KR101149711B1 - 저분자 후코이단, 비타민나무 추출물 및 니아신아마이드가 함유된 피부 미백용 화장료 조성물 및 그 제조방법 - Google Patents

저분자 후코이단, 비타민나무 추출물 및 니아신아마이드가 함유된 피부 미백용 화장료 조성물 및 그 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 타이로시나아제의 글리코실화(glycosylation) 과정을 억제하는 저분자 후코이단, 항산화 성분을 함유한 비타민나무 추출물 및 피부에서 이미 만들어진 멜라닌을 함유하고 있는 멜라노좀이 멜라닌형성세포에서 각질형성세포로 이동하는 것을 억제하는 니아신아마이드를 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

저분자 후코이단, 비타민나무 추출물 및 니아신아마이드가 함유된 피부 미백용 화장료 조성물 및 그 제조방법{Whitening cosmetic composition containing Hippophae rhamnoides extract, low molecular weight fucoidan and niacin amide, and the method for preparing thereof}
본 발명은 타이로시나아제의 글리코실화(glycosylation) 과정을 억제하는 저분자 후코이단(fucoidan), 항산화 성분을 함유한 비타민나무 추출물 및 피부에서 이미 만들어진 멜라닌을 함유하고 있는 멜라노좀이 멜라닌형성세포에서 각질형성세포로 이동하는 것을 억제하는 니아신아마이드를 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부는 자연적 과정을 통해서 뿐만 아니라, 자외선, 스트레스 및 피부 부작용 등의 외부 요인에 의해 쉽게 노화된다. 피부 노화 과정 중 피부가 부분적으로 검어지는 현상(색소 침착: pigmentation)이 발생되고 이로 인해 미관상 문제가 나타나게 된다.
인체 피부에서 색소 침착이 발생되는 과정을 살펴보면, 멜라닌이라는 색소가 만들어지는 과정이 가장 중요한 단계이다. 멜라닌은 피부에 존재하는 멜라닌 형성세포에서 만들어지는데, 타이로신으로부터 타이로시나아제라는 효소에 의해 만들어진다. 이렇게 만들어진 멜라닌은 주변의 각질형성세포로 전달되고 각질형성세포의 피부 턴오버에 의해 각질층으로 전달되고 마침내 때와 함께 피부에서 떨어져 나가게 된다. 그러므로 일정한 피부색을 나타내려면 일정한 양의 멜라닌이 만들어지고 일정량이 피부 각질을 통해 없어져야 한다.
한편, 색소 침착은 멜라닌이 너무 많이 만들어지거나, 피부 각질로 잘 떨어져 나가지 못해 일어나는 현상에서 기인된다. 따라서, 색소 침착을 막고 피부 미백 효과를 나타내기 위해서는 하기 표 1에 나타낸 바와 같이 멜라닌 형성세포에서 멜라닌을 합성하기 위하여 거치는 일련의 과정을 억제하고 불활화시켜야 한다.
가능한 미백 접근 방법
단계 가능한 미백 접근 방법
멜라닌 합성 전 멜라노좀 구조 기능의 변화
전사 억제
타이로시나아제의 글리코실화 억제
멜라닌 합성 타이로시나아제 억제
퍼옥시다아제 억제
항산화제
환원제
지방
멜라닌 합성 후 멜라노좀 이동 억제
멜라닌 분배 촉진
상기 표 1에서, 멜라닌 합성 전 단계는 멜라닌형성세포 내 멜라노좀이 멜라닌을 합성할 수 있도록 변형되며, 타이로시나아제의 글리코실화를 통하여 멜라닌 합성을 촉진한다. 멜라닌 합성 과정에서는 멜라노좀 내의 타이로신이 산소 환경에서 타이로시나아제와 만나 멜라닌을 합성하며, 멜라닌 합성 후 단계는 멜라닌을 갖고 있는 멜라노좀이 각질 형성세포로 이동하는 과정이다.
