KR101000153B1

KR101000153B1 - 백강잠 추출물을 함유하는 백강잠 발효 추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 화장료 조성물

Info

Publication number: KR101000153B1
Application number: KR1020100051203A
Authority: KR
Inventors: 김관철; 김극태; 박종성
Original assignee: 이노스킨 주식회사
Priority date: 2010-05-31
Filing date: 2010-05-31
Publication date: 2010-12-10

Abstract

본 발명은 백강잠 발효 추출물을 함유하는 백강잠 발효 추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로 백강잠 발효 추출물에 의한 피부지질의 증가, 특히 콜레스테롤의 증가를 통해 피부장벽을 강화함으로써 건조 피부, 노화 피부의 기능을 정상화시켜 가려움, 악건성, 인설 등을 방지하는 유효한 화장료 조성물을 제공한다.

Description

백강잠 추출물을 함유하는 백강잠 발효 추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 화장료 조성물{Process for fermented bombyx mori extract on containing bombyx mori extract and Cosmetic composition on containing bombyx mori extract}

본 발명은 백강잠 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 백강잠 발효 추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 백강잠 발효 추출물에 의한 피부 지질의 증가, 특히 콜레스테롤의 증가를 통해 피부장벽을 강화함으로써 건조 피부, 노화 피부의 기능을 정상화시켜 가려움, 악건성, 인설(鱗屑) 등을 방지하는 백강잠 발효 추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

백강잠(白蠶)은 누에나방과 곤충 누에 유충 Bombyx mori(Batrytis bassiana)이 백강균에 감염되어 죽은 것을 말린 전충으로서, 풍사(風邪)를 몰아내고 경련을 진정시키며 울결(鬱結)을 푸는 데 효능이 있는 약재로 알려져 있으며, 백간잠(白乾蠶)이라고도 한다. 한방에서는 이를 다양한 증세에 사용하는데, 특히 풍증 따위를 다스리는 데에 좋은 효과를 나타내며, 중시풍담와 인사불성, 구안와사, 반신불수 등에는 백강잠 7개를 빻아서 생강탕으로 복용하면 좋고, 어린이의 경풍이나 근육이 당기고 사지가 차가운 데에는 전충과 천웅첨, 포부자탄을 함께 섞어 약간 볶은 뒤 가루로 만들어 생강탕으로 매일 2~3회 정도 복용하면 좋은 효과를 나타낸다고 알려져 있다.또한 백강잠은 풍을 가라앉히거나 경기를 없애는 작용을 하는데, 간질병이 발작하는 증상에는 전갈과 천마, 담남성 등을 같이 쓰고, 중풍으로 입이 돌아갔거나 안면근육이 수축되었을 때에는 전갈, 백부자 등을 함께 쓰며, 풍열과 간의 열로 두통이 날 때, 눈이 붉어지고 목이 붓거나 아플 때도 쓴다. 두통과 눈물이 자주 날 때에는 형개와 상엽, 목적 등을 함께 쓰며, 목이 아플 때에는 길경과 방풍·감초등을 같이 사용하고, 가려움증을 제거하는 작용이 있어 풍진(風疹), 소양증(瘙痒症)에는 선퇴, 박하 등을 같이 쓰며, 이밖에도 수면 촉진작용과 항경련 작용을 갖고 있는 것으로 알려져 있다.

백강잠과 관련된 선행 특허로는 백강잠 추출물을 유효성분으로 포함하는 식용 억제 및 체중 증가 억제용 의약 조성물 및 식품(한국등록특허 10-0583030), 백강잠 추출 혼합물을 함유한 피부 노화 방지용 화장료 조성물(한국공개특허 10-2010-0010316)이 있다.

또한 천연추출물을 사용하여 피부 장벽기능 강화 및 개선과 관련된 종래기술로는, 천연추출물인 난초 발효추출물을 이용한 한국공개특허 10-2009-0083082, 녹차로부터 분리한 캄페롤 배당체를 이용한 한국등록특허 10-0727743이 있다. 한국등록특허 10-0596595(국제공개번호 WO 2001/74327)는 최소 1종의 프로테아제 억제제와 최소 1종의 세포분화 강화제를 이용하여 피부지질 장벽을 증강하는 기술이며, 스토론튬 양이온 (Sr² ⁺)을 유효성분을 포함하는 피부장벽 기능개선용 피부외용제에 관한 기술(한국공개특허 10-2007-000599)이 있다. 그러나 특허 10-583030에서는 70% 에탄올을 사용한 추출물로서 경구투여 의약품 또는 식품에 관한 것이며 피부용과는 거리가 있다. 또한 10-2009-0083082에서는 멜라닌 합성저해에 의한 미백 효과, 콜라겐 합성 증가에 의한 노화방지 및 주름방지에 효과가 있다고 하나 피부 장벽기능과는 직접적인 관련이 적고, 10-2010-0010316에서는 백강잠 등 7가지의 생약 추출혼합물을 유효성분으로 하여 피부 미백효과를 갖는 것이다.

