KR100589965B1 - 3,5-디아미노인다졸 유도체, 그의 제조방법 및 사이클린의존성 키나아제 저해제로서의 그의 용도 - Google Patents

Abstract

본 발명은 사이클린 의존성 키나아제(CDK) 저해제로 유용한 3,5-디아미노인다졸구조를 갖는 하기 화학식 1의 화합물, 그의 약제학적으로 허용되는 염, 수화물 및 용매화물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 화학식 1의 화합물을 제조하는 방법 및 약제학적으로 허용되는 담체와 함께 화학식 1의 화합물을 활성성분으로 함유함을 특징으로 하는 암, 염증, 혈관 협착증 및 혈관생성 등 세포 증식에 관련된 질병의 억제 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

상기 식에서, R1, R2 및 R3 은 명세서에 정의된 바와 같다.

Description

3,5-디아미노인다졸 유도체, 그의 제조방법 및 사이클린 의존성 키나아제 저해제로서의 그의 용도{3,5-Diaminoindazole derivatives, their preparation and their use as inhibitors for cyclin dependent kinases}

본 발명은 사이클린 의존성 키나아제(Cyclin Dependent Kinase ; 이하, "CDK"라 한다) 저해제로서 유용한 하기 화학식 1의 화합물, 그의 약제학적으로 허용되는 그의 염, 수화물 및 용매화물, 그 제조방법 및 그를 활성성분으로 함유하는 암, 염증, 혈관 협착증 및 혈관생성 등 세포 증식에 관련된 질병의 억제 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

[화학식 1]

상기 식에서,

R1 은 방향족 그룹; 할로겐, 아미드, 저급알킬로 치환될 수 있는 카바메이 트, 에스테르, 저급알킬, 저급알콕시, 시아노, 하이드록시, 설포닐, 할로겐으로 치환될 수 있는 저급알킬 설폭시, 설폰아미드, 아미딘, 아미독심, 사이클로알킬, 저급알킬기에 의해 치환될 수 있는 질소 및 산소원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리 내에 포함된 헤테로사이클로알킬, 아미노, 페닐, 퓨릴 및 티오펜 그룹으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 방향족 그룹; 질소, 산소 및 황 원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리에 포함된 방향족 그룹; 바이사이클릭 방향족 그룹; 질소, 산소 및 황 원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리에 포함된 바이사이클릭 방향족 그룹; 또는 질소 및 산소 원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리내에 포함된 헤테로사이클릭 그룹, 아미노 그룹, 및 저급알킬기로 치환될 수 있는 카바메이트 그룹으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 치환된, 질소, 산소 및 황 원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리에 포함된 바이사이클릭 방향족 그룹을 나타내며,

R2 및 R3 은 각각 수소; 저급알킬; 또는 할로겐으로 치환될 수 있는 저급알킬 설포닐 그룹을 나타낸다.

상기 화학식 1의 치환기에 대한 상기 설명에서 용어 "저급알킬" 및 "저급알콕시"는 각각 탄소 수 1 내지 6개의 직쇄 또는 분지쇄의 알킬기 및 알콕시기를 의미한다. 또한, "할로겐"은 불소, 염소, 브롬, 요오드를 의미한다. "사이클로알킬"은 탄소수 3 내지 6의 사이클로알킬을 의미한다.

세포분열 과정의 분자 수준에서의 본격적인 연구는 1980년대 후반 개구리 난 자의 분열에 관한 연구, 효모의 여러 세포 성장이나 방사성 돌연변이의 특성분석, 그리고 종양 억제자인 Rb 연구를 통하여 활발해지기 시작했다. 1990년대에 들어 작은 크기의 세포주기 조절인자가 그의 조절기능을 통하여 세포의 성장, 분화, 발생, 노화, 고사(apoptosis) 등 세포분열과정을 조절한다는 사실이 밝혀졌으며, 이러한 연구결과는 여러 질병의 병리현상들을 좀더 정확히 이해하는데 큰 도움을 주었다. 그 대표적인 예가 암(cancer)이다. 정상세포가 암세포로 변형되는 과정에서 세포성장 조절이 그 기능을 상실하는 경우가 많이 발견되었다. 즉, 암세포에서는 세포주기 조절인자의 비정상적인 활성이 많이 발견되었고 이중에는 암병리학에서 가장 문제시되고 있는 침입/전이(invasion/metastasis)의 깊은 상관관계를 보여주는 경우도 있다. 특히, 형질전환된 동물을 이용하여 세포성장 조절요소들의 과발현(overexpression) 또는 녹아웃(knock-out)을 유도하면 이들 실험동물에 암이 유발되는 것으로부터 세포주기의 조절해제(cell cycle deregulation)가 암을 유발시키는 직접적인 원인임을 알 수 있다.

