KR101210596B1 - 설피린을 포함하는 수의학적 조성물의 용도 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 설피린, 보다 바람직하게는, 설피린 및 항히스타민제를 포함하는 수의학적 조성물의 새로운 용도에 관한 것으로, 본 발명에 따른 조성물은 가축의 백신 접종 후 발생하는 부작용, 특히 돼지의 기립 지연 및 식욕 감퇴를 줄일 수 있을 뿐만 아니라, 백신의 항체 형성에 부정적 영향을 주지 않고, 장기적으로 항체 형성에 도움이 된다.

Description

설피린을 포함하는 수의학적 조성물의 용도{Use of veterinary composition containing sulpyrine}
본 발명은 설피린을 포함하는, 보다 바람직하게는 설피린 및 항히스타민제를 포함하는 수의학적 조성물의 새로운 용도에 관한 것이다.
가축의 질병을 예방하기 위하여 매우 다양한 백신이 개발되어 사용되고 있으나, 백신의 접종에 의해 여러 가지 부작용이 나타나고 있다. 이러한 부작용의 원인으로는 몇몇 생백신의 경우 불완전한 병원성의 제거로 잔존하는 병원성 때문에 특히 면역능이 저하된 개체에서 심한 부작용을 보이거나, 불활화 백신의 경우 첨가된 오일 유래의 면역보조제(어쥬번트)에 의한 경우 등이 있으나 그 원인이 명확히 밝혀진 것은 아니다. 이러한 부작용의 예로서 접종에 의한 국소적 반응에 의해 발생하는 부종, 염증, 괴사 등의 부작용과 전신적 접종 반응에 의해 발생하는 스트레스, 면역 이상 반응, 발열 등으로 인한 식욕 감퇴, 기립 지연, 행동 저하, 발적, 호흡 곤란, 신경의 이상 증상, 폐사 등을 들 수 있다. 이러한 부작용 때문에 백신 접종을 기피하는 현상이 종종 나타난다.
특히, 성장 속도가 중요한 돼지, 소, 닭, 오리 등의 경우 백신 접종 스트레스를 조절할 필요성이 매우 크다. 예를 들어, 양돈 농가의 경우 돼지열병, 돼지 유행성 설사병, 돼지 전염성 위장염 등의 근절을 위하여 이러한 질병에 대한 백신의 접종이 필수적으로 실시되어야 하지만, 백신이 접종된 돼지에 발생하는 식욕 저하, 기립 지연, 식욕 전폐 등의 부작용 때문에 일부 양돈 농가에서는 돼지열병 백신의 접종의 중요성을 알면서도 접종을 꺼리고 있다. 특히, 돼지열병의 경우에는 불완전하게 제거된 생백신이 사용됨에 따라 부작용이 더욱 심각하게 나타날 수 있으며, 이 때문에 농가에서는 접종을 매우 꺼리며, 돼지 유행성 설사병, 돼지 전염 성위장염 등의 경우에는 불활화 백신의 면역보조제로 인한 부작용 때문에 접종이 꺼려지는 것으로 추측된다.
따라서 가축에게 백신이 접종된 후에도 백신의 부작용이 발생하지 않거나 감소시킬 수 있는 방법이 고안될 필요가 있다.
따라서 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 가축 백신의 접종 시 발생하는 부작용을 최소화하는 방법 및 이러한 작용을 하는 수의학적 조성물을 제공하는 것이다.
또한 본 발명이 이루고자 하는 다른 기술적 과제는 접종 횟수 등을 줄여 종국에는 백신 접종 기피 현상을 줄이기 위한 가축 백신 접종 시 백신의 항체 형성을 촉진하는 방법 및 이러한 방법을 위한 수의학적 조성물을 제공하는 것이다.
상기 기술적 과제를 달성하기 위하여, 본 발명은 설피린을 유효성분으로 포함하며, 백신에 첨가하여 사용하는 것을 특징으로 하는 백신 접종에 의해 발생하는 동물의 스트레스 감소용 수의학적 조성물을 제공한다.
종래에는 동결건조된 또는 농축된 백신을 동물에 접종하기 위하여 주사용 생리식염수, 멸균 증류수, 주사용 증류수 등을 혼합하여 주사하였고, 희석할 필요가 없는 액제 백신은 그대로 주사하였다. 이 경우 종종 가축의 기립 지연, 식욕 감퇴 등의 부작용이 발생하였고, 그 결과 가축이 사료를 섭취하는 양이 줄어들어 가축의 성장 속도가 매우 둔화하였다.
본 발명자들은 이러한 백신 접종 시 동결건조된, 농축된 백신 또는 그대로 투여하는 액제 백신에 첨가제로 설피린, 보다 바람직하게는, 설피린 및 항히스타민제를 혼합하여 접종할 경우 기립 지연, 식욕 감퇴 등의 가축 백신 접종 부작용이 획기적으로 줄어든다는 놀라운 사실을 발견하여 본 발명을 완성하였다.
따라서 본 발명의 수의학적 조성물은 소, 말, 돼지, 닭, 개, 오리, 양, 염소, 고양이 등을 포함하는, 하지만 이에 한정되지 않는, 동물의 백신 접종 시 발생하는 스트레스, 특히, 소 또는 돼지의 식욕 감퇴를 개선하는데 매우 유용하며, 특히, 백신의 기본적 목적인 항체 생성률을 방해하지 않을뿐더러 오히려 도움이 되어 종국에는 백신의 접종 횟수, 백신의 투여량 등을 줄일 수 있을 것으로 생각된다.
본 발명의 수의학적 조성물은 동결건조 백신, 농축된 백신 등에 첨가하여 접종할 수 있도록 바람직하게 액상 제형이나, 이에 한정되는 것은 아니며, 분말 제형, 과립 제형, 정제 제형 등일 수도 있다. 본 발명의 수의학적 조성물이 액상 제형이 아닐 경우에는 생리식염수, 멸균 증류수 또는 주사용 증류수 등과 혼합하여 사용될 수 있다.
