KR100849019B1 - A cosmetic composition containing a white lupin extract - Google Patents

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Abstract

본 발명은 화이트 루핀 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 더욱 상세하게는 상기 추출물을 함유하여 필라그린의 합성을 증가시키고, 세포간 지질 성분의 합성을 촉진하며, 피부의 건조증상 및 손상된 피부장벽의 회복력을 개선시키는 피부 보습용 화장료 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a cosmetic composition containing a white lupine extract. More particularly, the present invention relates to a skin moisturizing cosmetic composition containing the extract, which increases the synthesis of filaggrin, promotes the synthesis of intercellular lipid components, and improves dryness of skin and recovery of damaged skin barriers.

또한 상기 조성물에 세라마이드를 더 함유하여 상기 효과를 더욱 증진하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 특히, 세라마이드는 피부 외적으로 작용하여 피부 내적으로 작용하는 화이트 루핀 추출물과 함께 피부의 보습력을 더욱 증진하며, 피부장벽의 회복력을 더욱 개선시켜, 피부건조증상, 아토피증상을 포함하는 피부질환을 예방하고 그 증상을 개선시키는 것을 특징으로 한다. It also relates to a cosmetic composition characterized in that it further contains the ceramide in the composition to further enhance the effect. In particular, ceramides work with the skin outside to enhance the skin's moisturizing properties with the white lupine extract, and also improve the resilience of the skin barrier, preventing skin diseases including skin dryness and atopic symptoms. It is characterized by improving the symptoms.

화이트 루핀, 세라마이드, 피부 보습, 아토피 White lupine, ceramide, skin moisturizer, atopy

Description

화이트 루핀 추출물을 함유하는 화장료 조성물 {A cosmetic composition containing a white lupin extract}A cosmetic composition containing a white lupin extract

도 1은 화이트 루핀 추출물을 처리하였을 때 각질 형성세포의 분화 정도를 도시한 것이다. Figure 1 shows the degree of differentiation of keratinocytes when treated with white lupine extract.

도 2는 화이트 루핀 추출물을 처리하였을 때 각질형성세포에서의 발현되는 필라그린의 양에 관한 것이다.         Figure 2 relates to the amount of filaggrin expressed in keratinocytes when treated with white lupine extract.

도 3은 화이트 루핀 추출물을 함유한 조성물(실시예 2)의 각질세포간 지질 생성량에 관한 것이다.Figure 3 relates to the amount of lipid production between keratinocytes of the composition containing the white lupine extract (Example 2).

본 발명은 화이트 루핀 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 더욱 상세하게는 화이트 루핀 추출물을 함유하여 필라그린의 합성을 증가시키고, 세포간 지질 성분의 합성을 촉진하며, 피부의 건조증상 및 손상된 피부장벽의 회복력을 개선시키는 피부 보습용 화장료 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a cosmetic composition containing a white lupine extract. More specifically, the present invention relates to a skin moisturizing cosmetic composition containing white lupine extract to increase the synthesis of filaggrins, promote the synthesis of intercellular lipid components, and improve dryness of the skin and recovery of damaged skin barriers.

또한 상기 조성물에 세라마이드를 더 함유하여 상기 효과를 더욱 증진하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 특히, 세라마이드는 피부 외적 으로 작용하여 피부 내적으로 작용하는 화이트 루핀 추출물과 함께 피부의 보습력을 더욱 증진하며, 피부장벽의 회복력을 더욱 개선시켜, 피부건조증상, 아토피증상을 포함하는 피부질환을 예방하고 그 증상을 개선시키는 것을 특징으로 한다. It also relates to a cosmetic composition characterized in that it further contains the ceramide in the composition to further enhance the effect. In particular, ceramide, along with the white lupine extract acting externally to the skin, further enhances the skin's moisturizing capacity, further improves the resilience of the skin barrier, and prevents skin diseases including skin dryness and atopic symptoms. It is characterized by improving the symptoms.

피부는 표피, 진피, 피하지방층으로 구성되어 있으며, 표피의 가장 최외각에 위치한 각질층은 낮은 투과성과 물리적인 장벽기능을 제공하여 인체를 외부의 환경으로부터 보호하고 수분 손실을 막으며, 독성 물질이나 미생물, 기계적인 자극, 자외선에 대한 장벽 기능을 담당한다. 각질층은 약 40%의 단백질, 40%의 수분, 10~20%의 지질로 구성되는데, 그 구조는 단백질이 풍부한 각질세포와 그 사이를 채우고 있는 세포간 지질로 되어 있다. 기저층에서 생산된 각질형성세포는 유극층과 과립층을 거쳐 분화되면서 세포의 형태가 편평하게 되고, 세포 내 소기관들이 사라지기 시작하며, 섬유성 단백질의 생성, 탈수 및 세포막의 비후 등의 각화과정을 거쳐 탈락되게 된다. 이 과정 중에 케라토히알린 과립 내부의 프로필라그린이 단백질 분해와 탈인산화 과정을 거쳐서 필라그린으로 변화되고 세포 내에서 접착제의 역할을 하며 천연보습인자로 작용하여 보습기능을 향상시킬 뿐만 아니라 불용성의 세포막으로 대체됨으로써 외부 자극에 대한 장벽의 역할을 수행한다. The skin is composed of epidermis, dermis and subcutaneous fat layer. The outermost stratum corneum is the outermost layer of epidermis, which provides low permeability and physical barrier function to protect the body from the outside environment and prevent water loss. It is responsible for mechanical stimulation, barrier function against ultraviolet rays. The stratum corneum consists of about 40% protein, 40% moisture, and 10-20% lipids. The structure is composed of protein-rich keratinocytes and intercellular lipids filling them. The keratinocytes produced in the basal layer are differentiated through the polar layer and the granule layer, and the cells are flattened, the organelles disappear, and the keratinization process involves the formation of fibrous proteins, dehydration and thickening of the cell membrane. You will be eliminated. During this process, propyllagrin inside the keratin-hyline granules is transformed into filaggrin through proteolysis and dephosphorylation, acts as an adhesive within the cell, acts as a natural moisturizing factor, and improves moisturizing function as well as insoluble cell membranes. It is replaced by a barrier to external stimuli.

세포간 지질의 주요한 구성 성분은 세라마이드 (40-50%), 콜레스테롤 (20-25%) 및 유리 지방산 (20-25%) 등이다. 상기 세 가지의 주요 지질 중 어느 하나의 농도가 감소하거나 증가하게 되면 피부의 보호 장벽 기능의 손실이 발생하게 된다. 이 중에서 세라마이드는 세포간 지질의 가장 중요한 구성 요소로서, 수분 증발을 막고 수분을 유지하는 성분으로 잘 알려져 있다. 유전적 요인 또는 노화에 의 해 세라마이드의 생산이 감소되면 각질층의 보호 장벽 기능이 감소되고 따라서, 여러 가지 피부과적 증상, 예컨대, 아토피 피부염 및 건선 증상 등이 나타난다고 보고되어 있다 (Fulmer & Kramer, J. Invest. Derm., 86:598-602(1986); 및 Tupker R. A. et al., Acta Derm. Venereol. Stockh, 70:1-5(1990)). 또한 과도한 세안이나, 목욕 등의 생활습관적 요소나, 건조한 대기, 오염물질 등의 환경적인 요인으로 인해 쉽게 그 기능이 손실될 수 있으며, 실제적으로 여러 위해요인들이 늘어난 최근 들어서는 건조피부증상 및 이로 인한 제반 장해를 호소하는 사람이 점점 증가하고 있는 추세이다.The major constituents of intercellular lipids are ceramides (40-50%), cholesterol (20-25%) and free fatty acids (20-25%). Decreasing or increasing the concentration of any of the three major lipids results in loss of protective barrier function of the skin. Among them, ceramide is the most important component of intercellular lipids and is well known as a component that prevents water evaporation and maintains water. It has been reported that decreased ceramide production by genetic factors or aging reduces the protective barrier function of the stratum corneum and thus causes various dermatological symptoms such as atopic dermatitis and psoriasis symptoms (Fulmer & Kramer, J.). Invest.Drm., 86: 598-602 (1986); and Tupker RA et al., Acta Derm.Vereereol.Stockh, 70: 1-5 (1990)). In addition, it can be easily lost due to excessive factors such as excessive face washing, lifestyle factors such as bathing, and dry air and pollutants.In recent years, dry skin symptom and various related factors have been increased. The number of people who complain of disability is increasing.