세포의 성장은 다른 모든 생물학적 조절과 마찬가지로 포지티브 조절과 네거티브 조절을 받고 있다. 현재까지 알려진 세포주기 조절의 주된 경로는 사이클린 의존성 키나아제의 활성에 의한 것으로서, 많은 암세포 및 발암기전에 대한 연구결과 키나아제 활성에 대한 포지티브 또는 네거티브 조절상의 문제가 암의 발생으로 이어지는 경우가 많은 것으로 확인되었다. 즉, 균형 잡힌 조절이 이루어지지 못하거나 적시의(timely) 조절이 이루어지지 못하는 경우 암이 발생될 수 있다.

포유류의 대표적인 사이클린 의존성 키나아제로는 세포주기의 mid-G1기에서 활성을 나타내는 CDK4(cyclin dependent kinase 4), mid-G1 및 S기에서 활성을 나타내는 CDK2, 및 G2-M기에서 활성을 나타내는 CDC2(CDK1)를 들 수 있다. 이중 CDK4 및 CDK2는 G1-S 세포주기 체크포인트에 의해서 그 활성이 조절되며 CDC2는 G2-M 체크포인트에 의해서 그 활성이 조절되는 것으로 알려져 있다. 여러 암세포에서 CDK4, CDK2, CDC2(CDK1)의 조절기작에 있어서의 비정상성을 보여주고 있고, 실제로 형질전환된 동물에서 인위적으로 유도된 이들 효소의 비정상성이 암을 유발시키는 것으로 확인되었다. 따라서, 이들 대표적인 사이클린 의존성 키나아제 CDK4, CDK2, CDC2(CDK1)는 항암제의 표적(target)으로서 매우 좋은 위치에 있다.

이들 CDKs와 암 발병과의 관련성에 대해 지금까지 보고된 결과를 좀더 자세히 설명하면 다음과 같다.

CDK4 활성의 비정상적 조절과 암 발병과의 연관성은 여러 암조직에서 관찰되고 있다. 여러 종류의 암에서 p16, p15 유전자의 결실 또는 사이클린 D1의 과발현이 확인되고 있는데 이는 CDK4 활성이 조절되지 않는 경우 암의 악성 표현형(malignant phenotype)이 나타날 수 있음을 시사하고 있다. 또한, p16 녹아웃 마우스는 p53 녹아웃 마우스만큼이나 암발생율이 높다고 보고되어 있으며, 이로부터 CDK4 조절에 대한 p16의 기능상실이 암의 원인임을 알 수 있다. 이 결과는 p16이 Ras나 src 등을 과발현시킨 NIH 3T3 세포에 있어서 하부(downstream)에서 그 역할을 수행할 가능성을 보여준다고 할 수 있다. 또한, 역으로 p16 이나 p21을 ras로 형질 변환시킨 세포에서 발현시키면 변형된 표현형이 정상적인 표현형으로 바뀌는 것이 관찰되었다. 이러한 실험적 증거들은 CDK4 활성의 조절해제가 암을 유도하는 분명한 원인임을 입증한다고 여겨지고, 한 걸음 더 나아가 암세포의 표현형을 유지하게 하는 역할을 하고 있을 가능성을 보여 준다고 하겠다. 따라서 CDK4의 저해제는 항암효과를 보일 가능성이 매우 높다.