그런대, 노인성 피부질환은 대부분 모든 노인에게 나타나는 증상으로서 병리학적 원인은 면역저하 및 피부장벽의 트러블로 알려져 있으며, 피부 트러블의 원인은 피부 콜레스테롤의 함량 저하가 일어나면서 피부 장벽기능이 저하되어 피부 건조에 따른 문제가 발생하는 것이다.

노인성 피부 질환의 예는 첫째 접촉피부염, 둘째는 피부 건조증 및 인설(鱗屑), 소양증(搔痒症) 등이며, 셋째는 피부습진의 증가이다. 기존에는 이들 질환의 치료에 아토피 피부용 제품이 활용되거나 보습제가 다량 함유된 제품을 사용하였으나, 노화에 따른 근본적이고 효율적인 증상의 개선은 어려운 실정이었으며, 소염제 등의 도포 또는 경구투여 등은 효과가 단기적이고 지속적인 치료시에는 부작용 발생 등 단점이 많았다.

따라서 피부에 부작용이 적으면서도 지속적으로 사용이 가능하고 피부 악화의 원인에 충실한 피부 외용제 및 그에 필요한 화장료 조성물의 개발이 필요하다.

본 발명은 상기의 문제점을 해소하기 위하여 안출된 것으로서 백강잠 발효추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 화장료 조성물을 제공하기 위하여 콜레스테롤을 효과적으로 투여하면서 피부 콜레스테롤 합성을 촉진시키는 천연성분을 선발하고 이를 통하여 피부내 생리적으로 분비를 촉진시켜 피부장벽을 개선하는 것이다. 본 시험에 서는 이 추출물을 사용한 제품을 다양하게 개발하고 임상적으로 효능을 시험하여 본 발명을 완성하였다.

본 발명은 다양한 천연물로부터 콜레스테롤 증가에 효과를 갖는 천연물의 개발을 위하여 콜레스테롤의 생합성 rate-limiting step 평가법을 이용하여 효능을 측정하였으며, 추출물 내 유효성분을 높이고 효과적 피부전달을 위하여 이중 발효를 하여 추출물을 제조하였고, 이를 함유한 피부외용제에 대하여 피부자극 시험 및 임상시험을 통하여 본 과제를 해결하였다.

따라서 본 발명의 목적은 백강잠 발효 추출물에 의한 피부 지질의 증가, 특히 콜레스테롤의 증가를 통해 피부장벽을 강화함으로써 건조 피부, 노화 피부의 기능을 정상화시켜 가려움, 악건성, 인설(鱗屑) 등을 방지하는 백강잠 발효 추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 하나의 구현예는 백강잠을 열수로 추출하여 열수 추출물을 만드는 단계; 상기 열수 추출물에 발효 미생물을 접종하고 발효시킨 후 이를 여과하여 고형분을 제거하는 단계로 이루어지는 것을 특징으로 하는 백강잠 발효 추출물의 제조방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 구현에는 또한 상기 조성물을 이용하여 제조된 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

기타 본 발명의 구현예들의 구체적인 사항은 이하의 상세한 설명에 포함되어 있다.

본 발명의 피부외용제는 노화시 나타나는 피부질환에 유효한 치료효과를 나타내기 때문에 피부에 맞는 적절한 제형의 피부외용제 개발을 통하여 현대인들의 피부고민을 해결하고 관련 산업의 기술 발전 및 부가가치를 창출할 수 있다.

먼저 백강잠을 구입하여 20L 추출기에 0.5kg을 분쇄하여 넣은 후 정제수를 1:10의 비율로 넣고 80℃에서 18~24시간 추출하여 열수 추출물을 만든다. 이후 저온숙성 발효를 진행하기 위하여 500ml 플라스크에 열수 추출물 200ml을 넣고 종균(S. cerevisiae + L. plantarum)을 접종한 후에, 28℃에서 3일간 Shaking Incubator를 이용하여 발효를 진행한다. 3일 후에 꺼내어 Miracloth(Calbiochem사)를 이용하여 고형물을 제거한 후에, 0.2um 멤브레인 필터를 이용하여 균체를 제거하고 나온 여과액을 회수하여 발효추출물을 얻었다.

