KR101446738B1 - 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상지질혈증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 - Google Patents

4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상지질혈증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법및 이를 유효성분으로 함유하는 이상지질혈증의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 4-티오피라졸 유도체는 나이아신 GPR109A 수용체에 결합하여 수용체를 활성화하는 작용이 우수하며, 베타-어레스틴 신호전달경로의 활성화는 적게 유발되므로, 안면홍조 부작용을 최소화시키면서 고지혈증 등의 이상지질혈증의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
[화학식 1]
Figure 112012100507998-pat00054

(상기 화학식 1에서, R1 내지 R4는 본 명세서에서 정의한 바와 같다)

Description

4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상지질혈증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물{4-Thiopyrazole derivatives or pharmaceutically acceptable salts thereof process for the preparation thereof and pharmaceutical composition for the prevention and treatment of dyslipidemia containing the same as an active ingredient}
본 발명은 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상지질혈증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
이상지질혈증은 혈청 지질의 비정상적인 상태로서, 고지혈증 등을 포함한다. 콜레스테롤은 세포막과 필수 유기 분자, 예를 들면, 스테로이드 및 담즙산에 필수적인 기초 단위이지만, 과량의 콜레스테롤은 심혈관 질환의 원인이 되는 것으로 공지되어 있다. 예를 들면, 콜레스테롤은 포말세포(foam cell)와의 관계를 통해서 관상 동맥 내에 축적되어 고지혈증 등의 이상지질혈증을 초래하는 플라크의 주요 성분이 된다.
나이아신(niacin, nicotinic acid)은 수용성 비타민(vitamin B3)의 하나로서 고지혈증 등의 이상지질혈증을 치료하기 위해 50년 이상 사용된 물질이다.
나이아신 수용체(GPR109A 및 GPR109B)는 2001년에 Lorenzen A 등에 의해 처음으로 밝혀졌으며(비특허문헌 1), 이중 GPR109A는 고친화력 나이아신 수용체, GPR109B는 저친화력 나이아신 수용체로서, 서로 96%의 상동성(homology)을 보이고 있다.
GPR109A 수용체는 지방조직과 지라, 면역세포 등에서 많이 발현되고 간, 신장, 심장이나 장관에서는 발현되지 않는 것으로 알려져 있다. GPR109A(인간의 유전자 HM74A)는 Gαi/o-coupled GPCR(G-protein coupled receptor, G-단백연결 수용체)로서 나이아신과 결합하면 세포 내 cAMP 생성이 억제되고 베타-어레스틴(β-arrestin)에 의해 세포 내로 이동하여 MAPK 신호전달경로가 활성화된다. 따라서 나이아신을 투여하여 GPR109A를 활성화시킬 경우, 트리글리세라이드(TAG, triacylglyceride)가 분해되어 생성되는 유리지방산(FFA, free fatty acid)과 글리세롤의 농도가 낮아지고, 간의 트리글리세라이드 합성이 억제되어 초저밀도지단백(LDL, very low-density lipoproteins) 및 저밀도지단백(LDL, low density lipoproteins)이 줄어들며 고밀도지단백(HDL, high-density lipoproteins)이 증가하여 이상지질혈증의 치료효과를 나타낸다.
그러나, 상기 나이아신에 의한 GPR109A 활성화는 지방농도를 낮추는 약리작용과 함께 안면홍조(flushing)를 유발하는 단점이 있다.
이에, 안면홍조 부작용을 나타내지 않으면서 GPR109A를 활성화시켜 이상지질혈증을 치료할 수 있는 물질에 대한 연구가 수행되고 있다.
나이아신 투여시 나타나는 안면홍조 부작용은 베타-어레스틴1(β-arrestin1)이 매개된 ERK/MAPK 활성화 및 PLA2에 의한 아라키도네이트(arachinodate) 합성과 이어지는 프로스타그란딘(PLD2, prostaglandin D2 와 PLE2, prostaglandin E2) 생성으로 야기되는 것으로 알려져 있으므로 이를 피할 수 있는 G-단백질 기반 리간드를 개발한다면 부작용을 줄일 수 있을 것으로 기대된다.
GPCR의 활성화는 G-단백과 연결되는 신호전달경로와 베타-어레스틴의 세포 내 이동으로 나타나는 탈감작(desensitization) 경로로 전달될 수 있으며, 이 두 가지 경로는 독립적으로 조절될 수 있는 것으로 보이나 아직 구조-활성 상관관계는 모호한 실정이다. 또한, GRK2(GPCR kinase 2)와 Arrestin 3(beta-arrestin 1)에 의해 GPR109A 수용체의 세포 내 이동이 조절된다는 보고가 있으나(비특허문헌 2), 그 정확한 기전은 알려져 있지 않다.
따라서, 나이아신 수용체인 GPR109A의 활성이 G-단백 신호전달경로로 주로 전달되고, 베타-어레스틴 신호전달경로의 활성화는 적게 유발되는 화합물을 개발하면 안면홍조부작용을 최소화할 수 있는 이상지질혈증 치료성분이 될 것이다.
한편, 최근에 Merck사는 안면홍조 부작용을 보이지 않으면서 강력한 GPR109A 항진제(agonist)로 작용하는 화합물 MK-6892(바이아릴사이클로헥산카르복실산)를 개발하였다(비특허문헌 3).
또한, MK-0354[3-(1H-테트라졸-5-일)-1,4,5,6-테트라하이드로-사이클로펜타피라졸]는 MK-6892에 비해 상대적으로 수용체에 대한 친화력은 약하지만 동물실험에서 혈관확장이 관찰되지 않는다고 보고되었다(비특허문헌 4).
나아가, Arena사에서 GPR109A 수용체 항진제로서 하기에 표시된 바와 같은 피라졸-3-카르복실산 유도체를 개발하였다(특허문헌 1 내지 특허문헌 3).
Figure 112012100507998-pat00001
,
Figure 112012100507998-pat00002
,
Figure 112012100507998-pat00003

또한, Merck사에서는 GPR109A 수용체 항진제로서 하기에 표시된 바와 같은 피롤 구조를 포함한 사이클로펜타피라졸 유도체 및 안트라닐산 유도체를 개발하였다(특허문헌 4 내지 특허문헌 5).
Figure 112012100507998-pat00004
,
Figure 112012100507998-pat00005

그러나, 아직까지 GPR109A 수용체 항진제로서 4-티오피라졸 유도체에 대하여는 보고된 바 없다.
이에, 본 발명자들은 안면홍조 부작용을 최소화할 수 있는 고지혈증 등의 이상지질혈증의 치료성분을 발굴하기 위하여, 나이아신 수용체인 GPR109A 수용체의 활성이 G-단백 신호전달경로로만 주로 전달되고, 베타-어레스틴 신호전달경로의 활성화는 적게 유발되는 화합물을 연구하던 중, 4-티오피라졸 유도체가 GPR109A 수용체를 활성화시키되, 베타-어레스틴 신호전달경로의 활성화는 적게 유발시켜 안면홍조 부작용을 최소화시키면서 고지혈증 등의 이상지질혈증을 치료할 수 있음을 알아내고, 본 발명을 완성하였다.
국제 공개특허 제2006/12795호. 국제 공개특허 제2005/011677호. 국제 공개특허 제2004/032928호. 국제 공개특허 제2007/092364호. 국제 공개특허 제2007/092364호.
Am. J. Cardiol. 2007, 100 (suppl), pp. 53N-61N. J. Biol. Chem., 2010, 285, pp. 22605-22618. J. Med. Chem., 2010, 53, pp. 2666-2670. J. Med. Chem., 2008, 51, pp. 5101-5108.
본 발명의 목적은 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 4-티오피라졸 유도체의 제조방법을 제공하는 데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 이상지질혈증 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 안면홍조 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 데 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여,
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하는 데 있다.
[화학식 1]
Figure 112012100507998-pat00006
(상기 화학식 1에서, R1, R2, R3 및 R4는 본 명세서에서 정의한 바와 같다).
또한, 본 발명은 4-티오피라졸 유도체의 제조방법을 제공한다.
나아가, 본 발명은 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 이상지질혈증 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 안면홍조 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 화학식 1의 4-티오피라졸 유도체는 나이아신 GPR109A 수용체에 결합하여 수용체를 활성화하는 작용이 우수하며, 베타-어레스틴 신호전달경로의 활성화는 적게 유발되므로, 안면홍조 부작용을 최소화시키면서 고지혈증 등의 이상지질혈증의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 실험예 1에 따른 실시예 1 내지 실시예 4의 4-티오피라졸 유도체 화합물의 GPR109A 항진에 의한 농도-항진 그래프이다.
도 2는 본 발명의 실험예 1에 따른 실시예 11, 실시예 18 내지 실시예 21의 4-티오피라졸 유도체 화합물의 GPR109A 항진에 의한 농도-항진 그래프이다.
도 3은 본 발명의 실험예 1에 따른 실시예 22, 실시예 24 내지 실시예 27의 4-티오피라졸 유도체 화합물의 GPR109A 항진에 의한 농도-항진 그래프이다.
도 4는 본 발명의 실험예 1에 따른 실시예 28, 실시예 29 및 실시예 32의 4-티오피라졸 유도체 화합물, 비교예 1 및 비교예 2의 GPR109A 항진에 의한 농도-항진 그래프이다.