한편, 화이트 루핀 추출물은 항노화용 화장료 조성물(대한민국 특허공개 제2002-0030263, 일본 공개특허 제2004-131500호, 일본 공개특허 제2001-031554호, 일본 공개특허 제1998-007518호)에 대해서 이미 공지되어 있으며, 또한 미백용 화장료 조성물(일본 공개특허 제2004-067593호, 일본 공개특허 제2001-335418호, 일본 공개특허 제1995-061915호)도 이미 공지되어 있으나, 피부 보습용에 대해서는 알려지지 않았다.Meanwhile, the white lupine extract is already known about an anti-aging cosmetic composition (Korean Patent Publication No. 2002-0030263, Japanese Laid-Open Patent Publication No. 2004-131500, Japanese Laid-Open Patent Publication No. 2001-031554, and Japanese Laid-Open Patent Publication No. 1998-007518). Moreover, the cosmetic composition for whitening (Unexamined-Japanese-Patent No. 2004-067593, Unexamined-Japanese-Patent No. 2001-335418, and Unexamined-Japanese-Patent No. 1995-061915) is already known, but it is not known about skin moisturizing.

본 발명의 목적은 표피 단백질과 세포간 지질 성분의 합성을 증가시키는 화이트 루핀 추출물을 이용하여 피부 내적으로 피부장벽을 강화시키고 또한 세라마이드를 더 추가하여 외적으로도 피부 건조를 방지하고 피부의 보습력을 높이며 피부장벽의 회복력을 개선시켜, 피부건조증상, 아토피증상을 포함하는 피부질환을 예방하고 그 증상을 더욱 개선하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.The purpose of the present invention is to enhance the skin barrier internally by using white lupine extract to increase the synthesis of epidermal protein and intercellular lipid components, and also by adding more ceramide to prevent dryness of the skin and increase the moisturizing ability of the skin. It is to provide a cosmetic composition that improves the resilience of the skin barrier, prevents skin diseases including skin dry symptoms and atopic symptoms and further improves the symptoms.

이하 본 발명을 보다 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

본 발명은 화이트 루핀(루피너스 알버스(lupinus albus))의 추출물을 함유하는 피부 보습용 화장료 조성물에 관한 것이다. 특히, 상기 추출물은 표피 단백질 및 세포간 지질, 세라마이드, 콜레스테롤, 디-/트리-글리세라이드의 생성을 증가시키는 것을 특징으로 한다.The present invention relates to a cosmetic composition for moisturizing skin containing an extract of white lupine (lupinus albus). In particular, the extract is characterized by increasing the production of epidermal protein and intercellular lipids, ceramides, cholesterol, di- / tri-glycerides.

루핀(Lupin)은 종자(곡물)를 생산하는 콩과의 식물로서, 루핀의 재배 역사는 2,000년 이상 되며 지중해성 기후 환경에서 곡물의 윤작(輪作) 생산에 포함되는 가치 있는 간작(間作) 작물이다. 봄 파종 화이트 루핀의 생육기간은 100 ~ 150일 정도이며, 월 최고기온이 15 ~ 25℃ 사이에서 잘 자란다. 재배되고 있는 대부분의 루핀은 -5 ~ -10℃ 에서는 월동이 가능하고 내상성(耐霜性)이 상당히 강하며 유식물기에는 -9℃까지도 견딜 수 있다. 루핀은 척박한 토양이나 산성 토양에 잘 자라기 때문에 청예나 사일리지용으로 재배되기도 하나 대부분의 루핀은 독성이 있거나 기호성을 떨어뜨리는 알칼로이드 함량이 높다. 이 알칼로이드들은 쓴맛을 내기 때문에 해충이나 가축의 방목으로부터 자신을 보호하는 기능이다. 옛날에는 종자를 침지하여 알칼로이드를 제거하였으나 1920년대 독일 육종학자에 의해서 사람이나 가축이 바로 먹을 수 있는 저 알칼로이드 또는 스윗 루핀 품종이 육성되어 있고 지금도 육성개발 중에 있다. Lupine is a legume plant that produces seeds (grains). Lupine has a cultivation history of more than 2,000 years and is a valuable crop crop that is involved in crop rotation in the Mediterranean climate. to be. Spring sowing white lupine has a growth period of 100 to 150 days, and the maximum monthly temperature grows well between 15 and 25 ℃. Most of the lupines cultivated are able to overwinter at -5 ~ -10 ℃, have a strong resistance to torsion and can withstand -9 ℃ in seedling plants. Because lupine grows well in poor or acidic soils, it can be grown for horticulture or silage, but most lupines are high in toxic or less palatable alkaloids. These alkaloids have a bitter taste, which protects them from pests and livestock grazing. In the old days, alkaloids were removed by immersing seeds, but low alkaloids or sweet lupine varieties, which were eaten by humans or livestock, were raised by German breeders in the 1920s, and are still being developed.

루핀 종자(곡물)는 높은 영양 가치를 갖는 단백질이 풍부하나 상대적으로 지방은 낮다. 대두로부터 유도되는 것(이하, "대두유" 및 "대두유제품"으로 호칭한다)과 유사하게, 루핀 곡물을 가축 사료나 우유와 같은 낙농 대체 제품으로 생산하기 위해 가공하려는 시도가 이전부터 있어 왔다. 또한, 인간식품의 많은 부분을 대체할 수 있는데 단백질과 카로틴이 높아서 제품의 영양가치를 높이는데 이용된다. 루핀의 껍질과 가루는 파스타와 빵의 재료로 쓰이며, 크런치, 과자, 아기분유, 죽과 샐러드에도 이용된다.Lupine seeds (grains) are high in protein with high nutritional value but relatively low in fat. Similar to what is derived from soybeans (hereinafter referred to as "soybean oil" and "soybean milk products"), attempts have been made to process lupine grains to produce dairy substitutes such as livestock feed or milk. It can also replace many parts of human foods, which are high in protein and carotene, which can be used to increase the nutritional value of a product. Lupine's skin and powder are used as ingredients for pasta and bread, as well as for crunch, snacks, baby formula, porridge and salads.

