KR101070070B1 - Cosmetic composition for preventing skin aging - Google Patents

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Abstract

본 발명은 피부 노화 방지 효능을 갖는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 백지, 곽향, 조각자, 및 정향 추출물을 혼합한 생약혼합물(이하 ‘홍옥산가미’라 함)과 국화 및 감초 추출물을 혼합한 생약혼합물(이하 ‘국화음’이라 함)을 함유함으로써, 피부에서의 세포 증식 활성, 항산화 효능, 항염증 효과, 및 항노화 활성이 우수한 피부노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition having an anti-aging effect, and more particularly, a herbal medicine mixture (hereinafter referred to as 'hongokgami') mixed with white paper, kwakhyang, sculpture, and clove extract is mixed with chrysanthemum and licorice extract. By containing a herbal mixture (hereinafter referred to as chrysanthemum sound), the present invention relates to a cosmetic composition for preventing skin aging, which is excellent in cell proliferation activity, antioxidant effect, anti-inflammatory effect, and anti-aging activity in skin.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 홍옥산가미와 국화음의 2 종의 생약혼합물을 동시에 적용함으로써 시너지 효과에 의한 항염증 효능을 극대화시킬 수 있으며, 피부에 자극이 없는 안전한 물질로서, 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 연고, 패취, 또는 분무제 등의 제형으로 이용될 수 있다.The cosmetic composition according to the present invention can maximize the anti-inflammatory effect by synergistic effect by simultaneously applying two kinds of herbal mixture of hongokgami and chrysanthemum, as a safe substance without irritation to the skin, lotion, essence, lotion , Creams, packs, gels, ointments, patches, or sprays.

피부노화 방지, 화장료, 세포증식활성, 항산화, 항염증, 항노화Skin aging prevention, cosmetics, cell proliferation activity, antioxidant, anti-inflammatory, anti aging

Description

피부노화 방지용 화장료 조성물 {COSMETIC COMPOSITION FOR PREVENTING SKIN AGING}Cosmetic composition for preventing skin aging {COSMETIC COMPOSITION FOR PREVENTING SKIN AGING}

도 1은 홍옥산가미의 세포 증식 활성 효과를 측정한 결과이다. S10은 양성대조군, S0은 음성대조군, S1은 실험대조군이다.Figure 1 shows the results of measuring the cell proliferation activity of ruby gill gill. S10 is a positive control, S0 is a negative control, S1 is an experimental control.

도 2는 국화음의 세포 증식 활성 효과를 측정한 결과이다. S10은 양성대조군, S0은 음성대조군, S1은 실험대조군이다.2 is a result of measuring the cell proliferation activity effect of chrysanthemum. S10 is a positive control, S0 is a negative control, S1 is an experimental control.

도 3은 홍옥산가미의 항산화효과를 나타낸 결과로, 농도별 자유라디칼 소거능을 나타낸다.Figure 3 shows the antioxidant effect of the ruby scavenger, showing the free radical scavenging ability by concentration.

도 4는 국화음의 항산화효과를 나타낸 결과로, 농도별 자유라디칼 소거능을 나타낸다.Figure 4 shows the antioxidant effect of chrysanthemum sound, showing the free radical scavenging ability by concentration.

도 5는 홍옥산가미 및 국화음의 세포 수준에서의 PGE2 생성 억제 효능을 측정한 결과와 두 원료 동시 적용시의 시너지 효과를 나타낸 그림이다.5 is a graph showing the results of measuring the inhibitory effect of PGE2 production at the cellular level of chalcopyrite and chrysanthemum and the synergistic effect of the application of both materials simultaneously.

본 발명은 피부 노화 방지 효능을 갖는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 피부에서의 세포 증식 활성, 항산화 효능, 항염증 효과, 및 항노화 활 성이 우수한 피부노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것으로, 홍옥산가미와 국화음의 2 종의 생약혼합물을 동시에 적용함으로써 시너지 효과에 의한 항염증 효능을 극대화시킬 수 있으며, 피부에 자극이 없는 안전한 물질로서, 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 연고, 패취, 또는 분무제 등의 제형으로 이용될 수 있는 피부노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition having an anti-aging effect of skin, and more particularly to a skin anti-aging cosmetic composition having excellent cell proliferation activity, antioxidant effect, anti-inflammatory effect, and anti-aging activity in skin, ruby Simultaneous application of two kinds of herbal mixtures of acid and chrysanthemum can maximize the anti-inflammatory effect by synergistic effect.It is a safe substance without skin irritation, lotion, essence, lotion, cream, pack, gel, ointment It relates to a cosmetic composition for preventing skin aging that can be used in the form of a patch, patch, or spray.

인체의 피부는 외부 환경에 직접적으로 노출되는 부위로서, 과도한 자외선이나 오염 물질 등에 노출되면 활성산소나 프리라디칼이 생성되며, 생성된 활성산소나 프리라디칼에 의해 홍반, 부종, 뾰루지, 따끔거림, 가려움 등의 피부 자극 및 염증 반응이 유발된다. 이러한 원인들에 의해 생성된 피부 트러블은 미관상 문제가 될 뿐만 아니라, 염증 반응 과정에서 생성되는 물질들이 부수적으로 피부의 색소 침착을 일으키고, 피부 탄력 섬유의 붕괴를 촉진시켜 피부 주름의 증가에까지 영향을 미치는 등 피부 노화에까지 이르는 것으로 알려져 있다.The skin of the human body is a part directly exposed to the external environment, and when exposed to excessive ultraviolet rays or pollutants, free radicals or free radicals are generated, and erythema, edema, rashes, tingling, and itching by the generated free radicals or free radicals Skin irritation and inflammatory reactions in the back are induced. Skin troubles caused by these causes are not only aesthetic problems, but also substances produced during the inflammatory process may cause pigmentation of the skin and accelerate the breakdown of skin elastic fibers, thereby affecting the increase of skin wrinkles. It is known to lead to skin aging.

피부가 노화됨에 따라 각질화와 표피세포의 융합속도가 점차 느려지게 되며 표피세포층은 얇게, 각질층은 두꺼워지며, 진피층과의 경계선도 완만하게 된다. 진피에서는 섬유아세포가 노화되어 섬유질과 기질의 생성능력이 감소하게 되고, 피부세포는 나이가 들수록 세포내에 과산화물 수치가 급격히 증가하며, 각종 오염물질과 스트레스 등에 영향을 쉽게 받게 된다. 세포 및 세포막의 구성성분이 과산화물질로 변하고 단백질 손상이 일어나 세포는 그 기능을 원활히 수행할 수 없게 되어 세포의 대사활성이 저하되고, 이러한 기능적, 구조적 손상으로 주름이 생기게 되어 이들로 인해 피부노화가 더욱 촉진된다. 이러한 피부 노화 메커니즘에 관여되 는 단계를 모두 막아주는 것이 피부 노화를 근본적으로 방지할 수 있다.As the skin ages, keratinization and epidermal cell fusion rate gradually slows down, the epidermal cell layer becomes thinner, the stratum corneum becomes thicker, and the boundary line with the dermal layer becomes smoother. In the dermis, fibroblasts age to decrease the ability to produce fibers and substrates, and skin cells rapidly increase peroxide levels in cells as they age, and are susceptible to various pollutants and stress. The components of cells and cell membranes are changed to peroxides, protein damage occurs, and the cells are unable to perform their functions smoothly, which lowers the metabolic activity of the cells, and wrinkles are caused by these functional and structural damages. Further promoted. Preventing all steps involved in this mechanism of skin aging can fundamentally prevent skin aging.

