KR100914862B1 - 스트레커 반응을 촉매하는 탄수화물 촉매 - Google Patents

스트레커 반응을 촉매하는 탄수화물 촉매

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Abstract

본 발명은 스트레커 반응을 촉매하는 탄수화물 촉매에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 미생물 유래 알파-사이클로소포로헥사데카오스, 또는 숙시닐글리칸 모노머 촉매 및 그 촉매를 이용한 스트레커 반응 방법에 관한 것이다.

Description

스트레커 반응을 촉매하는 탄수화물 촉매{Catalytic Carbohydrates for Strecker Reaction}
본 발명은 스트레커 반응을 촉매하는 탄수화물 촉매에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 미생물 유래 알파-사이클로소포로헥사데카오스, 또는 숙시닐글리칸 모노머 촉매 및 그 촉매를 이용한 스트레커 반응 방법에 관한 것이다.
세포 유래 탄수화물이 발병과 공생 모두에서 세균과 식물 상호작용에 관여하는 것으로 알려졌다(Denny, T. P. Annu . Rev . Phytopathol . 1995, 58, 145-161; Breedveld, M. W.; Miller, K. J. Microbiol . Rev . 1994, 58, 145-161;Long, S. R.; Staskawicz, B. J. Cell 1993, 73, 921-935). 이러한 생물학적 기능 외에도 Rhizobial 또는 Bradyrhizobial 환형 글루칸을 사용한 생물공학적 응용에 대한 연구가 최근에 보고되었다(Kwon, C.; Park, H.; Jung, S. Carbohydr . Res . 2007, 342, 762-766; Lee, S.; Park, H.;Seo, D.; Choi, Y.; Jung, S. Carbohydr . Res . 2004, 339, 519-527; Lee, S.; Jung, S. Carbohydr . Res . 2003, 338, 1143-1146; Lee, S.; Seo, D.; Park, H.; Choi, Y.; Jung, S. Anton . Leeuw . 2003, 84, 201-207; Lee, S.; Jung, S. Carbohydr . Res . 2002, 337, 1785-1789; Lee, S.; Seo, D.; Kim, H.; Jung, S. Carbohydr . Res . 2001, 334, 119-126).
스트레커(Strecker) 반응은 질소를 함유하는 헤테로 사이클, 알파-아미노산 및 다른 생물학적으로 유용한 분자의 합성에 대한 유용한 전구체인 알파-아미노나이트릴의 합성에 대한 가장 실용적이고 효율적인 방법 중 하나이다(Ramon, D. J.; Yus, M. Angew . Chem ., Int . Ed . Engl . 2005, 44, 1602-1634; (b) Groger, H.Chem . Rev. 2003, 103, 2795-2827; Enders, D.; Shilvock, J. P. Chem . Soc . Rev . 2000, 29, 359-373;Strecker, A. Ann . Chem . Pharm . 1850, 75, 27-45). 스트레커 반응은 일반적으로 산 또는 염기 촉매를 사용하여 이민에 시아나이드 이온의 친핵성 첨가에 의하여 수행된다. 그 반응의 효율성은 촉매를 사용하여 증가되고, 반응성 시아나이드 이온 공급원은 시안화수소(hydrogen cyanide), 시안화나트륨 또는 시안화칼륨, 비스(디알킬아미노)시아노보란, 디에틸포스포로시아니데이트 (diethylphosphorocyanidate) 및 트리메틸실릴 시아나티드(trimethylsilyl cyanide;TMSCN)이다. 그들 중에서, TMSCN는 HCN, NaCN, 또는 KCN과 비교하여 비교적 온화한 조건에서 친핵성 첨가 반응에 대한 좀 더 효과적이고 다루기 쉬운 시아나이드 이온 공급원으로 작용한다. 동종성 및 이종성 촉매들은 알파-아미노나이트릴의 합성을 위하여 사용되어 왔다(Spino, C. Angew . Chem ., Int . Ed . Engl . 2004, 43, 1764-1766; Yet, L. Angew . Chem ., Int . Ed . Engl . 2001, 40, 875-877; Takamura, M.; Hamashima, Y.; Usuda, H.; Kanai, M.; Shibasaki, M. Angew . Chem ., Int . Ed . Engl . 2000, 39, 1650-652; 그러나 이들 방법 중 대부분은 고가의 시약, 고난이도의 조건 및 많은 양의 독성 물질들의 생성 등과 같은 하나 이상의 문제점을 가진다. 이러한 이유로 인하여 깨끗하고 환경친화적인 용매 없는 방법들로 정량적인 수율을 가지는 알파-아미노나이트릴 생산 방법에 대한 필요성이 대두되었다.