본 발명에서 이용되는 화이트 루핀 추출물은, 당업계에 공지된 다양한 방법을 통해 얻어질 수 있고, 바람직하게는 (a) 물, (b) 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올 (예: 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등), (c) 아세톤, (d) 에틸 아세테이트, (e) 클로로포름 또는 (f) 1,3-부틸렌글리콜을 추출 용매로 하여 상기 화이트 루핀으로부터 얻은 것이다. 보다 바람직하게는, 추출 용매는 에탄올이며, 가장 바람직하게는 약 70% 에탄올이다. The white lupine extract used in the present invention may be obtained through various methods known in the art, and preferably includes (a) water, (b) anhydrous or hydrous lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms (eg, methanol, Ethanol, propanol, butanol, and the like), (c) acetone, (d) ethyl acetate, (e) chloroform or (f) 1,3-butylene glycol as obtained from the white lupine. More preferably, the extraction solvent is ethanol, most preferably about 70% ethanol.

본 발명의 하기 제조예1 를 참조하여 화이트 루핀 추출물의 제조방법을 설명하면 다음과 같다: 건조된 화이트 루핀을 파쇄한 뒤, 여기에 그 건조 중량의 1-10배의 저급알코올을 첨가한다. 일정온도에서 수 일간 추출한 후 여과포로 여과하였다. 다시 여과지로 여과한 다음, 회전감압 증발기로 건조한다. 건조된 화이트 루핀 추출물 파우더를 글리콜, 바람직하게는 부틸렌 글리콜에 용해하여 사용한다. 한편, 본 발명의 추출물은 상기한 추출용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 화이트 루핀 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.Referring to the preparation method of the white lupine extract with reference to Preparation Example 1 of the present invention is as follows: After crushing the dried white lupine, low alcohol of 1-10 times its dry weight is added thereto. After extracting for several days at a constant temperature, it was filtered through a filter cloth. Filter again with filter paper and dry with a rotary evaporator. The dried white lupine extract powder is used by dissolving in glycol, preferably butylene glycol. On the other hand, it will be apparent to those skilled in the art that the extract of the present invention can be obtained not only the above-described extraction solvent, but also the white lupine extract having substantially the same effect using other extraction solvents.

또한, 본 발명의 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐 만 아니라, 통 상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 화이트 루핀 추출물에 포함되는 것이다.In addition, the extract of the present invention includes not only the extract by the above-described extraction solvent, but also an extract that has undergone a conventional purification process. Obtained by various additional purification methods, such as, for example, separation using ultrafiltration membranes having a constant molecular weight cut-off value, separation by various chromatography (manufactured for separation according to size, charge, hydrophobicity or affinity). The fraction is also included in the white lupine extract of the present invention.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 화이트 루핀 추출물은 조성물 전체 중량에 대해서 0.001 ~ 20중량% 함유함을 특징으로 한다. 바람직하게는 0.1 ~ 10 중량%, 더더욱 바람직하게는 1 ~ 5 중량%의 양으로 함유된다. 상기 추출물 함량이 0.001 중량% 미만인 경우에는 뚜렷한 효과가 없는 문제점이 있고, 20 중량% 초과인 경우는 함유량의 증가에 따른 뚜렷한 효과의 증가가 나타나지 않는다According to a preferred embodiment of the present invention, the white lupine extract is characterized in that it contains 0.001 to 20% by weight based on the total weight of the composition. It is preferably contained in an amount of 0.1 to 10% by weight, even more preferably 1 to 5% by weight. If the extract content is less than 0.001% by weight, there is a problem that there is no obvious effect, and when the extract content is more than 20% by weight, there is no apparent increase in effect with the increase of the content.

또한, 본 발명의 화장료 조성물에서 유효 성분으로서 사용되는 세라마이드는 특별히 한정하지는 않지만, 동,식물기원의 세레브로시드와 효모기원의 각각의 세라마이드, 예를 들어, 세라마이드 I, 세라마이드 II, 세라마이드 III, 세라마이드 IV, 세라마이드 V, 세라마이드 VI의 유도체 중에서 1종 이상을 혼합하여 사용할 수 있다. 본 발명의 세라마이드는 프랑스 세로바이올로지크(Serobiologiques)사의 세라마이드 LS 3773을 사용하였다. In addition, the ceramide used as an active ingredient in the cosmetic composition of the present invention is not particularly limited, but each ceramide of the cerebroside and yeast origin of the plant, plant origin, for example, ceramide I, ceramide II, ceramide III, ceramide One or more kinds of derivatives of IV, ceramide V and ceramide VI can be used in combination. Ceramide of the present invention was used ceramide LS 3773 of Serobiologiques, France.

한편, 세라마이드 화합물의 함량은 전체 화장료 조성물에 대하여 0.0001 ~ 20.0 중량%가 일반적이며, 바람직하게는 0.0005 ~ 15.0 중량%이고, 보다 바람직하게는 0.005 ~ 10 중량%이다. 만일, 함량이 0.0001 중량% 미만인 경우에는 뚜렷한 효과가 없는 문제점이 있고, 20 중량% 초과인 경우는 함유량의 증가에 따른 뚜렷한 효과의 증가가 나타나지 않는다.On the other hand, the content of the ceramide compound is generally 0.0001 to 20.0% by weight based on the total cosmetic composition, preferably 0.0005 to 15.0% by weight, more preferably 0.005 to 10% by weight. If the content is less than 0.0001% by weight, there is a problem that there is no obvious effect, when the content is more than 20% by weight does not appear to increase the apparent effect of the increase in content.

상기 화이트 루핀 추출물과 세라마이드를 함유하는 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이크림, 영양크림, 마사지크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 파우더, 에센스, 팩 등 그 제형에 있어 특별히 한정되지 않고 화장료의 제형 또는 사용 목적 등에 따라 제조될 수 있다.The cosmetic composition containing the white lupine extract and ceramide may be prepared in any formulation commonly prepared in the art, for example, softening cream, astringent makeup, nourishing cosmetic, eye cream, nutrition cream, massage cream, The cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, powder, essence, pack, and the like are not particularly limited, and may be prepared according to the formulation or purpose of use of the cosmetic.

(제조예 1)화이트 루핀 추출물의 제조Preparation Example 1 Preparation of White Lupine Extract

지질을 함유하지 않는 분쇄된 화이트 루핀을 이용하여 이것을 1 ㎏되게 무게를 측정한 후 에틸알코올 및 물이 7:3으로 섞여져 있는 수용액에 침전시켜 5일간 방치한다. 방치 후 300메쉬를 이용하여 여과하고 이 여과액을 진공 감압 농축기를 이용하여 80℃에서 농축시킨다. 이렇게 하여 얻어진 화이트 루핀 추출물 파우더를 다시 제품에 적용하기 용이하게 50% 1,3-부틸렌 글리콜에 용해하여 사용하였다.It is weighed to 1 kg using pulverized white lupine that does not contain lipid, and then precipitated in an aqueous solution containing ethyl alcohol and water at 7: 3 and left for 5 days. After standing, the mixture was filtered using 300 mesh and the filtrate was concentrated at 80 ° C. using a vacuum vacuum concentrator. The white lupine extract powder thus obtained was used after being dissolved in 50% 1,3-butylene glycol for easy application to the product again.