이에, 노화를 방어할 수 있는 물질을 찾는 노력은 과거부터 현재까지 계속해서 진행되고 왔고, 항산화 작용을 갖는 새로운 원료를 탐색하기 위한 연구가 국내외에서 활발하게 이루어지고 있다. 항노화제라는 이름으로 연구가 된 물질은 대부분 항산화제로서, 비타민(vitamin) C 와 E, 티올(thiol) 그룹을 갖는 N-acetyl-L-cysteine, S-allyl-L-cysteine 등과, 천연물의 항산화물로는 베타카로틴(β-carotene), 커큐민(curcumin), 엘라직산(ellagic acid), 푸마릭산(furmaric acid) 등이 연구가 되었다. 최근에는 근육에 존재하는 항산화물인 카르노신(carnosine)은 노화시에 세포의 형태를 유지하게 하는 효과가 있다고 보고되었으며, PBN(α-phenyl-N-t-butyl nitrone) 등이 세포 및 실험 동물에서 수명연장 효과가 있는 것으로 보고되었으나 아직 항노화 물질로 보고된 물질은 그다지 많지 않은 상태이다. Accordingly, efforts to find a material that can protect against aging have been ongoing from the past to the present, and researches to search for new raw materials with antioxidant activity are being actively conducted at home and abroad. Most of the substances studied under the name of anti-aging agents are antioxidants such as vitamin C and E, thiol group N-acetyl-L-cysteine, S-allyl-L-cysteine, etc. Antioxidants include beta-carotene, curcumin, ellagic acid, and fumaric acid. Recently, carnosine, an antioxidant present in muscle, has been reported to maintain cell morphology during aging, and PBN (α-phenyl-Nt-butyl nitrone) has long life expectancy in cells and experimental animals. Although it has been reported to be effective, not much has been reported as an anti-aging substance.

그러나 노화현상이 단순하게 산화에 의해서만 이루어지는 것이 아니고, 텔로미어, 세포복제능력, 유전자 손상 및 회복능력 등 수많은 요인에 의해 영향을 받는 것으로 알려져 있기 때문에 천연물 및 약제의 발굴에 있어서 많은 어려움이 있었다.However, aging is not only caused by oxidation but is known to be affected by numerous factors such as telomeres, cell replication ability, gene damage and recovery ability, and thus, there have been many difficulties in discovering natural products and drugs.

상기와 같은 종래 기술의 문제점을 해결하고자, 본 발명은 피부에 다른 자극이나 부작용을 초래하지 않으면서도 피부세포를 활성화시켜 주며, 피부에서의 세포 증식 활성, 항산화 효과, 항염증 효능, 및 시너지 효과가 뛰어나며, 특히 항노화 활성이 우수한 피부노화 방지용 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다. In order to solve the problems of the prior art as described above, the present invention activates the skin cells without causing other irritation or side effects on the skin, cell proliferation activity, antioxidant effect, anti-inflammatory effect, and synergistic effect in the skin An object of the present invention is to provide a cosmetic composition for preventing skin aging that is excellent and particularly excellent in anti-aging activity.

본 발명은 백지, 곽향, 조각자, 및 정향 추출물로 이루어진 생약 혼합물과 국화 및 감초 추출물로 이루어진 생약 혼합물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다.The present invention provides a cosmetic composition for preventing skin aging, comprising a herbal mixture consisting of white paper, squat, sculpture, and clove extract, and a herbal mixture consisting of chrysanthemum and licorice extract as an active ingredient.

이하 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명자들은 종래부터 생약 등으로 사용되어 오던 자연의 천연물로부터 탁월한 항노화 효능 물질을 탐색하기 위하여 여러 물질을 대상으로 연구한 결과, 백지, 곽향, 조각자, 및 정향 추출물을 혼합한 생약 혼합물(이하 ‘홍옥산가미’라 함)과 국화 및 감초 추출물을 혼합한 생약 혼합물(이하 ‘국화음’이라 함)의 혼합 추출물이 피부에서의 세포 증식 활성, 항산화 효능, 항염증 효과 및 시너지 효과가 뛰어난 것을 확인하고 본 발명을 완성하였다. The present inventors studied various substances to search for excellent anti-aging efficacy substances from natural natural products, which have been conventionally used as herbal medicines, and as a result, herbal mixtures containing white paper, kwakhyang, sculptor, and clove extract (hereinafter ' Mixed extract of herbal mixture mixed with chrysanthemum and licorice extract (hereinafter referred to as chrysanthemum sound) has excellent cell proliferation, antioxidant, anti-inflammatory and synergistic effects in skin This invention was completed.

본 발명은 인체 안전성이 우수하면서 피부 항노화 활성이 우수한 화장료 조성물에 관한 것으로, 세포 증식을 활성화시키고, 자유라디칼 소거활성도 우수하며, PGE2의 생성을 탁월하게 억제시키는 ‘홍옥산가미’ 와 ‘국화음’이라 칭하는 혼합 추출물을 함유함을 특징으로 한다.The present invention relates to a cosmetic composition excellent in human safety and excellent skin anti-aging activity, activating cell proliferation, excellent free radical scavenging activity, and 'hongoksangami' and 'chrysanthemum' to excellently inhibit the production of PGE2 It is characterized by containing a mixed extract called '.

본 발명에서 제공되는 ‘홍옥산가미’는 백지, 곽향, 조각자, 및 정향 추출물의 혼합으로 얻어진다. 'Hongoksangami' provided in the present invention is obtained by mixing white paper, wagyang, engraver, and clove extract.

상기 백지(학명: Angelica dahurica)는 쌍떡잎식물 산형화목 미나리과의 두해살이 또는 세해살이풀로 대활(大活)·흥안백지·독활·구리대·굼배지라고도 한다. 산골짜기 냇가에서 자란다. 풀 전체에 털이 없고 뿌리줄기는 매우 굵으며 수 염뿌리가 많이 내린다. 줄기는 곧게 서고 높이 1∼2m이다. 잎은 3개씩 2∼3회 깃꼴겹잎으로 많이 갈라지고 갈라진 조각은 타원형 또는 바소꼴로 끝이 뾰족하며 고르지 못한 톱니가 있다. 6∼8월에 흰색 꽃이 피는데 20~40개의 산형꽃차례가 모여 겹산형 꽃차례를 이룬다. 총포는 없고 작은총포는 가늘며 작다. 화관은 작고 꽃잎 5개, 수술 5개, 그리고 1개의 씨방은 꽃받침 아래 위치한다. 열매는 분과로서 타원형이고 날개가 있으며 10월에 익는다. 어린 잎은 식용한다. 한방에서는 뿌리를 말려 만든 생약을 백지라 하여 발한, 진정, 진통, 정혈, 감기, 두통, 통경, 치통에 처방한다. 한국, 일본, 중국 북동부, 동부 시베리아 등지에 분포한다. Angelica dahurica is a biennial or triennial herb of the dicotyledonous plant Asteraceae, also known as Daebyeong, Heungan Baekji, Dokbyeong, Copperdae, and Gumbaegi. Grows in a valley stream. There is no hair throughout the grass, the roots are very thick, and the roots are much lower. Stems stand straight and 1 ~ 2m high. The leaves are divided into 3 ~ 2 times of pinnate leaf with 3 pieces, and the split pieces are oval or lanceolate with sharp ends and uneven teeth. White flowers bloom in June-August, with 20-40 inflorescences forming a double inflorescence. No guns, small guns are thin and small. Corolla is small with 5 petals, 5 stamens, and 1 ovary under calyx. Fruit is branched, oval, winged and ripens in October. Young leaves are edible. Herbal medicines made by drying the root is called white paper, and is prescribed for sweating, soothing, pain, blood, cold, headache, pain, toothache. It is distributed in Korea, Japan, northeastern China and eastern Siberia.