이에 본 발명자들은 멜라닌 합성과 관련된 각 단계별로 작용할 수 있는 물질 중 멜라닌 합성 전에 타이로시나아제의 글리코실화(glycosylation) 과정을 억제하는 저분자 후코이단; 멜라닌 합성 과정에서 항산화 효과를 보이는 비타민나무 추출물; 및 멜라닌 합성 후 피부에서 만들어진 멜라닌을 함유하고 있는 멜라노좀이 멜라닌형성세포에서 각질형성세포로의 이동하는 것을 억제하는 니아신아마이드를 선별하고, 이들의 적정 비율로 혼합하여 사용할 경우 우수한 피부 미백 효과를 보이는 것을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명의 목적은 멜라닌 합성과 관련된 모든 단계에서 효능을 보임으로써 멜라닌 합성 및 이동을 억제하고 피부 자극이 없는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에서는 저분자 후코이단, 비타민나무 추출물 및 니아신아마이드를 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서는 타이로시나아제의 글리코실화를 억제하는 저분자 후코이단, 항산화 효과가 우수한 비타민나무 추출물 및 멜라노좀의 이동을 억제하는 니아신아마이드를 유효성분으로 함유함으로써 자외선 또는 α-MSH에 의한 색소 침착을 억제하였고, 우수한 미백효과를 부여할 수 있었다.
본 발명은 멜라닌 합성과 관련된 일련의 과정 중 타이로시나아제의 글리코실화 억제를 통해 멜라닌 합성 이전 단계를 억제하는 저분자 후코이단; 항산화 효과를 통해 멜라닌 합성을 억제하는 비타민나무 추출물; 및 합성된 멜라닌을 함유하는 멜라노좀의 이동을 억제하는 니아신아마이드를 유효성분으로 함유함으로써 멜라닌 합성 및 이동을 억제하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.
또한 본 발명에서는 상기 저분자 후코이단, 비타민나무 추출물 및 니아신아마이드를 적정 비율로 혼합하여 사용함으로써 그 효능을 최적화하였다. 이를 위하여, 본 발명의 일 실시예에서는 글리코실화 억제 시험을 통하여 저분자 후코이단의 유효 농도를 결정하고, DPPH 시험을 통하여 비타민나무 추출물의 유효농도를 결정하였으며, 각질형성세포/멜라닌형성세포 배양을 통해 니아신아마이드의 멜라노좀 이동 억제 유효농도를 결정하였다. 또, 인공피부(Reconstructed epidermis)를 통해 자외선 또는 α-MSH에 의한 색소 침착을 억제할 수 있는 비타민 추출물, 저분자 후코이단 및 니아신아마이드 최적의 조성비를 결정한 다음 특정 조성비로 제조한 화장료의 미백 효과를 임상시험을 통해 확인하였다.
후코이단은 끈적끈적한 점질 구조의 황산염화한 다당류로 고미역 및 다시마 등 갈조류에 들어있는 성분이다. 후코이단의 평균 분자량은 20 kDa이며, 후코스(Fucose)라는 기본당과 황산기가 결합되어 있다. 본 발명에서는 다시마에서 추출한 후코이단을 분자량 5～15 kDa으로 제조한 저분자 후코이단을 사용하는 것이 바람직하며, 보다 상세하게는 라디컬 공정(radical process) 및 이온교환크로마토그래피(ion exchange chromatography)를 통해 저분자 후코이단을 제조할 수 있다.
일반적으로 멜라닌 합성에 관여하는 타이로시나아제는 아스파라긴 잔기에서 글리코실화가 일어나면서 활성화되며, 이 과정에서 기질로 당류가 요구된다. 이때, 저분자 후코이단이 상기 글루코실화를 주관하는 효소에 결합하여 타이로시나아제가 활성화되는 것을 억제한다. 본 발명에 의한 조성물은 상기 저분자 후코이단을 조성물 총 중량에 대하여 1～10 중량%로 함유하는 것이 바람직하며, 그 함량이 1 중량% 미만인 경우에는 원하는 효능을 얻을 수 없고, 10 중량%를 초과하는 경우에는 제형안정성에 문제가 발생한다.