도 5는 서브클로닝(subcloning) 된 pCMV6-A-Hygro/GPR109A 벡터맵이다.
도 6은 본 발명의 실험예 2에 따른, 실시예 1 내지 5, 실시예 9, 실시예 11 및 실시예 18의 4-티오피라졸 유도체 화합물에 대한 베타-어레스틴의 세포 내 이동을 GFP로 측정한 이미지이다.
도 7은 본 발명의 실험예 2에 따른, 실시예 19 내지 실시예 26에 대한 4-티오피라졸 유도체 화합물의 베타-어레스틴의 세포 내 이동을 GFP로 측정한 이미지이다.
도 8은 본 발명의 실험예 2에 따른, 실시예 27 내지 실시예 33, 비교예 1 및 비교예 2에 대한 4-티오피라졸 유도체 화합물의 베타-어레스틴의 세포 내 이동을 GFP로 측정한 이미지이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
Figure 112012100507998-pat00007
(상기 화학식 1에서,
R1은 비치환 또는 하나 이상의 할로겐, C1-C10의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 또는 R5CONH-이고, 여기서, 상기 R5는 C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고;
R2는 C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 페닐이고;
R3은 C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고;
R4는 비치환 또는 C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알콕시로 치환된 페닐, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 5-7 원자의 헤테로아릴, 또는
Figure 112012100507998-pat00008
이고, 여기서 상기 헤테로아릴은 할로겐 또는 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 5-7 원자의 헤테로사이클로알킬로 치환될 수 있으며, 상기 R6은 수소 또는 할로겐이다).
바람직하게는 상기 R1은 비치환, 클로로, 브로모, 메틸, t-부틸, 또는 카보닐아미노이고;
R2는 메틸 또는 페닐이고,
R3은 메틸이고,
R4는 메톡시페닐, 피리딘, 피라진, 클로로피리딘, 몰폴리노피리딘, 피라진, 또는
Figure 112012100507998-pat00009
이고, 여기서 상기 R6는 플루오로이다.
본 발명에 따른 약학적 조성물에 있어서, 상기 화학식 1로 표시되는 4-티오피라졸 유도체의 바람직한 예는 하기와 같다.
(1) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(4-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(2) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(4-브로모페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(3) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-브로모페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(4) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(5) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸--1H-피라졸;
(6) 1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(7) 1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-브로모페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(8) 1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(9) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-[4-(tert-부틸)페닐]티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(10) 1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-[4-(tert-부틸)페닐]티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(11) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(4-아세트아미도페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(12) 1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-(4-아세트아미도페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(13) 1-(6-몰폴리노피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(14) 1-(6-몰폴리노피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-브로모페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(15) 1-(6-몰폴리노피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(16) 1-(6-몰폴리노피리딘-3-일)카르보닐-4-[4-(tert-부틸)페닐]티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(17) 1-(6-몰폴리노피리딘-3-일)카르보닐-4-(4-아세트아미도페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(18) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(19) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(20) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(2-브로모페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(21) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(4-아세트아미도페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(22) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-[4-(tert-부틸)페닐]티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(23) N-{2-[4-(4-클로로페닐)티오]-3,5-다이메틸-1H-피라졸-1-일}-2-옥소에틸-4-플루오로벤젠설폰아마이드;
(24) 1-(4-메톡시페닐)카르보닐-4-(4-메틸페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
(25) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸;
(26) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(4-브로모페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸;
(27) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-브로모페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸;
(28) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-페닐티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸;
(29) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-클로로페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸;
(30) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸;
(31) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(4-브로모페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸;
(32) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(2-브로모페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸; 및
(33) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(2-클로로페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸.
본 발명에 따른 약학적 조성물에 있어서, 상기 화합물의 구조식을 하기 표 1에 정리하여 나타내었다.
제조예 구조 제조예 구조
1
Figure 112012100507998-pat00010
 2
Figure 112012100507998-pat00011
3
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 4
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5
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 6
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7
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 8
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9
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 10
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11
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 12
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13
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 14
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15
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 20
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 22
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23
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25
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27
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 28
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29
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31
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 32
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33
Figure 112012100507998-pat00042
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 4-티오피라졸 유도체는 약학적으로 허용가능한 염의 형태로 사용할 수 있다. 상기 염으로는 약학적으로나 생리학적으로 허용되는 다양한 유기산 또는 무기산에 의해 형성된 산부가염이 유용하다. 적합한 유기산으로는, 예를 들면 카르복실산, 포스폰산, 술폰산, 아세트산, 프로피온산, 옥탄산, 데칸산, 글리콜산, 락트산, 푸마르산, 숙신산, 아디프산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 글루탐산, 아스파르트산, 말레산, 벤조산, 살리실산, 프탈산, 페닐아세트산, 벤젠술폰산, 2-나프탈렌술폰산, 메틸황산, 에틸황산, 도데실황산 등을 사용할 수 있고, 적합한 무기산으로는, 예를 들면 염산, 황산 또는 인산 등을 사용할 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 4-티오피라졸 유도체는 약학적으로 허용가능한 염뿐만 아니라, 통상의 방법에 의해 제조될 수 있는 모든 염, 수화물 및 용매화물을 모두 포함할 수 있다.
나아가, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 4-티오피라졸 유도체의 제조방법을 제공한다.
제법 1
본 발명에 따른 화학식 1의 유도체의 제조방법은 하기 반응식 1로 나타낸 바와 같이,
화학식 2로 표시되는 화합물과 화학식 3으로 표시되는 하이드라진 수화물의 고리화 반응을 수행하여 화학식 4로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 1); 및
상기 단계 1에서 제조된 화학식 4로 표시되는 화합물과 화학식 5로 표시되는 산염화물의 반응시켜 화학식 1로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 2);를 포함하는 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법을 제공한다.
[반응식 1]
Figure 112012100507998-pat00043
(상기 화학식 1에서, R1, R2, R3 및 R4는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같다).
이하, 상기 제조방법을 각 단계별로 상세히 설명한다.
먼저 본 발명에 따른 상기 제법 1에 있어서, 단계 1은 화학식 2로 표시되는 화합물과 화학식 3으로 표시되는 하이드라진 수화물의 고리화 반응을 수행하여 화학식 4로 표시되는 화합물을 제조하는 단계로서, 보다 구체적으로는 화학식 2로 표시되는 1,3-다이케톤과 화학식 3으로 표시되는 하이드라진의 고리화 반응을 통하여 피라졸 고리를 형성하는 단계이다.
이때, 사용 가능한 유기용매로는 반응에 악영향을 미치지 않는 메탄올, 에탄올, 테트라하이드로퓨란(THF), 1,4-다이옥산, 다이메틸포름아마이드(DMF) 또는 다이메틸아세트아마이드(DMAc)를 사용할 수 있고, 바람직하게는 다이메틸포름아마이드(DMF)를 사용할 수 있다.
또한, 반응온도는 실온에서 용매의 비등점까지 사용할 수 있다.
상기 단계 1은 반응용매 및 반응온도에 따라 R2와 R3의 위치선택성(regioselectivity)을 조절할 수 있다.
다음으로 본 발명에 따른 상기 제법 1에 있어서, 단계 2는 단계 1에서 제조된 화학식 4로 표시되는 화합물과 화학식 5로 표시되는 산염화물를 반응시켜 화학식 1로 표시되는 화합물을 제조하는 단계로서, 보다 구체적으로는 염기 존재 하에서, 화학식 4로 표시되는 피라졸 유도체의 아민기와 화학식 5로 표시되는 산염화물를 반응시켜 화학식 1로 표시되는 화합물을 제조하는 단계이다.
이때, 사용 가능한 염기는 트라이에틸아민(TEA), N,N-다이이소프로필에틸아민(DIPEA), 피리딘 및 4-(다이메틸아미노)피리딘(DMAP)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 염기를 사용할 수 있고, 바람직하게는 트라이에틸아민(TEA)과 4-(다이메틸아미노)피리딘(DMAP)을 함께 사용할 수 있다.
또한, 사용 가능한 유기용매로는 반응에 악영향을 미치지 않는 다이클로로메탄, 클로로포름, 다이메틸설폭사이드(DMSO), 다이메틸포름아마이드(DMF), 테트라하이드로퓨란(THF) 또는 1,4-다이옥산 등을 사용할 수 있고, 바람직하게는 테트라하이드로퓨란(THF)를 사용할 수 있다.
제법 2
본 발명에 따른 화학식 1의 유도체의 제조방법은 하기 반응식 2로 나타낸 바와 같이,
화학식 2로 표시되는 화합물과 화학식 3으로 표시되는 하이드라진 수화물의고리화 반응을 수행하여 화학식 4로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 1); 및
상기 단계 1에서 제조된 화학식 4로 표시되는 화합물과 화학식 6으로 표시되는 카르복실산 유도체를 반응시켜 화학식 1로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 2);를 포함하는 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법을 제공한다.
[반응식 2]
Figure 112012100507998-pat00044
(상기 화학식 2에서, R1, R2, R3 및 R4는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같다).
이하, 상기 제조방법을 각 단계별로 상세히 설명한다.
