KR100868784B1 - 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물을 함유하는 주름개선 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물 및 이를 함유하는 주름개선 화장료 조성물에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 국내에 자생하는 버섯류 중에서 액체배양이 가능한 버섯을 사용하여 피부 주름을 개선할 수 있는 물질을 제공하고 섬유아세포의 기능 활성화를 통하여 피부 주름을 개선시킬 수 있어 주름 발생 억제 및 개선에 우수한 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물 및 이를 함유하는 주름개선 화장료 조성물에 관한 것이다.

이를 위해 본 발명에 따른 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물은 주름개선 물질로서 주름 개선에 유효한 것을 특징으로 하고, 본 발명에 따른 주름 개선 화장료 조성물은 상기 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물을 함유하는 것을 특징으로 한다.

망목주름담홍버섯, 주름개선, 섬유아세포 증식, 콜라겐 합성

Description

망목주름담홍버섯 액체배양 추출물을 함유하는 주름개선 화장료 조성물{Extract of Rhodotus palmatus Cultured Broth and Cosmetic Composition Comprising the Same for Providing Anti-wrinkle Activity}

본 발명은 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물 및 이를 함유하는 주름개선 화장료 조성물에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 국내에 자생하는 버섯류 중에서 액체배양이 가능한 버섯을 사용하여 피부 주름을 개선할 수 있는 물질을 제공하고 섬유아세포의 기능 활성화를 통하여 피부 주름을 개선시킬 수 있어 주름 발생 억제 및 개선에 우수한 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물 및 이를 함유하는 주름개선 화장료 조성물에 관한 것이다.

일반적으로 여성을 대표하는 상품이라고 역사적으로 알려져 있던 화장품은 오늘날에는 단순한 아름다움의 표현 도구만이 아닌 생활용품으로, 남녀노소를 불문하고 생활에 가까이 자리 잡고 있으며, 산업의 발전에 따라 고급화, 다양화됨으로써 특별한 효과나 효능을 기대하는 '기능성' 제품에 대한 관심도 높아지고 있는 실정이다.

Cosmetic(화장품)과 Pharmaceutical(의약품)의 합성어인 "Cosmeceutical"은 우리나라의 법률(화장품법 제2조제2항)상으로는 기능성 화장을 뜻하며 피부의 미백에 도움을 주는 제품, 피부의 주름개선에 도움을 주는 제품, 피부를 곱게 태워주거나 자외선으로부터 피부를 보호하는데 도움을 주는 제품으로 되어있다. 일반적으로 이러한 기능성 화장품은 미용 효과뿐만 아니라 신체의 구조나 기능에 영향을 주고 예방 및 치료 작용을 하는 화장품으로 해석되고 있으며, 특히 시장에서 기능성 화장품의 비율이 늘어남에 따라, 인체에 미치는 새로운 효능 성분을 모색하고, 이를 피부에 효율적으로 이용하고자 하는 연구가 활발히 이루어지고 있다.

기능성 화장품에 사용되는 천연물질 소재로는 약용식물을 포함한 허브(herb)류가 가장 많이 활용되고 있으며, 약용으로 많이 이용되고 있는 버섯류도 좋은 천연물질 소재로 각광받고 있다. 일예로 대한민국 특허출원 1999-4497호에는 Schizophyllum commune (치마버섯) 다당체인 베타-1,6-분지 베타-1,3-글루칸을 함유하는 보습화장료 조성물이 개시되어 있으며, Grifola frondosa(잎새버섯)의 다당체도 피부 보습, 자극완화 그리고, 광노화 억제의 효과, 미백 효과를 가지고 있다(Lee 등, Anti-irritation and moisturizing effects of exoploysaccharide produced by Grifola frondosa. J. of the Society of Cosmetic Soientists of Korea 31: 35-41, 2005). 또한 대한민국 특허출원 2003-19746호에는 Dictyophora echinovolvata(망태버섯)추출물을 함유한 천연 무방부제 화장료 조성물이 개시되어 있고, 대한민국 특허출원 2001-32706호에는 Agaricus blazei (아가리쿠스 버섯) 추출물을 화장품에 적용함으로써 우수한 항 부종 효과 및 부종 형성에 대한 억제작 용 효과가 있는 화장료의 조성물이 개시되어 있다.