비타민나무는 비타민, 아미노산, 미네랄 등이 높은 영양가가 잎, 과육, 과피 및 씨 안에 포함되어 있다. 상기 비타민나무의 잎 또는 줄기를 당업계에 잘 알려진 방법으로 물 또는 유기용매로 추출한 추출물 형태로 사용할 수 있다. 본 발명에 사용하는 유기용매는 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에테르, 에틸아세테이트, 클로로포름 및 이들 유기용매와 물의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택될 수 있으며, 바람직하게는 80% 에탄올을 사용한다. 이때, 추출온도는 10～80℃가 바람직하며, 6～24시간 동안 추출할 수 있다. 상기 추출온도 및 추출시간을 벗어나면 추출 효율이 떨어지거나 성분의 변화가 생길 수 있다. 이러한 비타민나무 추출물은 산소 환경에서 활성화된 타이로시나아제에 의해 타이로신이 도파, 도파퀴논 및 멜라닌으로 되는 과정을 억제하는 항산화 효과를 갖는다.
본 발명에 의한 조성물은 상기 비타민나무 추출물을 조성물 총 중량에 대하여 0.05～10 중량%로 함유하는 것이 바람직하며, 그 함량이 0.05 중량% 미만인 경우에는 원하는 효능을 얻을 수 없고, 10 중량%를 초과하는 경우에는 제형안정성에 문제가 발생한다.
니아신아마이드는 생물에 존재하는 아미드로서, 니코틴산과 상호변환적(相互變換的)이며, 보통 NAD와 NADP와 같은 조효소의 구성 성분이 된다. 또한 니코틴산과 유사하게 사용되며, 합성된 멜라닌이 함유된 멜라노좀이 각질형성세포로 전달되는 것을 억제한다. 본 발명에 의한 조성물은 상기 니아신아마이드를 조성물 총 중량에 대하여 1～7 중량%로 함유하는 것이 바람직하며, 그 함량이 2 중량% 미만인 경우에는 원하는 효능을 얻을 수 없고, 7 중량%를 초과하는 경우에는 피부 안전성에 문제가 있다.
본 발명에 의한 피부 미백용 화장료 조성물은 상기 유효성분 이외에 당업계에서 통상적으로 사용되는 첨가물 또는 부가물 등을 더 첨가하여 스킨, 스킨토너, 스킨소프트너, 스킨로션, 아스트린젠트, 로션, 영양로션, 밀크로션, 모이스처로션, 영양크림, 맛사지크림, 모이스처크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 세럼, 컨센트레이트, 팩, 마스크, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디클렌저, 바디로션, 바디오일, 샴푸, 린스, 파운데이션, 메이크업베이스, 팩트, 루스파우더, 프레스드 파우더, 콤팩트, 아이섀도우, 아이라이너 또는 립스틱 등으로 제형화될 수 있으나, 이에만 한정되는 것은 아니다.
이하, 본 발명의 내용을 실시예 및 시험예를 통하여 보다 구체적으로 설명한다. 이들 실시예는 본 발명의 내용을 이해하기 위해 제시되는 것일 뿐 본 발명의 권리범위가 이들 실시예로 한정되는 것은 아니고, 당업계에서 통상적으로 주지된 변형, 치환 및 삽입 등을 수행할 수 있으며, 이에 대한 것도 본 발명의 범위에 포함된다.
[실시예 1] 저분자 후코이단 제조
후코이단과 아세트산구리 일수화물(Cu(CH3COO)2H2O:0.08 g, 0.40 mmol)을 물 20 ml에 60℃에서 용해하여 시료로 만들었다. 이때 2 M의 NaOH를 넣어주며 pH 7로 유지하였다. 그 다음 연동펌프를 사용하여 유속 12 ml/h로 9%의 과산화수소 수용액을 넣어 주었고 이 과정을 5시간 지속하였다. 상기 시료에 Chelex 100 킬레이트 수지를 첨가하여 시료에서 구리를 분리시킨 후 0.1 M NaOH로 중화한 다음 탈염시켰다. 여기서 얻어진 시료를 마지막으로 1,000 g/mol의 분자량을 필터하는 멤브레인(membrane)을 사용하는 여과작용 세포(diafiltration cell)를 이용하여 필터링을 해준 후 동결건조하여 분자량 5～15 kDa의 저분자 후코이단을 얻었다.
