피부감염증 개선용 화장료 조성물을 포함하는 기능성 화장품을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 수지상 세포에 5-아미노레불린산을 처리하는 단계를 포함하는 인터루킨 12의 발현을 촉진시키는 방법을 제공하는 것이다.
상술한 목적을 달성하기 위한 일 실시양태로서, 본 발명은 5-아미노레불린산 또는 그의 유도체를 유효성분으로 포함하는 피부감염증 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 용어 "5-아미노레불린산(5-Aminolevulinic acid, ALA)"이란, 5-아미노레불린산생성효소에 의해 숙시닐CoA와 글리신에서 2-아미노-3-옥소아디핀산을 거쳐 생합성되고, C5H9NO3의 화학식으로 표현되며, 131.13의 분자량을 갖는 화합물을 의미하며, 하기의 화학식으로 표시된다.
Figure 112013020645049-pat00001
2분자의 5-아미노레불린산은 포스포빌리노겐생성효소에 의해 탈수 축합되어 포르포빌리노겐을 형성하는데, 상기 포스포빌리노겐은 헴, 피코빌린, 담즙색소,시아노코바레민 등 테트라피롤화합물의 생합성 중간체가 된다고 알려져 있고, 5-아미노레불린산이 산화적 탈아미노반응을 받아 2-옥소글루타르산세미알데히드가 되었다가 숙신산으로 되돌아가는 대사경로가 알려져 있다. 통상적으로, 상기 ALA는 여드름 치료요법으로 알려진 PDT(Photo Dynamic Therapy) 치료요법에 사용되는데, PDT 치료요법은 여드름균이 생성한 포르피린(Coproporphyrin Ⅲ)에 빛을 가하면 활성산소가 생성되고, 생성된 활성산소에 의하여 여드름균이 파괴되어 여드름을 치료하는 방법이다. 이때, 상기 ALA는 포르피린 전구체(Precursor)로서 사용되어 상기 PDT 치료요법의 효율을 배가시키는 효과를 나타낸다. 그러나, 상기 PDT 치료요법을 수행하기 위하여는 여드름 부위에 빛을 조사하여야 하는데, 빛의 조사량이 과다할 경우 활성산소가 과량으로 생성되어, 여드름균 뿐만 아니라 피부세포를 손상시킬 수 있다는 문제점이 있다. 본 발명자들은 이러한 문제점을 해결할 수 있는 방안을 개발하고자 다양한 연구를 수행한 결과, 상기 ALA가 피부조직에 분포하는 수지상 세포를 자극하여, 상기 수지상 세포로부터 인터루킨 12의 분비를 촉진시키는 효과를 나타냄을 새로이 발견하였다. 상기 분비된 인터루킨 12는 환자의 피부조직에 포함된 수지상 세포에서 생성되는 물질로서 부작용을 최소화하여 피부세포를 손상시키지 않으며, 이러한 ALA의 효과는 본 발명자들이 최초로 규명하였다.
본 발명의 용어 "5-아미노레불린산(ALA)의 유도체"란, 상기 ALA의 카르복시기 또는 아미노기를 다른 치환기로 치환시킨 구조를 포함하고, 상기 ALA와 동일 또는 유사한 활성을 나타내는 화합물을 의미한다. 상기 ALA의 유도체는 특별히 이에 제한되지 않으나, 바람직하게는 ALA의 카르복시기의 수소 또는 아미노기의 염화기가 다른 치환기로 치환된 구조를 포함하는 화합물이 될 수 있고, 보다 바람직하게는 ALA의 카르복시기의 수소가 메틸기(-CH3)로 치환된 m-ALA, ALA의 카르복시기의 수소가 부틸기(-C4H9)로 치환된 b-ALA, ALA의 카르복시기의 수소가 헥실기(-C6H13)로 치환된 h-ALA, ALA의 아미노기의 염화기가 포르밀기(-CHO)로 치환된 N-formyl-ALA 등이 될 수 있으나, 상기 ALA와 동일 또는 유사한 활성을 나타내는 한, 상기 ALA의 유도체는 상술한 화합물에 제한되지 않는다.