그리고 피부 노화 특히 주름 개선효과가 있는 것으로 대한민국 특허출원 2003-73323호에는 Inonotus obliquus (차가버섯) 추출물을 함유하는 주름개선 화장료 조성물이 개시되어 있으며, 대한민국 특허출원 2001-10171호에는 Phellinus linteus(상황버섯)은 항암, 이 외에 피부 주름 개선 효과, 기미, 주근깨 개선 등의 미백 효과, 항여드름, 항산화효과가 있는 미백화장료가 개시되어 있다. 그 외에 대한민국 특허출원 2003-24042호에는 Hericium erinaceus(노루궁뎅이버섯) 자실체 추출물을 사용하여 피부노화 방지 및 미백, 피부손상완화용 외용제 조성물이, 그리고 Cordyceps sp.(동충화초), Coriolus hirsutus (흰융털구름버섯) 등도 주름과 미백 효과를 보이고 있는 것으로 알려져 있다(Lee 등, Screening of traditional herbal medicines to develop new materials for anti-aging and anti-wrinkle in the skin, J Soc. Cosmet. Scientists Korea 31: 147-152, 2005).

그러나 지금까지 버섯을 이용하여 개발된 화장료 중 주름 및 피부노화 방지에 사용된 버섯들은 대한민국 특허출원 2003-73323호에서만 차가버섯 자실체와 균사체 배양물의 혼합 추출물을 사용하였을 뿐, 전부 자실체 추출물을 사용하여 개발된 것으로 자실체의 경우 배양 조건 및 서식지에 따라 그 성분이 변화하기 때문에 실제 산업화하기 위해서는 가능한 배양조건 및 생산량, 그리고 효능을 일정하게 조절할 수 있는 액체상태의 균사체 배양을 통해 주름을 억제할 수 있는 물질을 개발할 필요성이 대두되고 있다. 또한 통상적으로 알려진 버섯 이외에 국내에서 자생하고 있는 다양한 버섯류를 활용하여 산업화 가능한 물질을 개발할 필요성이 요구 되고 있는 실정이다.

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하고 상기와 같은 요청에 의해 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 국내에 자생하는 버섯류 중에서 액체배양이 가능한 버섯을 사용하여 피부 주름을 개선할 수 있는 물질을 제공하고자 하는 것이다.

또한 본 발명의 다른 목적은 섬유아세포의 기능 활성화를 통하여 피부 주름을 개선시킬 수 있어 주름 발생 억제 및 개선에 우수한 주름 개선 화장료 조성물을 제공하고자 하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 제1요지에 따른 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물은 주름개선 물질로서 주름 개선에 유효한 것을 특징으로 한다.

바람직하게는, 상기 망목주름 담홍버섯 액체배양 추출물은 망목주름 담홍버섯 균사체가 함유된 배양액 전체를 균질화한 후 20 내지 40중량%가 되도록 에탄올에 침지, 교반하면서 상온 내지 40℃의 온도에서 24시간 이상 추출한 후 여과하여 수득한 에탄올 추출물인 것을 특징으로 한다.

보다 바람직하게는, 상기 에탄올 추출물이 건조분말인 것을 특징으로 한다.

또한 상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 제2요지에 따른 주름 개선 화장료 조성물은 상기 기재된 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물을 함유하는 것을 특징으로 한다.

바람직하게는, 상기 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물은 화장료 조성물 총 중량에 대해 0.01 내지 10중량%로 포함되는 것을 특징으로 한다.

보다 바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 유연 및 영양화장수, 영양크림, 맛사지크림, 에센스 및 팩으로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 한다.

이하, 본 발명의 실시예를 참조하여 본 발명을 상세히 설명한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당 업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.