다른 실시예로서 원료를 상기와 동일 중량으로 혼합한 후에 1:10의 액비로(즉, 원료혼합물 500g에 물 5L 첨가) 정제수를 첨가하여 80℃에서 18~24시간 교반하면서 열수 추출한 후 효모(Saccharomyces cerevisiae)를 10의 5승~10의 7승의 농도로 접종한 후 28℃에서 72시간 배양하였다. 이후 80g을 원심분리하여 고형분을 제거한 후 0.2um 멤브레인 필터를 이용하여 균체를 제거하고 나온 여과액을 회수하여 발효 추출물로 하였다.

본 발명에서 백강잠 발효 추출물은 화장료 전체 중량의 0.01~50중량% 함유하고 있다. 또한 본 발명에서 백강잠 발효추출물의 유효성분을 높이기 위하여 효모 및 유산균으로 복발효하여 효능성분이 증량되거나 생성되도록 한다.

백강잠 발효 추출물의 함유량이 0.01중량% 이하에서는 기대하는 효과를 얻을 수 없으며, 50중량%를 초과하면 효과에서는 문제가 없으나 피부안전성 및 화장료로서 갈색이 진해지면서 외관에 문제가 있을 수 있다

본 발명에서는 1) 백강잠을 열수로 추출하여 열수 추출물을 만드는 단계, 2) 상기 열수 추출물에 효모균(Saccharomyces cerevisiae)과 유산균(Lactobacillus. plantarum)을 접종하고 발효시킨 후 이를 여과하여 고형분을 제거하여 발효 추출물을 제조한 다음, 이 발효 추출물을 총콜레스테롤 합성측정법(HMG-CoA reductase 법)에 의해 콜레스테롤의 합성 효과를 확인한 후 피부 장벽 강화 효과를 확인하였다.

이하에서 본 발명의 이해를 돕기 위한 바람직한 실시예 및 비교예를 제시하나, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정하는 것은 아니다.

[실시예 1] 백강잠 효모 및 유산균의 복합 발효 추출물의 제조

백강잠을 구입하여 20L 추출기에 0.5kg을 분쇄하여 넣은 후 정제수를 1:10의 비율인 5L를 넣고 80℃에서 24시간 추출하여 열수 추출물을 만든다.

이후 저온숙성 발효를 진행하기 위하여 500ml 플라스크에 추출액 200ml을 넣고 종균(S. cerevisiae + L. plantarum)을 접종한 후에, 28℃에서 3일간 Shaking Incubator를 이용하여 발효를 진행하였다. 그 후 3일이 지나 꺼내어 Miracloth(Calbiochem사)를 이용하여 고형물을 제거한 후에 0.2um 멤브레인 필터를 이용하여 균체를 제거하고 나온 여과액을 회수하여 발효추출물로 한다.

[실시예 2] 백강잠 효모 발효 추출물의 제조

원료를 동일 중량으로 혼합한 후에 1:10의 액비로(즉, 원료혼합물 500g에 물 5L 첨가) 정제수를 첨가하여 80℃에서 24시간 교반하면서 열수 추출한 다음 효모(Saccharomyces cerevisiae)를 10의 6승의 농도로 접종한 후 28℃에서 72시간 배양하였다. 이후 80g을 원심분리하여 고형분을 제거한 다음 0.2um 멤브레인 필터를 이용하여 균체를 제거하고 나온 여과액을 회수하여 발효 추출물로 한다.

[비교예 1]

원료를 동일 중량으로 혼합한 후에 1:10의 액비로(즉, 원료혼합물 500g에 물 5L 첨가) 정제수를 첨가하여 80℃에서 24시간 교반하면서 열수 추출하여 백강잠 추출물로 한다.

[비교예 2]

원료를 동일 중량으로 혼합한 후에 1:10의 액비로(즉, 원료혼합물 500g에 물 5L 첨가) 정제수를 첨가하여 80℃에서 24시간 교반하면서 열수 추출한 다음 락토바실러스아시도필루스(Lactobacillus acidophilus) 10⁶의 농도로 접종한 후 28℃에서 72시간 배양하였다. 이후 80g을 원심분리하여 고형분을 제거한 다음 0.2um 멤브레인 필터를 이용하여 균체를 제거하고 나온 여과액을 회수 하여 발효추출물로 한다.

