KR100820173B1 - 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체, 이의 약학적으로허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로함유하는 허혈성 심장질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물 - Google Patents

4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체, 이의 약학적으로허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로함유하는 허혈성 심장질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물 Download PDF

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이선경
윤성준
이병호
오광석
정이숙
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Abstract

본 발명은 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 허혈성 심장질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체는 나트륨/수소 교환통로인 NHE-1에 대하여 강력한 억제작용을 하여 심장기능 손상의 회복을 증진시키고, 우수한 심장 보호효과를 나타냄으로써, 본 발명의 조성물은 심근경색, 부정맥, 협심증 등의 허혈성 심장질환의 예방 및 치료제로 유용하게 사용될 수 있고, 또한 관동맥우회술, 관동맥경피성형술 등 심장시술 시 또는 혈전용해제 등 재관류 요법에 대한 심장보호제 등으로 사용될 수 있다.
[화학식 1]
Figure 112007019928730-pat00001
(상기 식에서, R1, R2 및 X는 명세서에 정의된 바와 같다.)
4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체, 나트륨/수소 교환통로, NHE-1, 허혈성 심장질환 예방 및 치료제, 심장보호제

Description

4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 허혈성 심장질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물{4-Methylimidazol-5-ylcarbonylguanidine derivatives, pharmaceutically acceptable salts thereof, preparation method, and pharmaceutical compositions for the prevention and treatment of the Ischemic Heart Diseases containing the same as an active ingredient}
본 발명은 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 허혈성 심장질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
나트륨/수소 교환통로(sodium-hydrogen exchanger, 이하 NHE라 약칭함)는 다양한 세포종에서 발현되는 이온통로로, 세포 내의 수소 이온 한 개를 밖으로 내보내고 Na+ 한 개를 세포 내로 들여옴으로써 정전기적으로는 중성이며 세포 내 pH 조 절에 중요한 역할을 하는 막 단백질이다. 현재까지 7 개의 아형이 확인되었다. 심근세포의 주아형이며, 세포 내 pH, 나트륨 이온농도 및 세포크기를 유지하는데 중요한 역할을 하는 NHE-1은 허혈-재관류 손상에 주요 역할을 하는 막 단백질로 알려져 있다(Avkiran, M. et. al., (2002) J. Am. Coll. Cardiol., 39: 747-753). 정상적인 생리적 pH 7.2에서 NHE-1은 거의 작동을 하지 않는다. 산소가 부족한 허혈 상태에서는 에너지생성을 해당 작용(glycolysis)에 의존하므로 세포 내 수소 이온 농도가 증가하여 산성화(pH 6.4)가 된다. 수소 이온 감지기(proton sensor)를 갖는 NHE-1은 세포 내 pH가 산성화된 것을 감지하여 활성화되어, 수소 이온을 내보내고 나트륨 이온을 세포 내로 들여오므로 세포 내 pH는 정상상태로 회복되고 나트륨 이온의 농도는 증가하게 된다. 허혈시에는 ATP 에너지 생성의 감소로 Na+/K+ ATPase가 억제되므로 나트륨 펌프에 의해 세포 내에 축적된 나트륨 이온을 내보낼 수 없게 된다. 따라서 정상상태에서는 칼슘을 내보내고 나트륨을 들여오는 나트륨/칼슘 통로인 NCX(Na+/Ca2 + exchanger)가 높아진 나트륨 농도를 조절하기 위해 역방향으로 작동하여 나트륨 이온을 내보내고 칼슘 이온을 들여와 세포 내 칼슘 이온의 농도가 높아지게 된다. 세포 내 칼슘 이온농도의 증가는 프로테아제, 포스포리파제, 엔도누클레아제 등의 효소를 활성화시켜 각종 단백질 분해, 지방대사장애에 의한 활성산소 유리기의 증가, DNA 변형 등을 일으켜 세포손상을 일으키게 된다. NHE-1의 억제로 세포 내 나트륨 이온 농도의 증가를 막음으로써 NCX의 역방향 작동을 억제할 수 있고 세포 내 칼슘 이온 농도의 증가를 억제하여 허혈/재관류에 의한 세포손상을 보호할 수 있다. 증가된 수소 이온은 다른 이온통로에 의해 정상으로 조절됨으로써 NHE-1의 억제에 의한 세포 내 산성화는 일어나지 않는 것으로 보고 되어 있다.
허혈/재관류시의 심근세포 손상과 심장기능 저하에 의해 발생하는 심근경색, 부정맥, 심부전증 등의 허혈성 심장질환은 유병율 및 사망률이 높고 완치가 어려워, 지난 50년 동안 집중적인 기초 및 임상 연구가 진행된 바 있다(Koner, R.A. et al., (2004) J. Am. Coll. Cardiol., 44: 276-286). 허혈/재관류 손상은 대사, 면역반응 및 이온 항상성의 변화, 산소유리기 등 다양한 생리학적 기전이 관여되므로 면역조절 물질, 세포사멸 관련물질, 이온통로 조절물질 등 다양한 분야에서 연구가 이루어지고 있다. 기전연구와 함께 새로운 작용점에 의한 치료제의 개발 및 외과적 시술의 개발 등이 활발히 이루어졌으나 허혈/재관류로부터 심근세포를 보호할 수 있는 기술이 아직 임상적으로 상용화되지 못하고 있다. 관동맥우회술, 관동맥경피성형술 등의 외과적 시술 및 혈전용해제 등의 약물요법에 의한 재관류 요법 후에도 심근경색의 재발, 심장기능저하, 부정맥, 신경인지능력 저하 등 재관류 손상이 높은 비율로 나타나는 것으로 알려져 있다(Robert, M., (2003) Ann. Thorac. Surg., 75: S700-708). 따라서 허혈에 의한 심근세포 손상의 진행을 늦추고, 재관류 손상을 완화시킬 수 있는 안전하고 유효한 약물의 개발이 요구된다.
NHE-1 저해제에 의해 세포 내 나트륨 이온 농도 저하가 감소되고 칼슘의 과부하가 억제됨으로서 심장기능 저하 및 세포괴사와 같은 허혈/재관류에 의한 손상 이 보호된다는 연구결과가 동물실험에서 확인되어(Avkiran, M. et al., (2002) J. Am. Coll. Cardiol., 39, 747), 허혈/재관류 손상에 대한 보호제로서 NHE-1 저해제 연구가 진행 중에 있다. NHE 저해제로 처음으로 알려진 약물은 이뇨제인 피라진 유도체 아밀로라이드(amiloride)이다(Benos, D.J., (1982) A. J. Physiol., 242: C131). 아밀로라이드는 NHE-1에 대한 억제작용이 있으며 랫트 적출심장 실험에서 허혈/재관류 후에 심장기능의 회복을 증진시키는 것이 확인된 바 있으나, NHE-1 이외에도 NHE-2 및 나트륨 채널을 억제하는 등 선택성이 부족하여 심장보호제로서는 문제가 있다.
따라서, NHE-1에 대해 선택성이 있는 약물개발 연구가 진행되었으며 훽스트 마리온 러셀(Hoechst Marion Roussel; 현재 Aventis)에 의하여 NHE-1에 대해 높은 선택성을 갖는 벤조일구아니딘 유도체 카리포라이드(cariporide; HOE-694)(Scholz, W. et. al., (1993) Br. J. Pharmacol., 109: 562)가 개발된 바 있다. 카리포라이드는 동물모델에서 우수한 심장보호효과를 나타낸다. 현재까지 알려진 거의 대부분의 NHE-1 억제제들은 아실구아니딘으로서 조니포라이드(zoniporide), 사비포라이드, EMD-7580 등 다수의 약물들이 선택적 NHE-1 억제제로 임상개발 중에 있다.
NHE-1 억제제는 심근 수축력의 개선, 부정맥의 감소, 세포사멸 및 괴사의 감소, 대사상태의 개선 및 나트륨과 칼슘 이온의 과부하를 감소시킴으로써 허혈/재관류 손상에 대한 보호효과를 나타내는 것이 확인된 바 있다(Karmazyn, M., (2002) Science & Medicine, 18-26). 따라서 선택적인 NHE-1 억제제는 급성 심근경색, 관동맥우회술 및 관동맥성형술 등의 외과적 시술, 혈전용해제요법 등 허혈/재관류 손상에 대한 심장보호제로 응용될 수 있을 것이며, 심부전증, 부정맥 등 광범위한 허혈성 심혈관계 질환의 치료 및 예방 효과가 기대된다.
이에 본 발명자들은 NHE-1에 대해 선택성이 있는 약물에 관하여 연구하던 중, 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체를 합성하였고, 이들 화합물이 선택적으로 NHE-1 억제 효과를 나타내고, 허혈/재관류에 의한 심장기능 손상의 회복을 증진시키며, 심근경색의 크기를 유의성 있게 감소시켜 우수한 심장보호효과가 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법을 제공하는 데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 허혈성 심장질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공하는 데 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 허혈성 심장질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
이하 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 신규의 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
Figure 112007019928730-pat00002
상기 식에서,
R1 및 R2는 독립적으로 또는 선택적으로, 수소, 할로겐 원소, 트리할로메틸, 메실, 니트로, 아미노, C1~C5의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 또는 OR3이고,
R3는 수소, 트리할로메틸, C1~C5의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 페닐이며,
X는 수소, C1~C5의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 벤질이다.
바람직하게는,
R1 및 R2는 독립적으로 또는 선택적으로, 수소, F, Cl, Br, I, -CF3, -CCl3, 메실, 니트로, 아미노, C1~C3의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 또는 OR3이고,
R3는 수소, -CF3, -CCl3, C1~C3의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 페닐이며,
X는 수소, C1~C3의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 벤질이다.
더욱 바람직하게는,
R1 및 R2는 독립적으로 또는 선택적으로, 수소, F, Cl, 메틸, 또는 OR3이고,
R3는 메틸이며,
X는 수소, 메틸 또는 벤질이다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체의 바람직한 예는 하기와 같다.
1) (2-페닐-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘;
2) (2-(2-메틸페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
3) (2-(3-메틸페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 메탄설포네이 트;
4) (2-(4-메틸페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
5) (2-(2,3-디메틸페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
6) (2-(2,5-디메틸페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
7) (2-(3,5-디메틸페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 메탄설포네이트;
8) (2-(2-메톡시페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
9) (2-(3-메톡시페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
10) (2-(4-메톡시페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
11) (2-(2,3-디메톡시페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
12) (2-(2,5-디메톡시페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
13) (2-(2-플루오로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄 설포네이트;
14) (2-(3-플루오로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 메탄설포네이트;
15) (2-(4-플루오로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
16) (2-(2,3-디플루오로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
17) (2-(2,5-디플루오로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
18) (2-(3,5-디플루오로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 메탄설포네이트;
19) (2-(2-클로로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
20) (2-(3-클로로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘;
21) (2-(4-클로로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
22) (2-(2,3-디클로로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
23) (2-(2,5-디클로로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
24) (2-(3,5-디클로로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘;
25) (2-(2-메톡시-5-클로로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
26) (2-(2-메톡시-5-플루오로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
27) (N-메틸-2-페닐-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘;
28) (N-메틸-2-(3-메틸페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘;
29) (N-메틸-2-(2-클로로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘;
30) (N-메틸-2-(3-클로로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘;
31) (N-벤질-2-(3-메틸페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘; 및
32) (N-벤질-2-(3-클로로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘.
상기 화학식 1로 표시되는 본 발명의 4-메틸-이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체는 약학적으로 허용가능한 염의 형태로 사용할 수 있으며, 상기 염으로는 약학적으로 허용가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산부가염이 유용하다. 적합한 유리산으로는 무기산과 유기산을 사용할 수 있으며, 무기산으로는 염산, 브롬산, 황산, 인산 등을 사용할 수 있고, 유기산으로는 구연산, 초산, 젖산, 말레산, 푸마린산, 글루콘산, 메탄설폰산, 아세트산, 글리콘산, 숙신산, 타르타르산, 4-톨루엔술폰산, 갈락투론산, 엠본산, 글루탐산 또는 아스파르트산 등을 사용할 수 있다. 바람직하게는 무기산으로는 염산, 유기산으로는 메탄설폰산을 사용할 수 있 다.
본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 4-메틸-이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체는 약학적으로 허용가능한 염뿐만 아니라, 통상의 방법에 의해 제조될 수 있는 모든 염, 수화물 및 용매화물을 모두 포함한다.
