KR100829718B1 - Cosmetic Composition for Whitening the Skin Comprising the Extract of Ilex rotunda as Active Ingredient - Google Patents
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Abstract
본 발명은 먼나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명의 먼나무 추출물은 티로시나아제 활성 억제 효과가 우수하고 멜라닌 세포에서 멜라닌의 생성을 저해하는 효과가 있으며, 피부에 거의 자극을 주지 않아 안정성이 우수한 피부 미백용 화장료 조성물의 유효성분으로서 유용하게 사용될 수 있다. The present invention provides a cosmetic composition for skin whitening comprising distant extract as an active ingredient. The far-tree extract of the present invention has an excellent effect of inhibiting tyrosinase activity and inhibits melanin production in melanocytes, and is useful as an active ingredient of a cosmetic composition for skin whitening having excellent stability because it hardly irritates the skin. Can be.
먼나무 추출물, 티로시나제, 멜라닌, 미백, 화장료 조성물 Farwood extract, tyrosinase, melanin, whitening, cosmetic composition
Description
본 발명은 먼나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a cosmetic composition for skin whitening comprising distant extract as an active ingredient.
희고 고운 피부를 갖고자 하는 것은 모든 사람의 한결 같은 소망이다. 일반적으로 사람의 피부, 모발 및 눈 등의 색은 멜라닌, 카로틴 및 헤모글로빈 등에 의해 결정된다. 특히 멜라닌은 피부색을 결정하는 가장 중요한 요인으로서, 멜라닌의 양과 성질 및 분포의 정도에 따라 피부색이 결정된다. 사람의 피부나 모발의 색소는 햇빛, 특히 자외선의 유해한 영향으로부터 피부나 모발을 보호해 주는 역할을 한다. 예컨대, 이러한 색소가 부족한 사람은 햇빛에 매우 민감하여 화상을 입기 쉬우며 어린 나이에도 피부암의 발생 확률이 높다. 단파장의 자외선 (290-320 nm) 및 발암 물질은 피부에서 유해 라디칼, 예컨대, 산소 라디칼을 형성하며, 이러 한 산소 라디칼이 피부 세포를 공격하여 피부를 노화시키는 것으로 알려져 있다. It is everyone's constant desire to have white, fair skin. In general, the color of human skin, hair and eyes is determined by melanin, carotene and hemoglobin and the like. In particular, melanin is the most important factor for determining the skin color, the skin color is determined according to the amount, nature and distribution of melanin. Human skin and hair pigments protect skin and hair from the harmful effects of sunlight, especially ultraviolet light. For example, people who lack these pigments are very sensitive to sunlight and are prone to burns and have a high probability of developing skin cancer even at a young age. Short wavelength ultraviolet (290-320 nm) and carcinogens form harmful radicals in the skin, such as oxygen radicals, which are known to attack skin cells and age the skin.
멜라닌의 주요한 기능은 이러한 유해 라디칼을 제거하여 이에 의한 손상으로부터 피부를 보호하는 것이다. 따라서 멜라닌의 양이 많다는 것은 물리적 또는 화학적 독성 물질로부터 피부를 보호할 수 있는 효과적인 대응 체계를 가지고 있다는 것을 의미한다. The main function of melanin is to remove these harmful radicals and protect the skin from the damage thereby. Therefore, high levels of melanin means that it has an effective response system that can protect the skin from physical or chemical toxic substances.
한편, 멜라닌은 티로시나아제(tyrosinase)라는 효소에 의해 티로신(tyrosine)이 도파(DOPA), 도파퀴논(Dopaquinone)으로 전환되고, 비효소적인 산화반응을 거쳐서 생성된다. 이때 생성된 멜라닌은 피부 세포에 전달되고 표피 박리와 함께 멜라닌이 상실되어 소멸되는 순환 과정을 가진다.On the other hand, melanin is tyrosine (tyrosine) is converted to dopa (DOPA), dopaquinone (Dopaquinone) by an enzyme called tyrosinase (tyrosinase) is produced through a non-enzymatic oxidation reaction. The produced melanin is delivered to the skin cells and has a cyclic process in which melanin is lost and disappeared along with epidermal detachment.
이러한 멜라닌 생성 과정은 자연적으로 일어나는 현상으로서, 정상 상태의 사람 피부에서는 멜라닌이 과다 생성되지 않으나, 피부가 자외선, 환경오염 또는 스트레스 등의 외부의 자극과 반응하면 멜라닌이 과다 생성된다. 이렇게 과다 생성된 멜라닌이 피부 밖으로 배출되지 못하고 피부 속에 남아 있게 되면 색소 침착이 일어나 기미 및 주근깨 등으로 나타게 된다.The melanin production process is a naturally occurring phenomenon. In human skin in a normal state, melanin is not excessively produced, but melanin is excessively produced when the skin reacts with external stimuli such as ultraviolet rays, environmental pollution or stress. When the excessively produced melanin is not discharged out of the skin and remains in the skin, pigmentation occurs, resulting in blemishes and freckles.
