KR101174369B1 - 유방암 진단용 바이오마커 및 유방암 진단제 - Google Patents

유방암 진단용 바이오마커 및 유방암 진단제 Download PDF

Info

Publication number
KR101174369B1
KR101174369B1 KR1020090038713A KR20090038713A KR101174369B1 KR 101174369 B1 KR101174369 B1 KR 101174369B1 KR 1020090038713 A KR1020090038713 A KR 1020090038713A KR 20090038713 A KR20090038713 A KR 20090038713A KR 101174369 B1 KR101174369 B1 KR 101174369B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
breast cancer
gene
seq
full
biomarker
Prior art date
Application number
KR1020090038713A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20100119661A (ko
Inventor
맹필재
김리라
박영우
Original Assignee
한국생명공학연구원
충남대학교산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 한국생명공학연구원, 충남대학교산학협력단 filed Critical 한국생명공학연구원
Priority to KR1020090038713A priority Critical patent/KR101174369B1/ko
Priority to PCT/KR2010/002768 priority patent/WO2010126338A2/ko
Publication of KR20100119661A publication Critical patent/KR20100119661A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101174369B1 publication Critical patent/KR101174369B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • C12Q1/6886—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material for cancer
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57407—Specifically defined cancers
    • G01N33/57415—Specifically defined cancers of breast
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/112—Disease subtyping, staging or classification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/118—Prognosis of disease development
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers

Abstract

본 발명은 유방암 진단용 바이오마커 및 이에 특이적으로 결합하는 프로브를 포함하는 유방암 진단제에 관한 것으로서, KRT15의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA 단독 또는 ECGR4의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA 단독으로 이루어진 유방암 진단용 바이오마커와, 프로브로서 유방암 진단용 바이오 마커를 구성하는 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA에 상보적으로 결합하여 증폭할 수 있는 프라이머를 유효성분으로 포함하는 유방암 진단제를 제공한다. 검체의 조직으로부터 본 발명의 유방암 진단용 바이오마커를 구성하는 유전자인 KRT15의 DNA 단편 내지 전장 DNA 단독 또는 ECGR4의 DNA 단편 내지 전장 DNA 단독의 발현 수준을 측정하고 이를 정상 조직에서의 발현 수준과 비교하는 경우 유방암, 특히 초기단계로서 진행단계가 1기인 유방암을 효과적으로 진단할 수 있고, 이를 통해 유방암을 조기에 치료할 수 있다. 아울러, 본 발명의 유방암 바이오마커 조성물을 구성하는 유전자자의 DNA 단편 내지 전장 DNA의 발현 수준을 이를 정상 조직에서의 발현 수준과 비교하는 경우 유방암의 진단에 대한 특이도와 민감도를 향상시킬 수 있다.
유방암, 바이오마커, 진단제, KRT15, ECRG4, DNA 단편