본 발명에 따른 부가염은 통상의 방법으로 제조할 수 있으며, 예를 들면 화학식 1의 화합물을 수혼화성 유기용매, 예를 들면 아세톤, 메탄올, 에탄올 또는 아세토니트릴 등에 녹이고 과량의 유기산을 가하거나 무기산의 산 수용액을 가한 후 침전시키거나 결정화시켜서 제조할 수 있다. 이어서 이 혼합물에서 용매나 과량의 산을 증발시킨 후 건조시켜서 부가염을 얻거나 또는 석출된 염을 흡인 여과시켜 제조할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법을 제공한다.
구체적으로, 본 발명의 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체의 제조방법은 하기 반응식 1에 나타난 바와 같이,
이탈기(leaving group, L)를 갖는 화학식 2의 카복시산 유도체를 구아니딘(3)과 반응시켜 화학식 1의 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체를 얻는 단계를 포함하여 이루어질 수 있다.
Figure 112007019928730-pat00003
상기 반응식 1에서,
R1, R2 및 X는 화학식 1에서 정의한 바와 같고, L은 이탈기이다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 출발물질로 사용되는 화학식 2의 카복시산 유도체로는 에스테르(ester) 유도체, 아실 할라이드(acyl halide) 유도체, 카복시산 무수물(acid anhydride) 유도체, 카복시산 등을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 에스테르 유도체 또는 카복시산을 사용할 수 있다.
상기 카복시산 유도체(2)는 구아니딘에 의해 쉽게 이탈될 수 있는 이탈기(L)를 가지고 있기 때문에, 구아니딘과의 반응시 용이하게 치환될 수 있다. 이러한 이탈기로는 할로겐 원소, 히드록시, 알콕시, 메실(mesylate)기, 토실(tosylate)기 등이 있다. 본 명세서에서 상기 이탈기란 상대적으로 안정된 약염기성 분자나 이온을 의미하며, 안정할수록 더 잘 이탈된다.
또한, 상기 에스테르 유도체는 그 이탈기의 형태에 따라, 메틸 에스테르, 에틸 에스테르 등의 일반적인 알킬 에스테르 유도체, p-나이트로페닐 에스테르, N-히드록시석신이미드 에스테르, 펜타플루오로페닐 에스테르 등의 활성 에스테 르(active ester) 유도체 등을 사용할 수 있다. 상기 카복시산 유도체들은 통상적인 공지의 방법으로 카복시산으로부터 쉽게 제조될 수 있다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 카복시산 유도체(2)는 사용되는 유도체의 종류에 따라 정량 또는 과량의 구아니딘과 반응시키거나, 적절한 염기 촉매 존재하에서 동일한 당량의 구아니딘과 반응시킬 수 있다.
1) 상기 카복시산 유도체(2)가 알킬 에스테르 혹은 활성 에스테르인 경우, 적절한 용매를 사용하여 정량 또는 과량의 구아니딘과 반응하여 화학식 1의 화합물을 제조할 수 있다. 상기 구아니딘의 사용량은 카복시산 유도체에 대하여 1~10 당량인 것이 바람직하다. 이때, 반응 용매는 메탄올, 에탄올, 이소프로판올과 같은 알콜계 용매, 테트라히드로퓨란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄과 같은 에테르계 용매, 디메틸포름아미드(DMF) 또는 이들의 혼합용매를 사용할 수 있다. 또한, 반응 온도는 상온에서부터 용매의 비등점의 온도 범위 내에서 수행될 수 있다.
2) 상기 카복시산 유도체(2)가 아실 할라이드 또는 산 무수물인 경우, 적절한 용매에서 과량의 구아니딘과 반응시키거나 염기 촉매 존재하에 구아니딘과 반응시켜 화학식 1의 화합물을 제조할 수 있다. 이때, 사용 가능한 염기 촉매로는 수산화나트륨, 수산화칼륨, 탄산나트륨 등의 무기염기 또는 트리에틸아민, 피리딘 등의 유기염기를 사용할 수 있으며, 반응 용매는 벤젠, 톨루엔 등의 방향족 탄화수소 화합물계 용매, 테트라히드로퓨란 등의 에테르계 용매, 디클로로메탄, 클로로포름 등의 할로겐화 탄화수소 화합물계 용매 또는 디메틸포름아미드 등을 사용하거나 이들의 혼합용매를 사용할 수 있다.
3) 상기 카복시산 유도체(2)가 히드록시의 이탈기를 갖는 카복시산인 경우, 하기 반응식 2에 나타난 바와 같이, 카복시산 화합물(2a)을 축합제(condensing agent) 존재하에 구아니딘(3)과 반응시켜 화학식 1의 화합물을 제조할 수 있다.
Figure 112007019928730-pat00004
상기 반응식 2에서, R1, R2 및 X는 화학식 1에서 정의한 바와 같고,
화합물 2a는 화학식 2의 화합물이다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 카복시산 화합물(2a)을 적절한 반응용매에서 축합제 존재하에 정량 또는 과량의 구아니딘과 반응하여 화학식 1의 화합물을 얻을 수 있다. 이때, 반응 온도는 상온에서부터 용매의 비등점의 온도 범위 내에서 수행될 수 있다. 또한, 상기 축합제로는 N,N-카보닐디이미다졸(N,N-carbonyldiimidazole), 디시클로헥실카보디이미드(dicyclohexylcarbodiimide), 디이소프로필카보디이미드(diisopropylcarbodiimide), 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로 필)카보디이미드(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide), 디페닐포스포닐아자이드(diphenylphosphonylazide) 등을 사용하는 것이 바람직하다.
상기 반응 용매로는 테트라히드로퓨란, 1,4-디옥산 등의 에테르계 용매, 벤젠, 톨루엔 등의 방향족 탄화수소 화합물계 용매, 디클로로메탄, 클로로포름 등의 할로겐화 탄화수소 화합물계 용매, 디메틸포름아미드(DMF) 또는 이들의 혼합용매를 사용하는 것이 바람직하다.
본 발명에 따른 반응식 1 또는 반응식 2의 제조방법에 있어서, 상기 카복시산 유도체의 치환기 R 또는 X가 반응에 영향을 받는 치환기인 경우,
상기 제조방법은 하기 반응식 3에 나타난 바와 같이, 상기 치환기는 보호기로 보호될 필요가 있으므로, 반응 전 적당한 보호기로 보호하여 반응을 수행한 다음, 상기 보호기를 제거하는 단계를 추가적으로 더 포함할 수 있다.
Figure 112007019928730-pat00005
상기 반응식 3에서, R1, R2 및 L은 반응식 1에서 정의한 바와 같고, m은 화 합물에 결합된 부가염의 당량을 나타내는 것으로, 양의 정수이고,
화합물 1a, 1a' 및 1b는 화학식 1의 화합물이며, 화합물 2b는 화학식 2의 화합물이다.
본 발명의 반응식 1 또는 반응식 2의 제조방법에 있어서, 화학식 1의 유도체 중 X가 H인 화합물의 경우, 화학식 2의 이미다졸의 아민이 적당한 보호기로 보호되어 있는 상태에서 구아니딘(3)과의 반응을 수행한 후 보호기를 제거하여 화학식 1의 유도체를 얻는 과정을 포함할 수 있다. 보호기를 도입함으로서 구아니딘과의 반응 수율을 향상시킬 수 있다. 이때, 보호기로는 화합물 2b의 제조과정에 염기가 사용되므로 염기에 안정한 보호기를 사용할 수 있는데, 1-에톡시에틸이 바람직하다.
상기 반응식 3에서 N-1-에톡시에틸 화합물 1b는 화합물 2b로부터 상기 반응식 1 또는 반응식 2의 방법으로 제조할 수 있다.
상기 화학식 1의 X가 H인 화합물 1a는 화학식 1의 X가 1-에톡시에틸인 화합물 1b를 염산, 황산 등의 무기산, 또는 아세트산, 4-톨루엔설폰산, 메탄설폰산 등의 유기산과 반응시켜 1-에톡시에틸 보호기를 제거하여 제조할 수 있다. 상기 반응의 반응 용매로는 무기산을 사용할 경우 메탄올, 에탄올과 같은 알코올계 용매를 물과 함께 사용하는 것이 바람직하며, 유기산을 사용할 경우에는 메틸렌클로라이드 같은 할로겐화 탄화수소 화합물계 용매, 테트라히드로퓨란, 1,4-디옥산 등의 에테 르계 용매, 아세토니트릴, 아세톤 등이 사용될 수 있다. 이때, 상기 반응 온도는 0 ℃에서부터 용매의 비등점까지의 온도 범위 내에서 수행될 수 있다.
본 발명에 따른 상기 제조방법은, 상기의 무기산 또는 유기산을 사용하는 경우, 화학식 1b의 화합물을 반응시켜 1-에톡시에틸 보호기를 제거함과 동시에 화학식 1의 X가 H인 화합물(1a)의 산부가염(1a')으로 제조할 수 있는 방법을 포함할 수 있다. 더욱 바람직하게는 메탄설폰산을 사용하여 1 내지 2 당량의 메탄설폰산 부가염을 제조할 수 있다.
이하, 상기 반응식 1 또는 반응식 2의 출발물질인 화학식 2의 카복시산 유도체(2)를 제조하는 방법을 설명한다.
a) 하기 반응식 4에 나타난 바와 같이, 카복시산 유도체(2c)가 에틸 에스테르(L = OC2H5)인 경우, 염기 및 촉매 존재하에 페닐보론산 화합물(4)과 2-할로-4-메틸이미다졸 화합물(5)을 스즈키형(Suzuki-type) 커플링 반응시켜 제조할 수 있다.
Figure 112007019928730-pat00006
상기 반응식 4에서, R1, R2 및 X는 화학식 1에서 정의한 바와 같고, Y는 B(OH)2, BCl2, BBr2,
Figure 112007019928730-pat00007
이고, Z는 Cl, Br 및 I로 이루어진 할로겐 원소 또는 OSO2CF3이며,
화합물 2c는 화학식 2의 화합물이다.
상기 페닐보론산 화합물(4)은 상업적으로 시판되는 화합물을 사용하거나, 페닐 할라이드로부터 공지된 방법으로 제조하여 사용할 수 있다.
상기 촉매로는 팔라듐, 니켈, 플래티늄 착체 등의 금속 촉매를 사용할 수 있으며, 이들 중 팔라듐 촉매를 사용하는 것이 더욱 바람직하다. 상기 팔라듐 촉매로는 Pd(PPh3)4, Pd-C, PdCl2(PPh3)2, Pd2(dba)3, PdCl2(dppf), [PdCl(allyl)]2, Pd(OAc)2 또는 PdCl2 등을 사용할 수 있다.
상기 반응식 4의 반응에서 반응을 촉진하고 수율을 높이기 위하여 PPh3, P-(o-tolyl)3, PBu3 등의 포스핀 화합물을 부가물로 사용하거나, 염화리튬, 브롬화리튬, 요오드화리튬 등의 염을 부가물로 사용할 수 있다.
상기 염기로는 트리에틸아민, 이소프로필에틸아민과 같은 3차-아민 유기염기, 탄산나트륨, 탄산칼륨, 수산화칼륨, 수산화나트륨, 탄산세슘, 수산화바륨 등과 같은 무기염기를 사용할 수 있으며, 1 내지 3 당량 사용하는 것이 바람직하다. 무기염기가 유기 용매에 용해되지 않을 때는 무기염기를 물에 용해시켜서 가할 수 있 는데, 이때 무기 염기가 0.5 내지 4 M 정도의 농도가 되도록 하여 사용하는 것이 바람직하다.
상기 반응식 4의 스즈키 반응의 용매로는 테트라히드로퓨란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄과 같은 에테르계 용매, 벤젠, 톨루엔, 자일렌과 같은 방향족 탄화수소 화합물계 용매, 메탄올, 에탄올과 같은 알코올계 용매, 디메틸포름아미드(DMF), 아세토니트릴, 에틸 아세테이트 등을 단독으로 사용하거나 혼합하여 사용할 수 있다. 이때, 반응 온도는 상온에서부터 용매의 비등점까지의 온도 범위 내에서 수행될 수 있다.
또한, 상기 반응식 4의 2-할로-4-메틸이미다졸 화합물(5)은 하기 반응식 5에 나타난 바와 같이, 상업적으로 시판되는 4-메틸이미다졸 화합물(6)로부터 제조할 수 있다.
Figure 112007019928730-pat00008
상기 반응식 5에서, X는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같고, Z는 Cl, Br 및 I로 이루어진 할로겐 원소이다.