[시험예 1] α-글루코시다아제 활성 억제 실험법
p-니트로페닐 α-글루코시드 용액(PNP-Gluc)을 이용한 방법으로 상기 실시예 1에서 제조한 저분자 후코이단의 α-글루코시다아제 활성 억제 효과를 확인하였다. 실시예 1에서 제조한 저분자 후코이단을 물 20 ml(아세트산구리 일산화물 함유)에 용해한 시료 용액 50, 100 및 200 ㎕, 효모 α-글루코시다아제(3 untits/ml) 2 ㎕, 10 mM p-니트로페닐 α-D-글루코시드 용액(PNP-Gluc) 5 ㎕를 96-웰 마이크로플레이트에 모두 넣은 후 37℃에서 30분간 반응시킨 다음 탄산나트륨(Sodium Carbonate) 용액 200 ㎕를 넣어주어 반응을 정지시켰다. 분광계로 파장 405 nm에서 반응 용액의 흡광도를 측정하였다. 시험물질의 α-글루코시다아제 활성 저해 효과는 하기 수학식 1로 산출하였으며, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다. 이때, 양성대조군으로는 저분자 후코이단과 동일한 농도의 DNJ(Deoxynojirimycin)을 사용하였다.
Figure 112010012382102-pat00001
a: (-) 대조군의 흡광도, b: 시험물질의 흡광도,
a',b': α-글루코시다아제 대신 H2O로 대체하여 측정한 흡광도
α-글루코시다아제 활성 저해
농도(㎍/㎖) 실시예 1의 저분자 후코이단 DNJ
0 0 0.0
50 30.8 17.3
100 54.2 68.2
200 72.5 95.0
상기 표 2의 결과에서, 실시예 1의 저분자 후코이단은 50, 100 및 200 ㎍/㎖ 농도에서 높은 글리코실화(Glycosylation) 반응 억제 효과를 나타내었고, 특히 50 ㎍/㎖에서는 양성대조군인 DNJ의 17.3% 보다 더 높은 30.8%의 억제효과를 나타내었다. 이러한 결과를 통해 본 발명에 의한 저분자 후코이단이 타이로시나아제의 성숙 과정(글리코실화)을 억제하는 유효물질임을 확인하였으며, 또한 우수한 미백 효과를 보이는 물질임을 알 수 있었다. 상기 결과에서 저분자 후코이단은 50 ㎍/㎖에서부터 그 효과를 유의적으로 나타내었으므로 1%의 후코이단 용액을 200배 희석하여 사용할 수 있다.
[실시예 2]
비타민나무의 잎을 정제수로 세척하고 분쇄하여 건조시킨 다음 비타민나무 건조물 10 g에 정제수 1,000 ml로 채운 후 80℃로 3시간 동안 3회 반복 추출 여과지로 여과하였다. 상기 여과액을 냉각 콘덴서가 부착되어 있는 증류장치를 이용하여 감압 농축하고 동결건조하였다.
[실시예 3]
비타민나무의 잎을 정제수로 세척하고 분쇄하여 건조시킨 다음 비타민나무 건조물 10 g에 70% 에탄올 수용액 1,000 ml로 채운 후 80℃로 3시간 동안 3회 반복 추출 여과지로 여과하였다. 상기 여과액을 냉각 콘덴서가 부착되어있는 증류장치를 이용하여 감압 농축하고 동결건조하였다.