본 발명은 상기의 문제점을 해결하고 상기의 필요성에 의하여 안출된 것으로서 본 발명의 목적은 환경친화적인 스트레커 반응을 촉매하는 물질을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 환경친화적인 스트레커 반응을 촉매하는 물질을 이용하여 알파-아미노나이트릴을 생산하는 방법을 제공하는 것이다.
상기의 목적을 달성하기 위하여 본 발명은
하기 화학식 A에 기재된 스트레커 반응을 촉매하는 탄수화물 촉매를 제공한다.
[화학식 A]
또한 본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 촉매가 관여하는 스트레커 반응의 기질은 말론알데히드(malonaldehyde) 비스(페닐이민); (본 발명에서 "기질 1"), N-벤질리덴벤젠 설폰아민;(본 발명에서 기질 2), N-벤질리덴-N- (다이페닐메틸)아민; (본 발명에서 "기질 3")인 것이 바람직하나 이에 한정되지 아니한다.
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또한 본 발명은 하기 화학식의 A의 촉매를 이용한 알파-아미노나이트릴의 합성 방법을 제공한다.
[화학식 A]
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 합성 방법에 사용되는 반응물 기질은 말론알데히드(malonaldehyde) 비스(페닐이민), N-벤질리덴벤젠 설폰아민, 또는 N-벤질리덴-N- (다이페닐메틸)아민 인 것이 바람직하나 이에 한정되지 아니한다.
삭제
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본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 반응은 물 및/또는 알코올 존재하에서 진행되는 것을 바람직하나 이에 한정되지 아니하며, 상기 알코올은 메탄올인 가장 바람직하다. 본 발명에 사용된 메탄올은 기질들이 물에 녹지 않기 때문에 사용한 것이고 반응에는 참여하지 않는 용매이다.
본 발명에서 사용된 상기 화합물 A는 X. oryzae pv. oryzae KACC 10331에서 유래하는 것이 바람직하다.
이하 본 발명을 설명한다.
본 발명에 기재된 용어 중" 스트레커 반응"이란 아미노산 합성시에 유용한 전구체인 알파-아미노나이트릴의 합성법으로 유명하며, 알데히드 또는 케톤(일반적으로 이민 기를 가지고 있는 화합물과 시안화알칼리의 2가지 화합물로부터 α－아미노나이트릴을 얻는 반응 즉 이민화합물과 시안화염 화합물이 일정한 용매조건하에서 특정 촉매의 작용으로 일어나는 과정을 의미한다.
본 발명에서 본 발명자들은 Xanthomonas oryzae 에서 유래한 알파-사이클로소포로헥사데카오스(이하, "알파-C16"이라 함)와 Rhizobium meliloti로부터 유래한 숙시노글라이칸 모노머 모두는 스트레커 반응에서 환경친화적 촉매로 작용한다는 것을 보인다(도 1). 알파-C16은 15개의 베타-(1→2)-연결과 하나의 알파-(1→6)-연결을 가지는 중성 환형 헥사데카글루코사이드로 벼 병원성 세균인 Xanthomonas oryzae pv. oryzae.에서 분리한 세포질 글루칸이다(Jung, Y.; Park, H.; Cho, E.; Jung, S. Carbohydr . Res . 2005, 340, 673-677;Talaga, P,Stahl, B.; Wieruszeski, J.-M.; Hillenkamp, F.; Tsuyumu, S.; Lippens, G.; Bohin, J.-P. J. Bacteriol . 1996, 178, 2263-2271) 한편 숙시닐글리칸 모노머(M1, M2 및 M3)는 Rhizobium meliloti 1021로부터 유래한 옥타사카라이드로 아세틸, 피루빌 및 숙시닐 기를 치환체로 가진다(도 2)( Wang, L. X.; Wang, Y.; Pellock, B.; Walker, G. C. J. Bacteriol. 1999, 181, 6788-6796).