상기 2-할로-4-메틸이미다졸(7) 화합물은 4-메틸이미다졸(6)의 할로겐화 반 응에 의해 얻을 수 있다. 화학식 7의 화합물은 화학식 6의 화합물과 할로겐 분자를 사용하여 아세트산, 메탄올 등의 알코올계 용매, 1,4-디옥산 등의 에테르계 용매 또는 물에서 반응시켜 제조할 수 있으며, 또한 화학식 6의 화합물을 리튬 디이소프로필아미드(LDA)나 n-BuLi 등의 염기로 처리한 후 할로겐 분자를 가하여 테트라히드로퓨란, 디에틸에테르 등의 에테르계 용매에서 제조할 수 있다. 바람직하게는 N-할로석신이미드를 사용하여 제조할 수 있으며, 이때 용매는 테트라히드로퓨란, 1,4-디옥산 등의 에테르계 용매, DMF 또는 아세토니트릴 등의 용매를 사용할 수 있고, 반응은 0 ℃에서부터 실온까지의 온도에서 수행할 수 있다.
상기 화학식 5의 화합물은 화학식 7의 화합물로부터 소듐 히드라이드(NaH), 탄산칼륨, 탄산나트륨 등의 염기를 사용하고 X의 종류에 따라 적당한 알킬 할라이드와 반응시켜서 얻을 수 있다. 이때 반응용매로는 테트라히드로퓨란 등의 에테르계 용매, 아세토니트릴 또는 DMF 등의 용매가 사용될 수 있으며 0 ℃에서부터 용매의 비등점까지의 온도에서 수행할 수 있다.
X가 1-에톡시에틸기인 경우, 에틸 비닐에테르를 트리플루오로아세트산 등의 산 촉매하에서 화학식 7의 화합물과 반응시켜 얻을 수 있다. 이때 반응용매로는 디클로로메탄 등의 할로겐화 탄화수소 화합물계 용매 또는 아세토니트릴 등이 사용될 수 있으며, 반응은 0 ℃에서부터 실온까지의 온도에서 수행할 수 있다.
b) 반응식 2에 나타난 바와 같이, 상기 L이 -COOH인 경우, 출발물질인 카복 시산 유도체(2a)는 상기 반응식 4에서 제조한 에스테르 유도체(2c)를 염기를 사용하여 통상의 방법에 의해 가수분해하여 얻을 수 있다.
c) 상기 반응식 1의 출발물질(2)이 에틸 에스테르 이외의 다른 유도체인 경우에는 상기 반응식 4와 같은 방법으로 제조하거나 상기 카복시산 유도체(2a)로부터 통상의 방법에 의하여 제조할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 및 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 허혈성 심장질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물, 또는 심장보호 용도로 사용되는 약학적 조성물을 제공한다.
NHE-1 억제제는 심근 수축력의 개선, 부정맥의 감소, 세포사멸 및 괴사의 감소, 대사상태의 개선 및 나트륨과 칼슘 이온의 과부하를 감소시킴으로써 허혈/재관류 손상에 대한 보호효과를 나타내는 것이 확인된 바 있다(Karmazyn, M., Science & Medicine, 18-26 (2002)).
본 발명에 따른 유도체 및 이의 약학적으로 허용가능함 염은 사람 NHE-1을 발현시킨 세포에서 NHE-1에 대하여 강력한 억제효과를 나타내고, 흰쥐의 적출 심장을 이용한 랑겐돌프의 허혈심장 모델에서도 재관류후 심장 기능(좌심실 발생압, LVDP)의 회복을 증진시켜 허혈/재관류에 대해 우수한 심장보호작용을 나타내며, 마취된 흰쥐를 이용한 허혈심근 모델에서 심근경색의 크기를 유의적으로 감소시켜 우 수한 항허혈 작용을 나타내었다.
따라서, 본 발명에 따른 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염들은 NHE-1에 대한 강력한 억제효과 및 in vitro 및 in vivo 모델에서 허혈/재관류에 대해 우수한 심장보호작용을 나타내므로, 심근경색, 심부전증, 협심증 등 허혈성 심장질환의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있으며, 또한 관동맥우회술, 관동맥경피성형술을 포함하는 수술요법 또는 혈전용해제를 이용한 약물요법을 포함하는 재관류 요법 시술 시에 심장보호제로서 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 상기 화학식 1의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물은 임상 투여시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있으며, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충전제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조될 수 있다. 경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환자, 산제, 과립제, 캡슐제, 트로키제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 본 발명의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose), 락토오스(lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 제조될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감 미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
나아가, 본 발명의 화합물의 인체에 대한 투여량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 몸무게가 70 kg인 성인 환자를 기준으로 할 때, 일반적으로 0.1~1000 mg/일이며, 바람직하게는 1~500 mg/일이며, 또한 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정시간 간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.
이하, 실시예 및 실험예를 통하여 본 발명을 상세하게 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
<제조예 1> 2- 브로모 -4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
에틸 4-메틸-5-이미다졸 카복실레이트(10 g, 64.86 mmol)를 아세토니트릴(150 ml)에 용해시킨 후, 0 ℃에서 N-브로모석신이미드(12.7 g, 71.35 mmol)를 첨가하고 서서히 상온으로 올려준 후 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완결된 후 물을 첨가하고 에틸 아세테이트로 2번 추출하여 포화소금물로 세척하였다. 황산마그네슘(MgSO4)으로 건조시킨 후 여과하여, 여액을 감압하에서 농축시키고 실리카겔 컬럼 크로마토그라피(헥산:에틸 아세테이트=2:1)로 정제하여 흰색 고체의 목적 화합물(9.5 g, 63%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.34(t, 3H), 2.53(s, 3H), 4.34(q, 2H);
MS 234 (M+).
<제조예 2> N -(1- 에톡시에틸 )-2- 브로모 -4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
에틸 비닐에테르(6.6 ml, 68.65 mmol)를 메틸렌클로라이드(CH2Cl2, 20 ml)에 용해시키고 트리플루오로아세트산(3 mmol%)을 0 ℃에서 첨가하여 5분 정도 반응시킨 다음, CH2Cl2(30 ml)에 용해시킨 제조예 1의 화합물(8 g, 34.33 mmol)을 첨가 혼합하였다. 상온에서 3시간 동안 반응시킨 후 물을 넣고 CH2Cl2로 2번 추출하여 포화소금물로 세척하였다. MgSO4로 건조시킨 후 여과하여 여액을 감압하에서 농축시키고 실리카겔 칼럼 크로마토그라피(헥산:에틸 아세테이트=2:1)로 정제하여 무색 오일 형태의 목적 화합물(9.8 g, 93%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 5.68(q, 1H), 4.37(q, 2H), 3.44-3.35(m, 2H), 2.71(s, 3H), 1.67(d, 3H), 1.39(t, 3H), 1.20(t, 3H);
MS 304 (M+).
< 제조예 3> N -(1- 에톡시에틸 )-2-아릴-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
제조예 3-1. N -(1- 에톡시에틸 )-2- 페닐 -4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
상기 제조예 2에서 얻은 화합물(600 mg, 1.97 mmol)과 Pd(PPh3)4(68 mg, 3 mmol%, 0.059 mmol), 페닐보론산(408 mg , 3.34 mmol)을 톨루엔에(7 ml)에 용해시킨 후, 2 M 탄산칼륨(K2CO3, 1ml) 수용액을 첨가하고 16시간 동안 교반하면서 가열, 환류하였다. 반응이 완결된 후, 2 N 수산화나트륨(NaOH) 수용액을 첨가하고 에틸 아세테이트로 2 번 추출하고 소금물로 세척하였다. MgSO4로 건조시킨 후 여과하여 여액을 감압하에서 농축시키고, 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그라피(헥산:에틸 아세테이트=2:1)로 정제하여 연노랑색 오일 형태의 목적 화합물(560 mg, 94%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.08(t, 3H, J = 7.0 Hz), 1.40(t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.71(d, 3H, J = 6.2 Hz), 2.79(s, 3H), 3.19(m, 2H), 4,41(q, 2H, J = 7.1 Hz), 5.47(q, 2H, J = 6.2 Hz), 7.45(m, 5H);
MS 303 (M+).
제조예 3-2. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(2- 메틸페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
2-메틸페닐보론산(201 mg, 1.48 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(230 mg, 74%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.11(t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.39(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.62(d, 3H, J = 6.5 Hz), 2.19(s, 3H), 2.78(s, 3H), 3.25(q, 2H, J = 7.1 Hz), 4.40(q, 2H, J = 7.2 Hz), 5.14(q, 1H, J = 6.5 Hz), 7.20-7.39(m, 4H);
MS 316 (M+).
제조예 3-3. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(3- 메틸페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
3-메틸페닐보론산(201 mg, 1.48 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(240 mg, 77%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.08(t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.39(t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.71(d, 3H, J = 6.2 Hz), 2.38(s, 3H), 2.78(s, 3H), 3.19(q, 2H, J = 7.1 Hz), 4.40(q, 2H, J = 7.1 Hz), 5.50(q, 1H, J = 6.2 Hz), 7.20-7.39(m, 4H);
MS 316 (M+).
제조예 3-4. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(4- 메틸페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
4-메틸페닐보론산(201 mg, 1.48 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(245 mg, 79%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.07(t, 3H, J = 7.0 Hz), 1.39(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.71(d, 3H, J = 6.3 Hz), 2.39(s, 3H), 2.78(s, 3H), 3.18(q, 2H, J = 7.0 Hz), 4.40(q, 2H, J = 7.2 Hz), 5.47(q, 1H, J = 6.3 Hz), 7.23(d, 2H, J = 7.8 Hz), 7.35(d, 2H, J = 7.8 Hz);
MS 316 (M+).
제조예 3-5. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(2,3- 디메틸페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
2,3-디메틸페닐보론산(369 mg, 2.46 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(483 mg, 89%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.11(t, 3H, J = 6.9 Hz), 1.39(t, 3H, J = 6.9 Hz), 1.60(d, 3H, J = 6.0 Hz), 2.04(s, 3H), 2.29(s, 3H), 2.78(s, 3H), 3.33(q, 2H, J = 6.9 Hz), 4.38(q, 2H, J = 6.9 Hz), 5.12(q, 1H, J = 6.0 Hz), 7.10-7.24(m, 3H);
MS 330 (M+).
제조예 3-6. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(2,5- 디메틸페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
2,5-디메틸페닐보론산(369 mg, 2.46 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(402 mg, 74%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.11(t, 3H, J = 7.0 Hz), 1.39(t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.62(d, 3H, J = 6.2 Hz), 2.13(s, 3H), 2.31(s, 3H), 2.77(s, 3H), 3.15-3.35(m, 2H), 4.40(q, 2H, J = 7.1 Hz), 5.15(q, 1H, J = 6.2 Hz), 7.01 (s, 1H), 7.14(s, 2H);
MS 330 (M+).
제조예 3-7. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(3,5- 디메틸페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
3,5-디메틸페닐보론산(221 mg, 1.48 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(249 mg, 77%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.03(t, 3H, J = 7.3 Hz), 1.39(t, 3H, J = 6.9 Hz), 1.71(d, 3H, J = 6.1 Hz), 2.34(s, 6H), 2.78(s, 3H), 3.19(q, 2H, J = 7.3 Hz), 4.40(q, 2H, J = 6.9 Hz), 5.50(q, 1H, J = 6.1 Hz), 7.07(m, 3H);
MS 330 (M+).
제조예 3-8. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(2- 메톡시페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
2-메톡시페닐보론산(374 mg, 2.46 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(316 mg, 58%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.05(t, 3H, J = 6.9 Hz), 1.39(t, 3H, J = 6.9 Hz), 1.65(d, 3H, J = 5.4 Hz), 2.78(s, 3H), 3.13(m, 2H), 3.76(s, 3H), 4.40(q, 2H, J = 6.9 Hz), 5.14(q, 1H, J = 5.4 Hz), 6.93(d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.02(dd, 1H, J = 7.5, 7.5 Hz), 7.39-7.46(m, 2H);
MS 332 (M+).
제조예 3-9. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(3- 메톡시페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복 시산 에틸 에스테르의 제조
3-메톡시페닐보론산(224 mg, 1.48 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(227 mg, 70%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.08(t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.39(t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.71(d, 3H, J = 6.2 Hz), 2.78(s, 3H), 3.19(m, 2H), 3.83(s, 3H,), 4.40(q, 2H, J = 7.1 Hz), 5.50(q, 1H, J = 6.2 Hz), 6.99-7.06(m, 3H), 7.33(dd, 1H, J = 7.9, 7.9 Hz);
MS 332 (M+).