한편, CDK2의 경우에, 일부 유방암에서 사이클린 E의 과발현이 관찰되고 이는 유방암의 전이와 깊은 연관이 있으며, 사이클린 E의 과발현이 낮은 혈청조건에서 세포의 고사를 저해하고 고착 비의존성 성장(anchorage independent growth)을 유발시키며, MMTV 프로모터를 이용하여 CDK2가 과발현되는 형질전환 동물에서 유방 상피세포의 과증식(hyperproliferation) 및 종양(neoplasia)이 관찰되는 것으로 보고되었는데, 이러한 사실은 CDK2 활성이 세포변형 과정 또는 그의 유지에 관여함을 강하게 시사하며, CDK2의 저해제가 항암제로서 작용할 수 있음을 나타낸다고 할 수 있다.

또한, CDKs 저해제는 세포증식에 관련된 질병(proliferative disease) 치료제로서도 사용될 수 있다고 알려져 있다 (참조: Webster K.R., "The therapeutic potential of targeting the cell cycle", Exp. Opin. Invest. Drugs, 1998; 76(6); pp865-887).

그 이외에도 CDC2(CDK1), CDK3, CDK5, CDK6, CDK7 등이 세포분열의 각 단계에서 중요한 역할을 하는 것으로 차츰 밝혀지고 있고 이들은 사이클린 의존성 키나아제(CDKs) 패밀리로 구분되고 있다. 또한, 사이클린의 경우도 위에서 언급했던 사이클린 D1이나 사이클린 E 이외에 사이클린 A, B, C, D2, D3, D4, F 및 G 가 같은 패밀리에 속한다.

이렇게 축적된 연구결과를 바탕으로 하여 이들 사이클린 의존성 키나아제들을 효과적으로 억제하는 저해제가 항암제 및 염증, 혈관 협착증 및 혈관 생성등 세포증식에 관련된 질병의 억제제 및 치료제로서 유용하리라는 인식 하에 이들 저해제에 대한 개발이 최근에 와서 이루어지기 시작했다.

지금까지 개발된 CDKs 저해제로서 효과적인 화합물로는 하기 화학식 2의 플라보피리돌(Flavopiridol; 유럽특허 제0,241,003호(1987) 및 제0,366,061호(1990) 참조)을 들 수 있다.

다음으로, 퓨린 구조를 갖는 하기 화학식 3의 CDKs 저해제가 국제특허출원 공개 제WO97/16447호에 개시된 바 있다.

또한, 4-아미노피리미딘 구조를 갖는 CDKs 저해제가 최근에 국제특허출원공 개 제WO98/33798호에 개시된 바 있다.

그러나, 지금까지 개발된 CDK 저해제들은 아직까지 충분히 만족스러운 효과를 나타내지 못하였으며, 이에 본 발명자들은 이들 CDKs 효소들의 저해제, 특히 아미노인다졸 계열 화합물에 대한 집중적인 연구를 수행한 결과, 새로운 구조를 갖는 상기 화학식 1의 3,5-디아미노인다졸 구조의 화합물이 상기한 CDKs 효소들을 효과적으로 저해함을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 목적은 상기 화학식 1의 3,5-디아미노인다졸 유도체, 그의 제조방법 및 이 유도체를 활성성분으로 함유하는 암, 염증, 혈관 협착증 및 혈관생성 등 세포 증식에 관련된 질병의 억제 또는 치료용 조성물을 제공하는 것이다. 여기서 CDKs 란 CDK2, CDK4 및 CDC2(CDK1), CDK3, CDK5, CDK6, CDK7 등을 모두 포함하며, 사이클린도 사이클린 D1 과 사이클린 E 및 사이클린 A, B, C, D2, D3, D4, F, G 를 모두 포함한다.

이하, 본 발명을 상세히 설명하면 다음과 같다.

본 발명은 CDKs 활성을 억제함으로써 암, 염증, 혈관 협착증 및 혈관생성 등 세포 증식에 관련된 질병의 억제 및 치료 효과를 나타내는, 특히 항암제로서 유용한 하기 화학식 1의 신규한 3,5-디아미노인다졸 유도체, 그의 약제학적으로 허용되는 염, 수화물 및 용매화물 및 그 제조방법에 관한 것이다.