Description

유방암 진단용 바이오마커 및 유방암 진단제{Biomarker for diagnosing breast cancer and diagnostic agent for breast cancer}
본 발명은 유방암 진단용 바이오마커 및 이에 특이적으로 결합하는 프로브를 포함하는 유방암 진단제에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 유방암 진단용 바이오마커 조성물 및 이에 특이적으로 결합하는 프로브를 포함하는 유방암 진단제 조성물에 관한 것이다.
전세계에서 유방암은 폐암에 이어 두번째로 흔히 발생되는 암이며, 사망률은 5위에 해당하는 위험한 암이다. 유방암의 경우 일단 암세포가 주변 조직에 침범하거나 림프절로 전이가 시작되면 완치가 어렵기 때문에 조기 발견이 다른 암보다 더 중요하다고 할 수 있다.
유방암에 인한 사망률을 줄이기 위해서는 첫째, 유방암을 초기에 조기 진단하고 둘째, 일차 수술에 의한 치료 이후 예후를 진단하여 적절한 부가 치료 (Adjuvant therapy)를 하는 것이 중요하다. 현재 유방암 진단에는 1차 촉진에 의한 자가 진단 외에, 유방 X-선 조영술, 초음파검사법 등이 예방차원에서의 검진방법으로 사용되고 있으며 이 방법은 초기의 유방암을 진단하는 데에도 가장 널리 사용되 는 방법이다. 그러나, 유방 X-선 조영술은 우리나라 여성들에서 흔히 발견되는 조밀유방일 경우 섬유질이 많아서, 진단율이 떨어지는 단점이 있으며, 특히 젊은 여성같이 유선이 많이 발달되어 있어도 진단율이 떨어진다. 또한, X-선을 사용하기 때문에 진단 과정에서 오히려 유방암이 생길 가능성도 배제 할 수 없다. 그래서 대안으로 초음파검사법이 사용되고 있지만 이 역시 악성종양(cancer)과 양성종양(non-cancer)을 구별하기는 쉽지 않다. 실제 임상에서는 이상 소견이 있으면 세침흡입세포검사법, 자기공명촬영법 등을 부가적으로 사용하여 진단율을 높이고 있다. 그러나, 이 방법들을 사용하더라도 정상조직과 비 정상조직을 형태상으로 구분할 뿐 악성종양(cancer) 과 양성종양(non-cancer)을 구분하기가 쉽지 않기 때문에 확진을 위해서는 더욱 정밀한 조직검사를 하게 된다. 이와 같은 이유들로 인해 유방암은 다른 암에 비해 비교적 분자 유전학적인 방법으로 유방암을 진단하는 방법이 발달되어 있다. 조직검사에서 조직을 잘라서 병변을 확인한 다음 적출을 위한 1차 수술이 시행된다. 이후의 부가치료를 어떻게 할지 결정하기 위하여 에스트로겐 수용체(Estrogen receptor, ER)의 유무와 유방암 특이 종양표지자인 HER2/neu(Human Epidermal growth factor Receptor 2, ErbB-2 또는 ERBB2라고도 알려져 있다) 유전자의 수를 조직내 교잡법( in situ hybridization)을 통해 확인하는 방법을 사용한다. 만약, 발견된 암 조직이 에스트겐 수용체를 가지고 있으면, 타목시펜(Tamoxifen)과 같은 에스트로겐 유사체를 사용하여 치료를 하게 되고, HER2/neu 유전자가 과발현되어 있으면, HER2/neu 단클론항체인 trastuzumab을 제품화한 허셉틴(Herceptin)을 유방암의 치료에 사용하게 된다. 유방암의 진단 및 치료 에 가장 유용하게 사용되는 유방암 특이 진단 마커인 HER2/neu 유전자의 증폭 및 과발현은 침습성 유방암의 20 ~ 35%에서 발견된다. 따라서. HER2/neu 검사는 에스트로겐 수용체 검사와 더불어 유방암 환자의 치료에 결정적인 역할을 한다.
그러나, 유방암 환자 모두가 ER 유전자나 Her2/neu 유전자가 과발현되어 있는 것은 아니므로, 이러한 진단 방법들의 단점을 보완하고 좀더 빠르고 확실하게 암을 구분하기 위하여 암 특이적 종양표지자(biomarker)를 찾기 위한 시도가 다양하게 이루어지고 있으며, 이를 이용한 새로운 진단 방법들이 최근 소개되고 있다. 최근 미국에서 Oncotype DX라고 하는 21-gene assay (Oncotype DX, Genomic Health, Redwood City, CA)와 MammaPrint라고 하는 70-gene assay (MammaPrint, Agendia, Amsterdam, the Netherlands)가 제품화 되어 임상에서 실제 사용되고 있다. Oncotype DX는 실시간 정량 PCR 방법으로16개의 유방암 관련 유전자와 5개의 대조군 유전자를 검사는 방법이고, MammaPrint는 70개의 유전자를 마이크로어레이 방법으로 검사하는 방법이다. 이들 두 방법은 1차 수술이후, 부가 치료를 어떠한 방식으로 할 지에 관한 표준을 제시하고 있으며, 이로 인해 개인 맞춤 치료가 가능하게 되었다 (Am J Health-Syst PharmVol 65 Jan 1, 2008 23-28).
본 발명자들은 유방암 진단 과정에서 수득할 수 있는 미량의 조직으로부터 전체 RNA(total RNA)를 분리하고, 이를 역전사효소를 이용하여 cDNA로 합성한 다음, 특이적 프라이머를 이용한 실시간 중합효소 반응을 통하여 조직 내에 포함되어 있는 KRT15 유전자, ECRG4 유전자, INHBA 유전자, ISG15 유전자, 또는 MMP11 유전자의 발현 정도, 특히 상기 유전자 전사체의 특정 부위의 발현 정도가 유방암과 유의적으로 관련이 있음을 발견하고 본 발명을 완성하였고, 상기 유방암 관련 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA 단독, 또는 이들의 조합을 유방암 진단용 바이오마커 또는 바이오마커 조성물로 사용하여 유방암 유무를 간단하게 확인할 수 있는 방법을 제시하고자 한다.
본 발명은 유방암 환자 조직과 정상 조직간에서 발현 수준의 차이를 보이며, 유방암의 초기 단계를 진단하는데 이용될 수 있는 신규 바이오마커 및 이에 특이적으로 결합할 수 있는 프로브를 유효성분으로 포함하는 유방암 진단제를 제공하는 데 그 목적이 있다.
또한, 유방암 진단에 대한 특이도와 민감도를 향상시킬 수 있는 바이오마커 조성물 및 이에 특이적으로 결합할 수 있는 프로브를 유효성분으로 포함하는 유방암 진단제 조성물을 제공하는 데 그 목적이 있다.
본 발명의 일 목적은 유방암 조직에서 특이적으로 저발현되는 유전자인 KRT15 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA 단독, 또는 ECRG4 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA 단독으로 유방암 진단용 바이오마커를 제공함으로써 달성될 수 있다.
아울러, 본 발명의 일 목적은 KRT15 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브 단독 또는 ECRG4 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브 단독을 유효성분으로 포함하는 유방암 진단제를 제공함으로써 달성될 수 있다.
본 발명의 다른 목적은 1) KRT15 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA 및 ECRG4 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA로 이루어진 유방암 진단용 바이오마커 조성물, 2) KRT15 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA 및 ECRG4 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 바이오마커와 INHBA 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA, ISG15 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA, 및 MMP11 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 바이오마커로 이루어진 유방암 진단용 바이오마커 조성물을 제공함으로써 달성될 수 있다.
아울러, 본 발명의 다른 목적은 3) KRT15 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브 및 ECRG4 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브를 유효성분으로 포함하는 유방암 진단제 조성물, 4) KRT15 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브 및 ECRG4 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브 로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 프로브와 INHBA 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브, ISG15 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브, 및 MMP11 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 프로브를 유효성분으로 포함하는 유방암 진단제 조성물을 제공함으로써 달성될 수 있다.
검체의 조직으로부터 본 발명의 유방암 진단용 바이오마커를 구성하는 유전자인 KRT15의 DNA 단편 내지 전장 DNA 단독 또는 ECGR4의 DNA 단편 내지 전장 DNA 단독의 발현 수준을 측정하고 이를 정상 조직에서의 발현 수준과 비교하는 경우 유방암, 특히 초기단계로서 진행단계가 1기인 유방암을 효과적으로 진단할 수 있고, 이를 통해 유방암을 조기에 치료할 수 있다. 아울러, 본 발명의 유방암 바이오마커 조성물을 구성하는 유전자자의 DNA 단편 내지 전장 DNA의 발현 수준을 측정하고 이를 정상 조직에서의 발현 수준과 비교하는 경우 유방암의 진단에 대한 특이도와 민감도를 향상시킬 수 있다. 이때, 본 발명의 유방암 진단제 또는 유방암 진단제 조성물을 이용하는 경우 유방암 진단용 바이오마커 또는 바이오마커 조성물를 구성하는 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA의 발현 수준을 쉽게 측정할 수 있다.
본 발명은 유방암 조직에서 정상 조직보다 특이적으로 저발현되는 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA와 고발현되는 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA 를 바이오마커로 이용하고, 상기 바이오마커를 구성하는 유전자의 특정 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하여 발현 수준을 측정할 수 있는 프로브를 진단제의 유효성분으로 이용한다. 본 발명의 바람직한 일 실시예에서 유방암 진단용 바이오 마커로 사용되는 유전자의 정보 및 전장 DNA의 서열번호는 표 1과 같고, 상기 유전자의 발현 수준을 측정하는데 사용되는 프로브, 프로브의 서열번호 및 프로브가 인식할 수 있는 유전자 mRNA상의 염기서열 위치는 표 2와 같고, 상기 프로브 및 각 유전자의 cDNA를 이용한 정량 실시간 PCR(quantitative real-time PCR, QRT-PCR) 방법에 의해 측정되어지는 각 유전자의 특정 DNA 단편의 서열번호, 염기서열 길이 및 녹는점은 표 3과 같다.
유전자 mRNA 젠뱅크 승인번호 mRNA 염기서열의 길이 전장 DNA 서열번호
KRT15(keratin 15) NM_002275 1861 bp 서열번호 2
ECRG4(esophageal cancer related gene 4 protein) NM_032411 793 bp 서열번호 6
INHBA(inhibin, beta A) NM_002192 2175 bp 서열번호 10
ISG15(ISG15 ubiquitin-like modifier) NM_005101 685 bp 서열번호 14
MMP11(matrix metallopeptidase 11) NM_005940 2276 bp 서열번호 18
유전자 프로브 프로브 서열번호 프로브가 인식하는 유전자 mRNA상의 염기서열 위치
KRT15(keratin 15) 센스 프라이머 서열번호 3 665~744
안티센스 프라이머 서열번호 4
ECRG4(esophageal cancer related gene 4 protein) 센스 프라이머 서열번호 7 288~361
안티센스 프라이머 서열번호 8
INHBA(inhibin, beta A) 센스 프라이머 서열번호 11 1178~1262
안티센스 프라이머 서열번호 12
ISG15(ISG15 ubiquitin-like modifier) 센스 프라이머 서열번호 15 140~220
안티센스 프라이머 서열번호 16
MMP11(matrix metallopeptidase 11) 센스 프라이머 서열번호 19 1801~1894
안티센스 프라이머 서열번호 20
유전자 프로브 프로브에 의해 측정되는 유전자 DNA 단편의 서열번호 유전자 DNA 단편의 염기서열 길이 유전자 DNA 단편의 녹는점(℃)