(실험예 1)화이트 루핀 추출물의 세포독성 시험Experimental Example 1 Cytotoxicity Test of White Lupine Extract

화장품에 사용되는 원료로서 1차 안전성을 검증하고자, 본 발명의 화이트 루핀 추출물에 대하여 V79-4세포(차이니스 햄스터, 폐조직 섬유 아세포의 연속 세포주)를 배양하여 MTT 시험(참고문헌: Mossman T. (1983). Rapid colorimetric assay for cellular growth & survival: application to proliferation & cytotoxicity assays. Journal of Immunological Methods, 65, 55-63)을 수행하여 세포독성을 시험하였으며, 그 결과를 표 1에 나타내었다.In order to verify the primary safety as a raw material used in cosmetics, the white lupine extract of the present invention by culturing V79-4 cells (Chinese hamster, lung tissue fibroblasts continuous cell line) MTT test (Reference: Mossman T. (1983) Rapid colorimetric assay for cellular growth & survival: application to proliferation & cytotoxicity assays.Journal of Immunological Methods, 65, 55-63) was performed to test the cytotoxicity, the results are shown in Table 1.

시 료sample aIC50(%, W/V) a IC 50 (%, W / V) 소디움라우릴설페이트(SLS)Sodium Lauryl Sulfate (SLS) 0.0050.005 화이트 루핀 추출물White lupine extract 2.52.5

aIC50:Inhibitory Concentration 50, 50%의 세포를 사멸시키는 농도 a IC 50 : Inhibitory Concentration 50, concentration killing 50% of cells

표 1에서 보는 바와 같이, 본 발명에 따른 화이트 루핀 추출물의 IC50 값은 2.5로 소디움라우릴설페이트에 비하여 500배 이상 세포독성이 낮아 안전성이 우수함을 알 수 있다. As shown in Table 1, IC 50 of the white lupine extract according to the present invention The value is 2.5, which is more than 500 times lower than cytotoxicity compared to sodium lauryl sulfate, it can be seen that the excellent safety.

(실험예 2)사람 각질 형성세포의 분화유도 시험Experimental Example 2 Differentiation Induction Test of Human Keratinocytes

사람 각질 형성세포의 분화시 생성되는 각화 외피(Cornified Envelop)의 양을 측정하여 화이트 루핀 추출물의 세포분화 촉진효과를 시험하였다. 일차 배양한 사람의 각질 형성세포를 배양용 플라스크에 넣어 바닥에 부착시킨 후, 하기 표 2의 화이트 루핀 추출물을 비롯한 시험물질들을 표 2에 제시한 농도로 배양액에 첨가하여, 세포가 바닥 면적의 70~80% 정도 자랄 때까지 5일간 배양하였다. The effect of promoting the differentiation of white lupine extract was measured by measuring the amount of Cornified Envelop produced during the differentiation of human keratinocytes. The keratinocytes of the primary cultured person were put in a culture flask and attached to the bottom, and then test substances, including the white lupine extract of Table 2, were added to the culture solution at the concentrations shown in Table 2, whereby the cells were 70% of the floor area. Incubated for 5 days until the growth of ~ 80%.

이 세포를 수확(cell harvest)하여 포스페이트 완충 식염수(phosphate buffered saline, PBS)로 세척한 뒤, 2% 소디움 도데실 설페이트(Sodium Dodecyl Sulfate, SDS)와 20mM 농도의 디티오스레이톨(Dithiothreitol, DTT)을 함유한 10mM 농도의 트리스-염산 완충액(Tris-HCl, pH 7.4) 1㎖를 가하여 소니케이션(sonication), 보일링(boiling), 원심분리한 침전물을 다시 PBS 1㎖에 현탁시켜 340nm에서의 흡광도를 측정한다. 이와 별도로 상기 소니케이션 후의 용액 일부를 취하여 단백질 함량을 측정하여, 세포분화정도의 평가시 기준으로 삼는다. The cells were harvested and washed with phosphate buffered saline (PBS), followed by 2% Sodium Dodecyl Sulfate (SDS) and 20 mM Dithiothreitol (DTT). 1 ml of 10 mM Tris-HCl (Tris-HCl, pH 7.4) was added and the sonication, boiling and centrifuged precipitates were again suspended in 1 ml of PBS and absorbed at 340 nm. Measure Separately, a portion of the solution after the sonication is taken to measure the protein content and used as a reference for the evaluation of the degree of cell differentiation.

저칼슘(0.03mM) 처리군과 고칼슘(1.30mM) 처리군을 각각 음성/양성 대조군으로 하고, 저칼슘 농도에 화이트 루핀 추출물을 첨가하여 실시한 시험 결과를 하기 표 2에 나타내었다. 도 1은 각질 형성세포의 분화 정도를 도시한 것이다. 시험결과, 화이트 루핀 추출물을 처리하였을 때 양성 대조군으로 쓰인 고칼슘 처리군과 비슷한 정도로 각질형성이 증가하였음을 알 수 있다.The low calcium (0.03 mM) treated group and the high calcium (1.30 mM) treated group were negative / positive controls, respectively, and the test results performed by adding white lupine extract to the low calcium concentration are shown in Table 2 below. 1 shows the degree of differentiation of keratinocytes. As a result, the treatment of white lupine extract showed that keratinogenesis increased to a similar degree as the high calcium treated group used as a positive control.

화이트 루핀 추출물White lupine extract 분화능(%)Differentiation capacity (%) 대조군Control 저칼슘(0.03mM)Low Calcium (0.03mM) 100100 고칼슘(1.30mM)High Calcium (1.30mM) 175175 시험물질 처리군Test substance treatment group 화이트 루핀 0.5%White Lupine 0.5% 105105 화이트 루핀 2.0%White Lupine 2.0% 131131 화이트 루핀 3.0%White Lupine 3.0% 158158

(실험예 3)필라그린 유전자 발현량의 측정Experimental Example 3 Measurement of Filaggrin Gene Expression

사람 각질형성세포를 배양한 후, 화이트 루핀 추출물 3.0%를 2일간 처리한 후, 세포로부터 AGPC법으로 RNA를 추출하였다. 이들 RNA에 대하여 다음과 같이 RT-PCR을 실시하였다. 필라그린에 특이한 프라이머를 McKinley-Grant L.J. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 86, 4848-4852(1989)가 보고하고 있는 필라그린의 염기서열에 따라 작성하였다. RT-PCR은 mRNA를 한번에 역전사 효소로 cDNA로 하고, 이를 주형으로 하여 상기 프라이머를 사용하여 폴리머라아제 반응(공지된 반응)을 실시하여 필라그린의 mRNA를 측정하였다. PCR 산물은 아가로오스 겔로 전기영동하고, 전기영동 후의 겔을 에티듐브로마이드 용액에 침지시킨 후에 DNA를 측정하였다. DNA 밴드의 정량은 NIH 이미지(해석 프로그램)를 사용하여 실시하였다. 보정은 글리셀알데히드-3-인산 디히드로게나아제(G3PDH)를 사용하여 실시하였다. 도 2는 RT-PCR 방법에 의하여 발현되는 필라그린의 양을 보여주고 있다. 이 때, 음성 대조군은 저칼슘 처리군이며, 양성 대조군은 고칼슘 처리군을 사용하였으며, 화이트 루핀 추출물은 저칼슘 처리군에 첨가하여 시험하였다. 도 2에서 보는 바와 같이 화이트 루핀 추출물을 처리한 각질형성세포에서의 필라그린 발현이 월등하게 증가하는 결과를 나타내었다. 따라서 이와 같은 천연보습인자의 전구체인 필라그린의 합성이 증가하는 결과로부터 천연보습인자의 증가를 간접적으로 확인할 수 있었다.After culturing human keratinocytes, 3.0% of white lupine extract was treated for 2 days, and RNA was extracted from the cells by AGPC method. RT-PCR was performed on these RNAs as follows. Primers specific for filaggrins are described in McKinley-Grant L.J. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 86, 4848-4852 (1989) reported in accordance with the nucleotide sequence of filaggrin. RT-PCR measured the mRNA of filaggrin by performing a polymerase reaction (known reaction) using the said primer as a template and using this primer as cDNA. The PCR product was electrophoresed with an agarose gel, and the DNA after electrophoresis was immersed in an ethidium bromide solution. Quantification of DNA bands was performed using NIH images (interpretation programs). Calibration was carried out using glycelaldehyde-3-phosphate dehydrogenase (G3PDH). Figure 2 shows the amount of filaggrin expressed by the RT-PCR method. At this time, the negative control group was a low calcium treated group, the positive control group was used a high calcium treated group, and the white lupine extract was added to the low calcium treated group and tested. As shown in FIG. 2, the filaggrin expression in keratinocytes treated with the white lupine extract was significantly increased. Therefore, the increase of the natural moisturizing factor was indirectly confirmed from the result of the increase in the synthesis of the filaggrin, a precursor of the natural moisturizing factor.

