KR101294455B1 - 면역 아쥬반트 제조용 화합물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 항원, 예컨대, 박테리아 및 바이러스성 질환용 백신과 함께 공동 투여되는 경우 면역 아쥬반트로서 유용한 화합물인, 화학식 I의 TLR-4 수용체 효능제 E6020 및 그의 입체이성질체의 제조 방법을 제공한다. 또한, 합성 중간체를 제공한다.
면역 아쥬반트, ＴＬＲ―４ 수용체

Description

면역 아쥬반트 제조용 화합물 {COMPOUNDS FOR PREPARING IMMUNOLOGICAL ADJUVANT}
일반적으로, 백신 투여가 감염성 질환을 예방하는데 효과적인 방법인 것으로 입증되었다. 일반적으로, 백신은 비용면에서 효과적이고, 표적 병원체에 대한 항생제 내성을 유발하지 않거나, 숙주에 존재하는 정상균총에 영향을 주지 않는다. 많은 경우에서, 예컨대, 항바이러스 면역을 유도할 때, 백신을 사용하여 이용가능한 생존 치유법 또는 증상을 호전시키는 치료법이 없는 질병을 예방할 수 있다.
백신은 발생원 (agent) 또는 항원, 전형적으로 비감염성 또는 비병원체성 형태로 체내에 도입되는 감염성 유기체 또는 그의 일부분에 대한 면역계 반응을 촉발시킴으로써 기능한다. 일단 면역계가 유기체에 대하여 "초회감작 (prime)"되거나 감작되면, 그 후 면역계가 감염성 병원체인 이러한 유기체에 노출될 때, 이들 유기체가 숙주 유기체 내에서 번식하고, 충분히 많은 세포를 감염시켜 질병의 증상을 유발시키기 전에, 병원체를 박멸시키는 면역 반응을 빠르고 강하게 일으킨다.
면역계를 초회감작시키는데 사용되는 발생원 또는 항원은 독성약화된 유기체로 알려진, 감염성이 덜한 상태의 완전한 유기체일 수 있거나, 일부 경우에서는, 유기체의 다양한 구조적 성분을 나타내는 탄수화물, 단백질 또는 펩티드와 같은 유기체의 구성 성분일 수 있다.
많은 경우에서, 백신이 효과를 나타낼 정도, 즉, 면역성이 부여될 정도로 충분히 면역계를 자극하기 위하여, 백신에 존재하는 항원에 대한 면역 반응을 증강시키는 것이 필요하다. 단독으로 투여되는 많은 단백질과 대부분의 펩티드 및 탄수화물 항원은 면역성을 부여하는 충분한 항체 반응을 일으키지 않는다. 이러한 항원들은 이물질로 인식되어 면역 반응을 일으키는 방식으로 면역계에 노출될 필요가 있다. 이 때문에, 항원을 고정하고, 면역 반응을 촉진시키는 첨가제 (아쥬반트)가 고안되었다.
가장 잘 알려진 아쥬반트로는 유/수 에멀젼 중 마이코박테리아의 혼합물로 이루어진 프로인트 완전아쥬반트 (Freund's complete Adjuvant)이다. 프로인트 아쥬반트는 두가지 방식으로 작용한다. 우선, 세포 및 체액-매개 면역을 증강시킴으로써, 둘째로, 항원 유발의 급속 분산을 차단 ("저장소 효과 (depot effect)")함으로써 작용한다. 그러나, 이 물질에 대한 빈번한 독성의 생리학적 및 면역학적 반응으로 인해 프로인트 아쥬반트는 인간에게 사용될 수 없다.
면역자극성 또는 아쥬반트 활성을 갖는 것으로 밝혀진 다른 분자는 내독소이며, 지질다당류 (LPS)로도 알려져 있다. LPS는 "선천" 면역 반응, 즉, 유기체를 사전에 노출시킬 필요 없이, 유기체를 내독소 (및 침입한 세균의 성분)로 인식하도록 전개되는 반응을 유발함으로써 면역계를 자극시킨다. LPS가 생존가능한 아쥬반트로 하기에 너무 독성인 반면, 구조적으로 내독소와 관련된 분자, 예컨대 모노포스포릴 지질 A ("MPL")는 임상 실험에서 아쥬반트로 시험되고 있다. LPS 및 MPL 둘 다 인간의 톨-유사 수용체-4 (TLR-4)에 대한 효능제인 것으로 증명되었다. 그 러나, 현재, 인간에 사용하기 위한 유일한 FDA-승인된 아쥬반트는 항원의 침전에 의한 "저장 (depot)" 항원에 사용되는 알루미늄 염 (알룸, Alum)이다. 알룸 역시 항원에 대한 면역 반응을 자극한다.
따라서, 항원이 단독으로 또는 알룸과 함께 주입되는 경우에서보다 항원에 대한 보다 강한 항체 반응을 일으키도록 면역계를 자극하기 위하여, 항원과 함께 공동 투여될 수 있는 화합물의 제조를 위한 합성 방법의 개발이 필요하다.
<발명의 요약>
하나의 측면에서, 본 발명은 하기 구조를 갖는 TLR-4 수용체 효능제 E6020의 합성 방법을 제공한다.
Figure 112008007582947-pct00001
E6020
다른 측면에서, 본 발명은 E6020의 임의의 입체이성질체를 합성하는 방법을 포함한다. 따라서, 본 명세서에서는 하기 구조를 갖는 화합물을 제조하기 위한 합성 중간체가 제공된다.
Figure 112008007582947-pct00002
이들 화합물은 항원, 예컨대, 박테리아 및 바이러스성 질환용 백신과 함께 공동 투여되는 경우에 면역 아쥬반트로서 유용하다. 본 발명은 또한 E6020을 제조하는데 유용한 합성 중간체 및 그의 입체이성질체를 제공한다.
도 1은 결정형 ER-8016158의 구조를 도시한 것이다.
도 2는 ER-806158 결정내 수소결합 (점선)의 최상의 다이어그램을 보여주는, a-축을 따라 충전되어 있는 다이어그램이다.
도 3은 결정형 ER-806158의 분말 X-선 회절 (PXRD) 패턴을 나타낸 것이다.
도 4는 결정형 ER-806158의 DSC 온도 기록도를 나타낸 것이다.
도 5는 결정형 ER-806158의 적외선 스펙트럼을 나타낸 것이다.
정의
본 발명에 따라 본 명세서에서 사용되는 것으로서, 하기 용어는, 달리 명시되지 않는 한 하기 의미로 정의된다.
본 발명에서 개시된 특정 화합물 및 구체적인 관능기에 대한 정의가 또한 이하에 보다 자세히 기재되어 있다. 본 발명의 목적상, 화학 원소는 원소의 주기율표 (CAS 버젼, Handbook of Chemistry and Physics, 75th Ed., 내부표지)에 따라 정의되며, 구체적인 관능기는 일반적으로 그 안에 기재된 것과 같이 정의된다. 또한, 유기 화학의 일반적인 이론 뿐만 아니라 구체적인 관능성 잔기 및 반응성이 문헌["Orgarnic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999]에 기재되어 있으며, 이 문헌의 전체 내용이 본 명세서에 포함된다. 또한, 본 명세서에 기재된 바와 같이, 당업자라면 합성 방법에서 각종 보호기가 사용된다는 것을 인식할 것이다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "보호기"는 특정 관능성 잔기, 예를 들어, O, S, P 또는 N을 일시적으로 차단하여, 반응이 다중관능성 화합물의 다른 반응 위치에서 선택적으로 일어날 수 있도록 하는 기를 의미한다. 바람직한 실시태양에서, 보호기는 양호한 수율로 선택적으로 반응하여 계획한 반응에 안정한 보호된 기질을 제공한다. 보호기는 용이하게 이용가능한, 바람직하게는, 다른 관능기를 공격하지 않는 무독성 시약에 의해 양호한 수율로 선택적으로 제거되어야 한다. 보호기는 용이하게 분리할 수 있는 유도체 (보다 바람직하게는, 새로운 입체 중심을 생성하지 않음)를 생성하며, 보호기는 추가 위치에서의 반응을 방지하기 위하여, 최소한의 추가 관능성을 갖는다. 본 명세서에 상술된 바와 같이, 산소, 황, 질소, 인 및 탄소 보호기가 사용될 수 있다.
예를 들어, 특정 실시태양에서, 본 명세서에 상술된 바와 같이, 예시적인 특정 산소 보호기가 사용된다. 이러한 산소 보호기로는 메틸 에테르, 치환된 메틸 에테르 (몇 개만 언급하자면, 예를 들어, MOM (메톡시메틸 에테르), MTM (메틸티오메틸 에테르), BOM (벤질옥시메틸 에테르), PMBM (p-메톡시벤질옥시메틸 에테르)), 치환된 에틸 에테르, 치환된 벤질 에테르, 실릴 에테르 (예를 들어, TMS (트리메틸실릴 에테르), TES (트리에틸실릴에테르), TIPS (트리이소프로필실릴 에테르), TBDMS (t-부틸디메틸실릴 에테르), 트리벤질 실릴 에테르, TBDPS (t-부틸디페닐 실릴 에테르)), 에스테르 (몇 개만 언급하자면, 예를 들어, 포르메이트, 아세테이트, 벤조에이트 (Bz), 트리플루오로아세테이트, 디클로로아세테이트), 카르보네이트, 시클릭 아세탈 및 케탈이 포함되나, 이에 한정되는 것은 아니다. 포스파이트 산소 및 포스페이트 산소에 대한 보호기로는 예를 들어, 알킬 포스페이트/포스파이트, 예컨대, 메틸, 에틸; 이소프로필; t-부틸; 시클로헥실; 1-아다만틸; 및 2-트리메틸실릴프로프-2-에닐; 알케닐 포스페이트/포스파이트, 예컨대, 에테닐 및 알릴; 2-치환된 에틸 포스페이트/포스파이트 예컨대, 2-시아노에틸, 2-시아노-1,1-디메틸에틸, 2-(트리메틸실릴)에틸, 2-(4-니트로페닐)에틸, 2-(페닐술포닐)에틸, 및 2-(벤질술포닐)에틸; 할로에틸 포스페이트/포스파이트 예컨대, 2,2,2-트리클로로에틸, 2,2,2-트리클로로-1,1-디메틸에틸, 2,2,2-트리브로모에틸, 2,3-디브로모프로필, 벤질 포스페이트/포스페이트 예컨대, 벤질; 4-니트로벤질, 4-클로로벤질; 1-옥시도-4-메톡시-2-피콜릴, 플루오레닐-9-메틸, 5-벤즈이속사졸릴메틸렌, (C6H5)2C=; 및 페닐 포스페이트/포스파이트, 예컨대, 페닐; 4-니트로페닐, 및 4-클로로페닐; 및 실릴 포스페이트/포스파이트, 예컨대, 트리메틸실릴이 포함된다.
다른 예시적인 특정 실시태양에서, 질소 보호기가 사용된다. 이러한 질소 보호기는, 몇 개만 언급하자면, 카르바메이트 (몇 개만 언급하자면, 메틸, 에틸 및 치환된 에틸 카르바메이트 (예를 들어, Troc)가 포함됨) 아미드, 시클릭 이미드 유도체, N-알킬 및 N-아릴 아민, 이민 유도체, 및 엔아민 유도체와 같은 일가 또는 이가의 보호기일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 아민 보호기, 예컨대, Cbz, Boc, Fmoc, TROC, TMS-에틸카르보닐, 시아노에틸카르보닐, 알릴옥시카르보닐 또는 (C6H5)2C= (디페닐메틸렌)이 또한 언급될 수 있다. 다른 예시적인 특정 보호기가 본 명세서에 상술되어 있으나, 본 발명이 이들 보호기에 한정되는 것은 아니며, 각종 추가의 등가 보호기가 상기 기준을 사용하여 용이하게 확인될 수 있으며, 본 발명에 사용될 수 있음을 인식할 수 있을 것이다. 또한, 각종 보호기가 문헌["Protective Groups in Orgarnic Synthesis" Third Ed. Greene, T. W. and Wuts, P.G., Eds., John Wiley &Sons, New York: 1999]에 기재되어 있으며, 이 문헌의 전체 내용이 본 명세서에 포함된다.
본 명세서에 기재된 것과 같은 화합물은 임의의 수의 치환기 또는 관능성 잔기로 치환될 수 있음이 이해된다. 일반적으로, 용어 "임의로는"으로 수식되거나 수식되지 않은, 용어 "치환된" 및 본 발명의 화학식에 포함된 치환기는 소정의 구조에서 수소 라디칼이 명기된 치환기의 라디칼로 대체되는 것을 말한다. 임의의 제시된 구조에서 하나 이상의 위치가 특정 기로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있는 경우, 치환기는 모든 위치에서 동일 또는 상이할 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 것으로서, 용어 "치환된"은 유기 화합물의 모든 허용가능한 치환기가 포함되는 것으로 고려된다. 개괄적으로, 허용가능한 치환기로는 유기 화합물의 아시클릭 및 시클릭, 분지쇄 및 비분지쇄, 카르보시클릭 및 헤테로시클릭, 방향족 및 비방향족, 탄소 및 헤테로원자 치환기가 포함된다. 본 발명의 목적상, 헤테로원자, 예컨대, 질소는 수소 치환기 및/또는 헤테로원자의 원자가를 만족시키는, 본 명세서에 기재된 유기 화합물의 임의의 허용가능한 치환기를 가질 수 있다. 또한, 본 발명을 유기 화합물의 허용가능한 치환기에 의해 어떠한 방식으로도 제한하고자 하는 것이 아니다. 본 발명에 의해 계획되는 치환기 및 가변기의 조합은 일반적으로 상기된 것과 같이, 예시된 질환을 치료 및 예방하는데 유용한 안정한 화합물을 생성하도록 하는 것이 바람직하다. 치환기의 예로는 할로 치환기, 예를 들어 F, Cl, Br, 또는 I; 히드록실기; C1-C6 알콕시기, 예를 들어, -OCH3, -OCH2CH3 또는 -OCH(CH3)2; C1-C6 할로알킬기, 예를 들어, -CF3, -CH2CF3 또는 -CHCl2; C1-C6 알킬티오; 아미노; 모노 및 디알킬 아미노기; -NO2; -CN; 술페이트기 등이 포함되나, 이에 한정되는 것은 아니다. 일반적으로 적절한 치환기의 추가 예는 본 명세서에 기재되어 있는 실시예에 제시된 구체적인 실시태양에 의해 설명된다.
본 명세서에서 사용되는 것으로서, 용어 "안정한"은, 바람직하게는 제조하기에 충분한 안정성을 갖고, 충분한 시간 동안 검출될 수 있도록, 및 바람직하게는, 충분한 시간 동안 본 명세서에 상술된 목적으로 사용될 수 있도록 화합물의 안전성을 유지하는 화합물의 상태를 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 것으로서, 용어 "알킬"은 직쇄 및 분지쇄 알킬기를 포함한다. 유사한 약정이 다른 포괄적인 용어, 예컨대, "알케닐", "알키닐" 등에 적용된다. 또한, 본 명세서에서 사용되는 것으로서, 용어 "알킬", "알케닐", "알키닐" 등은 치환된 기 및 비치환된 기 둘 다를 포함한다. 특정 실시태양에서, 본 명세서에서 사용되는 것으로서, "저급 알킬"은 1 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 알킬기 (시클릭, 아시클릭, 치환된 기, 비치환된 기, 분지쇄 또는 비분지쇄)를 나타낼 때 사용된다. 다른 실시태양에서, C1 -4, C2 -4, C1 -3 또는 C3 -6 알킬 또는 알케닐이 바람직하다.
특정 실시태양에서, 본 발명에 사용되는 알킬, 알케닐 및 알키닐기와 관련하여, 알킬기는 1 내지 20개의 지방족 탄소 원자, 알케닐 및 알키닐기는 2 내지 20개의 탄소 원자를 함유한다. 다른 특정 실시태양에서, 본 발명에 사용되는 알킬, 알케닐 및 알키닐기는 1 내지 15개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 또 다른 실시태양에서, 본 발명에 사용되는 알킬, 알케닐 및 알키닐기는 1 내지 8개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 또 다른 실시태양에서, 본 발명에 사용되는 알킬, 알케닐 및 알키닐기는 1 내지 6개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 또 다른 실시태양에서, 본 발명에 사용되는 알킬, 알케닐 및 알키닐기는 1 내지 4개의 탄소 원자를 함유한다. 따라서, 지방족 기의 예로는, 예를 들어, 하나 이상의 치환기를 포함할 수 있는, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, 알릴, n-부틸, sec-부틸, 이소부틸, tert-부틸, n-펜틸, sec-펜틸, 이소펜틸, tert-펜틸, n-헥실, sec-헥실, 잔기 등을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 알케닐기는, 예를 들어, 에테닐, 프로페닐, 부테닐, 1-메틸-2-부텐-1-일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 대표적인 알키닐기로는 에티닐, 2-프로피닐 (프로파르길), 1-프로피닐 등을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 명세서에서 사용되는 것으로서, 용어 "알리시클릭"은 지방족과 시클릭 화합물의 특성을 조합한 화합물을 지칭하며, 임의로는 하나 이상의 관능기로 치환된, 시클릭 또는 폴리시클릭 지방족 탄화수소 및 가교된 시클로알킬 화합물을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 당업자라면 인식할 수 있는 바와 같이, 본 명세서에서 "알리시클릭"은 임의로는 하나 이상의 관능기로 치환된, 시클로알킬, 시클로알케닐 및 시클로알키닐 잔기를 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 따라서, 알리시클릭 기의 예로는, 하나 이상의 치환기를 포함할 수 있는, 시클로프로필, -CH2-시클로프로필, 시클로부틸, -CH2-시클로부틸, 시클로펜틸, -CH2-시클로펜틸-n, 시클로헥실, -CH2-시클로헥실, 시클로헥세닐에틸, 시클로헥사닐에틸, 노르보르빌 잔기 등을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 명세서에서 사용되는 것으로서, 용어 "알콕시" (또는 "알킬옥시") 또는 "티오알킬"은 산소 원자 또는 황 원자를 통해 모 분자 잔기에 결합한, 상기 정의된 알킬 또는 시클로알킬기를 지칭한다. 특정 실시태양에서, 알킬 또는 시클로알킬기는 1 내지 20개의 지방족 또는 알리시클릭 탄소 원자를 함유한다. 다른 특정 실시태양에서, 알킬 또는 시클로알킬기는 1 내지 10개의 지방족 또는 알리시클릭 탄소 원자를 함유한다. 또 다른 실시태양에서, 본 발명에서 사용되는 알킬, 알케닐 및 알키닐기는 1 내지 8개의 지방족 또는 알리시클릭 탄소 원자를 함유한다. 또 다른 실시태양에서, 알킬기는 1 내지 6개의 지방족 또는 알리시클릭 탄소 원자를 함유한다. 또 다른 실시태양에서, 알킬기는 1 내지 4개의 지방족 또는 알리시클릭 탄소 원자를 함유한다. 알콕시의 예로는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시, tert-부톡시, 네오펜톡시 및 n-헥스옥시가 포함되나, 이에 한정되는 것은 아니다. 티오알킬의 예로는 메틸티오, 에틸티오, 프로필티오, 이소프로필티오, n-부틸티오 등이 포함되나, 이에 한정되는 것은 아니다.
