상기한 목적을 달성하기 위한 본 발명은 락토바실러스 크리스파터스 RMK567(KCCM 10745P)을 함유하는 발효유를 제공한다.
또한, 본 발명은 락토바실러스 크리스파터스 RMK567 균주를 원유에 접종하여 발효유를 제조하는 방법을 제공한다.
이하 본 발명의 구성을 상세히 설명하면 다음과 같다.
본 발명은 원유에서 분리된 종균 락토바실러스 크리스파터스 RMK567(KCCM 10745P)을 함유하는 발효유를 제공한다. 락토바실러스 크리스파터스 RMK567(KCCM 10745P)은 발효유의 감마-아미노부티르산의 함량을 증가시킨다.
본 발명의 발효유는 락토바실러스 크리스파터스 RMK567 균주를 함유한 발효유에 과당, 올리고당 등의 식품학적으로 허용 가능한 당류 또는 딸기, 블루베리, 포도 등을 이용한 과일 쨈을 첨가하여 기호성이 우수한 발효유를 제조할 수 있다. 또한, 락토바실러스 크리스파터스 RMK567 균주는 감마-아미노부티르산의 생성능이 우수하여, 본 발명에 의한 발효유는 다른 균주에 의한 발효유보다 감마-아미노부티르산 함량이 높다.
또한, 본 발명은 락토바실러스 크리스파터스 RMK567 균주를 원유에 접종하여 발효유를 제조하는 방법을 제공한다.
락토바실러스 크리스파터스 RMK567 균주를 원유에 접종하여 발효유를 제조하는 방법을 공정별로 상세히 설명하면 다음과 같다.
[제 1공정] 종균 및 벌크 접종균(bulk starter) 제조
원유에서 분리된 종균인 락토바실러스 크리스파터스(Lactobacillus crispatus) RMK567(KCCM 10745P)을 탈지유 또는 환원탈지유에 0.5 내지 1%(v/v) 접종하고, 37 내지 42℃에서 6 내지 12시간 동안 배양하는 것이 바람직하다. 그런 다음, 이 배양액 종균을 80 내지 90℃에서 30분 내지 60분간 열처리된 탈지유 또는 환원탈지유에 0.5 내지 1%(v/v)로 접종하고, 37 내지 42℃에서 6 내지 12시간 동안 배양하여, 이 배양액을 벌크 접종균으로 사용한다.
[제 2공정] 발효액 제조
원유 0~100%, 탈지 분유 0~10%와 글루탐산모노나트륨(monosodium glutamate, MSG) 0.1~1%를 첨가하고 55~65℃에서 배합하여 완전히 녹인 후 180~250kgf/㎠의 압력으로 균질화한 다음 85~95℃에서 5~30분간 살균시킨다. 상기 과정을 통해 균질화 시킨 우유를 35~45℃ 정도로 냉각시키고 락토바실러스 크리스파터스 (Lactobacillus crispatus) RMK567((KCCM 10745P) 벌크 접종균을 0.5~1.0중량% 접종하여 최종 pH가 4.3~4.6으로 감소할 때까지 배양시킨 다음 교반기로 서서히 교반하면서 배양액을 15~20℃로 냉각한다. 상기 과정은 본 발명에 사용가능한 발효유 제조의 바람직한 일실시 배양으로서 반드시 이에 한정될 필요는 없다.
[제 3공정] 당 시럽 및 과일첨가
올리고당이 바람직하게는 3.0~7.0중량%, 액상과당이 바람직하게는 1.0~5.0 중량%, 정제수가 바람직하게는 1.0~10.0중량%에 딸기쨈(61.2Bx, 딸기 45%) 또는 블루베리쨈(62.0Bx, 블루베리 40%) 4~10중량%를 더 첨가하는 것으로 관능성을 크게 개선할 수 있다.
[제 4공정] 혼합 및 충진·포장
발효액 70~90중량%에 당 시럽 및 과일 10~30중량%를 혼합하고 서서히 교반하여 적당한 크기의 용기에 충전 및 포장시켜 0~5℃에서 저장한다.