본 발명의 용어 "수지상 세포(dendritic cell)"란, 림프계 조직을 비롯하여 여러 조직의 각 조직 세포간극에서 나뭇가지모양으로 존재하는 세포로서, 골수의 조혈간세포에서 유래하고, 주로 T세포에 항원제시 기능을 수행하는 대표적인 항원제시세포의 일종을 의미한다. 상기 수지상 세포는 표면에 클래스Ⅰ 및 클래스Ⅱ 조직적합성 항원을 발현하며 면역응답시 T세포활성화에 중요한 역할을 하고 있다고 알려져 있다. 본 발명의 목적상 상기 수지상 세포는 ALA의 자극에 의하여 인터루킨 12를 과다 발현 및 분비하는 세포로서 사용되고 있으나, 상기 수지상 세포의 용도가 특별히 이에 제한되지는 않으며, 다양한 면역치료요법의 매개체로서 이용될 수도 있다.
본 발명의 용어 "인터루킨 12(interleukin 12, IL-12)"란, 림프구, 마크로파지 등이 항원을 인지하여 생산하는 생물학적 활성을 가진 사이토카인 단백질인 인터루킨의 일종으로서, B세포 및 단핵구, 대식세포에서 생산되는 분자량이 약 70,000인 당단백질을 의미한다. 상기 IL-12는 서로 상동성이 없는 40kDa(p40)과 35kDa(p35)의 2개의 소단위가 하나의 이황화결합으로 결합된 헤테로2합체(p70)의 형태이고, 정지기의 T세포와 자연살생(NK)세포에서 인터페론γ생산의 유도, NK세포의 활성유도, 정지기 T세포의 렉틴 자극에 의한 세포증식능의 항진, 나이브세포에서 TH1세포로의 분화촉진, 인터류킨3 존재 하에서 조혈간세포의 증식 촉진, 이식종양에 대한 생체 내 항종양효과 등을 나타내는 것으로 알려져 있다. 본 발명에 있어서, 상기 IL-12는 ALA에 의하여 자극된 수지상 세포에서 발현되어 자연살상세포 등에 의한 피부감염증의 원인균의 사멸을 유도할 수 있다.
본 발명의 용어 "피부감염증(infectious diseases of skin)"이란, 세균, 진균, 리케치아, 스피로헤타 등의 외인성 세균의 감염에 의해 피부에 국한해서 증상을 나타내는 각종질환을 의미한다. 상기 피부감염증은 특별히 이에 제한되지 않으나, 황색포도상구균을 원인균으로 하는 전염성 농가진, 조균류뮤코목에 속하는 진균류를 원인균으로 하는 피부뮤코증, 혐기성 방선균을 원인균으로 하는 피부방선균증 등이 될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 5-아미노레불린 산을 처리하여 수지상세포의 활성을 유도할 경우, 인터루킨 12 단백질을 증가시켜서 피부 진피층 내 소염효과를 가지게 하여 피부면역을 증강시킬 수 있을 뿐만 아니라, 수지상세포에 의한 자연살상세포 혹은 T세포의 분화를 촉진시킬 수 있음을 확인하였다.
한편, 본 발명의 ALA를 유효성분으로 포함하는 피부감염증 예방 또는 치료용 약학 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 상기 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 피부에 직접적으로 작용하기 때문에 경구 투여용 제제 보다는 비경구 투여를 위한 제제로 제형화 됨이 바람직한데, 상기 비경구 투여용 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
특히, 상기 조성물은 피부 외용제의 형태로 제형화 됨이 바람직한데, 상기 피부 외용제는 특별히 이에 제한되지 않으나, 바람직하게는 연고제, 로션제, 스프레이제, 패취제, 크림제, 산제, 현탁제, 겔제 또는 젤의 형태로 제조되어 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 상기 조성물은 1일 0.0001 내지 100 mg/kg으로, 바람직하게는 0.001 내지 100 mg/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다.
상기 조성물은 인간을 포함하는 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 피부감염증이 발병된 영역에 도포하거나, 근육 또는 피하 주사에 의해 투여될 수 있다.