본 발명에 사용된 "망목주름담홍버섯"은 주름버섯목 송이과 Rhodotus속으로서, 봄과 가을에 걸쳐 부후목에 발생하며 특히 느릅나무에 발생하고, 북반구 온대이북에 분포한다. 전체가 핑크색~담홍색이며 갓의 표면은 평활하거나 망목상의 주름이 있는 경우가 많고, 주름은 약간 성기며 핑크색~담홍색이며, 대는 짧고, 포자는 6~8㎛이고 대략 구형인 특징이 있다.

본 발명에 따른 조성물에 있어서 "망목주름 담홍버섯 액체배양 추출물"은 액체배지를 사용하여 통기배양 후 망목주름 담홍버섯 균사체가 함유된 배양액 전체를 균질화한 다음, 5배의(균사체중량의) 40% 에탄올을 첨가하여 상온 내지 40℃에서 24시간 이상 추출한 후 여과하여 농축한 에탄올 추출물이다.

또한 본 발명에 따른 조성물에 있어, 상기 에탄올 추출물은 건조시켜 분말로 사용할 수 있다. 그러나 본 발명의 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물은 상기 방법에 의해 얻어진 것에 제한되는 것이 아니고 사용 가능한 형태로 가공하기 위하여 사용되는 공지의 모든 가공수단에 의해 얻어진 것을 포함한다.

본 발명에 함유되는 망목주름 담홍버섯의 식품 및 의약품, 화장품에 대한 생리활성에 대해서 지금까지 전혀 보고된 바가 없었다. 따라서 본 발명자들은 다음과 같이 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물을 사용하여 피부 주름의 개선에 효능이 있는지를 확인하였다.

본 발명의 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물의 피부 주름개선의 확인 과정은 인체 섬유아세포에 상기 추출물을 처리하는 단계를 포함한다.

본 발명자들은 피부 주름의 주된 원인인 섬유아세포의 사멸과 콜라겐 생성기능 저하를 효과적으로 억제할 수 있는 소재를 탐색하기 위하여 섬유아세포의 일종인 NHF(Normal Human Fibroblast)를 사용하였으며 한국 세포주은행(KCLB)에서 분양받아 실험에 사용하였다.

망목주름담홍버섯 액체배양 추출물의 섬유아세포 증식효과를 측정하기 위해 섬유아세포를 1 x 10⁴ cell/well농도로 96 well plate에 분주 후 배양하였다. 여기에 일정한 농도의 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물을 처리하고 37℃, 5% CO₂ incubator에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 MTT시약을 처리하고, 발색을 유도시킨 다음 ELISA microplate reader(ELx800, Bio-tec, USA)를 이용하여 540nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물 0.001-0.1중량% 처리시 약 109~134%의 섬유아세포의 증식을 촉진하는 것을 확인할 수 있었다.

또한, 본 발명자들은 피부의 주름개선 효과를 검정하는 콜라겐 합성효과를 보기 위하여 섬유아세포를 96well-plate에 1 x 10⁴ cell/well씩 분주하고 DMEM배지로 24시간 배양시킨 다음, 배지에 단계적으로 희석한 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물을 가하고 다시 24시간 동안 CO₂ incubator에서 배양하였다. 배양 완료 후, 배양액을 Procollagen Type I C-epetide EIA (Takara Bio Inc., MK101)을 이용하여 콜라겐 양을 측정한 결과 0.1 중량% 처리시 120ng/ /ml 이상의 콜라겐을 생성하는 것으로 나타났다. 그 결과 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물의 처리가 섬유아세포의 콜라겐 생성량을 증가시키는 것을 알 수 있었다.

이하에서 실시예와 비교예를 들어 상세하게 설명하지만, 본 발명의 기술적 범위가 이들 실시예에 한정하는 것은 아니다.