본 발명의 수의학적 조성물은 상기 목적을 달성하기 위한 유효성분으로 설피린, 보다 바람직하게는, 설피린 및 동물에게 투여 가능한 것으로 당업계에서 널리 알려진 항히스타민제를 포함한다. 이러한 유효성분은 백신의 항체 생성에 긍정적 영향을 미치면서 상기 백신 접종의 스트레스를 개선하는데 도움이 된다.
본 발명의 수의학적 조성물에 포함되는 바람직한 항히스타민제로는 클로르페니라민, 디펜히드라민, 트리페레나민, 프로메타진 또는 이들의 수의학적으로 허용 가능한 염이 사용될 수 있다. 보다 바람직하게는, 클로르페니라민 말레이트가 사용될 수 있다.
본 발명의 수의학적 조성물은 또한 카페인을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 수의학적 조성물은 또한 통상적인 주사용 희석액에 포함되는 정제수, 에탄올, 가용화제, 전해질, pH 조정제, 등장화제 등을 포함할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
바람직하게, 본 발명의 수의학적 조성물은 보존제를 포함하지 않는다. 이러한 보존제에는 예를 들어, 수의학적 조성물의 보존제로 통상적으로 사용되는 벤질알코올, 안식향산, 안식향산나트륨, 염화벤잘코늄, 염화벤제토늄, 클로르부탄올, 소르빈산, 소르빈산칼륨, 파라벤, 페놀 등이 포함되나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보존제를 포함하는 본 발명의 수의학적 조성물이 생백신 또는 불활화백신과 혼합되게 되면 백신의 안정성에 부정적 영향을 주게 되고, 결과적으로 가축 내 항체 생성에 부정적인 영향을 줄 수 있다.
다만, 상기 보존제를 포함하지 않는 본 발명의 수의학적 조성물은 보다 바람직한 일 예로 언급되는 것일 뿐이며, 예를 들어, 설피린, 또는 설피린 및 항히스티민제를 유효성분으로 포함하고, 본 발명에서 언급한 방법으로 본 발명의 목적을 달성하는 용도로 사용된다면 설령 보존제를 포함하고 있더라도 해당 조성물은 본 발명의 범주에 포함된다.
또한, 본 발명에 따른 수의학적 조성물은 그 pH가 5.6 내지 8.4인 것이 더욱 바람직하다. pH가 5.6 미만이거나 8.4를 초과하는 수의학적 조성물을 사용할 경우 백신의 안정성(예를 들어, 생백신 또는 약독화 백신의 사멸 등)에 부정적 영향을 미치게 되고, 결과적으로 백신의 항체 형성에 나쁜 영향을 미친다.
본 발명의 수의학적 조성물과 혼합되어 사용될 수 있는 백신으로는 돼지 열병 예방 백신, PED 백신(돼지 유행성 설사 예방 백신), TGE 백신(돼지 전염성 위장염 예방 백신), 돈단독 예방 백신, 돼지 로타 백신, 돼지 파보 백신, 돼지 써코바이러스 백신 또는 이들의 혼합 백신 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
특히, 본 발명의 수의학적 조성물과 혼합되어 접종되는 백신은 돼지 열병 백신, 돈단독 백신, 돼지열병-돈단독 혼합백신, 및 PED-TGE 혼합백신(돼지 유행성 설사 예방 및 돼지 전염성 위장염 예방의 혼합백신)인 것이 바람직한데, 이 경우 본 발명의 수의학적 조성물이 돼지의 식욕 감퇴, 돼지의 기립 지연을 개선하는 효과가 매우 탁월하다.
본 발명은 또한 본 발명에 따른 수의학적 조성물과 백신을 포함하는 것을 특징으로 하는 키트(kit)를 제공한다.
본 발명은 또한 백신과 혼합된 본 발명에 따른 수의학적 조성물을 인간 이외의 동물에 투여하는 것을 특징으로 하는 백신 접종에 의해 발생하는 동물, 바람직하게는 돼지의 식욕 감퇴 또는 기립 지연을 개선하는 방법을 제공한다.
본 발명에 따른 방법에 있어 설피린은 돼지 1 두당 10 내지 200 mg의 투여량으로 투여되는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게 돼지 1 두당 20 내지 100 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 항히스타민제의 경우 투여량은 항히스타민제의 구체적 종류에 따라 다를 수 있으며, 클로르페니라민 말레이트일 경우 투여량은 돼지 1 두당 0.1 내지 5 mg 투여되는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게 돼지 1 두당 0.3 내지 1 mg의 투여량으로 투여되는 것이 바람직하다.
본 발명에 따른 수의학적 조성물을 백신과 혼합하여 접종함으로써 가축의 백신 접종 스트레스, 바람직하게는 돼지의 식욕 감퇴 및 기립 지연을 획기적으로 개선할 수 있을 뿐만 아니라, 백신 접종의 본래 목적인 항체 형성률을 증가시킬 수 있다.
본 명세서에 첨부된 도면은 본 발명의 바람직한 실시예 또는 실시예의 평가 결과를 예시하는 것이며, 발명의 상세한 설명과 함께 본 발명의 기술 사상의 이해를 돕기 위한 것이므로 하기 도면에 기재된 사항에만 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
도 1은 자돈에 돼지열병 생백신을 접종한 후 야기되는 항체가 변화를 효소면역항체검사법(ELISA)를 이용하여 측정한 결과(실험예 9, S/P 비율)이다.
도 2는 설피린 함유 조성물의 혼합에 따른 생백신의 안정성을 돼지열병 생백신의 바이러스의 사멸 여부(역가)로 측정한 결과(실험예 10, log10)이다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석돼서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
<실시예 1>
다음과 같은 조성으로 본 발명의 수의학적 조성물을 제조하였으며, 항히스타민제로 클로르페니라민 말레이트를 사용하였다. 즉, 설피린 500 mg, 클로르페니라민 말레이트 10 mg 및 카페인 10 mg에 주사용 증류수를 혼합하여 총 부피가 1 ml가 되도록 본 발명의 수의학적 조성물을 제조하였다.