(실험예 4)무모생쥐에서 피부장벽 손상 후 회복력 시험효과Experimental Example 4 Effect of resilience test after skin barrier injury in hairless mice

화이트 루핀 추출물이 장기간의 피부손상으로 인한 피부장벽의 회복에 미치는 효과를 평가하기 위해 실시예 1, 2및 비교예 1, 2를 제조하였다. 제조 방법은 다음과 같다. 1) 1-7을 교반하면서 70℃로 가온하여 유상 용액을 만든다. 2) 정제수에 8-11을 넣어 교반하면서 70℃로 가온하여 수상 용액을 만든다. 3) 상기 2)에 유상 용액인 1)과 원료 12를 혼합한 후 유화시켜 냉각한다. 4) 상기 3)에 원료 14-15를 첨가하여 혼합하고 30℃까지 냉각시켜 얻는다.Examples 1 and 2 and Comparative Examples 1 and 2 were prepared to evaluate the effect of the white lupine extract on the recovery of the skin barrier due to prolonged skin damage. The manufacturing method is as follows. 1) Warm 1-7 to 70 ° C while stirring to form an oily solution. 2) Add 8-11 to purified water and warm it to 70 ℃ while stirring to make an aqueous solution. 3) The oily solution 1) and the raw material 12 are mixed with 2), and then emulsified and cooled. 4) The raw material 14-15 is added to 3), mixed, and cooled to 30 ° C.

성 분ingredient 함량 (중량%)Content (% by weight) 실시예 1Example 1 실시예 2Example 2 비교예 1Comparative Example 1 비교예 2Comparative Example 2 1. 바셀린1. Vaseline 7.07.0 7.07.0 7.07.0 7.07.0 2. 유동파라핀2. Liquid paraffin 10.010.0 10.010.0 10.010.0 10.010.0 3. 밀납3. Beeswax 2.02.0 2.02.0 2.02.0 2.02.0 4. 폴리솔베이트-604. Polysorbate-60 2.02.0 2.02.0 2.02.0 2.02.0 5. 솔비탄세스퀴올레이트5. Solbitan Sesquioleate 2.52.5 2.52.5 2.52.5 2.52.5 6. 스쿠알란6. Squalane 3.03.0 3.03.0 3.03.0 3.03.0 7. 세라마이드7. Ceramide 2.02.0 -- 2.02.0 -- 8. 글리세린8. Glycerin 4.04.0 4.04.0 4.04.0 4.04.0 9. 프로필렌글리콜 9. Propylene Glycol 6.06.0 6.06.0 6.06.0 6.06.0 10. 카르복시비닐폴리머10. Carboxyvinyl Polymer 0.50.5 0.50.5 0.50.5 0.50.5 11. 토코페롤아세테이트11.Tocopherol Acetate 0.10.1 0.10.1 0.10.1 0.10.1 12. 트리에탄올아민12. Triethanolamine 0.50.5 0.50.5 0.50.5 0.50.5 13. 정제수13. Purified water To 100To 100 To 100To 100 To 100To 100 To 100To 100 14. 화이트 루핀 추출물14. White Lupine Extract 3.03.0 3.03.0 -- -- 15. 향, 방부제15. Incense, Preservative 미량a very small amount 미량a very small amount 미량a very small amount 미량a very small amount

피부장벽 손상의 방법으로 아세톤을 도포하였다. 8-12주 된 무모생쥐의 배부에 아세톤을 점적하여 경표피수분손실량 (TEWL: transepidermal water loss)이 도달하면, 상기 표 3의 실시예 1, 2와 비교예 1, 2의 시료를 5cm2 면적으로 도포하였다. TEWL은 C-K (Courage+Khazaka, Cologne, 독일국)사의 수분증발량기(evaporimeter)인 Tewameter TM 210으로 측정하였다. 도포 6시간 경과 후에 TEWL을 측정하여 TEWL이 감소되는 정도를 평가함으로써 피부장벽 기능이 회복되는 정도를 평가하였다. 평가에 사용된 회복율 계산은 다음 식 1과 같이 계산하였고 그 결과를 표 4에 나타내었다.Acetone was applied as a method of skin barrier damage. When transepidermal water loss (TEWL) was reached by dropping acetone into the embryo of 8-12 week old hairless mice, the samples of Examples 1 and 2 and Comparative Examples 1 and 2 of Table 3 were 5 cm 2. The area was applied. TEWL was measured by Tewameter TM 210, an evaporimeter from CK (Courage + Khazaka, Cologne, Germany). After 6 hours of application, TEWL was measured to evaluate the extent to which TEWL was reduced to evaluate the extent to which skin barrier function was restored. Recovery rate calculation used in the evaluation was calculated as in the following equation 1 and the results are shown in Table 4.

(수학식 1)(Equation 1)

Br(Barrier Recovery) = ( 1 - (Bt =6 - Bt =0 )/(Bt =d - Bt =0)) * 100Br (Barrier Recovery) = (1-(B t = 6 -B t = 0 ) / (B t = d -B t = 0 )) * 100

Bt =6:피부장벽 손상 후 6시간 경과 후의 TEWL 측정값B t = 6 : TEWL measured 6 hours after skin barrier damage

Bt =0:피부장벽 손상 이전의 TEWL 측정값B t = 0 : TEWL measurement before skin barrier damage

Bt =d:피부장벽 손상 직후의 TEWL 측정값B t = d : TEWL measured immediately after skin barrier damage

적용 시료Application Sample 6시간 경과 (초기 TEWL 기준)6 hours elapsed (based on initial TEWL) 실시예 1Example 1 64.264.2 실시예 2Example 2 50.350.3 비교예 1Comparative Example 1 35.1 35.1 비교예 2Comparative Example 2 20.420.4

상기 표 4의 결과를 살펴보면, 화이트 루핀 추출물을 포함하는 실시예 2의 경우 세라마이드를 포함하는 비교예 1과 세라마이드와 화이트 루핀 추출물을 모두 포함하고 있지 않은 비교예 2보다 피부장벽 손상 후 회복효과가 더 뛰어남을 알 수 있다. 또한, 화이트 루핀 추출물에 세라마이드가 함유된 실시예 1의 경우, 세라마이드와의 시너지 효과에 의해 화이트 루핀 추출물만을 포함하는 실시예 2보다 피부장벽 손상 후 회복효과가 더 우수한 것을 알 수 있다.Looking at the results of Table 4, in the case of Example 2 containing a white lupine extract compared to Comparative Example 1 containing a ceramide and Comparative Example 2 does not include both ceramide and white lupine extract recovery effect after skin barrier damage You can see the excellent. In addition, in the case of Example 1 containing the ceramide in the white lupine extract, the synergistic effect with the ceramide, it can be seen that the recovery effect after the skin barrier damage is better than Example 2 containing only the white lupine extract.