상기 곽향(학명: Teucrium veronicoides)은 쌍떡잎식물 통화식물목 꿀풀과의 여러해살이풀로 산지에서 자란다. 높이 20∼30cm이다. 풀 전체에 길이 1~2mm 정도의 털이 난다. 기는줄기가 옆으로 벋으면서 곧게 서고 가지를 친다. 잎은 달걀 모양 또는 넓은 달걀 모양이고 끝이 다소 뭉툭하다. 잎 길이는 2.5∼4cm, 나비 1.5∼2.5cm로 톱니가 있고 잎자루는 길이 1∼2cm이다. 꽃은 하늘색으로 7∼8월에 총상꽃차례로 피는데, 한쪽으로 치우쳐 드문드문 달린다. 꽃의 길이는 약 8mm이고, 꽃차례의 길이는 4∼8cm이다. 포는 꽃받침보다 짧고 넓은 바소꼴이다. 꽃받침은 윗부분에 선모가 드문드문 나고 열매가 익을 때는 밑을 향한다. 열매는 분과(分果)로 둥글고 윤기가 나며 길이 1.5mm이다. 제주도, 함경북도 등지에 분포한다. The Gwakhyang (Teucrium veronicoides) is a perennial herb of the dicotyledon and moss plant in the mountain. It is 20-30cm in height. Hairs 1 ~ 2mm long throughout the grass. The creeper stands upright and branches. Leaves are oval or broad oval, somewhat blunt at end. Leaves are 2.5-4cm long, 1.5-2.5cm wide, with serrates, and petioles are 1-2cm long. Flowers bloom in light blue color in July-August, which are sparsely inclined to one side. The length of the flower is about 8 mm, and the length of the inflorescence is 4 to 8 cm. Pau shorter than broad calyx. Calyx is sparsely sparse at the top and faces downward when ripe. Fruits are branched, round, glossy, 1.5mm long. It is distributed in Jeju Island and North Hamgyong Province.

상기 조각자(학명: Gleditsia sinensis)는 쌍떡잎식물 장미목 콩과의 낙엽교목으로 중국 원산이다. 가시는 큰 것은 길이 10cm 이상으로 방추형 비슷하다. 잎 은 어긋나고 3∼6쌍의 작은잎으로 구성된 깃꼴겹잎이다. 작은잎은 긴 타원형 또는 바소꼴로 양끝이 좁고 길이 1∼9cm, 나비 5∼35cm이다. 꼬투리는 편평하고 길이 20cm, 나비 3cm이며 비틀리지 않고 쪼개면 매운 냄새가 난다. 꽃은 6월에 담황백색으로 피고, 총상꽃차례에 달린다. 열매는 협과로 10월에 익는다. 가시를 조각자라고 하며 소종?배농 등의 효능이 있어 각종 종기에 쓴다. 한국의 중부지방에서도 월동이 가능하다. The sculptor (Gleditsia sinensis) is a deciduous tree of the dicotyledonous rosewood legume native to China. The spines are large, fusiform, more than 10 cm long. A leaf is a pinnate leaf composed of 3 to 6 pairs of small leaves that are shifted. Small leaves are long oval or lanceolate, narrow at both ends, 1 ~ 9cm long, 5 ~ 35cm butterfly. The pod is flat, 20cm long, 3cm butterfly, and spicy without splitting. Flowers bloom pale yellow and white in June and hang on inflorescences. The fruit ripens in October as a berry. The thorn is called a sculptor and is used for boils and boils. Overwintering is also possible in central Korea.

상기 정향(학명: Eugenia aromaticum)은 쌍떡잎식물 도금양목 도금양과의 상록 소교목으로 몰루카제도 원산이다. 줄기는 높이 4∼7m이다. 잎은 마주나고 향기가 있으며 바소꼴이다. 꽃은 흰색으로 가지 끝에 모여 달리고 꽃잎은 4개이다. 수술은 많으며 암술은 1개이다. 열매는 핵과이고 검은 홍색이다. 꽃이 피기 전의 꽃봉오리를 수집하여 말린 것을 정향 또는 정자(丁字)라고 한다. 꽃봉오리의 형태가 못처럼 생기고 향기가 있으므로 정향이라고 하며 영어의 클로브(clove)도 프랑스어의 클루(clou: 못)에서 유래한다. BC 3세기경 이미 중국에 알려졌고 로마와 유럽에는 중세에 알려졌다. 16세기 포르투갈인들이 몰루카제도에서 이 식물을 발견하기 전까지는 정체를 알 수 없었으며, 처음에는 포르투갈의 전유물이었으나 네덜란드에 전해졌다. 매우 향기로우므로 그대로 또는 분말로 사용하고, 물이나 증기로 빼낸 정향유를 활용한다. 식품, 약품, 방부제 등에 쓰거나, 발작증을 비롯하여 치과에서 진통제 등으로 쓴다. 정향은 그 산출량이 적기 때문에 꽃봉오리뿐만 아니라 꽃대와 열매까지도 모두 이용하고 있다. The clove (Eugenia aromaticum) is an evergreen sub-tree of the dicotyledonous plated cactus plated sheep and is native to the Moloccan Islands. The stem is 4-7m high. The leaves are opposite, fragrant, and lanceolate. Flowers are white, gathered at the ends of branches, and 4 petals. There are many surgeries and one pistil. Fruits are nucleus, black red. Collecting and drying flower buds before they bloom is called cloves or sperm (丁字). The bud is shaped like a nail and has a fragrance, so it is called clove. The English clove is also derived from the French clou. It was already known in China around the third century BC and in the Middle Ages in Rome and Europe. Until the 16th century, the Portuguese discovered the plant in the Molucca Islands, it was unknown, and was originally a portuguese monopoly, but it was brought to the Netherlands. It is very fragrant, so use it as it is or as a powder and use clove oil extracted with water or steam. It is used for food, medicine, and preservatives, or as a painkiller in dentistry, including seizures. Cloves are low in yield, so they use not only buds but also flower beds and fruits.

본 발명에서 제공되는 ‘국화음’혼합물은 국화와 감초 추출물의 혼합으로 얻어진다.'Chrysanthemum' mixture provided in the present invention is obtained by mixing chrysanthemum and licorice extract.

상기 국화(학명: Chrysanthemum morifolium)는 쌍떡잎식물 초롱꽃목 국화과의 여러해살이풀로 국(菊)·구화라고도 한다. 국화는 관상용으로 널리 재배하며, 많은 원예 품종이 있다. 높이 1m 정도로 줄기 밑부분이 목질화하며, 잎은 어긋나고 깃꼴로 갈라진다. 꽃은 두상화로 줄기 끝에 피는데 가운데는 관상화, 주변부는 설상화이다. 설상화는 암술만 가진 단성화이고 관상화는 암·수술을 모두 가진 양성화이다. 꽃은 노란색, 흰색, 빨간색, 보라색 등 품종에 따라 다양하고 크기나 모양도 품종에 따라 다르다. 꽃의 지름에 따라 18cm 이상인 것을 대륜, 9cm 이상인 것을 중륜, 그 이하인 것을 소륜이라 하며 꽃잎의 형태에 따라 품종을 분류하기도 한다.Chrysanthemum (Chrysanthemum morifolium) is a perennial plant of the dicotyledon plant Campanula Asteraceae, also called chrysanthemum. Chrysanthemum is widely grown for ornamental purposes, and there are many horticultural varieties. The base of the stem is woody about 1m in height, and the leaves are shifted and split into feathers. The flower is a conical flower, which blooms at the end of the stem, in the middle, ornamental flower and the periphery of snow flower. Snowshoes are single shoes with pistils and coronary flowers are bisexuals with both cancer and surgery. The flowers vary depending on the varieties, such as yellow, white, red, and purple, and their size and shape also vary depending on the variety. Depending on the diameter of the flower is more than 18cm in large ring, 9cm or more in middle ring, less than small ring is called varieties depending on the shape of the petals.