정제된 알파-C16의 구조 분석은 NMR 분광기와 MALDI-TOF 질량 분광기를 통하여 수행하였으며 그 결과는 기존 보고와 같다(Jung, Y.; Park, H.; Cho, E.; Jung, S. Carbohydr. Res . 2005, 340, 673-677; Talaga, P,Stahl, B.; Wieruszeski, J.-M.; Hillenkamp, F.; Tsuyumu, S.; Lippens, G.; Bohin, J.-P. J. Bacteriol . 1996, 178, 2263-2271). 도 2A 알파-C16의 구조를 보여준다. 정제된 숙시닐글리칸 모노머들의 상세한 구조적 결정도 NMR 분광기를 통하여 수행하였고. 그 결과는 그 전 보고와 같다(Wang, L. X.; Wang, Y.; Pellock, B.; Walker, G. C. J. Bacteriol. 1999, 181, 6788-6796).
숙시닐글리칸 모노머들의 구조 정보를 통하여 본 발명자들은 환원 말단으로부터 세번째 포도당 잔기의 C-6 위치에 아세틸 기가 위치하고, 숙시닐 기는 6번째와 7번째 포도당 잔기의 C-6 위치에 위치하고, 피루빌 기는 4,6-케탈 연결을 통하여 8번째 포도당에 연결되어 있다는 것을 확인하였다. 도 2B에 도시한 바와 같이, 숙시닐글리칸 모노머들은 그들의 치환체에 따라서 M1, M2 및 M3로 구성된다.
최종적으로 정제된 알파-C16 및 숙시닐글리칸 모노머는 물과 메탄올 혼합용액에서 스트레커 반응에 대한 촉매로 사용되었다. 알파-C16와 숙시닐글리칸 모노머의 M2가 반응에 첨가되었을 때, 기질 1은 메탄올과 물의 혼합 용액에서 1시간 이내에 그들의 생성물로 전환되고 그 전환은 100%이다. 본 발명에서 본 발명자들은 1H NMR 분광 분석에 의하여 정량적인 수율을 결정하였다.
도 3에 도시된 바와 같이, 반응물에 해당하는 이민 카본에 연결된 양성자 d는 5분 후에 사라지고 생성물의 양성자 d는 알파-C16(도 3a의 A) 및 M2 (도 3a의 B)의 존재 하에서 명확하게 나타났다. 30 분의 반응 동안에 기질 1의 고리 양성자(a-c)에 해당하는 신호들이 그들의 생성물 신호에 나타났다(a'-c'). 기질 1의 구조적 대칭성에 기하여, 이들 결과들은 친핵성으로 시아나이드 이온은 기질 1의 친전자성 이민 카본을 동시에 공격하지 않는다는 것을 나타낸다. 또 그 반응 패턴은 첨가된 촉매에 따라서 30분까지는 다르다. 알파-C16의 존재 하에서, 그 반응물은 30분까지 여전히 40% 이상 남아서 결과적으로 반응은 1시간 후에 완료된다(도 3a의 A). 한편, M2 존재하에서 그 반응물은 30분에 95% 이상 생성물로 전환된다(도 3a의 B). 이들 결과들은 치환체로 숙시닐 기를 가지는 M2의 약산성에 기인한다.
UV-가시광선 분광 분석은 반응 30분 후에 물과 메탄올의 혼합물에 기질 1 만을 가지고 수행되었다. 기질 1 만은 혼합 용액에서 380 nm 부근에서 독특한 흡광도를 가진다. 일단 두 촉매에 의하여 반응이 진행되면, 도 3b에 도시한 바와 같이, 색이 노란색에서 무색으로 변하면서 그 흡광도는 점차적으로 380 nm 근처에서 감소한다. UV-vis 스펙트럼으로부터, M2가 반응 30분 동안에는 알파-C16 보다 더 효율적이다. 알파-C16 또는 M2 부존재 하에서, 기질 1 단독으로 그것의 생성물로 전환과 베타-사이클로덱스트린(베타-CD)의 첨가에 의하여 얻어진 것들은 심지어 24시간 후에도 10% 이하였고, 이것은 1H NMR 분광기 분석에 의하여 확인하였다(데이터는 도시 안됨). 기질 2에서는 숙시닐글리칸 모노머 중에서, M1 및 M3는 그 기질을 각각 48%와 40%로 생성물로 전환한다. 기질 3의 경우에, M1과 M3는 그 기질을 각각 17%와 15%로 생성물로 전환한다. 알파-C16는 기질 2와 3에 대해서는 촉매 효과가 없다(표 1).