[화학식 1]

상기 식에서,

R1 은 방향족 그룹; 할로겐, 아미드, 저급알킬로 치환될 수 있는 카바메이트, 에스테르, 저급알킬, 저급알콕시, 시아노, 하이드록시, 설포닐, 할로겐으로 치환될 수 있는 저급알킬 설폭시, 설폰아미드, 아미딘, 아미독심, 사이클로알킬, 저급알킬기에 의해 치환될 수 있는 질소 및 산소원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리 내에 포함된 헤테로사이클로알킬, 아미노, 페닐, 퓨릴 및 티오펜 그룹으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 방향족 그룹; 질소, 산소 및 황 원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리에 포함된 방향족 그룹; 바이사이클릭 방향족 그룹; 질소, 산소 및 황 원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리에 포함된 바이사이클릭 방향족 그룹; 또는 질소 및 산소 원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리내에 포함된 헤테로사이클릭 그룹, 아미노 그룹, 및 저급알킬기로 치환될 수 있는 카바메이트 그룹으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 치환된, 질소, 산소 및 황 원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리에 포함된 바이사이클릭 방향족 그룹을 나타내며,

R2 및 R3 은 각각 수소; 저급알킬; 또는 할로겐으로 치환될 수 있는 저급알킬 설포닐 그룹을 나타낸다.

화학식 1의 치환기에 대한 상기 설명에서 용어 "저급알킬" 및 "저급알콕시"는 각각 탄소 수 1 내지 6개의 직쇄 또는 분지쇄의 알킬기 및 알콕시기를 의미한다. 또한, "할로겐"은 불소, 염소, 브롬, 요오드를 의미한다. "사이클로알킬"은 탄소수 3 내지 6의 사이클로알킬을 의미한다.

본 발명에 따른 화합물은 또한 약제학적으로 허용되는 염을 형성할 수 있다. 이러한 약제학적으로 허용되는 염에는 약제학적으로 허용되는 음이온을 함유하는 무독성 산부가염을 형성하는 산, 예를 들면 염산, 황산, 질산, 인산, 브롬화수소산, 요오드화수소산 등과 같은 무기산, 타타르산, 포름산, 시트르산, 아세트산, 트리클로로아세트산, 트리플루오로아세트산, 카프릭산, 이소부탄산, 옥살산, 말론산, 석신산, 프탈산, 글루콘산, 벤조산, 락트산, 푸마르산, 말레인산 등과 같은 유기 카본산, 메탄설폰산, 벤젠설폰산, p-톨루엔설폰산 또는 나프탈렌설폰산 등과 같은 설폰산 등에 의해 형성된 산부가염이 포함된다.

바람직한 화학식 1의 화합물은 R1 이 방향족 그룹; 할로겐, 저급알킬, 저급알콕시, 하이드록시, 할로겐으로 치환될 수 있는 저급알킬 설폭시, 저급알킬기에 의해 치환될 수 있는 질소 및 산소 원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리 내에 포함된 헤테로사이클로알킬, 페닐 및 퓨릴로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 방향족 그룹; 또는 질소 및 산소 원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리내에 포함된 헤테로사이클릭 그룹, 아미노 그룹 및 알킬기로 치환될 수 있는 카바메이트 그룹으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 치환된, 질소, 산소 및 황 원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리에 포함된 바이사이클릭 방향족 그룹을 나타내며, R2 및 R3 은 각각 수소; 저급알킬; 또는 할로겐으로 치환될 수 있는 저급알킬 설포닐 그룹인 화합물들이다.

또한, 본 발명의 대표적인 화합물에는 다음과 같은 것을 들 수 있다 :

1. N-(5-{[(3-클로로프로필)설포닐]아미노}-1H-인다졸-3-일)-2-페닐아세트아미드;

2. N-(5-{[(3-클로로프로필)설포닐]아미노}-1H-인다졸-3-일)-2-(4-하이드록시페닐)아세트아미드;

3. 4-{2-[(5-{[(3-클로로프로필)설포닐]아미노}-1H-인다졸-3-일)아미노]-2-옥소에틸}페닐 3-클로로-1-프로판설포네이트;