[시험예 2] 피부색소 세포 타이로시나아제 활성 저해 효과
일반적으로 타이로시나아제 활성 억제율을 측정하는 방법인 L-타이로신 용액을 이용한 방법으로 실시예 3에서 제조한 비타민나무 추출물의 버섯 타이로시나아제의 활성저해 효과를 측정하였다. L-타이로신 용액 50 ㎕을 96-웰 마이크로플레이트에 넣고 여기에 농도 별로 준비된 실시예 3 비타민나무 추출물을 각각 5 ㎕씩 가하고, 2 unit/㎕ 농도의 버섯 타이로시나아제 5 ㎕와 완충용액[제1인산칼륨(potassium phosphate monobasic; KH2PO4)과 제2인산칼륨(Potassium phosphate dibasic; K2HPO4)을 혼합하여 pH 6.8로 맞춘 완충용액] 45 ㎕를 넣어 37℃에서 10분간 반응시켰다. 반응이 끝나면 웰을 얼음에 넣어 5분간 반응을 중지시키고 분광계(spectrometer)로 파장 475 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시험물질의 타이로시나아제 활성 저해 효과는 하기 수학식 2로 산출하였으며, 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다. 이때, 양성대조군으로는 비타민나무 추출물과 동일한 농도의 코지산을 사용하였다.
Figure 112010012382102-pat00002
타이로시나아제 억제 활성
농도(㎍/㎖) 실시예 3의 비타민나무 추출물 코지산
0 0 0.0
50 14.9 87.7
100 24.6 88.7
200 31.1 89.1
300 50.9 89.8
상기 표 3의 결과에서, 본 발명에 의한 실시예 3의 비타민나무 추출물은 50, 100, 200 및 300 ㎍/㎖ 농도에서 각각 14.9%, 24.6%, 31.1% 및 50.9%의 L-타이로시나아제의 활성 억제 효과를 나타내었다. 특히 300 ㎍/㎖에서 IC50 값을 나타내어 미백물질로서 큰 효과를 보일 수 있음을 확인하였다.
[시험예 3] DPPH 시험을 통한 비타민나무 추출물의 유효농도 확인
시험물질을 측정하려는 농도에 맞게 에탄올에 녹여 96-웰 플레이트에 넣고, 100 μM DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 용액을 넣어준 다음 30분간 37℃에서 보관하였다. 분광광도계(spectrophotometer)를 이용하여 517 nm(기기에 따라 540 nm도 가능)에서의 흡광도를 측정한 후 비타민 C를 양성대조군으로 사용하여 시험물질의 항산화력을 비교하였다. 시험물질로는 실시예 1의 저분자 후코이단, 실시예 3의 비타민나무 추출물 및 니아신아마이드를 3:5:2의 중량비로 혼합한 복합추출물을 100 ppm 및 50 ppm 농도를 사용하여 DPPH 실험방법으로 수행하였다.
시험물질　 100 ppm 50 ppm
복합추출물 0.083 0.090
비타민 C 0.352 0.335
상기 표 4의 결과에서, 본 발명에 의한 복합추출물은 DPPH 실험에서 항산화력으로 뛰어난 비타민 C의 값보다 복합 추출물의 항산화 DPPH 값이 낮게 나왔다. 비타민나무 추출물은 비타민 C 보다 우수한 황산화력을 나타내었다.