상기 표 1에서 a는 반응이 완성된시간을 의미하고, b는 1H NMR 분석에 의하여 결정하였으며, c의 값은 키럴 컬럼을 사용한 HPLC 분석에 의하여 결정하였다.
본 발명을 통하여서 본 발명자들은 본 촉매 탄수화물에 의하여 유도된 키랄 컬럼을 가지는 에난치오머 익세스(ee)를 조사하였으나 모든 그 ee 비들은 10% 이하였다. 본 발명자들은 Rhizobium 속으로부터 분리한 Rhizobial 환형 베타-(1,2)-글루칸(사이클로소포로스)와 Bradyrhizobium 속으로부터 분리한 환형 베타-(1,3), 베타-(1,6)-글루칸과 같은 다른 미생물 환형 탄수화물들의 효과들 반응에서 테스트하였으나 그 두 환형 글루칸들은 그 반응에 대하여 효과가 없었다.
상기 기질 외에, N-벤질리덴아닐린, N-벤질리덴베질아민, N-벤질리덴-tert-부틸아민 및 N-벤질리덴-메틸아민에 대해서도 스트레커 반응을 조사하였으나 반응이 일어나지 않았다. 이러한 결과들은 알파-C16과 숙시닐글리칸 모노머가 다른 것들보다 대칭적 구조를 가지는 기질 1에 대하여 최대 반응성을 나타낸 것에 기초하여 이민 화합물에 대한 위치선택성(regioselectivity)을 가지고 스트레커 반응에 관여한다는 것을 나타낸다.
본 발명으로부터 본 발명자들은 스트레커 반응의 가능한 기작은 주로 미생물 환형 또는 선형 올리고사카라이드들의 하이드록시 기와 이민 화합물의 질소 원자들 사이에 수소 결합하고, 그 다음에 그 이민 탄소는 더 친전자성이 될 수 있어서 시아나이드 이온의 친핵성 공격에 대하여 그것을 활성화한다는 것을 가설한다. 이 ㅎ현상은 다른 것들과는 다르게 기질 1을 가지는 반응에서 강하게 일어난다. 수소 결합 효과 외에도, 알파-C16 또는 숙시노글리칸 모노머의 구조적 성질들도 그 기질에 따라 촉매 반응에 기여한다. 특별하게 알파-C16은 그것의 환형 구조에 기초하여서 기질 1에 대하여 복합체-형성 능력을 가질 수 있다. 또 숙시노글리칸 모노머들은 그 구조 내에 음이온성 치환체에 기인하여 일반적으로 약산으로 작용할 수 있다.
상기의 구성에서 알 수 있는 바와 같이 본 발명에서는 스트레커 반응에 대한 촉매 탄수화물로서 작용할 수 있는 미생물 환형 또는 선형 글리칸을 처음 발견하였으며, 이들 탄수화물 촉매는 여러 유기 합성 반응에서 환경 친화적인 촉매로 응용될 수 있는 효과가 있다.
도 1은 미생물 사이클로소포로헥사데카노스(알파-C16) 또는 숙시닐글리칸 모노머에 의하여 촉매된 알파-아미노나이트릴의 스트레커 합성도.
도 2는 (A) 알파-C16 및 (B) 숙시닐글리칸 모노머 (여기서 Glc: glucose; Gal: galactose; Ac: acetyl; Suc: succinyl; Pyr: pyruvyl group)의 구조.
도 3a는 0, 5, 30 및 60분에서 촉매로 (A) 알파-C16 및 (B) 숙시노글리칸, M2의 존재 또는 부존재하에서 기질 1의 부분적인 1H NMR 스펙트럼이고, 3b는 반응 30분 후에 기질 1 단독(─) 그리고 알파-C16 (--------) 또는 M2 (─­─)와 함께 있는 반응 혼합물의 기질 1의 UV-vis 흡수 스펙트럼을 나타냄.