용어 "알킬아미노"는 -NHR'구조를 갖는 기를 지칭하며, 여기서 R'는 본 명세서에서 정의된 바와 같은 알킬 또는 시클로알킬이다. 용어 "디알킬아미노"는 -N(R')2 구조를 갖는 기를 지칭하며, 여기서, 각 경우의 R'는 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같은 알킬 또는 시클로알킬이다. 용어 "아미노알킬"은 NH2R'- 구조를 갖는 기를 지칭하며, 여기서 R'는 본 명세서에서 정의된 바와 같은 알킬 또는 시클로알킬이다. 특정 실시태양에서, 알킬기는 1 내지 20개의 지방족 또는 알리시클릭 탄소 원자를 함유한다. 다른 특정 실시태양에서, 알킬 또는 시클로알킬기는 1 내지 10개의 지방족 또는 알리시클릭 탄소 원자를 함유한다. 또 다른 실시태양에서, 본 발명에서 사용되는 알킬, 알케닐 및 알키닐기는 1 내지 8개의 지방족 또는 알리시클릭 탄소 원자를 함유한다. 또 다른 실시태양에서, 알킬 또는 시클로알킬기는 1 내지 6개의 지방족 또는 알리시클릭 탄소 원자를 함유한다. 또 다른 실시태양에서, 알킬 또는 시클로알킬기는 1 내지 4개의 지방족 또는 알리시클릭 탄소 원자를 함유한다. 알킬아미노의 예로는 메틸아미노, 에틸아미노, 이소-프로필아미노 등을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
일반적으로, 본 명세서에서 사용되는 것으로서, 용어 "아릴" 및 "헤테로아릴"은 각각 치환 또는 비치환될 수 있고, 바람직하게는 3 내지 14개의 탄소 원자를 갖는, 안정한 모노- 또는 폴리시클릭, 헤테로시클릭, 폴리시클릭 및 폴리헤테로시클릭 불포화 잔기를 지칭한다. 또한, 본 명세서에서 정의된 바와 같은 아릴 및 헤테로아릴 잔기가 알킬 또는 헤테로알킬 잔기를 통해 결합할 수 있다는 것이 이해될 것이며, 이에 따라, -(알킬)아릴, -(헤테로알킬)아릴, -(헤테로알킬)아릴, 및 -(헤테로알킬)헤테로아릴 잔기도 포함된다. 따라서, 본 명세서에서 사용되는 것으로서, 용어 "아릴 또는 헤테로아릴" 및 "아릴, 헤테로아릴, -(알킬)아릴, -(헤테로알킬)아릴, -(헤테로알킬)아릴 및 -(헤테로알킬)헤테로아릴"은 상호 교환되어 사용될 수 있다. 치환기는 상기 언급한 임의의 치환기, 즉, 안정한 화합물을 생성시키는, 본 명세서에 개시된 것과 같은 지방족 잔기 또는 다른 잔기에 대해서 기재된 치환기를 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 특정 실시태양에서, "아릴"은, 비제한적인 예로서, 페닐, 나프틸, 테트라히드로나프틸, 인다닐, 인데닐 등을 포함하는, 하나 또는 두개의 방향족 고리를 갖는 모노- 또는 비시클릭 카르보시클릭 고리계를 지칭한다. 본 발명의 특정 실시태양에서, 본 명세서에서 사용되는 것으로서, 용어 "헤테로아릴"은 5 내지 10개의 고리 원자를 갖고, 이 중 1개의 고리 원자가 S, O 및 N로부터 선택되고; 0, 1 또는 2개의 고리 원자가 S, O 및 N로부터 독립적으로 선택되는 추가의 헤테로 원자이고; 나머지 고리 원자는 탄소인 시클릭 방향족 라디칼을 지칭하며, 이 라디칼은, 예를 들어, 피리딜, 피라지닐, 피리미디닐, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 옥사졸릴, 이소옥사졸릴, 티아디아졸릴, 옥사디아졸릴, 티오페닐, 푸라닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐 등과 같이 임의의 고리 원자를 통해 분자의 나머지 부분과 결합한다.
아릴 및 헤테로아릴 기 (비시클릭 아릴기를 포함함)는 비치환 또는 치환될 수 있다는 것이 이해될 것이며, 이때, 치환은 하나 이상의 수소 원자가 일반적으로 상기한 1종 이상의 임의의 치환기로 독립적으로 대체되는 것을 포함한다. 일반적으로 적절한 치환기의 추가 예는 본 명세서에서 기재된 실시예에 제시된 구체적인 실시태양에 의해 설명된다.
본 명세서에서 사용되는 것으로서, 용어 "시클로알킬"은 구체적으로 3 내지 7개, 바람직하게는 3 내지 10개의 탄소 원자를 갖는 기를 지칭한다. 적절한 시클로알킬의 비제한적인 예로는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸 등이 포함되며, 이는 다른 알리시클릭, 헤테로알리시클릭 또는 헤테로시클릭 잔기의 경우에서와 같이, 임의로는, 일반적으로 상기된 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있다. 유사한 약정이 다른 포괄적인 용어, 예컨대, "시클로알케닐", "시클로알키닐" 등에 적용된다. 또한, 상기 및 본 명세서에 기재된 임의의 알리시클릭 또는 헤테로알리시클릭 잔기가 이에 융합된 아릴 또는 헤테로아릴 잔기를 포함할 수 있음이 이해될 것이다. 일반적으로 적절한 치환기의 추가 예는 본 명세서에 기재된 실시예에 제시된 특정 실시태양에 의해 설명된다.
본 명세서에서 사용되는 것으로서, 용어 "헤테로지방족"은 주쇄에 있는 하나 이상의 탄소 원자가 헤테로 원자로 치환된 지방족 잔기를 지칭한다. 따라서, 헤테로지방족 기는, 예를 들어, 탄소 원자 대신에 하나 이상의 산소, 황, 질소, 인 또는 규소 원자를 함유하는 지방족 쇄를 지칭한다. 헤테로지방족 잔기는 분지쇄 또는 선형의 비분지쇄일 수 있다. 특정 실시태양에서, 헤테로지방족 잔기는 하나 이상의 수소 원자가 일반적으로 상기된 하나 이상의 치환기로 독립적으로 치환된다. 일반적으로 적절한 치환기의 추가 예는 본 명세서에 기재된 실시예에 제시된 특정 실시태양에 의해 설명된다.
본 명세서에서 사용되는 것으로서, 용어 "헤테로알리시클릭"은 헤테로지방족과 시클릭 화합물의 특성을 조합한 화합물을 지칭하며, 예로서, 임의로는 본 명세서에 정의된 바와 같은 하나 이상의 관능기로 치환된, 포화 및 불포화 모노- 또는 폴리시클릭 헤테로사이클, 예컨대, 모르폴리노, 피롤리디닐, 푸라닐, 티오푸라닐, 피롤릴 등을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 상기 및 본 명세서에 기재된 임의의 알리시클릭 또는 헤테로알리시클릭 잔기가 이에 융합된 아릴 또는 헤테로아릴 잔기를 포함할 수 있음이 이해될 것이다. 일반적으로 적절한 치환기의 추가 예는 본 명세서에 기재된 실시예에 제시된 특정 실시태양에 의해 설명된다.
본 명세서에서 사용되는 것으로서, 용어 "할로" 및 "할로겐"은 불소, 염소, 브롬 및 요오드로부터 선택되는 원자를 지칭한다.
용어 "할로알킬"은 1, 2 또는 3개의 할로겐 원자가 결합된, 상기 정의한 바와 같은 알킬기를 의미하며, 이러한 기의 예로는 클로로메틸, 브로모에틸, 트리플루오로메틸 등을 들 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 것으로서, 용어 "헤테로시클로알킬" 또는 "헤테로사이클"은, 비제한적인 예로서, 산소, 황 및 질소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 3개의 헤테로 원자를 갖는 융합된 6-원 고리를 포함하는 비- 또는 트리-시클릭 기를 포함하는, 비방향족 5-, 6- 또는 7-원 고리 또는 폴리시클릭 기를 지칭하며, 여기서, (i) 각각의 5원 고리는 0 내지 1개의 이중결합을 갖고, 각각의 6원 고리는 0 내지 2개의 이중결합을 가지며; (ii) 질소 및 황 헤테로원자가 임의로는 산화될 수 있고; (iii) 질소 헤테로원자가 임의로는 4급화될 수 있으며; (iv) 임의의 상기 헤테로시클릭 고리는 치환 또는 비치환된 아릴 또는 헤테로아릴 고리에 융합될 수 있다. 대표적인 헤테로사이클로는 피롤리디닐, 피라졸리닐, 피라졸리디닐, 이미다졸리닐, 이미다졸리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 모르폴리닐, 티아졸리디닐, 이소티아졸리디닐 및 테트라히드로푸릴 등을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 특정 실시태양에서, "치환된 헤테로시클로알킬 또는 헤테로사이클" 기가 사용되며, 본 명세서에서 사용되는 것으로서, 이 용어는 하나 이상의 수소 원자가 일반적으로 상기된 하나 이상의 치환기로 독립적으로 치환된, 상기 정의한 바와 같은 헤테로시클로알킬 또는 헤테로사이클 기를 지칭한다. 일반적으로 적절한 치환기의 추가 예는 본 명세서에 기재된 실시예에 제시된 특정 실시태양에 의해 설명된다.
본 명세서에서 사용되는 것으로서, 용어 "지방족", "헤테로지방족", "알킬", "알케닐", "알키닐", "헤테로알킬", "헤테로알케닐", "헤테로알키닐" 등은 치환 및 비치환된 기, 포화 및 불포화 기, 및 직쇄 및 분지쇄 기를 포함한다. 유사하게, 용어 "알리시클릭", "헤테로알리시클릭", "헤테로시클로알킬", "헤테로사이클" 등은 치환 및 비치환된 기, 포화 및 불포화 기를 포함한다. 또한, 용어 "시클로알킬", "시클로알케닐", "시클로알키닐", "헤테로시클로알킬", "헤테로시클로알케닐", "헤테로시클로알키닐", "아릴", "헤테로아릴" 등은 치환된 기 및 비치환된 기 둘 다를 포함한다.
또한, E6020은 비대칭 탄소 원자를 함유하기 때문에, 입체이성질체, 즉, 거울상이성질체 및 부분입체이성질체의 형태로 존재할 수 있다. 당업자라면 본 발명의 방법이 E6020의 모든 가능한 입체이성질체 중 임의의 것을 제조하는데 적절할 수 있다는 것을 인식할 것이다. 본 명세서에 기재된 실시예가 특정 이성질체의 제조를 개시하고 있을지라도, E6020의 다른 입체이성질체의 제조 방법이 본 발명의 범위안에 포함되는 것으로 간주된다.
<상세한 설명>
하나의 측면에서, 본 발명은 하기 구조를 갖는 TLR-4 수용체 효능제 E6020의 합성 방법을 제공한다.
Figure 112008007582947-pct00003
E6020
E6020은 강력한 TLR-4 수용체 효능제이므로, 이 화합물은 항원, 예컨대, 박테리아 및 바이러스성 질환에 대한 백신과 함께 공동 투여될 경우, 면역 아쥬반트로서 유용하다. 예를 들어, E6020은 임의의 적절한 항원 또는 백신 성분, 예를 들어, 병원성 및 비병원성 유기체, 바이러스 및 진균으로부터의 항원으로 이루어진 군으로부터 선택된 항원성 제제와 함께 사용될 수 있다. 추가의 예로서, E6020은 예컨대, 천연두, 황열, 암, 디스템퍼, 콜레라, 수두, 성홍열, 디프테리아, 파상풍, 백일해, 인플루엔자, 광견병, 볼거리, 홍역, 구제역 및 회색질척수염과 같은 질병의 상태 및 증상에 대해 약리학적으로 활성인 단백질, 펩티드, 항원 및 백신과 함께 사용될 수 있다. 특정 실시태양에서, E6020 및 항원은, 각각 이들와 함께 백신을 접종한 숙주 동물, 배아 또는 난자에게 투여될 경우, 면역 반응을 일으키는데 효과적인 양으로 존재한다.
다른 측면에서, 본 발명은 TLR-4 수용체 효능제 E6020의 임의의 입체이성질체를 합성하기 위한 방법을 포함한다. 따라서, 본 명세서에서는 하기 구조를 갖는 화합물의 제조 방법을 제공한다:
Figure 112008007582947-pct00004
I. 인산 에스테르 우레이도 이량체의 제조
특정 실시태양에서, 본 발명의 방법은 하기 단계를 포함한다:
(a) 하기 화학식 1의 화합물을 포스겐과 적절한 조건하에 반응시켜 하기 화학식 2의 우레이도 이량체를 생성시키는 단계;
Figure 112008007582947-pct00005
상기 식에서,
R1a는 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 시클로알케닐, 시클로알키닐, 헤테로알킬, 헤테로알케닐, 헤테로알키닐, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로알케닐, 헤테로시클로알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 포스파이트 산소 보호기 또는 포스페이트 산소 보호기이고;
R2a 및 R2b는 각각 독립적으로 수소 또는 적절한 질소 보호기이거나, R2a와 R2b가 함께 5- 또는 6원 헤테로시클릭 고리를 형성한다 (여기서, R2a 및 R2b는 동시에 수소가 아님).
Figure 112008007582947-pct00006
(b) 단계 (a)에서 생성된 화학식 2의 우레이도 이량체를 적절한 조건하에 탈보호하여, 하기 화학식 3의 부분적으로 탈보호된 이량체를 생성시키는 단계;
Figure 112008007582947-pct00007
(c) 단계 (b)에서 생성된 부분적으로 탈보호된 이량체를 적절한 시약과 적절한 조건하에 반응시켜, 하기 화학식 4의 보호된 이량체를 생성시키는 단계; 및
Figure 112008007582947-pct00008
(d) 단계 (c)에서 생성된 이량체를 1종 이상의 적절한 시약으로 적절한 조건하에 처리하여, 하기 화학식 5의 나트륨 염을 생성시키는 단계.
Figure 112008007582947-pct00009
특정 실시태양에서, 상기 화학식 1 내지 5의 화합물은 하기 입체화학을 갖는다:
Figure 112008007582947-pct00010
또 다른 실시태양에서, 단계 (c)에서 생성된 이량체를 1종 이상의 적절한 시약으로 적절한 조건하에 처리하는 단계에 의해 하기 구조를 갖는 화합물이 생성된다.
Figure 112008007582947-pct00011
그 다음, 상기 화합물을 정제시킴으로써, 하기 화학식의 상응하는 디-나트륨 염이 수득된다.
<화학식 5>
Figure 112008007582947-pct00012
상기 나타낸 것과 같은 특정 실시태양에서, 각 경우의 R1a는 독립적으로 수소, C1-C6 알킬기, C3-C6 알케닐기, C3-C6 알키닐기, 포스파이트 산소 보호기 또는 포스페이트 산소 보호기이다. 예시적인 특정 실시태양에서, 각각의 R1a는 알릴이다.
특정 실시태양에서, R2a 및 R2b는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, -C(=O)RX, -C(=O)ORX, -SRX, SO2RX이거나, R2a와 R2b가 함께 =CRxRy 구조를 갖는 잔기를 형성하고 (이때, R2a와 R2b가 동시에 수소는 아님), Rx 및 Ry는 각각 독립적으로 수 소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 시클로알케닐, 시클로알키닐, 헤테로알킬, 헤테로알케닐, 헤테로알키닐, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로알케닐, 헤테로시클로알키닐, 헤테로지방족, 헤테로알리시클릭, 아릴, 헤테로아릴, -C(=O)RA 또는 -ZRA (여기서, Z는 -O-, -S-, -NRB임)이고, 이때, 각 경우의 RA 및 RB는 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 시클로알케닐, 시클로알키닐, 헤테로알킬, 헤테로알케닐, 헤테로알키닐, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로알케닐, 헤테로시클로알키닐, 헤테로지방족, 헤테로알리시클릭, 아릴 또는 헤테로아릴 잔기이다. 예시적인 특정 실시태양에서, R2a는 수소이고, R2b는 -C(=O)ORX (여기서, Rx는 치환 또는 비치환된 저급 알킬임)이다. 다른 예시적인 특정 실시태양에서, R2a는 수소이고, R2b는 -C(=O)OtBu이다.
특정 실시태양에서, 단계 (a)에서의 반응 조건은 적절한 용매 중 포스겐을 포함한다. 예시적인 특정 실시태양에서, 용매는 CH2Cl2, 톨루엔 또는 이들의 조합물이다. 특정 실시태양, 단계 (a)에서의 반응 조건은 또한 약염기를 포함한다. 예시적인 특정 실시태양에서, 약염기는 수성 NaHCO3이다.
특정 실시태양에서, 단계 (b)에서 탈보호 반응 조건은 적절한 용매 중 강산을 포함한다. 예시적인 특정 실시태양에서, 용매는 CH2Cl2이다. 다른 예시적인 특정 실시태양에서, R2a는 수소이고, R2b는 -C(=O)OtBu이고, 강산은 TFA이다.
특정 실시태양에서, 단계 (c)의 시약은 3-옥소-테트라데칸산 유도체이다. 본 명세서에서 사용되는 것으로서, "카르복실산 유도체" (예를 들어, 3-옥소-테트라데칸산 또는 도데칸산 유도체)는 RC(=O)X 구조의 화합물을 지칭하며, 여기서, R은 카르복실 라디칼이고, X는 일차 아민과의 반응을 통해 아미드를 형성하기에 적절하거나, 일차 아민과의 반응을 통해 아미드를 형성하도록 화학적으로 변환될 수 있는 적절한 화학적 기이다. 특정 실시태양에서, X는 할로겐, 히드록실, -OR, -SH, -SR 또는 -C(할로)3이고, 여기서 R은 알킬 또는 아릴이다. 예시적인 특정 실시태양에서, 시약은 3-옥소-테트라데칸산이다. 특정 실시태양에서, 단계 (c)의 시약은 3-옥소-테트라데칸산이고, 탈보호된 이량체를 시약과 반응시키기 위한 반응 조건은 염기를 포함한다. 특정 실시태양에서, 염기는 1-히드록시벤조트리아졸이다. 특정 실시태양에서, 염기는 휴니그 (Hunig's) 염기이다. 특정 실시태양에서, 단계 (c)의 반응 조건은 카르복실산 활성화 시약, 예컨대, DCC를 포함한다. 특정 실시태양에서, 카르복실산 활성화 시약은 1-[3-(디메틸아미노)프로필]-3-에틸카르보디이미드이다. 특정 실시태양에서, 카르복실산 활성화 시약은 HBTU이다.