4. N-{5-[비스(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}-2-페닐아세트아미드;

5. N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}-2-페닐아세트아미드;

6. 2-(4-클로로페닐)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

7. 2-(4-클로로페닐)-N-{5-[메틸(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

8. 2-[4-(2,5-디메틸-1-피롤리디닐)페닐]-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

9. tert-부틸 5-[2-({5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아미노)-2-옥소에틸]-1,3-벤조티아졸-2-일카바메이트;

10. 2-(2-아미노-1,3-벤조티아졸-6-일)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

11. 2-(2-클로로페닐)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

12. 2-(2-플루오로페닐)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

13. 2-[1,1'-비페닐]-4-일-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

14. 2-[4-(2-퓨릴)페닐]-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

15. 2-(4-에톡시페닐)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

16. 2-(4-이소프로필페닐)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

17. N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}-2-[2-(4-몰포리닐)-1,3-벤조티아졸-6-일]아세트아미드;

18. N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}-2-[4-(1-피페리디닐)페닐]아세트아미드.

R2 및 R3 모두가 수소인 경우를 제외한 본 발명에 따른 화학식 1의 화합물은 하기 화학식 5의 화합물에 대해 설폰아미드화 및 알킬레이션 반응 중 하나 이상을 수행하여 R2또는 R3을 결합시키고, 통상의 탈보호화 과정을 수행함으로써 제조할 수 있으며, 이러한 화학식 1의 화합물의 제조 방법도 또한 본 발명의 목적이다.

상기식에서, R1은 화학식 1에서 정의한 바와 같다.

그러나, 본 발명에 따른 화합물의 제조방법이 하기에 설명하는 것으로만 한정되는 것은 아니며, 본 명세서에서 기재되거나 선행문헌에 게시된 여러 가지 합성방법을 임의로 조합함으로써 용이하게 제조할 수 있고, 이러한 조합은 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자에게 범용화된 통상의 기술이다.

본 발명에 따른 방법에서 출발물질의 하나로 사용될 수 있는 R1이 페닐인 화학식 5의 화합물은 하기 반응식 1에 도시된 방법에 따라 제조할 수 있다. 안트라 릴로니트릴을 출발물질로 이용하여 하기 반응식 1에 나타낸 바와 같은 반응과정을 거쳐 화학식 5의 화합물을 얻는 방법은 본 발명자들의 국제특허출원공개 제WO 01/85726호에 명시되어 있다.

반응이 완결된 후에 생성물은 통상적인 후처리 방법, 예를 들면 크로마토그래피, 재결정화 등의 방법에 의해 분리 및 정제할 수 있다.

본 발명에 따른 화학식 1의 화합물은 CDKs 에 대한 우수한 저해활성으로 인하여 세포의 항증식(antiproliferative) 효과가 뛰어난, 암, 염증, 혈관 협착증 및 혈관생성 등 세포 증식에 관련된 질병의 억제 또는 치료용 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다. 특히 본 발명에 따른 화학식 1의 화합물은 항암제로서 유용하다. 따라서, 본 발명은 약제학적으로 허용되는 담체와 함께 화학식 1의 화합물, 그의 약제학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 용매화물을 활성성분으로 함유함을 특징으로 하는 암, 염증, 혈관 협착증 및 혈관생성 등 세포 증식에 관련된 질병의 억제 또는 치료용 조성물을 제공하는 것을 또 다른 목적으로 한다.

본 발명의 화합물을 임상적인 목적으로 투여시에 단일용량 또는 분리용량으로 숙주에게 투여될 총 일일용량은 체중 1kg 당 1 내지 50mg의 범위가 바람직하나, 특정 환자에 대한 특이 용량 수준은 사용될 특정 화합물, 체중, 성, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설률, 약제혼합 및 질환의 중증도에 따라 변화될 수 있다.

본 발명의 화합물은 목적하는 바에 따라 주사용 제제 및 경구용 제제로 투여할 수 있다.