1.1. 일반적인 방법들
본 발명에서 사용된 모든 기질들은 상업적인 공급원(Sigam 또는 Aldrich Chem. Co.)로부터 구입하였으며, 더 정제하지 아니하고 사용하였다. HPLC 급 물과 메탄올을 본 발명의 반응 용액으로 사용하였다. 이민 화합물들(13.5 mM), TMSCN (14 mM) 및 탄수화물들(1.3 mM)의 혼합물을 물과 메탄올 용액에서 30℃에서 교반하였다. 기질에 대한 그 반응 용액은 물과 메탄올이 1:1 비율로 구성되었으나 기질 3의 경우에는 순수한 물에 대한 매우 낮은 용해도로 인하여 그 비율을 2:8로 조정하였다. 그 반응은 254 nm에서 TLC로 처음 모니터하였다. 실리카겔 60 F254 유리-베이크된 TLC 판들에 반응 혼합물을 스팟팅하고 기질 1에 대한 혼합물에 대해서는 Hex:EtOAc:MeOH = 2:1:1의 용매 시스템에서 다른 기질에 대한 혼합물에 대해서는 Hex:EtOAc = 2:1의 용매 시스템으로 전개하였다.
1H NMR 분광 분석은 Bruker AVANCE 400 또는 500 분광기로 수행하였다. 1H NMR 분석에서 정량적인 수율을 계산하기 위하여, 각 반응 혼합물에서 앨리쿼트들을 일정 기간에 취하여서 질소 기체 하에서 메탄올을 부분적으로 제거하고 그 혼합물을 동결건조하였다. 알파-C16 또는 M2을 가지는 기질 1의 혼합물에 대한 NMR 측정은 CD3OD (99.8 원자 % D)에서 수행된 반면 다른 기질들을 갖는 것들은 CD3Cl (99.8 원자 % D)에서 수행되었다.
ee 값들을 용매 시스템으로 Hex:IPA = 95:5 또는 90:10을 가지는 키랄 컬럼(Pirkle (R, R) Whelk-O1, Regis, USA)으로 HPLC 분석에 의하여 체크하였다.
1.2. 알파- C16 및 숙시닐글리칸 모노머들의 제조 및 동정화
X. oryzae pv. oryzae KACC 10331는 한국 농업미생물자원센터(Korean Agricultural Culture Collection;KACC)로부터 구입하여서, 150rpm으로 교반하면서 28℃에서 TGY 배지(Sunish, K. R.; Sakthivel, N. Appl . Microbiol . Biotechnol . 2001, 55, 782-86.)에서 배양하였다. 그 미생물들을 2일간 배양한 후 8000 rpm, 4℃에서 10분간 원심분리하여 수집하였다 그 세포 펠렛들을 5% 트리클로로초산으로 추출하고, 원심분리한 후 그 상등액을 NH4OH로 중화한 후 1 mL/분의 속도로 Sephadex G-25 (2.5 x 34 cm) 컬럼에서 크로마토그래피하였다. 환형 글루칸을 가질 분획을 모아서 농축하고 알파-C16의 음이온 형태를 분리하기 위하여 DEAE-Sephadex(2 x 35 cm) 컬럼에 걸었다. 중성인 것을 모아서 Bio-Gel P-4 컬럼(Bio-Rad)으로 탈염하였다. 컬럼(2.4 x 54 cm)을 상온에서 18 mL/h 속도로 증류수로 용출하였고 그 탈염된 물질을 최종적으로 동결건조하였다. 정제된 알파-C16의 구조 분석은 포지티브 모드에서 매트릭스로 2,5-dihydroxybenzoic acid (DHB)를 사용하여서 FT-NMR 분광기 및 MALDI-TOF 질량 분광기로 수행되었다.
숙시닐글리칸 모노머를 제조하기 위하여, Rhizobium meliloti 1021(American Type Culture Collection;ATCC No.; 51124)(미국)에서 구입)은 500 mL의 GMS 배지에서 30℃에서 5일간 배양하였다(Wang, L. X.; Wang, Y.; Pellock, B.; Walker, G. C. J. Bacteriol . 1999, 181, 6788-6796). 세포를 모아서(13,000 g에서 10분) pH 7.0에서 25mL의 GMS 염 버퍼로 세척하고 배양 상등액을 냉동하였다. 해동 후, 배양 상등액들을 회전 증발로 5배 농축하였다. 다음, 고분자량 숙시노글리칸을 3배의 냉각된 에탄올을 첨가하여서 농축된 상등액으로부터 침전시켰다. 그 후 고 분자량 숙시노글리칸을 원심분리(12,000 g에서 10분)에 의하여 농축된 상등액으로부터 제거하였다. 그 상등액을 회전 증발로 한번 더 5배 농축하였고 저분자량 숙시노글리칸은 7배 부피의 냉각 에탄올을 첨가하고 원심분리하여 얻었다.