제조예 3-10. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(4- 메톡시페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
4-메톡시페닐보론산(224 mg, 1.48 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(264 mg, 81%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.08(t, 3H, J = 6.9 Hz), 1.40(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.70(d, 3H, J = 6.3 Hz), 2.77(s, 3H), 3.20(m, 2H), 3.85(s, 3H), 4.38(q, 2H, J = 7.2 Hz), 5.46(q, 1H, J = 6.3 Hz), 6.95(dd, 2H, J = 2.1, 7.2 Hz), 7.40(dd, 2H, J = 2.1, 7.2 Hz);
MS 316 (M+).
제조예 3-11. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(2,3- 디메톡시페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5-카 복시 산 에틸 에스테르의 제조
2,3-디메톡시페닐보론산(447 mg, 2.46 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(466 mg, 79%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.04(br, 3H), 1.40(t, 3H, J = 6.9 Hz), 1.67(d, 3H, J = 6.0 Hz), 2.79(s, 3H), 3.16(br, 2H), 3.61(s, 3H), 3.91(s, 3H), 4.39(q, 2H, J = 6.9 Hz), 5.20(q, 1H, J = 6.0 Hz), 7.00(m, 2H), 7.11(dd, 1H, J = 7.8, 7.8 Hz);
MS 362 (M+).
제조예 3-12. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(2,5- 디메톡시페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5-카 복시 산 에틸 에스테르의 제조
2,5-디메톡시페닐보론산(447 mg, 2.46 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(350 mg, 69%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.06(t, 3H, J = 6.9 Hz), 1.39(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.68(br, 3H), 2.78(s, 3H), 3.15(br, 2H), 3.70(s, 3H), 3.77(s, 3H), 4.38(m, 2H), 5.16(q, 1H), 6.86(d, 1H, J = 9.3 Hz), 6.95(dd, 1H, J = 3.0, 9.3 Hz), 6.98(d, 1H, J = 3.0 Hz);
MS 290 (M+-72).
제조예 3-13. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(2- 플루오로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5-카복시산 에틸 에스테르의 제조
상기 제조예 2에서 얻은 화합물(500 mg, 1.64 mmol)과 Pd(PPh3)4(152 mg, 8 mmol%), 2-플루오로페닐보론산(344 mg, 2.46 mmol)을 톨루엔(10 ml)과 에탄올(10 ml)에 용해시킨 후, 2 M 탄산나트륨(Na2CO3, 2.1 ml)와 무수염화리튬(208 mg, 4.92 mmol)을 첨가하여 16시간 동안 교반하면서 가열, 환류하였다. 반응액을 감압하에서 농축시켜 에탄올을 제거하고, 2 N NaOH을 첨가하여 에틸 아세테이트로 2번 추출한 후 소금물로 세척하였다. MgSO4로 건조시킨 후 여과하여 여액을 감압하에서 농축시키고, 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그라피(헥산:에틸 아세테이트=2:1)로 정제하여 오일 형태의 목적 화합물(311mg, 0.97mmol, 60%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.07(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.40(t, 3H, J = 6.9 Hz), 1.70(d, 3H, J = 6.0 Hz), 2.79(s, 3H), 3.18(m, 2H), 4.40(q, 2H, J = 6.9 Hz), 5.23(q, 1H, J = 6.0 Hz), 7.14(dd, 1H, J = 8.1, 9.3 Hz), 7.23(m, 1H), 7.48(m, 2H);
MS 320 (M+).
제조예 3-14. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(3- 플루오로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5-카복시산 에틸 에스테르의 제조
3-플루오로페닐보론산(206 mg, 1.48 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(260 mg, 83%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.10(t, 3H, J = 6.9 Hz), 1.41(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.71(d, 3H, J = 6.3 Hz), 2.79(s, 3H), 3.21(q, 2H, J = 6.9 Hz), 4.40(q, 2H, J = 7.2 Hz), 5.47(q, 1H, J = 6.3 Hz), 7.16(m, 1H), 7.23-7.28(m, 2H), 7.40(m, 1H);
MS 320 (M+).
제조예 3-15. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(4- 플루오로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5-카복시산 에틸 에스테르의 제조
4-플루오로페닐보론산(206 mg, 1.48 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(210 mg, 67%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.09(t, 3H, J = 6.9 Hz), 1.40(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.69(d, 3H, J = 6.3 Hz), 3.20(m, 2H), 4.40(q, 2H, J = 7.2 Hz), 5.42(q, 1H, J = 6.3 Hz), 7.13(m, 2H), 7.47(m, 2H);
MS 320 (M+).
제조예 3-16. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(2,3- 디플루오로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5-카 복시 산 에틸 에스테르의 제조
2,3-디플루오로페닐보론산(447 mg, 2.46 mmol)을 사용하여 제조예 3-13과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(150 mg, 34%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.09(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.39(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.70(d, 3H, J = 6.0 Hz), 2.79(s, 3H), 3.21(m, 2H), 4.40(q, 2H, J = 7.2 Hz), 5.23(q, 1H, J = 6.0 Hz), 7.19(m, 1H), 7.25-7.31(m, 2H);
MS 338 (M+).
제조예 3-17. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(2,5- 디플루오로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5-카 복시 산 에틸 에스테르의 제조
2,5-디플루오로페닐보론산(388 mg, 2.46 mmol)을 사용하여 제조예 3-13과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(147 mg, 27%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.09(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.41(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.70(d, 3H, J = 6.3 Hz), 2.79(s, 3H), 3.18(q, 2H, J = 7.2 Hz), 4.40(q, 2H, J = 7.2 Hz), 5.24(q, 1H, J = 6.3 Hz), 7.10-7.17(m, 2H), 7.25(m, 1H);
MS 338 (M+).
제조예 3-18. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(3,5- 디플루오로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5-카 복시 산 에틸 에스테르의 제조
3,5-디플루오로페닐보론산(388 mg, 2.46 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(336 mg, 61%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.15(t, 3H, J = 7.0 Hz), 1.40(t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.71(d, 3H, J = 6.2 Hz), 2.78(s, 3H), 3.23(q, 2H, J = 7.0 Hz), 4.40(q, 2H, J = 7.1 Hz), 5.48(q, 1H, J = 6.2 Hz), 6.88(m, 1H), 7.06(m, 2H);
MS 338 (M+).
제조예 3-19. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(2- 클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
2-클로로페닐보론산(344 mg, 2.46 mmol)을 사용하여 제조예 3-13과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(398 mg, 72%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.10(t, 3H, J = 6.6 Hz), 1.39(t, 3H, J = 6.9 Hz), 1.66(br, 3H), 2.79(s, 3H), 3.21(br, 2H), 4.40(m, 2H), 5.10(q, 1H, J = 6.0 Hz), 7.35-7.49(m, 4H);
MS 336 (M+).
제조예 3-20. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(3- 클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
3-클로로페닐보론산(231 mg, 1.48 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(275 mg, 83%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.11(t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.41(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.72(d, 3H, J = 6.1 Hz), 2.79(s, 3H), 3.22(q, 2H, J = 7.1 Hz), 4.40(q, 2H, J = 7.2 Hz), 5.47(q, 1H, J = 6.1 Hz), 7.35-7.53(m, 3H), 7.55(d, 1H, J = 1.8 Hz);
MS 336 (M+).
제조예 3-21. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(4- 클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
4-클로로페닐보론산(231 mg, 1.48 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(254 mg, 77%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.09(t, 3H, J = 6.9 Hz), 1.40(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.70(d, 3H, J = 6.3 Hz), 2.77(s, 3H), 3.20(m, 2H), 4.40(m, 2H), 5.43(q, 1H, J = 6.3 Hz), 7.43(m, 4H);
MS 336 (M+).
제조예 3-22. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(2,3- 디클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5-카 복시 산 에틸 에스테르의 제조
2,3-디클로로페닐보론산(469 mg, 2.46 mmol)을 사용하여 제조예 3-13과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(257 mg, 42%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.10(br, 3H), 1.39(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.64(br, 3H), 2.78(s, 3H), 3.21(br, 2H), 4.40(q, 2H, J = 7.2 Hz), 5.09(q, 1H, J = 6.3 Hz), 7.29(m, 2H), 7.58(d, 1H, J = 6.9 Hz);
MS 370 (M+).
제조예 3-23. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(2,5- 디클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5-카 복시 산 에틸 에스테르의 제조
2,5-디클로로페닐보론산(469 mg, 2.46 mmol)을 사용하여 제조예 3-13과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(271 mg, 45%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.14(t, 3H, J = 6.9 Hz), 1.40(t, 3H, J = 6.9 Hz), 1.68(br, 3H), 2.78(s, 3H), 3.24(br, 2H), 4.40(q, 2H, J = 6.9 Hz), 5.11(q, 1H, J = 6.0 Hz), 7.40(m, 3H);
MS 370 (M+).
제조예 3-24. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(3,5- 디클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5-카 복시 산 에틸 에스테르의 제조
3,5-디클로로페닐보론산(469 mg, 2.46 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(513 mg, 84%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.14(t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.40(t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.71(d, 3H, J = 6.2 Hz), 2.78(s, 3H), 3.25(q, 2H, J = 7.1 Hz), 4.40(q, 2H, J = 7.1 Hz), 5.46(q, 1H, J = 6.2 Hz), 7.42-7.44(m, 3H);
MS 298 (M+-72).
제조예 3-25. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(2- 메톡시 -5- 클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
2-메톡시-5-클로로페닐보론산(458 mg, 2.46 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(349 mg, 58%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.08(t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.39(t, 3H, J = 6.9 Hz), 1.68(d, 3H, J = 6.3 Hz), 2.78(s, 3H), 3.16(br, 2H), 3.76(s, 3H), 4.36(q, 2H, J = 6.9 Hz), 5.10(q, 1H, J = 6.3 Hz), 6.87(d, 1H, J = 8.7 Hz), 7.37-7.42(m, 2H);
MS 367 (M+1)+.
제조예 3-26. N -(1- 에톡시에틸 )-2-(2- 메톡시 -5- 플루오로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
2-메톡시-5-플루오로페닐보론산(251 mg, 1.48 mmol)을 사용하여 제조예 3-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(219 mg, 64%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.07(t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.39(t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.67(d, 3H, J = 6.3 Hz), 2.78(s, 3H), 3.16(br, 2H), 3.74(s, 3H), 4.40(q, 2H, J = 7.1 Hz), 5.14(q, 1H, J = 6.3 Hz), 6.87 (dd, 1H, J = 4.4, 8.9 Hz), 7.09-7.19(m, 2H);
MS 350 (M+).
< 제조예 4> N - 메틸 -2- 브로모 -4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
2-브로모-4-메틸-1H-이미다졸-5-카복시산 에틸 에스테르(1.0 g, 4.29 mmol)를 디메틸포름아미드(DMF, 30 ml)에 용해시키고 0 ℃로 냉각시킨 후, 60% 소듐 히 드라이드(NaH, 343 mg, 8.58 mmol)를 첨가하여 30분 동안 교반하였다. 요오도메탄(0.8 ml, 12.87 mmol)을 한 방울씩 천천히 적하 첨가하고, 반응온도를 0 ℃에서 실온으로 올리면서 4시간 동안 교반한 후 반응액에 물을 첨가하였다. 에틸 아세테이트로 추출하여, MgSO4로 건조시키고 여과하여 감압하에서 농축시킨 후, 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그라피(헥산:에틸 아세테이트=5:1)로 정제하여 흰색 고체의 목적 화합물(693 mg, 2.81 mmol, 65%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.38(t, 3H, J = 7.1 Hz), 2.46(s, 3H), 3.88(s, 3H), 4.33(q, 2H, J = 7.1 Hz);
MS 246 (M+).
< 제조예 5> N - 메틸 -2-아릴-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
제조예 5-1. N - 메틸 -2- 페닐 -4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의제조
상기 제조예 4에서 얻은 화합물(230 mg, 0.93 mmol)과 Pd(PPh3)4(32 mg, 3 mmol%, 0.028 mmol), 페닐보론산(193 mg, 1.58 mmol)을 톨루엔에(5 ml)에 용해시킨 후, 2 M K2CO3(0.6 ml)을 첨가하고 16시간 동안 교반하면서 가열, 환류하였다. 반응이 완결된 후, 2 N NaOH를 첨가하고 에틸 아세테이트로 2번 추출하고 소금물로 세척하였다. MgSO4로 건조시킨 후 여과하여 여액을 감압하에서 농축시키고, 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그라피(헥산:에틸 아세테이트=5:1)로 정제하여 오일 형태의 목적 화합물(231 mg, 60%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.41(t, 3H, J = 7.1 Hz), 2.54(s, 3H), 3.88(s, 3H), 4.35(q, 2H, J = 7.1 Hz), 7.49(m, 3H), 7.59(m, 2H);
MS 244 (M+).