[시험예 4] 니아신아마이드의 멜라노좀 이동 저해 효과 측정
케라티노사이트와 멜라노사이트는 각각 신생아의 포피로부터 분리하였다. 구체적으로, 0.25% 트립신을 처리하여 상기 포피 조직으로부터 표피를 분리한 다음, 7.5 ㎎/㎖ 소 뇌하수체 추출물, 0.1 ㎎/㎖ 사람표피성장인자(hEGF), 0.5 ㎎/㎖ 히드로코르티손(hydrocortisone), 50 ㎎/㎖ 겐타마이신(gentamicine), 50 ㎎/㎖ 암포테리신(amphotericin) 및 5 ㎎/㎖ 인슐린을 첨가한 KGM(Clonetics) 배지로 교반(vortex)하여 세포를 분리하고, T75 플라스크에서 배양하여 케라티노사이트와 멜라노사이트를 각각 얻었다. 이때, 배양된 멜라노사이트는 멜라노좀을 분석하기 위하여 CFDA(carboxy fluorescein diacetate)로 염색하였다. 실험을 위하여 케라티노사이트와 멜라노사이트를 공동배양배지(KGM + (KGM-TPA-히드로코르티손))에서 공동 배양하였다. 그런 다음, 6일 동안 12시간 간격으로 공동 배양한 세포 중 일부에 니아신아마이드 100 ppm(시험물질 A) 및 200 ppm(시험물질 B)을 각각 첨가하였다. 그리고 아무것도 첨가하지 않은 것을 대조군으로 하였다. 상기 시험물질 A 및 B를 첨가한 세포를 항사이토케라틴(Zymed Laboratories, 미합중국)에 대한 쥐의 단클론항체와 배양하여 FACS(fluorescence activated cell sorting)에서 케라티노사이트를 분리하였고, 그 후 피코에리트린과 결합된 항마우스 IgG(Burlingame, 미합중국)와 상기 배양된 세포를 37℃에서 30분간 반응시켰다. 그런 다음, 스크래퍼를 이용하여 배양된 세포를 플라스크로부터 떼어낸 후 EPICSXL 플로우 사이토미터(Coulter Cytometry, Coulter Corp., 미합중국)를 이용하여 FACS 분석하였다. 이때, FACS 분석에서는 575 ㎚에서 피코에리트린에 반응하는 케라티노사이트를 분석하였고, 525 ㎚에서 CFDA를 측정하여 케라티노사이트의 멜라노좀을 확인하였다. 공동배양에서 얻어진 결과는 Coulter XL 소프트웨어(Coulter Corp.)를 이용하여 분석하였다. 하기 수학식 3을 이용하여 멜라노좀 이동 저해도를 계산하였으며, 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다.
Figure 112010012382102-pat00003
시료 저해율
시험물질 A 시험물질 B 대조군
니아신아마이드 함량(ppm) 100 200 -
형광 12.83 7.26 20.14
멜라노좀 이동 저해도(%) 36.23 63.95 0.01
상기 표 5의 결과에서, 본 발명에 의한 니아신아마이드를 첨가한 시험물질 A 및 B는 상기 두 물질을 전혀 첨가하지 않은 대조군에 비하여 멜라노좀의 이동 저해 효과가 매우 우수함을 확인할 수 있었다. 특히 니아신아마이드를 200 ppm 첨가한 군에서 멜라노좀의 이동을 효과적으로 저해하는 것을 확인하였다.
[제형예 1～3 및 비교제형예 1～3] 스킨로션
하기 표 6에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 제형예 1～3 및 비교제형예 1～3의 스킨로션을 제조하였다(단위: 중량%).
성분 제형예 1 제형예 2 제형예 3 비교제형예 1 비교제형예 2 비교제형예 3
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량
디소듐이디티에이 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02
베타인(ICID), 트리메틸글리신(JSQI) 2 2 2 2 2 2
글리세린(농글리세린) 2 2 2 2 2 2
피이지/피피지-17/6코폴리머 1 1 1 1 1 1
피이지-8 2 2 2 2 2 2
실시예 3:실시예 1:니아신아마이드를 5:3:2로 혼합한 복합물 0.001 1 10 - - -
실시예 3:실시예 1을 5:3으로 혼합한 복합물 - - - - 8 -
실시예 3 - - - - - 5
에탄올 10 10 10 10 10 10
메틸파라벤, KP:파라옥시벤조산메틸
(파라옥시안식향산에스테르)		 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
폴리옥시에틸렌하이드로제네이티드캐스터오일 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3
옥틸도데세스-16 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
향 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05
[제형예 4～6 및 비교제형예 4～6] 로션
하기 표 7에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 제형예 4～6 및 비교제형예 4～6의 로션을 제조하였다(단위: 중량%).