상술한 목적을 달성하기 위한 다른 실시양태로서, 본 발명은 5-아미노레불린산 또는 그의 유도체를 유효성분으로 포함하는 피부감염증 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
상술한 5-아미노레불린산 또는 그의 유도체는 피부조직에 존재하는 수지상 세포에 직접적으로 작용하여 피부감염증을 간접적으로 예방 또는 치료하는 효과를 나타내므로, 상기 5-아미노레불린산은 피부감염증 개선용 화장료 조성물의 유효성분으로서 사용될 수 있다.
본 발명의 5-아미노레불린산 또는 그의 유도체를 유효성분으로 포함하는 피부감염증 개선용 화장료 조성물은 첨가제를 추가로 포함할 수 있다. 첨가제의 종류는 특별히 제한되는 것은 아니나, 예를 들면, 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급알코올, 살균제, 산화방지제, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제 및 향료 중 어느 하나 이상일 수 있다. 이러한 첨가제들은 필요에 따라 적절한 함량으로 배합하여 사용할 수 있다.
상술한 목적을 달성하기 위한 또 다른 실시양태로서, 본 발명은 상기 피부감염증 개선용 화장료 조성물을 포함하는 기능성 화장품을 제공한다.
본 발명의 기능성 화장품은 피부감염증 개선효과를 나타내고, 그의 제형은 특별히 제한되는 것은 아니나, 예를 들면, 용액, 유탁액, 현탁액, 페이스트, 크림, 로션, 겔, 파우더, 스프레이, 계면활성제-함유 클린징, 오일, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 파운데이션, 메이크업베이스, 에센스, 화장수, 폼, 팩, 유연수, 선 스크린 크림, 선오일 등의 제형으로 제조될 수 있고, 바람직하게는 피부외용연고, 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩, 에멀젼 또는 오일젤의 제형으로 제조될 수 있다.
예를 들어, 피부외용연고는 상기 조성물 이외에 바셀린 50 내지 97중량% 및 폴리옥시에틸렌올레일-에테르 포스페이트 0.1 내지 5중량%를 함유하도록 제조될 수 있다. 예를 들어, 유연화장수는 프로필렌글리콜 또는 글리세린과 같은 다가알콜류 1 내지 10중량% 및 폴리에틸렌올레일에테르 또는 폴리옥시에틸렌 경화피마자유와 같은 계면활성제 0.05 내지 2중량%를 함유하도록 제조될 수 있고, 영양화장수 및 영양크림은 상기 조성물 이외에 스쿠알란, 바셀린 또는 옥틸도데칸올과 같은 오일류 5 내지 20중량% 및 세탄올, 스테아릴알콜 또는 밀납과 같은 왁스성분 3 내지 15중량%을 함유하도록 제조될 수 있으며, 에센스는 글리세린 또는 프로필렌글리콜과 같은 다가알콜류 5 내지 30중량%를 함유하도록 제조될 수 있다.
마사지크림은 상기 조성물 이외에 유동파라핀, 바셀린 또는 이소노닐이소노나노에이트와 같은 오일류를 30 내지 70중량% 함유하도록 제조될 수 있고, 팩은 폴리비닐알콜을 5 내지 20중량% 함유하는 필오프(peel off) 팩으로 제조될 수 있으며, 일반유화형 화장료에 카올린, 탈크, 산화아연 또는 이산화티탄과 같은 안료가 5 내지 30중량% 함유된 워시오프(wash off) 팩으로도 제조될 수 있다.
상술한 목적을 달성하기 위한 또 다른 실시양태로서, 본 발명은 수지상 세포에 5-아미노레불린산(5-ALA)을 처리하는 단계를 포함하는 인터루킨 12(IL-12)의 발현을 촉진시키는 방법을 제공한다.
본 발명의 5-ALA는 수지상 세포를 활성화 시킬 수 있을 뿐만 아니라, 수지상 세포에서 IL-12의 발현량을 증가시키며, 상기 발현량이 증가된 IL-12는 정상적인 활성을 나타내므로, 5-ALA를 수지상 세포에 처리하면 IL-12의 발현을 촉진시킬 수 있다.