[실시예]

실시예 1 : 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물의 제조

Potato dextrose agar (PDA, Difco Co.) 평판배지에서 생육된 망목주름담홍버섯 균사체를 직경 7㎜의 cork border로 일정하게 절취하여, 이 균사체 절편 9~10개를 균질화한 다음, 100㎖ potato dextrose broth (PDB, Difco Co.)에 접종하여 25℃에서 120rpm의 속도로 5~15일간 1차 종균배양을 하였다. 1차 종균이 끝난 배양액을 다시 PDB(pH 5.0) 500㎖ baffle flask에 균질화한 종균을 20% 접종하고, 25℃, 120rpm에서 5~25일간 2차 종균 배양을 하였다.

망목주름담홍버섯 액체배양 추출물의 제조는 통기배양 후 균사체가 함유된 배양액 전부를 균질화한 다음, 5배의(균사체중량의) 40% 에탄올을 첨가하여 상온 내지 40℃에서 24시간 이상 추출하였으며, 규조토 여과 후 여액을 50℃에서 고형분 함량이 최소 2%이상 되게 감압 농축하거나 동결건조하여 "망목주름담홍버섯 액체배양 추출물을 수득하였다.

실시예 2 : 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물이 인체 섬유아세포 증식에 미치는 영향

인체 섬유아세포를 분화시키는 과정에서 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물을 각 농도별로 처리한 후 섬유아세포의 분화에 미치는 영향을 측정하였다. 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물이 인체 섬유아세포 증식에 미치는 영향을 조사하기 위하여 MTT assay로 세포증식 정도를 측정하였다. 즉, 10% FBS와 1% penicillin 및 streptomycin이 포함된 DMEM에 인체 섬유아세포인 NHF를 배양하였다. 세포가 culture dish에 80~90% 자랐을 때 trypsin mixture 700㎕를 가한 후 37℃에서 3분간 incubation하여 세포를 떼어 낸 뒤 1:3의 비율로 계대 배양하면서 실험에 사용하였다. 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물이 인체 섬유아세포 증식정도를 측정하기 위해 사용한 MTT assay는 세포의 생육 및 분화를 측정하는 colormetric assay로서 살아있는 세포 내 mitochondria의 dehydrogenase가 MTT와 반응하여 dark blue의 MTT- formazan crystal을 형성하는 것을 기본 원리로 하였다. 즉, NHF를 1 x 10⁴ cell/well농도로 96 well plate에 분주 후 세포가 plate 바닥에 부착될 수 있도록 37℃, 5% CO₂ incubator에 24시간 배양하였다. 배양 시 사용된 배지를 제거한 후 새로운 배지에 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물을 농도별로 희석한 후 200㎕씩 분주하고, 37℃, 5% CO₂ incubator에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 시험물질이 포함된 배지를 제거하고 0.5㎎/㎖로 배지에 희석한 MTT시약을 well당 200㎕씩 분주한 다음 96 well plate의 빛을 차단하여 37℃, 5% CO₂ incubator에서 4시간 동안 배양하였다. 배양이 완료되면 MTT시약이 포함된 배지를 제거하고, DMSO(dimethyl sulfoxide) 100㎕가하여 MTT-formazan crystal을 용해시키고 Sorenson's buffer (O.1M NaCl, 0.1M glycine, pH 10.5) 20㎕ 처리하여 상온에서 5분 동안 발색을 유도시킨 다음 ELISA microplate reader (ELx800,Bio-tec, USA)를 이용하여 540nm에서 흡광도를 측정하였다. MTT실험을 통해 세포의 생존 능력을 다음의 수학식 1에 따라 계산하였으며 그 결과인 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물 처리가 인체 섬유아세포의 증식에 미치는 영향을 아래의 표 1로 나타내었다.

[수학식 1]

여기서, A는 시료 흡광도이고 B는 대조군 흡광도이다.

[표 1]

처리농도	0.01 mg/mL	0.1 mg/mL	1.0mg/mL
세포증식율(%)	109.06 ± 18.83	116.82 ±17.95	133.93 ± 13.69

결과치 : 평균값 ± 표준편차 (반복수 = 10)

상기 표 1에서 확인할 수 있는 바와 같이, 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물이 섬유아세포의 증식에 미치는 영향을 확인한 결과 0.01mg/mL 및 0.1mg/mL, 1.0mg/mL 농도에서 각각 대조군에 비해 109, 117, 134% 정도의 세포 증식율을 보여 섬유아세포의 증식을 촉진함으로써 피부 주름 개선이 가능한 것으로 나타났다.