상기 감초(학명: Glycyrrhiza uralensis)는 쌍떡잎식물 장미목 콩과의 여러해살이풀로 약용식물이다. 뿌리는 적갈색으로 땅속 깊이 들어가고 줄기는 모가 지며 1m 정도 곧게 자란다. 또한 흰털이 밀생하여 회백색으로 보이며 선점(腺點)이 흩어져 있다. 잎은 어긋나고 홀수깃꼴겹잎이다. 작은잎은 7∼17개씩이고 달걀 모양이며 끝이 뾰족하다. 작은잎의 길이는 2∼5cm, 나비 l∼3cm로 양면에 흰털과 선점이 있으며 톱니는 없다. 꽃은 7∼8월에 피는데 길이 1.4∼2.5cm로 보라색이며, 총상꽃차례로 잎겨드랑이에 달린다. 꼬뚜리는 선처럼 가늘고 긴 모양으로 활처럼 굽으며 신장형의 종자가 6∼8개씩 들어 있다. 뿌리는 단맛이나서 감미료, 한약재로 사용한다. 시베리아산(G. glabra var. glandulifera), 에스파냐산(G. glabra) 등이 있다. 비슷한 종으로 개감초(G. pallidiflora)가 있다. 이는 단맛이 적고 감 초와 달리 약용으로 쓰이지 않으며, 털이 적고 열매가 타원형이며 끝이 뾰족하다. 중국 동북부와 시베리아, 몽골 등지에 분포한다.The licorice (Glycyrrhiza uralensis) is a perennial herb of the dicotyledonous plant Rosaceae. The roots are reddish brown deep into the ground, the stems are gathered, and grow straight about 1m. In addition, white hairs are dense, appearing as off-white, and preemption is scattered. The leaves are shifted and oddly littered leaf. Small leaves 7-17 each, egg-shaped, pointed end. Small leaves are 2 ~ 5cm long, 1 ~ 3cm butterfly, white hairs and dots on both sides, and no sawtooth. Flowers bloom in July-August, 1.4-2.5cm long, purple, and hanged on the axilla as a total inflorescence. The pod is thin and long like a line and bent like a bow and contains 6 to 8 seeds. The root is sweet, so use it as a sweetener or herbal medicine. Siberian acid (G. glabra var. Glandulifera) and Spanish acid (G. glabra). A similar species is G. pallidiflora. It is less sweet, unlike licorice, and is not used for medicinal purposes. The hair is small, the fruit is oval, and the tip is sharp. It is distributed in northeastern China, Siberia and Mongolia.

본 발명에서 제공하는 ‘홍옥산가미’와 ‘국화음’ 혼합물 내 각종 생약 성분은 통상의 추출 방법에 의하여 추출할 수 있으며, 추출용매의 종류 및 함량 등도 목적에 따라 임의 선정하여 사용할 수 있다. 바람직하게는, 상기 추출용매는 정제수, 탄소수 1내지4인 무수 또는 함수 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올, 에틸아세테이트, 글리세린, 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜을 포함한 용매군 중에서 선택된 하나의 순수용매 또는 둘 이상이 조합된 혼합용매이며, 생약의 전체 부피에 대하여 1내지 20배의 양으로 사용할 수 있다.Various herbal ingredients in the mixture of 'hongoksangami' and 'chrysanthemum' provided by the present invention may be extracted by a conventional extraction method, and the type and content of the extraction solvent may be arbitrarily selected according to the purpose. Preferably, the extraction solvent is one pure solvent selected from the group consisting of purified water, anhydrous or hydrous methanol having 1 to 4 carbon atoms, ethanol, propyl alcohol, butyl alcohol, ethyl acetate, glycerin, propylene glycol and butylene glycol Two or more are combined solvents, and may be used in an amount of 1 to 20 times the total volume of the herbal medicine.

본 발명에서 제공하는 ‘홍옥산가미’와 ‘국화음’ 혼합물은 세포 증식을 활성화 시키고, 자유라디칼 소거활성도 우수하며, 세포 염증 반응의 프로스타글란딘 생성을 억제하는 효능이 있으며, 특히 프로스타글란딘 E2 의 생성을 억제하는 효능이 탁월하다. 또한‘홍옥산가미’와 ‘국화음’ 을 동시에 적용시에는 단일 적용시보다 훨씬 높은 프로스타클란딘 억제율을 보여, 두 혼합물을 동시에 적용하여 시너지 효과에 의한 항염증 효능을 극대화시킬 수 있다. 이 경우 홍옥산 가미와 국화음은 10:90 ~ 90:10의 중량비로 사용하는 것이 바람직하다. The mixture of 'hongokgami' and 'chrysanthemum' provided by the present invention activates cell proliferation, has excellent free radical scavenging activity, and has the effect of inhibiting prostaglandin production of the cellular inflammatory response, and particularly inhibits the production of prostaglandin E2. Excellent efficacy. In addition, the simultaneous application of 'hongoksangami' and 'chrysanthemum sound' shows much higher inhibition of prostaglandin than a single application, and the two mixtures can be applied simultaneously to maximize anti-inflammatory effects due to synergistic effects. In this case, it is preferable to use hongoksan kami and chrysanthemum in a weight ratio of 10:90 to 90:10.

본 발명에 따른 피부 노화 방지 효능을 갖는 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되지 않지만, 예를 들면, 화장수, 에센스, 크림, 팩, 젤, 로션, 연고, 패취 또는 분무제 등의 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition having an anti-aging effect according to the present invention is not particularly limited in its formulation, but may be prepared, for example, in a formulation such as lotion, essence, cream, pack, gel, lotion, ointment, patch or spray. have.

상기 제형에 있어서 혼합물의 함량은 조성물의 총 중량에 대하여0.0001 내지 30중량%, 바람직하게는 0.001 내지 20중량%로 함유할 수 있다. 혼합물의 함량은 총 중량에 대하여 0.0001 중량% 미만일 경우에는 본 발명에서 목적하는 효과를 얻기가 힘들며, 30 중량% 이상일 경우에는 제형 안정성에 문제가 생길 수 있다.The content of the mixture in the formulation may contain from 0.0001 to 30% by weight, preferably 0.001 to 20% by weight relative to the total weight of the composition. If the content of the mixture is less than 0.0001% by weight relative to the total weight, it is difficult to obtain the desired effect in the present invention, when more than 30% by weight may cause a problem in the formulation stability.

이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해서 제조예 및 실시예를 들어 상세히 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 제조예나 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형 될 수 있으며, 본 발명의 범위가 아래에서 상술하는 예들로 한정되지 않는다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to Preparation Examples and Examples. However, the production examples or embodiments according to the present invention can be modified in various other forms, the scope of the present invention is not limited to the examples described below.

<제조예 1 : ‘홍옥산가미’ 혼합물의 제조>Preparation Example 1 Preparation of a Mixture of 'Hongoksangami'

일차적으로 백지, 곽향, 조각자, 정향을 완전 건조한 후, 각각 백지 60~80g, 곽향 20~40g, 조각자 20~40g, 및 정향 60~80g의 건조중량으로 혼합한 다음, 추출 용매로서 증류수, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에틸아세테이트, 프로판올, 글리세린, 함수 부틸렌글리콜, 함수 프로필렌글리콜로 구성된 그룹으로부터 하기 표 1에 나타낸 제조실시예와 같이 선택된 하나 이상의 용매를 10~20배 부피량 가하였다. 추출 방법으로는 선택된 용매에 준비된 생약성분을 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 12시간 끓여서 추출한 후 300메쉬 여과포로 여과하고, 상기 여과액을 4-15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후, 와트만 여과지로 여과함으로써 '홍옥산가미’ 혼합물을 제조하였다. Firstly, white paper, kwak, sculptor and cloves are completely dried, mixed with dry weight of white paper 60 ~ 80g, 20 ~ 40g kwak, 20 ~ 40g flakes, and 60 ~ 80g clove, respectively, and then distilled water, ethanol, 10-20 times by volume of one or more solvents selected from the group consisting of methanol, butanol, ethyl acetate, propanol, glycerin, hydrous butylene glycol, and hydrous propylene glycol were prepared as shown in Table 1 below. Extraction method was prepared by adding the herbal ingredients prepared in the selected solvent, boiled for 12 hours in an extractor equipped with a cooling condenser and filtered with a 300 mesh filter cloth, and the filtrate was left at 4-15 ℃ for 7 days to ripen, and then Whatman filter paper The mixture was prepared by filtration with ruby ruby.

