KR101019643B1

KR101019643B1 - 초분자체 함유 화장료 조성물

Info

Publication number: KR101019643B1
Application number: KR1020080052991A
Authority: KR
Inventors: 지광환; 유동찬; 조현남; 김희준; 문태원; 양선아; 임남경; 이인선; 이삼빈; 정호순; 강공원
Original assignee: 금오공과대학교 산학협력단; (주)라티브
Priority date: 2008-06-05
Filing date: 2008-06-05
Publication date: 2011-03-07
Also published as: KR20090126738A

Abstract

본 발명은 약용식물에서 기능성 성분을 분리 정제하고 이를 다시 초분자화를 통해서 성분의 기능을 극대화 하는 것에 관한 것이다. 구체적으로는 홍삼, 인진호, 형개, 회향, 측백엽 등의 약용식물에서 목적하는 약용 성분을 분리 정제한 후, 이를 수용성 분자담지체인 사이클로 덱스트린과 포접시켜 화장료조성물에 첨가함으로써 약용 성분의 안정성을 높이고, 피부투과율을 높이는 것에 관한 것이다. 본 발명에 의하면 약용성분의 활성을 저하시키지 않으면서 안정성을 높이고 또한 그 활성을 장기간 유지할 수 있는 효과를 나타낸다.

초분자 복합체, 사이클로덱스트린, 가용화

Description

초분자체 함유 화장료 조성물{COSMETIC COMPOSITION CONTAINING SUPRAMOLECULE}

본 발명은 약용식물에서 기능성 성분을 분리 정제하고 이를 다시 초분자화를 통해서 성분의 기능을 극대화 하는 것에 관한 것이다. 구체적으로는 홍삼, 인진호, 형개, 회향, 측백엽 등의 약용식물에서 목적하는 약용 성분을 분리 정제한 후, 이를 사이클로 덱스트린과 포접시켜 화장료조성물에 첨가함으로써 분리된 약용성분의 안정성을 높이고, 피부투과율을 높이는 기술에 관한 것이다.

약용 식물은 높은 약리학적 활성과 약한 독성을 가지는 특성으로 인해 오래전부터 치료를 위한 목적으로 사용되어 왔다. 약용 식물의 이러한 생리활성은 피토케미칼(phytochemicals)이라고 하는 식물 유래의 유용 성분에 의한 것이다. 피토케미칼은 생화학적 반응의 기질 역할이나 효소 반응의 보효소나 저해제로써 작용하는 등 다양한 작용 기작을 가진다.

모발과 두피는 밀접한 관계를 가지고 있다. 모발의 성장은 모낭과 모유두에서 이루어지므로 모발의 관리를 위해서는 모발 자체보다는 모발의 뿌리인 모낭의 모유두를 통해 영양을 공급해 주어야 한다. 건강한 모발을 위해서는 두피의 관리가 무엇보다 중요하다.

피부는 신체의 노화와 마찬가지로 연령이 증가함에 따라 끊임없이 변화하여 피부 기능의 저하를 가져오게 된다. 일반적으로 피부의 노화는 피부 두께, 피부 색조, 피부탄력의 변화, 혈관의 확장 및 주름 등 다양한 증상으로 나타나게 된다. 이들 증상 중 피부 노화의 대표적인 증상인 주름의 생성은 피부의 내인성 노화, 광노화 그리고 얼굴의 표정근의 만성적인 수축 및 이완에 의해서 발생되는데 이 중 내인성 노화와 광노화는 진피 내의 물질의 변성에 의해서 초래되는 것으로 알려져 있다. 이러한 내인성 노화와 광노화의 치료로써 자외선 차단제를 이용한 광방어나 진피 내 물질의 변성을 막는 약품을 도포하는 방법들을 이용하게 된다. 최근 피부과 영역에서 피부 주름 병변에 대한 미용적인 목적의 치료 요구가 날로 증대되고 있으며 피부 주름 병변을 예방 또는 치료하는 데 있어서 보다 효과적이고 간편하며 부작용이 적은 약제의 필요성이 요구되고 있다.

비듬 발생이나 가려움, 피부질환과 노화, 피부유연성을 잃게 하는 인체의 각종 오염을 효과적으로 제거하면서도, 제형 안정성이 뛰어난 화장료 조성물의 개발이 당업계에 요청되어 왔으며, 이러한 요청에 부응하기 위한 노력의 일환으로 본 출원인에 의한 한국특허 제10-050991호는 인삼과 인진쑥 및 형개의 물 및/또는 에탄올 추출물(Brix 1.5∼2.5)을 0.1∼12중량% 함유하는 화장료 조성물을 제안하고 있으나, 그 효과의 우수성에도 불구하고 추출물 중에 포함된 전분 및 단백질 성분으로 인하여 상대적으로 경시 안정성이 열등하여 장기간 보관 시 상 분리가 일어나거나 침전이 생길 우려가 있을 뿐만 아니라 추출물의 고유 색상에 의한 영향을 완 전히 배제하기 곤란하다는 문제점이 있었다.

또한, 본 출원인에 의한 한국특허 제10-070122호는 약용식물의 추출물에서 정제한 말톨(maltol), β-피넨(β-pinene), dl-멘톤(dl-menthone), 1-풀레곤(1-pulegone) 및 d-리모넨(d-limonene)을 유효 성분으로서 함유하는 화장료 조성물을 제안하고 있으나, 상기 성분들의 비수용성으로 인해 그 제제화가 용이하지 않으며 경시 안정성에 문제가 있었다.

현재 높은 생리활성을 나타내어 잠재적으로 가치가 클 것으로 기대되는 식물유래 약용 성분들 가운데 낮은 용해도로 인하여 개발단계에 진입조차 하지 못하는 경우가 있다. 이러한 물이나 수용액에 잘 녹지 않는 약용 성분의 용해도의 향상 및 약물의 흡수도를 증가시킬 수 있는 전통적인 기술로는 에탄올이나 계면활성제를 첨가제로 이용하는 방법, 이온화 그룹을 가지고 있을 경우 염의 형태로 제조하는 방법, pH를 조절함으로써 용해도를 증가시키는 방법 등이 있다. 또한 친수성 작용기를 화합물에 유기화학적 방법으로 도입하여 수용화 시키는 방법도 있다. 그러나 이 같은 방법은 많은 시간과 노력을 필요로 할 뿐만 아니라 약용물질 자체의 효능과 안정성 및 기타 물리/화학적인 성질을 변화시키기 때문에 약용물질로서의 가치를 상실하게 만들 위험이 있다. 최근에는 리포좀, 마이크로에멀젼, 사이클로덱스트린 등의 분자담지체를 이용한 난용성 약용 성분의 가용화 기술이 진행되고 있다.