그러므로, 피부 미백은 멜라닌 생성의 억제를 통해 이루어질 수 있는데, 대표적인 멜라닌 생성 억제의 방법으로는, 자외선과 같은 외부자극을 차단하는 방법, 멜라닌 형성과 관련된 티로시나아제의 활성을 억제하는 방법, 멜라닌 생성을 주관하는 멜라닌 세포의 분열을 방해하는 방법, 비타민 C 유도체를 이용하는 방법 등이 있다.Therefore, skin whitening can be achieved by inhibiting melanin production. Representative methods of inhibiting melanin production include blocking external stimuli such as ultraviolet light, inhibiting the activity of tyrosinase related to melanin formation, and producing melanin. There is a method for preventing the division of melanocytes that control the use, a method using a vitamin C derivative.
일본특개평 4-9320 호에는 미백 물질로서 아스코르브산이 개시되어 있는데, 아스코르브산은 미백 효과는 있지만 제형 내에서 안정성이 나빠 시간이 경과하면서 그 유효 성분의 활성도가 떨어지는 문제점이 있어 캡슐 또는 리포좀으로 아스코르브산을 안정화시키는 등의 다양한 방법이 제기되고 있으나 아직 뚜렷한 안정화 방법을 제시하지 못하고 있다.Japanese Patent Application Laid-Open No. 4-9320 discloses ascorbic acid as a whitening substance. Ascorbic acid has a whitening effect but has poor stability in the formulation, and as a result, the activity of the active ingredient decreases as time passes. Ascorbic acid is used as a capsule or liposome. Various methods such as stabilization have been proposed, but no clear stabilization method has yet been proposed.
일본특개평 6-192062 호에는 미백 물질로서 하이드로퀴논이 개시되고 있는데, 하이드로퀴논은 미백 효과는 우수하나 발암성 물질이므로 화장료로서의 사용에 제한을 받고 있다.In Japanese Patent Laid-Open No. 6-192062, hydroquinone is disclosed as a whitening substance. Hydroquinone is excellent in whitening effect but is limited to its use as a cosmetic since it is a carcinogenic substance.
또 다른 미백 물질로서 코직산(일본특개평 56-7710 호)은 티로시나아제의 저해능력이 탁월하여 미백 효과가 우수하게 나타나지만, 코직산의 독성 및 발암성 때문에 화장료, 식품 등의 재료로 사용하기에 부적합하다는 문제가 있다.As another whitening substance, kojic acid (Japanese Patent Laid-Open No. 56-7710) has an excellent inhibitory ability of tyrosinase and shows an excellent whitening effect, but it is not suitable for use in cosmetics and foods due to the toxicity and carcinogenicity of kojic acid. There is a problem.
또 다른 미백 물질로 고산 지대의 월귤 나무에서 추출하거나 합성을 통하여 얻을 수 있는 알부틴(일본특개평 4-9315 호)은 티로시나아제에 대한 억제 능력이 검증되고 있으나, 알부틴이 하이드로퀴논에 당이 붙어있는 상태로서, 화장료에 적용 시 피부 효소에 의해 당이 분리되어 피부 자극이 유발되는 문제점이 지적되고 있다.As another whitening substance, arbutin (Japanese Patent Application Laid-Open No. 4-9315), which can be extracted from alpine bilberry or synthesized, has been proven to inhibit tyrosinase, but arbutin has a sugar attached to hydroquinone. As it is, it is pointed out that the sugar is separated by skin enzymes when applied to cosmetics, causing skin irritation.
현재까지 피부 미백과 관련하여 많은 화장품 회사에서 다양한 연구개발이 이루어지고 있으나, 먼나무에 의한 피부 미백 작용 또는 피부 미백제로서의 용도와 관련하여서는 전혀 알려진 바가 없다.Until now, various cosmetic companies have been conducting various research and development related to skin whitening, but nothing is known about the skin whitening effect of distant trees or its use as a skin whitening agent.
본 발명자는 화장료의 안정성, 부작용 및 미백 효과의 약화 등의 종래의 피부 미백용 화장료 조성물의 문제점을 극복하기 위해 예의 노력한 결과 먼나무 추출물이 우수한 미백효과 및 피부 안정성을 나타냄을 확인하였다. The present inventors have made diligent efforts to overcome the problems of the conventional skin whitening cosmetic composition, such as weakening the stability, side effects and whitening effect of the cosmetics, it was confirmed that the far-tree extract exhibits excellent whitening effect and skin stability.