구분division 추출용매Extraction solvent 부피량 (㎏)Volume (kg) 수득량 (㎏)Yield (kg) 제조실시예 1Preparation Example 1 증류수Distilled water 55 3.53.5 제조실시예 2Preparation Example 2 70% 에탄올70% ethanol 66 4.14.1 제조실시예 3Preparation Example 3 70% 메탄올70% methanol 66 4.24.2 제조실시예 4Preparation Example 4 70% 부탄올70% Butanol 66 4.24.2 제조실시예 5Preparation Example 5 에틸아세테이트Ethyl acetate 55 3.63.6 제조실시예 6Preparation Example 6 프로판올Propanol 55 3.73.7 제조실시예 7Preparation Example 7 글리세린glycerin 55 3.63.6 제조실시예 8Preparation Example 8 부틸렌글리콜Butylene glycol 44 2.82.8 제조실시예 9Preparation Example 9 프로필렌글리콜Propylene glycol 44 2.82.8 제조실시예 10Preparation Example 10 30% 함수 부틸렌글리콜30% water butylene glycol 44 2.72.7 제조실시예 11Preparation Example 11 30% 함수 프로필렌글리콜30% water propylene glycol 44 2.62.6

<제조예 2 : ‘국화음’ 혼합물의 제조>Preparation Example 2 Preparation of a Chrysanthemum Sound Mixture

상기 제조예 1과 동일하게 국화와 감초를 완전 건조한 후, 국화 200g 및 감초 2g을 혼합하여 하기 표2에 나타낸 제조실시예와 같이 용매에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 12시간 끓여서 추출한 후 300메쉬 여과포로 여과하고, 상기 여과액을 4-15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 여과지로 여과함으로써 ‘국화음’ 혼합물을 제조하였다.After completely drying chrysanthemum and licorice in the same manner as in Preparation Example 1, mixed with 200g of chrysanthemum and 2g of licorice and put into a solvent as shown in Table 2 below, extracted by boiling for 12 hours in an extractor with a cooling condenser 300 mesh filter cloth The mixture was filtered, and the filtrate was left to mature at 4-15 ° C. for 7 days, followed by filtration through Whatman filter paper to prepare a “chrysanthemum” mixture.

구분division 추출용매Extraction solvent 부피량 (㎏)Volume (kg) 수득량 (㎏)Yield (kg) 제조실시예 12Preparation Example 12 증류수Distilled water 33 2.22.2 제조실시예 13Preparation Example 13 70% 에탄올70% ethanol 44 2.92.9 제조실시예 14Preparation Example 14 70% 메탄올70% methanol 44 3.03.0 제조실시예 15Preparation Example 15 70% 부탄올70% Butanol 44 3.03.0 제조실시예 16Preparation Example 16 에틸아세테이트Ethyl acetate 33 2.32.3 제조실시예 17Preparation Example 17 프로판올Propanol 33 2.12.1 제조실시예 18Preparation Example 18 글리세린glycerin 33 2.12.1 제조실시예 19Preparation Example 19 부틸렌글리콜Butylene glycol 44 3.23.2 제조실시예 20Preparation Example 20 프로필렌글리콜Propylene glycol 44 3.13.1 제조실시예 21Preparation Example 21 30% 함수 부틸렌글리콜30% water butylene glycol 44 3.13.1 제조실시예 22Preparation Example 22 30% 함수 프로필렌글리콜30% water propylene glycol 44 2.92.9

<실험예 1 : 세포 증식 활성능 측정>Experimental Example 1 Measurement of Cell Proliferation Activity

본 발명의 제조예 1 및 2에 따라 얻어진 ‘홍옥산가미’와 ‘국화음’ 혼합 추출물인 화장료 유효성분 물질의 세포 증식 활성 및 독성에 관한 효능을 측정하기 위하여 사람의 섬유아세포를 배양하여 MTT 환원법[3(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide reduction method]을 수행하고 포르마잔 생성물(formazan product)을 이소프로필 알코올로 추출하여570 nm에서의 흡광도를 측정하여 상대 비교하였다. 양성대조군은 10% FBS(fetal bovine serum) 넣은 배지로, 음성대조군으로는 FBS를 넣지 않은 배지를 사용하였고, 실험 대조군으로는 시료를 처리하지 않은 배양액을 사용하였다. 실험은 제조예 용매 중 1,3-부틸렌글라이콜:물 (30:70)로 얻은 유효성분 물질을 사용하였으며, 하기 수학식1을 이용하여 세포의 생존능력을 수치로 계산하여 하기 표3에 나타내었다.MTT reduction method by culturing human fibroblasts in order to measure the effect on the cell proliferation activity and toxicity of the cosmetic active ingredient material of the mixture of 'hongoksangami' and 'chrysanthemum' obtained according to Preparation Examples 1 and 2 of the present invention Relative comparison of [3 (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide reduction method] and extraction of formazan product with isopropyl alcohol to measure absorbance at 570 nm It was. The positive control group was used as a medium containing 10% FBS (fetal bovine serum), the medium without FBS was used as a negative control group, and the culture medium without the sample was used as the experimental control group. Experiment was performed using the active ingredient material obtained in 1,3-butylene glycol: water (30:70) in the solvent of Preparation Example, using the following formula 1 to calculate the viability of the cell numerical value in Table 3 Indicated.

Figure 112004059341099-pat00001
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물질matter 농도 (㎍/㎖)Concentration (μg / ml) 세포증식능 (%)Cell proliferation (%) 홍옥산가미Ruby 0.10.1 121.7121.7 1One 129.6129.6 1010 123.5123.5 100100 128.5128.5 10001000 131.3131.3 국화음Chrysanthemum 0.10.1 115.0115.0 1One 118.1118.1 1010 118.9118.9 100100 126.9126.9 10001000 127.7127.7 1000010000 144.8144.8 * 반복시험수 = 5* Number of replicates = 5

상기 표 3에서 보는 바와 같이, ‘홍옥산가미’와 ‘국화음’ 혼합 추출물은 최소 처리 농도부터 대조군에 비해 최대, 131.3%, 144,8%까지 세포증식이 촉진됨을 확인할 수 있었고, 이러한 결과로부터 본 발명에 따른 혼합 추출물은 세포증식능이 탁월하고, 또, 세포 독성은 없음을 확인할 수 있었다. As shown in Table 3, 'hongoksangami' and 'chrysanthemum' mixed extract was found to promote cell proliferation up to 131.3%, 144,8% from the minimum treatment concentration compared to the control, from these results The mixed extract according to the present invention was confirmed that the cell proliferation is excellent, and there is no cytotoxicity.

<실험예 2 : 항산화 효과 측정>Experimental Example 2 Measurement of Antioxidant Effect

본 발명의 제조예에 따라 얻어진 ‘홍옥산가미’와 ‘국화음’ 혼합 추출물인 화장료 유효성분 물질의 항산화 효과를 알아보기 위하여 자유라디칼 소거활성 실험(Free Radical Scavenging Activity Test)을 실시하였다. 자유라디칼 소거활성 실험은 Kim등(Kor. J. Pharmacogn., 24(4), 299-303(1993))의 방법을 변형한 것으로써, 안정한 자유라디칼인 DPPH(1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl, Sigma사) 시약을 사용하였다. 0.2 mM DPPH 용액(Blank인 경우는 메탄올) 1㎖에 상기 제조예 1 또는 2에서 제조한 혼합 추출물을 다양한 농도로 제작하여, 이들 각각을 2㎖를 첨가하여 혼합하고, 실온에서 10분간 방치한 후 525 nm에서 흡광도를 측정하는 실험군을 설정하였으며, 이에 대한 대조군으로는 정제수를 이용한 경우로 설정하였다. 상기 실험군과 대조군에 대한 흡광도 측정 후, 하기 수학식2를 이용하여 자유라디칼 소거활성 효과를 구하여, 그 결과를 하기 표4에 나타내었다.A free radical scavenging activity test was conducted to investigate the antioxidant effect of the cosmetic active ingredient materials of the mixed mixture of 'hongoksangami' and 'chrysanthemum' obtained according to the preparation example of the present invention. The free radical scavenging activity was modified from the method of Kim et al. (Kor. J. Pharmacogn., 24 (4), 299-303 (1993)), which is a stable free radical DPPH (1,1-diphenyl-2- picryhydrazyl, Sigma) reagent was used. To 1 ml of 0.2 mM DPPH solution (Methanol for Blank), the mixed extract prepared in Preparation Example 1 or 2 was prepared at various concentrations, and each of them was added and mixed with 2 ml, and left at room temperature for 10 minutes. An experimental group for measuring absorbance at 525 nm was set, and the control group was set to the case of using purified water. After measuring the absorbance for the experimental group and the control group, the free radical scavenging activity was obtained using Equation 2 below, and the results are shown in Table 4 below.