본 발명의 5-아미노레불린산을 유효성분으로 포함하는 조성물은 피부감염증의 원인균이 아닌 피부조직내의 수지상 세포에 작용하여 IL-12의 분비를 촉진함으로써, 피부감염증을 간접적으로 치료하는 효과를 나타내어, 부작용을 나타내지 않으므로, 피부감염증의 효과적인 예방, 치료 또는 개선에 널리 활용될 수 있을 것이다.
도 1은 백혈구에 대한 5-아미노레불린산의 독성평가 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 5-아미노레불린산의 수지상 세포 활성화 효과를 나타내는 그림이다.
도 3은 5-아미노레불린산의 사이토카인 합성촉진 효과를 나타내는 그래프이다.
도 4는 5-아미노레불린산의 자연살상세포로의 분화촉진 효과를 나타내는 현미경 사진이다.
이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 5- 아미노레불린산(5-ALA)의 독성평가
BALB/c 생쥐의 말초 및 비장에서 단핵구 세포를 추출하고, 추출된 단핵구 세포를 Histopak Ficoll과 혼합한 다음, 800 rpm으로 원심분리하여 백혈구를 수득하였다. 상기 수득한 백혈구에 다양한 농도의 5-ALA를 처리하고 24시간이 경과한 시점에서, 백혈구에 독성이 나타나는 지의 여부를 MTT 분석법으로 평가하였다(도 1). 도 1은 백혈구에 대한 5-아미노레불린산의 독성평가 결과를 나타낸 그래프이다. 도 1에서 보듯이, 5-ALA를 10 μM 까지 처리하여도 백혈구에 대하여 독성을 나타내지 않음을 알 수 있었다.
실시예 2: 5- ALA 의 수지상 세포 활성화 효과
상기 실시예 1의 방법으로 수득한 백혈구를 다시 고속원심분리하여 상기 백혈구에 포함된 수지상 세포를 수득하였다. 상기 수득한 수지상 세포에 다양한 농도의 5-ALA를 처리하고, 15분 동안 얼음물에서 냉각시켰으며, 냉각된 세포를 1500rpm으로 2회 세척하고, 2% 포르말린으로 고정시키고, 고정된 수지상 세포를 보체인 CD30을 이용하여 형광염색하였으며, 형광염색된 수지상 세포를 유세포 분석기를 이용하여 분석하였다(도 2). 도 2는 5-아미노레불린산의 수지상 세포 활성화 효과를 나타내는 그림이다. 도 2에서 보듯이, 10 μM의 5-ALA를 처리할 경우, 수지상 세포가 활성화됨을 알 수 있었다.
실시예 3: 5- ALA 의 사이토카인의 합성촉진 효과
상기 실시예 2의 방법으로 수득한 수지상 세포에 10 μM의 5-ALA 또는 50㎍/㎖의 IL-12를 각각 처리하고, 24시간이 경과한 시점에서 2,000 rpm으로 원심분리하여 상층액을 수득하였다. 상기 수득한 상층액을 3배 희석하고, 인터페론 감마 정량용 ELISA kit 또는 IL-12 정량용 ELISA kit에 적용하여 인터페론 감마 또는 IL-12의 발현량 변화를 비교하였다(도 3). 도 3은 5-아미노레불린산의 사이토카인 합성촉진 효과를 나타내는 그래프이다. 도 3에서 보듯이, 5-ALA를 처리하면 사이토카인인 인터페론 감마 및 IL-12의 발현량이 현저하게 증가하였고, 특히 인터페론 감마는 IL-12를 처리한 경우보다 5-ALA를 처리한 경우에 합성량이 상대적으로 증가함을 알 수 있었다.
실시예 4: 5- ALA 의 자연살상세포( NK cell ) 분화촉진 효과
상기 실시예 3의 결과로부터 수지상 세포에 5-ALA를 처리한 경우, IL-12의 발현량이 증가함을 확인하였으므로, 상기 발현량이 증가된 IL-12가 정상적인 활성을 나타내는지의 여부를 확인하고자 하였다. 이를 위하여, IL-12의 다양한 활성 중에서, 백혈구 중에서 자연살상세포(NK cell)의 성숙을 촉진시키는 특성을 이용하여 다음과 같은 실험을 수행하였다.