* 설피린 ------------------------- 500 mg
* 클로르페니라민 말레이트 -------- 10 mg
* 카페인 ------------------------- 10 mg
* 주사용 증류수 ------------------ to 1 ml
하기 실험들에서, 필요한 경우 통상적으로 사용되는 동결건조 백신 희석제(멸균 증류수 또는 주사용 증류수)로 백신을 희석하여 백신 조성물의 용량을 20 ml로 조정하고, 상기 본 발명에 따른 조성물과 혼합하여(즉, 백신 조성물 20 ml와 본 발명 조성물 1 ml를 혼합하여) 해당 가축에 접종한 후에 본 발명에 따른 수의학적 조성물의 영향을 평가하였다.
<실험예 1> 육성돈의 PED-TGE 혼합백신 접종 후의 식욕 감퇴 억제
본 발명에 따른 수의학적 조성물을 혼합한 백신을 접종 받은 군을 실시예 1, 통상적인 백신을 접종 받은 군을 비교예 1, 백신을 접종 받지 않은 군을 비교예 2로 설정하였다. 각각 70일령의 육성돈 5마리를 대상으로 하였다.
각각 분만 6주 전의 육성돈 5마리를 대상으로 하여 1차 접종한 후 식욕 개시 시간을 측정하고, 그로부터 3주 후에 2차 접종하고 다시 식욕 개시 시간을 측정하였다. 백신을 접종하지 않는 비교예 2의 경우에는 실시예 1 및 비교예 1과 같은 시기에 육성돈 5마리를 대상으로 하여 식욕 개시 시간을 측정하였다.
이때, PED-TGE 혼합백신으로서 힘백 돈사방-PT((주)고려비엔피)를 사용하였다.
접종 후 1시간 내에 사료를 먹은 경우에는 10점, 접종 후 2시간 내에 사료를 먹은 경우에는 8점, 접종 후 3시간 내에 사료를 먹은 경우에는 6점, 접종 후 4시간 내에 사료를 먹은 경우에는 4점, 접종 후 5시간 내에 사료를 먹은 경우에는 2점, 접종 후 6시간 이후에 사료를 먹은 경우에는 0점으로 처리하여, 각각의 육성돈의 식욕 개시 시간을 점수로 환산하였다.
1차 접종 후의 식욕 개시 시간의 측정 결과에 (100점으로 환산하기 위해) 2 또는 2.5를 곱한 값을 하기 표 1에 나타내었고, 2차 접종 후의 식욕 개시 시간의 측정 결과에 (100점으로 환산하기 위해) 2를 곱한 값을 하기 표 2에 나타냈다. 다만, 폐사가 발생한 경우에는 생존한 육성돈의 점수를 합한 후, 생존한 마리수로 나눈 후 10을 곱하여 계산하였다.
실시예 1
(1마리 폐사함)		 비교예 1 비교예 2
(미접종)
1차 접종 후
1시간 이내		 1 마리 2 마리
1차 접종 후
2시간 이내		 3 마리 1 마리
1차 접종 후
3시간 이내		 2 마리
1차 접종 후
4시간 이내		 1 마리
1차 접종 후
5시간 이내		 1 마리
1차 접종
6시간 이후		 2 마리
1차 접종
24시간 이후		 1 마리
환산 점수 85 점 12 점 80 점
실시예 1 비교예 1 비교예 3(미접종)
(2마리 폐사함)
2차 접종 후
1시간 이내		 2 마리 2 마리
2차 접종 후
2시간 이내		 2 마리 1 마리
2차 접종 후
3시간 이내		 1 마리
2차 접종 후
4시간 이내		 1 마리
2차 접종 후
5시간 이내
2차 접종
6시간 이후		 2 마리
2차 접종
24시간 후		 1 마리
환산 점수 90 점 20 점 93 점
상기 표 1 및 2에 나타나는 바와 같이, 비교예 1은 1차 접종 후의 식욕 개시 시간에 대한 환산 점수가 12점, 2차 접종 후의 식욕 개시 시간에 대한 환산 점수가 20점인 반면, 본 발명에 따른 수의학적 조성물이 혼합되어 투여된 실시예 1은 1차 접종 후의 식욕 개시 시간에 대한 환산 점수가 85점, 2차 접종 후의 식욕 개시 시간에 대한 환산 점수가 90점으로 백신을 접종하지 않아서 접종 후의 스트레스가 발생하지 않은 비교예 2의 환산 점수와 유사하였다. 즉, 실시예 1은 본 발명의 수의학적 조성물을 사용함으로써 PED-TGE 혼합백신 접종 스트레스를 줄일 수 있었고, 그 결과 육성돈이 사료를 먹기 시작하는 시간(식욕 개시 시간)을 앞당긴 것으로 볼 수 있다.
실시예 1의 경우 1마리가 폐사하였고, 비교예 2의 경우 2마리가 폐사하였는데, 폐사 원인은 백신 또는 본 발명의 수의학적 조성물에 의한 것이 아니라, 위축 및 폐렴인 것으로 부검 결과 밝혀졌다.
따라서, PED-TGE 혼합백신에 본 발명의 수의학적 조성물을 혼합하여 동물에 접종하면 백신의 접종 후에 발생하는 식욕 감퇴를 억제할 수 있음을 알 수 있다.
<실험예 2> 자돈의 돼지열병 생백신 접종 후의 식욕 감퇴 억제
본 발명에 따른 수의학적 조성물을 혼합한 백신을 접종 받은 군을 실시예 1, 통상적인 백신을 접종 받은 군을 비교예 1, 백신을 접종 받지 않은 군을 비교예 2로 설정하였다. 각각 35일령 자돈 4마리를 대상으로 하여 1차 접종한 후 식욕 개시 시간을 측정하고, 그로부터 3주 후에 2차 접종하고 다시 식욕 개시 시간을 측정하였다. 백신을 접종하지 않는 비교예 2의 경우에는, 실시예 1 및 비교예 1과 같은 시기에 자돈 4마리를 대상으로 하여 식욕 개시 시간을 측정하였다.
상기의 실험예 1과 같은 방법으로 1차 접종 후에 측정한 식욕 개시 시간을 점수로 환산한 후 2.5를 곱한 값을 하기의 표 3에 나타내고 2차 접종 후에 측정한 식욕 개시 시간을 점수로 환산한 후 2.5를 곱한 값을 하기의 표 4에 나타냈다.