Figure 112004059341099-pat00002
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물질matter 농도 (㎍/㎖)Concentration (μg / ml) 자유라디칼 소거율 (%)Free radical scavenging rate (%) SC50 (%)SC 50 (%) 홍옥산가미Ruby 0.10.1 2.72.7 0.340.34 1One 3.33.3 1010 15.915.9 100100 22.822.8 10001000 42.142.1 1000010000 65.665.6 국화음Chrysanthemum 0.10.1 5.05.0 0.080.08 1One 4.24.2 1010 19.419.4 100100 32.532.5 10001000 55.255.2 1000010000 70.170.1 * 반복시험수 = 5* Number of replicates = 5

상기 표4에서, SC50 은 자유라디칼 소거율 50%를 달성하기 위해 소요되는 시료의 농도로서 다른 성분물질과 상대적으로 비교할 때 사용하는 수치로서 값이 작을수록 소거율이 높음을 의미한다. 보통 작약추출물은 SC50이 15.51%, 하수오추출물은 4.21%, 황금근추출물은 14.40%이다. 상기 표4에 나타낸 결과를 통해 확인할 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따른 제조예 1 또는 2에 의해 추출 수득된 ‘홍옥산가미’ 및 ‘국화음’ 혼합 추출물은 자유라디칼 소거능력이 다른 성분 물질들에 비하여 상대적으로 매우 탁월하다는 것을 확인할 수 있었다. In Table 4, SC50 is a concentration of the sample required to achieve 50% free radical scavenging ratio, which is a value used in comparison with other component substances, and the smaller the value, the higher the scavenging ratio. Peony extracts are usually 15.51% for SC50, 4.21% for sewage extracts and 14.40% for golden root extracts. As can be seen through the results shown in Table 4, the 'hongokgami' and 'chrysanthemum' mixed extract obtained by the preparation example 1 or 2 according to the present invention is a component material having different free radical scavenging ability It can be confirmed that it is relatively excellent compared to.

<실험예 3 : PGE2 생성 억제 효능 및 시너지 효과 측정 >Experimental Example 3: Measurement of PGE2 Inhibition Effect and Synergy Effect

‘홍옥산가미’와 ‘국화음’ 혼합 추출물의 PGE2 생성 억제 효과를 알아보기 위하여 하기 실험을 실시하였다[참고문헌 : Analytical Biochemistry, 1999, 271, 18-28].The following experiment was conducted to investigate the inhibitory effect of PGE2 production by the mixture of 'hongoksangami' and 'chrysanthemum' [Ref .: Analytical Biochemistry, 1999, 271, 18-28].

먼저, 사람의 표피 조직에서 분리한 섬유아세포를 수 차례 계대배양(Subcultury)한 후, 96-웰 플레이트에 1?105개씩 넣고 37℃, 5 %(v/v) CO2 배양기 에서 24시간 배양하였다. FBS(fetal bovine serum)가 포함되지 않은 배지로 교체하여 2시간 배양하고 평가하고자 하는 ‘홍옥산가미’및 ‘국화음’ 혼합 추출물을 하기 표 5에 나타낸 농도로 처리하여 37℃, 5 %(v/v) CO2 배양기에서 2시간 동안 배양하였다. 또한 두 추출물을 동시 적용시에 시너지 효과를 관찰하기 위하여 표5에 나타낸 농도로 처리하였다. PGE2 자극원으로 칼슘 이오노포어A23187 (Calcium ionophore A23187)과 아라키돈산을 50 μM 농도로 5분간 처리한 후, 도데실트리메틸암모늄 브로마이드 (dodecyltrimethylammonium bromide)를 최종 농도 0.25 %(w/v)로 10분간 처리하여 세포를 용혈시켰다. 이 상층액을 goat-anti mouse Ig로 코팅된 플레이트에 50 ㎕ 씩 취하여 넣어주고, 이때 PGE2 standard도 각각 농도를 변화시켜가며(20, 40, 80, 160, 240, 320, 480, 640 pg / 50 ㎕) 50 ㎕ 씩 넣어주었다. 여기에 PGE2 항체와 PGE2 접합체를 각각 50 ㎕ 씩 넣어 플레이트 쉐이커로 2시간 동안 상온에서 반응시킨 다음, 배지 및 버퍼를 제거하고 4회 수세하였다. 효소 기질인 3,3’,5,5’-테트라메틸벤지딘 (tetramethylbenzidine(TMB))/ 과산화수소(hydrogen peroxide)를 150 ㎕씩 넣어 쉐이커에서 30분간 반응시켜 준 후, 반응 정지를 위하여 1M의 황산 (Sulphuric acid)을 첨가하고 ELISA reader 450 nm에서 흡광도를 측정하여 정량함으로써 추출물의 PGE2 억제 효과를 판단하였다. 그 결과를 하기의 표 5에 나타내었다. 하기 표 5의 억제율은 아라키돈산을 처리하지 않은 피부 섬유아세포와 아라키돈산을 처리한 섬유아세포의 PGE2생성량의 차이를 기준으로 계산하였다.First, the fibroblasts isolated from human epidermal tissue were subcultured several times, and then 1 to 105 cells were placed in 96-well plates and incubated in 37 ° C. and 5% (v / v) CO 2 incubator for 24 hours. The mixture of 'hongokgami' and 'chrysanthemum' mixed extracts to be cultured and evaluated for 2 hours by replacing with a medium containing no FBS (fetal bovine serum) was treated at the concentrations shown in Table 5 below at 37 ° C, 5% (v / v) incubated for 2 hours in a CO2 incubator. In addition, the two extracts were treated at the concentrations shown in Table 5 to observe the synergistic effect upon simultaneous application. After treatment with calcium ionophore A23187 and arachidonic acid at 50 μM for 5 minutes as a PGE2 stimulator, dodecyltrimethylammonium bromide was added at a final concentration of 0.25% (w / v) for 10 minutes. The cells were hemolyzed by treatment. 50 μl of the supernatant was added to a plate coated with goat-anti mouse Ig, and the PGE2 standard was also changed at different concentrations (20, 40, 80, 160, 240, 320, 480, 640 pg / 50). 50 μl each was added. 50 μl of PGE2 antibody and PGE2 conjugate were added thereto, followed by reaction at room temperature for 2 hours using a plate shaker. The medium and the buffer were removed, and washed four times. 150 μl of 3,3 ', 5,5'-tetramethylbenzidine (TMB) / hydrogen peroxide was added to the enzyme substrate and reacted with a shaker for 30 minutes. Sulfuric acid) was added and the absorbance was measured and quantified by ELISA reader 450 nm to determine the PGE2 inhibitory effect of the extract. The results are shown in Table 5 below. Inhibition rate of Table 5 was calculated based on the difference in the amount of PGE2 production of skin fibroblasts not treated with arachidonic acid and fibroblasts treated with arachidonic acid.

시료sample 농도 (㎍/㎖)Concentration (μg / ml) PGE2 (pg/105 cells)PGE2 (pg / 10 5 cells) * 억제율 (%)* Inhibition rate (%) 음성 대조군Negative control group -- 88 -- 양성 대조군 (+아라키돈산)Positive control (+ arachidonic acid) -- 307307 -- 홍옥산가미Ruby 100100 307307 00 10001000 320320 -4.3-4.3 1000010000 129129 59.559.5 국화음Chrysanthemum 100100 293293 4.74.7 10001000 307307 0.00.0 1000010000 170170 45.845.8 홍옥산가미 + 국화음Hongoksangami + Chrysanthemum 100100 111111 65.665.6 10001000 6969 79.679.6 * 반복시험수 = 5* Number of replicates = 5

상기 표 5으로부터 ‘홍옥산가미’는 10000㎍/㎖에서 59.5%의 항염 효능이 있고, ‘국화음’도 10000㎍/㎖에서 45.8%까지 자극원에 의한 PGE2 생성을 억제함을 알 수 있었다. 홍옥산가미와 국화음을 동시에 적용한 결과, 각각에선 항염 효능을 보이지 않았던 100㎍/㎖ 농도에서 65.6%의 염증 억제 효과를 보였고, 1000㎍/㎖ 농도에서는 79.6%의 매우 높은 PGE2 억제율로 탁월한 항염 효능을 나타내었다. Table 5 shows that "hongoksangami" has an anti-inflammatory effect of 59.5% at 10000㎍ / ㎖, and "Chrysanthemum sound" also inhibits the production of PGE2 by the stimulation source up to 45.8% at 10000㎍ / ㎖. The simultaneous application of hongoksangami and chrysanthemum sound resulted in 65.6% of inhibitory effect at 100µg / ml concentration, which did not show anti-inflammatory effect. Indicated.