먼저 본 발명에 따른 상기 제법 2에 있어서, 단계 1은 화학식 2로 표시되는 화합물과 화학식 3으로 표시되는 하이드라진 수화물의 고리화 반응을 수행하여 화학식 4로 표시되는 화합물을 제조하는 단계로서, 보다 구체적으로는 화학식 2로 표시되는 1,3-다이케톤과 화학식 3으로 표시되는 하이드라진의 고리화 반응을 통하여 피라졸 고리를 형성하는 단계이다.
이때, 사용 가능한 유기용매로는 반응에 악영향을 미치지 않는 메탄올, 에탄올, 테트라하이드로퓨란(THF), 1,4-다이옥산, 다이메틸포름아마이드(DMF) 또는 다이메틸아세트아마이드(DMAc)를 사용할 수 있고, 바람직하게는 다이메틸포름아마이드(DMF)를 사용할 수 있다.
또한, 반응온도는 실온에서 용매의 비등점까지 사용할 수 있다.
다음으로 본 발명에 따른 상기 제법 2에 있어서, 단계 2는 단계 1에서 제조된 화학식 4로 표시되는 화합물과 화학식 6으로 표시되는 카르복실산 유도체를 반응시켜 화학식 1로 표시되는 화합물을 제조하는 단계로서, 보다 구체적으로는 아마이드화제 존재 하에서, 화학식 4로 표시되는 피라졸 유도체의 아민기와 화학식 5로 표시되는 카르복실기를 반응시켜 화학식 1로 표시되는 화합물을 제조하는 단계이다.
이때, 상기 아마이드화제(amide reagent)는 다이이소프로필에틸아민, 트라이에틸아민 또는 다이메틸아미노피리딘(DMAP)와 함께 벤조트리아졸-1-일-옥시-트리스(다이메틸아미노)-포스포니움 헥사플루오로포스페이트(Py-BOP), O-벤조트리아졸-N,N,N,N-테트라메틸-유로니움-헥사플루오로-포스페이트(HBTU), 2-(7-아자-1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸유로니움헥사플루오로포스페이트(HATU), 하이드록시벤조트리아졸(HOBt), 다이사이클로헥실카르보디이미드(DCC), 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카르보다이이미드(EDC), 또는 카르보닐다이이미다졸(CDI)을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카르보다이이미드(EDC)를 사용할 수 있다.
또한, 사용 가능한 유기용매로는 반응에 악영향을 미치지 않는 메탄올, 테트라하이들로퓨란(THF), 다이메틸포름아마이드, 다이클로로메탄, 톨루엔 등을 이용하여 반응을 수행할 수 있고, 바람직하게는 다이클로로메탄을 사용할 수 있다.
제법 3
본 발명에 따른 화학식 1의 유도체의 제조방법은 하기 반응식 3으로 나타낸 바와 같이,
화학식 1a로 표시되는 화합물을 화학식 7로 표시되는 몰폴린과 커플링 반응을 수행하여 화학식 1b로 표시되는 화합물을 제조하는 단계를 포함하는 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법을 제공한다.
[반응식 3]
Figure 112012100507998-pat00045
(상기 화학식 3에서, R1, R2 및 R3은 제1항의 화학식 1에서 정의한 바와 같고; A는 질소(N) 또는 탄소(C) 원자이고; 1a 및 1b는 화학식 1의 화합물이다).
본 발명에 따른 상기 제법 3은 화학식 1a로 표시되는 화합물과 화학식 7로 표시되는 몰폴린의 커플링 반응을 수행하여 화학식 1b로 표시되는 화합물을 제조하는 단계로서, 보다 구체적으로는 화학식 1a로 표시되는 화합물의 헤테로아릴 고리의 클로라이드기를 화학식 7로 표시되는 몰폴린과 커플링 반응을 시켜 화학식 1b로 표시되는 화합물을 제조하는 단계이다.
이때, 상기 제법 3은 염기 또는 용매를 사용하지 않고, 마이크로웨이브 반응기에서 반응을 수행할 수 있다.
또한, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 이상지질혈증 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
Figure 112012100507998-pat00046
(상기 화학식 1에 있어서, R1, R2, R3 및 R4는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같다).
이때, 상기 예방 또는 치료 가능한 이상지질혈증은 고지혈증, 고콜레스테롤혈증 또는 고중성지방혈증을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1의 4-티오피라졸 화합물은 농도의존적으로 GPR109A 수용체에 대한 우수한 항진활성을 가지는 것을 알 수 있다. 또한, 실시예 1 내지 3, 5, 11, 22, 25, 내지 29의 화합물들은 10 μM에서 95% 이상의 항진활성을 나타내며, 특히, 실시예 5, 25 내지 29의 화합물들은 10 μM에서 103% 이상의 항진활성을 보이는 것을 알 수 있다. 반면, 종래에 고지혈증 치료제로 사용 중인 비교예 1의 MK6892 및 비교예 2의 나이아신의 경우, 10 μM에서 103.5% 및 100.0%의 항진활성을 나타내는 것을 알 수 있다. 이로부터, 본 발명에 따른 4-티오피라졸 화합물의 GPR109A 수용체에 대한 항진활성은 종래에 사용되어 오던, MK6892 및 나이아신에 비해 우수한 항진활성을 갖는 것을 알 수 있다(도 1-4 및 표 2 참조).
나아가, 본 발명은 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 안면홍조 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
안면홍조 부작용과 관련된 신호전달 경로인 베타-어레스틴의 세포 내로의 이동을 측정한 실험에서, 본 발명에 따른 4-티오피라졸 화합물은 고농도 투여시에도 나이아신 또는 종래 GPR109A 수용체 항진제로 알려진 MK-6892의 형광비율보다 훨씬 낮은 형광비율을 나타냄으로써 상기 베타-어레스틴의 세포 내로의 이동을 감소시켰다(도 6-8 및 표 3 참조).
따라서, 본 발명에 따른 화학식 1의 4-티오피라졸 유도체는 나이아신 GPR109A 수용체에 결합하여 수용체를 활성화하는 작용이 우수하며, 베타-어레스틴 신호전달경로의 활성화는 적게 유발되므로, 안면홍조 부작용을 최소화시키면서 고지혈증 등의 이상지질혈증의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 약학적 조성물은 상기 화학식 1의 4-티오피라졸 유도체 성분에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.
본 발명에 따른 약학적 조성물에 있어서, 상기 화학식 1의 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 임상 투여시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충전제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조될 수 있다.
경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환자, 산제, 과립제, 캡슐제, 트로키제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 본 발명의 상기 화학식 1의 아릴 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 상기 화학식 1의 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 인체에 대한 투여량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 몸무게가 70 Kg인 성인 환자를 기준으로 할 때, 일반적으로 0.1 - 1000 mg/일이며, 바람직하게는 1 - 500 mg/일이며, 또한 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정시간 간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 이상지질혈증의 예방 또는 치료를 위하여 단독으로, 또는 수술, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
이하, 본 발명을 제조예, 실시예 및 실험예에 의하여 상세히 설명한다.
단, 하기 제조예, 실시예 및 실험예는 본 발명을 구체적으로 예시하는 것이며, 본 발명의 내용이 제조예, 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.
< 제조예 1> 3-[(4- 클로로페닐 ) 티오 ]펜탄-2,4- 다이온의 제조
3-클로로-2,3-펜탄다이온(1 g, 7.4 mmol)과 4-클로로벤젠싸이올(1.1 g, 7.4 mmol)의 혼합물에 피페리딘(0.63 g, 7.4 mmol)과 다이클로로메탄(0.8 mL) 혼합액을 0℃에서 적가하였다. 5분 동안 교반 후, 메탄올(3 mL)을 가하고 실온에서 6시간 동안 교반하여 반응시키고, 피페리딘 염산염의 침전물로 여과하여 제거한 후 에테르(3 100 mL)로 세척하였다. 여액을 모두 합하여 물(3 × 100 mL)로 세척한 후 Na2SO4로 건조시키고, 여과하여 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(2% 에틸아세테이트/헥산)로 정제하여 무색의 고체인 목적화합물(1.65 g, 수율 91%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.31(s, 6H), 4.32(s, 1H), 7.34(d, 2H), 7.41(d, 2H).
< 제조예 2> 3-[(4- 브로모페닐 ) 티오 ]펜탄-2,4- 다이온의 제조
4-클로로벤젠싸이올을 사용하는 대신에 4-브로모벤젠싸이올을 사용하는 것을 제외하고 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(수율 86%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.32(s, 6H), 4.28(s, 1H), 7.45(d, 2H), 7.82(d, 2H).
< 제조예 3> 3-[(2- 브로모페닐 ) 티오 ]펜탄-2,4- 다이온의 제조
4-클로로벤젠싸이올을 사용하는 대신에 2-브로모벤젠싸이올을 사용하는 것을 제외하고 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 92%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.28(s, 6H), 4.27(s, 1H), 6.83(d, 1H), 7.01 (m, 1H), 7.24(m, 1H), 7.52(d, 1H).
< 제조예 4> 3-[(3,5- 다이클로로페닐 ) 티오 ]펜탄-2,4- 다이온의 제조
4-클로로벤젠싸이올을 사용하는 대신에 3,5-다이클로로벤젠싸이올을 사용하는 것을 제외하고 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 90%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.34 (s, 6H), 4.25 (s, 1H), 6.93 (d, 2H), 7.12 (d, 1H).