실시예 3 : 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물 처리가 콜라겐 생성에 미치는 영향

피부의 주름개선 효과를 검정하기 위해 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물 처리가 섬유아세포의 콜라겐 생성에 미치는 영향을 측정하였다. 여기서 사용한 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물은 실시예 1에서 제조한 것이다. 상기 영향을 알아보기 위해 인체 섬유아세포의 콜라겐 생성량을 측정하였다.

먼저, 피부의 주름개선 효과를 검정하는 콜라겐 합성효과를 확인하고자 사람 섬유아세포를 96well-plate에 1 x 10⁴ cell/well씩 분주하고 10% FBS와 1% Penicillin-streptomycin이 들어있는 DMEM배지로 24시간 배양시킨 다음, 배지에 단계적으로 희석한 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물을 가하고 다시 24시간 동안 CO₂ incubator에서 배양하였다. 배양 완료 후, 배양액을 Procollagen Type I C-epetide EIA (Takara Bio Inc., MK101)을 이용하여 콜라겐 양을 측정하였다. 콜라겐 측정 키트에 포함된 표준 농도곡선을 작성하였으며, 각 배지에 포함된 총 단백질의 양을 보정한 후 대조군을 0으로 하여 콜라겐 증가량을 산정한 결과는 표 2로 나타내었다.

[표 2]

처리농도	0.01 mg/mL	0.1 mg/mL	1.0 mg/mL
collagen 증가량 (ng/ml)	14.3 ± 1.1	52.7 ± 3.6	127.1 ± 10.3

결과치 : 평균값 ± 표준편차 (반복수 = 10)

상기 표 2의 결과인 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물 처리가 인체 섬유아세포의 콜라겐 생성에 미치는 영향에서 확인할 수 있는 바와 같이, 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물이 섬유아세포 콜라겐 생성에 미치는 영향을 확인한 결과 0.01 mg/mL, 0.1 mg/mL 및 1.0 mg/mL 농도에서 각각 대조군에 비해 14, 53, 127 ng/ml정도의 collagen을 더 생성되는 것으로 나타나 피부 주름 개선이 가능한 것으로 나타났다.

실시예 4 : 피부 탄력성에 대한 증진효과의 측정

피부탄력성에 대한 약용식물복합 추출액의 영향을 측정하기 위해 영양크림을 제조하여 피부 탄력도 개선 효과 측정 실험을 실시하였다. 이를 위해 하기 표 3에 나타나 있는 성분들과 함량을 사용하여 통상적인 방법으로 혼합하여 제조예 1 내지 3과 비교제조예 1의 영양 크림을 제조하였다. 제조예 1 내지 제조예 3은 망목주름담홍버섯 추출물을 화장료 조성물 총 중량에 대해 각각 0.01, 1.0, 10 중량%를 첨가한 것이고, 비교제조예 1은 망목주름담홍버섯 추출물을 첨가하지 않은 화장료 조성물이다.

[표 3]

원료명	제조예1	제조예2	제조예3	비교제조예1
폴리솔베이트-60	1.2	1.2	1.2	1.2
소르비탄 스테아레이트	0.4	0.4	0.4	0.4
스테아린산	0.5	0.5	0.5	0.5
스쿠알란	6.0	6.0	6.0	6.0
세토스테아릴알콜	1.5	1.5	1.5	1.5
세틸옥타노에이트	5.0	5.0	5.0	5.0
카보머	0.12	0.12	0.12	0.12
트리에탄올아민	0.12	0.12	0.12	0.12
글리세린	3.0	3.0	3.0	3.0
부틸렌 글리콜	2.0	2.0	2.0	2.0
망목주름담홍버섯 추출물	0.01	1.0	10	0
향료	적당량	적당량	적당량	적당량
방부제	적당량	적당량	적당량	적당량
정제수	잔량	잔량	잔량	잔량
합계(중량%)	100	100	100	100

제조예 1 내지 3 및 비교제조예 1에서 제조한 화장료 조성물의 피부탄력성에 대한 약용식물복합 추출액의 영향을 측정하기 위해, 피부 탄력도 개선 효과 측정 실험을 실시하였다.