따라서, 상기 시험을 통해 ‘홍옥산가미’와 ‘국화음’ 혼합 추출물은 함께 적용시, 단일 적용시보다 훨씬 높은 항염 효능을 나타내므로 두 추출물을 동시에 적용하면 확실하게 시너지 효과를 볼 수 있다. Therefore, the 'hongoksangami' and 'chrysanthemum' mixed extract through the above test shows a much higher anti-inflammatory effect than when applied together, it can be surely synergistic effect when the two extracts are applied at the same time.

<실험예 4 : in vivo 항염 효능 측정> Experimental Example 4: In vivo anti-inflammatory effect measurement

‘홍옥산가미’와 ‘국화음’ 혼합 추출물의 동물 실험에서의 항염 효능을 알아보기 위하여, in vivo 평가법(mouse ear swelling test, MEST)[참고문헌 : A. Crummey, G. P. Harper, E. A. Boyle and F. R. Mangan. Inhibition of arachidonic acid-induced ear edema as a model for assessing topical anti- inflammatory compound. Agents and Actions 1987, 20, 69-76]을 이용하였다.In order to investigate the anti-inflammatory effects of mixed mixtures of 'hongoksangami' and 'chrysanthemum' in animal experiments, mouse ear swelling test (MEST) [References: A. Crummey, GP Harper, EA Boyle and FR Mangan. Inhibition of arachidonic acid-induced ear edema as a model for assessing topical anti- inflammatory compound. Agents and Actions 1987, 20, 69-76.

무모 마우스(hairless mouse) 21마리를 각 5마리씩 5개 군으로 나누어 ‘홍옥산가미’및 ‘국화음’ 혼합 추출물을 각각 0.5 %(v/v), 1.0 %(v/v)로 에탄올에 용해시킨 시험군과 에탄올만 처리하는 대조군으로 분류하였다. Twenty-one hairless mice were divided into five groups, each of which was divided into five groups, whereby a mixture of ruby antagonist and chrysanthemum sound was dissolved in ethanol at 0.5% (v / v) and 1.0% (v / v), respectively. Test group and ethanol-only control group.

각군의 마우스의 양쪽 귀를 시료 적용 전 에탄올로 깨끗이 세척한 후 마이크로미터를 이용하여 마우스의 귀 두께의 평균치를 측정하였다. 시험군에는 각각의 시료20㎕를, 대조군에는 에탄올 20㎕를 도포하고 1시간이 경과한 후에, 대조군을 제외한 각각의 마우스의 좌측 귀에는 에탄올을, 우측 귀에는 아라키돈산을 각각 2㎎/ear 도포하였고, 도포 1시간 후 마이크로미터를 이용하여 양쪽 귀의 두께를 3회씩 반복 측정하여 아라키돈산에 의한 귀의 부종(edema) 정도를 측정하였다. Both ears of each group of mice were washed with ethanol prior to sample application, and then the average thickness of the ears of the mice was measured using a micrometer. 20 μl of each sample was applied to the test group, 20 μl of ethanol was applied to the control group, and after 1 hour, ethanol was applied to the left ear and arachidonic acid to the right ear of each mouse except the control group. After 1 hour of application, the thickness of both ears was repeated three times using a micrometer to measure the degree of edema of the ears by arachidonic acid.

아라키돈산을 도포하지 아니한 마우스의 좌측 귀는 시험군 자체의 염증 유발 여부를 알아보기 위한 대조군으로 이용하였으며, 시료의 도포 전과 비교하여 별다른 차이를 보이지 아니하였다. The left ear of the mice not coated with arachidonic acid was used as a control to determine whether the test group induced inflammation, and showed no difference compared to before application of the sample.

‘홍옥산가미’및 ‘국화음’ 혼합 추출물을의 항염 효과는 에탄올만 처리한 대조군을 기준으로 부종억제 정도를 판정하였으며, 그 결과를 표 6에 나타내었다. The anti-inflammatory effect of the mixed mixture of 'hongoksangami' and 'chrysanthemum' was determined based on the degree of edema inhibition based on the ethanol-only control, and the results are shown in Table 6.

구분division 농도 (부피%)Concentration (% by volume) 귀두께 (㎛)Ear thickness (㎛) 억제율 (%)Inhibition Rate (%) 아라키돈산 처리전Before arachidonic acid treatment 아라키돈산 처리후After arachidonic acid treatment 두께변화Thickness change 홍옥산가미Ruby 0.50.5 325325 536536 211211 29.229.2 1.01.0 331331 517517 186186 37.637.6 국화음Chrysanthemum 0.50.5 318318 523523 205205 31.231.2 1.01.0 324324 512512 188188 36.936.9 대조군Control group -- 328328 626626 298298 --

※ 억제율(%) = (A-B) / A × 100 ※ Inhibition Rate (%) = (A-B) / A × 100                     

A : 대조군 귀의 평균 두께 변화A: average thickness change of control ear

(아라키돈산 처리 후의 두께 - 아라키돈산 처리 전의 두께)    (Thickness after arachidonic acid treatment-thickness before arachidonic acid treatment)

B : 시험군 귀의 평균 두께 변화B: average thickness change of test group ears

(아라키돈산 처리 후의 두께 - 아라키돈산 처리 전의 두께)    (Thickness after arachidonic acid treatment-thickness before arachidonic acid treatment)

상기 표 6의 결과에서 보는 바와 같이, ‘홍옥산가미’및 ‘국화음’ 혼합 추출물을 포함하는 시험군은 모두 30% 내외의 염증 억제율을 보여 in vivo 상에서도 항염 효능이 우수함을 확인할 수 있었다. As shown in the results of Table 6, the test group containing a mixture of 'hongoksangami' and 'chrysanthemum' all showed an inhibitory rate of about 30% of the anti-inflammatory effect even in vivo.

< 실험예 5 : 안전성 검증 ; 알러지 유발가능성 평가> Experimental Example 5: Safety Verification; Allergen Assessment>

홍옥산가미와 국화음의 알러지 유발여부를 확인하기 위한 실험으로 LLNA(local lymph node assay) 실험법을 택하여 실시하였다[참고문헌 : OECD GUIDELINE FOR THE TESTING OF CHEMICALS ; DRAFT NEW GUIDELINE 429: Skin Sensitization ; Local Lymph Node Assay]. In order to confirm allergenicity of ruby sapphire and chrysanthemum sound, LLNA (local lymph node assay) method was selected. [Reference: OECD GUIDELINE FOR THE TESTING OF CHEMICALS; DRAFT NEW GUIDELINE 429: Skin Sensitization; Local Lymph Node Assay.

상기 제조예 1 및 2에서 제조한 혼합 추출물을 60%에탄올에 가하여 각각 20%, 40%, 60% 용액으로 제조하여, 마우스 (Balb/c)의 양쪽 귀에 25 ㎕씩 3일간 발라준 후 마우스로부터 이개임파절(Auricular lymph node)을 분리하였다. 분리한 임파절을 분쇄하여 단일세포 상태로 만든 후 방사성 동위원소 [3H]-메칠티미딘(methyl thymidine)를 첨가하여 24시간 배양한 다음, 세포 증식의 증폭도[dpm]를 측정한다. 그 결과를 표7에 나타내었다.The mixed extracts prepared in Preparation Examples 1 and 2 were added to 60% ethanol to prepare a 20%, 40%, and 60% solution, respectively, and 25 μl was applied to both ears of the mouse (Balb / c) for 3 days. Auricular lymph node was isolated. The isolated lymph nodes were pulverized into a single cell state, incubated for 24 hours with the addition of radioisotope [3H] -methyl thymidine, and the amplification degree [dpm] of cell proliferation was measured. The results are shown in Table 7.