< 제조예 5> 3-[(2- 클로로페닐 ) 티오 ]펜탄-2,4- 다이온의 제조
4-클로로벤젠싸이올을 사용하는 대신에 2-클로로벤젠싸이올을 사용하는 것을 제외하고 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 91%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.31 (s, 6H), 4.25 (s, 1H), 6.85 (d, 1H), 7.10 (dd, 1H), 7.18 (d, 1H), 7.35 (d, 1H).
< 제조예 6> 3-[(4-( tert -부틸) 페닐 ) 티오 ]펜탄-2,4- 다이온의 제조
4-(tert-부틸)벤젠싸이올을 출발물질로 사용하여 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 97%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 1.29(s, 9H), 2.34(s, 6H), 4.25(s, 1H), 7.02 (d, 2H), 7.30 (d, 1H).
< 제조예 7> 3-[(4- 아세트아미도페닐 ) 티오 ]펜탄-2,4- 다이온의 제조
4-아세트아미도벤젠싸이올을 출발물질로 사용하여 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 80%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.17(s, 3H), 2.33(s, 6H), 4.25(s, 1H), 7.05(d, 2H), 7.14(brs, 1H), 7.42(d, 1H).
< 실시예 1> 1-(피리딘-3-일)카르보닐-3,5- 다이메틸 -4-(4- 클로로페닐 ) 티오 -1H-피 라졸 의 제조
단계 1: 4-(4- 클로로페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
상기 제조예 1의 화합물(3.2 g, 13.2 mmol)을 에탄올(10 mL)에 녹이고, 하이드라진 1수화물(0.8 mL, 16.5 mmol)을 교반하면서 적가하였다. 반응액을 교반하면서 가온하여 반응액이 균일하여지면, 8시간 동안 추가 교반하면서 가열, 환류시켰고, 냉각 후 감압 농축하여 휘발물질을 모두 제거하였다. 잔류물을 재결정(벤젠:헥산=20 mL:150 mL)하여 무색 고체의 목적화합물(2 g, 수율 64%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.78(s, 6H), 7.32(d, 2H), 7.75(d, 2H).
단계 2: 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(4- 클로로페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
상기 단계 1의 화합물(50 mg, 021 mmol)의 THF(5 mL) 용액에 니코티닐 클로라이드 염산염(74 mg, 0.42 mmol), 트리에틸아민(58 L, 0.42 mmol) 및 다이메틸아미노피리딘(5 mg, 0.042 mmol)을 가하였다. TLC로 반응경과를 관찰하면서 출발물질이 사라지는 약 2시간 동안 반응 혼합액을 교반하여 반응시킨 후 휘발물질을 감압 하에 농축, 제거하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트(50 mL)과 물(50 mL)에 분산시키고, 유기층을 분리하여 MgSO4로 건조시킨 후, 여과하고 여액을 감압, 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(에틸아세테이트:헥산=1:10)로 정제하여 무정형 고체의 목적화합물(64 mg, 수율 89%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.21(s, 3H), 2.72(s, 3H), 7.32(d, 2H), 7.37(m, 1H), 7.74(d, 2H), 8.08(m, 1H), 8.80(m, 1H), 9.26(s, 1H).
< 실시예 2> 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(4- 브로모페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H-피 라졸 의 제조
단계 1: 4-(4- 브로모페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
상기 제조예 2의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(수율 79%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.77(s, 6H), 7.61(d, 2H), 7.79(d, 2H).
단계 2: 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(4- 브로모페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
상기 단계 1의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(수율 87%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.79(s, 6H), 7.47(m, 1H), 7.58(d, 2H), 7.78(d, 2H), 8.07(m, 1H), 8.76(m, 1H), 9.27(s, 1H).
< 실시예 3> 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(2- 브로모페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H-피 라졸 의 제조
단계 1: 4-(2- 브로모페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
상기 제조예 3의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 91%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.28(s, 6H), 6.51(d, 1H), 6.95(dd, 1H), 7.10(dd, 1H), 7.50(d, 1H).
단계 2: 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(4- 브로모페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
상기 단계 1의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 무색의 목적화합물(수율 90%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.21(s, 3H), 2.72(s, 3H), 6.57(d, 1H), 6.99(dd, 1H), 7.15(dd, 1H), 7.46(m, 1H), 7.54(d, 1H), 8.80(m, 1H), 9.26(s, 1H).
< 실시예 4> 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5- 다이클로로페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
단계 1: 4-(3,5- 다이클로로페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
상기 제조예 4의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 78%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.27(s, 6H), 6.81(d, 2H), 7.06 (d, 1H).
단계 2: 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5- 다이클로로페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H-피 라 졸의 제조
상기 단계 1의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 무색의 목적화합물(수율 88%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.21 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 6.88 (d, 2H), 7.13 (d, 1H), 7.45 (m, 1H), 8.36 (d, 1H), 8.81 (d, 1H), 9.26 (s, 1H).
< 실시예 5> 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(2- 클로로페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H-피 라졸 의 제조
단계 1: 4-(2- 클로로페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
상기 제조예 5의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 64%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.88(s, 6H), 6.53(m, 1H), 7.03(m, 2H), 7.32(m, 1H).
단계 2: 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(2- 클로로페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
상기 단계 1의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 무색의 목적화합물(수율 89%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.21(s, 3H), 2.73(s, 3H), 6.61(m, 1H), 7.10(m, 2H), 7.37(m, 1H), 8.38(d, 1H), 8.81(d, 1H), 9.27(s, 1H).
< 실시예 6> 1-(6- 클로로피리딘 -3-일)카르보닐-4-(3,5- 다이클로로페닐 ) 티오 -3,5-다 이 메틸-1H- 피라졸의 제조
4-(4-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 4의 단계 1에서 제조된 4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하고, 니코티닐 클로라이드 염산염을 사용하는 대신에 6-클로로니코티닐 클로라이드를 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 86%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.21(s, 3H), 2.74(s, 3H), 6.88(m, 2H), 7.13(s, 2H), 7.48(d, 1H), 8.35(dd, 1H), 9.08(d, 1H).
< 실시예 7> 1-(6- 클로로피리딘 -3-일)카르보닐-4-(2- 브로모페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
4-(4-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 3의 단계 1에서 제조된 4-(2-브로모페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하고, 니코티닐 클로라이드 염산염을 사용하는 대신에 6-클로로니코티닐 클로라이드를 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 80%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.20(s, 3H), 2.72(s, 3H), 6.56(d, 1H), 7.01(dd, 1H), 7.15(dd, 1H), 7.48(d, 1H), 7.54(d, 1H), 8.34(dd, 1H), 9.08(d, 1H).
< 실시예 8> 1-(6- 클로로피리딘 -3-일)카르보닐-4-(2- 클로로페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
4-(4-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 5의 단계 1에서 제조된 4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하고, 니코티닐 클로라이드 염산염을 사용하는 대신에 6-클로로니코티닐 클로라이드를 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 76%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.16(s, 6H), 6.52(m, 1H), 7.07(m, 2H), 7.38(m, 1H), 7.60(m, 1H), 8.38(m, 1H), 8.92(m, 1H).
< 실시예 9> 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-[4-( tert -부틸) 페닐 ] 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
단계 1: 4-[4-( tert -부틸) 페닐 ] 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
상기 제조예 6의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 54%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 1.27(s, 9H), 2.27(s, 6H), 6.92(d, 2H), 7.22(d, 1H).
단계 2: 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-[4-( tert -부틸) 페닐 ] 티오 -3,5- 다이메틸 -1H-피 라졸 의 제조
상기 단계 1의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 무색의 목적화합물(수율 90%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 1.28(s, 9H), 2.21(s, 3H), 2.75(s, 3H), 7.01(d, 2H), 7.28(d, 2H), 7.44(m, 1H), 8.34(d, 1H), 8.79(d, 1H), 9.24(s, 1H).
< 실시예 10> 1-(6- 클로로피리딘 -3-일)카르보닐-4-[4-( tert -부틸) 페닐 ] 티오 -3,5-다 이 메틸-1H- 피라졸의 제조
4-(4-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 9의 단계 1에서 제조된 4-[4-(tert-부틸)페닐]티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하고, 니코티닐 클로라이드 염산염을 사용하는 대신에 6-클로로니코티닐 클로라이드를 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 99%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 1.28(s, 9H), 2.20(s, 3H), 2.74(s, 3H), 7.01(d, 2H), 7.25(s, 1H), 7.28(m, 2H), 7.46(d, 2H).
< 실시예 11> 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(4- 아세트아미도페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
단계 1: 4-(4- 아세트아미도페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
상기 제조예 7의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 75%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.15(s, 3H), 2.25(s, 6H), 6.95(d, 2H), 7.05(brs, 1H), 7.34(d, 2H).
단계 2: 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(4- 아세트아미도페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H-피 라 졸의 제조
상기 단계 1의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 무색의 목적화합물(수율 87%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.16(s, 3H), 2.18(s, 3H), 2.75(s, 3H), 7.05 (d, 2H), 7.36(brs, 1H), 7.41(d, 2H), 7.47(m, 1H), 8.34(d, 1H), 8.79(d, 1H), 9.23(s, 1H).