제조예 5-2. N - 메틸 -2-(3- 메틸페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
3-메틸페닐보론산(187 mg, 1.38 mmol)을 사용하여 제조예 5-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(238 mg, 67%)을 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.37(t, 3H, J = 7.1 Hz), 2.54(s, 3H), 3.88(s, 3H), 4.36(q, 2H, J = 7.1 Hz), 7.25-7.55(m, 4H);
MS 258 (M+).
제조예 5-3. N - 메틸 -2-(2- 클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
2-클로로페닐보론산(285 mg, 1.82 mmol)을 사용하여 제조예 5-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(239 mg, 71%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.41(t, 3H, J = 7.2 Hz), 2.55(s, 3H), 3.69(s, 3H), 4.37(q, 2H, J = 7.2 Hz), 7.36-7.51(m, 4H);
MS 278 (M+).
제조예 5-4. N- 메틸 -2-(3- 클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
3-클로로페닐보론산(285 mg, 1.82 mmol)을 사용하여 제조예 5-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(260 mg, 77%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.41(t, 3H, J = 7.2 Hz), 2.53(s, 3H), 3.89(s, 3H), 4.37(q, 2H, J = 7.2 Hz), 7.43-7.46(m, 3H), 7.61(d, 1H, J = 1.8 Hz);
MS 278 (M+).
< 제조예 6> N -벤질-2- 브로모 -4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
2-브로모-4-메틸-1H-이미다졸-5-카복시산 에틸 에스테르(1.2 g, 5.08 mmol) 를 DMF(45 ml)에 용해시키고 K2CO3(1.05 g, 7.63 mmol)를 첨가하여 실온에서 30분 동안 교반한 후, 벤질 클로라이드(0.7 ml, 6.10 mmol)를 첨가하였다. 120 ℃에서 8시간 동안 교반한 후 반응액을 냉각하고 물을 첨가하였다. 에틸 아세테이트로 추출하여, MgSO4로 건조시키고 여과하여 감압하에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그라피(헥산:에틸 아세테이트 = 8:1)로 정제하여 흰색 고체의 목적 화합물(1.06 g, 3.28 mmol, 65%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.40(t, 3H, J = 7.1 Hz), 2.48(s, 3H), 4.37(q, 2H, J = 7.1 Hz), 5.17(s, 2H), 7.03(m, 2H), 7.32 (m, 3H) ;
MS 323 (M+).
< 제조예 7> N -벤질-2-아릴-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
제조예 7-1. N -벤질-2-(3- 메틸페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
상기 제조예 6에서 얻은 화합물(600 mg, 1.86 mmol)과 Pd(PPh3)4(65 mg, 3 mmol%, 0.056 mmol), 3-메틸페닐보론산(429 mg, 3.16 mmol)을 톨루엔에(10 ml)에 용해시킨 후, 2 M K2CO3(1.8 ml)을 첨가하고 16시간 동안 교반하면서 가열, 환류하였다. 반응이 완결된 후, 2 N NaOH를 첨가하고 에틸 아세테이트로 2 번 추출하고 소금물로 세척하였다. MgSO4로 건조시킨 후 여과하여 여액을 감압하에서 농축시키고, 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그라피(헥산:에틸 아세테이트=5:1)로 정제하여 오일 형태의 목적 화합물(266 mg, 45%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.25(t, 3H, J = 7.1 Hz), 2.56(s, 3H), 4.22(q, 2H, J = 7.1 Hz), 5.57(s, 2H), 6.94(m, 2H), 7.24-7.41 (m, 6H), 7.55 (d, 1H, J = 1.5 Hz);
MS 334 (M+).
제조예 7-2. N -벤질-2-(3- 클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 카복시산 에틸 에스테르의 제조
3-클로로페닐보론산(494 mg, 3.16 mmol)을 사용하여 제조예 7-1과 동일한 방법으로 반응시켜 오일 형태의 목적 화합물(282 mg, 44%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) σ 1.26(t, 3H, J = 7.2 Hz), 2.41(s, 3H), 3.88(s, 3H), 4.36(q, 2H, J = 7.2 Hz), 6.94(m, 2H), 7.24-7.41(m, 6H), 7.55(s, 1H);
MS 354 (M+).
<실시예 1> (2- 페닐 -4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘의 제조
2 M 구아니딘 메탄올 용액(4.2 ml, 8.4 mmol)을 감압하에 증발시키고, DMF(5 ml)에 용해시킨 제조예 3-1에서 얻은 화합물(419 mg, 1.39 mmol)을 첨가한 후, 80 ℃에서 16시간 동안 교반하였다. 물을 첨가하여 반응을 종결시키고, 6 N NaOH로 염기성화한 후, 에틸 아세테이트로 2 번 추출하여 유기층을 소금물로 세척하였다. MgSO4로 건조시킨 후 여과하여 여액을 감압하에서 농축시켰다. 그 잔류물을 메탄올에 녹인 후 1 N 염산(HCl, 5 당량)을 첨가하고 5시간 동안 교반하면서 가열, 환류하였다. 반응물을 감압하에서 농축시키고 6 N NaOH로 염기성화 한 후, 에틸 아세테이트로 2 번 추출하여 소금물로 세척하였다. MgSO4로 건조시킨 후 여과하여 여액을 감압하에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그라피(메탄올:디클로로 메탄=2:1)로 정제하여 흰색 고체의 목적 화합물(47 mg, 14%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.47(s, 3H), 7.32(m, 3H), 7.81(m, 2H);
MS 243 (M+).
< 실시예 2> (2-(2- 메틸페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
2 M 구아니딘 메탄올용액(2.3 ml, 4.36 mmol)을 감압하에 증발시키고, DMF(6 ml)에 용해시킨 제조예 3-2에서 얻은 화합물(230 mg, 0.73 mmol)을 첨가한 후, 80 ℃에서 16시간 동안 교반하였다. 물을 첨가한 후, 에틸 아세테이트로 2 번 추출하 여 유기층을 소금물로 세척하고 MgSO4로 건조시킨 후, 여과하여 여액을 감압하에서 농축시켰다. 그 잔류물을 아세톤에 녹인 후 메탄설폰산을 가하여 상온에서 1시간 동안 교반하여 반응하였다. 물을 첨가하여 반응을 종결시키고, 형성된 고체를 여과한 후, 물과 디에틸 에테르로 여러 번 씻어서 흰색 고체의 목적 화합물(150 mg, 0.34 mmol, 70%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.48(s, 3H), 2.59(s, 3H0, 7.25-7.33(m, 3H), 7.48(d, 1H, J = 6.7 Hz);
MS 258 (M+).
< 실시예 3> (2-(3- 메틸페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-3에서 얻은 화합물(230 mg, 0.73 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(105 mg, 61%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.46(s, 3H), 2.67(s, 3H), 2.73(s, 3H), 7.36(d, 1H, J = 7.5 Hz), 7.42(dd, 1H, J = 7.5, 7.7 Hz), 7.78 (d, 1H, J = 7.7 Hz), 7.86(s, 1H);
MS 258 (M+).
< 실시예 4> (2-(4- 메틸페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-4에서 얻은 화합물(200 mg, 0.63 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(190 mg, 67%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.41(s, 3H), 2.64(s, 3H), 2.71(s, 6H), 7.35(d, 2H, J = 8.1 Hz), 7.86(d, 2H, J = 8.1 Hz);
MS 258 (M+).
< 실시예 5> (2-(2,3- 디메틸페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-5에서 얻은 화합물(430 mg, 1.30 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(365 mg, 61%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.42(s, 3H), 2.43(s, 3H), 2.71(s, 3H), 2.75(s, 6H), 7.29(dd, 1H, J = 7.6, 7.7 Hz), 7.41(m, 1H);
MS 271 (M+).
< 실시예 6> (2-(2,5- 디메틸페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-6에서 얻은 화합물(400 mg, 1.21 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(300 mg, 54%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.37(s, 3H), 2.47(s, 3H), 2.65(s, 3H), 2.70(s, 6H), 7.25(s, 1H), 7.38(s, 2H), 7.78 (d, 1H, J = 7.7 Hz), 7.86(s, 1H);
MS 271 (M+).
< 실시예 7> (2-(3,5- 디메틸페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-7에서 얻은 화합물(200 mg, 0.61 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(77 mg, 35)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.37(s, 6H), 2.61(s, 3H), 2.69(s, 3H), 7.08(s, 1H), 7.59(s, 2H);
MS 271 (M+).
< 실시예 8> (2-(2- 메톡시페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-8에서 얻은 화합물(180 mg, 0.54 mmol)을 사용하여 실시예 2 와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(180 mg, 71%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.71(s, 3H), 2.73(s, 6H), 4.06(s, 3H), 7.18(dd, 1H, J = 7.5, 7.7 Hz), 7.28(d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.60(m, 1H), 8.07(dd, 1H, J = 1.7, 7.7 Hz);
MS 273 (M+).
< 실시예 9> (2-(3- 메톡시페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-9에서 얻은 화합물(190 mg, 0.57 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(108 mg, 41%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.67(s, 3H), 2.73(s, 6H), 3.91(s, 3H), 7.12(m, 1H), 7.47(dd, 1H, J = 8.2, 8.2 Hz), 7.58(m, 2H);
MS 273 (M+).
< 실시예 10> (2-(4- 메톡시페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-10에서 얻은 화합물(240 mg, 0.72 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(230 mg, 69%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.68(s, 3H), 2.74(s, 6H), 3.91(s, 3H), 7.16(dd, 2H, J = 2.1, 6.9 Hz), 7.98(d, 2H, J = 2.1, 6.9 Hz);
MS 273 (M+).
< 실시예 11> (2-(2,3- 디메톡시페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-11에서 얻은 화합물(430 mg, 1.19 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(400 mg, 68%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.70(s, 3H), 2.73(s, 6H), 3.92(s, 3H), 3.95(s, 3H), 7.27(m, 2H), 7.62(m, 1H);
MS 303 (M+).
< 실시예 12> (2-(2,5- 디메톡시페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-12에서 얻은 화합물(150 mg, 0.42 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(200 mg, 97%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.70(s, 3H), 2.73(s, 6H), 3.87(s, 3H), 4.01(s, 3H), 7.18(m, 2H), 7.65(d, 1H, J = 2.7 Hz);
MS 303 (M+).
< 실시예 13> (2-(2- 플루오로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-13에서 얻은 화합물(280 mg, 0.87 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(220 mg, 56%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.67(s, 3H), 2.72(s, 6H), 7.35(m, 1H), 8.13(m, 1H);
MS 261 (M+).
< 실시예 14> (2-(3- 플루오로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-14에서 얻은 화합물(220 mg, 0.69 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(170 mg, 69%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.66(s, 3H), 2.73(s, 3H), 7.20(m, 1H), 7.53(m, 1H), 7.74-7.82(m, 2H);
MS 261 (M+).
< 실시예 15> (2-(4- 플루오로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-15에서 얻은 화합물(180 mg, 0.56 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(150 mg, 60%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.66(s, 3H), 2.73(s, 6H), 7.29(m, 2H), 8.04(m, 2H);
MS 261 (M+).
< 실시예 16> (2-(2,3- 디플루오로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-16에서 얻은 화합물(120 mg, 0.36 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(110 mg, 66%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.69(s, 3H), 2.73(s, 6H), 7.30-7.42(m, 2H), 7.91(m, 1H);
MS 279 (M+).
< 실시예 17> (2-(2,5- 디플루오로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-17에서 얻은 화합물(100 mg, 0.30 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(75 mg, 54%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.67(s, 3H), 2.73(s, 6H), 7.23-7.36(m, 2H), 7.89-7.95(m, 1H);
MS 279 (M+).
< 실시예 18> (2-(3,5- 디플루오로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-18에서 얻은 화합물(300 mg, 0.89 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물 170 mg, 51%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.66(s, 3H), 2.73(s, 3H), 7.02-7.10(m, 2H), 7.62(m, 1H);
MS 279 (M+).
< 실시예 19> (2-(2- 클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비 스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-19에서 얻은 화합물(350 mg, 1.04 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(300 mg, 62%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.68(s, 3H), 2.72(s, 6H), 7.53(m, 2H), 7.61(dd, 1H, J = 1.4, 7.7 Hz), 7.85(dd, 1H, J = 1.7, 7.3 Hz);
MS 277 (M+).