다른 특정 실시태양에서, 각 경우의 R1a는 알릴이고, 단계 (d)에서 반응 조건은 적절한 용매 중 Pd(PPh3)4를 포함한다. 예시적인 특정 실시태양에서, 단계 (d)에서 처리 조건은 추가로 트리페닐 포스핀 및 페닐실란을 포함한다. 예시적인 특정 실시태양에서, 용매는 THF이다.
또 다른 실시태양에서, 하기 구조를 갖는 화합물의 정제법은 크로마토그래피 분리 및 염기로의 처리를 포함한다.
Figure 112008007582947-pct00013
예시적인 특정 실시태양에서, 정제 방법은 (i) 이온 교환 크로마토그래피, (ii) C-4 크로마실 용출, 및 (iii) 수성 NaOAc로의 처리를 포함한다. 예시적인 특정 실시태양에서, 정제 방법은 (i) 바이오타지 (Biotage) KP-실리카 크로마토그래피, (ii) 바이오타지 (Biotage) KP HS-C18 크로마토그래피, 및 (iii) 수성 NaOAc를 사용한 처리를 포함한다.
II . 중간체 1의 제조 방법
예시적인 특정 실시태양에서, 하기 화학식 1의 화합물은,
<화학식 1>
Figure 112008007582947-pct00014
(상기 식에서, R1a는 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 시클로알케닐, 시클로알키닐, 헤테로알킬, 헤테로알케닐, 헤테로알키닐, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로알케닐, 헤테로시클로알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 또는 포스파이트 산 소 보호기 또는 포스페이트 산소 보호기이고;
R2a 및 R2b는 각각 독립적으로 수소 또는 적절한 질소 보호기이거나, R2a와 R2b가 함께 5- 또는 6원 헤테로시클릭 고리를 형성하며, 이때, R2a와 R2b가 동시에 수소는 아니다.)
하기 단계를 포함하는 방법에 의해 제조된다:
(a) 하기 화학식 6의 알코올을 하기 화학식 7의 적절하게 보호된 디올과 반응시켜, 하기 화학식 8의 알코올을 생성시키는 단계;
Figure 112008007582947-pct00015
Figure 112008007582947-pct00016
(상기 식에서, -OX1은 적절한 이탈기를 나타낸다.)
Figure 112008007582947-pct00017
(b) 화학식 8의 알코올을 적절한 도데칸산 유도체와 적절한 조건하에 반응시켜, 하기 화학식 9의 에스테르를 생성시키는 단계;
Figure 112008007582947-pct00018
(c) 화학식 9의 에스테르를 적절한 조건하에 탈보호하여, 하기 화학식 10의 히드록실 아민을 생성시키는 단계;
Figure 112008007582947-pct00019
(d) 화학식 10의 히드록실 아민을 적절한 조건하에서 부분적으로 탈보호하여, 하기 화학식 11의 알코올을 생성시키는 단계;
Figure 112008007582947-pct00020
(상기 식에서, R2a 및 R2b는 상기 정의한 바와 같다.)
(e) 화학식 11의 알코올을 적절한 조건하에 1종 이상의 적절한 시약으로 처리하여, 하기 화학식 12의 인산 에스테르를 생성시키는 단계; 및
Figure 112008007582947-pct00021
(상기 식에서, R1a는 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 시클로알케닐, 시클로알키닐, 헤테로알킬, 헤테로알케닐, 헤테로알키닐, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로알케닐, 헤테로시클로알키닐, 아릴 또는 헤테로아릴, 포스파이트 산소 보호기 또는 포스페이트 산소 보호기이고;
R3a 및 R3b는 각각 독립적으로 수소 또는 적절한 질소 보호기이거나, R3a와 R3b가 함께 5- 또는 6원 헤테로시클릭 고리를 형성하고, 이때, R3a와 R3b가 동시에 수소는 아니다.)
(f) 화학식 12의 화합물을 적절한 조건하에서 부분적으로 탈보호하여, 하기 화학식 1의 아민을 생성시키는 단계.
<화학식 1>
Figure 112008007582947-pct00022
특정 실시태양에서, 각 경우의 R1a는 독립적으로 수소, C1-C6 알킬기, C3-C6 알케닐기, C3-C6 알키닐기, 포스파이트 산소 보호기 또는 포스페이트 산소 보호기이다. 예시적인 특정 실시태양에서, 각 경우의 R1a는 알릴이다.
특정 실시태양에서, R2a 및 R2b는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, -C(=O)RX, -C(=O)ORX -SRX, SO2RX 이거나, R2a와 R2b가 함께 =CRxRy 구조를 갖는 잔기를 형성하고 (이때, R2a와 R2b가 동시에 수소는 아님), Rx 및 Ry는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 시클로알케닐, 시클로알키닐, 헤테로알킬, 헤테로알케닐, 헤테로알키닐, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로알케닐, 헤테로시클로알키닐, 헤테로지방족, 헤테로알리시클릭, 아릴, 헤테로아릴, -C(=O)RA 또는 -ZRA (여기서, Z는 -O-, -S-, -NRB임)이고, 각 경우의 RA 및 RB는 독립적으로 수소, 또는 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 시클로알케닐, 시클로알키닐, 헤테로알킬, 헤테로알케닐, 헤테로알키닐, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로알케닐, 헤테로시클로알키닐, 헤테로지방족, 헤테로알리시클릭, 아릴 또는 헤테로아릴 잔기이다. 예시적인 특정 실시태양에서, R2a는 수소이고, R2b는 -C(=O)ORX (여기서, Rx는 치환 또는 비치환된 저급 알킬이다)이다. 다른 예시적인 특정 실시태양에서, R2a는 수소이고, R2b는 -C(=O)OtBu이다.
예시적인 특정 실시태양에서, X1은 토실이다.
특정 실시태양에서, 단계 (b)의 도데칸산 유도체는 도데칸산이다. 특정 실시태양에서, 단계 (b)의 시약은 도데칸산이고, 화학식 8의 알코올을 반응시키기 위한 반응 조건은 염기를 포함한다. 특정 실시태양에서, 염기는 4-디메틸아미노피리딘 (DMAP)이다. 특정 실시태양에서, 단계 (b)의 반응 조건은 카르복실산 활성화 시약, 예컨대, DCC를 포함한다. 특정 실시태양에서, 카르복실산 활성화 시약은 1-[3-(디메틸아미노)프로필]-3-에틸카르보디이미드이다.
특정 실시태양에서, 단계 (c)의 탈보호 반응 조건은 촉매적 가수소분해 및 적절한 용매를 포함한다. 예시적인 특정 실시태양에서, 단계 (c)의 탈보호 반응 조건은 H2 및 Pd/C를 포함한다. 예시적인 특정 실시태양에서, 용매는 이소프로필알코올 (IPA)이다.
다른 예시적인 특정 실시태양에서, R2a는 수소이고, R2b는 -C(=O)OtBU이며, 단계 (d)의 반응 조건은 디-tert-부틸디카르보네이트 및 적절한 용매를 포함한다. 특정 실시태양에서, 용매는 알코올이다. 예시적인 특정 실시태양에서, 용매는 이소프로필알코올 (IPA)이다.
특정 실시태양에서, 단계 (e)는 하기 단계를 포함한다.
(i) 하기 화학식 13의 포스포르아미드산 에스테르의 계내 (in situ) 생성 단계; 및
Figure 112008007582947-pct00023
(상기 식에서, R4a 및 R4b는 독립적으로 저급 알킬이다.)
(ii) 하기 화학식 14의 아인산 에스테르의 계내 생성 단계.
Figure 112008007582947-pct00024
(상기 식에서, R1a, R2a, R2b, R3a 및 R3b는 상기 정의한 바와 같다.)
다른 특정 실시태양에서, 처리 단계 (e)는 포스포릴화제를 포함하며, 화학식 13의 포스포르아미드산 에스테르를 계내 생성시킨다. 예시적인 특정 실시태양에서, 포스포릴화제는 디알킬 아민 존재하의 알릴 테트라이소프로필포스포로디아미다이트이다. 다른 특정 실시태양에서, 처리 단계 (e)는 피리디늄 트리플루오로아세테이트를 포함한다. 예시적인 특정 실시태양에서, 디알킬 아민은 디이소프로필아민이고, 화학식 13의 포스포르아미드산 에스테르는 하기 화학식 13a의 구조를 갖는다:
Figure 112008007582947-pct00025
특정 실시태양에서, 처리 단계 (e)는 화학식 13의 포스포르아미드산 에스테르의 계내 생성 후, 화학식 15-1의 보호된 에탄올아민과 반응시키는 단계를 포함한다.
<화학식 15-1>
Figure 112011040439400-pct00026
상기 식에서, R3a 및 R3b는 각각 독립적으로 수소 또는 적절한 질소 보호기이거나, R3a와 R3b가 함께 5- 또는 6-원 헤테로시클릭 고리를 형성한다 (이때, R3a와 R3b가 동시에 수소는 아님). 예시적인 특정 실시태양에서, R3a 및 R3b는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, -C(=O)RX, -C(=O)ORX, -SRX, SO2RX이거나, R3a와 R3b가 함께 =CRxRy 구조를 갖는 잔기를 형성하고 (이때, R3a와 R3b가 동시에 수소는 아님), Rx 및 Ry는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 시클로알케닐, 시클로알키닐, 헤테로알킬, 헤테로알케닐, 헤테로알키닐, 헤테로시클로알킬, 헤테로 시클로알케닐, 헤테로시클로알키닐, 헤테로지방족, 헤테로알리시클릭, 아릴, 헤테로아릴, -C(=O)RA 또는 -ZRA (여기서 Z는 -O-, -S-, -NRB임)이고, 각 경우의 RA 및 RB는 독립적으로 수소, 또는 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 시클로알케닐, 시클로알키닐, 헤테로알킬, 헤테로알케닐, 헤테로알키닐, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로알케닐, 헤테로시클로알키닐, 헤테로지방족, 헤테로알리시클릭, 아릴 또는 헤테로아릴 잔기이다. 예시적인 특정 실시태양에서, R3a는 수소이고, R3b는 -C(=O)ORX (여기서, Rx는 아릴알킬임)이다. 다른 예시적인 특정 실시태양에서, R3a는 수소이고, R3b는 -C(=O)ORX (여기서, Rx는 9-플루오레닐메틸 (즉, R3b는 Fmoc임))이다.
예시적인 특정 실시태양에서, 처리 단계 (e)는 화학식 13의 포스포르아미드산 에스테르와 화학식 15-1의 보호된 에탄올아민 (여기서, R3a는 수소이고, R3b는 Fmoc임)의 계내 반응을 포함하며, 반응 조건은 아세트산 및 피리디늄 트리플루오로아세테이트를 포함한다.
특정 실시태양에서, 처리 단계 (e)는 화학식 14의 아인산 에스테르의 계내 생성 후, 적절한 산화제 존재하에 산화시켜, 화학식 12의 인산 에스테르를 생성시키는 단계를 포함한다. 예시적인 특정 실시태양에서, 산화제는 H2O2이다.
Figure 112008007582947-pct00027
특정 실시태양에서, R2a는 수소이고, R2b는 -C(=O)OtBu이며, 단계 (f)의 반응조건은 디알킬아민 및 적절한 용매를 포함한다. 예시적인 특정 실시태양에서, 디알킬아민은 디메틸 아민이다. 다른 예시적인 특정 실시태양에서, 용매는 THF이다.
특정 실시태양에서, 화학식 6 내지 13, 13a 및 14의 중간체는 하기 입체화학을 갖는다:
Figure 112008007582947-pct00028
합성 개요
전문가 (practitioner)는 E6020 및 그의 입체이성질체의 합성에 유용한 합성 전략, 보호기 및 기타 물질, 및 방법에 대한 지침을 위한, 본 명세서에 포함된 정보와 함께 이용할 인지질 화학의 확립된 문헌을 갖는다.
다양한 특허 문헌 및 본 명세서에 인용된 기타 참고 문헌은 특정한 단당류 출발 물질을 제조하는 것에 대한 유용한 배경 정보를 제공한다. 특히, 특정 시약 및 출발 물질이 6,551,600; 6,290,973; 및 6,521,776 (상기 문헌의 내용이 전체로 서 본 명세서에 포함됨)에 기재되어 있다.
또한, 전문가는 E6020 및 그의 입체이성질체의 합성에 유용한 대표적인 중간체에 관한 문헌에서 제공되는 구체적인 지침 및 실시예에 정통하다.
E6020의 합성에서 상기 검토된 화합물은 헵틸 및 운데실 측쇄를 갖는다. 이들 측쇄는 상이한 알킬 쇄 길이를 갖는 E6020 유사체의 합성에 적절한 시약을 사용함으로써, 다양한 길이를 가질 수 있다. 따라서, 본 발명은 하기 화학식 15의 화합물에 관한 것이다.
<화학식 15>
Figure 112008007582947-pct00029
화학식 15에서, A는 -(CH2)X-O- 또는 공유결합이고, n은 0 또는 1이고, x는 1 내지 6이다. A가 -(CH2)X-O-인 경우, 메틸렌기는 NR3aR3b 중 질소 원자에 결합하고, 산소는 포스파이트 또는 포스페이트 기 중 인 원자에 결합한다. 바람직하게는 x는 2 내지 4, 가장 바람직하게는 2이다. n이 0인 경우, 화학식 15의 화합물은 포스파이트 기를 함유한다. n이 1인 경우, 화학식 15의 화합물은 포스페이트 기를 함유한다.
R1a는 수소, C1-C6 알킬기, C3-C6 알케닐기, C3-C6 알키닐기, 포스파이트 산소 보호기 또는 포스페이트 산소 보호기이다. 이러한 보호기는 당업계에 공지되어 있으며, 대표적인 목록이 상기되어 있다. 특히 바람직한 R1a는 알릴기이다.
화학식 15에서, R2a와 R2b 중 하나는 H이고, 다른 하나는 일가의 질소 보호기이거나, R2a와 R2b가 함께 이가의 질소 보호기이다. A가 -(CH2)-O-인 경우, R3a 및 R3b에 대하여는, R3a와 R3b 중 하나가 H이고, 다른 하나는 일가의 질소 보호기이거나, R3a와 R3b가 함께 이가의 질소 보호기이다. A가 공유결합인 경우, R3a 및 R3b는 C1-C6 알킬로부터 독립적으로 선택되거나, R3a 및 R3b가 함께 -(CH2)4-, -(CH2)5- 또는 -(CH2)2O(CH2)2-이다. 바람직하게는, A가 공유결합인 경우, R3a 및 R3b는 C2-C6 알킬기, 예컨대, 에틸, 프로필 또는 부틸이고, 보다 바람직하게는 이소프로필기이다.
화학식 15의 화합물에서, R2a 및 R2b에 결합된 질소에 대한 보호기는 산성, 염기성, 산화, 및 환원 조건으로부터 선택되는 제1 조건하에 제거될 수 있고, R3a 및 R3b에 결합된 질소에 대한 보호기는 제1 조건과 상이한 나머지 3개의 조건으로부터 선택되는 제2 조건하에 제거될 수 있다. 바람직한 질소 보호기는 Boc, Fmoc, TROC, TMS-에틸카르보닐, 시아노에틸카르보닐, 알릴옥시카르보닐, (C6H5)2C=, 테트라클로로프탈아미드 또는 아지드로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일반적으로, 질소 보호기를 제거하는데 사용될 수 있는 조건으로는, 산성, 염기성, 산화 또는 환원 조건의 4 종류가 있다. 바람직한 실시태양에서, 하나의 질소 보호기가 이들 4 종류의 조건 중 하나의 조건하에 선택적으로 제거되고, 나머지 질소 보호기는 남은 3 종류의 조건 중 하나의 조건하에 선택적으로 제거된다. 하나의 실시태양에서, 질소 보호기는 각각 약산성 또는 약염기성 조건하에 제거된다.
R2a 및 R2b에 결합된 질소는 Boc 기로 보호될 수 있고, R3a 및 R3b에 결합된 질소는 Fmoc 기로 보호될 수 있거나, 그 반대일 수 있다. Boc 기는 산성 조건 (실온에서, 염화메틸렌과 같은 용매 중 메탄술폰산, 트리플루오로아세트산, 또는 포름산) 하에 선택적으로 제거될 수 있다. 반면에, Fmoc 기는 실온에서, THF용매 중 피페리딘 또는 디메틸아민과 같은 이차 아민을 사용하여 선택적으로 제거될 수 있다.
다르게는, R2a 및 R2b에 결합된 질소는 Troc 기로 보호될 수 있고, R3a 및 R3b에 결합된 질소는 Fmoc 기로 보호될 수 있거나, 그 반대일 수 있다. Fmoc 기는 상기한 조건하에 선택적으로 제거될 수 있고, Troc 기는 THF 중 아연, 및 물과 같은 환원적 조건하에 분리된다.
다른 실시예에서, R2a 및 R2b에 결합된 질소는 Troc 기로 보호될 수 있고, R3a 및 R3b에 결합된 질소는 Boc 기로 보호될 수 있거나, 그 반대일 수 있다. Troc 기는 THF 중 아연, 및 물과 같은 환원적 조건하에 분리될 수 있고, Boc 기는 상기한 조건과 같은 조건하에서 선택적으로 제거될 수 있다.
R4는 C5-C12 알킬기 또는 C5-C12 알케닐기이다. R4는 C5-C12 알킬기이고, 바람직하게는 C5-C9 알킬기, 보다 바람직하게는 C7 알킬기, 가장 바람직하게는 n-헵틸 기이다.
R5는 C5-C15 알킬기 또는 C5-C15 알케닐기이다. R5는 C5-C15 알킬기, 바람직하게는 C7 내지 C13, 보다 바람직하게는 C11 알킬기, 가장 바람직하게는, n-운데실이다.
화학식 15의 화합물의 염은 합성 과정에서 생성될 수 있고, 또는 화학식 I의 화합물을 산 또는 염기와 반응시켜 제조될 수도 있다. 산 부가염이 바람직하다.