실시예 1 비교예 1 비교예 2
(미접종)
1차 접종 후
1시간 이내
1차 접종 후
2시간 이내		 2 마리 3 마리
1차 접종 후
3시간 이내		 2 마리 1 마리
1차 접종 후
4시간 이내		 1 마리
1차 접종 후
5시간 이내		 1 마리
1차 접종
6시간 이후
1차 접종
24시간 후		 2 마리
환산 점수 70 점 15 점 75 점
실시예 1 비교예 1 비교예 2
(미접종)
2차 접종 후
1시간 이내		 2 마리 3 마리
2차 접종 후
2시간 이내		 1 마리 1 마리
2차 접종 후
3시간 이내		 1 마리 1 마리
2차 접종 후
4시간 이내
2차 접종 후
5시간 이내		 2 마리
2차 접종
6시간 이후
2차 접종
24시간 이후		 1 마리
환산 점수 85 점 20 점 95 점
상기 표 3 및 4에 나타나는 바와 같이, 비교예 1은 1차 접종 후의 식욕 개시 시간에 대한 환산 점수가 15점, 2차 접종 후의 식욕 개시 시간에 대한 환산 점수가 20점이었다. 그리나, 본 발명의 실시예 1은 1차 접종 후의 식욕 개시 시간에 대한 환산 점수가 70점, 2차 접종 후의 식욕 개시 시간에 대한 환산 점수가 85점으로 접종하지 않아서 접종 후의 스트레스가 발생하지 않은 비교예 2의 환산 점수와 유사하였다. 즉, 실시예 1은 본 발명의 수의학적 조성물을 사용함으로써 돼지열병 생백신 접종에 의한 스트레스를 줄일 수 있었고, 그 결과 자돈이 사료를 먹기 시작하는 시간(식욕 개시 시간)을 앞당긴 것으로 볼 수 있다. 따라서, 돼지열병 생백신에 본 발명의 수의학적 조성물을 혼합하여 동물에 접종하면 백신의 접종 후에 발생하는 식욕 감퇴를 억제할 수 있음을 알 수 있다.
<실험예 3> 자돈의 돼지열병-돈단독 혼합백신 접종 후의 식욕 감퇴 억제
상기 실험예 2와 같이, 각각 40일령 자돈 10마리를 대상으로 하여 1차 접종한 후 식욕 개시 시간을 측정하고, 그로부터 20일 후에 2차 접종하고 다시 식욕 개시 시간을 측정하였다. 백신을 접종하지 않는 비교예 2의 경우에는, 실시예 1 및 비교예 1과 같은 시기에 자돈 5마리를 대상으로 하여 식욕 개시 시간을 측정하였다. 접종 방법은 상기 실험예 2와 동일하다.
상기 실험예 1과 같은 방법으로 1차 접종 후에 측정한 식욕 개시 시간을 점수로 환산한 값을 하기의 표 5에 나타내고 2차 접종 후에 측정한 식욕 개시 시간을 점수로 환산한 값을 하기의 표 6에 나타냈다. 단, 비교예 2의 경우에는 환산 점수에 2를 곱한 값을 표 5 및 6에 나타냈다. 그리고, 폐사가 발생한 경우에는 생존한 자돈의 점수를 합한 후, 생존한 마리수로 나눈 후 10을 곱하여 계산하였다.
실시예 1 비교예1 비교예3
(미접종)
1차 접종 후
1시간 이내
1차 접종 후
2시간 이내		 4 마리 3 마리
1차 접종 후
3시간 이내		 5 마리 1 마리 2 마리
1차 접종 후
4시간 이내		 1 마리 2 마리
1차 접종 후
5시간 이내		 1 마리
1차 접종
6시간 이후		 2 마리
1차 접종
24시간 후		 4 마리
환산 점수 66 점 16 점 72 점
실시예 1 비교예1
(3 마리 폐사함)		 비교예3
(미접종)
2차 접종 후
1시간 이내		 5 마리
2차 접종 후
2시간 이내		 3 마리 3 마리
2차 접종 후
3시간 이내		 1 마리 2 마리 2 마리
2차 접종 후
4시간 이내		 1 마리 1 마리
2차 접종 후
5시간 이내		 2 마리
2차 접종
6시간 이후		 1 마리
2차 접종
24시간 이후		 1 마리
환산 점수 84 점 29 점 72 점
상기 표 5 및 6의 결과에 따르면, 비교예 1은 1차 접종 후의 식욕 개시 시간에 대한 환산 점수가 16점, 2차 접종 후의 식욕 개시 시간에 대한 환산 점수가 29점이었다. 그리나, 본 발명의 실시예 1은 1차 접종 후의 식욕 개시 시간에 대한 환산 점수가 66점으로서 접종하지 않아서 접종 후의 스트레스가 발생하지 않은 비교예 2의 환산 점수보다 조금 낮았으나, 2차 접종 후의 식욕 개시 시간에 대한 환산 점수가 84점으로서 접종하지 않아서 접종 후의 스트레스가 발생하지 않은 비교예 2의 환산 점수보다 오히려 높았다. 즉, 실시예 1은 본 발명의 수의학적 조성물을 사용함으로써 돼지열병-돈단독 혼합백신의 2차 접종에 의한 스트레스를 줄일 수 있었고, 그 결과 자돈이 사료를 먹기 시작하는 시간(식욕 개시 시간)을 앞당긴 것으로 볼 수 있다. 비교예 1의 경우 3마리가 폐사하였는데, 폐사 원인은 백신 또는 본 발명의 수의학적 조성물에 의한 것이 아니라, 위축 및 폐렴인 것으로 부검 결과 밝혀졌다.
따라서, 돼지열병-돈단독 혼합백신에 본 발명의 수의학적 조성물을 희석하여 동물에 접종하면 백신의 접종 후에 발생하는 식욕 감퇴를 억제할 수 있음을 알 수 있다.