(실험예 5)Experimental Example 5

상기 실시예 1, 2 및 비교예 1에서 제조된 각 화장료 조성물의 보습력을 평가하기 위하여, 각 화장료가 도포된 피부를 대상으로 하여 수분 보유능 및 수분 증발량을 다음과 같이 측정하였다.In order to evaluate the moisturizing power of each cosmetic composition prepared in Examples 1, 2 and Comparative Example 1, the moisture retention capacity and the water evaporation amount were measured as follows on the skin to which each cosmetic was applied.

실험예 5-1: 인체 적용시 수분 보유능 평가Experimental Example 5-1: Evaluation of Water Retention Capacity in Human Application

수분 보유능 측정은 Corneometer (Courage + Khazaka, GmbH, Germany)를 사용하여 피부 표면의 전기 전도도를 측정하였으며, 측정온도는 25℃, 40% 상대습도를 유지하는 항온항습실에서 실시예 1, 2 및 비교예 1에서 제조된 각 화장료를 30명의 피시험자 하박 안쪽에 일정량 (0.03g/16cm2 )을 도포하고 도포 전, 도포 1시간 후 및 도포 2시간 후의 피부의 수분함량을 측정하였으며, 아무런 처리를 하지 않은 정상 피부를 대조군으로 사용하였다. 그 결과는 다음 표 5에 나타내었다.Moisture retention was measured by using Corneometer (Courage + Khazaka, GmbH, Germany) to measure the electrical conductivity of the skin surface, Example 1, 2 and Comparative Example in a constant temperature and humidity room maintained at 25 ℃, 40% relative humidity Each cosmetic product prepared in 1 was coated with a predetermined amount (0.03 g / 16 cm 2 ) in the lower half of 30 test subjects, and the moisture content of the skin was measured before application, after 1 hour of application, and after 2 hours of application. Normal skin was used as a control. The results are shown in Table 5 below.

구분division 실시예 1Example 1 실시예 2Example 2 비교예 1Comparative Example 1 대조군Control 도포전 피부 전기전도도Skin electrical conductivity before application 4747 4747 4747 4747 도포 1시간 후 피부 전기전도도Skin electrical conductivity 1 hour after application 8080 7575 7070 4747 도포 2시간 후 피부 전기전도도Skin conductivity after 2 hours of application 7373 6262 5555 4747

실험예 5-2: 수분 증발량의 측정Experimental Example 5-2: Measurement of Water Evaporation Amount

팔의 상박 부위에 테입 스트리핑 (tape stripping)을 실시하여 피부의 방어막을 약화시킨 후, 실험예 5-1과 동일한 방법으로 피실험자에게 각 화장료를 도포한 후, C-K (Courage+Khazaka, Cologne, 독일국)사의 수분증발량기(evaporimeter)인 Tewameter TM 210를 이용하여 12 시간마다 1분 간격으로 5회씩 수분 증발량을 측정하여 평균값을 구하였다. 그 결과는 하기 표 6과 같다.After tape stripping on the upper arm of the arm to weaken the skin's protective film, apply the cosmetic to the subject in the same manner as in Experiment 5-1, and then apply CK (Courage + Khazaka, Cologne, Germany). Using Tewameter TM 210, an evaporator, the water vapor evaporation was measured 5 times at 1 minute intervals every 12 hours to obtain an average value. The results are shown in Table 6 below.

구분division 실시예 1 (%)Example 1 (%) 실시예 2 (%)Example 2 (%) 비교예 1 (%)Comparative Example 1 (%) 대조군 (%)Control (%) 0시간 후 수분증발량Moisture evaporation after 0 hours 100.0100.0 100.0100.0 100.0100.0 100.0100.0 12시간 후 수분증발량Water evaporation after 12 hours 65.865.8 78.478.4 80.380.3 92.692.6 24시간 후 수분증발량Water evaporation after 24 hours 45.345.3 62.762.7 70.170.1 89.989.9 36시간 후 수분증발량Water evaporation after 36 hours 43.243.2 55.455.4 64.964.9 83.383.3 48시간 후 수분증발량Water evaporation after 48 hours 40.540.5 50.050.0 58.858.8 77.877.8

상기 실험예의 결과에서 보듯이, 본 발명의 화이트 루핀 추출물을 함유하는 실시예 2이 비교예 1에 비해서 피부 전기 전도도가 높고, 적은 수분 손실량을 나타낸다. 또한 화이트 루핀 추출물과 세라마이드를 함유하는 실시예 1의 화장료는 실시예 2, 비교예 1의 화장료에 비해서 더욱 우수한 보습 효과를 나타냄을 알 수 있다.As shown in the results of the above experimental example, Example 2 containing the white lupine extract of the present invention has a higher skin electrical conductivity than the comparative example 1, and shows a small amount of water loss. In addition, it can be seen that the cosmetic composition of Example 1 containing white lupine extract and ceramide shows a more excellent moisturizing effect than the cosmetics of Example 2 and Comparative Example 1.

(실험예 6)세포간 지질 생성능 시험Experimental Example 6 Intercellular Lipid Formation

화이트 루핀 추출물의 세포간 지질의 구성 성분, 세라마이드, 콜레스테롤, 디-/트리-글리세라이드의 생성능을 증가시키는지 알아보았다. 상기 실험예 4에서 3일 동안 화이트 루핀 추출물만을 함유한 실시예 2를 처치한 실험동물의 피부 조직을 8mm 펀치로 절편 하여 0.25% 트립신을 함유한 PBS 용액이 담겨있는 페트리 디쉬 (Petri Dish)에 진피가 아래로 가도록 하여 담근 다음 상온에서 90~120분 동안 방치하였다. 표피층을 조직에서 분리하고, 증류수로 세척한 후 여과지를 이용하여 물기를 제거한 뒤 중량을 측정하였다. 거의 건조된 각질을 블라이-다이어 용액(Bligh-Dyer, 메탄올:클로로포름:물=4:2:1.6) 5ml에 넣어 교반 후 하루 동안 방치한 다음, 부유액을 모으고, 다시 각질층을 포함하고 있는 침전물에 CHCl 3 :MeOH (2:1) 용액을 4ml 첨가하여 교반한 후, 별도로 모아 둔 부유액과 함께 여과지로 여과하였다. 여과액에 다시 증류수 6ml을 넣어 교반한 후, 2000rpm으로 10 분간 원심분리한 하층액만을 취해 35 ℃에서 질소가스로 건조시키고 CHCl 3 :MeOH (2:1) 용액 일정량에 녹여 보관하였다. 각시료들을 CAMAG사의 자동 TLC(Thin Layer chromatography) 샘플러-4를 이용하여 실리카겔 TLC 판에 점적하고, AMD(자동 다중 전개)를 이용하여 표 7과 같은 조성비의 전개 용매로 전개하였다.We investigated whether white lupine extract increased the constituents of intercellular lipids, ceramides, cholesterol, and di- / tri-glycerides. The skin tissue of the experimental animal treated with Example 2 containing only white lupine extract for 3 days in Experimental Example 4 was sectioned with an 8 mm punch to dermis in a Petri dish containing PBS solution containing 0.25% trypsin. After soaking to go down and left for 90 to 120 minutes at room temperature. The epidermal layer was separated from the tissue, washed with distilled water, and then drained using a filter paper, and weighed. The dried keratin is placed in 5 ml of Bligh-Dyer (methanol: chloroform: water = 4: 2: 1.6), left to stir for one day after stirring, and then the suspended solids are collected. 3: 4 ml of a solution of MeOH (2: 1) was added thereto, followed by stirring, followed by filtration with a filter paper together with the suspended solids collected separately. 6 ml of distilled water was again added to the filtrate, followed by stirring. Only the lower layer was centrifuged at 2000 rpm for 10 minutes, dried with nitrogen gas at 35 ° C., and dissolved in a predetermined amount of CHCl 3: MeOH (2: 1) solution. Each sample was deposited on a silica gel TLC plate using CAMAG's automated thin layer chromatography (TLC) Sampler-4, and developed using a developing solvent having a composition ratio as shown in Table 7 using AMD (automatic multiple development).