[실험예 1] 백강잠 추출 발효물의 콜레스테롤 증량 효과

실험방법은 콜레스테롤 정량(Cholesterol/Cholesteryl Ester 정량 키트 이용)으로 하였고, 비색형 실험방법으로 콜레스테롤 반응 버퍼 180㎕에 cholesterol standard를 20㎕를 더하여 0.5ug/㎕가 되도록 만들어서 잘 섞어준 후, 각 well당 0, 4, 8, 12, 16, 20㎕씩 넣어 0, 2, 4, 6, 8, 10 ug/well의 농도로 기준을 잡는다. 먼저 106개의 세포에 200의㎕ 클로로폼-메탄올을 2:1의 비율로 섞은 용액을 처리한 후 10분간 원심분리하고 진공건조시켜 말린 후 20㎕의 2-프로판올에 잘 녹여 각각의 분석마다 1㎕씩 사용한다. 콜레스테롤 반응 버퍼와 cholesterol probe, 효소, cholesterol esterase를 섞은 반응액을 각각 50씩 처리한 후 37에서 60분 동안 빛을 차단시키고 반응시킨 후 570nm에서 그 흡광도를 재어 앞서 만든 기준법에 대입하여 그 값을 계산하였다.

광파장(o.d. 570 nm)

	1 시간	2시간	3시간
실시예 1	0.1	0.17	0.2
실시예 2	0.07	0.1	0.14
비교예 1	0.05	0.08	0.06
비교예 2	0.06	0.09	0.07

[표 1]로부터 실시예 1, 2는 비교예 1, 2에 비하여 콜레스테롤의 합성량이 증가함을 알 수 있으므로 이로부터 콜레스테롤의 합성 능력이 있는 것으로 판정할 수 있다

[실험예 2] 피부 장벽 회복 효능 테스트

50대 12명, 60대 15명, 70대 10명 총 37명을 대상으로 수분 증발량을 동일 습도상에서 TEWL 측정장치로(Tewameter)(Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany) 측정하여 2주일 간의 피부 장벽기능 회복효과를 [표 2]에 나타내었다.

피부 회복정도

시 료	회복정도
실시예1, 백강잠 효모, 유산균 추출물(0.5%)	18%
실시예1, 백강잠 효모, 유산균 추출물(5.0%)	25%
실시예1, 백강잠 효모, 유산균 추출물(25%)	30%
실시예2, 백강잠 효모추출물(0.5%)	15%
실시예2, 백강잠 효모추출물(5.0%)	18%
실시예2, 백강잠 효모추출물(30%)	25%
비교예1, 백강잠 추출물(5%)	2%
비교예2, 백강잠 유산균(Lactobacillus acidophilus)	5%

상기 도표에서 보듯이 백강잠 효모 추출물과 효모, 유산균 추출물은 유효 분의 함량이 늘어남에 따라 피부장벽 회복효과가 매우 좋아짐을 확인할 수 있었다. 특히 0.5%에서도 의미한 효과가 있음을 알 수 있다.

[실험예 3] 본 발명의 피부외용제 조성물에 사용되는 발효추출물의 인체에 대한 안전성을 알아보기 위하여 하기와 같이 인체 첩포시험(closed patchtest)을 통하여 자극시험을 하였다. 피험자는 성인 30명을 선택하였고 시험 부위는 상박(fore arm)이다.

각 농도별 시료를 만든 후 핀챔버(Fin chamber)에 시료를 15을 적하시킨 후 이를 시험 부위인 상박에 얹고 실험용 테이프로 고정시킨다. 24시간 후에 테이프를 제거한 다음 시험부위표시를 4시간 후에 피부반응을 판정하였는데, 그 기준은 다음[표 3]과 같으며, 그 결과는 [표 4]과 같다.

판정기준

-	특이 현상 없음
±	미세 홍반
+	홍반
++	홍반 이상, 뾰루지 등

또한 결과는 하기식에 따라 계산한다.

자극도={(-x인원)+(_±x 인원)+(+x인원)+(++x인원)}/피험자수

피부반응 판정

시료	-	±	++	자극도
콘트롤(증류수)	27	2	1	-	0.1
백강잠추출물 5%	-	3	-	2	0.3
백강잠효모추출물 0.5%	30	-	-	-	0
백강잠효모추출물 5%	28	1	-	1	0.1
백강잠효모추출물 50%	21	5	2	2	0.4
백강잠효모,유산균추출물 0.5%	29	1	-	-	0
백강잠효모,유산균추출물 5%	27	2	1	-	0.13
백강잠효모,유산균추출물 50%	25	3	1	1	0.3
백강잠L.acidophilus추출물 5%	24	2	3	1	0.4

[표 4]를 보면 경자극에 해당하나 컨트롤보다 높아지고 함량이 많아질수록 자극도가 높아짐을 알 수 있다. 일정함량에서는 피부반응이 거의 없음을 알 수 있다. 따라서 피부외용제 원료로서 적합함을 알 수 있다.