화학식 15의 바람직한 화합물로는, (a) A가 -(CH2)2-O-이고, n이 0이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물; (b) A가 -(CH2)2-O-이고, n이 1이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물; (c) A가 공유결합이고, n이 0이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물; 및 (d) A가 공유결합이고, n이 0이고, R3a 및 R3b가 각각 이소프로필이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물이 있다.
이러한 중간체는 하기 화학식 16의 E6020 전구체 및 유사체를 제조하는데 유용하다.
Figure 112008007582947-pct00030
화학식 16에서, 화학식 1에 대해 상기한 바와 같이, n은 0 또는 1이다. R1a는 수소, C1-C6 알킬기, C2-C6 알케닐기, C2-C6 알키닐기, 포스파이트 산소 보호기 또는 포스페이트 산소 보호기이다. R1a에 대한 바람직한 치환기는 상기한 것과 동일하다. 예를 들어, R2a 및 R2c 중 하나는 H이고, 다른 하나는 일가의 질소 보호기 또는 -C(O)CH2C(O)R6이거나, R2a와 R2c가 함께 이가의 질소 보호기이다. R2a 및 R2c에 대한 바람직한 기는, R2a 또는 R2c가 바람직하게는 -C(O)CH2C(O)R6일 수도 있다는 점 을 제외하고는, R2a 및 R2b에 대하여 상기한 것과 동일하다. R4는 화학식 15에서와 같이 동일한 바람직한 기를 포함하는 C5-C12 알킬기 또는 C5-C12 알케닐기이다. R5 및 R6는 독립적으로, R5에 대하여 상기한 것과 동일한 바람직한 치환기를 포함하는 C5-C15 알킬기 또는 C5-C15 알케닐기이다.
화학식 16의 바람직한 화합물로는, (a) n이 1이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물; (b) n이 1이고, R1a가 알릴이고, R2a가 수소이고, R2c가 Boc이고, R4가 C7 알킬이고, R7이 C11 알킬인 화합물; (c) n이 1이고, R2a가 수소이고, R2c가 -C(O)CH2C(O)R6이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬이고, R6가 C11 알킬인 화합물; (d) n이 0이고, R1a가 알릴이고, R2a가 수소이고, R2c가 Boc이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물; (e) n이 1이고, R1a가 알릴이고, R2a가 수소이고, R2c가 수소이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물; 및 (f) n이 0이고, R1a가 알릴이고, R2a가 수소이고, R2c가 -C(O)CH2C(O)R6이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬이 고, R6가 C11 알킬인 화합물이 있다.
화학식 16의 화합물의 염은 합성 과정에서 생성될 수 있고, 또는 화학식 I의 화합물을 산 또는 염기와 반응시켜 제조될 수도 있다. 산 부가염이 바람직하다.
본 발명은 또한 화학식 17의 화합물을 포함한다.
Figure 112008007582947-pct00031
화학식 17에서, R은 수소 또는 C1-C6 알킬기이고, 바람직하게는 수소이다. 화학식 17에서 R2a 및 R2b 중 하나는 H이고, 다른 하나는 일가의 질소 보호기이거나, R2a 및 R2b가 함께 이가의 질소 보호기이다. R2a 및 R2b에 대한 바람직한 기는 화학식 15에 대하여 상기 검토한 것과 같다. R4는 C5-C12 알킬기 또는 C5-C12 알케닐기 이고, R5는 C5-C15 알킬기 또는 C5-C15 알케닐기이다. R4 및 R5에 대한 바람직한 기 또한 화학식 15에 대하여 상기 검토한 것과 같다.
화학식 17의 바람직한 화합물로는 (a) R이 수소이고, R2a 및 R2b가 수소이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물; 및 (b) R이 수소이고, R2a가 수소이고, R2b가 질소 보호기이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물을 들 수 있다.
본 발명은 또한 화학식 18의 화합물을 포함한다.
Figure 112008007582947-pct00032
화학식 18에서, R4는 C5-C12 알킬기 또는 C5-C12 알케닐기이고, R5는 C5-C15 알킬기 또는 C5-C15 알케닐기이다. R6 및 R7에 대한 바람직한 기는 상기 검토한 바와 같다. 화학식 18의 바람직한 화합물은 ER-819059이다.
본 발명을 실시하기 위한 합성 방법의 실시예는 반응식 1 내지 5, 및 본 명세서의 실시예에 상술된 바와 같이, 이하에 제공된다. 본 명세서에 기재된 방법은 본 명세서에 개시된 것과 같은 각각의 화합물 및 그들의 균등물에 적용될 수 있다는 것이 이해될 것이다. 또한, 시약 및 출발 물질이 당업자에게 공지되어 있다. 하기 반응식이 특정한 예시적인 중간체 및 보호기를 개시하고 있을지라도, 대체가 능한 출발물질, 보호기 및/또는 시약을 사용하여 본 발명의 범위안에 속하는 것으로 간주되는 다른 중간체를 수득할 수 있다는 것이 이해될 것이다.
Figure 112008007582947-pct00033
본 발명의 예시적인 특정 실시태양에서, 에스테르 ER-819059는 디올 ER-028694를 적절한 기로 선택적으로 관능화시켜, 일차 히드록실을 이탈기로 변환시키는 3 단계를 걸쳐 제조된다. 예를 들어, 디올 ER-028694의 일차 히드록실을 토실화하여, 상응하는 부가물 ER-028695를 얻는다. 그 다음, 토실 에스테르 ER-028695를 염기, 예컨대, NaHMDS의 존재하에, 알코올 ER-807277과 커플링시켜 상응하는 에테르 ER-806158을 얻는다. 알코올 ER-806158을 라우르산으로 에스테르화한 후, 페닐 디히드로옥사졸 기를 가수소분해하여 히드록실아민 ER-819120을 얻는다. 아미 노기를 Boc기로 보호하여, ER-819302를 얻는다.
Figure 112008007582947-pct00034
Figure 112008007582947-pct00035
Figure 112008007582947-pct00036
그 다음, Boc-보호된 ER-819302를 반응식 2 및 3에 나타낸 바와 같이 6 단계에 걸쳐 E6020로 전환시킬 수 있다. 예를 들어, ER-819302를 비스(알릴옥시)디이소프로필 아미노포스핀 및 디이소프로필아민의 존재하에 인산화한 후, FmocNH (CH2)2OH와 계내 반응시키고, 산화 (예를 들어, 과산화수소)시켜, 인산화된 중간체 ER-819344를 생성시킨다. 이를 적절한 조건 (예를 들어, Me2NH) 하에 탈보호시켜, 탈보호된 중간체 ER-819385를 생성시킨다. ER-819385를 포스겐과 적절한 조건 (예를 들어, 수성 NaHCO3의 존재하에 톨루엔 중 20% 포스겐) 반응시켜, 디인산 에스테 르 ER-819409를 생성시킨다. ER-819409 상의 Boc-보호된 이차 아민을 적절한 산, 예컨대, TFA를 사용하여 탈보호시켜, 디아민 중간체 ER-807284를 얻는다. 유리 아민을 커플링 시약, 예컨대, EDC 및 DMAP의 존재하에, 3-옥소-1-테트라데칸산을 사용하여 아미드화하여, 최종전 화합물 ER-807285를 얻는다. 알릴-포스페이트 에스테르를 과량의 트리페닐포스핀 및 양성자 공급원 (페닐실란)의 존재하에, 팔라듐(0) 시약, 예컨대, 팔라듐(0) 테트라키스트리페닐포스핀을 사용하여 탈보호시켜, 원하는 조 생성물을 얻은 후, 이를 정제하여 (예를 들어, 적절한 이온 교환 크로마토그래피한 후, 수성 NaOAc로 처리), 원하는 화합물 E6020을 얻는다.
상기 반응식 1, 2 및 3에 기재된 각각의 반응은 상기한 각종 예시적인 중간체의 합성에 대해 기재한 것과 같은 시약 및 조건을 사용하여 실행될 수 있고, 또는 다른 이용가능한 시약, 보호기 또는 출발 물질을 사용하여 변형될 수도 있음이 이해될 것이다. 예를 들어, 다양한 우레아 생성 조건, 인산화 및 아민 보호/탈보호 조건이 당업계에 공지되어 있으며, 이는 본 발명의 방법에 사용될 수 있다 (참조: 일반적으로, 문헌[March, Advanced Orgarnic Chemistry, 5th ed., John Wiley & Sons, 2001; "Comprehensive Orgarnic Transformations, a guide to functional group preparations", Richard C. Larock, VCH publishers, 1999; "Protective group in Orgarnic Synthesis" Third Ed. Greene, T. W. and Wuts, P.G., Eds., John Wiley & Sons, New York: 1999], 상기 문헌의 내용이 전체로서 본 명세서에 포함됨).
요약하면, 본 발명은 종래에 보고된 방법보다 현저히 적은 단계를 통해 높은 수율로 E6020을 합성하는 방법을 제공한다. 본 방법은 표제 화합물을 효율이 높은 경로를 통해 높은 총괄 수율로 제공한다.
하기 대표적인 실시예는 본 발명을 설명하기 위한 것이지, 본 발명의 범위를 제한하려는 것이 아니며, 그렇게 해석되어서도 아니된다. 실제로, 하기 실시예를 비롯한 본 명세서의 전체 내용 및 본 명세서에 인용된 과학적 참고자료 및 특허문헌으로부터, 본 명세서에 기재되고 나타난 실시태양 이외에도, 본 발명의 다양한 변형 및 그의 많은 실시태양이 가능함이 당업자에게 명백해질 것이다. 또한, 인용된 문헌의 내용은 기술 수준을 설명하기 위해 본 명세서에 참고로서 포함된다는 것이 이해되어야 한다.
하기 실시예는 본 발명의 다양한 실시태양 및 균등물에서 본 발명의 실시에 적용될 수 있는 중요한 추가 정보, 실증, 및 지침을 포함한다.
본 발명의 화합물 및 그의 제조는, 이들 화합물이 제조되거나 사용된 일부의 방법들을 설명한 실시예에 의해 더 잘 이해될 수 있을 것이다. 그러나, 이들 실시예들은 본 발명을 제한하려는 것은 아님을 알 수 있을 것이다. 본 발명의 변형은 본 명세서에 기재되고, 본 명세서 이하에 청구된 것과 같은 본 발명의 범위 내에 있는 것으로 여겨진다.
본 발명의 화합물 및 그의 제조는, 이들 화합물이 제조되거나 사용된 일부의 방법들을 설명한 실시예에 의해 더 잘 이해될 수 있을 것이다. 그러나, 이들 실시 예들은 본 발명을 제한하려는 것은 아님을 알 수 있을 것이다. 현재 공지되었거나 더 발전된, 본 발명의 변형은, 본 명세서에 기재되고, 본 명세서 이하에 청구된 것과 같은 본 발명의 범위 내에 있는 것으로 여겨진다.
면역 아쥬반트 E6020의 제조를 예시하는데 이용되는 하기 실시예는, 본 발명의 화합물 및 방법을 사용한 면역 아쥬반트 화합물의 합성 전구체의 합성을 포함한다.
Figure 112008007582947-pct00037
당업자라면, 비제한적인 예로서, 미국특허 제6,551,600호, 제6,290,973호 및 제6,521,776호 (이들 문헌의 내용은 전체로서 본 명세서에 포함됨)에 기재된 E6020의 유사물을 포함하는 본 발명의 화합물로부터 본 발명의 방법에 의해 E6020의 많은 유사물이 제조된다는 것을 인식할 것이다. 따라서, 첨부된 청구범위에 의해 정의되는 본 발명의 범위가 이하에 실시예로서 기재된 합성 방법으로 제한되지 않는다는 것이 이해될 것이다.
일반적인 반응 방법
구체적으로 언급되지 않는 한, 반응 혼합물은 자기적으로 구동되는 교반 막 대를 사용하여 교반한다. 불활성 기체는 건조한 아르곤 혹은 건조한 질소 중 하나를 말한다. 반응은 반응 혼합물의 적절하게 후처리된 샘플의 박층 크로마토그래피, 양성자 핵 자기 공명 또는 고압 액체 크로마토그래피 (HPLC)에 의해 모니터링 된다.
아래 목록은 본 명세서에서 언급한 일부 통상적인 유기시약에 대해 사용되는 약자이다:
ATP: 알릴 테트라이소프로필포스포로디아미다이트
DMF: 디메틸 포름아미드
EA: 에틸 아세테이트
EDC: 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드
HBTU: O-벤조트리아졸-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄-헥사플루오로-포스페이트
HOBT: 1-히드록시벤조트리아졸
IPA: 이소-프로필 알코올
MTBE: 메틸 tert-부틸 에테르
NaHMDS: 나트륨 헥사메틸디실라잔
Pyr.TFA: 피리디늄 트리플루오로아세테이트
TBME: Tert-부틸 메틸 에테르
TFA: 트리플루오로 아세트산
THF: 테트라히드로푸란
TsCl: 토실 클로라이드
실시예 1: ER -028695의 제조
Figure 112008007582947-pct00038
제조 1: 건조한 22-L 반응기에 든 건조 테트라히드로푸란 (THF) (2408 g) 중 p-톨루엔술포닐 클로라이드 (1704 g, 8.938 mol)의 교반 용액에, 건조 THF (1041 g) 중 ER-028694 (952 g, 5.46 mol)를 질소 분위기하에 0℃에서 9분에 걸쳐 가하였다. 잔류 ER-028694는 무수 THF (364 g)를 사용하여 반응기 내로 헹구어냈다. 트리에틸아민 (1.35 Kg, 13.4 mol)을 19분에 걸쳐 적가하였으며, 그동안 투명한 황색 반응액의 용액이 혼탁해졌다. 잔류 트리에틸아민은 건조 THF (30 g)를 사용하여 반응 혼합물 내로 헹구어냈다.
0℃에서 추가로 15시간 17분 동안 교반한 후, 반응물에 1.0 M의 염산 (2120 g)을 36분에 걸쳐 서서히 가하여, 0.1 ℃에서 5.9℃로의 온도 변화를 수반하면서 반응을 켄칭하였다. 염수 (785 mL)를 3분에 걸쳐 가하고, 추가로 5분 동안 계속하여 교반한 후, 반응 혼합물 (-22 L)을 THF (0.57 Kg)이 든 50-L 후처리 (work-up) 반응기에 옮겼다. 유기층을 수성층 (pH=6)과 분리하였다. 유기층을 1.0 M 염산 (2120 g)과 염수 (785 mL)의 혼합물로 세척하였다. 그 다음, 유기층을 물 (2120 mL)과 염수 (980 mL)의 혼합물로 세척하였다.
유기층을 깨끗한 22-L 반응기로 옮긴 후, 질소 분위기 하에 THF (1.6 Kg)를 가하였다. 용액을 교반하면서 0℃ (빙수욕)로 냉각시킨 다음, 10% NaOH 수용액 (2.04 Kg)을 -0.4℃에서 2.3℃로의 온도 변화를 수반하면서 7분에 걸쳐 가하였다. 28% NH4OH 수용액 (935 g)을 1.9℃에서 12.5℃로의 온도 변화를 수반하면서 6분에 걸쳐 가한 후, 혼합물을 25분 동안 교반한 다음, 헵탄 (1.1 Kg)을 가하였다. 반응 혼합물을 헵탄 (0.532 Kg)이 든 50-L 후처리 반응기에 옮기고, 잘 혼합하고, 정치시킨 후, 수성층 (pH 14)을 폐기하였다. 유기층을 10% 수성 NaOH (2.04 Kg), 이어서 물 (2.04 Kg)로 세척하였다. 유기층 용매를 증발시키고 (하우스 진공), 잔류물을 헵탄 (1.1 Kg)으로 공비혼합하여, 투명한 오렌지 색 오일을 수득하였다. 단리된 물질 (1.839 Kg)을 추가의 정제없이 다음 단계에 사용하였다. ER-028695에 대한 분석 데이터:
Figure 112008007582947-pct00039
제조 2: 무수 THF (250 mL)를 p-톨루엔술포닐 클로라이드 (161.1 g, 0.845 mol)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 가하였다. 그 다음, ER-028694 (90.0 g, 0.516 mol), 이어서 트리에틸아민 (176 mL, 1.26 mol)을 22℃의 반응기 온도에서 가하여, 투명한 황색 용액을 수득하였다. 수분 후, 용액이 혼탁해졌다. 15시간 33분 동안 교반한 후, 100-μL 샘플을 취하였다. GC 분석 결과, 100% 전환되었음이 확인되었다. 다른 100-μL 샘플을 취하고, 2.0 mL 공정 용수 및 3.0 mL 헵탄으로 추출하였다. 유기층을 공정 용수 (2.0 mL)로 2회 세척한 후, 염수 (2.0 mL)로 세척하였다. 생성된 유기층을 감압 하에 증발시켜 무색 오일을 수득하였다. 무색 오일을 1H-NMR 분석한 결과, 1.00/91.93/7.07 비율의 ER-028694/ER-028695/ER-817864인 것으로 나타났다.
반응이 완료되었음을 확인한 후, 1.O M의 염산용액을 21.4℃에서 26.8℃로의 온도 변화를 수반하면서 가한 후, 염수 (74.2 mL)를 가하였다. 유기층 (~0.6 L)을 수성층 (~0.4 L, pH=10)과 분리하고, 1.0 M 염산 (201 mL)과 염수 (74.2 mL)의 혼합물, 이어서, 공정 용수 (201 mL)와 염수 (92.7 mL)의 혼합물로 세척하였다. 그 다음, 유기층을 깨끗한 반응기로 옮긴 후, 질소 분위기 하에서 THF (200 mL)를 가하였다. 용액을 교반하면서 10℃로 냉각시킨 후, 25℃ 미만의 반응 온도로 유지하면서 (온도가 15.3℃에서 21.3℃로 변화함), 10% 수성 NaOH 용액 (193 g)을 2분에 걸쳐 가하였다. 이어서, 반응 온도를 여전히 25℃ 미만으로 유지하면서 (온도가 15.5℃에서 22.7℃로 변화함), NH4OH 수용액 (88.4 g)을 5분에 걸쳐 가하였다 (지연된 발열이 관찰됨). 반응 혼합물을 15분 동안 교반하면서 20℃로 가온하였다. 반응 혼합물을 헵탄 (200 mL)을 사용하여 pH 14인 수성층으로부터 분리하였다. 유기층을 10% 수성 NaOH (193 g), 이어서, 공정 용수 (193 mL)로 세척하였다. 용매를 증발시키고 (29 내지 32℃, 20 torr에서), 잔류물을 헵탄으로 (200 mL, 29 내지 32℃, 4.4 torr에서) 처리하여, 투명한 오렌지색 오일을 수득하였다. 단리시킨 물질을 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다 (100% 수율로 추정됨). 무색 오일을 1H-NMR 분석한 결과, 0.9/90.9/8.2 비율의 ER-028694/ER-028695/ER-817864임을 알 수 있었다. KF는 13.0 ppm 이었다.