특히, 사이클로 덱스트린은 글루코오스 분자가 동그란 고리 모양으로 붙어 있는 구조를 가지며 분자 내에 소수성 환경의 공간을 가지고 있어 여러 종류의 유용성 약물들의 가용화를 위하여 널리 이용되고 있다. 또한, 사이클로 덱스트린의 잠재적인 경피 흡수 증진 효과도 보고된 바 있다.

그러나 사이클로덱스트린이 모든 성분을 가용화 시키고 안정화시킬 수 있는 것은 아니므로, 특정 약리 활성성분에 대하여 어떠한 비율과 조건에서 가용화가 잘 이루어지는 지에 대한 추가적인 연구가 필요하다.

이에 본 발명자들은 종래의 문제점을 해결하기 위하여 약용식물에서 피부에 유용한 활성성분들을 분리 정제한 후, 이들을 수용성 분자 담지체와의 초분자 상호작용을 통하여 수용액 내에서도 안정하게 존재할 수 있도록 하고 동시에 이들의 기능성을 극대화 시키는 연구를 진행하였다.

이에 분자담지체로서 널리 사용되는 사이클로덱스트린에 담지되어 가용화된 약용 성분들을 다양한 제형의 화장료조성물에 첨가하는 경우, 활성성분의 약리적 기능을 훼손시키지 않으면서, 우수한 안정성을 가지며 여러 경우에서 피부흡수 증진효과를 나타냄을 발견하고 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 약용 식물에서 추출된 약용성분이 사이클로덱스트린에 담지되어 형성된 초분자체를 유효성분으로 함유하여 안정성이 우수하고 피부흡수 증진효과를 나타내는 화장료조성물을 제공하는데 있다.

본 발명의 다른 목적은 약용식물에서 목적으로 하는 활성성분을 분리 정제하고, 사이클로덱스트린과의 초분자 상호작용을 통하여 초분자체를 형성하고, 이를 함유하는 화장료 조성물을 제조하는 방법을 제공하는데 있다.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 홍삼, 인진호, 형개, 회향, 측백엽 추출물로부터 분리 정제한 말톨(maltol), 아데노신(adenosine), β-피넨(β-pinene), 멘톤(menthone), 풀레곤(pulegone), 리모넨(limonene), 아네 톨(anethole), 에스트라골(estragole) 및 펜촌(fenchone)을 사이클로덱스트린에 담지시켜 제조한 초분자 복합체를 유효성분으로 함유하는 초분자체 함유 화장료 조성물을 제공한다.

상기 화장료 조성물에 있어서, 상기 말톨(maltol), 아데노신(adenosine), β-피넨(β-pinene), 멘톤(menthone), 풀레곤(pulegone), 리모넨(limonene), 아네톨(anethole), 에스트라골(estragole) 및 펜촌(fenchone)과 사이클로덱스트린의 초분자 복합체는 중량비로 각각 1: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20의 범위로 함유되는 것이 바람직하다.

상기 화장료 조성물에 있어서, 사이클로덱스트린은 β-사이클로덱스트린 및/또는 γ-사이클로덱스트린인 것이 바람직하다.

상기 화장료 조성물에 있어서, 상기한 유효성분으로서의 초분자 복합체의 합계량은 화장료 조성물 전 중량에 대하여 0.01∼20 중량%, 바람직하게는 1∼15 중량%, 더욱 바람직하게는 1∼10중량 %의 범위가 되도록 첨가하여 제형화 하는 것이 바람직하다.

본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 홍삼, 인진호, 형개, 회향, 측백엽의 추출물로부터 약용 성분으로서의 말톨(maltol), 아데노신(adenosine), β-피넨(β-pinene), 멘톤(menthone), 풀레곤(pulegone), 리모넨(limonene), 아네톨(anethole), 에스트라골(estragole) 및 펜촌(fenchone)을 분리 정제하는 단계; 0.01∼0.1M의 β-사이클로덱스트린 및/또는 γ-사이클로덱스트린 수용액에 상기 약용 성분을 첨가함에 있어서, 상기 사이클로덱스트린이 상기 각 약용성분에 대하여 1∼10당량이 되도록 첨가하여 상온에서 0.5∼2시간 교반하고 감압 농축시켜 상기 약용 성분들의 초분자체를 형성하는 단계; 및 상기 형성된 초분자 복합체의 합계량이 화장료 조성물 전 중량에 대하여 0.01∼20 중량%, 바람직하게는 1∼15 중량%, 더욱 바람직하게는 1∼10중량 %의 범위가 되도록 첨가하여 제형화 하는 단계를 포함하는 초분자체 함유 화장료조성물의 제조방법이 제공된다.

초분자체 형성에 사용되는 상기 β-사이클로덱스트린은 상기 각 약용성분에 대하여 1.0∼2.0 당량으로, 바람직하게는 1.2∼2.0당량으로, 더욱 바람직하게는 1.5∼2.0 당량으로 사용되는 것이 바람직하다.

초분자체 형성에 사용되는 상기 γ-사이클로덱스트린은 상기 각 약용성분에 대하여 2.0∼3.0당량으로, 바람직하게는 2.2∼3.0당량으로 사용되는 것이 바람직하다.

분자담지체로서 β-사이클로덱스트린을 사용하는 것이 더욱 효율적이지만, γ-사이클로덱스트린의 수용성이 높기 때문에 필요에 따라 병행하여 사용할 수 있다.

또한, 상기 초분자 복합체 형성단계는 pH 7에서 수행되는 것이 바람직하며, 상기 초분자 복합체를 형성하는 단계에서 교반과 함께 초음파 조사를 병행함으로써 반응시간을 단축시킬 수 있다. 이는 약용물질이 물과 섞이지 않는 오일 형태의 물질이므로 초음파조사를 하게되면 미세한 기름방울 형태로 분산이 이루어져 사이클로덱스트린과의 복합체 형성이 보다 효율적으로 이루어 질 수 있도록 유도하기 때문이다.

이하, 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다.

제한적인 것은 아니지만 본 발명의 화장료 조성물의 제조에 사용되는 유효성분의 천연 식물 출처원으로는 홍삼, 인진호, 형개, 회향 및 측백엽이 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기한 천연 식물로부터 유래하는 피토케미칼인 말톨, 아데노신, β-피넨, 멘톤, 풀레곤, 리모넨, 아네톨, 에스트라골 및 펜촌의 초분자체를 유효성분으로 함유한다. 이들 성분의 상호 상승 작용에 의하여 현저히 증진된 우수한 비듬 발생 억제 효과, 가려움증 개선 효과, 피부질환 개선 효과 및 보습 효과를 나타내는 것으로 믿어지며, 제제화가 용이하고 경시 안정성이 특히 우수하며, 피부흡수 증진효과를 나타낸다.