<실험예 4> 임신모돈의 PED-TGE 혼합백신 접종 후의 기립 지연 개선
본 발명에 따른 수의학적 조성물을 혼합한 백신을 접종 받은 군을 실시예 1, 통상적인 백신을 접종 받은 군을 비교예 1, 백신을 접종 받지 않은 군을 비교예 2로 설정하였다. 각각 분만 6주 전의 임신모돈(妊娠母豚) 5마리를 대상으로 하여 상기 실험예 1과 같은 방법으로 1차 접종한 후 기립 개시 시간을 측정하고, 그로부터 3주 후에 2차 접종하고 다시 기립 개시 시간을 측정하였다. 백신을 접종하지 않은 비교예 2의 경우에는, 실시예 1 및 비교예 1과 같은 시기에 임신모돈 5마리를 대상으로 하여 기립 개시 시간을 측정하였다.
접종 후 1시간 내에 기립한 경우에는 10점, 접종 후 2시간 내에 기립한 경우에는 8점, 접종 후 3시간 내에 기립한 경우에는 6점, 접종 후 4시간 내에 기립한 경우에는 4점, 접종 후 5시간 내에 기립한 경우에는 2점, 접종 후 6시간 이후에 기립한 경우에는 0점으로 처리하여, 각각의 임신모돈의 기립 개시 시간을 점수로 환산하였다.
1차 접종 후 측정한 기립 개시 시간 기초하여 점수로 환산한 후 2를 곱한 값을 하기의 표 7에 나타내고, 2차 접종 후 측정한 시립 시간에 기초하여 점수로 환산한 후 2를 곱한 값을 하기의 표 8에 나타냈다.
이때, PED-TGE 혼합백신으로서 힘백 돈사방-PT((주)고려비엔피)를 사용하였다.
실시예 1 비교예 1 비교예 2
(미접종)
1차 접종 후
1시간 이내		 2 마리 5 마리
1차 접종 후
2시간 이내		 2 마리 1 마리
1차 접종 후
3시간 이내		 1 마리 1 마리
1차 접종 후
4시간 이내		 3 마리
1차 접종 후
5시간 이내
1차 접종
6시간 이후
환산 점수 84 점 52 점 100 점
실시예 1 비교예 1 비교예 2
(미접종)
2차 접종 후
1시간 이내		 3 마리 5 마리
2차 접종 후
2시간 이내		 1 마리 2 마리
2차 접종 후
3시간 이내		 1 마리 1 마리
2차 접종 후
4시간 이내		 2 마리
2차 접종 후
5시간 이내
2차 접종
6시간 이후
환산 점수 88 점 60 점 100 점
상기 표 7 및 8의 결과에 따르면, 비교예 1은 1차 접종 후의 기립 개시 시간에 대한 환산 점수가 52점, 2차 접종 후의 기립 개시 시간에 대한 환산 점수가 60점이었다. 실시예 1은 1차 접종 후의 기립 개시 시간에 대한 환산 점수가 84점, 2차 접종 후의 기립 개시 시간에 대한 환산 점수가 88점으로서, 접종하지 않은 비교예 2에 비해서는 다소 점수가 낮은 편이었으나, 비교예 1에 비해 비교적 높은 점수였다.
즉, PED-TGE 혼합백신에 혼합한 본 발명의 수의학적 조성물을 접종한 임신모돈의 경우 PED-TGE 혼합백신 접종에 의한 스트레스가 줄어들어 접종 후의 기립 지연이 개선된 것으로 볼 수 있다.
<실험예 5> 육성돈의 PED-TGE 혼합백신 접종 후의 기립 지연 개선
각각 70일령의 육성돈 5 마리를 대상으로 하여, 상기 실험예 4와 같은 방법으로 1차 접종한 후 기립 개시 시간을 측정하고, 그로부터 20일 후에 2차 접종한 후 다시 기립 개시 시간을 측정하였다. 백신을 접종하지 않은 비교예 2의 경우에는 실시예 1 및 비교예 1과 같은 시기에 육성돈 5 마리를 대상으로 하여 기립 개시 시간을 측정하였다.
상기 실험예 4와 같은 방법으로, 1차 접종 후 측정한 기립 개시 시간을 점수로 환산한 후 2를 곱한 값을 하기의 표 9에 나타내고, 2차 접종 후 측정한 기립 시간을 점수로 환산한 후 2를 곱한 값을 하기의 표 10에 나타냈다. 다만, 폐사가 발생한 경우에는 생존한 임신모돈의 점수를 합한 후, 생존한 마리 수로 나눈 후 10을 곱하여 계산하였다.
실시예 1
(1마리 폐사함)		 비교예 1 비교예 2
(미접종)
1차 접종 후
1시간 이내		 2 마리 3 마리
1차 접종 후
2시간 이내		 2 마리 1 마리
1차 접종 후
3시간 이내		 2 마리 1 마리
1차 접종 후
4시간 이내		 1 마리
1차 접종 후
5시간 이내		 1 마리
1차 접종
6시간 이후		 1 마리
환산 점수 90 점 36 점 88 점
실시예 1 비교예 1 비교예 2(미접종)
(2마리 폐사함)
2차 접종 후
1시간 이내		 3 마리 3 마리
2차 접종 후
2시간 이내		 1 마리 1 마리
2차 접종 후
3시간 이내		 1 마리
2차 접종 후
4시간 이내
2차 접종 후
5시간 이내		 2 마리
2차 접종
6시간 이후
2차 접종
24시간 후		 1 마리
환산 점수 95 점 36 점 100 점
상기 표 9 및 10의 결과에 따르면, 비교예 1은 1차 접종 후의 기립 개시 시간에 대한 환산 점수, 2차 접종 후의 기립 개시 시간에 대한 환산 점수가 각각 36점이었다. 반면, 실시예 1은 1차 접종 후의 기립 개시 시간에 대한 환산 점수가 90점, 2차 접종 후의 기립 개시 시간에 대한 환산 점수가 95점으로서, 접종하지 않은 비교예 2의 점수와 유사한 점수를 보이며, 비교예 1에 비해 월등히 높은 점수를 보였다.