실시예 2: ER -806158의 제조
Figure 112008007582947-pct00040
제조 1: 건조한 22-L 반응기에 든 건조 THF (10.580 Kg) 중 ER-807277 (1.177 Kg, 6.642 mol)의 교반 용액에, THF (3.300 Kg) 중 1.0 M 나트륨 비스(트리메틸디실릴)아미드를 질소 분위기하에 -1℃에서 반응 온도를 -0.8 내지 4.1℃로 유지하면서 33분에 걸쳐 가하였다. 용액을 -0.1℃에서 추가로 17분 동안 교반한 후, 건조 THF (0.968 Kg) 중 조 ER-028695 (1.089 Kg, 3.316 mol)를 반응액에 -0.1 내지 3.9℃의 온도를 유지하면서 5분에 걸쳐 가하였다. 잔류 ER-028695는 건조 THF (0.253 Kg)를 사용하여 반응기 내로 헹구어냈다. 최종 반응 혼합물을 실온으로 가온하였으며, 그동안 오렌지색의 투명한 반응액이 현탁액으로 되었다 (약 19℃에서). 실온에서 3시간 31분 동안 교반한 후, 반응이 완료된 혼합물을 0.1℃로 냉각시키고, 50-L 후처리 반응기에 든 냉각 NH4Cl (4.7 Kg) 포화 수용액 및 염수 (1.65 L)의 혼합물에 부었다 (발열반응, Tmax=16.2℃). 잔류 반응 혼합물은 물 (2 x 1.0 L), 이어서, 톨루엔 (3.769 Kg)을 사용하여 후처리 반응기 내로 헹구어냈다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 5분 동안 정치시키고, 생성된 하부 수성층 (pH=9)을 폐기하였다. 유기층의 용매를 30 내지 34℃에서 하우스 진공하에 부분적으로 증발시켰다. 용기를 최소량의 THF (0.4 Kg)로 헹구고, 헹구어낸 것을 생 성물과 합하였다. 톨루엔 (0.4 Kg)을 가열하면서 가하여 (욕 온도 = 30 내지 34℃), 옮기기 용이하도록 고체를 슬러리 상태로 분쇄하였다.
조 슬러리를 깨끗하고 건조한 22-L 반응기로 질소 하에 옮긴 후, ~19℃에서 고속 교반하면서, 헵탄 (7.503 Kg)을 가하였다. 추가로 6시간 22분 동안 교반한 후, 혼합물을 감압 여과 (피셔 (Fisher) P5 여과지, 카탈로그 #09- 801G)하고, 케이크 (~5.4 L)를 헵탄으로 3회 (각각, 0.99 Kg, 1.02 Kg 및 1.01 Kg) 세척하였다. 합한 여액 및 세척액을 하우스 진공 하에 30 내지 34℃에서 증발시켜, 혼탁한 오렌지색의 오일 (1.207 Kg)을 수득하였다. 여과 깔대기 내의 백색의 고체 케이크는 ER-807277이었다.
조 생성물 (1.206 Kg)을 메틸 tert-부틸 에테르 (MTBE)/헵탄=1/4 (700 mL) 중에 용해시키고, 매질 프릿화된 여과 깔대기를 통해 여과시킨 후, 여과 케이크를 MTBE/헵탄=1/4 (300 mL)으로 헹구어, 투명한 황색 여액을 수득하였다. 조 ER-806158 용액을 미리 조정된 실리카겔 카트리지 [MTBE (10.46 Kg), 이어서, MTBE/헵탄=1/4 (3.140 Kg/11.606 Kg)로 조정된 바이오타지 (Biotage) 150L (5.62 Kg, 공극 부피=7.07 L) 카트리지] 상에 유속을 ~840 mL/분 (~25 psi 용매 압력)으로 조정하여 로딩하였다. 로딩한 후, 카트리지를 MTBE/헵탄=1/4 (0.148 Kg/0.547 Kg)로 헹구어낸 후, MTBE/헵탄=1/4 (2.09 Kg/7.740 Kg), MTBE/헵탄=2/3 (2.094 Kg/2.904 Kg), MTBE/헵탄=7/3 (3.661 Kg/1.448 Kg), 마지막으로 MTBE (40.298 Kg)를 사용하여 용출시켰다. 크로마토그래피 전 과정 동안에 대략 350-mL 분획이 회수되었다. 합한, 생성물 함유 분획을 농축시키고, 헵탄 (0.540 Kg)을 사용하여 공비혼합하여 건조시킨 후, 하우스 진공하에 33℃에서 1시간 13분 동안 건조시켜 투명한 오렌지색의 오일 (0.793 Kg, 71 %)을 98.32 면적% 순도로 수득하였다.
ER -806158의 결정화
정제된 ER-806158 2.376 Kg을 헵탄 (8.121 Kg) 중에 용해시키고, 질소 분위기 하에 깨끗하고 건조한 22-L 반응기에 옮긴 후, 교반하였다. 투명한 황색 용액을 매 0.5 시간당 ~4℃로 단계적으로 낮춰 -15℃로 냉각시켰다. 생성된 백색 현탁액을 -15℃에서 추가로 1시간 동안 교반한 후, 냉각한 여과 깔대기 및 여과지 상에서, 여과 케이크 상에 질소 블랭킷을 두면서 진공을 걸어 여과하였다. 상기한 바와 같이 여과된 원하는 고체를 냉각 헵탄 (-12.3℃, 1.387 Kg)으로 세척하고, 고체의 상부에 질소 블랭킷을 가하면서 여과 케이크를 14시간 13분 (T =14.9 내지 18.8℃) 동안 진공하에 두었다. 반응기에서 잔류 ER-806158을 용해시키는 용매, 세척액 및 모액을 재사용하기 위해 합하였다.
수득량: 2.068 Kg, 87.0% 수율
ER -806158에 대한 분석 데이터
Figure 112008007582947-pct00041
제조 2: 반응에 사용된 ER-028695의 양 (mol)을 실시예 1, 방법 2에 사용된 출발 물질 ER-028694의 양을 기준으로 하여 계산한 결과, 100% 수율로 추정되었다. ER-807277 (178.3 g, 1006 mmol)을 질소 분위기 하에서 깨끗하고 건조한 5-L 반응기에 가하였다. 건조 THF (1.8 L)를 교반하면서 가하여, 투명한 황색 용액을 얻고, 이 용액을 0℃로 냉각시켰다. NaHMDS/THF (1.0 M, 553 mL)를 20분에 걸쳐 가하고, 반응 온도를 5℃ (3.8 내지 1.3℃) 이하로 유지시켰다. 용액을 10분 동안 교반한 다음, -5℃로 냉각시켰다. 조 ER-028694 (165 g로 계산됨, 503 mmol)를 건조 THF (165 mL, 1 vol.)와 함께 질소 분위기 하에 교반하면서, 건조하고 깨끗한 플라스크에 옮겨, 투명한 오렌지색 용액을 수득하였다. 그 다음, ER-028695/THF 용액을 반응액에 -3.2℃에서 0.4℃로의 온도 변화를 수반하면서 6분에 걸쳐 가하였다. 잔류 ER-028695를 건조 THF (40 mL)를 사용하여 반응기내로 헹구어 내고, 반응 혼합물을 가온 수조 (23℃) 내에서 실온으로 가온하였다. 워밍업 공정 중에, 투명한 오렌지색 반응액이 현탁액으로 되었다. 18.7 내지 21.3℃에서 1.75시간 동안 교반한 후에, 샘플 (10 μL)을 취하고, 1.0 mL MeCN에 가한 후, 0.2 μm 시린지 필터를 통해 여과하여, 무색 투명한 여액을 수득하였다. HPLC 분석 (TM-779) 결과, 98.2% 전환된 것으로 확인되었다. 실온에서 총 3시간 교반한 후, HPLC 분석한 결과 99.5% 전환으로 나타났다. NH4Cl (0.66 L) 포화 수용액을 한번에 가하고 (발열성, 18.9 내지 26.0℃), 이어서, 공정 용수 (0.30 L), 염수 (0.25 L) 및 톨루엔을 가하였다. 첨가 후, 5분 동안 교반을 계속하였다. 상부 유기층 (~2.6 L)의 용매를 29 내지 32℃에서 감압 하에 부분적으로 증발시켜, 슬러리 (481.7 g)를 얻고, 하부 수성층 (~1.4 L, pH=11)은 폐기하였다.
슬러리를 질소 하에 건조하고 깨끗한 5-L 반응기로 옮겼다. 헵탄 (1.65 L)을 고속 교반하면서, 실온에서 가하고, 교반을 14시간 동안 계속하였다. 혼합물 을 감압 여과 (매질 여과지)하고, 생성된 케이크 (~0.52 L)를 헵탄 (0.33 L)으로 세척한 후, 황색 여액을 회수하였다. 용매를 감압하여 증발시켜 (29 내지 32℃), 오렌지색의 오일 (177.9 g)을 수득하였다.
조 생성물 (177.9 g)을 TBME/헵탄=1/4 (178 mL) 중에 용해시키고, TBME/헵탄=1/4 (3.15 L), 이어서, BME (2.1 L)로 조정된 바이오타지 (Biotage) 75L 실리카겔 (834 g, 공극 부피=1.05 L) 카트리지 상에, ~170 mL/분 (~18 psi 용매 압력)의 조정된 유속으로 로딩하였다. 분획 1 - 2 (각 분획: ~350 mL)를 회수하였다. 로딩 후, 카트리지를 TBME/헵탄=1/4 (178 mL)로 헹구어 내고, TBME/헵탄=1/4 (2.1 L)로 용출시켜, 분획 2 - 8을 회수하고; TBME/헵탄=2/3 (1.05 L)으로 용출시켜 분획 8 - 11를 회수하고; TBME/헵탄=7/3 (1.05 L)으로 용출시켜, 분획 11 - 14를 회수하고; TBME (8.4 L)으로 용출시켜 분획 15 - 39를 회수하였다. 회수한 분획을 분석하고 (TLC, 실리카겔 F254; 이동상, TBME; 가시화, UV 및 아니스알데히드 용액), ER-807277 오염이 없는 생성물 함유 분획 (14 - 35)을 합하였다. 용매를 증발시키고 (29 내지 32℃, 80 torr), 헵탄으로 처리하여 (29 내지 32℃, 10.3 torr), 투명한 오렌지색 오일 (114.4 g)을 얻고, 실온으로 냉각시켜 고체화하였다. HPLC 분석 (TM-779)결과, 96 면적%로 확인되었다.
오렌지색 고체 (114.4 g, 1 wt)를 가온하고 (29 내지 32℃), 헵탄 (572 mL) 과 함께 교반하면서 질소 분위기 하에, 건조하고 깨끗한 1-L 반응기로 옮겼다. 용액을 14℃로 냉각시키고, 0.5시간 동안 교반한 후, ER-806158 결정 (0.112 g)으로 시딩하였다. 5시간 동안 교반을 계속하였으며, 그때 고체 입자를 볼 수 있었다. 반응 혼합물을 단계적으로 (매 0.5 시간당 4℃) -10℃로 냉각시키고, 1시간 동안 계속하여 교반하면서 -15℃로 더 냉각시켰다. 냉각한, 매질 여과 깔대기를 냉각 (~-20℃) 헵탄 (~200 mL)과 함께 제조하고, 반응 혼합물을 깔대기를 통해 진공을 걸어 여과한 후, 냉각 헵탄 (~-20 내지 -15℃)으로 세척하였다. 계속하여 1.5 시간 동안 진공하에 두고, 질소 블랭킷을 케이크의 상부에 가하였다. 그 다음, 생성된 백색의 조립상의 고체 (98.4 g, 0.295 mol)를 용기에 옮겼다. 분석 결과는 다음과 같다: wt/wt%, 99.95; 순도, 99.68; 잔류 헵탄, 19.1 ppm; KF, 1.04%. DSC로 용융 개시 온도가 27℃임을 알 수 있었다. 키랄 HPLC 분석 (TM-573)결과, 99.8 면적%로 확인되었다.
실시예 3: ER -819059의 제조
Figure 112008007582947-pct00042
제조 1: 깨끗한 건조 22-L 플라스크에 든 건조 디클로로메탄 (CH2Cl2) (3710 g) 중 N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (904 g, 4.176 mol), 라우르산 (정제됨, 881 g, 4.398 mol) 및 ER-806158 (1400 g, 4.198 mol)의 교반 용액에, 4-디메틸아미노피리딘 (51 g, 0.417 mol)을 질소 분위기 하에 가하였다. 1시간 13분 동안 교반한 후, 반응 혼합물이 약간 혼탁한 황색 용액으로 변하였고, 반응 온도가 최대 26.7℃에 이르렀다. 6시간 34분 후, 반응이 98.9% 완료되었음이 확인되었고, 그 때, 추가로 N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (303 g, 1.581 mol)를 한번에 가하였다. 실온에서 총 20시간 50분 동안 교반한 후, MeOH (5566 g)를 한번에 가하여, 황색 반응 현탁액 (약간의 흡열성, Tmin=17.1℃)을 수득하였다. 부분적으로 용매를 증발시켜 (하우스 진공, 29 내지 32℃), CH2Cl2 (3.71 Kg)를 제거한 후, 동등한 분량의 헵탄 (2 x 2.86 kg ea.)으로 추출하였다. 헵탄 추출물을 증발시키고 (하우스 진공, 30 내지 35℃), 헵탄 (0.75 Kg)을 사용하여 공비혼합하여 건조시켰다.
생성물 (2.192 Kg)을 헵탄 (3.00 Kg) 중에 용해시키고, 실리카겔 카트리지 [MTBE/헵탄=1/1 (15.0 Kg)로 미리 조정된 바이오타지 (Biotage) 150L 실리카겔 (5.62 Kg)] 상에 로딩하였다. 생성물을 TBE/헵탄=1/1 (31.3 Kg.)를 사용하여 ~0.84 L/분 (용매 압력=22 psi)의 조정된 유속으로 용출시키고, 대략 350 mL 용리액/분획을 회수하였다. 생성물 함유 분획을 합하고, 농축하여 건조시키고, 진공하에 건조시켜 (16℃, 하우스 진공, 16시간 13분), 투명한 엷은 황색 오일로서 ER-819059 (2.102 Kg, 86.4 % 수율)를 수득하였다.
ER -819059에 대한 분석 데이터
Figure 112008007582947-pct00043
제조 2: N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (1.49 g, 7.77 mmol), ER-806158 (2.00 g, 6.00 mmol), DMAP (0.07 g, 0.59 mmol) 및 도데칸산 (1.44 g, 7.19 mmol)을 질소 분위기 하에 건조한 50-mL 플라스크에 가하였다. 이어서, 건조 디클로로메탄 (6.0 mL)을 교반하면서 가하였다. 약간 혼탁한 용액이 얻어질 때까지 실온에서 계속하여 교반하였다. 16시간 동안 교반한 후, 샘플 (10 μL)을 취하고, 1.5 mL MeCN에 가하였다. HPLC 분석 (TM-780) 결과, 95.1% 전환되었음이 확인되었다. 이어서, 추가량의 N-3-(디메틸아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (0.307 g, 1.60 mmol)를 가하였다. 추가로 8시간 동안 (총 24시간) 교반한 후, 제2 샘플 (10 μL)을 취하여 전과 같이 분석하였다. HPLC 분석 (TM-780) 결과, 99.6% 전환되었음이 확인되었다. 추가로 15시간 (총 39시간) 동안 교반을 계속하고, 제3 샘플을 취하여 분석하였다. HPLC (TM-780) 분석 결과, 99.96% 전환되었음이 확인되었다. 이어서, 0.5 시간 동안 교반을 계속하면서, NaHCO3 (10 mL) 포화수용액, 염수 (10 mL) 및 헵탄 (10 mL)을 가하였다. 불량한 에멀젼이 관찰되었다. 이어서, 헵탄 (10 mL)을 가하고, 잘 혼합하였으나, 에멀젼이 실질적으로 개선되지 않았다. 다음으로, MeOH (3.0 mL)을 가하고, 잘 혼합하였으나, 이것으로도 에멀젼이 실질적으로 개선되지 않았다. 조성물을 0.5 시간 동안 정치시키고, 하부에 형성된 우유빛 수성층을 배수하였다. 수성층을 TBME (20 mL)으로 추출하고, 약 15분 동안 정치시킨 후, 하부 수성층을 배수하였다. 수성층을 TLC 분석 (TLC, 실리카겔 F254; 이동상, TBME; 가시화, UV 및 아니스알데히드 용액)한 결과, 상당량의 생성물이 검출되었다. 수성층을 다시 TBME (20 mL)로 추출하고, 유기층을 합하였다. 용매를 증발 (29 내지 32℃, 7.5 torr)시키고, 투명한 황색 오일 (3.35 g)을 수득하였다.
조 생성물 (3.35 g)을 TBME/헵탄=1/1 (12 mL) 중에 용해시키고, TBME/헵탄=1/1 (36 mL)로 조정한 바이오타지 (Biotage) 12M 실리카겔 (8.99 g, 공극 부피=11.3 mL) 카트리지 상에 로딩하였다. 생성물을 ~12 mL/분의 조정된 유속으로 용출시키고, 15개의 분획 (각각 ~6 mL)을 회수하였다. 회수한 분획을 분석하고 (TLC, 실리카겔 F254; 이동상, TBME/헵탄=1/1; 가시화, UV 및 아니스알데히드 용액), 생성물 함유 분획 (3 - 15)을 합하였다. 용매를 증발 (29 내지 32℃, 8.3 torr)시키고, 투명한 무색 오일 (3.03 g)을 얻었다. HPLC 분석 (TM-780)결과, 99.18 면적%로 확인되었다. 불량한 에멀젼으로 인해 수성 후처리를 수행하지 않았다.
실시예 4: ER -819120의 제조
Figure 112008007582947-pct00044
ER-819059 (3.03 g, 5.87 mmol, 1 wt) 및 10% Pd/C (0.303 g, 0.28 mmol)를 IPA (20.2 mL, 6.67 vol.)가 함유된 깨끗한 50-mL 플라스크에 질소 분위기 하에 가하였다. 플라스크를 실온에서 고속 교반하면서 배기시키고, 수소로 퍼징하였다 (수소 압력을 0.04 bar에서 유지시킴). 상기 배기 및 퍼징 공정을 추가로 2회 반복하였다. 다양한 샘플의 HPLC 분석을 통해 반응을 모니터링 하였다. 반응이 완료된 후 (약 3.5일), 플라스크를 3회에 걸쳐 배기시키고, 질소로 퍼징하였다. 생성된 혼합물을 0.2-μm 시린지 필터를 통해 여과하고, IPA (2 x 4.0 mL)로 헹구어냈다. 그 다음, 무색 투명한 여액을 합하고, 조 생성물/IPA 용액을 다음 반응에 사용하였다 (정제 없이, 100% 수율로 추정됨).