따라서, 본 발명의 목적은 피부 미백 효과가 우수한 먼나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부미백용 화장료 조성물을 제공하는데 있다.Therefore, it is an object of the present invention to provide a cosmetic composition for skin whitening comprising as an active ingredient extract of distant tree with excellent skin whitening effect.
본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 실시예 및 청구범위에 의해 명확하게 된다.Other objects and advantages of the invention will be apparent from the following examples and claims.
본 발명은 먼나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.The present invention provides a cosmetic composition for skin whitening comprising distant extract as an active ingredient.
본 발명의 화장료 조성물에 유효성분으로 사용되는 "먼나무(Ilex rotunda)"는 감탕나무(Awuifoliaceae)과에 속하는 쌍떡잎 식물로서, 높이가 10 m에 달하며, 상록 활엽 교목으로, 가지는 암갈색이며 털이 없다. 잎은 어긋나고 타원형이며 밑은 쐐기 모양이거나 둥글고 끝은 날카로우며 톱니가 없다. 잎자루가 길며 광택이 있고 잎맥은 희미한 특징을 가지고 있다. " Ilex rotunda " used as an active ingredient in the cosmetic composition of the present invention is a dicotyledonous plant belonging to the Awuifoliaceae family, reaching a height of 10 m, an evergreen broad-leaved arborescent, with dark brown and hairless. Leaves are alternate, oval, wedge-shaped or rounded at the bottom, sharp at the ends, without sawtooth. The petiole is long and glossy, and the leaf vein is faint.
먼나무의 나무껍질과 뿌리껍질은 일반적으로 "구필응"이라고 하며, 청열, 해독, 이통, 이습, 지혈의 특징이 있다. 또한 감기로 인한 발열, 편도염, 인후염에 해열 및 소염 작용을 나타내고, 급만성 간염, 급성위염, 타박상, 화상 등의 치료 약제로도 사용된다.The bark and root bark of distant trees are commonly called "gu pil nyeong" and are characterized by clear heat, detoxification, pain, diarrhea and hemostasis. It also exhibits antipyretic and anti-inflammatory effects on fever, tonsillitis, and sore throat caused by colds, and is also used as a therapeutic agent for acute hepatitis, acute gastritis, bruises and burns.
구필응에는 플라보노이드(flavonoid), 탄닌(tannin), 트리테르펜 (triterphene)류가 함유되어 있으며, 이것을 분리해서 베타-아미린(β-amyrin), 베타-시토스테롤(β-sitosterol)과 올레아놀릭산(oleanolic acid), 로툰딕산(rotundic acid)을 얻는다. Gufilung contains flavonoids, tannins and triterphenes, which are separated from beta-amyrin, beta-sitosterol and oleanolic acid. acid), rotundic acid.
구필응의 약리 효과는, 실험관 내에서 혈액 응고 시간을 단축시키며, 혈관 평활근의 수축 작용을 나타내고, 황색포도상구균, 용혈성연쇄상구균, 이질균, 티푸스균, 녹농간균의 발육을 억제하는 작용이다. The pharmacological effect of gufilungeum is to shorten the blood coagulation time in the test tube, exhibit the contractile action of vascular smooth muscle, and inhibit the development of Staphylococcus aureus, hemolytic streptococci, dysentery, typhoid bacteria, and Pseudomonas aeruginosa.
임상보고사례로 구필응의 약침 제제가 화농성 질환(창농ㅇ봉와직염ㅇ심부농종), 호흡기 감염, 급성편도선염, 급성위장염, 이질, 화상 및 수술 후의 감염 예방 작용을 나타냈다. 복통, 위통, 심교통 등에 지통 작용을 보였으며, 치료 중 전신 부작용을 나타내지 않았다. In clinical trials, the herbal medicine of Gu Pil-eung showed the prevention of purulent disease (changongbong cellulitis and deep adenoma), respiratory infection, acute tonsillitis, acute gastroenteritis, dysentery, burns and postoperative infection. Abdominal pain, stomach pain, cardiac pain, etc. showed painful effects and did not show systemic side effects during treatment.
본 발명에 있어서, 먼나무 추출물은 먼나무의 다양한 기관 또는 부분(예: 잎, 꽃, 열매, 줄기, 가지, 뿌리 등)으로부터 추출하여 얻은 것을 의미하고, 바람직하게는 뿌리, 줄기 또는 가지, 가장 바람직하게는 가지로부터 얻은 추출물을 의미한다.In the present invention, distant extract means that obtained by extracting from various organs or parts (such as leaves, flowers, fruits, stems, branches, roots, etc.) of distant trees, preferably roots, stems or branches, most preferably Means an extract obtained from eggplant.