시료sample 농도 (%)Concentration (%) 임파절세포 수 (세포/mL × 107)Lymph node count (cells / mL × 10 7 ) adpm (평균) a dpm (average) bS.I. (증폭도) b SI (amplitude) 에탄올ethanol 6060 1.581.58 996996 운반매개물Transportation 홍옥산가미Ruby 2020 1.811.81 14621462 1.51.5 4040 1.871.87 14811481 1.51.5 6060 1.281.28 15971597 1.61.6 에탄올ethanol 6060 1.761.76 17291729 운반매개물Transportation 국화음Chrysanthemum 2020 1.571.57 993993 0.60.6 4040 1.731.73 17431743 1.01.0 6060 1.931.93 11221122 0.60.6

표 7에서 adpm (disintegration per minute)는 [3H]-메칠티미딘(methyl thymidine)이 세포내로 삽입되는 양이고, bS.I. (stimulation index) 는 시료의 평균 dpm을 대조군의 평균 dpm으로 나눈 값이다.In Table 7, adpm (disintegration per minute) is the amount of [3H] -methylthymidine inserted into the cell, bS.I. (stimulation index) is the average dpm of the sample divided by the average dpm of the control group.

표 7에서 보는 바와 같이, 알러지 평가 결과는 대조군에 비한 시료군의 임파구 증폭정도로 나타내며 한 농도에서라도 시료의 증폭정도 (S.I.:stimulation index)가 3이상이고, 농도 의존적으로 증가하는 경향을 보일 경우 알러젠으로 간주하게 되는데, ‘홍옥산가미’및 ‘국화음’ 혼합 추출물은 증폭 정도 (S.I.)가 3 이하로서 알러지 유발 가능성이 없어 안전한 것으로 나타났다.As shown in Table 7, the allergy evaluation result is the lymphocyte amplification of the sample group compared to the control group. 'Hongoksangami' and 'Chrysanthemum' mixed extracts have been shown to be safe because they have an amplification degree (SI) of 3 or less and are unlikely to cause allergy.

이상의 실험으로부터 ‘홍옥산가미’및 ‘국화음’ 혼합 추출물은 세포 증식을 활성화 시키고, 자유라디칼 소거활성도 우수하며, 세포 염증 반응의 프로스타글란딘 생성을 억제하는 탁월한 노화 방지 화장료용 조성물로 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 연고, 패취, 또는 분무제 등의 제형으로 이용될 수 있다. From the above experiments, 'hongokgami' and 'chrysanthemum' mixed extracts activate cell proliferation, have excellent free radical scavenging activity, and are excellent anti-aging cosmetic compositions that inhibit prostaglandin production of cellular inflammatory reactions. , Creams, packs, gels, ointments, patches, or sprays.

이상 설명한 바와 같이 본 발명의 백지, 곽향, 조각자, 정향 추출물의 생약혼합물로 이루어진 ‘홍옥산가미’및 국화, 감초 추출물의 생약혼합물로 이루어진 ‘국화음’ 혼합 추출물은 피부에서의 세포 증식 활성, 항산화 효능, 항염증 효과 및 시너지 효과가 뛰어난 조성물로, 피부 노화 방지 효능이 우수한 화장료 조성물을 제공할 수 있다.As described above, the extract of 'Hongoksangami' consisting of a herbal medicine mixture of white paper, wagyang, sculpture, and clove extract of the present invention, and a 'Chrysanthemum' mixed extract consisting of a herbal mixture of chrysanthemum and licorice extract, have a cell proliferation activity and antioxidant activity in the skin. The composition having excellent efficacy, anti-inflammatory effect and synergistic effect can provide a cosmetic composition excellent in skin anti-aging effect.

Claims (10)

백지, 곽향, 조각자, 및 정향 추출물로 이루어진 생약 혼합물과 국화 및 감초 추출물로 이루어진 생약 혼합물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물. A cosmetic composition for preventing skin aging, comprising: a herbal mixture consisting of white paper, kwakhyang, sculptor, and clove extract; 제 1항에 있어서, 상기 백지, 곽향, 조각자 및 정향 추출물로 이루어진 생약 혼합물인 ‘홍옥산가미’와 국화 및 감초 추출물로 이루어진 생약 혼합물인 ‘국화음’을 10:90 ~ 90:10 의 중량비로 포함하는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.According to claim 1, wherein the weight ratio of 10:90 ~ 90:10 of 'Hakoksangami' which is a herbal mixture consisting of white paper, wagyang, sculpture and clove extract and a herbal mixture consisting of chrysanthemum and licorice extract Cosmetic composition for preventing skin aging, comprising a. 제 1항에 있어서, 상기 생약 혼합물 모두 세포 증식 활성을 증가시키는 것을 목적으로 함유되는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.The cosmetic composition for preventing skin aging according to claim 1, wherein all of the herbal mixtures are contained for the purpose of increasing cell proliferation activity. 제 1항에 있어서, 상기 생약 혼합물 모두 항산화 효능을 증가시키는 것을 목적으로 함유되는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.The cosmetic composition for preventing skin aging according to claim 1, wherein all of the herbal mixtures are contained for the purpose of increasing antioxidant efficacy. 제 1항에 있어서, 상기 생약 혼합물 모두 자유라디칼 소거 활성을 증가시키는 것을 목적으로 함유되는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.The cosmetic composition for preventing skin aging according to claim 1, wherein all of the herbal mixtures are contained for the purpose of increasing free radical scavenging activity. 제 1항에 있어서, 상기 생약 혼합물 모두 항염증 효능을 증가시키는 것을 목적으로 함유되는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물. The cosmetic composition for preventing skin aging according to claim 1, wherein all of the herbal mixtures are contained for the purpose of increasing anti-inflammatory efficacy. 제 1항에 있어서, 상기 생약 혼합물 모두 프로스타글란딘 생성을 억제하는 것을 목적으로 함유되는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.The cosmetic composition for preventing skin aging according to claim 1, wherein all of the herbal mixtures are contained for the purpose of inhibiting the production of prostaglandins. 제 1항에 있어서, 상기 피부 노화 방지 화장료 조성물이 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 연고, 패취, 또는 분무제의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물The anti-aging cosmetic composition according to claim 1, wherein the anti-aging cosmetic composition has a formulation of a lotion, an essence, a lotion, a cream, a pack, a gel, an ointment, a patch, or a spray. 제1항에 있어서, 상기 피부 노화 방지 화장료 조성물의 전체 중량에 대하여 생약추출물 0.0001 내지 30 중량%을 함유하는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.The cosmetic composition for preventing skin aging according to claim 1, wherein the herbal composition contains 0.0001 to 30% by weight based on the total weight of the skin anti-aging cosmetic composition. 제1항의 백지, 곽향, 조각자 및 정향 추출물로 이루어진 생약 혼합물과 국화 및 감초 추출물로 이루어진 생약 혼합물의 추출용매가 정제수, 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올, 에틸아세테이트, 글리세린, 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜을 포함한 용매군 중에서 선택된 하나의 순수용매 또는 둘 이상이 조합된 혼합용매이며, 생약의 전체 부피에 대하여 1 내지 20배의 양이 이용되는 것을 특징으로 하는 화장료 유효성분 물질의 분리추출 방법.The extraction solvent of the herbal mixture consisting of white paper, squash, sculpture and clove extract of claim 1 and the herbal mixture consisting of chrysanthemum and licorice extract is purified water, methanol, ethanol, propyl alcohol, butyl alcohol, ethyl acetate, glycerin, propylene glycol and butylene A single pure solvent selected from the group of solvents including glycol or a mixed solvent of two or more thereof, the method of separating and extracting a cosmetically active ingredient substance, characterized in that an amount of 1 to 20 times is used with respect to the total volume of the herbal medicine.
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