상술한 본 발명의 락토바실러스 크리스파터스 (Lactobacillus crispatus) RMK567을 이용한 발효유의 전체적인 제조공정을 도 1에 나타내었다.
이하 본 발명의 내용을 실시예에 의해 더욱 상세하게 설명하기로 한다. 다만, 이들 실시예는 본 발명의 내용을 이해하기 위해 제시되는 것일 뿐 본 발명의 권리범위가 이들 실시예에 한정되는 것으로 해석되어져서는 아니 된다.
[실시예 1] 감마-아미노부티르산(GABA) 생산 젖산 균주 선발
원유에서 분리된 젖산균과 상업용 젖산균 1%를 글루탐산모노나트륨(monosodium glutamate, MSG) 1% 첨가된 10% 환원탈지유에 37℃에서 18시간 배양 후 pH와 GABA 생산 양을 측정하였다. 그 결과는 다음 표 1과 같다. 원유에서 분리한 탈지유 응고 균주들 중 탈지유 응고속도와 GABA 생성 능력이 우수한 균주를 Lactobacillus crispatus RMK567로 명명하고, 2006년 4월 12일 사단법인 한국종균 협회(KFCC)에 기탁번호 KCCM 10745P로 기탁하였다.
<표 1> 상업 균주, 한국식품연구원에서 보관 젖산 균주 및 분리 균주의 탈지유 응고 여부와 배양 후의 pH 및 GABA 생산 양
보관 젖산균 |
출 처 |
탈지유 응고 반응 |
pH |
GABA (ppm/g건물) |
24hr |
48hr |
L. acidophilus*
|
NCFM, Rhone-poulenc |
+ |
+ |
4.21 |
32.50 |
L. acidophilus*
|
Culture System |
+ |
+ |
4.53 |
22.65 |
Streptococcus
themophilus
*
|
Culture System |
+ |
+ |
4.32 |
30.53 |
L. acidophilus*
|
NCFM, Rhone-poulenc |
+ |
+ |
4.12 |
23.64 |
L.
lactis
subsp
.
lactis
|
ATCC 21053 |
+ |
+ |
5.81 |
5.91 |
L.
lactis
|
ARRL B-633 |
+ |
+ |
6.07 |
9.85 |
L.
diacetylactis
|
NRRL B-2356 |
+ |
+ |
4.75 |
6.89 |
L.
casei
|
ATCC 393 |
+ |
+ |
5.44 |
5.91 |
L. acidophilus
|
ATCC 11506, IFO 3205 |
+ |
+ |
5.45 |
5.91 |
L.
cremoris
|
KFRI 00349 |
+ |
+ |
5.66 |
3.94 |
L.
delbrueckii
subsp
.
lactis
|
ATCC 7830, IFO 3376 |
+ |
+ |
5.30 |
5.94 |
L.
bulgaricus
|
ATCC 33409 |
+ |
+ |
5.30 |
8.86 |
L.
amylophilus
|
NRRL B-4437 |
+ |
+ |
6.07 |
5.91 |
L.
reuteri
|
KFRI 00661 |
+ |
+ |
5.84 |
10.83 |
L. crispatus RMK567 |
|
+ |
+ |
4.33 |
602.13 |
주) * 상업 균주
[실시예 2]
원유 96.05%, 탈지 분유 3.85%와 글루탐산모노나트륨 0.1%를 첨가하고 65℃에서 배합하여 완전히 녹인 후 180∼250kgf/㎠의 압력으로 균질화하였다. 90℃에서 5분간 살균하고, 40℃로 냉각시킨 다음 락토바실러스 크리스파터스 (Lactobacillus crispatus) RMK567(KCCM 10745P) 벌크 접종균을 1.0중량% 접종하여 최종 pH가 4.4로 감소할 때까지 배양시킨 다음 교반기로 서서히 교반하면서 배 양액을 15∼20℃로 냉각하였다. 발효액 84.0중량%에 올리고당 5.0중량%, 액상과당 2.0중량%, 정제수 5.0중량%, 딸기쨈 4.0중량%, 정제수 5.0중량%를 첨가하여 혼합한 다음 교반하여 용기에 충진 및 포장하고 5℃의 온도에서 저장하였다.