실시예 1의 경우 1마리가 폐사하였고, 비교예 2의 경우 2마리가 폐사하였는데, 폐사 원인은 백신 또는 본 발명의 수의학적 조성물에 의한 것이 아니라, 위축 및 폐렴인 것으로 부검 결과 밝혀졌다.
즉, PED-TGE 혼합백신에 희석한 본 발명의 수의학적 조성물을 접종한 육성돈의 경우 PED-TGE 혼합백신 접종에 의한 스트레스가 줄어들어 접종 후의 기립 지연이 개선된 것으로 볼 수 있다.
<실험예 6> 자돈의 돼지열병 생백신 접종 후의 기립 지연 개선
각각 35일령 자돈 4마리를 대상으로 하여 상기 실험예 2와 같은 방법으로 1차 접종한 후 기립 개시 시간을 측정하고, 그로부터 3주 후에 2차 접종하고 다시 기립 개시 시간을 측정하였다. 백신을 접종하지 않은 비교예 2의 경우에는 실시예 1 및 비교예 1과 같은 시기에 자돈 4마리를 대상으로 하여 기립 개시 시간을 측정하였다.
상기 실험예 4와 같은 방법으로 1차 접종 후 측정한 기립 개시 시간을 점수로 환산한 후 2.5를 곱한 값을 하기의 표 11에 나타내고, 2차 접종 후 측정한 기립 시간을 점수로 환산한 후 2.5를 곱한 값을 하기의 표 13에 나타냈다.
실시예 1 비교예 1 비교예 2
(미접종)
1차 접종 후
1시간 이내		 1 마리 2 마리
1차 접종 후
2시간 이내		 3 마리 2 마리
1차 접종 후
3시간 이내		 1 마리
1차 접종 후
4시간 이내
1차 접종 후
5시간 이내		 2 마리
1차 접종
6시간 이후
1차 접종
24시간 후		 1 마리
환산 점수 85 점 25 점 90 점
실시예 1 비교예 1 비교예 2
(미접종)
2차 접종 후
1시간 이내		 2 마리 3 마리
2차 접종 후
2시간 이내		 2 마리 1 마리
2차 접종 후
3시간 이내		 1 마리
2차 접종 후
4시간 이내		 1 마리
2차 접종 후
5시간 이내		 1 마리
2차 접종
6시간 이후		 1 마리
환산 점수 90 점 30 점 95 점
상기 표 11 및 12의 결과에 따르면, 비교예 1은 1차 접종 후의 기립 개시 시간에 대한 환산 점수가 25점, 2차 접종 후의 기립 개시 시간에 대한 환산 점수가 30점이었다. 실시예 1은 1차 접종 후의 기립 개시 시간에 대한 환산 점수가 85점, 2차 접종 후의 기립 개시 시간에 대한 환산 점수가 90점으로서, 접종하지 않은 비교예 2에 비해서는 점수가 약간 낮은 편이었으나, 비교예 1에 비해 상당히 높은 점수였다.
즉, 돼지열병 생백신에 희석한 본 발명의 수의학적 조성물을 접종한 자돈의 경우 돼지열병 생백신 접종에 의한 스트레스가 줄어들어 접종 후의 기립 지연이 상당히 개선되었음을 알 수 있다.
<실험예 7> 자돈의 돼지열병-돈단독 혼합백신 접종 후의 기립 지연 개선
본 발명에 따른 수의학적 조성물을 혼합한 백신을 접종 받은 군을 실시예 1, 통상적인 백신을 접종 받은 군을 비교예 1, 백신을 접종 받지 않은 군을 비교예 2로 설정하였다. 각각 40일령 자돈 10마리를 대상으로 하여 상기 실험예 4와 같은 방법으로 1차 접종한 후 기립 개시 시간을 측정하고, 그로부터 20일 후에 2차 접종하고 다시 기립 개시 시간을 측정하였다. 백신을 접종하지 않는 비교예 2의 경우에는 실시예 1 및 비교예 1과 같은 시기에 자돈 5마리를 대상으로 기립 개시 시간을 측정하였다.
상기 실험예 4와 같은 방법으로 1차 접종 후 측정한 기립 개시 시간을 점수로 환산한 값을 하기의 표 13에 나타내고, 2차 접종 후 측정한 기립 개시 시간을 점수로 환산한 값을 하기의 표 14에 나타냈다. 단, 비교예 2의 경우에는 환산 점수에 2를 곱한 값을 표 13 및 14에 나타냈다.
실시예 1 비교예 1 비교예 2
(미접종)
1차 접종 후
1시간 이내		 2 마리 3 마리
1차 접종 후
2시간 이내		 6 마리 1 마리
1차 접종 후
3시간 이내		 2 마리 2 마리 1 마리
1차 접종 후
4시간 이내		 2 마리
1차 접종 후
5시간 이내		 3 마리
1차 접종
6시간 이후		 2 마리
1차 접종
24시간 후		 1 마리
환산 점수 80 점 26 점 88 점
실시예 1 비교예 1 비교예 2
(미접종)
2차 접종 후
1시간 이내		 7 마리 4 마리
2차 접종 후
2시간 이내		 2 마리 2 마리 1 마리
2차 접종 후
3시간 이내		 1 마리
2차 접종 후
4시간 이내		 2 마리
2차 접종 후
5시간 이내		 2 마리
2차 접종
6시간 이후		 1 마리
환산 점수 92 점 40 점 96 점
상기 표 13 및 14의 결과에 따르면, 비교예 1은 1차 접종 후의 기립 개시 시간에 대한 환산 점수가 26점, 2차 접종 후의 기립 개시 시간에 대한 환산 점수가 40점이었다. 반면, 실시예 1은 1차 접종 후의 기립 개시 시간에 대한 환산 점수가 80점, 2차 접종 후의 기립 개시 시간에 대한 환산 점수가 92점으로서, 접종하지 않은 비교예 2에 비해서는 약간 점수가 낮은 편이었으나, 비교예 1에 비해 상당히 높은 점수였다.
즉, 돼지열병-돈단독 혼합백신에 희석한 본 발명의 수의학적 조성물을 접종한 자돈의 경우, 돼지열병-돈단독 혼합백신 접종에 의한 스트레스가 줄어들어 접종 후의 기립 지연이 상당히 개선된 것으로 볼 수 있다.