본 발명에 사용되는 피토케미칼 중 말톨과 아데노신은 주로 홍삼으로부터, β-피넨은 인진호로부터, 멘톤, 풀레곤 및 리모넨은 형개로부터, 아네톨, 에스트라골 및 펜촌은 회향으로부터 추출 분리될 수 있으며, 측백엽으로부터는 리모넨과 펜촌이 추출 분리될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서 첨가되는 이들 유효 성분을 추출 분리하기 위한 재료는 이들 식물의 뿌리, 잎, 줄기, 열매 또는 이들의 혼합체로부터 추출될 수 있으나, 바람직하게는 홍삼의 경우에는 그 파쇄물, 인진호, 형개 및 측백엽의 경우에는 잎과 줄기, 그리고 회향의 경우에는 열매를 사용하는 것이 바람직하다.

본 발명에 있어서의 유효성분 중 하나인 말톨은 홍삼에 다량 함유된 항산화 물질로 간기능, 신기능, 심기능을 높이며 노화물질의 축적을 억제하고 피로를 회복시켜 주어 노화방지에도 큰 효능을 나타내는 물질로 알려져 있다(J. Biochem. Molec. Bio, Vol.39, No. 2, Mar. 2006, 145-149; J. Agri. Food Chem. 2006, 54, 2558-2562; Biol. Pharm. Bull. 29(4) 750-754 (2006)).

또한, 홍삼에 함유되어 있는 아데노신은 피부 섬유아세포의 DNA합성을 촉진하고 단백질 합성을 증가시키며 세포의 크기를 증가시키는 역할이 있다고 알려져 있다. 또한 핵산의 합성을 증가시키고 단백질의 대사를 활발히 하여 세포의 항상성 유지를 해줌으로써 주름의 개선에 효과가 있다.

본 발명에 있어서의 유효성분 중 하나인 β-피넨은 인진호에 다량 함유되어 있으며, 항균, 항종창, 항염증, 혈행촉진에 우수한 생물화학적 작용을 하는 것으로 알려져 있다(Phytother. res. 17, 1-18 (2003); J. Der. Sci. (2006) 41, 137-142).

본 발명에 있어서의 유효성분인 멘톤, 풀레곤 및 리모넨은 형개에 다량 함유되어 있으며, 멘톤은 진통, 항알러지, 항독, 항균, 살충, 항암 작용 등이 보고 되어 있고(Int. J. Pharm. 229 (2001) 37-44; Int. J. Pharm. 219 (2001) 177-181), 풀레곤은 항암, 항균, 항독작용이 보고되어 있으며(Chem. Res. Toxicol. 1989 Sep-Oct;2(5):349-55), 측백엽에도 많이 함유되어 있는 것으로 알려져 있는 리모넨은 진통효과, 항우울증, 항종양, 혈액순환을 강화시켜 혈압 강하를 일으키는 효과 등이 보고 되어 있다(Int. Immunopharmacology 5 (2005) 829-838; Drug Des Deliv. 1990 Sep;6(3):229-38; Vitam Horm. 2005;72:505-35)

본 발명에 있어서의 유효성분인 아네톨은 항균, 항바이러스, 방충 효과가 있으며, 동물실험에 의하면 거담제, 진경제의 효과가 있는 것으로 알려져 있으며(Bioorganic & Medicinal Chemistry 13 (2005) 4353-4358), 에스트라골은 항염증, 세포재생, 피지억제, 살충활성을 나타내는 것으로 알려져 있고(Chem. Res. Toxicol. 1998, 11, 863-872; Fitoterapia 71 (2000) 725-729; Yakugaku Zasshi 125(4) 371-375 (2005); Phytother. Res. 18, 827-830 (2004)), 펜촌은 피부미용(주름제거)과 소화촉진 등의 작용이 보고 되어 있다(Int. J. Pharmaceutics 215 (2001) 229-240).

본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서의 유효 성분인 말톨, 아데노신, β-피넨, 멘톤, 풀레곤, 리모넨, 아네톨, 에스트라골 및 펜촌은 30∼80℃의 온도에서 100∼150rpm의 교반 하에 8∼24시간 동안 하기하는 특정한 용매를 사용하여 추출한 다음, 분리 정제하거나 또는 분리 정제 없이 회전 증발식의 감압 농축기를 이용하여 농축시킨 다음 동결 건조기를 이용하여 분말화된 상태로 사용된다.

본 발명에 있어서 상기한 유효성분을 효과적으로 추출하기 위해서는 대상 식물의 종류 및 대상 추출 성분에 따라 최적 추출량을 얻을 수 있는 용매의 선택이 필요하며, 용매의 제거 용이성 및 잔류 허용량 등도 함께 고려하여야 할 필요가 있다.

추출 용매로서는 에틸에테르, 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 이소프로판올, 클로로포름, 벤젠을 사용할 수 있으며, 유효 성분의 검출 여부 및 검출량 분석은 HPLC, GC 또는 GC-MS를 이용하여 수행할 수 있다. 홍삼으로부터의 말톨 및 아데노 신의 추출은 100% 이소프로판올 또는 70% 이소프로판올이 이 사용될 수 있으나, 특히 바람직한 것은 100% 이소프로판올이다. 인진호로부터의 β-피넨의 추출에는 에틸에테르, 1-부탄올, 이소프로판올이 사용될 수 있으나, 가장 바람직하게는 에틸에테르이고, 이 경우 멘톤과 아네톨도 다량 추출할 수 있는 장점이 있으며, 인진호로부터의 리모넨과 아네톨의 추출에는 메탄올이 특히 바람직하다. 형개로부터의 멘톤 및 리모넨의 추출에는 에틸에테르가 가장 바람직하나, 메탄올, 1-부탄올 및 이소프로판올도 사용 가능하며, 풀레곤의 추출에는 에탄올, 메탄올, 1-부탄올, 이소프로판올 및 클로로포름이 사용될 수 있다. 회향으로부터의 아네톨의 추출에는 에틸에테르가 바람직하며, 에스트라골의 추출에는 메탄올이, 그리고 펜촌의 추출에는 에탄올이 바람직하다. 측백엽으로부터의 리모넨의 추출에는 에탄올과 이소프로판올이 바람직하며, 펜촌의 추출에는 1-부탄올이 바람직하다.

본 발명에 있어서 비수용성 유효성분의 가용화와 안정화를 위해 사용되는 사이클로덱스트린(cyclodextrin, CD)은 환상의 고리구조로 인해 안쪽에 공동을 갖고 있으며 각 포도당의 외부로 노출되어 있는 하이드록시기(hydroxyl group)가 친수성을 나타내는 반면, 내부는 수소결합과 에테르(ether) 결합으로 인하여 소수성을 띄게 된다. 따라서 외부에서 소수성을 가지는 물질이 첨가되면 CD는 호스트로 작용하여 외부 물질을 공동에 포접하여 초분자 복합체를 형성하게 되며, 이러한 특성에 따라 포접된 비수용성 게스트(guest) 물질을 수용액 상에서 보호하고 안정화시키는 역할을 한다. 본 발명에서는 사이클로덱스트린의 이러한 특성을 활용하여 여러 비수용성 약용물질들을 다양한 조건하에서 사이클로덱스트린과 초분자 복합체를 형성 시켜보았다. α-CD는 동공의 크기가 본 발명의 약리활성물질들의 크기에 비해 작기 때문에 크기가 충분히 큰 β-CD와 γ-CD를 사용하였다. 사이클로덱스트린은 비수용성물질을 가용화시킬 뿐 아니라, 본 발명 약용성분인 말톨과 같은 수용성 저분자 물질을 안정화시키는 역할도 한다는 것을 알 수 있었다.