<실시예 20> (2-(3- 클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘의 제조
상기 제조예 3-20에서 얻은 화합물(200 mg, 0.59 mmol)을 사용하여 실시예 1와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(120 mg, 73%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.58(s, 3H), 7.73-7.46(m, 2H), 7.87(m, 1H), 7.99(s, 1H);
MS 277 (M+).
< 실시예 21> (2-(4- 클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-21에서 얻은 화합물(200 mg, 0.59 mmol)을 사용하여 실시예 2 와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(210 mg, 75%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.50(s, 3H), 2.57(s, 6H), 7.39(d, 2H, J = 8.5 Hz), 7.82(d, 1H, J = 8.5 Hz);
MS 277 (M+).
< 실시예 22> (2-(2,3- 디클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-22에서 얻은 화합물(220 mg, 0.59 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(190 mg, 64%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.60(s, 3H), 2.65(s, 6H), 7.38(dd, 1H, J = 7.7, 7.9 Hz), 7.62-7.70(m, 2H);
MS 311 (M+).
< 실시예 23> (2-(2,5- 디클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-23에서 얻은 화합물(271 mg, 0.73 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(280 mg, 76%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.66(s, 3H), 2.72(s, 6H), 7.49(dd, 1H, J = 2.5, 8.6 Hz), 7.57(d, 1H, J = 8.6 Hz), 7.93(d, 1H, J = 2.5 Hz);
MS 311 (M+).
< 실시예 24> (2-(3,5- 디클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘의 제조
상기 제조예 3-24에서 얻은 화합물(485 mg, 1.31 mmol)을 사용하여 실시예 1과 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(262 mg, 64%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.40(s, 3H), 7.25(d, 1H, J = 1.5 Hz), 7.76(m, 2H);
MS 311 (M+).
< 실시예 25> (2-(2- 메톡시 -5- 클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-25에서 얻은 화합물(300 mg, 0.82 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(280 mg, 69%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.68(s, 3H), 2.73(s, 6H), 4.04(s, 3H), 7.22(d, 1H, J = 8.8 Hz), 7.46(dd 1H, J = 2.6, 8.8 Hz), 8.20(d, 1H, J = 2.6 Hz);
MS 308 (M+1)+.
< 실시예 26> (2-(2- 메톡시 -5- 플루오로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘 비스메탄설포네이트의 제조
상기 제조예 3-26에서 얻은 화합물(190 mg, 0.54 mmol)을 사용하여 실시예 2와 동일한 방법으로 반응시켜 목적 화합물 130 mg, 50%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.68(s, 3H), 2.73(s, 6H), 4.03(s, 3H), 7.23(m, 2H), 7.95(dd, 1H, J = 2.3, 9.2 Hz);
MS 291 (M+).
<실시예 27> ( N - 메틸 -2- 페닐 -4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘의 제조
상기 제조예 5-1에서 얻은 화합물(195 mg, 0.80 mmol)을 사용하여 실시예 1과 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(34 mg, 16%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.52(s, 3H), 3.86(s, 3H), 7.50-7.54(m, 3H), 7.5-7.63(m, 2H);
MS 258 (M+).
< 실시예 28> ( N - 메틸 -2-(3- 메틸페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘의 제조
상기 제조예 5-2에서 얻은 화합물(100 mg, 0.39 mmol)을 사용하여 실시예 1과 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(8.4 mg, 8%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.44(s, 3H), 2.52(s, 3H), 3.90(s, 3H), 7.34-7.42(m, 4H);
MS 271 (M+).
< 실시예 29> ( N - 메틸 -2-(2- 클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘의 제조
상기 제조예 5-3에서 얻은 화합물(166 mg, 0.60 mmol)을 사용하여 실시예 1과 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(115 mg, 66%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.53(s, 3H), 3.69(s, 3H), 7.47-7.67(m, 4H);
MS 291 (M+).
< 실시예 30> ( N - 메틸 -2-(3- 클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘의 제조
상기 제조예 5-4에서 얻은 화합물(220 mg, 0.80 mmol)을 사용하여 실시예 1과 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(184 mg, 80%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.53(s, 3H), 3.87(s, 3H), 7.51-7.55(m, 3H), 7.65(s, 1H);
MS 291 (M+).
< 실시예 31> ( N -벤질-2-(3- 메틸페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘의 제조
상기 제조예 7-1에서 얻은 화합물(250 mg, 0.75 mmol)을 사용하여 실시예 1과 동일한 방법으로 반응시켜 흰색 고체의 목적 화합물(98 mg, 38%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.38(s, 3H), 2.56(s, 3H), 5.73(s, 2H), 6.89-6.94(m, 3H), 7.21-7.37(m, 6H);
MS 348 (M+).
< 실시예 32> ( N -벤질-2-(3- 클로로페닐 )-4- 메틸 -1 H - 이미다졸 -5- 일카보닐 )구아니딘의 제조
상기 제조예 7-2에서 얻은 화합물(300 mg, 0.85 mmol)을 사용하여 실시예 1과 동일한 방법으로 반응시켜 목적 화합물(99 mg, 31%)을 얻었다.
1H-NMR(300 MHz, CD3OD) σ 2.46(s, 3H), 5.65(s, 2H), 6.81(m, 2H), 7.14(m, 3H), 7.32-7.40(m, 4H);
MS 370(M+).
본 발명에 따른 실시예 화합물의 구조 및 치환기를 표 1에 나타내었다.
실시예 구조 치환기
R1 R2 R3 X
1
Figure 112007019928730-pat00009
 - H - H
2
Figure 112007019928730-pat00010
 2-메틸 H - H
3
Figure 112007019928730-pat00011
 3-메틸 H - H
4
Figure 112007019928730-pat00012
 4-메틸 H - H
5
Figure 112007019928730-pat00013
 2-메틸 3-메틸 - H
6
Figure 112007019928730-pat00014
 2-메틸 5-메틸 - H
7
Figure 112007019928730-pat00015
 3-메틸 5-메틸 - H
8
Figure 112007019928730-pat00016
 2-OR3 H 메틸 H
9
Figure 112007019928730-pat00017
 3-OR3 H 메틸 H
10
Figure 112007019928730-pat00018
 4-OR3 H 메틸 H
11
Figure 112007019928730-pat00019
 2-OR3 3-OR3 메틸 H
12
Figure 112007019928730-pat00020
 2-OR3 5-OR3 메틸 H
13
Figure 112007019928730-pat00021
 2-플루오로 H - H
14
Figure 112007019928730-pat00022
 3-플루오로 H - H
15
Figure 112007019928730-pat00023
 4-플루오로 H - H
16
Figure 112007019928730-pat00024
 2-플루오로 3-플루오로 - H
17
Figure 112007019928730-pat00025
 2-플루오로 5-플루오로 - H
18
Figure 112007019928730-pat00026
 3-플루오로 5-플루오로 - H
19
Figure 112007019928730-pat00027
 2-클로로 H - H
20
Figure 112007019928730-pat00028
 3-클로로 H - H
21
Figure 112007019928730-pat00029
 4-클로로 H - H
22
Figure 112007019928730-pat00030
 2-클로로 3-클로로 - H
23
Figure 112007019928730-pat00031
 2-클로로 5-클로로 - H
24
Figure 112007019928730-pat00032
 3-클로로 5-클로로 - H
25
Figure 112007019928730-pat00033
 2-OR3 5-클로로 메틸 H
26
Figure 112007019928730-pat00034
 2-OR3 5-플루오로 메틸 H
27
Figure 112007019928730-pat00035
 H H - H
28
Figure 112007019928730-pat00036
 3-메틸 H - 메틸
29
Figure 112007019928730-pat00037
 2-클로로 H - 메틸
30
Figure 112007019928730-pat00038
 3-클로로 H - 메틸
31
Figure 112007019928730-pat00039
 3-메틸 H - 벤질
32
Figure 112007019928730-pat00040
 3-클로로 H - 벤질
본 발명에 의한 화학식 1의 유도체에 대하여 하기와 같은 실험을 실시하여 여러 가지 약리작용을 조사하였다.
<실험예 1> NHE -1 억제효과 측정
본 발명의 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체의 NHE-1 억제효과를 세포단계에서 측정하기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다.
<1-1> PS120 / NHE -1 세포 준비
실험 세포는 CCL39에서 유래된 PS120 세포에 사람 NHE-1를 발현시켜 사용하였으며, 10% 소태아혈청과 1% 페니실린/스트렙토마이신(100X solution), 1% L-글루타민(200 mM 수용액)이 보충된 DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium) 배지에서 세포를 배양하였다. 직경 100 mm 디쉬에서 약 80~90% 키운 PS120/NHE-1 세포를 트립신으로 처리한 후, 인산완충용액(PBS, phosphate buffer saline)으로 1 회, 나트륨 없는 완충액(Na-free buffer, pH 7.4; 138.2 mM의 염화 콜린, 4.9 mM의 KCl, 1.5 mM의 CaCl2·H2O, 1.2 mM의 MgSO4·H2O, 1.2 mM의 KH2PO4, 15 mM의 D-글루코스, 20 mM HEPES)으로 1 회 세척하였다. 이것을 원심분리하여 침전물을 20 mM NH4Cl 및 10 μM BCECF-AM(2',7'-bis(2-carboxyethyl)-5,6-carboxy-fluorescein acetoxymethyl ester)을 함유하는 나트륨 없는 완충액에 부유시킨 후, 37 ℃의 CO2 배양기에서 30분간 배양하였다. NH4Cl를 제거하고 동시에 세포 밖에 남아있는 BCECF-AM을 세척해주기 위하여, PS120/NHE-1 세포를 원심분리한 후 나트륨 없는 완충액으로 1 회 세척하고, 세포수가 2.5×104 세포/10 μl가 되도록 부유액을 만들어 4 ℃의 암실에 보관하였다.
<1-2> NHE -1 억제효과 측정
96 웰 플레이트에 180 HBS 완충액(137 mM의 NaCl, 4.9 mM의 KCl, 1.5 mM의 CaCl2·H2O, 1.2 mM의 MgSO4·H2O, 1.2 mM의 KH2PO4, 15 mM의 D-글루코스, 20 mM의 HEPES, pH 7.4)과 디메틸설폭사이드(DMSO) 또는 DMSO에 녹인 화합물(0.03 ~ 10 μM) 10 μl 씩을 분주하여 잘 섞어준 후, 마지막으로 세포 내 산성화가 유발된 PS120/NHE-1 세포를 10 μl씩 첨가하여 교반하였다. 세포를 첨가하고 4분 후에 96 웰 플레이트용 형광분광광도계(XEMINI-XS; Molecular Device)를 사용하여 형광(여기: 485/444 nm, 방출: 535 nm)을 측정하였다. 측정된 형광 값은 칼륨양이온/나이제리신 테크닉(high-K+/nigericin technique)을 이용하여 pH로 환산하였다. NH4Cl 프리펄스(prepulse)로 세포 내 산성화를 유발시킨 세포는 NHE-1의 작동에 의해 세포 내 산성화가 다시 정상으로 회복되게 되는데, 이때 세포 내 산성화의 회복을 50% 억제시키는 화합물의 농도를 구하여(IC50 값) NHE-1에 대한 억제효과를 측정하였다. 대조물질로는 카리포라이드(cariporide, 심장보호제)를 사용하여 실험하였다. 그 측정 결과는 표 2에 나타내었다.
실시예 IC50(μM) 실시예 IC50(μM) 실시예 IC50(μM)
1 12 12 2.1 23 0.10
2 2.4 13 7.2 24 0.52
3 12 14 4.5 25 0.24
4 > 30 15 > 30 26 0.80
5 > 30 16 6.6 27 > 30
6 1.1 17 3.0 28 > 30
7 5.0 18 2.7 29 > 30
8 3.1 19 1.4 30 > 30
9 4.1 20 6.8 31 > 30
10 > 30 21 > 30 32 > 30
카리포라이드 1.0 11 > 30 22 0.50
표 2에 나타난 바와 같이, 대조물질인 카리포라이드는 1.0 μM의 IC50 값을 나타내어 NHE-1에 대한 우수한 억제효과를 나타낸 것과 비교하여, 본 발명의 실시예 2, 6~9, 12, 14, 17~19 및 22~26의 화합물들은 5.0 μM 이하의 IC50 값을 나타내어 NHE-1에 대한 우수한 억제효과를 나타내었다. 이 중에서 특히 실시예 22, 23, 25, 25 및 26의 화합물들은 0.8 μM 이하의 IC50 값을 나타내어 NHE-1 억제효과가 카리포라이드보다 더욱 우수하였으며, 실시예 23의 화합물은 0.10 μM의 IC50 값으로 카리포라이드보다 10 배 우수한 NHE-1 억제효과를 나타내었다.