본 발명의 먼나무 추출물은 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도와 압력의 조건 하에서, 통상적인 용매를 사용하여 제조될 수 있다.The mulberry extract of the present invention may be prepared according to conventional methods known in the art, that is, using conventional solvents, under conditions of conventional temperature and pressure.
본 발명에서 먼나무 추출물은 다양한 추출용매, 예를 들어, 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올 (메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올), 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 1,3-부틸렌글리콜 및 부틸 아세테이트로 구성된 군으로부터 선택되는 추출 용매로 하여 얻을 수 있으며, 바람직하게는 물과 에탄올의 적절한 혼합액을 이용하여 얻어진 것이고, 보다 바람직하게는 70% 에탄올을 이용하여 얻어진 것이다. 한편, 본 발명의 먼나무 추출물은 상기한 추출 용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.The mulberry extract in the present invention is a variety of extraction solvents, for example, water, anhydrous or hydrous lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms (methanol, ethanol, propanol and butanol), acetone, ethyl acetate, chloroform, 1,3-butylene glycol And an extraction solvent selected from the group consisting of butyl acetate, preferably one obtained by using a suitable mixture of water and ethanol, and more preferably one using 70% ethanol. On the other hand, it will be apparent to those skilled in the art that the far-tree extract of the present invention can obtain an extract having substantially the same effect using not only the aforementioned extraction solvent but also other extraction solvents.
또한, 본 발명의 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 활성 분획도 본 발명의 추출물에 포함되는 것이다. In addition, the extract of the present invention includes not only the extract by the above-described extraction solvent, but also the extract that has undergone a conventional purification process. Obtained by various additional purification methods, such as, for example, separation using an ultrafiltration membrane having a constant molecular weight cut-off value, separation by various chromatography (manufactured for separation according to size, charge, hydrophobicity or affinity). The active fraction is also included in the extract of the present invention.
본 발명의 먼나무 추출물은 피부 미백 성분으로 사용하는 것에 특징이 있다. 상기 먼나무 추출물은 티로시나아제의 활성을 억제함으로써 티로신으로부터 멜라닌이 생성되는 것을 저해하고, 멜라닌 세포에서 멜라닌 생성을 저해하는 효과가 있다.The far tree extract of the present invention is characterized by being used as a skin whitening ingredient. The mulberry extract inhibits the activity of tyrosinase and inhibits the production of melanin from tyrosine, and inhibits melanin production in melanocytes.
본 발명의 조성물에서 먼나무 추출물은 티로시나아제 활성을 저해하거나 또는 멜라닌 세포의 멜라닌 생성을 저해할 수 있는 유효량의 먼나무 추출물을 포함한다. 본 발명의 조성물에서 상기 먼나무 추출물의 함량은 조성물의 총 중량기준으 로 0.0001-20.0 중량%, 바람직하게 0.001-10.0 중량% 이다. 먼나무 추출물의 함량이 0.0001 중량% 미만일 경우에는 티로시나아제 활성 억제 및 멜라닌 세포에서 멜라닌 생성을 저해를 통한 미백효과의 개선이 다소 미흡한 문제점이 있고, 20 중량%를 초과할 경우에는 함유량 증가에 따른 뚜렷한 미백효과는 증가하지 않고 피부 민감성이 증가하는 문제점이 있다.The mulberry extract in the composition of the present invention comprises an effective amount of mulberry extract capable of inhibiting tyrosinase activity or inhibiting melanogenesis of melanocytes. The content of the mulberry extract in the composition of the present invention is 0.0001-20.0% by weight, preferably 0.001-10.0% by weight based on the total weight of the composition. If the content of distant tree extract is less than 0.0001% by weight, the improvement of the whitening effect through inhibition of tyrosinase activity and inhibition of melanin production in melanocytes is somewhat insufficient. There is a problem that the skin sensitivity is increased without increasing the whitening effect.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 먼나무 추출물 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.The components included in the cosmetic composition of the present invention include components commonly used in cosmetic compositions in addition to the extract of mulberry as an active ingredient, and include, for example, conventional auxiliaries such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and flavorings, and Carrier.
본 발명의 피부 미백 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 젤, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클렌징 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 밀크 로션, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 로션, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 파우더 워시, 클렌징 오일, 마스크, 팩 등의 제형으로 제조될 수 있다.The skin lightening composition of the present invention may be prepared in any formulation conventionally prepared in the art, for example, solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, surfactant-containing cleansing It may be formulated as such, but is not limited thereto. More specifically, in the formulation of flexible lotion, nutrition lotion, milk lotion, nutrition cream, massage cream, essence, eye cream, cleansing lotion, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, powder wash, cleansing oil, mask, pack Can be prepared.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 에스테르오일, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 카보머, 폴리아크릴아마이드, 폴리에틸렌글라이콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, the carrier component is animal oil, vegetable oil, ester oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, carbomer, polyacrylamide, polyethylene glycol, silicone, Bentonite, silica, talc or zinc oxide and the like can be used.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글라이콜, 1,3-부틸렌글라이콜, 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글라이콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solubilizer or emulsifier is used as the carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol , Fatty acid esters of 1,3-butylene glycol, oils, glycerol aliphatic esters, polyethylene glycols or sorbitan.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글라이콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the dosage form of the present invention is a suspension, a carrier diluent such as water, ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxy, bentonite, agar or tracant and the like can be used.