본 발명에 있어서 약용성분들의 초분자 복합체는 CD 수용액에 각 약용성분들을 직접 첨가하여 제조하였다. 비수용성 약용물질들이 수용액 상에서 CD와 초분자 복합체를 형성하였음은 ¹H NMR 분광법으로 확인할 수 있었다. ¹H NMR 스펙트럼에서 수용액에서의 CD에 의한 공명신호 뿐만 아니라 각 약용물질에 의한 공명 신호도 관찰되는 사실로부터 비수용성 약용물질들이 CD에 포접되어 수용액 상에 존재하고 있음을 확인할 수 있다. 실제로 비수용성 약용물질들은 물에 녹지 않기 때문에 D₂O를 용매로 하는 ¹H NMR 측정 조건에서는 그들의 공명신호들이 관찰이 되지 않는다. 따라서 이러한 실험결과는 β-CD와 γ-CD가 수용액에서 비수용성 약용물질들을 안정하게 포접하여 이들을 가용화한다고 말할 수 있다.

또한, 초분자 복합체의 형성은 적외선 분광법(IR)을 통해서도 확인을 할 수가 있다. 즉 IR 스펙트럼에서 CD 분자의 진도에 의한 신호 외에 약용물질 분자들의 진동에 의한 신호가 함께 관찰이 되며, 이러한 결과는 C=O 작용기를 가지는 풀레곤, 멘톤, 펜촌에서 잘 알 수 있는데, 이것은 C=O 작용기에 의한 진동 신호가 일반적으로 잘 관찰되기 때문이다. β-피넨, 리모넨, 아네톨, 에스트라골은 C=C 작용기에 의한 진동 신호의 관찰로 이들이 CD와 초분자 복합체를 형성하고 있음을 알 수 있다.

본 발명 초분자 복합체의 열적 안정성을 TGA분석을 통해 검토하였다. 사이클로덱스트린과 약용성분-CD 초분자 복합체의 TGA 결과들을 비교하여 본 결과, 초분자 복합체의 경우는 사이클로덱스트린만의 TGA 결과와는 달리 280℃ 부근에서 또 다른 열량 변화에 따른 중량 감소가 관찰이 되었는데 이것은 포접된 약용물질의 열분해 의한 것이다. 따라서 이 온도까지 약용물질이 CD에 안정하게 포접되어 있다는 것을 알 수 있었다.

한편 본 발명에 있어서, 제한 적인 것은 아니나 유효성분인 말톨(maltol), 아데노신(adenosine), β-피넨(β-pinene), 멘톤(menthone), 풀레곤(pulegone), 리모넨(limonene), 아네톨(anethole), 에스트라골(estragole) 및 펜촌(fenchone)의 초분자 복합체는 중량비로 각각 1: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20의 범위로 포함되는 것이 효과의 균형 측면에서 바람직하다.

이러한 비율은 화장료 조성물의 제형, 적용 대상 연령층이나 피부 성향, 첨가되는 계면활성제의 종류 등과 같은 다양한 파라메타에 의해 변화될 수 있는 것이므로 본 발명에 있어서 절대적인 것은 아니며 선택적이다.

본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서 상기한 유효 성분의 합계 첨가량은 화장료 조성물 전 중량에 대하여 0.01∼20 중량%, 바람직하게는 1∼15 중량%, 더욱 바람직하게는 1∼10중량%의 범위가 되도록 첨가하여 제형화하는 것이 바람직하다. 상기한 범위 미만에서는 그 첨가 효과가 미약하게 될 우려가 있으며, 역으로 상기 한 범위를 초과하면 경제적으로 바람직하지 못하게 될 우려가 있다.

상기한 비율 역시 화장료 조성물의 제형, 적용 대상 연령층이나 피부 성향, 첨가되는 계면활성제의 종류 등과 같은 다양한 파라메타에 의해 변화될 수 있는 것이므로 본 발명에 있어서 절대적인 것은 아니며 선택적이다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 통상의 화장료 조성물의 제조에 관용적으로 사용되는 통상적인 적어도 1종 이상의 음이온성 계면활성제, 비이온성 계면활성제, 양쪽성 계면활성제, 양이온성 계면활성제 및 이들의 혼합물을 포함할 수 있으며, 이들의 함량은 조성물 전 중량 기준으로 일반적으로 2 내지 40중량%, 바람직하게는 약 2 내지 25중량%이다. 또한, 상기의 계면활성제 외에 점도조정제, pH 조정제, 향료, 착색제, 산화방지제 등 화장품법규에 규정된 통상의 성분이 사용될 수 있음은 물론이다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 샴푸, 바디크렌져, 헤어컨디셔너, 보습제, 헤어토닉, 크림, 바디로션, 헤어로션 등과 같은 다양한 형태로 제형화될 수 있으며, 특히 미백제, 자외선 차단제, 주름 개선제, 육모제 등으로의 적용 가능성이 클 것으로 예상된다.

본 발명은 하기의 공정에 의하여 제조된다.

먼저 홍삼, 인진호, 형개, 회향, 측백엽의 추출물을 제조한다. 이때 각 약용식물을 혼합하여 추출할 수 있으며, 각각 별개로 추출한 후 혼합할 수 있음은 물론이다. 상기 추출물로부터 말톨(maltol), 아데노신(adenosine), β-피넨(β- pinene), 멘톤(menthone), 풀레곤(pulegone), 리모넨(limonene), 아네톨(anethole), 에스트라골(estragole) 및 펜촌(fenchone)을 분리 정제한다. 이 때 유효 성분의 검출 여부 및 검출량 분석은 HPLC, GC 또는 GC-MS를 이용하여 수행할 수 있다.

0.01∼0.1M의 β-사이클로덱스트린 및/또는 γ-사이클로덱스트린 수용액에 상기 약용 성분을 첨가함에 있어서, 상기 사이클로덱스트린이 상기 각 약용성분에 대하여 1∼10당량이 되도록 첨가하여 상온에서 0.5∼2시간 교반하고 감압 농축시켜 상기 약용 성분들의 초분자체를 형성한다.

이 경우 상기 β-사이클로덱스트린은 상기 각 약용성분에 대하여 1.0∼2.0당량으로, 바람직하게는 1.2∼2.0당량으로, 더욱 바람직하게는 1.5∼2.0 당량으로 사용되는 것이 바람직하다.

이 경우 상기 γ-사이클로덱스트린은 상기 각 약용성분에 대하여 2.0∼3.0당량으로, 바람직하게는 2.2∼3.0당량으로 사용되는 것이 바람직하다.