따라서, 본 발명의 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체들은 NHE-1에 대하여 강력한 억제효과를 나타냄으로, NHE-1 억제를 통하여 허혈/재관류 손상에 대한 보호제로서 유용하게 사용될 수 있는 것으로 사료된다.
<실험예 2> 흰쥐의 적출 허혈심장에 대한 심장보호효과
본 발명의 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체들이 적출심장에서 허혈 심장의 기능 회복을 증진시켜 심장보호작용을 나타내는지 알아보기 위하여, 흰쥐에 대하여 하기와 같은 적출심장 실험을 수행하였다.
수컷 흰쥐(300~450 g, 한국화학연구소 실험동물실)에 펜토바비탈 나트륨염 (Sodium pentobarbital)을 100 mg/kg을 복강 내 주사하여 마취시킨 후, 헤파린 1000 U/kg을 정맥 투여하고 심장을 적출하였다. 구체적으로 기관에 캐뉼라(cannula, PE 240)를 삽입하고 설치류 호흡기(rodent ventilator)를 이용해 인공호흡시키며, 그 상태에서 대동맥 캐뉼라를 대동맥에 삽입하고 역행성 관류하에 심장을 적출해 랑겐돌프 기기(Langendorff Apparatus)에 재빨리 매달고 심장에 붙어있는 불필요한 조직을 제거한 후, 정압 관류(85 mmHg) 하에서 95% O2/5% CO2로 포화된 37 ℃의 생리액 (modified Krebs-Henseleit bicarbonate buffer; 116 mM/L의 NaCl, 4.7 mM/L의 KCl, 1.1 mM/L의 MgSO4, 1.17 mM/L의 KH2PO4, 24.9 mM/L의 NaHCO3, 2.52 mM/L의 CaCl2, 8.32 mM/L의 글루코오스, 2.0 mM/L의 피루베이트)으로 관류시켰다. 에탄올과 증류수 혼합액(1:1 v/v)으로 채운 고무 풍선(latex balloon)이 연결된 금속 캐뉼라를 폐정맥을 통해 좌심실에 삽입시키고 풍선에 전달되는 좌심실압을 압력 변압기(pressure transducer)를 통해 등량적(isovolumetric)으로 확대기(Plugsys bridge amplifier)로 처리하여 기록계(Linearcorder mark 8 WR 3500)에 기록하였다. 심장을 15분 동안 안정화시킨 후 좌심실 이완기말압(LVEDP, left ventricular enddiastolic pressure)을 5 mmHg로 주고 이 풍선 부피를 전 실험 기간 동안 유지시켰다.
기조(Baseline) 심장 수축 기능과 심박동수(HR, heart rate) 및 관상혈류 (CF, coronary flow)를 측정하였다. 심장 수축 기능을 평가하는 지표인 좌심실 발생압(LVDP, left ventricular developed pressure)은 좌심실 최대 수축기압(LVSP, left ventricular peak systolic pressure)과 좌심실 이완기말압(LVEDP, left ventricular end diastolic ptrssure)의 차이로 산출하였다. 생체 내 심장과 달리 심장 박출량(cardiac output)을 측정할 수 없는 랑겐돌프 심장(Langendorff heart)에서 간접적으로 심장의 기능(cardiac performance)을 알아보는 중요한 지표인 심박동수-압력의 곱(RPP, rate-pressure product)은 심박동수(HR)에 좌심실 발생압(LVDP)을 곱하여 계산하였다. 심장의 온도는 실험 전 기간에 걸쳐 심장을 95% O2/5% CO2가 지속적으로 공급되는 37 ℃의 생리액에 담금으로서 일정하게 유지하였다. 안정화 후 심장은 용매(0.04% DMSO) 또는 일정 농도의 본 발명에 의한 화합물 또는 대조약물을 함유하는 용액으로 각각 10분 동안 관류시킨 후, 심장 수축 기능과 심박동수(HR, heart rate) 및 관상혈류(CF, coronary flow)를 재차 측정한 후 관류액 공급을 완전히 차단하여 30분 동안 전허혈(global ischemia)을 유발하였다. 이후 30분 동안 관류액을 재관류한 후에 각 지표(LVDP, HR, LVEDP, CF)를 재차 측정하였다. 음성대조군은 용매만을 투여하였으며, 대조물질로는 카리포라이드를 사용하였다. 그 측정 결과는 표 3에 나타내었다.
실시예 농도(μM) LVDP1×HR2(%) LVEDP3(mmHg)
6 10 33.5 31.7
19 10 68.9 34.7
23 10 59.2 25.0
24 10 23.3 28.0
25 10 60.2 27.7
26 10 45.5 39.5
음성대조군 - 15.5 55.3
카리포라이드 10 47.6 22.4
1 : 좌심실압(left ventricular developing pressure) 2 : 심박동수(heart rate) 3 : 좌심실이완기말압(left vetricualr end diastolic pressure)
표 3에 나타난 바와 같이, 흰쥐의 적출심장을 이용한 적출 허혈심장 실험에서, 음성대조군에서는 심장의 수축기능을 잘 반영하는 좌심실 발생압(LVDP)과 심박동수의 곱(Double Product parameter, LVDP×HR)이 허혈유발 전의 15.5%로 심장의 수축기능이 현저히 저하되었음을 알 수 있으며, 허혈/재관류에 의한 심근의 수축(contracture)을 나타내어 심장보호작용의 또 다른 지표인 재관류 좌심실이완기말압도 5 mmHg에서 55.3 mmHg로 유의성 있게 증가되었다.
카리포라이드 10 μM 투여군은 재관류 후의 심근 수축 기능(LVDP×HR)이 허혈 유발 전의 47.6%로 음성대조군에 비하여 현저히 증가되었고 좌심실이완기말압(LVEDP)은 22.4 mmHg으로 음성대조군보다 유의성 있게 낮아 허혈심장의 보호효과를 나타냈다. 실시예 6 및 26의 화합물 10 μM 투여군에서는 심장수축력이 각각 허혈 유발 전의 33.5%, 45.5%로, 좌심실이완기말압 지표는 각각 31.7 mmHg, 39.5 mmHg로 음성대조군(15.5%, 55.3 mmHg)에 비하여 유의성 있게 허혈심장 보호효과를 나타내었다. NHE-1에 대한 억제효과가 카리포라이드보다 10 배 이상 높은 실시예 23의 화합물 및 4 배 이상 강력한(표 2 참조) 실시예 25의 화합물은 심장수축력이 각각 허혈 유발 전의 59,2%, 60.2%로 회복되었고, 좌심실이완기말압 지표도 각각 25.0 mmHg와 27.7 mmHg로 저하시켜 카리포라이드와 유사하거나, 보다 우수한 허혈/재관류 후의 심장기능 회복보호효과를 나타내었다. 카리포라이드보다 NHE-1 억제효과가 약간 낮았던(0.7 배) 실시예 19의 화합물은 심장수축력이 허혈 유발 전의 68.9%로 카리포라이드보다 우수한 심근수축력 회복효과를 나타내었다.
따라서, 본 발명의 화합물들은 허혈/재관류 손상에 의한 심장기능의 회복을 증진시킴으로서 허혈성 심장에 대한 보호작용이 우수하므로, 허혈성 심혈관 질환에 관련된 질환의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 사료된다.
<실험예 3> 흰쥐의 in vivo 허혈심장 모델에 대한 심장 보호작용
본 발명의 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체들이 in vivo 허혈 심장을 보호하는 작용을 나타내는지 알아보기 위하여, 흰쥐에 대한 항허혈 효과(Antiischemic effects; 심근경색 감소 효과)를 하기와 같은 실험을 통해 조사하였다.
수컷 흰쥐(350~450 g, 한국화학연구소 실험동물실)에 펜토바비탈 (pentobarbital)을 75 mg/kg로 복강 주사하여 쥐를 마취시켰다. 기관절개술(tracheotomy)을 실시한 후 10 ml/kg의 일 회 심박출량(stroke volume), 분당 60 회의 심박수로 인공호흡을 실시하였다. 대퇴정맥과 대퇴동맥에 캐뉼러를 삽입하여 각각 약물 투여 및 혈압 측정에 이용하였다. 한편 허혈성 심근손상 모델에서 체온은 결과에 중요한 영향을 미치므로, 직장에 삽입한 체온 측정용 탐침(probe)과 항온 피복 조절 유니트(Homeothermic blanket control unit)를 사용하여 쥐의 체온을 37 ℃로 일정하게 유지시켰다. 이후 실험기간 동안 쥐의 평균 동맥압(mean arterial blood pressure)과 심박동수(HR)를 계속해서 측정하였다. 이때 혈압 측정에는 슈타탐 P23XL 압력 변환기(Statham P23XL pressure transducer, Grass Ins., MA, 미국)를 사용하고 심박동수 측정에는 심전도/심박동수 카플러(ECG/RATE Coupler, Hugo Sachs Electronic, 독일)를 사용하였다. 또한 그래프텍 리니어코더 차트 리코더(Graphtec Linearcorder WR 3310, Hugo Sachs Electronic)를 사용하여 모든 변화를 연속적으로 기록하였다.
좌관상 동맥은 셀리(Selye H.)의 방법에 의해 하기와 같이 결찰시켰다. 즉, 좌개흉술(left thoracotomy)에 의해 쥐의 가슴 일부를 열고 왼손의 장지(長指)로 마취된 흰쥐의 오른쪽 가슴에 압력을 가하여 심장을 외부로 밀어내어 왼손의 엄지와 검지 손가락으로 심장을 가볍게 고정시켰다. 이후 수술사(5-0 silk ligature)가 부착된 봉합용(suture) 바늘로 조심스럽게 좌심실 하행성 관상동맥(left anterior desending coronary artery, LAD)을 포함하는 부분을 뜬 뒤 재빨리 심장을 흉곽강(thoracic cavity)에 재위치시키고 수술사 양끝을 외부에 위치시켰다. 수술사 양끝은 PE 튜브(PE100, 2.5 cm)에 통과시킨 후 20분 동안 그대로 두어 안정화시켰다. 그 후 대퇴정맥에 삽입된 캐뉼러를 통해 용매(vehicle) 또는 약물을 투여하였으며, 약물의 효과가 충분히 나타나도록 30분간 그대로 두었다. 이때, 대조군의 약물로는 카리포라이드를 사용하였다.
이후 실에 끼워 놓았던 PE 튜브를 심장에 밀어 넣고 튜브의 끝 부분 실을 지혈(hemostatic) 핀셋으로 당겨 PE 튜브를 관상동맥에 수직으로 밀착시켜 압력을 가하였으며, 45분 동안 그대로 두어 관상동맥을 결찰(occlusion)시킨 뒤 지혈 핀셋을 제거하고 90분간 재관류시켰다.
상기 방법에 의해 관상동맥을 재결찰(reocclusion)시키고, 1% 에반스 블루 용액(Evans blue) 2 ml를 정맥투여하였다. 이후 펜토바비탈을 과량 정맥 투여하여 흰쥐를 도살시키고 심장을 떼어내어 우심실과 양쪽 심방을 제거하였다. 좌심실은 심첨으로부터 5~6 개의 절편(slice)으로 수평 절단하고, 절편 각각의 무게를 측정하였다. 심장 절편 각각의 표면은 콤팩트 미세 영상 측정장치(compact micro vision system)인 하이-스코프(Hi-scope)와 화상분석용 컴퓨터 프로그램(Image pro plus)을 이용해 컴퓨터에 입력시키고, 이로부터 각 절편에서 푸른색으로 착색된 정상혈류 조직의 면적과 착색되지 않은 영역의 면적을 측정하였다. 각 절편의 총면적에 대하여 착색되지 않은 영역의 면적비를 구하고 여기에 각 절편의 무게를 곱하여 각 절편의 위험영역인 AAR(area at risk)을 계산하였다. 이렇게 구한 각 절편에 대한 AAR을 모두 합하고 이것을 전체 좌심실 무게로 나누어, 하기 수학식 1에 의해 AAR(%)을 구하였다.