본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing, the carrier component is an aliphatic alcohol sulfate, an aliphatic alcohol ether sulfate, a sulfosuccinic acid monoester, an isethionate, an imidazolinium derivative, a methyltaurate, a sarcosinate, a fatty acid amide ether. Sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters and the like can be used.
본 발명의 먼나무 추출물을 포함하는 화장료 조성물은 티로시나아제의 활성 억제 및 멜라노사이트의 멜라닌 생성 억제를 통하여 우수한 피부 미백효과를 나타내며, 피부에 대한 자극이 낮으므로 뛰어난 피부 안전성을 갖는다. 이와 같은 사 실은 하기의 실시예에 상세히 명시되어 있다.The cosmetic composition comprising the extract of the far-tree of the present invention exhibits excellent skin whitening effect through the inhibition of tyrosinase activity and the inhibition of melanin production of melanocytes, and has excellent skin safety because of low irritation to the skin. This fact is specified in detail in the Examples below.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다. 또한 본 실시예에서 사용되는 부, %, 비는 특별히 언급되지 않는 한 질량 기준에 해당한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. These examples are intended to illustrate the present invention in more detail, and the scope of the present invention is not limited by these examples. In addition, the part,%, and ratio used in this Example correspond to a mass reference | standard unless there is particular notice.
제조예 1. 먼나무 추출물의 제조Preparation Example 1 Preparation of Mulberry Extract
먼저 세척한 먼나무 가지를 잘 말려서 건조한 다음 잘게 파쇄하여 파우더 형태로 준비하였다. 100 g의 먼나무 가지 파우더를 70% 에틸알코올 600 ml에 넣고 5일간 상온에서 추출한 후 와트만 여과지(No. 5)를 이용하여 여과하였다. 냉각 콘덴서가 장착된 추출기에 넣고 70℃에서 감압 농축기로 농축 및 건조하여 건조중량 7.75 g을 얻었다. 건조된 먼나무 추출 가루를 50% 1,3-부틸렌 글리콜에 용해하여 최종 농도 1%(w/v)가 되게 녹여서 사용하였다.First, the dried distant branches were dried well and then crushed to prepare a powder form. 100 g of distant eggplant powder was added to 600 ml of 70% ethyl alcohol, extracted at room temperature for 5 days, and filtered using Whatman filter paper (No. 5). It was placed in an extractor equipped with a cooling condenser and concentrated and dried at 70 ° C. under a reduced pressure concentrator to obtain a dry weight of 7.75 g. The dried mulberry extract powder was dissolved in 50% 1,3-butylene glycol and used to dissolve to a final concentration of 1% (w / v).
실험예 1: 먼나무 추출물의 티로시나아제 활성 저해 실험Experimental Example 1: Inhibition of tyrosinase activity of distant extract
먼나무 추출물의 티로시나아제 활성 저해 정도를 보기 위하여 티로시나아제 활성 저해 실험을 실시하였다. 티로시나아제 활성 저해 기질로는 인산나트륨 완충액 (pH 6.8)에 용해한 1.5 mmol/ℓ의 티로신 (시그마사, 미합중국)을 사용하였다. 먼나무 추출물은 0.05 M 인산나트륨 완충용액 (pH 6.8)을 이용하여 농도별로 희석 하여 시료액을 제조하고 상기 농도별 시료액 240 ㎕에 티로신 40 ㎕를 각각 첨가하고, 티로시나아제 (시그마사, 1500 U/㎖) 20 ㎕을 첨가한 후 37℃에서 15분 동안 반응시킨 다음, 490 nm에서 흡광도를 측정하였고, 대조군으로는 먼나무 추출물을 첨가하지 않은 것을 사용하였다. 티로시나아에 활성 저해도는 하기 수학식 1에 따라 계산하였으며, 결과는 하기 표 1에 기재하였다..Tyrosinase activity inhibition experiment was conducted to see the degree of inhibition of tyrosinase activity of the extracts of distant tree. As tyrosinase activity inhibiting substrate, 1.5 mmol / L tyrosine (Sigma, USA) dissolved in sodium phosphate buffer (pH 6.8) was used. Mulberry extract was diluted by concentration with 0.05 M sodium phosphate buffer (pH 6.8) to prepare a sample solution, and 40 μl of tyrosine was added to 240 μl of the sample solution for each concentration, and tyrosinase (Sigma, 1500 U / Ml) 20 μl was added and then reacted at 37 ° C. for 15 minutes, and then the absorbance was measured at 490 nm. Inhibition of activity on tyrosinah was calculated according to Equation 1 below, and the results are shown in Table 1 below.