그 침전물을 증류수에 녹이고 샘플들을 Bio-Gel P6 컬럼(1 x 120 cm)에 걸어서 20 mL/h 속도로 0.5% AcOH로 상온에서 용출하였다. 분획(1 mL)을 모아서 탄수화물 양을 분석하였다. 저-분자량 숙시노글리칸으로부터 온 숙시닐글리칸 모노머가 예상되는 위치의 용출 물질을 모아서 숙시닐글리칸 모노머를 분리하기 위하여 30 mL/h 속도로 Bio-Gel P-4 컬럼(2 x 54 cm)을 걸었다. 모노머 분획을 모아서 농축하고 그 후에 Sephadex G-15 컬럼(1 x 49 cm)을 사용하여 탈염하였다. 숙시닐글리칸 모노머의 M1, M2 및 M3 분획을 Bio-Gel P6에 의하여 분리하고, Bio-Gel P4 크로마토그래피는 MOPS [3-(N-morpholino) 프로판설폰산] 버퍼(10 mM; pH 7.0) 내의 5 mM KCl로 미리평형화된 DEAE Sephadex 컬럼(1.5 x 48 cm)에 대하여 더 분획화하였다. 그 샘플을 그 컬럼에 걸고 400 mL의 5에서 250 mM KCl에 의한 KCl 리니어 그래디언트로 용출하였다. 분획들(4 mL)을 모아서 페놀-황산 방법에 의하여 분석하였다. 피크들을 모아서 컷오프 분자량이 1,000인 SpectraPor 투석 막을 사용하여 물에 대하여 충분하게 투석하였다. 그 후 그 정제된 숙시닐글리칸 모노머를 Brucker 500 MHz NMR 분광기를 통하여 확인하였다.

Claims (12)

  1. 하기 화학식 A에 기재된 스트레커 반응을 촉매하는 탄수화물 촉매:
    [화학식 A]
    상기 화학식 A에서 Glc는 포도당이고, α1-6은 포도당의 1번 탄소와 이웃하는 포도당의 6번 탄소가 알파-글리코시드 결합을 의미하고, β1-2는 포도당의 1번 탄소와 이웃하는 포도당의 2번 탄소가 베타-글리코시드 결합을 의미.
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  4. 제1항에 있어서, 상기 촉매가 관여하는 스트레커 반응의 기질은 말론알데히드(malonaldehyde) 비스(페닐이민), N-벤질리덴벤젠 설폰아민 또는 N-벤질리덴-N- (다이페닐메틸)아민인 것을 특징으로 하는 스트레커 반응을 촉매하는 탄수화물 촉매.
  5. 제 1항에 있어서, 상기 화합식 A 화합물은 X. oryzae pv. oryzae KACC 10331에서 유래한 것을 특징으로 하는 스트레커 반응을 촉매하는 탄수화물 촉매.
  6. 제1항에 기재된 하기 화학식 A의 촉매를 이용한 알파-아미노나이트릴의 합성 방법:
    [화학식 A]
    상기 화학식 A에서 Glc는 포도당이고, α1-6은 포도당의 1번 탄소와 이웃하는 포도당의 6번 탄소가 알파-글리코시드 결합을 의미하고, β1-2는 포도당의 1번 탄소와 이웃하는 포도당의 2번 탄소가 베타-글리코시드 결합을 의미.
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  9. 제6항에 있어서, 상기 합성 방법에 사용되는 반응 기질은 말론알데히드(malonaldehyde) 비스(페닐이민), N-벤질리덴벤젠 설폰아민 또는 N-벤질리덴-N-(다이페닐메틸)아민인 것을 특징으로 하는 알파-아미노나이트릴의 합성 방법.
  10. 제 6항에 있어서, 상기 합성 반응은 물과 알코올 존재하에서 진행되는 것을 특징으로 하는 알파-아미노나이트릴의 합성 방법.
  11. 제 10항에 있어서, 상기 알코올은 메탄올인 것을 특징으로 하는 알파-아미노나이트릴의 합성 방법.
  12. 제 6항에 있어서, 상기 화합식 A의 촉매는 X. oryzae pv. oryzae KACC 10331에서 유래한 것을 특징으로 하는 알파-아미노나이트릴의 합성 방법.
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논문3 : Carbohydrate Polymers *
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