이를 위해 온도 22-24℃, 상대습도 55% 조건에서 20세 이상의 건강한 여성 20명을 4그룹으로 나누고, A그룹에는 제조예 1, B그룹에는 제조예 2, C그룹에는 제조예 3, D그룹에는 비교제조예 1의 화장료 조성물에 대하여 피부탄력 증진 효과를 측정하였다. 상기 화장료 조성물을 눈가를 중심으로 12주간 사용(2회/일)한 후, 피부탄력측정기(Cutometer SEM575, Courage+Khazaka사)를 이용하여 피부탄력을 측정하였다.

피부탄력도 측정결과(12주)는 피부탄력 측정기의 각 시험그룹별 평균값으로 △R5값(수학식 2)을 구하였고, 하기 표 4에 나타내었다. △R5값은 실탄성계수(Net elasticity)를 나타내는 값으로 1에 가까울수록 탄력도가 우수하다.

[수학식 2]

[표 4]

실험군	피부탄력증진효과(△R5)
A그룹	0.17
B그룹	0.19
C그룹	0.21
D그룹	0.07

상기 표 4에서 확인할 수 있는 바와 같이, 망목주름담홍버섯 추출물을 포함하는 A그룹(제조예 1), B그룹(제조예 2), C그룹(제조예 3)에서의 피부탄력은, D그룹(비교제조예 1)에서의 피부탄력에 비해 142.2~200% 이상 증가함을 확인할 수 있었다. 따라서 본 발명에 따른 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물을 함유하는 주름개선 화장료 조성물은 효과적으로 피부탄력을 증진시킬 수 있는 것이다.

본 명세서에서는 본 발명자들이 수행한 다양한 제조와 분석실험 가운데 몇 개를 예만을 들어 설명하는 것이나 본 발명의 기술적 사상은 이에 한정하거나 제한되지 않고, 당업자에 의해 변형되어 다양하게 실시될 수 있음은 물론이다.

이상에서 살펴본 바와 같이, 본 발명에 따른 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물은 피부주름 개선에 관련하여 섬유아세포의 증식을 촉진하고, 섬유아세포가 생성하는 콜라겐의 생성량을 증가시켜 주름을 예방할 수 있는 등의 효과가 있다.

이로 인해 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물이 유효성분으로 함유되어 있는 본 발명에 따른 주름 개선 화장료 조성물은 섬유아세포의 기능 활성화를 통하여 피부 주름을 개선시킬 수 있어 주름 발생 억제 및 개선에 우수한 효과가 있다.

Claims (6)

1. 주름 개선 화장료 조성물로서,

   주름 개선에 유효한 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는, 주름 개선 화장료 조성물.
2. 제 1항에 있어서,

   상기 망목주름 담홍버섯 액체배양 추출물은 망목주름 담홍버섯 균사체가 함유된 배양액 전체를 균질화한 후 5배의(균사체중량의) 40% 에탄올을 첨가하여 침지, 교반하면서 상온 내지 40℃의 온도에서 24시간 이상 추출한 후 여과하여 수득한 에탄올 추출물인 것을 특징으로 하는, 주름 개선 화장료 조성물.
3. 제 2항에 있어서,

   상기 에탄올 추출물은 건조분말인 것을 특징으로 하는, 주름 개선 화장료 조성물.
4. 삭제
5. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,

   상기 망목주름담홍버섯 액체배양 추출물은 화장료 조성물 총 중량에 대해 0.01 내지 10중량%로 포함되는 것을 특징으로 하는, 주름 개선 화장료 조성물.
6. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,

   상기 화장료 조성물은 유연 및 영양화장수, 영양크림, 맛사지크림, 에센스 및 팩으로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는, 주름 개선 화장료 조성물.