실시예 5: ER -819302의 제조
Figure 112008007582947-pct00045
ER-819120의 양(mol)을 이전 단계의 출발 물질인 ER-819059를 기준으로 하여 계산하였다.
IPA (ER-8189120의 균등물 2.52 g, 5.87 mmol, ~31.5 mL) 중 ER-819120를 함유하는 50-mL 플라스크에, 디-tert-부틸디카르보네이트 (1.30 g, 5.96 mmol)를 질소 분위기 하에 교반하면서 한번에 가하였다. 반응을 HPLC (샘플 제조: 샘플 15 μL를 1.0 mL MeCN에 가함) 및 TLC (TLC, 실리카겔 F254; 이동상, MeOH/CH2Cl2/NH4OH= 10/89/1; 가시화, 아니스알데히드 용액 또는 닌히드린 용액)로 모니터링 하였다. TLC 결과, 미미한 ER-819120 스팟만이 검출되었다. 디-tert-부틸디카르보네이트 (0.20 g, 0.92 mmol)를 추가로 가하였다. TLC 분석 결과, 어떠한 개선도 나타나지 않았다. 용매를 증발 (29 내지 32℃, 10 torr)시키고, 무색 투명한 오일 (3.21 g)을 수득하였다.
바이오타지 (Biotage) 12M 실리카겔 (8.99 g, 공극 부피=11.3 mL) 카트리지를 TBME/헵탄=1/1 (36 mL, 3 v.v.)으로 조정하였다. 유속을 ~12 mL/분으로 조정하였다. 조 생성물 (3.35 g)을 TBME/헵탄=1/1 (12 mL) 중에 용해시킨 후, 이를 카트리지 상에 로딩하고, TBME/헵탄=1/1 (70 mL)로 용출시켰다. 15개의 분획 (각각 ~6 mL)을 회수하고, 분석하였다 (TLC, 실리카겔 F254; 이동상, TBME/헵탄=1/1; 가시화, UV 및 아니스알데히드 용액). 분획 (3 - 15)으로부터 생성물을 합하였다. 용매를 증발 (29 내지 32℃, 8.3 torr)시키고, 무색 투명한 오일 (3.03 g)을 수득하였다.
실시예 6: 별법의 ER -819302의 제조
Figure 112008007582947-pct00046
이소프로판올 (IPA) (각 4.647 Kg)이 함유된 2개의 깨끗한 12-L 반응기에 동량으로 배분된 ER-819059 (1.970 Kg, 3.82 mol)에, 10% Pd/C (99 g = 플라스크 1, 102 g = 플라스크 2)를 가하였다. 플라스크를 교반하면서 3회에 걸쳐 배기시킨 다음 (-0.79 bar), 수소 (0.05 bar)로 퍼징하였다. 반응물을 실온의 수소 분위기 (0.04 bar) 하에 7일 16시간 동안 유지시킨 후, 반응물을 3회에 걸쳐 배기시키고 (하우스 진공), 질소로 퍼징하여, 모든 흔적량의 과량의 수소를 제거한 후, 질소 분위기 하에 0℃로 냉각시켰다.
2개의 분별 플라스크에서, 디-tert-부틸디카르보네이트 (각각, 434 g, 1.99 mol; 및 438 g, 2.01 mol)를 질소 분위기 하에 무수 THF (각각 203 g)에 용해시켰다. 냉각된 ER-819120 반응 혼합물을 5분에 걸쳐 각각의 플라스크에 가하였다. 무수 THF (각각 40 g)를 사용하여 잔류 시약을 반응 혼합물 내로 헹구어냈다. 반응은 발열성 (4.5 내지 10.1℃)인 것으로 밝혀졌으며, 가스 발생이 관찰되었다. 반응물을 실온으로 가온하고, 계속하여 밤새 교반하였다. 완성된 반응물을 합하고, 셀라이트 545 (1.143 Kg, 피셔 (Fisher) P5 24 cm 필터 상에 충전됨) 상에서 여과한 후, 질소 블랭킷 하에 IPA (3.091 Kg)로 헹구어냈다. 반응기 중의 잔류물을 헹구어내고, IPA (1.417 Kg)로 여과한 후, IPA (13.46 Kg)로 필터 패드를 헹구 어냈다. 필터 베드를 추가로 2회에 걸쳐 IPA (각각 4.573 Kg 및 6.360 Kg)로 세척하였다.
합한 여액을 농축시킨 후, 헵탄 (7.529 Kg)과 공비혼합하여, 투명한 무색 오일 (2.452 Kg; 70.57 면적% 순도)을 수득하였다. 조 생성물을 4 부분의 정제물로 균등하게 분배하였다.
조 ER-819302 (611 g, 1 wt)를 헵탄 (613 g, 1 wt) 중에 용해시키고, 바이오타지 (Biotage) 150L 실리카겔 카트리지 [(5.620 Kg); MTBE (10.48 Kg), 이어서, 헵탄 (15.51 Kg)으로 조정됨] 상에 700 mL/분의 유속으로 로딩하였다. 헵탄 (340 g, 0.56 wt)을 사용하여 잔류 ER-819302를 컬럼 상으로 헹구어냈다. 컬럼을 15% MTBE/헵탄 (7.102 Kg/36.994 Kg), 그 다음, MTBE (15.72 Kg)로 용출시켰으며, 이때, 각각 대략 3 L의 분획을 회수하였다. 남아있는 조 ER-819302를 동일한 방법을 사용하여 3개의 동등한 부분에서 별도로 크로마토그래피하였다. 4개의 정제물로부터 합한, 원하는 분획을 농축시키고, 헵탄 (0.5 Kg)과 공비혼합하여 건조시켜, 투명한 무색 오일로서 ER-819302를 수득하였다 (1.9135 Kg; 97.86 면적% 순도에서 94.6 % 수율).
ER -819302-00에 대한 분석 데이터
Figure 112008007582947-pct00047
실시예 7; ER -819344의 제조
Figure 112008007582947-pct00048
제조 1: 무수 CH2Cl2 (200 mL) 중 디이소프로필아민 (22.4 mL, 0.160 mol)의 교반 용액에, 피리디늄 트리플루오로아세테이트 (30.9 g, 0.160 mol)를 질소 분위기 하의 실온에서 한번에 가하였으며, 약간의 발열반응이었다. 일단, 반응 혼합물이 다시 실온에 이르면, 알릴 테트라이소프로필포스포로디아미다이트 (51.1 mL, 0.160 mol)를 가한 후, 10분 동안 교반하였다. ER-819302 (84.4 g, 0.159 mol)는 수분 함량이 60 ppm 미만으로 측정될 때까지, 무수 CH2Cl2 (300 mL)를 사용하여 수회에 걸쳐 공비혼합하여 건조시켰다. ER-819302를 디클로로메탄 (300 mL) 중에 용해시킨 후, 이 용액을 반응 온도를 20 내지 30℃로 유지하면서 상기 피리디늄 반응 혼합물에 서서히 가한 후, 잔류물은 추가의 디클로로메탄 (100 mL)을 사용하여 시약 용기로부터 헹구어냈다.
반응 중간체 ER-820116의 생성이 완료되면 (2 시간), 반응 혼합물을 0℃로 냉각시킨 후, 반응 온도를 0 내지 15℃로 유지하면서 아세트산 (18.2 mL, 0.320 mol)을 적가하였다. 피리디늄 트리플루오로아세테이트 (11 g, 0.056 mol)를 반응 혼합물에 가하고, 생성된 반응물을 10분 동안 교반한 후, 바로 ER-222581 (46.5 g, 0.164 mol)을 한번에 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 다음, 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 물 (49 mL, 0.480 mol) 중 30 중량% 과산화수소를 최종 반응 온도를 0 내지 10℃로 유지하면서 적가하였다 (강한 초기 발열성). 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 추가로 30분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 최종 반응 혼합물에 10 중량% 중아황산나트륨 수용액 (3.5 L)을 반응 속도가 0 내지 10℃로 유지되는 첨가 속도로 서서히 가하여 반응을 켄칭하였다. 켄칭된 반응물을 실온으로 가온하고, 그에 따른 층 양쪽에 대한 과산화물 시험이 음성이 될 때까지 (30분) 교반하였다.
생성된 혼합물을 MTBE (2.0 L)로 희석하고, 10분 동안 교반한 다음, 후처리 용기로 옮겼다. 층을 분리하고, 유기층을 5% 수성 NaHCO3 (2.0 L) 및 물과 염수의 1:1 혼합물로 각 1회씩 세척하였다. 합한 수성층을 MTBE (1 L)로 역추출하였다. 합한 유기층을 무수 황산나트륨 (100 g) 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시킨 후, MTBE와 공비혼합하여 건조시켜, ER-819344 (146.6 g, 97 % 수율, HPLC에 의한 순도 91 %)를 수득하였다.
ER -819344에 대한 분석 데이터
Figure 112008007582947-pct00049
제조 2: ER-819302 (1 wt.)를 무수 디클로로메탄 (3 vol.) 중에 용해시켰다. 물의 총량이 Kf에 의해 측정된 것으로서 ER-819302의 0.7 몰% 이상인 경우, 용매를 증발시키면서 수분을 제거함으로써 수분 함량을 만족스러운 수준으로 낮추었다.
무수 디클로로메탄 (2 vol.), 이어서, 디이소프로필 아민 및 피리디늄 트리플루오로아세테이트 (1 당량) (발열을 제어하기 위해 가하기 전에 욕(bath)에 둠)를 건조 반응기에 충전시켰다. 용액을 교반하고, 용기 내 온도를 20 내지 25℃로 조정하였다. 그 다음, 알릴 테트라이소프로필포스포로디아미다이트 (1 당량)를 용액에 충전시킨 후, 5분 동안 교반하였다. 이어서, ER-819302의 디클로로메탄 용액을 반응 온도가 30℃ 미만으로 유지되도록 하는 제어된 첨가 속도로 용액에 가하였다 (디클로로메탄 1 vol.로 헹구어냄). 반응 공정을 TLC (MTBE/헵탄/Et3N=40/60/1) 및 HPLC (TM, 샘플은 30-ul 반응 혼합물을 취하고, 이를 아세토니트릴 1 ml로 희석하여 제조함)로 모니터링 하였다. ER-819302:ER-820116 비가 95:5를 초과할 때, 반응이 완료된 것이며, 일반적으로 2시간 안에 일어난다. 중간체 ER-820116가 생성된 후, 반응 혼합물을 0 내지 10℃로 냉각시키고, 아세트산을 반응 온도가 15℃ 미만으로 유지되는 첨가 속도로 가하였다.
피리디늄 트리플루오로아세테이트 (0.4 당량)을 반응 혼합물에 충전시킨 후, ER-222581 (1 당량)을 가하였다. 혼합물을 백색 현탁액이 투명한 용액이 될 때까지 실온에서 대략 20 내지 30분 동안 교반하였다. 반응 공정을 TLC (MTBE/헵탄/Et3N=40/60/1) 및 HPLC (TM, 샘플은 30-ul 반응 혼합물을 취하고, 이를 아세토 니트릴 1 ml로 희석하여 제조함)로 모니터링 하였다. 반응이 완료된 후 (약 1.5 또는 2 시간), 반응 혼합물을 -5 내지 0℃로 냉각시켰다.
그 다음, 반응 온도를 5℃ 미만으로 유지하면서, 물 중 30 중량% 과산화수소 (3 당량)을 반응 혼합물 내로 가하였다. 반응 혼합물이 실온에 이르도록 한 다음, 30분 동안 교반하였다. 이를 다시 -5 내지 0℃로 냉각시키고, 반응 온도를 5℃ 미만으로 유지하면서, 중아황산나트륨 수용액 10 중량%를 가하였다. 중아황산 용액을 충전한 후, 반응 혼합물을 다시 실온에 이르게 한 다음, 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물이 과산화물 시험 스트립 상에서 음성 결과를 나타낼 때까지 교반을 계속하였다.
메틸 t-부틸 에테르를 반응물에 충전시키고, 10분 동안 교반하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 후처리 용기에 옮기고, 층을 분리하였다. 수성층이 생성물을 함유하는 것으로 나타나는 경우, 이를 메틸 t-부틸 에테르로 역추출하였다. 유기층을 5% 수성 중탄산나트륨, 이어서, 반(half) 염수로 세척하고 (수성층이 뿌옇게 되는 경우, 메틸 t-부틸 에테르로 역추출하는 것이 필요할 수 있음), 유기층을 농축시켰다 (우유빛 오일이 되는 경우, MTBE로 충전하고, 진공여과 함). 조 ER-819344를 HPLC 및 HNMR에 의해 분석하였다. HPLC 결과에 나타난 바와 같이, 최대 규모 가동으로 84.4 g ER-819302를 97% 수율로 제조하였다.
실시예 8: ER -819385-00의 제조
Figure 112008007582947-pct00050
THF (1.5 mL) 중 ER-819344 (1.56 g, 1.70 mmol)의 교반 용액에, THF (8.5 mL, 17.0 mmol) 중 2.0 M 디메틸아민을 실온에서 가하고, 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 완성된 반응 혼합물을 농축하고, 조 생성물을 MTBE (15 mL)와 2회 공비혼합하여 건조시켰다. 결과 생성물을 MTBE (30 mL) 중에 용해시키고, 염수 (7.5 mL)로 세척하였다. 최종 유기층을 농축하여 건조시키고, MTBE (15 mL)와 1회 공비혼합하여, 원하는 다소 불안정한 ER-819385를 수득하고, 추가의 정제없이 다음 단계에서 사용하였다.
제조 2: ER-819344-00 (1.56 g, 1.70 mmol)을 THF (1.5 mL) 중에 용해시키고, 실온에서 THF (2.0 M, 8.5 mL) 중 디메틸아민의 시판 용액에 가하고, 2시간 동안 교반하였다. TLC 분석을 수행하여, ER-819344가 완전히 소비되었음이 확인하였다. 가시화 기술로서 U.V. 램프 및 p-아니스알데히드 염료를 사용하였다. 그 다음, 휘발성 물질을 회전 증발법을 통해 제거하였다. 조 생성물을 MTBE (2 x 15 mL)와 공비혼합한 후, 이를 MTBE (30 mL) 중에 용해시키고, 염수 (임의의 잔류하는 저분자량 아민 (예를 들어, 디메틸아민, 에탄올아민)을 제거하기 위한 7.5 mL)로 세척하였다. 층들이 용이하게 분리됨에 따라, 에멀젼이 얻어지지 않았다. 세척한 후 수성층의 pH는 ~10이었다. 유기층을 농축하여 건조시키고, MTBE (1 x 15 mL)와 공비혼합하여, 원하는 아민 단량체 ER-819385-00을 수득하였다.
실시예 9: ER -819409-00의 제조
Figure 112008007582947-pct00051
제조 1: CH2Cl2 (15 mL) 중 조 ER-819385 (계산치: 1.18 g, 1.70 mmol)의 교반 용액에, NaHCO3 포화 용액 (12 mL)을 가하였다. 생성된 혼합물을 0℃로 냉각시킨 후, 톨루엔 (465 μL, 0.935 mmol) 중 20 % 포스겐을 적가하였다. 반응물을 실온에 이르게 하고, 1시간 동안 교반한 다음, 0℃로 냉각시킨 후, 20 % 포스겐 용액 (210 μL, 0.425 mmol)의 제2 부분을 가하였다. 최종 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 물 (15 mL)을 가하였다. 추가로 30분 동안 교반한 후, 켄칭한 반응물을 분별 깔대기로 옮기고, 45분 동안 층들을 분리하였다. 수성층을 CH2Cl2 (30 mL)로 추출하고, 합한 유기층을 농축하여 건조시켰다. 조 오일을 EtOAc/헵탄 (1:1, 50 mL) 중에 용해시킨 MTBE/에틸 아세테이트 (EtOAc) (1:1, 50 mL)와 함께 공비혼합하여 건조시키고, 프릿화된 깔대기 상에서 여과하여, 염을 제거하였다. 조 생성물을 실리카겔 (12g) 상에서, 2.5% MeOH/에틸 아세테이트 (50 mL), 3.8% MeOH/에틸 아세테이트 (50 mL), 마지막으로 5.6% MeOH/에틸 아세테이트 (100 mL)로 용출시켜 정제하여, 투명한 무색 오일로서 ER-819409 (984 mg, 82% 수 율)를 수득하였다.
제조 2: ER-819385-00 (1.70 mmol, 조물질)을 CH2Cl2 (15 mL) 중에 용해시키고, NaHCO3 포화 용액 (12 mL)에 가하였다. 생성된 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 톨루엔 (465 uL, 0.55 당량) 중 포스겐의 시판 용액에 적가하였다. 반응물을 1시간 동안 교반하면서 실온에 이르게 하였다. 반응 생성물을 가시화하는데 TLC (10% MeOH/CH2Cl2) 및 p-아니스알데히드 분석법을 사용하였으며, 다량의 출발 물질이 여전히 존재하는 것으로 나타났다. 따라서, 20 % 포스겐 용액 (210 uL, 0.25 당량)의 제2 첨가를 위해 반응물을 0℃로 냉각시켰다. 첨가 후, 반응물의 온도를 서서히 실온에 이르게 하였다. 1시간 후 TLC 분석한 결과, 출발물질이 여전히 나타났으나, 분해 징후는 나타나지 않았다. 그 다음, 반응물을 교반하면서 밤새 두었다. 다음날에 TLC 분석을 한 결과, 여전히 출발 물질의 존재가 확인되었으며, 기저수준의 분해 발생이 또한 나타났다. 물 (15 mL)을 반응 생성물에 실온에서 가하고, 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 분별 깔대기로 옮기고, 층들을 45분 동안 정치시킨 후, 분리하였다. 수성상을 CH2Cl2 (30 mL)로 추출하고, 유기층은 합하고, 농축하여 건조시켰다. 수성상 및 합한 유기층을 TLC 분석한 결과, 아민 출발 물질의 존재가 나타나지 않았으며, 후처리 동안에 반응이 완결되었음을 확인하였다.