상기 표 1의 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명의 먼나무 추출물은 티로시나아제 활성 억제에서 탁월한 효과를 나타내었으며, 또한 상기 활성 저해도는 먼나무 추출물 농도에 의존적으로 증가함을 알 수 있었다. As can be seen from the results of Table 1, the far-tree extract of the present invention showed an excellent effect on the inhibition of tyrosinase activity, and also the activity inhibition was found to increase depending on the concentration of far-tree extract.
실험예Experimental Example 2: 2: 먼나무A distant tree 추출물의 멜라닌 생성 저해 실험 Experiment to Inhibit Melanin Production by Extracts
생쥐 유래의 흑색종 세포 B-16 (쥐 흑색종 세포, 한국세포주은행)를 12-웰 플레이트(Falcon, 미합중국)에 1ㅧ 104 cell/well이 되도록 접종한 후에 하루 동안 배양하여 세포를 안정화 시킨 다음 각 웰당 0 내지 0.2%의 농도별로 먼나무 추출물을 처리하여 3-4일 동안 배양하였다. 배양한 플레이트는 원심분리한 후 배양액을 제거하고, 디메틸설폭사이드(DMSO)에 용해한 1N NaOH 용액 500 ㎕로 세포를 용해한 후 90℃ 수조 (water bath)에서 10분간 가열하였다. 이를 다시 원심분리한 후 그 상등액을 570 ㎚의 파장에서 흡광도를 측정하였다. 측정한 값을 이용하여 하기 수학식 2에 따라 멜라닌 생성 저해도를 계산하였으며, 그 결과는 표 2에 기재하였다.Mice-derived melanoma cells B-16 (murine melanoma cells, Korea Cell Line Bank) were seeded in 12-well plates (Falcon, USA) to 1 ㅧ 10 4 cell / well and cultured for one day to stabilize the cells. Next, each tree was treated with distant extracts at a concentration of 0 to 0.2% and incubated for 3-4 days. The cultured plate was centrifuged, the culture solution was removed, cells were lysed with 500 μl of 1N NaOH solution dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO), and then heated in a 90 ° C. water bath for 10 minutes. After centrifugation again, the supernatant was measured for absorbance at a wavelength of 570 nm. The melanin production inhibition was calculated according to Equation 2 using the measured values, and the results are shown in Table 2.
상기 표 2의 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명의 먼나무 추출물은 멜라닌 세포에서 멜라닌 생성을 크게 저해하는 것을 알 수 있다. 게다가, 멜라닌 생성 저해도는 먼나무 추출물 농도에 의존적으로 증가하는 양상을 보였다. 따라서 본 발명의 먼나무 추출물을 포함하는 조성물은 멜라닌 생성 억제에 우수한 효과가 있음을 알 수 있다.As can be seen from the results of Table 2, it can be seen that far tree extract of the present invention significantly inhibits melanogenesis in melanocytes. In addition, the inhibition of melanogenesis was increased depending on the concentration of distant tree extract. Therefore, it can be seen that the composition comprising the far-tree extract of the present invention has an excellent effect on inhibiting melanin production.
실험예 3: 먼나무 추출물의 세포독성 실험 Experimental Example 3: Cytotoxicity Test of Mulberry Extract
먼나무 추출물의 세포 독성을 알아보기 위하여 MTT 분석법을 통하여 독성여부를 확인하였다. 사람 섬유아세포(fibroblast, 한국세포주은행)를 96-웰 플레이트에 각 웰당 8ㅧ 103 cell/well로 접종하여 200 ㎕의 DMEM (Dulbecco Minimum Essential Medium) 배지에서 24시간 동안 배양한 후, 각 웰당 0 내지 0.2%의 농도별로 먼나무 추출물을 처리하여 다시 24시간 동안 배양하였다. 배양한 플레이트는 0.5 ㎎/㎖ MTT 용액(시그마, 미합중국)을 첨가한 후 4 시간 후에 배지를 제거하고 200 ㎕의 DMSO 용액으로 세포를 용해하였고 그 반응액을 ELISA Reader(Molecular Device, 미합중국)를 이용하여 570 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 이 때 먼나무 추출물을 처리하지 않은 무처리군을 대조군으로 하여 하기 수학식 4에 따라 세포의 증식율을 계산하였으며, 그 결과는 하기표 3에 기재하였다.To determine the cytotoxicity of distant extracts, the toxicity was confirmed by MTT analysis. Human fibroblasts (fibroblasts) were seeded in 96-well plates at 8 ㅧ 10 3 cells / well per well in a 96-well plate and incubated for 24 hours in 200 μl DMEM (Dulbecco Minimum Essential Medium) medium, followed by 0 for each well. The mulberry extract was treated by the concentration of -0.2% and incubated for another 24 hours. The cultured plate was added with a 0.5 mg / ml MTT solution (Sigma, USA) 4 hours later, the medium was removed, and the cells were lysed with 200 μl of DMSO solution. The reaction solution was then used for ELISA Reader (Molecular Device, USA). Absorbance at 570 nm was measured. At this time, as a control group was treated with no distant extract was calculated as a control according to the following equation (4), the results are shown in Table 3 below.