KRT15(keratin 15) 서열번호 3, 서열번호 4 서열번호 1 80 57.92~58.02
ECRG4(esophageal
cancer related gene 4
protein)		 서열번호 7, 서열번호 8 서열번호 5 74 57.66~57.86
INHBA(inhibin, beta A) 서열번호 11, 서열번호 12 서열번호 9 85 57.92~57.98
ISG15(ISG15
ubiquitin-like
modifier)		 서열번호 15, 서열번호 16 서열번호 13 81 57.90~58.20
MMP11(matrix
metallopeptidase 11)		 서열번호 19, 서열번호 20 서열번호 17 94 57.94~58.00
본 발명의 일 측면은 유방암 진단용 바이오마커 및 이에 특이적으로 결합하는 프로브를 포함하는 유방암 진단제에 관한 것이다.
본 발명은 서열번호 1의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 KRT15 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA로 이루어지는 유방암 진단용 바이오마커, 서열번호 5의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 ECRG4 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA로 이루어지는 유방암 진단용 바이오마커를 제공한다. KRT15 유전자 또는 ECRG4 유전자는 유방암 조직에서 정상 조직보다 특이적으로 저발현되는 것을 특징으로 하기 때문에 각 유전자의 전장 DNA를 유방암 진단용 바이오마커로 사용될 수 있으며, 특히 검체 조직에서의 서열번호 1의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 KRT15 유전자의 DNA 단편의 양, 서열번호 5의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 ECRG4 유전자의 DNA 단편의 양을 통해 각각 KRT15 유전자의 정량적인 발현 수준과 ECRG4 유전자의 정량적인 발현 수준을 간접적으로 측정할 수 있으므로 각 DNA 단편 또한 유방암 진단용 바이오마커로 사용될 수 있다.
본 발명은 서열번호 1의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 KRT15 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브를 유효성분으로 포함하는 유방암 진단제 또는 서열번호 5의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 ECRG4 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브를 유효성분으로 포함하는 유방암 진단제를 제공한다. 이때 프로브는 각 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하여 각 유전자의 DNA 단편의 양 내지 각 유전자의 발현 수준을 측정할 수 있는 것이라면 특별히 제한되지 않으나, 바람직하게는 각 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 상보적으로 결합하여 증폭할 수 있는 프라이머쌍이고, 보다 바람직하게는 서열번호 1의 폴리뉴클레오티드를 인식할 수 있는 서열번호 3의 센스 프라이머와 서열번호 4의 안티센스 프라이머, 또는 서열번호 5의 폴리뉴클레오티드를 인식할 수 있는 서열번호 7의 센스 프라이머와 서열번호 8의 안티센스 프라이머로 구성된다.
본 발명의 유방암 진단용 바이오마커와 유방암 진단제를 이용하여 유방암을 진단하는 방법은 정량 실시간 PCR (quantitative real-time PCR, QRT-PCR) 방법을 포함하여 본 발명의 업계에서 사용되는 방법이라면 특별히 제한되지 않으며, 바람직한 일 실시예로서 a) 검체의 유방 조직으로부터 전체 RNA(total RNA)를 분리하는 단계, b) 분리된 RNA로부터 역전사효소(Reverse transcriptase)를 이용하여 cDNA를 합성하는 단계, c) 합성한 cDNA를 주형으로 하고 정량 실시간 PCR(quantitative real-time PCR, QRT-PCR) 반응을 통해 특정 유전자(KRT15 유전자 또는 ECRG4 유전자)의 전장 cDNA 또는 cDNA 단편을 증폭하는 단계, d) 증폭된 전장 cDNA 또는 cDNA 단편의 양으로부터 특정 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계, e) 측정된 검체 유방 조직의 특정 유전자의 발현 수준과 정상 조직의 특정 유전자의 발현 수준을 비교하여 유방암 여부를 판정하는 단계를 포함한다.
상기의 유방암 진단방법 중 b) 단계는 역전사효소와 18~20 bp 길이의 올리고디티(oligo dT) 프라이머를 포함하는 하나의 키트에 의해 구현될 수 있고, c)와 d)단계는 열안정성 중합효소(hot-start Taq), KRT15 유전자(또는 ECRG4 유전자)의 전장 cDNA 또는 cDNA 단편에 상보적으로 결합하여 전장 cDNA 또는 cDNA 단편을 증폭할 수 있는 센스 프라이머 및 안티센스 프라이머, dATP, dGTP, dCTP, dTTP, 완충액, cDNA 또는 cDNA 단편의 양을 정량하는데 필요한 형광물질 (일례로 SYBR Green I) 등으로 구성된 유방암 진단용 정량 실시간 PCR 반응 전혼합물(pre-mixture)을 포함하는 하나의 키트에 의해 구현될 수 있고, 모든 단계의 유방암 진단방법은 각 단계를 구현하는 키트 내지 장치를 하나의 칩으로 구성한 랩온어칩(Lab on a chip, LOC)에 의해 구현될 수 있다.
아울러, 특정 유전자의 발현 수준인 mRNA의 양과 상기 mRNA에 의해 생성되는 단백질의 양은 일반적으로 비례관계에 있으므로, KRT15 단백질 또는 ECRG4 단백질을 유방암 진단용 바이오마커로 이용할 수 있고 KRT15 단백질 또는 ECRG4 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 유방암 진단제로 이용할 수 있음은 본 발명의 기술분야에서 통상의 지식을 가진자에게 자명하다.
본 발명의 유방암 진단용 바이오마커와 유방암 진단제를 이용하여 진단할 수 있는 유방암의 진행단계는 1기 내지 4기를 포함하고, 특히 유방암의 진행단계가 1기인 경우에도 높은 수준의 민감도와 특이도를 유지할 수 있으므로, 본 발명의 유방암 진단용 바이오마커와 유방암 진단제를 이용하는 경우 초기단계에 있는 유방암을 진단하여 조기에 치료할 수 있다
본 발명의 다른 측면은 유방암 진단용 바이오마커 조성물 및 이에 특이적으로 결합하는 프로브를 포함하는 유방암 진단제 조성물에 관한 것이다.
이하, 유방암의 진단방법, 진단할 수 있는 유방암의 진행단계, 각 유전자의 단백질을 유방암 진단용 바이오마커로 이용하고 항체를 유방암 진단제로 이용하는 내용은 앞에서 기술한 것과 동일하므로 생략한다.
본 발명은 서열번호 1의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 KRT15 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA; 및 서열번호 5의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 ECRG4 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA로 이루어지는 유방암 진단용 바이오마커 조성물을 제공한다.
KRT15 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA 단독 또는 ECRG4 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA 단독으로 이루어진 유방암 진단용 바이오마커를 이용하여 유방암을 진단하는 경우 로지스틱 회귀분석에 의한 특이도(Specificity, 정상인을 정상으로 판정할 확률)가 대략 30~50%이나, 유방암 조직에서 특이적으로 저발현되는 두 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA를 조합한 유방암 진단용 바이오마커 조성물을 이용하여 유방암을 진단하는 경우 로지스틱 회귀분석에 의한 특이도가 거의 70%가까이 증가하여 진단하고자 하는 검체의 분류 정확도를 높일수 있다.
아울러, 본 발명은 서열번호 1의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 KRT15 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브 및 ECRG4 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브를 유효성분으로 포함하는 유방암 진단제 조성물을 제공한다. 이때, KRT15 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 대한 프로브는 서열번호 1의 폴리뉴클레오티드를 인식할 수 있는 서열번호 3의 센스 프라이머와 서열번호 4의 안티센스 프라이머로 구성되고, ECRG4 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 대한 프로브는 서열번호 5의 폴리뉴클레오티드를 인식할 수 있는 서열번호 7의 센스 프라이머와 서열번호 8의 안티센스 프라이머로 구성되는 것이 바람직하다.
본 발명은 서열번호 1의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 KRT15 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA 및 서열번호 5의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 ECRG4 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA로 구성되는 그룹으로부터 하나 이상 선택되고, 유방암 조직에서 특이적으로 저발현되는 것을 특징으로 하는 바이오마커; 및 서열번호 9의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 INHBA 유전자의 DNA 내지 또는 전장 DNA, 서열번호 13의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 ISG15 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA, 및 서열번호 17의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 MMP11 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA로 구성되는 그룹으로부터 하나 이상 선택되고, 유방암 조직에서 특이적으로 고발현되는 것을 특징으로 하는 바이오마커로 이루어진 유방암 진단용 바이오마커 조성물을 제공한다.
유방암 조직에서 특이적으로 저발현되는 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA와 유방암 조직에서 특이적으로 고발현되는 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA을 조합하고, 이를 유방암 진단용 바이오마커 조성물로 이용하는 경우 KRT15 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA 단독 또는 ECRG4 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA 단독으로 이루어진 유방암 진단용 바이오마커를 이용하여 유방암을 진단하는 경우보다 로지스틱 회귀분석에 의한 민감도(암환자를 암으로 판정할 확률, Sensitivity) 또는 특이도가 증가하여 검체의 분류 정확도를 높일수 있다.