<실험예 8> 육성돈의 PED-TGE 혼합백신 접종 후의 항체 형성 단기 평가
육성돈의 PED-TGE 혼합백신 접종 후의 항체가 변화를 살펴보았다. 본 발명에 따른 수의학적 조성물을 혼합한 백신을 접종 받은 군을 실시예 1, 통상적인 백신을 접종 받은 군을 비교예 1, 백신을 접종 받지 않은 군을 비교예 2로 설정하였다. 70일령 육성돈(개체) 5마리를 대상으로 실험하였다. 실시예 1의 경우에는 PED-TGE 혼합백신 20 ml에 본 발명의 수의학적 조성물 1 ml를 혼합하여 1차 접종한 후 항체가를 측정하였고, 그로부터 3주 후에 2차 접종하고 항체가를 다시 측정하였다. 비교예 1의 경우에는 PED-TGE 혼합백신 20 ml를 1차 접종한 후 항체가를 측정하고, 그로부터 3주 후에 2차 접종하고 항체가를 다시 측정하였다. 비교예 2의 경우에는 어떠한 접종도 실시하지 않았으며, 상기 실시예 1 및 비교예 1과 같은 시기에 육성돈 5마리를 대상으로 하여 항체가를 측정하였다.
이때, PED-TGE 혼합백신으로서 힘백 돈사방-PT((주)고려비엔피)를 사용하였다.
TGE 항체가의 측정을 위하여 각 그룹의 육성돈으로부터 채혈한 혈액에서 분리한 혈청에 대한 바이러스 중화시험(VN)을 사용하였다. 중화시험은 200 TCID50/ml의 역가로 준비된 돼지 전염성 위장염 바이러스(TGEV) 희석액 50 마이크로리터와 돼지 전염성 위장염 바이러스(187L주) 희석액 50 마이크로리터를 2배 계단희석된 검사혈청과 혼합하여 37℃에서 1시간 동안 반응시켰다. 2×105 cells/ml 농도의 돼지 고환세포주인 ST 세포 희석액 100 마이크로리터씩을 각 웰에 첨가하고 37℃에서 5% CO2 조건에서 3일간 배양한 후 세포변성효과(cytopathic effect: CPE)의 유무에 따라 판독하였다. CPE 억제시킨 최고 희석배수로 나타낸 TGE 항체가는 하기의 표 15에 기재하였다.
구분 개체(15두) 1차 접종 전 2차 접종 전 2차 접종 3주 후 비고
실시예
1		 1 2배이하 16배 32배
2 2배이하 - - 혈청없음
3 2배이하 2배이하 32배
4 2배이하 8배 32배
5 2배이하 2배이하 16배
비교예
1		 6 2배이하 8배 8배
7 2배이하 4배 32배
8 2배 16배 32배
9 4배 4배 16배
10 2배 64배 32배
비교예
2
(미접종)		 11 2배 2배 4배
12 2배이하 - - 혈청없음
13 2배 2배 2배
14 2배 4배 4배
15 2배 - - 혈청없음
상기 표 15의 결과에 따르면, PED-TGE 혼합백신을 접종하지 않은 비교예 2는 항체가 거의 형성되지 않았고, PED-TGE 혼합백신만 접종한 비교예 1 및 PED-TGE 혼합백신에 혼합된 본 발명의 수의학적 조성물을 접종한 실시예 1은 아무런 접종을 하지 않은 비교예 2에 비하여 항체가 상당히 많이 형성되었다.
즉, 본 발명의 수의학적 조성물은 PED-TGE 혼합백신 접종에 의한 항체 생성에 부정적인 영향을 미치지 않음을 파악할 수 있다.
<실험예 9> 자돈의 돼지열병 생백신 접종 후의 항체 형성 장기 평가
자돈의 돼지열병 생백신 접종 후의 항체가 변화를 살펴보기 위하여 실시예 1, 비교예 1 및 비교예 2의 세 그룹으로 나누어 35일령 자돈 4마리를 대상으로 실험하였다. 실시예 1의 경우에는 돼지열병 생백신 20 ml에 본 발명의 수의학적 조성물 1 ml를 희석하여 1차 접종한 후 항체가를 측정하였고, 그로부터 3주 후에 2차 접종하고 항체가를 다시 측정하였다. 비교예 1의 경우에는 돼지열병 생백신 20 ml를 1차 접종한 후 항체가를 측정하였고, 그로부터 3주 후에 2차 접종하고 항체가를 다시 측정하였다. 비교예 2의 경우에는, 어떠한 접종도 실시하지 않고, 상기 실시예 1 및 비교예 1과 같은 시기에 자돈 4마리를 대상으로 하여 항체가를 측정하였다.
항체가의 측정을 위하여, 돼지열병 항체검사용 효소면역항체검사법(enzyme linked immunosorbent assay; ELISA) 키트(CSFV-Ab, (주)제노바이오텍)을 사용하였다. ELISA의 결과 판정은 검사 혈청의 S/P (sample to positive) 비율을 산출하여 판정하며, S/P 비율의 계산은 다음과 같다. 계산된 S/P 비율이 0.14 미만이면 음성, S/P 비율이 0.14 이상이면 양성으로 판정하였다. 상기 OD는 광학밀도를 의미하며, 계산된 S/P 비율은 하기의 표 16 및 도 1에 나타냈다.
Figure 112010001014001-pat00001
항체가 측정 시기 실시예 1 비교예 1 비교예 2
(미접종)
1차 접종 전 0.14 0.52 0.16
1차 접종 후 2차 접종 전 0.12 0.44 0.13
2차 접종 1주 후 0.35 0.52 0.10
2차 접종 2주 후 0.87 0.63 0.10
2차 접종 3주 후 0.87 0.88 0.10
2차 접종 4주 후 0.78 0.93 0.27
2차 접종 5주 후 0.97 0.83 0.11
2차 접종 6주 후 1.02 0.85 0.09
2차 접종 7주 후 1.00 0.50 -0.06
2차 접종 8주 후 0.94 0.61 -0.07
2차 접종 9주 후 1.01 0.55 -0.03
상기 표 16 및 도 1의 결과에 따르면, 돼지열병 생백신을 접종하지 않은 비교예 2는 항체가 거의 형성되지 않았고, 돼지열병 생백신만 접종한 비교예 1 및 돼지열병 생백신에 혼합된 본 발명의 수의학적 조성물을 접종한 실시예 1은 비교예 2에 비하여 항체가 상당히 많이 형성되었다.