상기 표 3의 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명의 추출물은 상대적으로 고농도에서도 섬유아세포에 대하여 세포 독성을 나타내지 않으므로, 먼나무 추출물을 함유한 조성물은 세포 독성에 대해서 상당히 안전함을 확인할 수 있었다.As can be seen from the results of Table 3, the extract of the present invention does not show cytotoxicity to fibroblasts even at relatively high concentrations, it was confirmed that the composition containing far-tree extract is quite safe against cytotoxicity.
이하, 상기한 실험예들의 결과를 근거로 하여 먼나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료를 조성하여 제시한다. 그러나 본 발명의 조성물이 하기의 제형예에 제한되는 것을 아니다.Hereinafter, based on the results of the experimental examples described above to present a cosmetic composition for skin whitening comprising distant extract as an active ingredient. However, the composition of the present invention is not limited to the following formulation examples.
제형예 1: 유연 화장수Formulation Example 1 Flexible Lotion
상기 제조예 1의 방법으로 획득한 먼나무 추출물을 포함하는 유연화장수의 제형예는 통상의 방법에 따라 표 4의 조성으로 제조하였고(실시예1), 비교군으로서 먼나무 추출물이 첨가되지 않은 유연화장수도 함께 제조하였다(비교예 1). Formulation example of the flexible longevity containing the far-wood extract obtained by the method of Preparation Example 1 was prepared in the composition of Table 4 in accordance with a conventional method (Example 1), as the comparative group also has a softened longevity not added to the far-wood extract It was prepared together (Comparative Example 1).
제형예 2: 영양화장수Formulation Example 2: Nutrients
상기 제조예 1의 방법으로 획득한 먼나무 추출물을 포함하는 영양화장수의 제형예는 통상의 방법에 따라 표 5의 조성으로 제조하였고(실시예 2), 비교군으로서 먼나무 추출물이 첨가되지 않은 영양 화장수도 함께 제조하였다(비교예 2). Formulation example of nutrient lotion comprising a distant tree extract obtained by the method of Preparation Example 1 was prepared in the composition of Table 5 according to a conventional method (Example 2), nutrient lotion not added distant extract as a comparison group It was prepared together (Comparative Example 2).
제형예Formulation example 3: 영양 크림 3: nutrition cream
상기 제조예 1의 방법으로 획득한 먼나무 추출물을 포함하는 영양 크림의 제형예는 통상의 방법에 따라 표 6의 조성으로 제조하였고(실시예 3), 비교군으로서 먼나무 추출물이 첨가되지 않은 영양크림(비교예 3)도 함께 제조하였다. Formulation example of the nourishing cream containing a distant tree extract obtained by the method of Preparation Example 1 was prepared in the composition of Table 6 according to a conventional method (Example 3), nutrient cream without distant extract added as a comparative group ( Comparative Example 3) was also prepared.
실험예 4: 화장료 조성물의 미백효과실험Experimental Example 4: Whitening Effect Experiment of Cosmetic Composition
19-40세의 특히 피부가 검은 한국 여성 30명을 대상으로 본 발명의 화장료 조성물의 미백 효과를 측정하였다. 측정 부위는 팔의 9 곳을 가로 세로 1 ㎝씩 표시하고, 상기 제형예 2 및 3에서 제조한 실시예 2, 3 및 비교예 2, 3의 화장료를 각각 2 곳씩 도포하고, 나머지 1 곳은 비교를 위하여 대조군으로 사용하였다. 각 화장료는 2 주 간격으로 8주 동안 꾸준히 도포하였고, 8주 후에 Minolta CR 300을 이용하여 피부색(L 값)을 측정한 후 하기 수학식 4를 이용하여 피부색의 변화도(ΔL)를 계산하였으며, 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다. The whitening effect of the cosmetic composition of the present invention was measured in 30 Korean women aged 19-40 years, especially those with dark skin. 9 parts of the arms were measured by 1 cm in width and length, and the cosmetics of Examples 2 and 3 and Comparative Examples 2 and 3 prepared in Formulation Examples 2 and 3 were applied to each of the two parts, and the other one was compared. It was used as a control for. Each cosmetic was applied steadily for 8 weeks at 2 weeks interval, after 8 weeks to measure the skin color (L value) using Minolta CR 300 and calculated the degree of change of skin color (ΔL) using the following equation 4, The results are shown in Table 7 below.