아울러, 본 발명은 서열번호 1의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 KRT15 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브 및 서열번호 5의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 ECRG4 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 프로브; 및 서열번호 9의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 INHBA 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브, 서열번호 13의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 ISG15 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브, 및 서열번호 17의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 MMP11 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 프로브를 유효성분으로 포함하는 유방암 진단제 조성물을 제공한다. 이때, KRT15 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 대한 프로브는 서열번호 1의 폴리뉴클레오티드를 인식할 수 있는 서열번호 3의 센스 프라이머와 서열번호 4의 안티센스 프라이머로 구성되고, ECRG4 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 대한 프로브는 서열번호 5의 폴리뉴클레오티드를 인식할 수 있는 서열번호 7의 센스 프라이머와 서열번호 8의 안티센스 프라이머로 구성되고, INHBA 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 대한 프로브는 서열번호 9의 폴리뉴클레오티드를 인식할 수 있는 서열번호 11의 센스 프라이머 및 서열번호 12의 안티센스 프라이머로 구성되고, ISG15 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 대한 프로브는 서열번호 13의 폴리뉴클레오티드를 인식할 수 있는 서열번호 15의 센스 프라이머 및 서열번호 16의 안티센스 프라이머로 구성되고, MMP11 유전자의 DNA 단편 내지 전장 DNA에 대한 프로브는 서열번호 17의 폴리뉴클레오티드를 인식할 수 있는 서열번호 19의 센스 프라이머 및 서열번호 20의 안티센스 프라이머로 구성되는 것이 바람직하다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다. 다만, 하기의 실시예는 본 발명을 보다 명확하게 설명하기 위한 것일뿐, 본 발명의 권리범위가 실시예에 의해 제한되지 않는다.
실시예 1. 유방암 진단용 후보 바이오마커의 선별
정상조직 27개 및 유방암 조직 78개로부터 전체 RNA를 분리한 후 역전사효소를 이용하여 cDNA를 합성하고, Affymetrix 사의 GeneChip 시스템인 U133 GeneChip(45000 probe sets, 39,000 transcripts)에 혼성화(hybridization)시켜 유전자 발현 양상, 즉 mRNA의 양을 분석하였다. 이때 적절한 조직 시료는 PCR 통계 분석법(Principal Component Analysis: 각 시료의 발현 유사성을 조사하는 통계적 분석법)을 이용하여 구하였고, 분석된 mRNA의 양을 기초로 발현도가 통계적 유의성을 가지고 변하는 유전자들을 확보하였다(p-value ≤0.05, fold change ≥3.0). 본 실험을 통하여 9개의 유전자를 확보하였고, 구체적으로 유방암 고발현 유전자인 INHBA, HIST2H2AA, FNDC1, MMP11, CXCL9, CXCL10, ISG15 와 유방암 저발현 유전자인 ECRG4, KRT15 이었다. 이중 KRT15, ECRG4, INHBA, ISG15, MMP11을 유방암 진단용 후보 바이오마커로 선별하였다.
실시예 2. 선별된 유방암 진단용 후보 바이오마커의 유방암 진행 단계에 따른 발현수준 분석
(1) 선별된 유방암 진단용 후보 바이오마커의 발현수준 측정
16명의 암이 아니라고 판정된 환자 조직으로부터 분리한 유방 조직과 실제 암으로 판정된 128명의 유방암 환자로부터 분리한 유방암 조직을 가지고, 정량 실시간 PCR (quantitative real-time PCR, QRT-PCR) 방법을 이용하여 선별된 유방암 진단용 후보 바이오마커인 KRT15, ECRG4, INHBA, ISG15, MMP11의 발현량을 분석하였다. 이때 정상인의 정보와 유방암 환자의 진행단계 별 정보는 표 4에 나타나는 바와 같다.
환자 구분 유방암 진행단계 환자수 나이 평균값
정상인 16 45.9
유방암 환자 1기 23 60.3
2A기 36 56.4
2B기 23 55.3
3A기 22 54.6
3B기 6 66.2
3C기 13 52.4
4기 5 46.6
먼저 검체의 조직으로부터 전체 RNA를 분리하고, 역전사효소 및 올리고디티(oligo dT) 프라이머를 이용하여 cDNA를 합성하였다. 합성된 cDNA를 주형으로 하고, 열안정성 중합효소(hot-start Taq), 프라이머, dATP, dGTP, dCTP, dTTP, 완충액, SYBR Green I 형광물질로 구성된 정량 실시간 PCR 반응 전혼합물(pre-mixture)을 이용한 정량 실시간 PCR 반응법으로 유방암 진단용 후보 바이오마커 유전자의 발현수준을 측정하였다. 이때 유방암 진단용 후보 바이오마커 유전자의 발현수준은 대조군으로 사용된 베타엑틴(actin, beta; ACTB)의 발현량을 기준으로 하여 상대적인 발현량으로 계산하였다.
정량 실시간 PCR 반응법에서 각 유전자의 cDNA를 증폭하는 데 사용된 프라이머는 표 2의 센스 프라이머 및 안티센스 프라이머이고, 증폭된 cDNA 단편은 각각 표 3에 나타난 서열번호 1, 서열번호 5, 서열번호 9, 서열번호 13, 서열번호 17의 폴리뉴클레오티드이었다. 또한, 베타엑틴 유전자의 cDNA를 증폭하는 데 사용된 프라이머는 서열번호 21의 센스 프라이머와 서열번호 22의 안티센스 프라이머이고, 그에 의해 증폭된 cDNA 단편은 베타엑틴 유전자의 젠벤크 승인번호 NM_001101에 나타나는 염기서열의 876~963 위치에 해당하는 88개 염기의 폴리뉴클레오티드이고 녹는점은 57.88~57.98℃의 범위를 가지다.
도 1은 정상인의 정상 조직과 진행단계별 유방암 환자의 유방암 조직에서의 유방암 진단용 후보 바이오마커 유전자의 발현수준을 나타낸 그래프로서, 도 1A는 INHBA 유전자를, 도 1B는 MMP11 유전자를, 도 1C는 ISG15 유전자를, 도 1D는 KRT15 유전자를, 도 1E는 ECRG4 유전자를 나타낸 것이다. 도 1에서 y축은 베타엑틴(Beta-Actin)의 발현량을 기준으로 한 상대적인 발현량을 의미하는 것으로서, 값 "1"은 베타엑틴의 발현량과 동일한 양이 발현됨을 의미한다. 도 1에서 보이는 바와 같이 KRT15 유전자와 ECRG4 유전자는 대부분의 진행단계별 유방암 환자의 유방암 조직에서 정상인의 정상조직보다 약 10~100배 수준으로 저발현되었고, INHBA 유전자, ISG15 유전자 및 MMP11 유전자는 대부분의 진행단계별 유방암 환자의 유방암 조직에서 정상인의 정상조직보다 약 10~100배 수준으로 고발현되었다.
(2) ROC(receiver operating characteristic) 커브 분석을 통한 선별된 유방암 진단용 후보 바이오마커의 유방암 진단 성능
유방암 진단용 후보 바이오마커의 유방암 진단에 대한 민감도 및 특이성을 알아보기 위하여 유방암 진단용 후보 바이오마커의 발현수준을 기초로 ROC 커브를 작성하였다. 이때 계산은 MedCalcversion10.1.7.0 프로그램을 사용하였다.
도 2는 유방암 환자의 진행단계를 고려하지 않은 유방암 진단용 후보 바이오마커의 발현수준에 대한 ROC 커브를 나타낸 그래프로서, 도 2A는 도 1을 재구성한 것이고, 도 2B는 각 유전자별 ROC 커브이다. ROC 커브에서 y축은 민감도(sensitiviy, 암환자를 암으로 판정할 확률)를, x축은 정상인을 암으로 판정할 확률인 FPR(False positive rate)을 의미하고, 백분율을 기준으로 "100-FPR"은 특이도(specificity, 정상인을 정상으로 판정할 확률)를 의미한다. 도 2에서 보이는 바와 같이 선별된 유방암 진단용 후보 바이오마커는 유방암 진단에 대한 높은 민감도와 특이도를 가지고 있다.
암과 정상의 판정기준을 특정 임계값으로 설정하였을때 유방암 진단용 후보 바이오마커의 유방암 환자의 진행단계를 고려하지 않은 전체 단계의 유방암 진단에 대한 민감도와 특이도를 표 5에 나타내었다. 표 5에서 나타내는 바와 같이 후보 바이오마커는 높은 민감도와 특이도를 가지고 있고, 특히 KRT15와 ECRG4는 다른 후보 바이오마커보다 더 높은 민감도를 보였다.
구분 ECRG4 ISG15 INHBA KRT15 MMP11
민감도(%) 89.8 74.2 78.9 91.4 71.9
특이도(%) 100 100 93.7 93.7 93.7
임계값 <= 0.3511 > 2.395 > 1.9834 <= 0.4577 > 2.4751
P value 0.0001 0.0001 0.0001 0.0001 0.0001
여기서, 임계값을 살펴보면, 유방암 조직에서 저발현되는 KRT15, ECRG4의 경우 검체 조직에서의 각 유전자의 베타엑틴(Beta-Actin) 발현량을 기준으로 한 상대적인 발현량이 각각 0.4577이하, 0.3511 이하이면 암으로 판정하고, 초과하면 정상으로 판정함을 의미하고, 유방암 조직에서 고발현되는 INHBA, ISG15, MMP11의 경우 반대로 해석된다.
도 3은 진행단계가 1기인 유방암 환자만을 대상으로 하여 유방암 진단용 후보 바이오마커의 발현수준에 대한 ROC 커브를 나타낸 그래프로서, 도 3A는 도 1의 진행단계가 1기인 유방암 환자만의 값을 재구성한 것이고, 도 3B는 진행단계가 1기인 유방암 환자만을 대상으로 한 각 유전자별 ROC 커브이다. 또한, 표 6은 암과 정상의 판정기준을 특정 임계값으로 설정하였을때 유방암 진단용 후보 바이오마커의 진행단계가 1기인 유방암 진단에 대한 민감도와 특이도를 나타낸 것이다.
구분 ECRG4 ISG15 INHBA KRT15 MMP11
민감도(%) 78.3 82.5 91.3 82.6 69.6
특이도(%) 100 100 93.7 87.5 100
임계값 <= 0.3511 > 2.395 > 1.9834 <= 0.4577 > 2.4751
P value 0.0001 0.0001 0.0001 0.0001 0.0001
도 3과 표 6에서 나타나는 바와 같이 진행단계가 1기인 유방암 진단에 대한 ROC 커브의 패턴 민감도, 특이도는 도 2 및 표 5의 진행단계가 전체인 유방암 진단의 경우와 거의 유사하므로, 선별된 유방암 진단용 후보 바이오마커를 이용하여 진행단계가 1기인 유방암을 효과적으로 진단할 수 있고, 이를 통해 조기에 유방암을 치료할 수 있다.
(3) 로지스틱 회귀분석을 통한 유방암 진단용 후보 바이오마커 조합의 진단 성능 분석
유방암 조직에서 특이적으로 저발현되는 유전자인 KRT15 또는 ECRG4 하나만을 유방암 진단용 바이오마커로 이용하는 경우와 유방암 조직에서 특이적으로 저발현 또는 고발현되는 유전자인 KRT15, ECRG4, INHBA, ISG15, MMP11의 조합을 유방암 진단용 바이오마커로 이용하는 경우의 진단 정확도를 알아보기 위하여 로지스틱 회귀분석을 실시하였고, 그 결과를 표 7에 나타내었다. 단, 하나만의 유전자를 유방암 진단용 바이오마커로 사용하는 경우 ROC 커브에 의한 진단 성능 값과 로지스틱 회귀분석에 의한 진단 성능 값은 차이가 있을 수 있다.
바이오마커 유전자의 조합수 KRT15 ECRG4 ISG15 INHBA MMP11 특이도(정상 구분률)
(%)		 민감도(암 구분률)
(%)		 진단 정확도(%)
1 ○ 31.25 96.87 89.58
○ 50 96.87 91.67
2 ○ ○ 68.75 96.87 93.75
○ ○ 75 99.22 96.53
○ ○ 68.75 98.44 95.14
○ ○ 50 98.44 93.06
○ ○ 81.25 98.44 96.53
○ ○ 68.75 97.66 94.44
○ ○ 62.5 97.66 93.75
3 ○ ○ ○ 75 97.66 95.14
○ ○ ○ 75 99.22 96.53
○ ○ ○ 75 96.87 94.44
○ ○ ○ 81.25 99.22 97.22
○ ○ ○ 81.25 96.87 95.14
○ ○ ○ 75 97.66 95.14
○ ○ ○ 93.75 99.22 98.61
○ ○ ○ 87.5 99.22 97.92
○ ○ ○ 81.25 98.44 96.53
4 ○ ○ ○ ○ 93.75 99.22 98.61
○ ○ ○ ○ 87.5 99.22 97.92
○ ○ ○ ○ 81.25 98.44 96.53
○ ○ ○ ○ 75 97.66 95.14
○ ○ ○ ○ 93.75 99.22 98.61
5 ○ ○ ○ ○ ○ 93.75 99.22 98.61
표 7에서 나타나는 바와 같이 KRT15 유전자만을 유방암 진단용 바이오마커로 사용하는 경우 유방암 환자를 유방암으로 판정할 확률은 96.87%이고 정상인을 정상으로 판정할 확률은 31.25%인데 반해, KRT15 유전자와 ECRG4 유전자를 조합하여 유방암 진단용 바이오마커로 사용하면 정상인을 정상으로 판정할 확률이 50%로 증가하고, 결과적으로 진단 정확도가 높아진다. KRT15, ECRG4, INHBA, ISG15, MMP11의 조합수가 증가할수록 유방암 환자를 유방암으로 판정할 확률 또는 정상인을 정상으로 판정할 확률이 증가하므로 유방암 진단용 바이오마커의 조합을 통해 진단 정확도를 높일 수 있다.