주사용 제제, 예를 들면 멸균 주사용 수성 또는 유성 현탁액은 공지된 기술에 따라 적합한 분산제, 습윤제 또는 현탁제를 사용하여 제조할 수 있다. 이때, 사용될 수 있는 용매에는 물, 링거액 및 등장성 NaCl 용액이 있으며, 멸균 고정 오일은 통상적으로 용매 또는 현탁 매질로서 사용한다. 모노-, 디-글리세라이드를 포함하여 어떠한 무자극성 고정오일도 이러한 목적으로 사용될 수 있으며, 올레산과 같은 지방산은 주사용 제제에 사용할 수 있다.

경구투여용 고체투여 형태는 캅셀제, 정제, 환제, 산제 및 입제가 가능하고, 특히 캅셀제와 정제가 유용하다. 정제 및 환제는 장피제로 제조하는 것이 바람직하다. 고체투여 형태는 본 발명에 따른 화학식 1의 활성화합물을 슈크로오즈, 락토오즈, 전분 등과 같은 하나 이상의 불활성 희석제, 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제, 붕해제 및 결합제 중에서 선택된 담체와 혼합시킴으로서 제조한다.

본 발명의 화합물을 임상적으로 투여하여 목적하는 세포의 항암효과를 얻고자 하는 경우에, 화학식 1의 활성화합물은 공지의 항암제 중에서 선택된 1종 이상 의 성분과 동시에 투여할 수 있다. 이러한 방식으로 본 발명의 화합물과 혼합하여 투여될 수 있는 항암제로는 5-플루오로우라실, 시스플라틴, 독소루비신, 택솔, 젬시타빈 (Gemcitabine) 등을 들 수 있다.

그러나, 항암효과를 목적으로 하는 본 발명에 따른 화합물 함유 제제는 상술된 것으로 제한되는 것은 아니며, 암의 치료 및 예방에 유용한 제제라면 어떠한 것도 포함될 수 있다.

이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 더욱 구체적으로 설명한다. 그러나, 이들 실시예 및 실험예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위한 것일 뿐, 어떤 의미로든 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되는 것은 아니다.

실시예 1 :

N-(5-{[(3-클로로프로필)설포닐]아미노}-1H-인다졸-3-일)-2-페닐아세트아미드의 합성

화학식 5의 화합물 0.2g (0.751 mmole)을 피리딘(15ml)에 녹인 후, 3-클로로프로판설포닐 클로라이드 0.11 ml (1.2eq)을 가하고 상온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 감압증류로 제거한 다음 메탄올과 디클로로메탄 5:95 혼합액을 이용 한 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 0.1g을 33%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CD₃OD, ppm); δ2.20 (2H, m), 3.17 (2H, t), 3.62 (2H, t), 3.78 (2H, s), 7.25 (1H, t), 7.32 (3H, m), 7.41 (3H, m), 7.61 (1H, s).

ESI MS(m/e) = 407 [M+1]

실시예 2 :

N-(5-{[(3-클로로프로필)설포닐]아미노}-1H-인다졸-3-일)-2-(4-하이드록시페닐)아세트아미드의 합성

2-1) N-(5-니트로-1H-인다졸-3-일)-2-(4-벤질옥시페닐)아세트아미드의 합성

2-아미노-N-하이드록시-5-니트로벤젠카르복시이미도아미드 2.0 g (10.2 mmole)을 150ml의 테트라히드로퓨란에 녹인 후, 수소화나트륨 0.26 g (60%, 2.5eq)을 가하고 10분간 상온에서 교반한 후 에틸 2-[(4-벤질옥시)페닐]아세테이트 0.72 g (1.2eq)을 가하고 14 시간동안 교반하였다. 용매를 감압증류로 제거한 다음, 에 틸아세테이트와 물로 처리한 후 에틸아세테이트와 헥산 1:2 혼합액을 이용한 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 2.23g을 54% 수율로 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm); δ3.71 (2H, s), 5.09 (2H, s), 7.00(2H, d), 7.30-7.45 (7H, m), 7.60 (1H, d), 8.15 (1H, dd), 9.01 (1H, s), 11.07 (1H, br s)