< 실시예 12> 1-(6- 클로로피리딘 -3-일)카르보닐-4-( 아세트아미도페닐 ) 티오 -3,5-다 이 메틸-1H- 피라졸의 제조
4-(4-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 11의 단계 1에서 제조된 4-(4-아세트아미도페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하고, 니코티닐 클로라이드 염산염을 사용하는 대신에 6-클로로니코티닐 클로라이드를 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 94%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.16(s, 3H), 2.18(s, 3H), 2.74(s, 3H), 7.06(d, 2H), 7.12(brs, 1H), 7.41(d, 2H), 7.46(d, 1H), 8.31(dd, 1H), 9.05(d, 1H).
< 실시예 13> 1-(6- 몰폴리노피리딘 -3-일)카르보닐-4-(3,5- 다이클로로페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
마이크로웨이브 반응용 바이알(5 mL)에 다이메틸포름아마이드(3 mL)를 넣은 후, 실시예 6에서 제조된 1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸(27 mg, 0.066 mmol) 및 몰폴린(28 L, 0.33 mmol)을 녹이고, 120℃에서 20분 동안 마이크로파로 조사하여 반응시켰다. 반응물을 냉각시킨 후, 에틸아세테이트(30 mL)와 물(30 mL)에 분산시키고, 유기층을 분리하였다. 층분리된 유기층을 물로 세척하고(30 mL × 3), 마그네슘설페이트(MgSO4)로 건조시킨 다음, 여과한 후 여액을 감압농축시켰다. 농축된 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=10:1)로 정제하여 무색 고체의 목적화합물(8 mg, 수율 27%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.19(s, 3H), 2.68(s, 3H), 3.72(m, 4H), 3.82(m, 4H), 6.65(d, 1H), 6.86(d, 2H), 7.11(d, 1H), 8.23(d, 1H), 8.99(s, 1H).
< 실시예 14> 1-(6- 몰폴리노피리딘 -3-일)카르보닐-4-(2- 브로모페닐 ) 티오 -3,5-다이메틸-1H- 피라졸의 제조
1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 7에서 제조된 1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-브로모페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 13과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 38%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.22(s, 3H), 2.66(s, 3H), 3.73(m, 4H), 3.82(m, 4H), 6.55(d, 1H), 6,65(d, 1H), 6.99(dd, 1H), 7.13(dd, 1H), 7.52(d, 1H), 8.23 9dd, 1H), 8.99(s, 1H).
< 실시예 15> 1-(6- 몰폴리노피리딘 -3-일)카르보닐-4-(2- 클로로페닐 ) 티오 -3,5-다이메틸-1H- 피라졸의 제조
1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 8에서 제조된 1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 13과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 38%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.23(s, 3H), 2.66(s, 3H), 3.73(m, 4H), 3.82(m, 4H), 6.58(m, 1H), 6,65(d, 1H), 7.08(m, 2H), 8.23(dd, 1H), 8.99(d, 1H).
< 실시예 16> 1-(6- 몰폴리노피리딘 -3-일)카르보닐-4-[4-( tert -부틸) 페닐 ] 티오 -3,5-다이메틸-1H- 피라졸의 제조
1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 10에서 제조된 1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-[4-(tert-부틸)페닐]티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 13과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 32%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 1.28(s, 9H), 2.23(s, 3H), 2.69(s, 3H), 3.71(m, 4H), 3.82(m, 4H), 6.64(d, 1H), 6,99(d, 1H), 7.25(d, 2H), 8.22(dd, 1H), 8.99(d, 1H).
< 실시예 17> 1-(6- 몰폴리노피리딘 -3-일)카르보닐-4-(4- 아세트아미도페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 12에서 제조된 1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-(아세트아미도페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 13과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 20%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.16(s, 3H), 2.20(s, 3H), 2.68(s, 3H), 3.71(m, 4H), 3.82(m, 4H), 6.62(d, 2H), 7.03(d, 2H), 7.10(brs, 1H), 7.25(s, 1H), 7.39(m, 2H).
< 실시예 18> 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(2- 클로로페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H-피 라졸 의 제조
실시예 5의 단계 1에서 제조된 4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸(0.1 g, 0.42 mmol)을 다이클로로메탄(5 mL)에 녹이고, 피라진-2-카르복실산(0.1 g, 0.84 mmol)과 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카르보다이이미드(EDC)를 첨가하였다. 박막 크로마토그래피로 반응 진행을 확인하면서 실온에서 약 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압농축시킨 다음, 농축된 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=5:1)로 정제하여 무색 고체의 목적화합물(85 mg, 수율 59%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.17(s, 3H), 2.76(s, 3H), 6.64(m, 1H), 7.11(m, 2H), 7.36(m, 1H), 8.77(m, 2H), 9.14(s, 1H).
< 실시예 19> 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(3,5- 다이클로로페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 4의 단계 1에서 제조된 4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 18과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 58%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.18(s, 3H), 2.78(s, 3H), 6.80(s, 2H), 7.14(s, 2H), 8.78(s, 2H), 9.15(s, 1H).
< 실시예 20> 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(2- 브로모페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H-피 라졸 의 제조
4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 3의 단계 1에서 제조된 4-(2-브로모페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 18과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 44%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.17(s, 3H), 2.76(s, 3H), 6.60(d, 1H), 7.01(dd, 1H), 7.16(dd, 1H), 7.54(d, 1H), 8.78(s, 2H), 9.15(s, 1H).
< 실시예 21> 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(4- 아세트아미도페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 11의 단계 1에서 제조된 4-(4-아세트아미도페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 18과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 43%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.15(s, 3H), 2.16(s, 3H), 2.78(s, 3H), 7.07(d, 2H), 7.18(brs, 1H), 7.41(d, 2H), 8.76(s, 2H), 9.12(s, 1H).
< 실시예 22> 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-[4-( tert -부틸) 페닐 ] 티오 -3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸의 제조
4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 9의 단계 1에서 제조된 4-[4-(tert-부틸)페닐]티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 18과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 57%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 1.28(s, 9H), 2.17(s, 3H), 2.78(s, 3H), 7.03(d, 2H), 7.28(d, 2H), 7.41(d, 2H), 8.75(s, 2H), 9.12(s, 1H).
< 실시예 23> N-{2-[4-(4- 클로로페닐 ) 티오 ]-3,5- 다이메틸 -1H- 피라졸 -1-일-2-옥소에틸}-4- 플루오로벤젠설폰아마이드의 제조
4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 2의 단계 1에서 제조된 4-(4-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하고, 피라진-2-카르복실산을 사용하는 대신에 2-(4-플루오로페닐설폰아미도)아세트산을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 18과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 31%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.78(s, 6H), 4.25(s, 1H), 7.35(d, 2H), 7.41(m, 2H), 7.43(brs, 1H), 7.75(d, 2H), 8.01(m, 2H).
< 실시예 24> 1-(4- 메톡시페닐 )카르보닐-4-(4- 메틸페닐 ) 티오 -3,5- 다이메틸 -1H-피 라졸 의 제조
4-(4-메틸페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸과 4-메톡시벤조산을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 18과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 48%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.34(s, 3H), 2.21(s, 3H), 2.77(s, 3H), 3.82(s, 3H), 7.06(d, 2H), 7.15(d, 2H), 7.41(d, 2H), 7.76(d, 2H).
< 실시예 25> 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5- 다이클로로페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5-페닐-1H- 피라졸의 제조
단계 1: 4-(3,5- 다이페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H 피라졸의 제조
3-[(4-클로로페닐)티오]펜탄-2,4-다이온을 사용하는 대신에 1-페닐-2-[(3,5-다이페닐)티오]부탄-1,3-다이온을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 73%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.30(s, 3H), 6.86(d, 2H), 7.06(m, 1H), 7.38-7.43 (m, 3H), 7.69-7.72(m, 2H).
단계 2: 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5- 다이클로로페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H- 피라졸의 제조
단계 1의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(수율 60%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.81(s, 3H), 6.91(d, 2H), 7.10(m, 1H), 7.35-7.39(m, 3H), 7.48(m, 1H), 7.86(m, 2H), 8.45(m, 1H), 8.83(m, 1H), 9.37(d, 1H).
< 실시예 26> 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(4- 브로모페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H-피 라졸 의 제조
단계 1: 4-(4- 브로모페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H 피라졸의 제조
3-[(4-클로로페닐)티오]펜탄-2,4-다이온을 사용하는 대신에 1-페닐-2-[(4-브로모페닐)티오]부탄-1,3-다이온을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 58%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.28(s, 3H), 6.88(d, 2H), 7.27-7.37(m, 5H), 7.73(m, 2H).
단계 2: 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(4- 브로모페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H-피라졸의 제조
단계 1의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(수율 50%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.80(s, 3H), 6.94(d, 2H), 7.37(m, 5H), 7.48(m, 1H), 7.88(m, 2H), 8.44(m, 1H), 8.82(m, 1H), 9.35(d, 1H).