도 1은 정상인의 정상 조직과 진행단계별 유방암 환자의 유방암 조직에서의 유방암 진단용 후보 바이오마커 유전자의 발현수준을 나타낸 그래프로서, 도 1A는 INHBA 유전자를, 도 1B는 MMP11 유전자를, 도 1C는 ISG15 유전자를, 도 1D는 KRT15 유전자를, 도 1E는 ECRG4 유전자를 나타낸 것이다.
도 2는 유방암 환자의 진행단계를 고려하지 않은 유방암 진단용 후보 바이오마커의 발현수준에 대한 ROC 커브를 나타낸 그래프로서, 도 2A는 도 1을 재구성한 것이고, 도 2B는 각 유전자별 ROC 커브이다.
도 3은 진행단계가 1기인 유방암 환자만을 대상으로 하여 유방암 진단용 후보 바이오마커의 발현수준에 대한 ROC 커브를 나타낸 그래프로서, 도 3A는 도 1의 진행단계가 1기인 유방암 환자만의 값을 재구성한 것이고, 도 3B는 진행단계가 1기인 유방암 환자만을 대상으로 한 각 유전자별 ROC 커브이다.
<110> The Industry & Academic Cooperation in Chungnam National University <120> Biomarker for diagnosing breast cancer and diagnostic agent for breast cancer <130> P08-06795 <160> 22 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 80 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> polunucleotide fragment of KRT15 gene <400> 1 gaccattgaa gagctccggg acaagatcat ggccaccacc atcgacaact cccgggtcat 60 cctggagatc gacaatgcca 80 <210> 2 <211> 1861 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 2 cactcaaggt gtgcaggcag ctgtgtttgt caggaaggca gaaggagttg gctttgcttt 60 aggggaggag acgaggtccc acaacaccct ctgaagggta tataaggagc cccagcgtgc 120 agcctggcct ggtacctcct gccagcatct cttgggtttg ctgagaactc acgggctcca 180 gctacctggc catgaccacc acatttctgc aaacttcttc ctccaccttt gggggtggct 240 caacccgagg gggttccctc ctggctgggg gaggtggctt tggtgggggg agtctctctg 300 ggggaggtgg aagccgaagt atctcagctt cttctgctag gtttgtctct tcagggtcag 360 gaggaggata tgggggtggc atgagggtct gtggctttgg tggaggggct ggtagtgttt 420 tcggtggagg ctttggaggg ggcgttggtg ggggttttgg tggtggcttt ggtggtggcg 480 atggtggtct cctctctggc aatgagaaaa ttaccatgca gaacctcaat gaccgcctgg 540 cctcctacct ggacaaggta cgtgccctgg aggaggccaa tgctgacctg gaggtgaaga 600 tccatgactg gtaccagaag cagaccccaa ccagcccaga atgcgactac agccaatact 660 tcaagaccat tgaagagctc cgggacaaga tcatggccac caccatcgac aactcccggg 720 tcatcctgga gatcgacaat gccaggctgg ctgcggacga cttcaggctc aagtatgaga 780 atgagctggc cctgcgccag ggcgttgagg ctgacatcaa cggcttgcgc cgagtcctgg 840 atgagctgac cctggccagg actgacctgg agatgcagat cgagggcctg aatgaggagc 900 tagcctacct gaagaagaac cacgaagagg agatgaagga gttcagcagc cagctggccg 960 gccaggtcaa tgtggagatg gacgcagcac cgggtgtgga cctgacccgt gtgctggcag 1020 agatgaggga gcagtacgag gccatggcgg agaagaaccg ccgggatgtc gaggcctggt 1080 tcttcagcaa gactgaggag ctgaacaaag aggtggcctc caacacagaa atgatccaga 1140 ccagcaagac ggagatcaca gacctgagac gcacgatgca ggagctggag atcgagctgc 1200 agtcccagct cagcatgaaa gctgggctgg agaactcact ggccgagaca gagtgccgct 1260 atgccacgca gctgcagcag atccaggggc tcattggtgg cctggaggcc cagctgagtg 1320 agctccgatg cgagatggag gctcagaacc aggagtacaa gatgctgctt gacataaaga 1380 cacggctgga gcaggagatc gctacttacc gcagcctgct cgagggccag gatgccaaga 1440 tggctggcat tggcatcagg gaagcctctt caggaggtgg tggtagcagc agcaatttcc 1500 acatcaatgt agaagagtca gtggatggac aggtggtttc ttcccacaag agagaaatct 1560 aagtgtctat tgcaggagaa acgtcccttg ccactcccca ctctcatcag gccaagtgga 1620 ggactggcca gagggcctgc acatgcaaac tccagtccct gccttcagag agctgaaaag 1680 ggtccctcgg tcttttattt cagggctttg catgcgctct attccccctc tgcctctccc 1740 caccttcttt ggagcaagga gatgcagctg tattgtgtaa caagctcatt tgtacagtgt 1800 ctgttcatgt aataaagaat tacttttcct tttgcaaata aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa 1860 a 1861 <210> 3 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Sense Primer of KRT15 gene <400> 3 gaccattgaa gagctccggg 20 <210> 4 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antisense primer of KRT15 gene <400> 4 tggcattgtc gatctccagg 20 <210> 5 <211> 74 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Polynucleotide fragment of ECRG4 gene <400> 5 attccttggc agcctgaagc gccagaagcg gcagctgtgg gaccggactc ggcccgaggt 60 gcagcagtgg tacc 74 <210> 6 <211> 793 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 6 ggataacccg cggccgcgcc tgcccgctcg cacccctctc ccgcgcccgg ttctccctcg 60 cagcacctcg aagtgcgccc ctcgccctcc tgctcgcgcc ccgccgccat ggctgcctcc 120 cccgcgcggc ctgctgtcct ggccctgacc gggctggcgc tgctcctgct cctgtgctgg 180 ggcccaggtg gcataagtgg aaataaactc aagctgatgc ttcaaaaacg agaagcacct 240 gttccaacta agactaaagt ggccgttgat gagaataaag ccaaagaatt ccttggcagc 300 ctgaagcgcc agaagcggca gctgtgggac cggactcggc ccgaggtgca gcagtggtac 360 cagcagtttc tctacatggg ctttgacgaa gcgaaatttg aagatgacat cacctattgg 420 cttaacagag atcgaaatgg acatgaatac tatggcgatt actaccaacg tcactatgat 480 gaagactctg caattggtcc ccggagcccc tacggcttta ggcatggagc cagcgtcaac 540 tacgatgact actaaccatg acttgccaca cgctgtacaa gaagcaaata gcgattctct 600 tcatgtatct cctaatgcct tacactactt ggtttctgat ttgctctatt tcagcagatc 660 ttttctacct actttgtgtg atcaaaaaag aagagttaaa acaacacatg taaatgcctt 720 ttgatatttc atgggaatgc ctctcattta aaaatagaaa taaagcattt tgttaaaaag 780 aaaaaaaaaa aaa 793 <210> 7 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Sense primer of ECRG4 gene <400> 7 attccttggc agcctgaagc 20 <210> 8 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antisense primer of ECRG4 gene <400> 8 ggtaccactg ctgcacctcg 20 <210> 9 <211> 85 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Polynucleotide fragment of INHBA gene <400> 9 ggcttggagt gtgatggcaa ggtcaacatc tgctgtaaga aacagttctt tgtcagtttc 60 aaggacatcg gctggaatga ctgga 85 <210> 10 <211> 2175 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 10 agtacagtat aaaacttcac agtgccaata ccatgaagag gagctcagac agctcttacc 60 acatgataca agagccggct ggtggaagag tggggaccag aaagagaatt tgctgaagag 120 gagaaggaaa aaaaaaacac caaaaaaaaa aataaaaaaa tccacacaca caaaaaaacc 180 tgcgcgtgag gggggaggaa aagcagggcc ttttaaaaag gcaatcacaa caacttttgc 240 tgccaggatg cccttgcttt ggctgagagg atttctgttg gcaagttgct ggattatagt 300 gaggagttcc cccaccccag gatccgaggg gcacagcgcg gcccccgact gtccgtcctg 360 tgcgctggcc gccctcccaa aggatgtacc caactctcag ccagagatgg tggaggccgt 420 caagaagcac attttaaaca tgctgcactt gaagaagaga cccgatgtca cccagccggt 480 acccaaggcg gcgcttctga acgcgatcag aaagcttcat gtgggcaaag tcggggagaa 540 cgggtatgtg gagatagagg atgacattgg aaggagggca gaaatgaatg aacttatgga 600 gcagacctcg gagatcatca cgtttgccga gtcaggaaca gccaggaaga cgctgcactt 660 cgagatttcc aaggaaggca gtgacctgtc agtggtggag cgtgcagaag tctggctctt 720 cctaaaagtc cccaaggcca acaggaccag gaccaaagtc accatccgcc tcttccagca 780 gcagaagcac ccgcagggca gcttggacac aggggaagag gccgaggaag tgggcttaaa 840 gggggagagg agtgaactgt tgctctctga aaaagtagta gacgctcgga agagcacctg 900 gcatgtcttc cctgtctcca gcagcatcca gcggttgctg gaccagggca agagctccct 960 ggacgttcgg attgcctgtg agcagtgcca ggagagtggc gccagcttgg ttctcctggg 1020 caagaagaag aagaaagaag aggaggggga agggaaaaag aagggcggag gtgaaggtgg 