또한, 상기 초분자 복합체 형성단계는 pH 7에서 수행되는 것이 바람직하며, 상기 초분자 복합체를 형성하는 단계에서 교반과 함께 초음파 조사를 병행함으로써 반응시간을 단축시킬 수 있다. 이는 약용물질이 물과 섞이지 않는 오일 형태의 물질이므로 초음파조사를 하게되면 미세한 기름방울 형태로 분산이 이루어져 사이클 로덱스트린과의 복합체 형성이 보다 효율적으로 이루어 질 수 있도록 유도하기 때문이다.

그리고 난 후 상기단계에서 형성된 약용성분의 초분자체를 화장료의 기재에 첨가하여 통상의 방법으로 각각의 제형에 따라 화장료 조성물을 제조한다. 이때 유효성분으로서의 상기 초분자 복합체들은 그 합계량이 화장료 조성물 전 중량에 대하여 0.01∼20 중량%, 바람직하게는 1∼15 중량%, 더욱 바람직하게는 1∼10중량%의 범위가 되도록 첨가하여 제형화 하는 것이 바람직하다.

본 발명은 교육과학기술부와 한국산업기술재단의 지역혁신인력양성사업으로 수행된 연구를 바탕으로 한 것으로서 이상에서 살펴본 바와 같이 본 발명에 의한 약용성분의 초분자 복합체를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 높은 수용성으로 인해 제제화가 용이하며, 약용성분의 기능에 저하 없이 그 안정성을 유지하므로 그 활성이 오래 지속된다.

이하, 본 발명을 추출예, 시험예, 실시예 및 비교예를 통하여 더욱 상세히 설명하기로 하나, 이는 본 발명을 예증하기 위한 것일 뿐 본 발명을 제한하고자 하는 것은 아니다.

실시예 1 :약용성분의 분리 정제

약용 성분을 추출하기 위한 추출 용매로 에틸에테르, 에탄올, 메탄올, 1-부 탄올, 이소프로판올, 클로로포름, 벤젠을 사용하였으며, 홍삼, 인진호, 형개, 회향, 측백엽 각 50g 내지 100g을 상기 용매를 이용하여 추출하였다. 추출 조건으로 온도 30∼60℃, 교반속도 100∼150rpm, 추출 시간 8∼24hr이었으며, 추출 용액은 vacuum evaporator를 사용하여 감압 농축, 및 동결 건조기를 사용하여 분말화 한 후, 각 약용성분을 HPLC상에서 분리하였으며, 분리된 각 약용성분을 표준물질을 사용하여 확인하였다.

그 일 예로 홍삼에서 아데노신을 정제하는 과정을 나타내었다.

홍삼 100g을 증류수 1L에 넣고 60℃에서 10시간 동안 추출을 하였다. 얻어진 추출물은 여과(filtering) 과정을 거친 후, 50℃의 감압 환경 하에서 1시간 동안 농축하였다. 농축된 추출물은 필터(filter)후에 동결건조를 하였다.

동결 건조한 경우 파우더(powder)의 양은 2.62g으로 2.62%의 수율을 보였다. 홍삼 추출물은 0.01% TFA(trifluoroacetic acid)를 포함하는 증류수와 70% 아세토니트릴(acetonitrile)을 이동상으로 HPLC상에서 분리하였다.

아데노신 성분임을 정확히 확인하기위해 분광학적 분석으로 확인하는 실험을 하였다. HPLC를 이용한 홍삼 추출물의 분리를 수행한 후 아데노신의 분획을 회수하여 UV-Visible 흡광도를 측정하여 표준물질의 최대흡수 파장영역과 비교하였다. UV-visible 흡광광도계는 Agilent 8453을 사용하였다.

실시예 2 : 사이클로덱스트린 초분자체 형성

상기 실시예 1에서 분리 정제된 각 약용 성분들을 사이클로덱스트린에 포접 시켜 초분자 복합체를 제조하였다.

β-CD 수용액 (10^-2M, 10 mL)과 γ-CD 수용액 (10^-1M, 10 mL)에 상기 각 약용성분들을 각 CD가 10당량씩 되도록 첨가하여 1 시간 동안 상온에서 교반하였다. 감압 농축기로 용매인 물을 모두 증발시키고, 남은 흰색 고체를 diethyl ether로 씻어주어 포접되지 않은 약용 성분들을 제거하였다. 최종 초분자 복합체는 상온에서 진공으로 건조하였다. 각 초분자 복합체는 90% 이상의 수율로 수득하였다.

초분자 복합체의 형성확인을 위하여 UV-vis 흡광 스펙트럼은 Hewlett-Packard 사의 8453 diode array 분광기를 사용하여 얻었다. IR 스펙트럼은 Jasco 사의 FTIR-460 Plus 분광기를 사용하여 얻었다. ¹H NMR 스펙트럼은 Bruker 사의 AVANCE III 400 Micro Bay 분광기를 사용하여 얻었다. TGA 데이터는 Perkin-Elmer 사의 Pyris 1 TGA 기기를 사용하고, 질소 분위기 하에서 분당 10℃ 가열하여 얻었다. 원소분석은 ThermoQuest 사의 EA 1110 analyzer를 사용하여 얻었다.

도 1은 본 발명 약용성분 초분자 복합체들 중 비수용성 약용성분들의 초분자복합체 ¹H NMR 스펙트럼을 나타낸다. 도 1에 나타나는 바와 같이 수용액에서의 CD에 의한 공명신호 뿐만 아니라 각 약용성분에 의한 공명 신호도 관찰되는 사실로부터 비수용성 약용성분들이 CD에 포접되어 수용액 상에 존재하고 있음을 확인할 수 있다.

도 2는 본 발명의 비수용성 약용성분과 β-사이클로덱스트린 초분자 복합체의 IR스펙트럼을 나타낸다. 도 2에 나타난 바와 같이, 사이클로덱스트린 분자의 진 동에 의한 신호 외에 약용성분 분자들의 진동에 의한 신호가 함께 관찰되는 사실로부터 초분자 복합체가 형성되어 있음을 확인할 수 있다.

도 3은 본 발명 비수용성 약용성분과 γ-CD 초분자 복합체의 TGA 결과들을 보여주고 있다. γ-CD 만의 TGA 다이아그램에서는, 100℃ 까지 서서히 중량이 감소됨을 확인할 수 있다. 이는 고체 상태의 γ-CD에 함유된 물분자의 이탈을 보여주는 것이다. 이 후 약 270℃ 까지 중량 감소가 나타나지 않은 것은 이 온도까지 γ-CD이 안정하게 존재한다는 것을 의미하고, 그 이후 급격한 중량 감소는 γ-CD의 분해를 의미한다. 하지만 초분자 복합체의 경우는 도 3에서 보는 바와 같이 γ-CD만의 TGA 결과와는 달리 280℃ 부근에서 또 다른 열량 변화에 따른 중량 감소가 관찰이 되었는데 이것은 포접된 약용물질의 열분해 의한 것이다. 따라서 이 온도까지 약용물질이 CD에 안정하게 포접되어 있다는 것을 알 수 있었다. 실제로 이 온도는 약용물질의 끓는점 보다 높은 온도이므로 CD에 포접된 약용물질 분자는 초분자 상호 작용에 의해 열적 안정성이 향상된다는 것을 유추할 수 있다.