본 발명에 따르면, 상기의 방법에 의하여 얻은 백강잠 발효 추출물을 함유한 화장료 조성물이 제공되며, 그 조성물이 유액, 크림, 에센스, 미용액, 바디로션, 바디젤, 바디에센스, 바디세정제, 클렌징폼, 팩, 클렌징크림으로부터 선택된 하나 이상의 제형에도 용이하게 적용할 수 있다.

[제조 실시예]

<제조 실시예 1> 유연화장수 제조

백강잠 발효 추출물에 여러 종류의 첨가제를 적절히 혼합시켜 유연화장수를 제조하였는데, 그 첨가제 및 조성비는 [표 5]와 같다.

첨가제의 종류 및 조성비

성 분	함량(%)
1,3-부틸렌글리콜(보습제)	4.0
세토스테아릴알콜(에몰리엔트제)	0.1
폴리옥시에틸렌 라우릴에테르(계면활성제)	0.5
모노스테아릴산 폴리옥시에틸렌 소르비탄( " )	1.5
글리세린(보습제)	5.0
글리세릴 모노스테아레이트(에몰리엔트제)	1.5
보존제	0.15
해바라기오일(에몰리엔트제)	8.0
향료(방향제)	0.1
백강잠 발효추출물(장벽 기능강화제)	0.5
콜레스테롤(피부보호제)	0.5
세라마이드( " )	0.2
스테아린산(피부컨디셔닝제)	0.8
KOH(중화제)	0.2
카보머(점증제)	0.1
정제수(피부컨디셔닝제)	잔부

<제조 실시예 2> 크림 제조

백강잠 발효 추출물에 여러 종류의 첨가제를 적절히 혼합시켜 크림을 제조하였는데, 그 첨가제 및 조성비는 [표 6]와 같다.

첨가제의 종류 및 조성비

성 분	함량(%)
스쿠알란(에몰리엔트제)	5.0
바셀린( " )	2.0
자기유화형 모노스테아린산 글리세린(보조 계면활성제)	2.5
글리세린(보습제)	8.0
향료	0.1
보존제	0.15
유동파라핀(에몰리엔트제)	3.0
비즈왁스( " )	1.0
마이크로스텔린왁스(피부보호제)	1,0
세테아릴알콜(에몰리엔트제)	2.0
글리세릴스테아레이트( " )	2.0
백강잠 발효추출물(장벽 기능강화제)	1.0
세테아릴글루코사이드(계면활성제)	2.0
콜레스테롤(피부보호제)	0.6
세라마이드( " )	0.3
스테아린산(피부컨디셔닝제)	1.0
수산화칼륨(중화제)	0.3
정제수(피부컨디셔닝제)	잔부
마그네슘알루미늄실리케이트(점증제)	0.4

본 발명은 노인성 피부질환 치료에 유효한 효과를 갖는 피부외용제 개발에 중요한 기술을 제공하며, 따라서 산업적으로 즉시 활용 가능한 기술임. 또한 시장에 제품화시 많은 부가가치를 창출할 수 있음.

Claims

백강잠을 열수로 80℃에서 18~24시간 추출하여 열수 추출물을 만드는 단계;
상기 열수 추출물에 발효 미생물인 효모(Saccharomyces. cerevisiae), 유산균(Lactobacillus plantarum) 중 1종 또는 하나 이상을 선택하여 접종하고 28℃에서 72시간 발효시킨 후 이를 여과하여 고형분을 제거하는 단계로 이루어지는 것을 특징으로 하는 백강잠 발효 추출물의 제조방법.
삭제
청구항 1에 기재된 제조방법으로 제조된 백강잠 발효 추출물을 건조 중량 기준으로 0.01~50중량% 함유함을 특징으로 하는 피부보호, 노인성 피부질환, 인설, 가려움 및 악건성 피부용 화장료 조성물
청구항 3에 있어서, 상기 화장료조성물은 물, 유분, 계면활성제, 보습제, 점증제, 방향제, 보존제, 중화제, 에몰리엔트제, 피부보호제, 피부컨디셔닝제로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 첨가제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물
청구항 4에 있어서, 화장료조성물은 유액, 크림, 에센스, 미용액, 바디로션, 바디젤, 바디에센스, 바디세정제, 클렌징폼, 팩, 클렌징크림으로부터 선택된 하나 이상의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.