< 실시예 27> 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(2- 브로모페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H-피 라졸 의 제조
단계 1: 4-(2- 브로모페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H 피라졸의 제조
3-[(4-클로로페닐)티오]펜탄-2,4-다이온을 사용하는 대신에 1-페닐-2-[(2-브로모페닐)티오]부탄-1,3-다이온을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 33%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.29(s, 3H), 6.63(dd, 2H), 6.92-6.98(m, 1H), 7.06-7.11(m, 1H), 7.35-7.40(m, 3H), 7.50(dd, 1H), 7.72(m, 2H).
단계 2: 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(2- 브로모페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H-피라졸의 제조
단계 1의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(수율 60%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.78(s, 3H), 6.67(d, 1H), 6.98(dd, 1H), 7.12(dd, 1H), 7.35(m, 3H), 7.49(m, 1H), 7.54(d, 1H), 7.88(m, 2H), 8.40(d, 1H), 8.45(d, 1H), 9.37(s, 1H).
< 실시예 28> 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-( 페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H- 피라졸의 제조
단계 1: 4-( 페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H 피라졸의 제조
3-[(4-클로로페닐)티오]펜탄-2,4-다이온을 사용하는 대신에 1-페닐-2-[(페닐)티오]부탄-1,3-다이온을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 43%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.29(s, 3H), 6.63(dd, 2H), 6.92-6.98(m, 1H), 7.06-7.11(m, 1H), 7.35-7.40(m, 4H), 7.50(dd, 1H), 7.72(m, 2H).
단계 2: 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-( 페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H- 피라졸의 제조
단계 1의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(수율 60%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.77(s, 3H), 6.67-6.98(m, 3H), 7.12-7.35(m, 4H), 7.49(m, 1H), 7.54(d, 1H), 7.82(m, 2H), 8.40(d, 1H), 8.45(d, 1H), 9.36(s, 1H).
< 실시예 29> 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(2- 클로로페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H-피 라졸 의 제조
단계 1: 4-(2- 클로로페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H 피라졸의 제조
3-[(4-클로로페닐)티오]펜탄-2,4-다이온을 사용하는 대신에 1-페닐-2-[(2-클로로페닐)티오]부탄-1,3-다이온을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 43%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.30(s, 3H), 6.65(m, 1H), 7.03(m, 2H), 7.31-7.38(m, 4H), 7.72(m, 2H).
단계 2: 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-( 페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H- 피라졸의 제조
단계 1의 화합물을 출발물질로 사용하여 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(수율 66%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.79(s, 3H), 6.69(m, 1H), 7.04-7.09(m, 2H), 7.34-7.38(m, 4H), 7.49(m, 1H), 7.88(m, 2H), 8.45(m, 1H), 8.83(m, 1H), 9.37(d, 1H).
< 실시예 30> 1-(피라진-3-일)카르보닐-4-(3,5- 다이클로로페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5-페닐-1H- 피라졸의 제조
4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 25의 단계 1에서 제조된 4-(3,5-다이페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H 피라졸을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 18과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 12%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.83 (s, 3H), 6.91 (m, 1H), 7.12 (m, 1H), 7.37 (m, 4H), 7.81 (m, 2H), 8.81 (m, 2H), 9.28 (m, 1H).
< 실시예 31> 1-(피라진-3-일)카르보닐-4-(4- 브로모페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H-피 라졸 의 제조
4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 26의 단계 1에서 제조된 4-(4-브로모페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H 피라졸을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 18과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 11%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.83(s, 3H), 6.94(d, 2H), 7.35(m, 5H), 7.83(m, 2H), 8.79(m, 1H), 9.24(s, 1H).
< 실시예 32> 1-(피진-3-일)카르보닐-4-(2- 브로모페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H-피 라졸 의 제조
4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 27의 단계 1에서 제조된 4-(2-브로모페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H 피라졸을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 18과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 11%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.82(s, 3H), 6.67(m, 1H), 7.12(m, 1H), 7.34(m, 3H), 7.52(m, 1H), 7.82(m, 2H), 8.80(s, 2H), 9.26(s, 1H).
< 실시예 33> 1-(피라진-3-일)카르보닐-4-(2- 클로로페닐 ) 티오 -3- 메틸 -5- 페닐 -1H-피 라졸 의 제조
4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸을 사용하는 대신에 실시예 29의 단계 1에서 제조된 4-(2-클로로페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H 피라졸을 사용하는 것을 제외하고 상기 실시예 18과 동일한 방법으로 수행하여 무색 고체의 목적화합물(수율 10%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ 2.82(s, 3H), 6.70(m, 1H), 7.05(m, 1H), 7.35(m, 3H), 7.73(m, 1H), 7.82(m, 2H), 8.80(s, 2H), 9.26(s, 1H).
< 실험예 1> 본 발명에 따른 4- 티오피라졸 유도체의 GPR109A 수용체 항진 활성 평가
본 발명에 따른 4-티오파라졸 유도체의 활성 촉진을 통한 이상지질혈증의 예방 또는 치료 효과를 평가하기 위하여 하기와 같은 방법으로 실험을 수행하였다.
(1) GPR109A 과발현 검색세포주 구축
GPR109A 수용체를 과발현하는 세포를 Molecular Devices사의 CHO-K1/Gα16 세포에 pCMV-XL6-GPR109A 형질전환시켜 제작하였다. 벡터를 이식(transfection)시킨 후 콜로니가 형성될 때까지 G418항생제를 넣고 2주 정도 배양하였고, 각의 콜로니 세포를 따로 배양하여 콜로니마다 나이아신에 의해 증가하는 칼슘 신호를 측정하였다.
체적으로 각각의 콜로니를 배양하여 폴리-D-라이신이 코팅된 96-웰 플레이트에 40,000개/웰로 분주하여 부착시켰다. 다음날 세포를 PBS로 세척하여 혈청이 없는 배지로 교체 후, 2시간 동안 배양하고 다시 HBSS로 세척하였다. 다음으로 Fluo-4NW 용액을 넣고 섭씨 37 ℃에서 1시간 동안 더 배양한 후, 리간드인 나이아신을 넣고 FlexStation II(Molecular Devices사) 기기에서 1분 동안 kinetic mode로 칼슘 신호를 측정하였다. 이때 칼슘 농도가 증가하면 형광(ex/em = 485/525)신호가 나타나게 되는데 형광 신호의 증가가 가장 높은 콜로니를 이후 칼슘 검색에 사용하였다.
(2) 화합물에 의한 세포내 칼슘농도 변화 측정
선별된 CHO K1/Ga16/GPR109A 세포를 위와 같은 방법으로 폴리-D-라이신이 코팅된 96-웰 플레이트에서 칼슘 신호를 측정하되, 나이아신 대신에 실시예 1 내지 실시예 5, 실시예 9, 실시예 11, 실시예 18 내지 실시예 33에서 제조된 4-티오피라졸 화합물 및 비교예 1로서, Merk사에서 개발된 고지혈증 치료제인 MK-6892 화합물을 처리하였다. 또한, 각각의 측정된 형광값에서 무처리군 형광값(CHO K1/Ga16에서 측정된 신호)을 차감하여 GPR109A 수용체에 의한 % 활성을 계산하여 도 1 및 표 2에 나타내었다.
% 항진 활성
10μM 3.2μM 1μM 316nM 100nM 32nM 10nM 1nM
실시예 1 94.9 97.2 86.4 82.8 74.6 24.7 - -
실시예 2 101.7 114.1 107.8 82.9 53.9 11.4 10.8 7.5
실시예 3 99.1 9.7 83.7 59.0 27.0 3.0 - -
실시예 4 10.7 90.5 78.2 67.8 29.4 3.4 - -
실시예 5 106.7 98.7 79.9 62.3 23.1 4.1 - -
실시예 9 55.1 25.1 1.4 - - - - -
실시예 11 98.2 84.4 56.4 24.4 2.6 - - -
실시예 18 80.8 26.1 1.9 - - - - -
실시예 19 61.1 21.6 6.2 - - - - -
실시예 20 72.0 22.4 5.7 4.0 - - - -
실시예 21 69.0 32.0 8.8 4.0 - - - -
실시예 22 101.0 74.5 49.5 17.0 8.6 6.5 - -
실시예 23 21.7 10.7 14.7 11.7 14.1 10.3 8.8 3.7
실시예 24 54.3 40.2 22.6 14.5 11.9 8.5 6.0 2.6
실시예 25 108.7 83.1 65.3 35.5 7.6 8.0 7.6 8.2
실시예 26 111.0 91.2 76.7 66.7 26.6 14.5 13.4 0.6
실시예 27 118.1 91.2 88.5 69.1 19.8 - - -
실시예 28 106.9 109.9 99.9 73.3 39.3 9.7 6.0 -
실시예 29 114.5 94.0 67.5 31.5 9.1 1.5 - -
실시예 30 65.9 16.0 0.5 - - - - -
실시예 31 51.7 12.5 2.1 - - - - -
실시예 32 59.3 2.6 - - - - - -
실시예 33 70.5 21.6 1.0 - - - - -
비교예 1 103.5 100.7 97.5 103.4 88.4 74.7 42.4 -
비교예 2 100.0 96.6 95.8 81.6 70.2 53.8 20.0 -
상기 표 2에서 있어서, "-"는 효과없음을 나타낸다.