<시험예 1> 약용성분 사이클로덱스트린 초분자 복합제 안정화 조건

사이클로덱스트린과 약용성분이 안정하게 존재할 수 있게 되는 물질의 비율에 대한 최적 조건을 알아보고자, 각 약용성분에 사이클로덱스트린 수용액을 증가시키며 반응을 시키고 ¹H NMR 스펙트럼을 측정하였다.

약용물질의 수용액에 대한 비수용성을 고려하여 1% CD₃OD를 포함하는 D₂O 수 용액에 각 약용물질을 녹여 농도를 10^-3 M로 제조한 용액을 사용하였다. 이 약용물질 D₂O/1% CD₃OD 수용액을 용매로 하여 β-CD와 γ-CD를 각각 10^-2 M로 녹인 용액을 제조하여, 각 사이클로덱스트린 수용액을 0.2 당량씩 각 약용물질 용액에 첨가량을 증가시키며 4당량까지 넣어주었다. 각 시료에 대한 ¹H NMR 스펙트럼을 얻어 각 약용물질의 특정 공명신호의 화학적 이동값의 변화를 통해 수용액 중에서 약용물질을 안정하게 초분자 복합체 형태로 존재할 수 있게 하는 사이클로덱스트린의 상대적 양을 측정하였다.

도 4는 대표적 예시로 풀레곤에 β-CD와 γ-CD의 양을 증가시키며 풀레곤의 디메틸 작용기의 공명 신호의 변화를 나타내는 그래프이다. 일반적으로 비수용성 유기 화합물이 수용액 중에 존재하는 사이클로덱스트린에 포접되게 되면 소수성 환경 요인의 증가로 인하여 그 공명신호가 높은 자기장 영역 쪽으로 이동하게 된다. 풀레곤 역시 그 공명 신호가 β-CD의 첨가량이 증가함에 따라 서서히 높은 자기장 영역으로 이동하였고, 그 이동값은 약 1.2 당량 이상에서 정점을 이루고, 그 이후의 증가량에 대해서는 단지 소폭의 미미한 변화만을 보였다. 이 같은 사실은 풀레곤을 수용액 중에 안정하게 포집하기 위해서는 1.2 당량 이상의 β-CD가 25℃에서 요구된다고 볼 수 있다. 반면에 γ-CD를 사용했을 때는 거의 2 당량 이상에서부터 공명신호의 이동 변화가 미미한 것으로 관찰되므로 γ-CD의 경우는 2 당량 이상이 요구된다고 추정된다.

<시험예 2> 초음파 조사에 의한 반응시간 단축

반응 시간을 단축시키기 위하여 초음파 조사에 대한 반응시간의 단축 영향을 조사하였다. 초음파를 조사하는 반응 용기의 특성상 교반을 할 수가 없어 교반 없이 초음파 조사만으로 반응을 진행시켰고, 10분 간격으로 조사 시간을 설정하였다. 각 조사 시간에 따른 초분자 복합체의 형성은 ¹H NMR을 통해 측정을 하였으며, 복합체를 형성하지 않은 약용물질 분량은 ¹H NMR 측정 전에 유기용매 CCl₄로 추출하여 제거하였다.

도 5는 약용성분 풀레곤(pulegone)에 대한 초음파 조사 시간에 따른 β-CD, γ-CD와의 초분자 복합체 형성 변화를 나타낸 것이다.

이 결과에서 알 수 있듯이 β-CD 수용액의 경우 약 1 시간의 초음파 조사 시간 이후부터는 대부분의 풀레곤이 β-CD와 초분자 복합체를 형성하게 됨을 관찰 할 수 있었다. 반면에 γ-CD 수용액의 2시간의 초음파 조사 시간에 약 0.8 당량의 풀레곤이 초분자 복합체를 형성함을 알 수 있었다. 이것은 앞에서 언급한 바와 같이 β-CD가 γ-CD에 비해 보다 효율적으로 안정하게 초분자 복합체를 형성하는 것이고, 그 원인은 공동의 크기가 잘 맞는다는 점에서 비롯된다고 할 수 있다.

다른 약용물질에 대한 실험 결과도 풀레곤의 경우와 유사한 경향성을 보이고 있다는 것을 확인하였다. 이같이 초분자 복합체의 형성 정도가 초음파 조사 시간에 영향을 받는 이유는 약용물질이 물과 섞이지 않는 오일 형태의 물질이라 초음파 조사를 하게 되면 미세한 기름방울 형태로 분산이 이루어져 사이클로덱스트린과의 복합체 형성이 보다 효율적으로 이루어 질수 있도록 유도하기 때문이라고 여겨진다.

실시예 3, 비교예 1, 비교예 2 : 크림의 제조

하기의 표 1에 나타낸 바와 같은 조성성분 및 조성비를 갖는 크림을 제조하였다. 본 발명 약용성분을 초분자 복합체를 형성하지 않고 크림 기재에 그대로 첨가하는 것을 비교예 1로 하였으며, 본 발명 약용성분을 함유하지 않는 것을 비교예 2로 하였다.

중량%
성분	실시예 3	비교예 1	비교예 2
세테아레트-25	2.0	2.0	2.0
글리세릴 스테아레이트	3.0	3.0	3.0
세테아릴 알콜	2.0	2.0	2.0
디메치콘	0.5	0.5	0.5
세테아릴 옥타노에이트	8.0	8.0	8.0
글리세린	3.0	3.0	3.0
본 발명 약용성분 초분자 복합체	^*11.5	-	-
약용성분	-	^*21.5	-
향료	0.3	0.3	0.3
정제수	잔량
합계	100.0

*1 : 말톨 초분자체: 아데노신 초분자체: β-피넨 초분자체: 멘톤 초분자체: 풀레곤 초분자체: 리모넨 초분자체: 아네톨 초분자체: 에스트라골 초분자체: 펜촌 초분자체= 1: 1: 1: 1: 1: 1: 1: 1: 1(중량비)

*2 : 말톨: 아데노신: β-피넨: 멘톤: 풀레곤: 리모넨: 아네톨: 에스트라골: 펜촌= 1: 1: 1: 1: 1: 1: 1: 1: 1(중량비)

실시예 4, 비교예 3, 비교예 4 : 샴푸의 제조

하기의 표 2에 나타낸 바와 같은 조성성분 및 조성비를 갖는 샴푸를 제조하였다. 본 발명 약용성분을 초분자 복합체를 형성하지 않고 샴푸기재에 그대로 첨가하는 것을 비교예 3으로 하였으며, 본 발명 약용성분을 함유하지 않는 것을 비교예 4로 하였다.