성분 제형예 4 제형예 5 제형예 6 비교제형예 4 비교제형예 5 비교제형예 6
글리세릴스테아레이트 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8
스테아르산 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
세테아릴알코올 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8
하이드로제네이티드레시틴*C12-16알코올*팔미트산 0.6 0.6 0.6 0.6 0.6 0.6
하이드로제네이티드폴리이소부텐 3 3 3 3 3 3
세틸옥타노에이트 4 4 4 4 4 4
메틸파라벤 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
프로필파라벤 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05
디메치콘 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량
디소듐이디티에이 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05
소듐메틸스테아로일타우레이트 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05
글리세린(농글리세린) 3 3 3 3 3 3
부틸렌글라이콜 2 2 2 2 2 2
실시예 3:실시예 1:니아신아마이드를 5:3:2로 혼합한 복합물 0.001 1 10 - - -
실시예 3:실시예 1을 5:3으로 혼합한 복합물 - - - - 8 -
실시예 3 - - - - - 5
트리에탄올아민 0.13 0.13 0.13 0.13 0.13 0.13
페녹시에탄올 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3
정제수 13 13 13 13 13 13
카보머 0.13 0.13 0.13 0.13 0.13 0.13
향 0.13 0.13 0.13 0.13 0.13 0.13
[제형예 7～9 및 비교제형예 7～9] 크림
하기 표 8에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 제형예 7～9 및 비교제형예 7～9의 크림을 제조하였다(단위: 중량%).
성분 제형예 7 제형예 8 제형예 9 비교제형예 5 비교제형예 6 비교제형예 6
하이드로제네이티드폴리이소부텐 7 7 7 7 7 7
펜타에리스리틸테트라에틸헥사노에이트 2 2 2 2 2 2
2-옥틸도데칸올 1 1 1 1 1 1
식물성 스쿠알란 4.50 4.5 4.5 4.5 4.5 4.5
림난테스알바씨드오일 1 1 1 1 1 1
펜타에리스리틸테트라이소스테아레이트 3 3 3 3 3 3
아라키딜알코올*베헤닐알코올*아라키딜글루코사이드 1 1 1 1 1 1
친유형글리세릴스테아레이트 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
글리세릴스테아레이트 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
세테아릴알코올 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
메틸파라벤 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
프로필파라벤 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
쉐어버터 3 3 3 3 3 3
데카메틸사이클로펜타실록산 3 3 3 3 3 3
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량 잔량
디소듐이디티에이 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02
농글리세린 6 6 6 6 6 6
부틸렌글라이콜 6 6 6 6 6 6
실시예 3:실시예 1:니아신아마이드를 5:3:2로 혼합한 복합물 0.001 1 10 - - -
실시예 3:실시예 1을 5:3으로 혼합한 복합물 - - - - 8 -
실시예 3 - - - - - 5
암모늄아크릴로일디메틸타우레이트/브이피코폴리머 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
페녹시에탄올 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3
트리에탄올아민 0.06 0.06 0.06 0.06 0.06 0.06
향 0.23 0.23 0.23 0.23 0.23 0.23
정제수 10 10 10 10 10 10
카보머 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
[시험예 5]
<평가 방법>
가. 시험 대상자 : 기미 주근깨 검은 반점이 생성되기 시작하거나 이미 생성된 30세 이상(평균 41.6± 4.5세)의 여성 피험자 10명/시료
나. 시험 기간 : 12주
다. 시험 제품명 : 스킨로션(제형예 3 및 비교제형예 1～3), 로션(제형예 6 및 비교제형예 4～6) 및 크림(제형예 9 및 비교제형예 7～9)
라. 평가 방법 : 본 시험 목적에 적합한 피험자들을 선정하여 12주간 시험제품 및 플라시보(placebo)를 얼굴 좌측 또는 우측에 무작위로 할당하여 정상적으로 사용하게 하였다. 제품 사용 전과 사용 4주, 8주 및 12주 후 각 평가 시점에서 육안 평가, 색차계(DSMⅡ Colormeter)를 이용하여 멜라닌 인덱스를 측정하였다. 또한 제품사용 후 각 평가시점에서 피부 안전성 평가 및 피험자에 의한 설문평가를 실시하였다.