조 오일을 MTBE/EA와 공비혼합하고, 1:1 비율로 ~50 ml EA/헵탄 중에 재 용해시키고, 프릿화된 깔대기 상에서 여과하여 염을 제거하였다. 이 물질을 SiO2 컬 럼 (50% EA/n-헵탄, 100% EA, 이어서, 5 내지 10% MeOH/EA) 상에서 정제하여, 무색 오일로 존재하는 원하는 우레아 ER-819409-00 984 mg을 수득하였다. 이는 Fmoc 탈보호로 인해 82% 총괄 수율을 나타내었다. 질량 수지(mass balance)는 우레아-생성 단계 중 밤새 교반하는 과정에서 형성된 기저수준 물질이다.
실시예 10: ER -819409-00의 디히드록시 우레아 합성
Figure 112008007582947-pct00052
무수 아세토니트릴 (348 g) 중 피리디늄 트리플루오로아세테이트 (108 g, 0.533 mol) 교반 용액에, 디이소프로필아민 (78.7 mL, 0.561 mol)을 반응 온도가 30℃ 미만으로 유지되는 속도로 가하였다. 반응물을 냉각시키고 실온에 이르게 한 후, 알릴 테트라이소프로필포스포로디아미다이트 (179 mL, 0.561 mol)를 가한 후 (약한 흡열, 이어서 발열이 관찰됨), 추가로 10분 동안 교반하였다. 후속적으로, 무수 아세토니트릴 (453 mL) 중 ER-819302 (283.2 g, 0.5345 mol; 헵탄 800 mL로 전처리함)을 반응 온도가 20 내지 30℃로 유지되는 첨가 속도로 가하였다. 추가로 30분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 이어서, 반응 온도를 25℃ 미만으로 유지하면서 아세트산 (64 mL, 1.1 mol)을 서서히 가하였다. 반응 혼합물 이 실온과 평형을 유지하도록 하였다. 아세토니트릴 (200 mL) 중 피리디늄 트리플루오로아세테이트 (103 g, 0.533 mol)를 반응 혼합물에 가하였다. 피리디늄 트리플루오로아세테이트의 첨가 직후, ER-812978 (40 g, 0.27 mol)을 가한 후, 아세토니트릴 (50 mL)로 헹구었다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 0℃로 냉각시키고, 이어서, 반응 온도를 0 내지 24℃로 유지하면서, 물 (140 mL, 1.37 mol) 중 30 중량% 과산화수소를 서서히 가하였다 (초기에 강한 발열성임). 최종 반응 혼합물을 추가로 30분 동안 교반한 후, 20 중량% 중아황산나트륨 수용액 (3000 g)을 반응 온도가 0 내지 18℃로 유지되는 속도로 가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 과산화물 시험 결과가 음성을 나타낼 때까지 교반하였다.
생성된 반응 혼합물을 후처리 용기내에서 MTBE (3000 mL)로 희석하고, 15분 동안 교반하였다. 층들을 분리한 후, 유기층을 10% 수성 중탄산나트륨 (NaHCO3) (3500 mL), 이어서, 30% NaCl 수용액 (2000 mL)으로 세척하였다. 염수층을 MTBE (3000 mL)로 3회 역추출하였다. 합한 유기층을 농축시키고, TBME/헵탄 = 1/1 (1.4 L)로 2회 처리하였다. 잔류물을 MTBE (735 g) 중에 용해시키고, 현탁액을 셀라이트 패드 (150 g)를 통해 여과한 후, 후속적으로 3회에 걸쳐 용기 및 필터 패드를 MTBE (300 mL)로 세척하였다. 여액을 농축하고 건조시켜, 약간 혼탁한 오일 363.4 g을 수득하였다. 조 ER-819302를 용해시키고, 미리 조정된 실리카겔 카트리지 [MTBE/헵탄=7/3 (15 Kg)로 조정된 바이오타지 (Biotage) 150L (5.62 Kg, 공극 부피=7.07 L) 카트리지] 상에 TBME/헵탄=7/3 (400 mL)와 함께 ~800 mL/분의 조정된 유 속으로 로딩하였다. 로딩 후, TBME/헵탄=7/3 (500 mL)을 사용하여 잔류 ER-819302를 헹구어내고, 이를 카트리지 상에 로딩하였다. 카트리지를 MTBE/헵탄=7/3 (26 Kg), 이어서, MTBE/헵탄/MeOH=70/25/5 (21.8 Kg/7.18 Kg/1.7 Kg)로 용출시켰다. 이 과정에서 총 36개의 분획을 회수하였다. 합한, 생성물 함유 분획을 농축시키고, 헵탄 (8 L)을 사용하여 공비혼합하여 건조시킨 후, 하우스 진공하에 건조시켜, 오일 (281 g, 79 %)을 92.69 면적% 순도로 수득하였다.
ER -820116에 대한 분석 데이터
Figure 112008007582947-pct00053
ER -821843에 대한 분석 데이터
Figure 112008007582947-pct00054
ER -819409에 대한 분석 데이터
Figure 112008007582947-pct00055
실시예 11: ER -807284-00의 제조
Figure 112008007582947-pct00056
제조 1: 건조 CH2Cl2 (120 mL) 중 ER-819409 (40.25 g, 28.51 mmol)의 교반 용액에, CH2Cl2 (140 mL) 중 메탄술폰산 (13.8 g, 144 mmol) 용액을 질소 분위기 하에서, 반응 온도를 20℃ 미만으로 유지하면서 10분에 걸쳐 서서히 가하였다. 반응 혼합물을 20℃로 가온한 후, 15시간 동안 교반하였으며, 이때 중간체 반응이 완결된 것으로 나타났다. 생성된 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 디이소프로필에틸아민 (27.5 mL, 158 mmol)을 5분에 걸쳐 가하였다. 0℃에서 추가로 5분 동안 교반한 후, 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (32.55 g, 170 mmol)를 한번에 가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 12분 동안 교반한 후, ER-028699 (20.6 g, 85.0 mmol)를 한번에 가하였다. 생성된 반응 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하고, 이어서, 30분 동안 실온으로 가온하였으며, 이때 반응이 완결된 것으로 나타났다.
완성된 반응 혼합물 (105 g) 중 사분의 일을 미리 조정된 바이오타지 (Biotage) 75M 실리카겔 카트리지 [MTBE (1 L), 이어서, CH2Cl2 (2 L)로 조정된 실리카겔 351 g] 상에서 150 내지 200 mL/분으로 조정된 유속으로 용출시켰다. 컬럼을 후속적으로 1% 에탄올 (EtOH)/CH2Cl2 (900 mL), 3% EtOH/CH2Cl2 (900 mL), 마지막으로 6% EtOH/CH2Cl2 (2250 mL)로 용출시켜, ~150 mL/분획으로 회수하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 합하여 농축시키고 (하우스 진공, 30 내지 35℃), 헵탄 (100 mL)과 3회에 걸쳐 공비혼합하여, ER-807285 8.8 g을 수득하였다. 완성된 반응물 중 나머지를 유사한 방법으로 정제하여, 총 35.2 g (74.5 % 수율)을 수득하였다.
두가지의 추가 실험 절차를 이하에 기재한다. 이들은 후처리 단계가 상이하다. 첫번째 것은 표준 켄칭 단계를 포함하고, 나머지 다른 하나는 역 켄칭 방법을 사용한다. TLC 분석을 NH4OH/MeOH/CH2Cl2 1:9:90으로 수행하였다. TLC 판을 p-아니스알데히드 염료로 태워 출발 물질 및 반응 생성물을 가시화하였다.
제조 2 : ER-819409-00 (995 mg, 0.705 mmol)를 CH2Cl2 (7.8 mL) 중에 용해시켰다. TFA (1.4 mL)를 실온에서 1 내지 2분에 걸쳐 혼합물에 가하였다. 그 다음 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다.
교반한 후, 반응 혼합물을 빙욕으로 냉각시키고, NaHCO3 (16.0 mL)의 포화 수용액을 25분에 걸쳐 가하였다. 중화시키는 중에 기록된 최고 온도는 ~8°C이었으며, 평균 온도 4℃였다. 생성된 혼합물을 추가로 45분 동안 교반하였으며, 그 동안에 내부 온도가 4℃에서 실온으로 서서히 가온되었다. 혼합물을 분리 깔대기에 옮기고, CH2Cl2 (11.0 mL)를 가하였다. 층들을 35분 동안 방치한 후, 분리하였다. pH가 8 내지 8.5인 수성층을 CH2Cl2 (5.0 mL)로 추출하였다. 유기층을 합하고, 포화된 염수 용액과 물을 3:1 비율로 혼합하여 제조한 식염수 (saline) 용액 10 mL로 세척하였다. 층들을 20분 동안 방치한 후, 분리하였다. 그 다음, 유기층을 밤새 냉동기 (-20 ℃)에 저장하였다.
다음날 아침, 유기층을 냉동기에서 꺼내어, 실온까지 가온되도록 하였다. 이를 Na2SO4를 사용하여 건조시키고, 프릿화된 깔대기 상에서 여과하고, 농축하여 건조시켰다. 생성된 오일을 CH2Cl2 (8.0 mL) 중에 재용해시키고, 임의의 염 잔류물을 제거하기 위하여 플러그 상에서 여과하였다. 생성된 물질을 농축하여 건조시켜, 무색 오일 ER-807284-00 (727 mg, 85% 질량 회수)을 생성하였다. 추가로 CH2Cl2 추출함으로써, 원하는 물질 여분의 99.0 mg를 수득하여, 질량 회수율이 96.8%에 이르렀다. 정제는 필요하지 않았다.
ER -807284에 대한 분석 데이터
Figure 112008007582947-pct00057
제조 3: 적절한 크기의 반응기에 CH2Cl2 (22.3 mL)를 충전시켰다. ER- 819409-00 (2.85 g, 2.01 mmol)를 가하고 CH2Cl2중에 용해시켰다. TFA (4.0 mL)를 실온에서 1분에 걸쳐 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4.5시간 교반시켰다.
후처리: (역 켄칭): 반응 혼합물을 0℃로 냉각된 NaHCO3의 포화 용액에 1 내지 2분에 걸쳐 테플론(Teflon) 캐뉼라를 통해 옮겼다. 약간의 가온이 관찰되었고, 최대 발열은 ~4℃였다. 반응 플라스크를 CH2Cl2 (4 X 2.5 mL)로 헹구고, 세척수를 용액에 가하였다. 냉각 장치를 제거하고, 온도를 45분에 걸쳐 실온에 이르게 하였다. 추가로 CH2Cl2 (22 mL)를 가하고 혼합물을 분별 깔대기에 옮겼다. 혼합물을 20분 동안 방치한 후, 분리하였다. 수성층을 CH2Cl2 (22 mL)로 추출하고, 유기층을 합하였다. 합한 유기층을 식염수, 포화염수/ H2O (3:1 비율) (40 mL)로 세척하였다. 층을 서서히 분리되는 동안 생성된 혼합물을 30분 동안 방치하였다. 층을 분리하였다. 유기층이 혼탁하게 남았다. 유기층을 밤새 -20℃ 냉동기에 저장하였다. 그 다음, 실온에 이르게 하고, Na2SO4로 건조시키고, 프릿화된 깔대기로 여과하고, 농축시켜 건조시켰다. 염수 수용액을 또한 CH2Cl2 (22 mL)로 역-추출하여, 추가로 물질을 회수하였다. 양성자 및 불소 NMR 스펙트럼은 물질의 두 크롭 (crop)이 TFA 염 형성물에 의해 오염된 것으로 나타났다. NaHCO3 층의 pH 분석 결과, pH가 ~7 (유리 염기 ER-807284-00를 깨끗하게 얻는데 충분히 높은 값 (8-8.5)이 아님)인 것으로 나타났다. 상기 수득된 두 크롭을 합하고 CH2Cl2 (50 mL) 중에 유기 물질을 용해시킴으로써 후처리를 반복하였다. 합한 용액을 기계적 교반 장치가 장착된 250 mL 삼목-둥근바닥 플라스크에 옮겼다. NaHCO3 (50 mL)의 포화 수용액을 가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 45분 동안 교반하였다. 반응기의 내용물을 250 mL 분별 깔대기에 옮겼다. 반응기를 CH2Cl2 (총 25 mL)로 헹구었다. 혼합물을 ~1시간 동안 방치한 후, 에멀젼이 관찰되었다. 유기 및 수성층을 분리하고 수성층을 CH2Cl2 (30 mL)로 역-추출하였다. 생성된 유기층을 합하고, 포화 염수 (25 mL)로 세척하였다. 1시간 동안 방치한 후에도, 유기층은 혼탁하게 남아 있었으며, 그 후, 유기 및 수성층이 분리하였다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고 프릿화된-깔대기로 여과하였다. 여액은 혼탁하였다. 염수 용액을 CH2Cl2 (25 mL)로 역-추출하였다. 유사한 건조 절차 후에, CH2Cl2 층으로부터의 물질을 다른 물질과 합하였다. 생성된 합한 유기 여액을 농축시켜 건조시키고, MTBE (2 X 25 mL)와 공비혼합하고, CH2Cl2 (10 mL) 중에 재용해시킨 후, 10 mL 시린지에 장착된 셀라이트 (3 mL) 플러그 상에서 여과하였다. 시린지의 첨단에 또한 소형 입자를 포획하는 여과 장치가 장착되었다. 여액을 농축시켜 건조시키고, NMR 분광법에 의해 디아민 ER-807284-00이 수득되었으며, TFA 염이 없다는 것이 확인되었다. 질량 회수는 95% 초과였다. 반응물을 TLC로 정제하였다. 후처리를 반복하여, 유리 염기를 깨끗하게 생성시키고, 일부 분해가 TLC에 의해 명백하게 되었다. pH 제어는 이러한 절차를 개선할 수 있다.
실시예 12: ER -807285-00의 제조
Figure 112008007582947-pct00058
1- EDC / HOBT 제조: 적절한 크기의 불활성 반응기를 ER-807284-00 (1.0 당량) 및 무수 메틸렌 클로라이드 (8.41 중량)로 충전시켰다. 그 다음, 반응기를 1-[3-(디메틸아미노)프로필]-3-에틸카르보디이미드 (2 당량), 이어서, 1-히드록시벤조트리아졸 (0.18 당량)로 충전하였다. 그 다음, 반응기를 3-옥소-테트라데칸산 (2.2 당량)으로 동량씩 3회에 걸쳐 충전하였으며, 이때 내부 온도가 15 내지 20℃로 유지되도록 하고, 각각의 충전과정 사이에 10분 동안 반응 혼합물을 교반하였다. 반응을 TLC로 ER-807284가 완전히 소비되었는지에 관하여 모니터링하였다. 반응이 완료된 것으로 확인된 경우 (전형적으로 1시간 후), 공정 용수 (5 중량)를 반응기에 충전하였다. 혼합물을 20분 동안 교반시킨 다음, 20분 동안 분리시켰다. 유기층을 분리해 내었다. 수성층을 에틸 아세테이트로 2회에 걸쳐 (2 x 6 중량) 상기 방법으로 역 추출하였다. 그 다음 모든 유기층을 합하고, 황산나트륨 (8 중량)으로 충전하고, 습기를 흡수하도록 15분 동안 두었다. 유기물을 여과하고, ER-807285에 대해 음성인 결과가 얻어질 때까지 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하였 다. 여액을 진공 (28 내지 35℃에서 ~50 torr)에서 농축하여 ER-807285를 얻었다. 이 물질을 3% 내지 6% EtOH/CH2Cl2를 사용하여 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 원하는 물질이 풍부한 분획을 합하고, 회전증발에 의해 농축시키고, 2시간 동안 IVAC 펌프 (0.2 torr)로 건조시켰다. 수율은 무색 오일의 ER-807285 50%였다.
제조 2 - EDC / DMF : ER-807284-00 (208 mg, 0.172 mmol)를 적절한 크기의 반응기에서 DMF (2.1 mL) 중에 용해시키고, EDC (263 mg, 1.37 mmol)를 가하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고, DMF (1.4 mL) 중에 용해된 3-옥소테트라데칸산 (166mg, 0.686 mmole)을 30초에 걸쳐 적가하였다. 생성된 반응 혼합물을 10분 동안 0℃에서 교반시키면서 실온에 이르게 하였다. 출발 물질 및 생성물에 대해 TLC (7.5 % MeOH/CH2Cl2: p-아니스알데히드 염료)로 모니터링하였다. 반응물에 NaHCO3 (8.0 mL), H2O (4.0 mL) 및 MTBE/n-헵탄 1:1 (10 mL)의 포화 용액을 첨가하여, 0℃에서 ~3 시간 뒤에 켄칭하였다. 반응 혼합물을 분별 깔대기에 옮겼다. 소량의 MTBE/n-헵탄 1:1을 사용하여 반응기를 헹구어낸 다음, 반응 혼합물과 합하였다. 반응 혼합물을 20 내지 30분 동안 방치하였으며, 그 후, 유기 및 수성층이 분리되었다. 유기층의 총 부피는 ~35 mL였다. TLC로 수성층을 분석한 결과, 소량의 DMF가 나타났다. 수성층의 제2 추출은 필요하지 않았다. 유기층을 염수 (4.0 mL)로 세척한 다음 15분 동안 방치하였다. 신속한 분리가 에멀젼 없이 관찰되었다. 유기 및 수성층을 분리하고, 유기층을 증발 건조시켜, 조 ER-807285-00를 수득하였 다. 조 ER-807285-00를 3 내지 6% EtOH/CH2Cl2 용매계를 사용하여 SiO2 컬럼 상에서 정제하였다. 수율은 HPLC에 의한 88% 순도로서, 53% (ER-807285 151 mg)이었다.
제조 3- HBTU /휴니그 염기/ DMF : ER-807284-00 (232 mg, 0.191 mmol)을 DMF (2.5 mL)중에 용해시켰다. 반응기를 0℃로 냉각시켰다. HBTU (218 mg, 0.574 mmol) 및 3-옥소테트라데칸산 (139 mg, 0.574 mmole)을 가하였다. 이어서, 30초에 걸쳐 휴니그 염기 (106 uL, 0.612 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 20분 동안 교반하였으며, ~10분 후 우유빛을 띠었다. 반응 혼합물을 실온에 이르게 하였다. 교반을 4시간에 걸쳐 계속하였다. TCL 모니터링은 DMF 때문에 곤란하였다. 따라서, 반응 시간이 단축되었을 수 있었다. 반응 혼합물을 MTBE/n-헵탄 1:1 (10 mL)로 희석하고, 60 mL 분별 깔대기에 옮기고, pH 3에서 시트르산 1.0 M (50 uL) 및 포화 염화나트륨 (9.5 mL)을 혼합하여 제조된 수성 용액으로 처리하였다. 상당량의 염이 형성되어 쏟아져 내리면서 깔대기가 막혔다. 물 (5.0 mL)을 가하여 염을 용해시켰으나, 그 후, MTBE (최대 15 mL)를 점진적으로 가한 후에도 상 분리가 가능하지 않았다. 그 다음, 에틸 아세테이트를 10 mL에 이를 때까지 가하여 상 분리 복원을 개시하였다. 층을 ~30분 동안 방치하여, 분리를 달성하였다. 수성상의 pH를 5로 조정하였다. 유기층을 상기한 바와 같이 제조한 묽은 시트르산 10 mL로 다시 세척하여, pH가 3이 되었다. 층을 분리하였다. 유기층을 NaHCO3 (2 X 5 mL)의 포화용액으로 세척하였다. 생성된 수성 및 유기층을 분리하고 유기층을 증 발 건조시켰다. ER-807285의 수율은 HPLC에 의한 91% 순도로서, 45% (143 mg)이었다.