중량%
성분	실시예 4	비교예 3	비교예 4
암모늄 라우레스 설페이트	12.0	12.0	12.0
암모늄 라우릴 설페이트	4.0	4.0	4.0
코카미도프로필 베타인	7.0	7.0	7.0
알킬폴리글리코사이드	1.5	1.5	1.5
폴리쿼터늄 10	0.5	0.5	0.5
글리세린	1.5	1.5	1.5
본 발명 약용성분 초분자 복합체	^*125.0	-	-
약용성분	-	^*225.0	-
향료	0.2	0.2	0.2
정제수	잔량
합계	100.0

*1, *2 : 전술한 바와 동일

실시예 5, 비교예 5, 비교예 6 : 헤어 토닉의 제조

하기의 표 3에 나타낸 바와 같은 조성성분 및 조성비를 갖는 헤어토닉을 제조하였다. 본 발명 약용성분을 초분자 복합체를 형성하지 않고 헤어토닉기재에 그대로 첨가하는 것을 비교예 5로 하였으며, 본 발명 약용성분을 함유하지 않는 것을 비교예 6으로 하였다.

중량%
성분	실시예 5	비교예 5	비교예 6
라우린산 소르비탄	0.5	0.5	0.5
글리세린	1.0	1.0	1.0
부틸렌 글리콜	2.0	2.0	2.0
디메치콘 코폴리올	0.2	0.2	0.2
케스터 오일	0.2	0.2	0.2
알콜	20.0	20.0	20.0
살리실산	0.1	0.1	0.1
본 발명 약용성분 초분자 복합체	^*115.0	-	-
약용성분		^*215.0	-
향료	0.2	0.2	0.2
정제수	잔량
합계	100.0

*1, *2 : 전술한 바와 동일

<시험예 3> 피부생리활성 테스트

재료 및 방법

실험에 사용한 버퍼(buffer)와 solution은 다음과 같은 조성으로 혼합하였다.

1. Chlormine-T-reagent (Aldrich, USA) 증류수 100ml에 녹인다.

2. Aldehyde-perchloric acid reagent 15g p-dimethyl-amino-benzaldehyde (Aldrich, USA), 60ml n-propanol (Ducksan, Korea)와 26ml perchloric acid (Sigma, Germany)에 증류수 100ml에 녹인다.

3. 133g citric acid (Sigma-Aldrich, USA), 32ml glacial acetic acid (Junsei, Japan), 320g sodium acetate (Shinyo, Japan), 91g sodium hydroxide (Samchun, Korea)와 800ml n-propanol에 부피가 3000ml이 되도록 증류수를 넣어준다. 그리고 0.2 M NaOH (Ducksan, Korea)를 이용하여 pH를 6.0-6.5가 되도록 보정한다. 증류수를 이용하여 최종 부피가 4L가 되도록 하고 2ml의 톨루엔(Ducksan, Korea)을 첨가한다.

정량곡선을 만들기 위해 하이드록시프롤린(hydroxyproline, Fluka, France) 각각 1, 2, 4, 6, 9 μg/ml이 되도록 희석하여 준비한다. 마우스 표피샘플과 스탠다드 하이드록시프롤린(hydroxyproline)은 UV-visible spectroscopy (Agilent, USA)를 이용하여 540㎚ 영역에서 분석하였다. 실험에 사용된 마우스는 C57BL/6종 5주령 웅성으로, 오리엔트 바이오사로부터 분양받았다. 난괴법에 의해 4군으로 나누어 군당 4마리씩 4주간 경피 도포하여 실험하였다. 동물 사육실은 온도 22 ± 2℃, 상대습도 50 ± 5%, 조명주기 12시간씩 밤낮을 유지하였고, 실험 전 기간 동안 사료와 물을 충분히 공급하였다.

실험시작 전 1주일 동안의 적응기를 거친 후 4주 동안 본 발명 약용 성분 초분자복합체 1.5% 함유된 크림(실시예 3)과 약용 성분이 1.5% 함유된 크림(비교예 1), 약용성분이 첨가되지 않은 크림(비교예 2)을 사용함으로서 하이드록시프롤린(hydroxyproline)함량의 변화 추이를 비교 분석하였다.

테스트에 사용된 크림은 마우스의 털을 제거한 후 가로세로 5㎝ 면적에 1회/1일 100μg/ml를 골고루 도포하였다. 매 1주일마다 마우스의 진피를 채취하여 실험에 사용하였다.

결과

1, 2, 3, 4주가 지난 마우스 등 부위의 진피를 가위로 절개하여, 정확하게 10mg을 정량하고, 6N HCl을 이용하여 120℃ 3시간 동안 hydrolysis하였다. 그리고 Chloramine-T시약과 Aldehyde-perchloric acid 시약을 이용하여 수화된 단일 하이드록시프롤린(hydroxyproline)과 반응시켰다. 반응 후, UV-spectroscopy로 540nm 흡수파장영역에서 측정하였다. 샘플 발색 후 희석 배율은 50배로 하여 정량하였다.

실시예 3과 비교예 1, 2의 크림 샘플에서 얻어진 마우스 진피 내 하이드록시프롤린(hydroxyproline)량을 하기의 표 4로 나타내었다.

4주 동안 연속 도포 후 in vivo 진피의 hydroxyproline량 대조에 대한 비율
기간	실시예 3	비교예 1	비교예 2
1주	1.35	1.12	1.0
2주	1.67	1.25	1.0
3주	1.83	1.2	1.0
4주	2.04	1.37	1.0
평균	1.72	1.23	1.0

표 4에서 확인할 수 있는 바와 같이 약용성분 초분자 복합체를 함유하는 실시예 3의 크림에서 하이드록시프롤린(hydroxyproline)량이 비교예들에 비해서 증가되는 것을 알 수 있다. 더욱이 초분자 복합체가 함유된 크림에서는 4주차에 비교예 2에 비해 약 2배정도 증가된 값을 나타내었다. 초분자체로 형성된 약용성분이 진피에서 존재하면서, 지속적인 영향을 준 것으로 판단되었다. 이는 초분자체로 형성된 약용성분들이 지속적인 피부 생리활성에 긍정적으로 작용할 수 있음을 의미한다.

<시험예 4> 항균성 테스트

상기 실시예 4, 비교예 3, 4의 샴푸를 시료로 하여 그람 양성균 3종, 그람 음성균 3종, 효모 1종 등을 모두 7종의 미생물을 이용하여 항균성을 검증하였다

Plate에 균주 접종 후 균주가 배지에 완전히 스며든 다음, 2배 희석한 시료와 양성대조군으로 항생제인 gentamycin 25 mL을 멸균된 디스크에 떨어뜨린 후 용매를 완전히 휘발시키고, 디스크를 배지에 올려놓았다. 이것을 인큐베이터에서 37℃, 24시간 배양한 후 나타난 clear zone의 크기를 측정하여 항균 활성 정도를 확인하였다.