또한 2차 접종 5주 후부터 실시예 1의 항체 형성이 비교예 1의 항체 형성보다 월등히 많았으며, 이는 본 발명에 따른 수의학적 조성물이 장기 평가에서 백신의 항체 형성이 긍정적인 영향을 미침을 의미한다.
<실험예 10> 본 발명 조성물의 혼합에 따른 돼지열병 생백신의 안정성
수의학적 조성물의 혼합에 따른 생백신의 안정성을 살펴보기 위하여 다음과 같이 세 개 그룹의 수의학적 조성물을 돼지열병 생백신에 혼합하여 실험하였다. 구체적으로, 그룹 1(VS-2)은 실시예 1의 수의학적 조성물, 그룹 2(VS-s-NaOH)는 실시예 1의 수의학적 조성물을 NaOH를 이용하여 중성(pH 7)으로 pH 조절한 것, 그룹 3(VS-2-BA)은 실시예 1의 수의학적 조성물에 보존제인 벤질알코올을 첨가한 것을 사용하였다. 그룹 1 내지 3의 조성물을 돼지열병 바이러스 백신주(LOM주) 105.5 TCID50/ml과 30분간 37℃에서 감작한 후 미리 준비된 80% monolayer가 형성된 돼지 콩팥유래 PK-15 세포주에 40분간 접종하고 배지를 교환하여 3일간 배양하여 돼지열병 생백신의 바이러스의 사멸 여부를 역가로 측정하였다. 2회 반복실험한 결과를 하기의 도 2에 나타냈다.
도 2의 결과에 따르면, 보존제로서 벤질알코올을 첨가한 수의학적 조성물이 혼합된 경우(VS-2-BA)에는 돼지열병 바이러스 백신주(LOM주)의 105.5 TCID50/ml의 바이러스가 모두 사멸하였다. 반면, 본 발명에 해당되는 수의학적 조성물이 혼합된 경우(VS-2)에는 103.0 TCID50/ml의 돼지열병 바이러스가 생존하였다. 또한, NaOH를 이용하여 pH를 조절한 조성물이 혼합된 경우(VS-2-NaOH)에도 돼지열병 바이러스가 상당수 생존하였음을 알 수 있다.
이러한 결과는, 본 발명에 따른 수의학적 조성물은 보존제를 포함하지 않기 때문에 생백신과 혼합되어도 백신의 안정성에 부정적 영향을 주지 않으며, 결과적으로 가축 내 항체 생성에 부정적인 영향을 주지 않음을 의미한다.

Claims (13)

  1. 설피린, 항히스타민제 및 카페인을 유효성분으로 포함하며, 백신에 혼합하여 사용하는 것을 특징으로 하는 백신 접종에 의해 발생하는 동물의 스트레스인 식욕 감퇴 또는 기립 지연 감소용 또는 백신 접종에 의해 발생하는 항체 생성 촉진용 수의학적 조성물.
  2. 삭제
  3. 제 1항에 있어서, 상기 항히스타민제는 클로르페니라민, 디펜히드라민, 트리페레나민, 프로메타진 또는 이들의 수의학적으로 허용 가능한 염인 것을 특징으로 하는 수의학적 조성물.
  4. 삭제
  5. 제 1항에 있어서, 상기 조성물의 pH가 5.6 내지 8.4인 것을 특징으로 하는 수의학적 조성물.
  6. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 벤질알코올, 안식향산, 안식향산나트륨, 염화벤잘코늄, 염화벤제토늄, 클로르부탄올, 소르빈산, 소르빈산칼륨, 파라벤 또는 페놀을 포함하는 보존제를 포함하지 않는 것을 특징으로 하는 수의학적 조성물.
  7. 제 1항에 있어서, 상기 백신은 돼지 열병 예방 백신, 돼지 유행성 설사(PED) 예방 백신, 돼지 전염성 위장염(TGE) 예방 백신, 돈단독 예방 백신, 돼지 로타 백신, 돼지 파보 백신, 돼지 써코바이러스 백신 또는 이들의 혼합 백신인 것을 특징으로 하는 수의학적 조성물.
  8. 제 7항에 있어서, 상기 백신은 돼지 열병 생백신, 돼지 열병-돈단독 혼합백신, 또는 PED-TGE 혼합백신인 것을 특징으로 하는 수의학적 조성물.
  9. 삭제
  10. 설피린; 클로르페니라민 또는 이의 수의학적으로 허용 가능한 염; 및 카페인을 포함하며, 백신에 혼합하여 사용하는 것을 특징으로 하는 백신 접종에 의해 발생하는 동물의 스트레스인 식욕 감퇴 또는 기립 지연 감소용 또는 백신 접종에 의해 발생하는 항체 생성 촉진용 수의학적 조성물.
  11. 제 1항, 제 3항, 제 5항 내지 제 8항 및 제 10항 중 어느 한 항의 수의학적 조성물 및 백신을 포함하는 것을 특징으로 하는 키트.
  12. 제 1항, 제 3항, 제 5항 내지 제 8항 및 제 10항 중 어느 한 항의 수의학적 조성물을 백신과 혼합하여 인간 이외의 동물에 투여하는 것을 특징으로 하는 백신 접종에 의해 발생하는 동물의 식욕 감퇴 또는 기립 지연을 개선하는 방법.
  13. 제 1항, 제 3항, 제 5항 내지 제 8항 및 제 10항 중 어느 한 항의 수의학적 조성물을 백신과 혼합하여 인간 이외의 동물에 투여하는 것을 특징으로 하는 백신 접종에 의해 발생하는 동물의 항체 형성을 촉진하는 방법.
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