상기 도 1 및 표 2에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 4-티오피라졸 화합물은 농도의존적으로 GPR109A 수용체에 대한 우수한 항진활성을 가지는 것을 알 수 있다. 또한, 실시예 1 내지 3, 5, 11, 22, 25, 내지 29의 화합물들은 10 μM에서 95% 이상의 항진활성을 나타내며, 특히, 실시예 5, 25 내지 29의 화합물들은 10 μM에서 103% 이상의 항진활성을 보이는 것을 알 수 있다. 반면, 종래에 고지혈증 치료제로 사용 중인 비교예 1의 MK6892의 경우, 10 μM에서 103.5%의 항진활성을 나타냈으며, 비타민 B의 일종인 비교예 2의 나이아신의 경우, 10 μM에서 100.0%의 항진활성을 나타내는 것을 알 수 있다. 이로부터, 본 발명에 따른 4-티오피라졸 화합물의 GPR109A 수용체에 대한 항진활성은 종래에 사용되어 오던, MK6892 및 나이아신에 비해 상당히 우수한 항진활성을 갖는 것을 알 수 있다.
따라서, 본 발명에 따른 화학식 1의 4-티오피라졸 유도체는 나이아신 GPR109A 수용체에 결합하여 수용체를 활성화하는 작용이 우수하므로, 고지혈증 등의 이상지질혈증의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
< 실험예 2> 본 발명에 따른 4- 티오피라졸 유도체의 GPR109A 수용체 항진이 베타- 어레스틴 이동에 미치는 영향-1
본 발명에 따른 4-티오피라졸 유도체의 GPR109A 수용체의 활성화에 따른 베타-어레스틴 신호전달 경로의 활성화로 인하여 발생하는 안면홍조 예방 효과를 평가 위하여 하기와 같은 방법으로 실험을 수행하였다.
(1) GPR109A 수용체의 이미징 발현벡터 구축
도 2에 나타낸 바와 같이, pCMV6-A-Hygro/GPR109A 벡터를 제작하기 위해 pCMV_neo/GPR109A(Origene사)와 pCMV_hygro shuttle vector에 제한효소 EcoR I, Not I으로 각각 분해시키고 1% 아가로스 겔 상에 원하는 DNA 밴드를 분리하여 QIAquik gel 추출 키트(QUIGEN사)를 이용하여 DNA절편을 정제하였다. 정제된 삽입 DNA와 벡터를 3:1 몰비로 넣고 2X 리가아제 완충액(Promega사)과 T4 DNA 리가아제를 첨가하여 10 ㎕의 반응물을 만들어 상온에서 10분간 반응시켰다. 그 후 E. coli DH5α (RBC) competent 세포에 DNA를 첨가하여 얼음에 20분간 방치한 후, 42 ℃가 설정된 Hot Block에서 1분간 열 충격을 가한 다음 다시 얼음에 20분간 방치한 후, 암피실린(Ampicillin)이 100 ㎍/㎖ 든 셀렉션 아가 플레이트(Selection Agar plate)에 뿌려 37 ℃, 밤샘 배양하였다. 다음날, 콜로니를 집어 LB broth/amp+배지에 넣고 37 ℃에서 200 rpm 속도로 밤샘으로 배양시킨 뒤, 플라스미드 DNA를 분리하였다. 플라스미드 DNA는 Miniprep 키트로 분리하여 DNA 시퀀싱 프라이머[T7 sequecing primer (20 mer) : TAA TAC GAC TCA CTA TAG GG, Hygro sequencing primer (20 mer): TCG CTG CGG CCG ATC TTA GC]를 가지고 시퀀스를 분석하여 확인하였다.
(2) GPR109A 수용체의 이미징 검색세포 구축
U2OS-beta-arrestin2 RrGFP 세포(Molecular Devices사)에 GPR109A 유전자를 서브클로닝한 pCMV6-A-Hygro/GPR109A를 형질전환시켜서 제작하였으며, 나이아신을 처리했을 때 세포 내로 이동하는 GFP 신호를 이미징하여 선별하였다.
이식 후 형성된 콜로니를 96-웰 플레이트에 15,000개/웰로 분주하여 부착시켰다. 다음날 세포를 PBS로 세척하여 혈청과 페놀 레드가 없는 배지로 교체 후 3시간 동안 배양하고 DRAQ5 용액과 나이아신을 처리하여 일정시간이 경과한 후에 세포를 8% 포름알데히드로 고정하고 15분 후, PBS로 세척하여 Arrayscan II (Thermofisher사)에서 이미지를 촬영하였다. 이때 칼슘농도가 증가하면 형광 (ex/em=485/525) 신호가 나타나므로 나이아신을 처리했을 때 수용체의 세포 내 이동이 활발히 유도되는 콜로니를 선별하여 이후 이미지 검색에 이용하였다.
(3) 베타- 어레스틴 이동 이미징 테스트
선별된 U2OS-beta-arrestin2 RrGFP/GPR109A 세포를 사용하여 위와 같이 이미징 실험을 수행하였으며, 이때, 실시예 1 내지 실시예 5, 실시예 9, 실시예 11, 실시예 18 내지 실시예 33에서 제조된 4-티오피라졸 화합물 및 비교예 1의 Merck사에서 개발된 고지혈증 치료제인 MK-6892 화합물, 비교예 2의 나이아신을 각각의 농도로 처리하여 고정하고 1분, 5분, 15분, 30분에 이미지를 촬영하여 베타-어레스틴의 세포내 이동을 측정하여 그 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 4-티오피라졸 화합물은 비교예 1의 MK-6892 및 비교예 2의 나이아신에 비하여 세포 내 스팟(spot)의 형성을 감소시켰으며, 특히, 실시예 9, 18 내지 25, 30-33의 화합물은 1 μ, 30분 동안 처리하여도 전혀 수용체의 세포 내 이동이 나타나지 않았다.
따라서, 본 발명에 따른 4-티오피라졸 화합물은 GPR109A 수용체를 활성화시키되, 안면홍조 부작용과 관련된 신호전달 경로인 베타-어레스틴의 세포 내로의 이동은 감소시킴으로써 안면홍조 부작용없이 고지혈증을 예방 또는 치료하는데 유용하게 사용될 수 있다.
< 실험예 3> 본 발명에 따른 4- 티오피라졸 유도체의 GPR109A 수용체 항진이 베타- 어레스틴 이동에 미치는 영향-2
본 발명에 따른 4-티오피라졸 유도체의 GPR109A 수용체의 활성화에 따른 베타-어레스틴 신호전달 경로의 활성화로 인하여 발생하는 안면홍조 예방 효과를 평가 위하여 하기와 같은 방법으로 실험을 수행하였다.
Tango-GPR109A-bla U2OS 세포주(Invitrogen 사)를 구매하였으며, 이를 384-웰 플레이트에 10,000개/웰씩 분주하여 밤새 부착시키고 본 발명에 따른 4-티오피라졸 화합물 또는 비교예로서 비교예 1의 MK-6892 및 비교예 2의 나이아신을 처리하여 5시간 후에 기질 혼합액[용액 A (CCF4-AM substrate mix, 1 mM) 12 ㎕, 용액 B 60 ㎕, 용액 C 925 ㎕, 용액 D 30 ㎕]을 8 ㎕ 씩 가하고 상온에서 2시간 반응시킨 후 청색형광(ex/em = 409/460)과 녹색형광(ex/em = 409/530)을 측정하였다. 이후, 하기 수학식 1에 나타낸 바와 같이, 청색/녹색 형광비율을 계산하여 표 3에 나타내었다. 이때, 청색/녹색 형광비율이 1보다 클수록 해당 화합물의 베타-어레스틴 세포 내 이동 능력이 커짐을 의미한다.
Figure 112012100507998-pat00047
청색/녹색 형광비율 (10μM)
실시예 1 2.2
실시예 2 2.3
실시예 3 3.3
실시예 4 1.5
실시예 5 3.5
실시예 9 0.8
실시예 11 3.2
실시예 18 1.0
실시예 19 0.8
실시예 20 0.9
실시예 21 0.8
실시예 22 0.9
실시예 23 1.0
실시예 24 1.0
실시예 25 0.8
실시예 26 1.3
실시예 27 1.2
실시예 28 1.6
실시예 29 1.0
실시예 30 0.8
실시예 31 0.7
실시예 32 0.8
실시예 33 0.8
비교예 1 6.8
비교예 2 3.9
상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 4-티오피라졸 유도체는 10 μM의 고농도 투여시에서 0.7-3.5의 형광비율을 나타냈으며, 이는 비교예 1 및 비교예 2의 MK-6892 및 나이아신의 형광비율(각각 6.8, 3.9)보다 훨씬 낮은 형광비율을 나타내는 것이다. 이로부터, 본 발명에 따른 4-티오피라졸 유도체는 안면홍조 부작용과 관련된 신호전달 경로인 베타-어레스틴의 세포 내로의 이동을 감소시키는 것을 알 수 있다.
따라서, 본 발명에 따른 화학식 1의 4-티오피라졸 유도체는 나이아신 GPR109A 수용체에 결합하여 수용체를 활성화하는 작용이 우수하며, 베타-어레스틴 신호전달경로의 활성화는 적게 유발되므로, 안면홍조 부작용을 최소화시키면서 고지혈증 등의 이상지질혈증의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
< 실험예 4> GPR109A 칼슘검색세포에 대한 세포독성
본 발명에 따른 4-티오피라졸 유도체의 세포독성을 알아보기 위하여 GPR109A 칼슘검색 세포주에서 하기와 같은 방법으로 실험을 수행하였다.