실시예 13: E6020 의 제조
Figure 112008007582947-pct00059
적절한 크기의 불활성 용기를 아르곤 스트림 하에, 탈기된 THF (1.57 중량) 중 ER807285 (1 당량)로 충전하였다. 테트라히드로푸란 (2 중량) 중 테트라키스 (트리페닐포스핀)팔라듐(0) (0.03 중량), 트리페닐포스핀 (0.03 중량) 및 페닐실란 (0.07 중량)의 용액을 40분에 걸쳐 반응기에 충전하였다 (내부 온도는 전형적으로 ~40 내지 45℃로 상승함). 반응은 ER-804057이 완전히 소비되었는지에 대해 TLC 및 HPLC로 모니터링하였다. 반응이 완료되었음이 확인된 경우 (전형적으로 <10분 후), 반응 혼합물을 이온 교환 크로마토그래피로 정제하였다. 이러한 정제 단계에 대한 보다 상세한 내용은, 실시예 14를 참조한다.
실시예 14: E6020 의 정제
Figure 112008007582947-pct00060
테트라키스 트리페닐포스핀 팔라듐(0), 트리페닐포스핀, 및 페닐실란을 함유하는 804057 유리산의 조 반응 혼합물을 소스 (Source) 3OQ 이온-교환 컬럼상에 로딩하였다. 그 다음, 비-결합 반응물을 메탄올/THF/물 (77.5/15/5)을 사용하여 804057로부터 용출해 내었다. 804057의 나트륨 염 (즉, E6020)을 0 M에서 시작하여 0.05 M에서 종결되는 나트륨 아세테이트의 증가하는 선형 구배를 사용하여 컬럼으로부터 용출시켰다. 크로마토그래피 과정 중에 불순물이 제거되었다.
임의의 제2 정제가 필요할 수 있다. 이러한 크로마토그래피는 이전의 크로마토그래피로부터 수득된 E6020/나트륨 아세테이트 이온-교환 용액으로 시작한다. 이를 C-4 크로마실 컬럼 상에 직접 로딩하였고, 등용매 완충계 메탄올/THF/물/나트륨 아세테이트 (77.5/15/5/0.05 M)로 용출시켰다. 생성물을 포함하는 분획을 고체 상 추출을 위해 합하였다.
그 다음, 순수한 E6020 용액을 물로 50/50으로 희석하였고, C-4 크로마실 컬럼 상에 로딩하였다. 이어서, 물에서 아세토니트릴로의 선형 구배를 이용하여, 물로 용출시켰다. 이로써 순수한 E6020으로부터 염과 물을 분리하였다. 그 다음, 생성물을 메탄올을 사용하여 컬럼으로부터 용출시켰다. 메탄올 중 순수한 E6020의 용액을 수득하였다. 이를 25 내지 30℃에서 회전 증발기 상 및 완전한 하우스 진공 하에서 농축 건조시켰다. 유리질 생성물을 동결건조시키거나 에틸 아세테이트/아세토니트릴의 용액으로 처리하여, 백색 고체를 생성시켰다. 이를 진공 건조시켜 E6020을 수득하였다.
실시예 15: 결정형 ER -806158, (R)-1-(((R)-4,5- 디히드로 -2- 페닐옥사졸 -4-일) 메톡시 )데칸-3-올의 특성화
ER-806158의 일부를 가온 톨루엔 중에 모든 물질이 용해될 때까지 재용해시키고, 냉각시켰다. 이는 단결정으로 얻어졌으며, 이들 중 하나를 본 연구에 사용하기 위해 선택하였다. 0.14 x 0.14 x 0.10 mm 치수를 갖는 무색 블록 결정을 매우 소량의 파라톤 (paratone) 오일을 사용하여 유리 섬유 상에 고정시켰다.
A. 단결정 X-선 회절
193 K에서 작동하는 옥스포드 크리오스트림 (Oxford Cryostream) 저온 장치가 장착된 회절분석기에 기초한 부루커 스마트 아펙스 전하 결합 소자 (Bruker SMART APEX CCD)를 사용하여 데이터를 수집하였다. 데이터를 30초 동안 프레임 당 0.3 °의 오메가 스캔을 사용하여 측정하여, 반구를 수집하였다. 총 1271 프레임 을 최대 0.76 Å의 분해능으로 수집하였다. 첫번째 50 프레임을 데이터 수집의 말기에서 재수집하여 붕괴에 대해 모니터링하였다. 스마트 (SMART) 소프트웨어 (SMART V 5.625 (NT) Software for the CCD Detector System; Bruker Analytical X-ray Systems, Madison, WI (2001))를 사용하여 셀 (Cell) 파라미터를 검색하고, 모든 관찰된 반사에 대하여 세인트 (SAINT)를 사용하여 보정 (refine)하였다. Lp 및 붕괴를 보정하는, 세인트 (SAINT) 소프트웨어 (SAINT V 6.22 (NT) Software for the CCD Detector System Bruker Analytical X-ray Systems, Madison, WI (2001)를 사용하여 데이터를 정리하였다. 구조를 SHELXS-97 프로그램 (Sheldrick, G. M. SHELXS-90, Program for the Solution of Crystal Structure, University of Gottingen, Germany, 1990.)을 사용하여 직접 방법으로 해석하고, SHELXT1-PC V 6.10 (SHELXTL 6.1 (PC-Version), Program library for Structure Solution and Molecular Graphics; Bruker Analytical X-Ray Systems, Madison, WI (2000))에 도입된, SHELX1-97 (Sheldrick, G. M. SHELXS-90, Program for the Refinement of Crystal Structure, University of Gottingen, Germany, 1997.), F2에 대해 최소자승법으로 보정하였다.
도 1에 나타낸 구조는, 시스템 부재의 분석에 의해 공간군 (space group) P1 (# 1)에서 해석하였다. 모든 비-수소 원자를 비등방성으로 보정하였다. 수소를 차분 퓨리에 (Fouier) 방법으로 확인하고, 등방성으로 보정하였다. 회절 연구에 사용된 결정은 데이터 수집 중 분해를 나타내지 않았다. 모든 도면은 50% 타원체 에서 수행되었다. 도 2는 결정내 수소결합 (점선)의 최상의 다이어그램을 보여주는, a-축을 따라 충전되어 있는 다이어그램이다.
결정 데이타 및 구조 정밀화
파장 0.71073 Å
결정계 삼사정계
공간군 P1
단위 세포 치수 a = 4.6047(11) Å α= 106.008(4)°.
b = 8.1161(19) Å β= 95.604(4)°.
c = 13.579(3) Å γ = 98.696(4)°.
부피 477.0 (2) Å3
Z 1
밀도 (계산치) 1.161 Mg/m3
흡수 계수 0.077 mm-1
F (OOO) 182
결정 크기 0.14 x 0.14 x 0.10 mm3
데이타 수집을 위한 세타 범위 1.58 내지 27.93°.
지수 범위 -6<=h<=6, -10<=k<=7, -12<=1<=17
수집된 굴절률 3293
독립 굴절률 2663 [R (int) = 0.0431]
세타 = 27.93°까지의 완성도 98.3 %
흡수 보정 없음
최대 및 최소 투과 0.9924 및 0.9893
정밀화 방법 F2에 대한 총 매트릭스 (Full-matrix) 최소자승법
데이타 / 구속 / 파라미터 2663 / 3 / 342
F2에 대한 적합도 1.006
최종 R 지수 [I > 2시그마 (I)] R1 = 0.0474, wR2 = 0.1231
R 지수 (모든 데이타) R1 = 0.0527, wR2 = 0.1275
절대 구조 파라미터 0.0 (16)
피크 및 홀의 최대 차이 0.252 및 -0.252 e.Å-3
B. 분말 X 선 회절
석영 판을 사용하여, 신타그 회절계 (Scintag Diffractometer) 상에서 일반적인 분말 회절 조건하에서 5 내지 70 도의 2-세타 범위로, 구리선 (copper radiation)을 사용하여 데이타를 수집하고 표 2에 나타낸 조건하에서 분석하였다. 배경 보정은 적용하지 않았다. 도 3은 결정형 ER-896158의 PXRD 패턴을 나타낸다. 결정형 ER-896158의 PXRD 패턴의 특징적 피크는 표 3에 기재하였다.
측정 조건
X 선 회절계 신타그
타겟 Cu
측정기 리튬 드리프트 다이오드
튜브 전압 40 kV
튜브 전류 30 mA
슬릿 DS 1.0, RS 0.3 mm, SS 2 mm 튜브, 0.5 m 측정기
스캔 속도 1°/분
단계I샘플링 0.02 "
스캔 범위 5 내지 70 "
샘플 홀더 석영 홀더 (25 mm x 25 mm)
각도계 세타-세타 (Theta-Theta), 고정 수평 마운트, 각도계
필터 전자적 (Electronic)
단색화 장치 사용하지 않음
Figure 112008007582947-pct00061
C. DSC 에 의한 결정형 ER -806158의 특성.
결정형 ER-806158의 고체상 특성은 시차 주사 열량 측정법 (DSC, 모세관 기술)에 의하여 측정하였다. 결정형 ER-806158의 5.17000 mg 샘플을 사용하여, 10℃/분에서 200℃로 가열하는 2920 DSC V2.5F 열량계 상에서 50 mL/분의 질소 퍼징하의 알루미나 팬으로 DSC를 가동하였다. 도 4는 질소의 존재하에서 +29.2 cal/g을 흡수하여 27℃ (개시 온도)에서 용융하는 결정형 ER-806158의 온도 기록도를 나타낸다. 샘플의 재가열 중 발열 반응으로 진행되는 용융이 관찰되었고, 이는 ER-806158이 액상으로 200℃에서 안정할 수 있다는 것을 나타낸다.
D. 결정형 ER -806158의 적외선 스펙트럼
결정형 ER-806158의 FTIR 흡수 스펙트럼을 순수한 결정형 분말에 대하여 기록하였다. 결정형 ER-806158의 IR 흡수 스펙트럼은 도 5에 나타내었다.

Claims (34)

  1. 하기 화학식 15의 화합물 또는 그의 염.
    <화학식 15>
    Figure 112013002198514-pct00062
    상기 식에서,
    A는 -(CH2)x-O- 또는 공유결합이고;
    n은 0 또는 1이고;
    x는 1 내지 6이고;
    R1a는 수소, C1-C6 알킬기, C3-C6 알케닐기, C3-C6 알키닐기, 포스파이트 산소 보호기 또는 포스페이트 산소 보호기이고;
    R2a와 R2b 중 하나는 H이고, 나머지는 일가의 질소 보호기이거나; R2a와 R2b가 함께 이가의 질소 보호기이고;
    A가 -(CH2)x-O-인 경우, R3a와 R3b 중 하나는 H이고, 나머지는 일가의 질소 보호기이거나; R3a와 R3b가 함께 이가의 질소 보호기이고;
    A가 공유결합인 경우, R3a 및 R3b는 C1-C6 알킬기이거나, R3a와 R3b가 함께 -(CH2)4-, -(CH2)5- 또는 -(CH2)2O(CH2)2-이고;
    R4는 C5-C12 알킬기 또는 C5-C12 알케닐기이고;
    R5는 C5-C15 알킬기 또는 C5-C15 알케닐기이며;
    R2a 및 R2b 또는 R3a 및 R3b의 질소 보호기가 Boc, Fmoc, TROC, TMS-에틸카르보닐, 시아노에틸카르보닐, 알릴옥시카르보닐, (C6H5)2C=, 테트라클로로프탈아미드 또는 아지드로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서, R2a 및 R2b에 결합된 질소 상의 보호기는 산성, 염기성, 산화 및 환원 조건으로부터 선택되는 제1 조건하에서 제거될 수 있고, R3a 및 R3b에 결합된 질소 상의 보호기는 제1 조건과 상이한 나머지 3 종류의 조건으로부터 선택되는 제2 조건하에서 제거될 수 있는 것인 화합물.
  4. 제1항에 있어서, A가 -(CH2)2-O-이고, n이 0이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물.
  5. 제4항에 있어서, 하기 화학식 ER-820842의 화합물.
    <화학식 ER-820842>
    Figure 112008007582947-pct00063
  6. 제1항에 있어서, A가 -(CH2)2-O-이고, n이 1이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물.
  7. 제6항에 있어서, 하기 화학식 ER-819344의 화합물.
    <화학식 ER-819344>
    Figure 112008007582947-pct00064
  8. 제1항에 있어서, A가 공유결합이고, n이 0이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물.
  9. 하기 화학식 ER-819385의 화합물 또는 그의 염.
    <화학식 ER-819385>
    Figure 112011040439400-pct00065
  10. 제1항에 있어서, A가 공유결합이고, n이 0이고, R3a 및 R3b가 각각 이소프로필이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물.
  11. 제10항에 있어서, 하기 화학식 ER-820116의 화합물.
    <화학식 ER-820116>
    Figure 112008007582947-pct00066
  12. 삭제
  13. 하기 화학식 16의 화합물 또는 그의 염.
    <화학식 16>
    Figure 112013002198514-pct00067
    상기 식에서,
    n은 0 또는 1이고;
    R1a는 수소, C1-C6 알킬기, C3-C6 알케닐기, C3-C6 알키닐기, 포스파이트 산소 보호기 또는 포스페이트 산소 보호기이고;
    R2a와 R2c 중 하나는 H이고, 나머지는 일가의 질소 보호기 또는 -C(O)CH2C(O)R6거나; R2a와 R2c가 함께 이가의 질소 보호기이고;
    R4는 C5-C12 알킬기 또는 C5-C12 알케닐기이고;
    R5 및 R6는 독립적으로 C5-C15 알킬기 또는 C5-C15 알케닐기이며;
    R2a 및 R2c의 질소 보호기는 Boc, Fmoc, TROC, TMS-에틸카르보닐, 시아노에틸카르보닐, 알릴옥시카르보닐, (C6H5)2C=, 테트라클로로프탈아미드 또는 아지드로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
  14. 삭제
  15. 제13항에 있어서, n이 1이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물.
  16. 제13항에 있어서, n이 1이고, R1a가 알릴이고, R2a가 수소이고, R2c가 Boc이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물.
  17. 제16항에 있어서, 하기 화학식 ER-819409의 화합물.
    <화학식 ER-819409>
    Figure 112008007582947-pct00068
  18. 제13항에 있어서, n이 1이고, R2a가 수소이고, R2c가 -C(O)CH2C(O)R6이고, R4 가 C7 알킬이고; R5가 C11 알킬이고, R6가 C11 알킬인 화합물.
  19. 제13항에 있어서, n이 0이고, R1a가 알릴이고, R2a가 수소이고, R2c가 Boc이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물.
  20. 제19항에 있어서, 하기 화학식 ER-821843의 화합물.
    <화학식 ER-821843>
    Figure 112008007582947-pct00069
  21. 삭제
  22. 삭제
  23. 제13항에 있어서, n이 0이고, R1a가 알릴이고, R2a가 수소이고, R2c가 -C(O)CH2C(O)R6이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬이고, R6가 C11 알킬인 화합물.
  24. 제18항에 있어서, 하기 화학식 ER-807285의 화합물.
    <화학식 ER-807285>
    Figure 112011040439400-pct00071
  25. 하기 화학식 17의 화합물 또는 그의 염.
    <화학식 17>
    Figure 112011040439400-pct00072
    상기 식에서,
    R은 수소 또는 C1-C6 알킬기이고;
    R2a 및 R2b는 각각 독립적으로 H 및 일가 질소 보호기로 이루어진 군으로부터 선택되거나, R2a와 R2b가 함께 이가의 질소 보호기이고;
    R4는 C5-C12 알킬기 또는 C5-C12 알케닐기이고;
    R5는 C5-C15 알킬기 또는 C5-C15 알케닐기이다.
  26. 제25항에 있어서, R2a 및 R2b의 질소 보호기가 Boc, Fmoc, TROC, TMS-에틸카르보닐, 시아노에틸카르보닐, 알릴옥시카르보닐, (C6H5)2C=, 테트라클로로프탈아미드 또는 아지드로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 것인 화합물.
  27. 제25항에 있어서, R이 수소이고, R2a 및 R2b가 수소이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물.
  28. 제27항에 있어서, 하기 화학식 ER-819120의 화합물.
    <화학식 ER-819120>
    Figure 112008007582947-pct00073
  29. 제25항에 있어서, R이 수소이고, R2a가 수소이고, R2b가 질소 보호기이고, R4가 C7 알킬이고, R5가 C11 알킬인 화합물.
  30. 제29항에 있어서, 하기 화학식 ER-819302의 화합물.
    <화학식 ER-819302>
    Figure 112008007582947-pct00074
  31. 하기 화학식 18의 화합물.
    <화학식 18>
    Figure 112008007582947-pct00075
    상기 식에서,
    R4는 C5-C12 알킬기 또는 C5-C12 알케닐기이고;
    R5는 C5-C15 알킬기 또는 C5-C15 알케닐기이다.
  32. 제31항에 있어서, 하기 화학식 ER-819059의 화합물.
    <화학식 ER-819059>
    Figure 112008007582947-pct00076
  33. 삼사정계 및 P1 공간군 (space group)을 갖는 결정형 ER-806158인 (R)-1-(((R)-4,5-디히드로-2-페닐옥사졸-4-일)메톡시)데칸-3-올.
  34. 제33항에 있어서, 하기 결정 격자 파라미터를 특징으로 하는 결정형 ER-806158인 (R)-1-(((R)-4,5-디히드로-2-페닐옥사졸-4-일)메톡시)데칸-3-올.
    a = 4.6047(11)Å α= 106.008(4)°
    b = 8.1161(19)Å β= 95.604(4)°
    c = 13.579(3)Å γ= 98.696(4)°
    부피 = 477.0(2) Å3 및 Z = 1.
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