2-2) t-부틸 5-니트로-3-{[2-(4-벤질옥시페닐)아세틸]아미노}-1H-인다졸-1-카르복실레이트의 합성

상기 실시예 2-1)에서 얻은 화합물 2.15g (5.35 mmole)을 60ml의 테트라히드로퓨란에 녹인 후, 수산화나트륨 0.84g (4eq)을 10ml의 물에 녹인 수용액과 디-tert-부틸디카보네이트 1.8g (1.3eq) 을 가하고 1시간 동안 교반하였다. 용액을 감압 증류로 제거한 다음 에틸아세테이트와 헥산 1:2 혼합액을 이용한 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 2.0g을 75% 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm); δ1.71 (9H, s), 3.80 (2H, s), 4.91 (2H, s), 6.82 (2H, d), 7.14 (2H, d), 7.29-7.35 (4H, m), 8.15 (1H, d), 8.33 (1H, dd), 9.16 (1H, d)

2-3) t-부틸 5-아미노-3-{[2-(4-하이드록시페닐)아세틸]아미노}-1H-인다졸-1-카르복실레이트의 합성

상기 실시예 2-2)에서 얻은 화합물 2.0g (3.98mmole)을 메탄올 100 ml에 녹인 후, 활성 탄소에 흡착된 팔라디움(10%)을 가하고 수소공기 하에서 2시간 동안 교반하였다. 셀라이트를 이용한 감압여과로 고체를 제거한 후 감압증류로 용매를 제거 하여 표제 화합물 1.46g을 96% 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm); δ1.59 (9H, s), 3.40 (2H, s), 5.16 (2H, s), 6.72 (2H, d), 6.89 (2H, m), 7.15 (2H, d), 7.74 (2H, d)

2-4) 화합물 A

화합물 B

상기 실시예 2-3)에서 얻은 화합물 1.46g (3.822 mmole)을 피리딘 30ml에 녹인 후, 3-클로로프로판설포닐 클로라이드 0.588 ml (1.2eq)을 가하고 상온에서 5시간 동안 교반하였다. 용매를 감압증류로 제거한 다음 메탄올과 디클로로메탄 5:95 혼합액을 이용한 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 A와 B 각각 0.6g 과 0.5g을 전체 수율 55%로 얻었다.

화합물 A

¹H NMR (CD₃OD, ppm); δ1.71 (9H, s), 2.20 (2H, m), 3.21 (2H, t), 3.6 (2H, t), 3.70 (2H, s), 7.76 (2H, d), 7.22 (2H, d), 7.47 (1H, dd), 7.74 (1H, d), 8.04 (1H, d)

화합물 B

¹H NMR (CD₃OD, ppm); δ1.68 (9H, s), 2.22 (2H, m), 2.38 (2H, m), 3.21 (2H, t), 3.53 (2H, t), 3.65 (2H, t), 3.74 (2H, t), 3.87 (2H, s), 7.30 (2H, d), 7.45 (1H, dd), 7.50 (2H, d), 7.76 (1H, d), 8.05 (1H, d)

2-5) N-(5-{[(3-클로로프로필)설포닐]아미노}-1H-인다졸-3-일)-2-(4-하이드록시페닐)아세트아미드의 합성

상기 실시예 2-4)에서 얻은 화합물 A 0.04g (0.077 mmole)에 염화수소가 포화된 에틸아세테이트 2 ml 를 가하고 6시간 동안 교반하였다. 용매를 감압증류로 제거하여 표제 화합물 0.035g을 정량적으로 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm); δ2.20 (2H, m), 3.17 (2H, t), 3.63 (2H, t), 3.67 (2H, s), 6.76 (2H, d), 7.23 (2H, d), 7.31 (1H, dd), 7.41 (1H, d), 7.60 (1H, s)

ESI MS(m/e) = 423 [M+1]

실시예 3 :

4-{2-[(5-{[(3-클로로프로필)설포닐]아미노}-1H-인다졸-3-일)아미노]-2-옥소 에틸}페닐 3-클로로-1-프로판설포네이트의 합성

상기 실시예 2-4)에서 얻은 화합물 B 0.05g (0.076 mmole)에 염화수소가 포화된 에틸아세테이트 2 ml 를 가하고 6시간 동안 교반하였다. 용매를 감압증류로 제거하여 표제 화합물 0.033g을 77%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm); δ2.12 (2H, m), 2.29 (2H, m), 3.10 (2H, t), 3.64 (2H, t), 3.70 (2H, t), 3.79 (4H, m), 7.45 (1H, d), 7.33 (2H, d), 7.42 (1H, d), 7.49 (2H, d), 7.64 (1H, s), 9.65 (1H, s), 10.68 (1H, s)