[실시예 3]
딸기쨈 4.0중량% 대신에 6.0중량%, 정제수 5.0중량% 첨가 대신에 3.0중량 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2와 같은 방법으로 발효유를 제조 및 저장하였다.
[실시예 4]
딸기쨈 4.0중량% 대신에 8.0중량%, 정제수 5.0중량% 첨가 대신에 1.0중량 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2와 같은 방법으로 발효유를 제조 및 저장하였다.
[실시예 5]
딸기쨈 4.0중량% 대신에 블루베리쨈 4.0중량% 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2와 같은 방법으로 발효유를 제조 및 저장하였다.
[실시예 6]
딸기쨈 4.0중량% 대신에 블루베리쨈 6.0중량%, 정제수 5.0중량% 첨가 대신 에 3.0 중량% 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2와 같은 방법으로 발효유를 제조 및 저장하였다.
[실시예 7]
딸기쨈 4.0 중량% 대신에 블루베리쨈 8.0 중량%, 정제수 5.0 중량% 첨가 대신에 1.0중량% 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2와 같은 방법으로 발효유를 제조 및 저장하였다.
<표 2> 실시예 1 내지 실시예 6의 발효유 조성물
항목(중량%) |
실시예 2 |
실시예 3 |
실시예 4 |
실시예 5 |
실시예 6 |
실시예 7 |
원 유 |
80.682 |
80.682 |
80.682 |
80.682 |
80.682 |
80.682 |
탈지분유 |
3.234 |
3.234 |
3.234 |
3.234 |
3.234 |
3.234 |
올리고당 |
5.0 |
5.0 |
5.0 |
5.0 |
5.0 |
5.0 |
액상과당 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
딸기쨈 |
4.0 |
6.0 |
8.0 |
- |
- |
- |
블루베리쨈 |
- |
- |
- |
4.0 |
6.0 |
8.0 |
글루탐산모노나트륨 |
0.084 |
0.084 |
0.084 |
0.084 |
0.084 |
0.084 |
정제수 |
5.0 |
3.0 |
1.0 |
5.0 |
5.0 |
5.0 |
<시험예 1> 관능검사
발효유 관련분야에서 2년 이상 근무한 13명의 인원을 관능검사요원으로 하여 상기 실시예 1 내지 실시예 6의 방법에 의해 제조한 발효유의 색깔, 맛, 조직감 및 종합적 기호도와 같은 관능검사를 9점 평점법으로 실시하여 그 결과를 아래의 표 3에 정리하여 나타내었다. 락토바실러스 크리스파터스 RMK567 균주를 함유한 발효유 에 당 시럽 및 과일 쨈을 첨가하여 기호성이 우수한 발효유를 제조할 수 있었다.
<표 3> 실시예 1 내지 실시예 6의 발효유 관능검사
항목 |
관능검사 |
색깔 |
맛 |
조직감 |
종합적 기호도 |
실시예 1 |
6.42±0.90 |
5.92±1.31 |
6.42±1.08 |
6.08±0.90 |
실시예 2 |
7.08±0.79 |
7.08±1.08 |
7.08±1.08 |
7.00±1.09 |
실시예 3 |
6.75±1.06 |
6.92±1.24 |
6.83±0.78 |
7.00±1.17 |
실시예 4 |
6.33±1.64 |
5.67±1.19 |
5.92±1.44 |
5.67±1.53 |
실시예 5 |
6.67±1.34 |
6.67±1.19 |
6.25±1.42 |
6.58±1.16 |
실시예 6 |
6.33±1.03 |
6.67±1.40 |
6.25±1.48 |
6.67±0.94 |
* 1: 매우 좋지 않음, 5: 관능한계치, 9: 매우 좋음