1080 ggcaggagca gatgaggaaa aggagcagtc gcacagacct ttcctcatgc tgcaggcccg 1140 gcagtctgaa gaccaccctc atcgccggcg tcggcggggc ttggagtgtg atggcaaggt 1200 caacatctgc tgtaagaaac agttctttgt cagtttcaag gacatcggct ggaatgactg 1260 gatcattgct ccctctggct atcatgccaa ctactgcgag ggtgagtgcc cgagccatat 1320 agcaggcacg tccgggtcct cactgtcctt ccactcaaca gtcatcaacc actaccgcat 1380 gcggggccat agcccctttg ccaacctcaa atcgtgctgt gtgcccacca agctgagacc 1440 catgtccatg ttgtactatg atgatggtca aaacatcatc aaaaaggaca ttcagaacat 1500 gatcgtggag gagtgtgggt gctcatagag ttgcccagcc cagggggaaa gggagcaaga 1560 gttgtccaga gaagacagtg gcaaaatgaa gaaattttta aggtttctga gttaaccaga 1620 aaaatagaaa ttaaaaacaa aacaaaaaaa aaaacaaaaa aaaacaaaag taaattaaaa 1680 acaaaacctg atgaaacaga tgaaggaaga tgtggaaaaa atccttagcc agggctcaga 1740 gatgaagcag tgaaagagac aggaattggg agggaaaggg agaatggtgt accctttatt 1800 tcttctgaaa tcacactgat gacatcagtt gtttaaacgg ggtattgtcc tttcccccct 1860 tgaggttccc ttgtgagcct tgaatcaacc aatctagtct gcagtagtgt ggactagaac 1920 aacccaaata gcatctagaa agccatgagt ttgaaagggc ccatcacagg cactttccta 1980 cccaattacc caggtcataa ggtatgtctg tgtgacactt atctctgtgt atatcagcat 2040 acacacacac acacacacac acacacacac acacaggcat ttccacacat tacatatata 2100 cacatactgg taaaagaaca atcgtgtgca ggtggtcaca cttccttttt ctgtaccact 2160 tttgcaacaa aacaa 2175 <210> 11 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Sense primer of INHBA gene <400> 11 ggcttggagt gtgatggcaa 20 <210> 12 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antisense primer of INHBA gene <400> 12 tccagtcatt ccagccgatg 20 <210> 13 <211> 81 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Polynucleotide fragment of ISG15 gene <400> 13 gggcaacgaa ttccaggtgt ccctgagcag ctccatgtcg gtgtcagagc tgaaggcgca 60 gatcacccag aagattggcg t 81 <210> 14 <211> 685 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 14 ataatagggc cggtgctgcc tgccgaagcc ggcggctgag aggcagcgaa ctcatctttg 60 ccagtacagg agcttgtgcc gtggcccaca gcccacagcc cacagccatg ggctgggacc 120 tgacggtgaa gatgctggcg ggcaacgaat tccaggtgtc cctgagcagc tccatgtcgg 180 tgtcagagct gaaggcgcag atcacccaga agatcggcgt gcacgccttc cagcagcgtc 240 tggctgtcca cccgagcggt gtggcgctgc aggacagggt cccccttgcc agccagggcc 300 tgggccccgg cagcacggtc ctgctggtgg tggacaaatg cgacgaacct ctgagcatcc 360 tggtgaggaa taacaagggc cgcagcagca cctacgaggt acggctgacg cagaccgtgg 420 cccacctgaa gcagcaagtg agcgggctgg agggtgtgca ggacgacctg ttctggctga 480 ccttcgaggg gaagcccctg gaggaccagc tcccgctggg ggagtacggc ctcaagcccc 540 tgagcaccgt gttcatgaat ctgcgcctgc ggggaggcgg cacagagcct ggcgggcgga 600 gctaagggcc tccaccagca tccgagcagg atcaagggcc ggaaataaag gctgttgtaa 660 agagaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaa 685 <210> 15 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Sense primer of ISG15 gene <400> 15 gggcaacgaa ttccaggtgt 20 <210> 16 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antisense primer of ISG15 gene <400> 16 acgccaatct tctgggtgat 20 <210> 17 <211> 94 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Polynucleotide fragment of MMP11 gene <400> 17 tagcaccatg gcaggactgg gggaactgga gtgtccttgc tgtatccctg ttgtgaggtt 60 ccttccaggg gctggcactg aagcaagggt gctg 94 <210> 18 <211> 2276 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 18 aagcccagca gccccggggc ggatggctcc ggccgcctgg ctccgcagcg cggccgcgcg 60 cgccctcctg cccccgatgc tgctgctgct gctccagccg ccgccgctgc tggcccgggc 120 tctgccgccg gacgcccacc acctccatgc cgagaggagg gggccacagc cctggcatgc 180 agccctgccc agtagcccgg cacctgcccc tgccacgcag gaagcccccc ggcctgccag 240 cagcctcagg cctccccgct gtggcgtgcc cgacccatct gatgggctga gtgcccgcaa 300 ccgacagaag aggttcgtgc tttctggcgg gcgctgggag aagacggacc tcacctacag 360 gatccttcgg ttcccatggc agttggtgca ggagcaggtg cggcagacga tggcagaggc 420 cctaaaggta tggagcgatg tgacgccact cacctttact gaggtgcacg agggccgtgc 480 tgacatcatg atcgacttcg ccaggtactg gcatggggac gacctgccgt ttgatgggcc 540 tgggggcatc ctggcccatg ccttcttccc caagactcac cgagaagggg atgtccactt 600 cgactatgat gagacctgga ctatcgggga tgaccagggc acagacctgc tgcaggtggc 660 agcccatgaa tttggccacg tgctggggct gcagcacaca acagcagcca aggccctgat 720 gtccgccttc tacacctttc gctacccact gagtctcagc ccagatgact gcaggggcgt 780 tcaacaccta tatggccagc cctggcccac tgtcacctcc aggaccccag ccctgggccc 840 ccaggctggg atagacacca atgagattgc accgctggag ccagacgccc cgccagatgc 900 ctgtgaggcc tcctttgacg cggtctccac catccgaggc gagctctttt tcttcaaagc 960 gggctttgtg tggcgcctcc gtgggggcca gctgcagccc ggctacccag cattggcctc 1020 tcgccactgg cagggactgc ccagccctgt ggacgctgcc ttcgaggatg cccagggcca 1080 catttggttc ttccaaggtg ctcagtactg ggtgtacgac ggtgaaaagc cagtcctggg 1140 ccccgcaccc ctcaccgagc tgggcctggt gaggttcccg gtccatgctg ccttggtctg 1200 gggtcccgag aagaacaaga tctacttctt ccgaggcagg gactactggc gtttccaccc 1260 cagcacccgg cgtgtagaca gtcccgtgcc ccgcagggcc actgactgga gaggggtgcc 1320 ctctgagatc gacgctgcct tccaggatgc tgatggctat gcctacttcc tgcgcggccg 1380 cctctactgg aagtttgacc ctgtgaaggt gaaggctctg gaaggcttcc cccgtctcgt 1440 gggtcctgac ttctttggct gtgccgagcc tgccaacact ttcctctgac catggcttgg 1500 atgccctcag gggtgctgac ccctgccagg ccacgaatat caggctagag acccatggcc 1560 atctttgtgg ctgtgggcac caggcatggg actgagccca tgtctcctca gggggatggg 1620 gtggggtaca accaccatga caactgccgg gagggccacg caggtcgtgg tcacctgcca 1680 gcgactgtct cagactgggc agggaggctt tggcatgact taagaggaag ggcagtcttg 1740 ggcccgctat gcaggtcctg gcaaacctgg ctgccctgtc tccatccctg tccctcaggg 1800 tagcaccatg gcaggactgg gggaactgga gtgtccttgc tgtatccctg ttgtgaggtt 1860 ccttccaggg gctggcactg aagcaagggt gctggggccc catggccttc agccctggct 1920 gagcaactgg gctgtagggc agggccactt cctgaggtca ggtcttggta ggtgcctgca 1980 tctgtctgcc ttctggctga caatcctgga aatctgttct ccagaatcca ggccaaaaag 2040 ttcacagtca aatggggagg ggtattcttc atgcaggaga ccccaggccc tggaggctgc 2100 aacatacctc aatcctgtcc caggccggat cctcctgaag cccttttcgc agcactgcta 2160 tcctccaaag ccattgtaaa tgtgtgtaca gtgtgtataa accttcttct tctttttttt 2220 tttttaaact gaggattgtc attaaacaca gttgttttct aaaaaaaaaa aaaaaa 2276 <210> 19 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Sense primer of MMP11 gene <400> 19 tagcaccatg gcaggactgg 20 <210> 20 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antisense primer of MMP11 gene <400> 20 cagcaccctt gcttcagtgc 20 <210> 21 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Sense primer of ACTB gene <400> 21 ttccttcctg ggcatggagt 20 <210> 22 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antisense primer of ACTB gene <400> 22 caggtctttg cggatgtcca 20