그 결과를 하기의 표 5에 나타내었다.

구 분	균주
	Gram(+)			Gram(-)			Yeast
	Listeria monocytogenes	Staphylococcus aureus	Streptococcus mutans	Acinetobacter baumannii	Escherchia coli O157:H7	Vivrio parahaemolyticcus	Malassezia furfur
비교예4	15±2.3^a)	17±0.6	13±1.9	N.E	N.E	N.E	21±0.8
비교예3	16±2.5	18±1.7	15±3.2	N.E	N.E	N.E	19±2.0
실시예4	16±2.8	18±0.6	16±4.0	N.E	N.E	N.E	19±1.3
gentamycin	15±0.7	19±0.3	15±0.4	16±0.3	14±0.5	13±0.8	N.E

* ^a) Inhibition zone in diameter (㎜)

* Disc diameter 8 ㎜

* N.E : No effect

* Gentamycin : 25 mg/disc

표 5에서 확인되는 바와 같이 실시예 4와 비교예 3에서 그람 음성의 균에서의 항균효과는 미미하였지만, 그람 양성균과 효모에서는 항균 활성을 확인할 수 있었다.

<시험예 5 > 육모성장 테스트

상기 실시예 5와 비교예 5, 6의 헤어토닉을 시료로 하여 육모성장 테스트를 하였다.

5주령 웅성 C57BL/6 마우스를 오리엔트 바이오사로부터 분양 받아 사육실에서 1주일 적응 시킨 후 제모한 배부 쪽 피부색이 pink color인 휴지기 체모의 5주령을 난괴법에 의해 4군으로 나누어 군 당 5마리씩 4주간 경피 도포하여 실험하였다. 동물 사육실은 온도 22 ±2 ℃, 상대습도 50 ± 5%, 조명주기 12시간씩 밤낮을 유지하였고, 실험 전 기간 동안 사료와 물은 자유로이 공급하였다.

발모의 효과를 보기 위해 제모용 칼을 사용하여 실험시작 1일전에 마우스의 배부 털을 제거하였고 시료는 1일 1회 100ul씩 마이크로피펫을 이용하여 21일간 경피 도포하였다. 실험 시작 후 털이 자란 상태를 육안적으로 관찰하기 위해 실험기간 동안 5회 (0, 9, 12, 16, 21일)에 걸쳐 에테르로 가볍게 마취한 후 디지털카메라로 사진 촬영하였다. 그 결과는 도 6에 나타내었다.

도 6에서 확인되는 바와 같이 실험 9일에는 모발 성장이 관찰되지 않았으나 실험 12일째부터 비교예 5와 실시예 5에서 털이 조금씩 자라는 것이 관찰되었다. 실험 16일째에는 비교예 6에서도 털이 자라는 것을 관찰할 수 있었고, 비교예 6에 비해 실시예 5와 비교예 5에서 뚜렷한 모발 성장효과가 나타났다. 21일째에는 실시예 5에서 제모 전과 동일한 모습을 보일 정도의 모발 성장효과를 관찰할 수 있었다. 이는 모발성장 촉진 효과가 오래 지속됨을 의미한다.

도 1은 본 발명 약용성분 초분자 복합체들 중 비수용성 약용성분들의 초분자복합체 ¹H NMR 스펙트럼을 나타낸다.

도 2는 본 발명의 비수용성 약용성분과 β-사이클로덱스트린 초분자 복합체의 IR스펙트럼을 나타낸다.

도 3은 본 발명 비수용성 약용성분과 γ-CD 초분자 복합체의 TGA 다이아그램을 나타낸다.

도 4는 사이클로덱스트린 첨가량 증가에 따른 풀레곤(pulegone) 공명신호의 화학적 이동값의 변화를 나타내는 그래프이다.

도 5는 초음파 조사 시간에 따른 풀레곤과 사이클로덱스트린과의 초분자 복합체 형성 정도를 나타내는 그래프이다.

도 6은 본 발명 초분자체 함유 화장료조성물의 모발 성장촉진 효과를 나타내는 사진도이다.

Claims

홍삼, 인진호, 형개, 회향, 측백엽 추출물부터 분리 정제한 약용성분으로서의 말톨(maltol), 아데노신(adenosine), β-피넨(β-pinene), 멘톤(menthone), 풀레곤(pulegone), 리모넨(limonene), 아네톨(anethole), 에스트라골(estragole) 및 펜촌(fenchone)을 사이클로덱스트린에 담지시켜 제조한 초분자 복합체를 유효성분으로 함유하는 초분자체 함유 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 말톨(maltol), 아데노신(adenosine), β-피넨(β-pinene), 멘톤(menthone), 풀레곤(pulegone), 리모넨(limonene), 아네톨(anethole), 에스트라골(estragole) 및 펜촌(fenchone)과 사이클로덱스트린과의 초분자 복합체는 중량비로 각각 1: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20: 0.1∼20의 범위로 함유되어있는 것을 특징으로 하는 초분자체 함유 화장료 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 사이클로덱스트린은 β-사이클로덱스트린 및/또는 γ-사이클로덱스트린인 것을 특징으로 하는 초분자체 함유 화장료 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 유효성분으로서의 초분자 복합체는 그 합계량이 화장료 조성물 전 중량에 대하여 0.01∼20 중량%인 것을 특징으로 하는 초 분자체 함유 화장료 조성물.
홍삼, 인진호, 형개, 회향, 측백엽의 추출물로부터 약용 성분으로서의 말톨(maltol), 아데노신(adenosine), β-피넨(β-pinene), 멘톤(menthone), 풀레곤(pulegone), 리모넨(limonene), 아네톨(anethole), 에스트라골(estragole) 및 펜촌(fenchone)을 분리정제하는 단계; 0.01∼0.1M의 β-사이클로덱스트린 및/또는 γ-사이클로덱스트린 수용액에 상기 약용 성분을 첨가함에 있어서, 상기 β-사이클로덱스트린이 상기 각 약용성분에 대하여 1.0~2.0 당량이 되고, 상기 γ-사이클로덱스트린이 상기 각 약용성분에 대하여 2.0~3.0 당량이 되도록 첨가하여 상온에서 0.5∼2시간 교반하고 감압 농축시켜 상기 약용 성분들의 초분자 복합체를 형성하는 단계; 및 상기 형성된 초분자 복합체의 합계량이 화장료 조성물 전 중량에 대하여 0.01∼20 중량%의 범위가 되도록 제형화하는 단계를 포함하는 초분자체 함유 화장료 조성물의 제조방법.
제5항에 있어서, 상기 초분자 복합체 형성단계에서 교반과 함께 초음파조사를 병행하는 것을 특징으로 하는 초분자체 함유 화장료 조성물의 제조방법.