Figure 112007019928730-pat00041
또한, 심장 절편을 1% 2,3,5-트리페닐테트라졸륨 클로라이드 인산 완충 용액 (2,3,5-triphenyltetrazolium chloride(TTC) phosphate buffer, 37 ℃, pH 7.4)에서 15분 동안 배양시키고 10% 포르말린(formalin) 용액에서 20~24시간 동안 고정시켰다. 이렇게 함으로써 심근의 탈수소효소(dehydrogenase)와 보조인자(cofactor)인 NADH에 의해 2,3,5-트리페닐테트라졸륨 클로라이드가 환원되어 포르마잔 염료 (formazan dye)가 되므로, 조직의 정상 부위는 붉은 벽돌색(brick-red color)을 띠게 된다. 반면 조직의 경색 부위에는 탈수소효소와 보조인자가 없으므로 2,3,5-트리페닐테트라졸륨 클로라이드가 환원되지 않고, 따라서 붉은 벽돌색을 띠지 않게 된다.
상기와 같이 2,3,5-트리페닐테트라졸륨 클로라이드에 의해 조직 부위가 착색되는지 여부에 의해 각 절편의 정상 영역 및 경색 영역(Infarct zone)을 상기 AAR 측정시와 동일한 방법으로 구하였다. 이렇게 구한 각 절편에 대한 경색 영역을 모두 합하고 이것을 전체 AAR 무게 또는 전체 좌심실 무게로 나누어, 하기 수학식 2에 의해 IS(%)를 구하였다. 이 실험 모델에 있어서는, IS(%)가 낮을수록 경색부위가 적은 것이므로 실험물질의 항허혈 효과가 강한 것으로 판정하였다. 그 측정 결과는 표 4에 나타내었다.
Figure 112007019928730-pat00042
실시예 심근경색율(IS/AAR1, %)
2 0.1 mg/kg 44.8
6 0.1 mg/kg 45.5
12 0.1 mg/kg 40.0
19 0.1 mg/kg 50.0
23 0.1 mg/kg 40.3
25 0.1 mg/kg 34.2
음성대조군 58.6
카리포라이드 0.1 mg/kg 40.5
1: IS/AAR(infacrt size/area at risk)
표 4에 나타난 바와 같이, 흰쥐를 이용한 in vivo 허혈 심근 손상 모델에서도, 본 발명의 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체들은 위험영역에 대한 심근경색율이 유의적으로 감소된 수치를 보였다. 구체적으로 용매 투여군은 위험영역(AAR)에 대한 심근경색율(IS/AAR, %)이 58.6%로서 허혈에 의한 심근 손상이 매우 심한 것을 알 수 있었고, 대조물질인 카리포라이드를 투여한 경우에는 심근경색율은 0.1 mg/kg 투여에 의해 40.5%로서 유의성 있는 항허혈 작용을 나타내었다. 실시예 2와 6의 화합물은 0.1 mg/kg 투여로 각각 44.%8 및 45.5%의 심근경색율을 나타내어 음성대조군보다 유의성 있는 감소를 나타내었으며, 실시예 20 및 23의 화합물은 각각 40.0% 및 40.3%의 심근경색율을 나타내어 카리포라이드와 유사한 심장보호효과를 나타내었다. 실시예 25의 화합물은 0.1 mg/kg 투여에 의해 34.2%의 심근 경색율을 나타내어 카리포라이드보다 유의성 있게(40.5%) 우수한 허혈심장 보호효과를 나타내었다. 실시예 25의 화합물은 NHE-1에 대한 억제효과가 카리포라이드보다 4 배 이상 우수하였을 뿐 아니라, 랫트 랑겐돌프모델에서 허혈에 의해 손상된 심장기능의 회복효과, 랫트 in vivo 허혈심장 모델에서 심근경색 크기의 감소효과가 카리포라이드보다 우수하였다.
따라서, 본 발명의 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체들은 in vivo 허혈심장 모델에서 심근경색율을 감소시킴으로서 허혈심장에 대한 보호작용이 우수하므로, 심근경색, 부정맥, 협심증 등의 허혈성 심장질환의 예방 및 치료제로 사용할 수 있으며, 관동맥우회술,관동맥경피성형술 등 심장시술 시의 심장보호제 등으로 사용할 수 있을 것으로 사료된다.
<실험예 4> 랫트에 대한 경구투여 급성 독성실험
본 발명의 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체들의 급성 독성을 알아보기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다.
6 주령의 특정병원부재(SPF) SD계 랫트를 사용하여 급성독성실험을 실시하였다. 군당 2 마리씩의 동물에 실시예 25의 화합물을 각각 0.5% 메틸셀룰로오스 용액에 현탁하여 10 mg/kg/15 ml의 용량으로 단 회 경구 투여하였다.
실험물질 투여 후, 동물의 폐사 여부, 임상증상 및 체중변화 등을 관찰하고 혈액학적 검사와 혈액생화학적 검사를 실시하였으며, 부검하여 육안으로 복강장기와 흉강장기의 이상여부를 관찰하였다.
실험 결과, 실험물질을 투여한 모든 동물에서 특기할 만한 임상증상은 없었고 폐사된 동물도 없었으며, 또한 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학 검사, 부검소견 등에서도 독성변화는 관찰되지 않았다. 이상의 결과 실험된 화합물은 모두 랫트에서 10 mg/kg 까지 독성변화를 나타내지 않으며, 경구 투여 최소치사량(LD50)은 적어도 100 mg/kg 이상인 안전한 물질로 판단되었다.
한편, 본 발명에 따른 상기 화합물은 목적에 따라 여러 형태로 제제화가 가능하다. 하기는 본 발명에 따른 상기 화합물을 활성성분으로 함유시킨 몇몇 제제화 방법을 예시한 것으로 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
<제제예 1> 정제(직접 가압)의 제조
본 발명의 유도체 화합물 5.0 mg
락토오스 14.1 mg
크로스포비돈 USNF 0.8 mg
스테아린산 마그네슘 0.1 mg
본 발명의 유도체 화합물을 체로 친 후, 락토오스, 크로스포비돈 USNF 및 스테아린산 마그네슘을 혼합하고 가압하여 정제로 제조하였다.
<제제예 2> 정제(습식 조립)의 제조
본 발명의 유도체 화합물 5.0 mg,
락토오스 16.0 mg
녹말 4.0 mg
폴리솔베이트 80 0.3 mg
콜로이달 실리콘 디옥사이드 2.7 mg
스테아린산 마그네슘 2.0 mg
증류수 적량
본 발명의 유도체 화합물을 체로 친 후, 락오토스와 녹말을 혼합하였다. 폴리솔베이트 80을 증류수에 용해시킨 후, 이 용액의 적당량을 첨가한 다음, 미립화하였다. 건조 후에 미립을 체질한 후 콜로이달 실리콘 디옥사이드 및 스테아린산 마그네슘과 혼합하였다. 그 미립을 가압하여 정제로 제조하였다.
<제제예 3> 산제의 제조
본 발명의 유도체 화합물 5.0 mg,
락토오스 14.8 mg
폴리비닐 피롤리돈 10.0 mg
스테아린산 마그네슘 0.2 mg
본 발명의 유도체 화합물을 체로 친 후에, 락토오스, 폴리비닐 피롤리돈 및 스테아린산 마그네슘과 함께 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
<제제예 3> 캡슐제의 제조
본 발명의 유도체 화합물 5.0 mg,
락토오스 14.8 mg
폴리비닐 피롤리돈 10.0 mg
스테아린산 마그네슘 0.2 mg
본 발명의 유도체 화합물을 체로 친 후에, 락토오스, 폴리비닐 피롤리돈 및 스테아린산 마그네슘과 함께 혼합하였다. 상기 혼합물을 통상의 캡슐제 제조방법에 따라 타정하고 젤라틴 캡슐에 충진하여 젤라틴 캡슐을 제조하였다.
<제제예 4> 주사제의 제조
본 발명의 유도체 화합물 100 mg,
만니톨 180 mg
Na2HPO4·12H2O 26 mg
증류수 2974 mg
본 발명의 유도체 화합물을 만니톨 및 Na2HPO4·12H2O와 함께 증류수에 용해시키고 pH를 약 7.5로 조절하여 멸균시킨 다음, 통상의 방법에 따라 주사제를 제조하였다.
이상에서 살펴본 바와 같이, 본 발명에 의하면 나트륨/수소 교환통로인 NHE-1에 대하여 강력한 억제작용을 나타내고, 적출 허혈심장모델에서 허혈/재관류에 의한 심장기능 손상의 회복을 증진시키며, 생체 내 허혈동물 모델에서 심근경색의 크기를 유의성 있게 감소시킬 수 있는, 우수한 심장보호효과를 갖는 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체를 얻을 수 있다. 따라서, 본 발명의 신규 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체는 심근경색, 심부전증, 협심증을 포함하는 허혈성 심장질환의 예방 및 치료제로 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 관동맥우회술, 관동맥경피성형술을 포함하는 수술요법 또는 혈전용해제를 이용한 약물요법을 포함하는 재관류 요법 시술 시에 심장보호제로 유용하게 사용될 수 있다.

Claims (18)

  1. 삭제
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. (2-(2,3-디클로로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
    (2-(2,5-디클로로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트;
    (2-(3,5-디클로로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘;
    (2-(2-메톡시-5-클로로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트; 및
    (2-(2-메톡시-5-플루오로페닐)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일카보닐)구아니딘 비스메탄설포네이트로 구성되는 군에서 선택되는 어느 하나의 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  5. 하기 반응식 1에 나타난 바와 같이,
    이탈기(L)를 갖는 화학식 2의 카복시산 유도체를 구아니딘과 반응시켜 화학식 1의 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체를 얻는 단계를 포함하여 이루어지는 제4항의 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법.
    [반응식 1]
    Figure 112008018267590-pat00044
    (상기 반응식 1에서,
    R1, R2 및 X는 제4항의 화합물 명칭을 통하여 정의된 바와 같고, L은 할로겐 원소, 히드록시, 알콕시, 메실레이트 및 토실레이트로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 1종의 이탈기이다.)
  6. 삭제
  7. 제5항에 있어서, 상기 구아니딘은 염기 촉매없이 카복시산 유도체에 대하여 1~10 당량으로 사용하는 것을 특징으로 하는 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법.
  8. 제7항에 있어서, 상기 반응 용매는 메탄올, 에탄올 및 이소프로판올을 포함하는 알콜계 용매; 테트라히드로퓨란, 1,4-디옥산 및 1,2-디메톡시에탄을 포함하는 에테르계 용매; 및 디메틸포름아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 1종 또는 이들의 혼합용매인 것을 특징으로 하는 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법.
  9. 제5항에 있어서, 염기 촉매 존재하에 상기 구아니딘은 카복시산 유도체에 대하여 동일한 당량으로 사용하는 것을 특징으로 하는 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법.
  10. 제9항에 있어서, 상기 염기 촉매는 수산화나트륨, 수산화칼륨, 탄산나트륨, 트리에틸아민 및 피리딘으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 1종 이상의 무기 또는 유기 염기인 것을 특징으로 하는 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법.
  11. 제9항에 있어서, 상기 반응용매는 벤젠 또는 톨루엔을 포함하는 방향족 탄화 수소 화합물계 용매; 테트라히드로퓨란 또는 1,4-디옥산을 포함하는 에테르계 용매; 디클로로메탄 또는 클로로포름을 포함하는 할로겐화 탄화수소 화합물계 용매; 및 디메틸포름아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 1종 또는 이들의 혼합용매인 것을 특징으로 하는 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법.
  12. 제5항에 있어서, 상기 이탈기가 히드록시인 경우, 상기 방법은 축합제 존재하에 수행되는 것을 특징으로 하는 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법.
  13. 제12항에 있어서, 상기 축합제는 N,N-카보닐디이미다졸, 디시클로헥실카보디이미드, 디이소프로필카보디이미드, 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드 및 디페닐포스포닐아자이드로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 1종인 것을 특징으로 하는 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법.
  14. 제5항에 있어서, 상기 카복시산 유도체가 보호기로 보호될 필요가 있는 경 우, 상기 방법은 반응 전 적당한 보호기로 보호하여 반응을 수행한 다음, 상기 보호기를 제거하는 단계를 추가적으로 더 포함하는 것을 특징으로 하는 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법.
  15. 제4항의 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 허혈성 심장질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  16. 제15항에 있어서, 상기 허혈성 심장질환은 심근경색, 심부전증 및 협심증으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 1종 이상인 것을 특징으로 하는 허혈성 심장질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  17. 제4항의 4-메틸이미다졸-5-카보닐구아니딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 수술요법 또는 약물요법 시술시에 심장보호 용도로 사용되는 약학적 조성물.
  18. 제17항에 있어서, 상기 수술요법은 관동맥우회술 또는 관동맥경피성형술이고, 상기 약물요법은 혈전 용해제를 이용한 재관류 요법인 것을 특징으로 하는 심장보호 용도로 사용되는 약학적 조성물.
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