Claims (16)

  1. 삭제
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 서열번호 5의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 ECRG4 유전자의 전장 DNA로 이루어지고, 유방암 조직에서 특이적으로 저발현되는 것을 특징으로 하는 유방암 진단용 바이오마커.
  6. 제 5항의 ECRG4 유전자의 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브를 유효성분으로 포함하는 유방암 진단제.
  7. 제 6항에 있어서, 상기 프로브는 서열번호 7의 센스 프라이머 및 서열번호 8의 안티센스 프라이머로 구성되는 것을 특징으로 하는 유방암 진단제.
  8. 제 6항 또는 제 7항에 있어서, 상기 유방암은 진행단계가 1기인 것을 특징으로 하는 유방암 진단제.
  9. 서열번호 1의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 KRT15 유전자의 전장 DNA; 및
    서열번호 5의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 ECRG4 유전자의 전장 DNA로 이루어지고,
    유방암 조직에서 특이적으로 저발현되는 것을 특징으로 하는 유방암 진단용 바이오마커 조성물.
  10. 제 9항의 KRT15 유전자의 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브 및 ECRG4 유전자의 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브를 유효성분으로 포함하는 유방암 진단제 조성물.
  11. 제 10항에 있어서,
    상기 KRT15 유전자의 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브는 서열번호 3의 센스 프라이머 및 서열번호 4의 안티센스 프라이머로 구성되고,
    상기 ECRG4 유전자의 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브는 서열번호 7의 센스 프라이머 및 서열번호 8의 안티센스 프라이머로 구성되는 것을 특징으로 하는 유방암 진단제 조성물.
  12. 제 10항 또는 제11항에 있어서, 상기 유방암은 진행단계가 1기인 것을 특징으로 하는 유방암 진단제 조성물.
  13. a) 서열번호 1의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 KRT15 유전자의 전장 DNA로 이루어지고, 유방암 조직에서 특이적으로 저발현되는 것을 특징으로 하는 바이오마커;
    b) 서열번호 5의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 ECRG4 유전자의 전장 DNA로 이루어지고, 유방암 조직에서 특이적으로 저발현되는 것을 특징으로 하는 바이오마커; 및
    c) 서열번호 9의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 INHBA 유전자의 전장 DNA, 서열번호 13의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 ISG15 유전자의 전장 DNA, 및 서열번호 17의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 MMP11 유전자의 전장 DNA로 구성되는 그룹으로부터 하나 이상 선택되고, 유방암 조직에서 특이적으로 고발현되는 것을 특징으로 하는 바이오마커로 이루어진 유방암 진단용 바이오마커 조성물.
  14. a) KRT15 유전자의 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브;
    b) ECRG4 유전자의 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브; 및
    c) INHBA 유전자의 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브, ISG15 유전자의 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브, 및 MMP11 유전자의 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 프로브를 유효성분으로 포함하는 유방암 진단제 조성물.
  15. 제 14항에 있어서,
    상기 KRT15 유전자의 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브는 서열번호 3의 센스 프라이머 및 서열번호 4의 안티센스 프라이머로 구성되고,
    상기 ECRG4 유전자의 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브는 서열번호 7의 센스 프라이머 및 서열번호 8의 안티센스 프라이머로 구성되고,
    상기 INHBA 유전자의 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브는 서열번호 11의 센스 프라이머 및 서열번호 12의 안티센스 프라이머로 구성되고,
    상기 ISG15 유전자의 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브는 서열번호 15의 센스 프라이머 및 서열번호 16의 안티센스 프라이머로 구성되고,
    상기 MMP11 유전자의 전장 DNA에 특이적으로 결합하는 프로브는 서열번호 19의 센스 프라이머 및 서열번호 20의 안티센스 프라이머로 구성되는 것을 특징으로 하는 유방암 진단제 조성물.
  16. 제 14항 또는 제15항에 있어서, 상기 유방암은 진행단계가 1기인 것을 특징으로 하는 유방암 진단제 조성물.
KR1020090038713A 2009-05-01 2009-05-01 유방암 진단용 바이오마커 및 유방암 진단제 KR101174369B1 (ko)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020090038713A KR101174369B1 (ko) 2009-05-01 2009-05-01 유방암 진단용 바이오마커 및 유방암 진단제
PCT/KR2010/002768 WO2010126338A2 (ko) 2009-05-01 2010-04-30 유방암 진단용 바이오마커 및 유방암 진단제