상기 표 7의 결과에서 알 수 있듯이, 8주 후의 ΔL 값을 보면, 먼나무 추출물을 포함하는 본 발명의 화장료( 실시예 2, 3)가 먼나무를 포함하지 않은 화장료( 비교예 2, 3) 및 대조군에 비하여 월등히 높게 나타났다. 따라서 본 발명의 화장료 조성물은 매우 우수한 미백 효과를 갖고 있음을 알 수 있다.As can be seen from the results of Table 7, 8 weeks after the ΔL value, the cosmetics of the present invention (Examples 2 and 3) containing the extract of distant trees did not contain distant trees (Comparative Examples 2 and 3) and the control group It was much higher than that. Therefore, it can be seen that the cosmetic composition of the present invention has a very good whitening effect.
실험예 5: 화장료 조성물의 피부 자극성 시험Experimental Example 5: Skin irritation test of the cosmetic composition
건강한 성인 남여 50명을 대상으로 상기 실시예 및 비교예에 따라 제조된 제품들의 피부 자극성을 실험을 실시하였다. 각 피검자들의 양팔 하박부에 5ㅧ 20 ㎠로 각 시료 (실시예 1 내지 3 및 비교예 1 내지 3)의 일정량 (약 0.1 g)을 24시간 첩포한 후, 제거하고 1시간 및 24시간 경과 후 육안으로 피부 상태 변화를 확인하고 표 8의 피부 반응 평가 기준에 따라 피부 반응 정도를 판정하였다. 또한 판정한 결과에 기초하여 하기 수학식 5를 이용하여 피부 자극율을 계산하였으며, 그 결과를 표 9에 기재하였다. 50 healthy adult male and female subjects were tested for skin irritation of the products prepared according to the Examples and Comparative Examples. After a certain amount (approximately 0.1 g) of each sample (Examples 1 to 3 and Comparative Examples 1 to 3) was patched for 24 hours at 5 ㅧ 20 cm 2 in the lower arm of each subject, after 1 hour and 24 hours had elapsed. The skin condition change was visually checked and the degree of skin reaction was determined according to the skin response evaluation criteria of Table 8. In addition, the skin irritation rate was calculated using Equation 5 based on the result of the determination, and the results are shown in Table 9.
상기 표 8의 결과에서 알 수 있듯이, 먼나무 추출물을 포함하는 본 발명의 실시예 1 내지 3의 화장료 조성물은 먼나무 추출물을 포함하지 않는 비교예 1 내지 3의 화장료 조성물과 비교하여 거의 유사한 피부 자극율을 보임으로써 본 발명의 먼나무 추출물이 피부에 자극을 거의 주지 않는 것을 알 수 있었다. 따라서 본 발명의 화장료 조성물은 피부 자극이 적고 피부 안전성이 우수함을 알 수 있었다.As can be seen from the results of Table 8, the cosmetic composition of Examples 1 to 3 of the present invention containing the far-tree extract has a nearly similar skin irritation rate compared to the cosmetic composition of Comparative Examples 1 to 3 not containing the far-tree extract It can be seen that the far tree extract of the present invention shows little irritation to the skin. Therefore, the cosmetic composition of the present invention was found to have less skin irritation and excellent skin safety.
이상에서 상세히 설명하였듯이, 본 발명은 먼나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부미백용 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명의 먼나무 추출물은 종래의 미백 성분에 비하여 향상된 티로시나아제 활성 억제 효과 및 뛰어난 멜라닌 세포의 멜라닌 생성 억제 효과가 있으며, 본 발명의 먼나무 추출물을 포함하는 화장료 조성물은 탁월한 피부 미백 효과를 나타낸다. 또한, 본 발명의 먼나무 추출물은 피부에 거의 자극을 주지 않으므로 화장료 조성물의 유효성분으로서 유효하게 사용될 수 있다.As described in detail above, the present invention provides a cosmetic composition for skin whitening comprising a distant extract as an active ingredient. The mulberry extract of the present invention has an improved inhibitory effect on tyrosinase activity and an excellent melanin production inhibitory effect on melanocytes compared to the conventional whitening ingredients, and the cosmetic composition comprising the mulberry extract of the present invention exhibits an excellent skin whitening effect. In addition, the far-tree extract of the present invention can be effectively used as an active ingredient of the cosmetic composition because it hardly irritates the skin.
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