구체적으로, 상기 실시예 1의 방법으로 수득한 백혈구에 10 μM의 5-ALA를 처리하고, 24시간이 경과한 시점에서 통상적인 혈구의 염색에 사용되는 김자 염색(Giemsa staining)을 수행하였다. 김자 염색은 백혈구의 핵을 자색 또는 보라색으로 염색하며, 자연살상세포는 성숙하지 않은 상태에서는 일반적인 단핵구의 형태를 나타내지만, IL-12등의 처리에 의해 성숙된 후에는 비정형이고 다핵성 세포인 형태를 나타내기 때문에, 김자 염색을 통해 자연살상세포의 성숙이 촉진되는지의 여부를 확인하고자 하였다(도 4). 도 4는 5-아미노레불린산의 자연살상세포로의 분화촉진 효과를 나타내는 현미경 사진이다. 도 4에서 보듯이, 5-ALA를 처리한 경우에 자연살상세포의 성숙이 촉진됨을 확인하였으므로, 상기 5-ALA 처리에 의하여 발현량이 증가된 IL-12는 정상적인 활성을 나타냄을 알 수 있었다.
상기 실시예 1 내지 4의 결과로부터, 5-ALA는 수지상 세포에 독성을 나타내지 않고, 수지상 세포를 활성화 시킬 뿐만 아니라, 수지상 세포에서 IL-12의 발현량을 증가시키며, 상기 발현량이 증가된 IL-12는 정상적인 활성을 나타냄을 확인하였으므로, 5-ALA가 수지상 세포에 작용하여 IL-12의 발현 및 분비를 촉진시키고, 이처럼 분비된 IL-12에 의해 피부감염증의 원인균을 사멸시키는 효과를 나타냄을 알 수 있었다.

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  12. 생체 외 조건(in vitro)에서 수지상 세포에 5-아미노레불린산(5-ALA)을 처리하는 단계를 포함하는, 수지상 세포에서 인터루킨 12(IL-12)의 발현을 촉진시키는 방법.
  13. 5-아미노레불린산(5-Aminolevulinic acid, ALA) 또는 ALA의 카르복시기의 수소가 메틸기(-CH3)로 치환된 m-ALA, ALA의 카르복시기의 수소가 부틸기(-C4H9)로 치환된 b-ALA, ALA의 카르복시기의 수소가 헥실기(-C6H13)로 치환된 h-ALA, ALA의 아미노기의 염화기가 포르밀기(-CHO)로 치환된 N-formyl-ALA 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 5-아미노레불린산의 유도체를 유효성분으로 포함하는 피부감염증 예방 또는 치료용 약학 조성물을 인간을 제외한 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 피부감염증 예방 또는 치료 방법으로서, 상기 방법은 빛을 조사하는 단계가 포함되지 않는 것을 특징으로 하는 방법.
  14. 5-아미노레불린산(5-Aminolevulinic acid, ALA) 또는 ALA의 카르복시기의 수소가 메틸기(-CH3)로 치환된 m-ALA, ALA의 카르복시기의 수소가 부틸기(-C4H9)로 치환된 b-ALA, ALA의 카르복시기의 수소가 헥실기(-C6H13)로 치환된 h-ALA, ALA의 아미노기의 염화기가 포르밀기(-CHO)로 치환된 N-formyl-ALA 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 5-아미노레불린산의 유도체를 유효성분으로 포함하는 피부감염증 개선용 화장료 조성물을 인간을 제외한 개체에 도포하는 단계를 포함하는 피부감염증 개선 방법으로서, 상기 방법은 빛을 조사하는 단계가 포함되지 않는 것을 특징으로 하는 방법.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2008. Vol. 52, No. 4, pp. 1366-1373*
Lasers Surg. Med. 2011. Vol. 43, No. 7, pp. 755-767*

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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