먼저, GPR109A 칼슘검색 세포를 폴리-D-라이신이 코팅된 384-웰 플레이트에 1,500개/웰의 밀도로 분주하여 부착시키고, 다음날 화합물을 원하는 농도로 처리하여 72시간 동안 배양하였다. WST-1(EZ-CYTOX, 대일랩서비스)을 5 ㎕처리하여 4시간 동안 더 배양한 후 450 nm에서의 흡광을 측정하고, 그 결과를 표 4에 나타내었다.
% 세포독성
10μM 3.2μM 1μM 316nM 100nM 32nM
실시예 1 - - - - - -
실시예 2 - - - - - -
실시예 3 - - - - - -
실시예 4 79.8 31.3 - - - -
실시예 5 - - - - - -
실시예 9 - - - - - -
실시예 11 - - - - - -
실시예 18 - - - - - -
실시예 19 50.3 33.1 - - - -
실시예 20 - - - - - -
실시예 21 - - - - - -
실시예 22 - - - - - -
실시예 23 - - - - - -
실시예 24 - - - - - -
실시예 25 75.7 64.4 55.6 3.0 - -
실시예 26 - - - - - -
실시예 27 - - - - - -
실시예 28 - - - - - -
실시예 29 - - - - - -
실시예 30 72.3 62.0 53.1 - - -
실시예 31 - - - - - -
실시예 32 - - - - - -
실시예 33 - - - - - -
비교예 1 18.2 13.4 16.8 18.5 14.2 6.8
상기 표 4에서 있어서, "-"는 독성없음을 나타낸다.
상기 표 4에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 4-티오피라졸 유도체는 전박적으로 세포 독성이 낮은 것을 알 수 있다. 특히, 본 발명에 따른 실시예 1 내지 3, 5, 9, 11, 18, 20 내지 24, 26 내지 29 및 31 내지 33 의 경우, 10 μM의 높은 농도에서도 세포독성이 없는 것으로 확인되었다. 반면에, 비교예 1인 MK-6892는 10 μM에서 18.2% 이상의 세포독성을 나타내는 것을 알 수 있다. 이로부터, 4-티오피라졸 유도체는 종래에 고지혈증 치료제로 사용중인 비교예 1의 MK-6892에 비하여 세포에 대한 독성효과가 현저히 우수한 것을 알 수 있다.
따라서, 본 발명에 따른 화학식 1의 4-티오피라졸 유도체는 나이아신 GPR109A 수용체에 결합하여 수용체를 활성화하는 작용이 우수하며, 베타-어레스틴 신호전달경로의 활성화는 적게 유발될 뿐만 아니라, 세포에 대한 독성이 낮으므로 안면홍조 부작용을 최소화시키면서 고지혈증 등의 이상지질혈증의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
한편, 본 발명에 따른 상기 유도체는 목적에 따라 여러 형태로 제제화가 가능하다. 하기에 본 발명의 조성물을 위한 제제예를 예시한다.
< 제제예 1> 약학적 제제의 제조
1. 산제의 제조
본 발명에 따른 화학식 1의 화합물 2 g
유당 1 g
상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
2. 정제의 제조
본 발명에 따른 화학식 1의 화합물 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
3. 캡슐제의 제조
본 발명에 따른 화학식 1의 화합물 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
4. 환의 제조
본 발명에 따른 화학식 1의 화합물 1 g
유당 1.5 g
글리세린 1 g
자일리톨 0.5 g
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 방법에 따라 1환 당 4 g이 되도록 제조하였다.
5. 과립의 제조
본 발명에 따른 화학식 1의 화합물 150 ㎎
대두추출물 50 ㎎
포도당 200 ㎎
전분 600 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 30 % 에탄올 100 ㎎을 첨가하여 섭씨 60 ℃에서 건조하여 과립을 형성한 후 포에 충진하였다.

Claims (9)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    [화학식 1]
    Figure 112014008459948-pat00048

    (상기 화학식 1에서,
    R1은 비치환 또는 하나 이상의 할로겐, C1-C10의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 또는 R5CONH-이고, 여기서, 상기 R5는 C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고;
    R2는 C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 페닐이고;
    R3은 C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고;
    R4는 비치환 또는 C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알콕시로 치환된 페닐, 피리딘, 클로로피리딘, 몰폴리노피리딘, 피라진, 또는
    Figure 112014008459948-pat00049
    이고, 상기 R6은 수소 또는 할로겐이다).
  2. 제1항에 있어서,
    상기 R1은 비치환, 클로로, 브로모, 메틸, t-부틸, 또는 카보닐아미노이고;
    R2는 메틸 또는 페닐이고,
    R3은 메틸이고,
    R4는 메톡시페닐, 피리딘, 클로로피리딘, 몰폴리노피리딘, 피라진 또는
    Figure 112014008459948-pat00050
    이고, 여기서 상기 R6는 플루오로인 것을 특징으로 하는 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  3. 제1항에 있어서, 상기 화학식 1로 표시되는 4-티오피라졸 유도체는:
    (1) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(4-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (2) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(4-브로모페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (3) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-브로모페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (4) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸
    (5) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸--1H-피라졸;
    (6) 1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (7) 1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-브로모페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (8) 1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (9) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-[4-(tert-부틸)페닐]티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (10) 1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-[4-(tert-부틸)페닐]티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (11) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(4-아세트아미도페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (12) 1-(6-클로로피리딘-3-일)카르보닐-4-(4-아세트아미도페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (13) 1-(6-몰폴리노피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (14) 1-(6-몰폴리노피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-브로모페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (15) 1-(6-몰폴리노피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (16) 1-(6-몰폴리노피리딘-3-일)카르보닐-4-[4-(tert-부틸)페닐]티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (17) 1-(6-몰폴리노피리딘-3-일)카르보닐-4-(4-아세트아미도페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (18) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(2-클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (19) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (20) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(2-브로모페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (21) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(4-아세트아미도페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (22) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-[4-(tert-부틸)페닐]티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (23) N-{2-[4-(4-클로로페닐)티오]-3,5-다이메틸-1H-피라졸-1-일}-2-옥소에틸-4-플루오로벤젠설폰아마이드;
    (24) 1-(4-메톡시페닐)카르보닐-4-(4-메틸페닐)티오-3,5-다이메틸-1H-피라졸;
    (25) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸;
    (26) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(4-브로모페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸;
    (27) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-브로모페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸;
    (28) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-페닐티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸;
    (29) 1-(피리딘-3-일)카르보닐-4-(2-클로로페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸;
    (30) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(3,5-다이클로로페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸;
    (31) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(4-브로모페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸;
    (32) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(2-브로모페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸; 및
    (33) 1-(피라진-2-일)카르보닐-4-(2-클로로페닐)티오-3-메틸-5-페닐-1H-피라졸로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  4. 하기 반응식 1로 나타낸 바와 같이,
    화학식 2로 표시되는 화합물과 화학식 3으로 표시되는 하이드라진 수화물의 고리화 반응을 수행하여 화학식 4로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 1); 및
    상기 단계 1에서 제조된 화학식 4로 표시되는 화합물과 화학식 5로 표시되는 산염화물의 반응시켜 화학식 1로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 2);를 포함하는 제1항의 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법:
    [반응식 1]
    Figure 112014067892214-pat00051

    (상기 반응식 1에서, R1, R2, R3 및 R4는 제1항의 화학식 1에서 정의한 바와 같다).
  5. 하기 반응식 2로 나타낸 바와 같이,
    화학식 2로 표시되는 화합물과 화학식 3으로 표시되는 하이드라진 수화물의고리화 반응을 수행하여 화학식 4로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 1); 및
    상기 단계 1에서 제조된 화학식 4로 표시되는 화합물과 화학식 6으로 표시되는 카르복실산 유도체를 반응시켜 화학식 1로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 2);를 포함하는 제1항의 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법:
    [반응식 2]
    Figure 112014067892214-pat00052

    (상기 반응식 2에서, R1, R2, R3 및 R4는 제1항의 화학식 1에서 정의한 바와 같다).
  6. 하기 반응식 3에 나타낸 바와 같이,
    화학식 1a로 표시되는 화합물을 화학식 7로 표시되는 몰폴린과 커플링 반응을 수행하여 화학식 1b로 표시되는 화합물을 제조하는 단계를 포함하는 제1항의 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법:
    [반응식 3]
    Figure 112014067892214-pat00053

    (상기 반응식 3에서, R1, R2 및 R3은 제1항의 화학식 1에서 정의한 바와 같고;
    A는 질소(N) 또는 탄소(C) 원자이고;
    1a 및 1b는 화학식 1의 화합물이다).
  7. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 화학식 1로 표시되는 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 고지혈증, 고콜레스테롤혈증 및 고중성지방혈증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 이상지질혈증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  8. 삭제
  9. 제7항에 있어서,
    상기 약학적 조성물은 GPR109A 수용체 활성 부작용인 안면홍조 유발이 없는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
KR1020120139673A 2011-12-29 2012-12-04 4-티오피라졸 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상지질혈증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 KR101446738B1 (ko)

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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