<임상시험의 설계>
피시험자 1군 2군 3군 비고
얼굴 부위 좌(우) 우(좌) 좌(우) 우(좌) 좌(우) 우(좌) 무작위
도포 시료 비교제형예 1,3,5 제형예 3,6,9 비교제형예 1,3,5 비교제형예 2,4,7 비교제형예 1,3,5 비교제형예 3,6,9
측정 사용 전 0 0 0 0 0 0
4주 후 0 0 0 0 0 0
8주 후 0 0 0 0 0 0
12주 후 0 0 0 0 0 0
상기에서, 피시험자 1～3군 모두 얼굴의 한쪽 부위에 비교제형예 1,3,5의 스킨로션, 로션 및 크림을 순차적으로 도포하였으며, 나머지 다른 부위에 1군은 제형예 3,6,9의 스킨로션, 로션 및 크림을, 2군은 비교제형예 2,4,7의 스킨로션, 로션 및 크림을, 3군은 비교제형예 3,6,9의 스킨로션, 로션 및 크림을 각각 순차적으로 도포하였다.
<평가 항목>
가. 전문가 관찰 평가: 피부의 검은 정도(0～9)
나. 기기 평가: DSMⅡ ColorMeter Melanin index
다. 설문: 피부의 검은 정도(5점척도법: 0～5), 피부 부작용(유, 무)
<임상 결과>
가. 전문가 관찰 평가
피시험자 1군 2군 3군
도포 시료 평균* 표준편차 평균* 표준편차 평균* 표준편차
측정 사용 전 0.01 0.11 0.24 0.13 -0.24 0.10
4주 후 -0.25 0.10 0.12 0.15 0.03 0.12
8주 후 -0.43** 0.09** -0.35 0.10 -0.18 0.12
12주 후 -0.78** 0.14** -0.44** 0.09** -0.25** 0.08**
* 평균: 시료 처치부위 값에서 대조군 처치부위 값을 뺀 값의 평균, ‘-’ 값은 피부색이 희어진 것을 나타냄.
** 통계적으로 유의한 차(p<0.05)가 있음.
나. 기기 평가: DSMⅡ ColorMeter Melanin index
피시험자 1군 2군 3군
도포 시료 평균* 표준편차 평균* 표준편차 평균* 표준편차
측정 사용 전 035 0.15 0.55 0.11 -0.30 0.15
4주 후 -0.89** 0.18** 0.02 0.42 0.04 0.12
8주 후 -1.03** 0.21** -0.64** 0.13** -0.43 0.15
12주 후 -2.06** 0.37** -1.30** 0.21** -1.01** 0.23**
* 평균: 시료 처치부위 값에서 대조군 처치부위 값을 뺀 값의 평균, ‘-’ 값은 피부색이 희어진 것을 나타냄.
** 통계적으로 유의한 차(p<0.05)가 있음.
다. 설문: 피부의 검은 부위 개선 정도(0～5), 피부 부작용(유, 무)
피시험자 1군 2군 3군
도포 시료 평균± 표준편차 평균± 표준편차 평균± 표준편차
검은 정도개선(8주 후) 2.10± 0.55 1.12± 0.39 0.78± 0.25
부작용(12주 후) 없음 없음 없음
상기 표 10 내지 12의 결과에서 보여지는 바와 같이, 전문가 관찰 평가, 기기 평가 및 설문 평가 모두에서 본 발명에 의한 복합 추출물을 함유하는 제형예 3,6,9를 처방한 1군이 비교제형예들을 처방한 2군 및 3군 보다 우수한 피부 미백효과를 나타내었으며, 피부에 대하여 안전함을 확인할 수 있었다.

Claims (3)

  1. 분자량 5～15 kDa의 후코이단, 비타민나무 추출물 및 니아신아마이드를 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 분자량 5～15 kDa의 후코이단 1～10 중량%, 비타민나무 추출물 0.05～10 중량% 및 니아신아마이드 1～7 중량%를 함유함을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
  3. 삭제
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