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020090038713A KR101174369B1 (ko) 2009-05-01 2009-05-01 유방암 진단용 바이오마커 및 유방암 진단제

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20100119661A KR20100119661A (ko) 2010-11-10
KR101174369B1 true KR101174369B1 (ko) 2012-08-16

Family

ID=43032714

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020090038713A KR101174369B1 (ko) 2009-05-01 2009-05-01 유방암 진단용 바이오마커 및 유방암 진단제

Country Status (2)

Country Link
KR (1) KR101174369B1 (ko)
WO (1) WO2010126338A2 (ko)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL2007470C2 (en) * 2011-09-26 2013-03-28 Macawi Internat B V Dynamic blower module.
CN106924714B (zh) * 2017-03-16 2020-01-24 山东大学 多肽c2orf40mpf在制备抗肿瘤药物中的应用
KR102133432B1 (ko) * 2019-12-26 2020-07-14 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 폐암 질환의 진단용 마커

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030124128A1 (en) 2001-06-21 2003-07-03 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Compositions, kits, and methods for identification, assessment, prevention, and therapy of breast cancer
US20040029114A1 (en) 2001-01-24 2004-02-12 Eos Technology, Inc. Methods of diagnosis of breast cancer, compositions and methods of screening for modulators of breast cancer
US20070269432A1 (en) 2003-09-24 2007-11-22 Oncotherapy Science, Inc. Method of Diagnosing Breast Cancer

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040029114A1 (en) 2001-01-24 2004-02-12 Eos Technology, Inc. Methods of diagnosis of breast cancer, compositions and methods of screening for modulators of breast cancer
US20030124128A1 (en) 2001-06-21 2003-07-03 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Compositions, kits, and methods for identification, assessment, prevention, and therapy of breast cancer
US20070269432A1 (en) 2003-09-24 2007-11-22 Oncotherapy Science, Inc. Method of Diagnosing Breast Cancer

Also Published As

Publication number Publication date
WO2010126338A3 (ko) 2011-06-23
WO2010126338A2 (ko) 2010-11-04
KR20100119661A (ko) 2010-11-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK2456889T3 (en) Markers of endometrial cancer
EP1888785B1 (en) Thyroid fine needle aspiration molecular assay
BRPI0708534A2 (pt) ensaio molecular para prognosticar a recorrência de cáncer do cólon dukes b
Rogers et al. Differentiating pancreatic lesions by microarray and QPCR analysis of pancreatic juice RNAs
CA2770716A1 (en) Methods, primers, probes and kits useful for the detection of braf mutations
KR20180009762A (ko) 폐암을 진단하거나 검출하기 위한 방법 및 조성물
KR20190026769A (ko) 유전자 발현 프로파일을 사용하여 폐암을 진단하기 위한 조성물 및 방법
JP2009050189A (ja) 抗癌剤の有効性予測方法
US9353416B2 (en) Gene relating to estimation of postoperative prognosis for breast cancer
KR101174369B1 (ko) 유방암 진단용 바이오마커 및 유방암 진단제
US10301685B2 (en) Method for predicting the benefit from inclusion of taxane in a chemotherapy regimen in patients with breast cancer
KR20180002882A (ko) 유전자 발현 프로파일 및 유방암에 대한 이의 용도
EP3368684B1 (en) Biomarker for breast cancer
JP2005270093A (ja) 乳癌の術後予後予測に関与する遺伝子
CA2962551C (en) Method for evaluating efficacy of chemoradiotherapy against squamous cell carcinoma
KR102052398B1 (ko) 전립선암 진단용 바이오마커 및 이의 용도
KR20200025968A (ko) 폐선암종 환자의 예후 진단 및 치료 전략 결정용 성별 특이적 바이오 마커
EP1682679B1 (en) Molecular marker
KR20200104106A (ko) 신장암 환자의 치료 전략 결정 및 예후 진단용 재발 특이적 마커
EP1660676B1 (en) Diagnosis of risk of breast cancer
KR20210040921A (ko) 신장암 환자의 치료 전략 결정 및 예후 진단용 재발 특이적 마커
US20030198961A1 (en) Determining cancer aggressiveness
CN117305450A (zh) 用于检测膀胱癌相关基因甲基化的核酸组合物及其相应的试剂盒和用途
EP1797196B1 (en) Detection of breast cancer
ES2399246T3 (es) Predicción del resultado del tratamiento del cáncer de mama

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20150715

Year of fee payment: 4

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20160809

Year of fee payment: 5

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20170810

Year of fee payment: 6

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20180807

Year of fee payment: 7