전개 용매조성(ml)Development solvent composition (ml) 용매 이동거리 (cm)Solvent Travel Distance (cm) 1차Primary 클로로폼 50 아세톤 20 메탄올 30Chloroform 50 Acetone 20 Methanol 30 55 2차Secondary 클로로폼 70 아세톤 5 메탄올 25Chloroform 70 Acetone 5 Methanol 25 77 3차3rd 클로로폼 72 에테르 6 에틸아세테이트 20 메탄올 2Chloroform 72 Ether 6 Ethyl Acetate 20 Methanol 2 99

TLC 판을 전개 시킨 후 TLC 스캐너-II(CAMAG 사: 덴시토미터)를 이용하여 570nm 파장에서 각 밴드의 크기를 측정하였다. 비교예 2 처리군의 세라마이드, 콜레스테롤, 디-/트리-글리세라이드 생성량을 100%로 환산하여 실시예 2를 처치한 군의 각질세포간 지질 생성량을 도 3에 나타내었다.After the TLC plate was developed, the size of each band was measured at a wavelength of 570 nm using a TLC scanner-II (a denserometer manufactured by CAMAG). Comparative Example 2 The amount of lipid generation between keratinocytes of the group treated with Example 2 in terms of the amount of ceramide, cholesterol, di- / tri-glyceride produced in the treated group was shown in FIG. 3.

도 3에서 보는 바와 같이, 아세톤에 의하여 피부장벽이 손상되고, 피부표피층의 지질이 많이 소실되어 있는 상태에서 실시예 2를 처치한 군의 세포간 지질 생성량이 비교예 2에 비하여 현저하게 증가되고 이는 장벽손상이 회복되어 지질의 재생산이 월등히 증가됨을 나타낸다.As shown in Figure 3, the skin barrier is damaged by acetone, the amount of intercellular lipids in the group treated with Example 2 is significantly increased compared to Comparative Example 2 in the state that the lipids of the skin epidermal layer is largely lost. Barrier damage is restored, indicating a significant increase in the reproduction of lipids.

(실험예 7)아토피성 피부염 개선 효과Experimental Example 7 Atopic Dermatitis Improvement Effect

아토피 증상 개선효과 측정시험은 전부터 아토피 증상, 예컨대 가려움, 진무름, 심한 건조증이라 진단 받았거나, 육안관찰로 아토피 유사 증상을 보이는 10대-50대 사이의 40명을 대상으로 하여 상기의 실시예 1, 2와 비교예 1, 2를 그룹당 10명에게 제공하고, 아토피 증상을 보이는 부위에 4주 동안 도포하게 하였다. 효능 평가는 4주 처치 후 설문 조사를 통해 개선 정도를 본인이 주관적으로 판단하게 하였고, 그 결과를 하기 표 8에 나타내었다.Atopic dermatitis improvement effect measurement test for a 40-year-old people in their teens to 50s who have been diagnosed with atopic symptoms such as itching, erosion, severe dryness or showing atopic-like symptoms by visual observation 2 and Comparative Examples 1 and 2 were given to 10 people per group and allowed to be applied to the site showing atopic symptoms for 4 weeks. Efficacy evaluation was a subject after a four-week treatment questionnaire subjective judgment of the degree of improvement, the results are shown in Table 8 below.

도포군Applicator 응답자 수 (인)Respondents (Personal) 매우 양호Very good 양호Good 보통usually 미흡Inadequate 실시예 1Example 1 44 55 1One 실시예 2Example 2 33 44 22 1One 비교예 1Comparative Example 1 22 44 33 1One 비교예 2Comparative Example 2 1One 22 55 22

평가 결과 화이트 루핀 추출물과 세라마이드가 함유된 제형을 도포한 실시예 1이 실시예 2와 비교예 1, 2보다 전반적으로 가려움이나 짓무름 등의 아토피 증상이 더 개선되었음을 알 수 있다.As a result, it can be seen that Example 1, which is coated with a formulation containing white lupine extract and ceramide, has improved atopic symptoms such as itching and rash more than Examples 2 and Comparative Examples 1 and 2.

이하, 본 발명의 화이트 루핀 추출물과 세라마이드를 함유하는 화장료 조성물에 대한 다양한 제형예는 통상적인 화장품 분야에서 제조 방법에 따라 제조한다. 그러나, 본 발명의 조성물이 하기의 제형예들로 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, various formulation examples for the cosmetic composition containing the white lupine extract and ceramide of the present invention are prepared according to a manufacturing method in the conventional cosmetic field. However, the composition of the present invention is not limited to the following formulation examples.

(제형예 1) 유연화장수 (스킨 로션) 제조Formulation Example 1 Manufacturing Softener (Skin Lotion)

본 발명의 화이트 루핀 추출물과 세라마이드를 함유하는 유연 화장수를 제조하기 위해 하기 표 9에 기재된 것처럼 배합하여 통상적인 화장품 분야에서의 제조 방법에 따라 제조한다.To prepare a flexible lotion containing the white lupine extract and the ceramide of the present invention, it is combined as described in Table 9, and prepared according to the manufacturing method in the conventional cosmetic field.

배합성분Ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 세라마이드Ceramide 0.20.2 1,3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 6.06.0 글리세린glycerin 4.04.0 올레일알코올Oleyl alcohol 0.10.1 폴리솔베이트 20Polysorbate 20 0.50.5 에탄올ethanol 15.015.0 벤조페논-9Benzophenone-9 0.050.05 화이트 루핀 추출물White lupine extract 1.01.0 향, 방부제Incense, preservative 미량a very small amount 정제수Purified water To 100To 100

(제형예 2) 영양 화장수 (밀크 로션) 제조Formulation Example 2 Preparation of Nourishing Lotion (Milk Lotion)

본 발명의 화이트 루핀 추출물과 세라마이드를 함유하는 영양 화장수를 제조하기 위해 하기 표 10에 기재된 것처럼 배합하여 통상적인 화장품 분야에서의 제조 방법에 따라 제조한다.To prepare a nourishing lotion containing the white lupine extract and ceramide of the present invention, it is combined as described in Table 10 and prepared according to a manufacturing method in a conventional cosmetic field.

배합성분Ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 세라마이드Ceramide 0.30.3 프로필렌글리콜Propylene glycol 6.06.0 글리세린glycerin 4.04.0 트리에탄올아민Triethanolamine 1.21.2 토코페닐아세테이트Tocophenyl Acetate 3.03.0 유동파라핀Liquid paraffin 5.05.0 스쿠알란Squalane 3.03.0 마카다미아너트오일Macadamia Nut Oil 2.02.0 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.51.5 솔비탄세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 1.01.0 산탄검Xanthan Gum 0.30.3 화이트 루핀 추출물White lupine extract 2.02.0 향, 방부제Incense, preservative 미량a very small amount 정제수Purified water To 100To 100

(제형예 3) 영양 크림 제조Formulation Example 3 Preparation of Nutritional Cream

본 발명의 화이트 루핀 추출물과 세라마이드를 함유하는 영양 크림을 제조하기 위해 하기 표 11에 기재된 것처럼 배합하여 통상적인 화장품 분야에서의 제조 방법에 따라 제조한다.To prepare a nourishing cream containing the white lupine extract and ceramide of the present invention, it is combined as described in Table 11 and prepared according to a conventional manufacturing method in the cosmetic field.

배합성분Ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 세라마이드Ceramide 0.50.5 바셀린vaseline 7.07.0 유동파라핀Liquid paraffin 10.010.0 밀납Beeswax 2.02.0 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 2.52.5 솔비탄세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 1.51.5 스쿠알란Squalane 3.03.0 프로필렌글리콜Propylene glycol 6.06.0 글리세린glycerin 4.04.0 트리에탄올아민Triethanolamine 0.50.5 산탄검Xanthan Gum 0.50.5 토코페닐아세테이트Tocophenyl Acetate 0.10.1 화이트 루핀 추출물White lupine extract 3.03.0 향, 방부제Incense, preservative 미량a very small amount 정제수Purified water To 100To 100

(제형예 4) 마사지 크림 제조Formulation Example 4 Preparation of Massage Cream

본 발명의 화이트 루핀 추출물과 세라마이드를 함유하는 마사지 크림을 제조하기 위해 하기 표 12에 기재된 것처럼 배합하여 통상적인 화장품 분야에서의 제조 방법에 따라 제조한다.To prepare a massage cream containing the white lupine extract and ceramide of the present invention, it is combined as described in Table 12 and prepared according to a manufacturing method in a conventional cosmetic field.

배합성분Ingredient 중량부 (%)Parts by weight (%) 세라마이드Ceramide 0.30.3 프로필렌글리콜Propylene glycol 6.06.0 글리세린glycerin 4.04.0 트리에탄올아민Triethanolamine 0.50.5 밀납Beeswax 2.02.0 토코페닐아세테이트Tocophenyl Acetate 0.10.1 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 3.03.0 솔비탄세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 2.52.5 세테아릴알코올Cetearyl Alcohol 2.02.0 유동파라핀Liquid paraffin 30.030.0 산탄검Xanthan Gum 0.50.5 화이트 루핀 추출물White lupine extract 2.02.0 향, 방부제Incense, preservative 미량a very small amount 정제수Purified water To 100To 100

(제형예 5) 팩 제조Formulation Example 5 Pack Preparation

본 발명의 화이트 루핀 추출물과 세라마이드를 함유하는 팩을 제조하기 위해 하기 표 13에 기재된 것처럼 배합하여 통상적인 화장품 분야에서의 제조 방법에 따라 제조한다.To prepare a pack containing white lupine extract and ceramide of the present invention, it is combined as described in Table 13 below, and prepared according to a manufacturing method in a conventional cosmetic field.

배합성분Ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 세라마이드Ceramide 0.10.1 프로필렌글리콜Propylene glycol 2.02.0 글리세린glycerin 4.04.0 폴리비닐알코올Polyvinyl alcohol 10.010.0 에탄올ethanol 7.07.0 파이지-40 히드로게비이티드 캐스터 오일Fiji-40 Hydrogenated Castor Oil 0.80.8 트리에탄올아민Triethanolamine 0.30.3 화이트 루핀 추출물White lupine extract 2.02.0 향, 방부제Incense, preservative 미량a very small amount 정제수Purified water To 100To 100

본 발명은 화이트 루핀 추출물을 함유하는 화장료 조성물로서 표피 단백질 합성을 촉진하고 세포간 지질 성분인 세라마이드, 콜레스테롤, 디-/트리-글리세라이드의 합성을 증가시켜 피부 건조를 방지하고 피부의 보습력을 높이며 피부장벽의 회복력을 개선시키는 것을 특징으로 한다. 또한, 인위적으로 세라마이드를 더 공급해줌으로써 시너지 효과를 극대화하여 피부건조증상, 아토피증상을 포함하는 피부질환을 예방하고 그 증상을 개선시키는 화장료 조성물을 제공할 수 있다.The present invention is a cosmetic composition containing white lupine extract to promote epidermal protein synthesis and increase the synthesis of intercellular lipids such as ceramide, cholesterol, di- / tri-glycerides to prevent dry skin, increase skin moisturizing power and It is characterized by improving the resilience of the barrier. In addition, by artificially supplying more ceramide, it is possible to provide a cosmetic composition to maximize the synergy effect to prevent skin diseases including skin dry symptoms, atopic symptoms and to improve the symptoms.

Claims (8)

건조된 화이트 루핀 파쇄물에 루핀 파쇄물 건조 중량의 1-10배의 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급알코올을 첨가하여 수 일간 추출한 후 여과하고 건조한 다음, 부틸렌 글리콜에 용해한 화이트 루핀 추출물과 세라마이드를 함유하는 피부 보습용 화장료 조성물.Contain the white lupine extract and ceramide dissolved in butylene glycol after extraction for several days by adding 1-10 times the dry weight of the lupine crushed product to anhydrous or hydrous lower alcohol having 1 to 10 times the dry weight of lupine crushed product. Cosmetic composition for skin moisturizing. 삭제delete 제1항에 있어서, 상기 조성물은 필라그린 합성 증가, 세포간 지질 성분 합성 촉진 또는 피부 장벽의 회복력을 개선하는 것을 특징으로 하는 피부 보습용 화장료 조성물.According to claim 1, wherein the composition is moisturizing cosmetic composition, characterized in that to increase the filaggrin synthesis, promote the synthesis of intercellular lipid components or improve the resilience of the skin barrier. 삭제delete 삭제delete 제1항 또는 제3항에 있어서, 화이트 루핀 추출물은 조성물 총 중량에 대해서 0.01 ~ 20중량%, 세라마이드는 조성물 총 중량에 대해서 0.0001 ~ 20 중량%를 함유하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.The cosmetic composition according to claim 1 or 3, wherein the white lupine extract contains 0.01 to 20% by weight based on the total weight of the composition, and ceramide contains 0.0001 to 20% by weight based on the total weight of the composition. 삭제delete 제1항 또는 제3항에 있어서, 상기 조성물이 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이크림, 영양크림, 마사지크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 파우더, 에센스, 팩으로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.The composition of claim 1 or 3, wherein the composition is selected from the group consisting of softening cream, converging cream, nourishing cream, eye cream, nourishing cream, massage cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, powder, essence, and pack. Cosmetic composition, characterized in that it has a formulation.
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