ESI MS(m/e) = 563 [M+1]

실시예 4 :

N-{5-[비스(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}-2-페닐아세트아미드의 합성

4-1)

화학식 5의 화합물 0.05g (0.137 mmole)을 디클로로메탄 5 ml에 녹인 후 트리에틸아민 0.06ml (1.5eq)과 메탄설포닐클로라이드 0.016ml (3.0eq)를 가하고 1시간 동안 교반하였다. 용매를 감압증류로 제거한 다음 헥산과 에틸아세테이트 1:1 혼합액을 이용한 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물 0.023g을 32%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm); δ1.68 (9H, s), 3.48 (6H, s), 3.83 (2H, s), 7.35 (3H, m), 7.41 (2H, m), 7.47 (1H, dd), 8.04 (1H, s), 8.15 (1H, d), 8.37 (1H, s)

4-2)

상기 실시예 4-1)에서 얻은 화합물 15mg(0.034 mmole)을 디클로로메탄 5 ml 에 녹인 후 트리플루오로아세트산 2 ml을 가하고 2시간동안 교반하였다. 용매를 감압증류로 제거하여 표제화합물을 정량적으로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃ + CD₃OD, ppm); δ3.45 (6H, s), 3.80 (2H, s), 7.30-7.40 (5H, m), 7.45 (1H, d), 8.00 (1H, s) 8.12 (1H, d)

ESI MS(m/e) = 423 [M+1]

실시예 5 :

N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}-2-페닐아세트아미드의 합성

5-1)

화학식 5의 화합물 1.0g (2.74 mmole)을 디클로로메탄 20 ml 에 녹인 후 트리에틸아민 0.76 ml (2 eq)과 메탄설포닐클로라이드 0.23 ml(1.1 eq)를 가하고 2시간동안 교반하였다. 여기에 1N 수산화나트륨 수용액 10 ml을 가한 다음 2시간동안 교반하였다. 용매를 감압증류로 제거한 다음 헥산과 에틸아세테이트 1:2 혼합액을 이용한 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물 0.33g을 27%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm); δ1.68 (9H, s), 2.95 (3H, s), 3.81 (2H, s), 7.27-7.37 (5H, m), 8.13 (1H, d), 8.35 (1H, s)

5-2)

상기 실시예 5-1)에서 얻은 화합물 15mg (0.034 mmole)을 디클로로메탄 5 ml에 녹인 후 트리플루오로아세트산 2 ml을 가하고 2시간동안 교반하였다. 용매를 감압증류로 제거하여 표제 화합물을 정량적으로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃ + CD₃OD, ppm); δ2.88 (3H, s), 3.76 (2H, s), 7.24 (1H, t), 7.30-7.37 (6H, m), 8.35 (1H, s)

ESI MS(m/e) = 345 [M+1]

실시예 6 :

2-(4-클로로페닐)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드의 합성

6-1)

에틸 2-[(4-벤질옥시)페닐]아세테이트 대신 에틸 2-(4-클로로페닐)아세테이트를 사용한 것을 제외하고는 실시예 2-1), 2-2), 2-3)과 동일한 방법으로 합성을 수행하여 표제 화합물 1.0g을 18%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CD₃OD, ppm); δ1.65 (9H, s), 3.77 (2H, s), 7.09 (1H, dd), 7.16 (1H, s), 7.32 (4H, m), 7.84 (1H, d)

6-2)

상기 실시예 6-1)에서 얻은 화합물 1.0g(2.5mmol)을 사용하여 실시예 5-1)과 동일한 방법으로 반응을 수행하여 표제 화합물 1.1g을 92%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm); δ1.61 (9H, s), 2.23 (3H, s), 3.78 (2H, s), 7.38 (4H, m), 7.46 (1H, dd), 7.79 (1H, s), 8.02 (1H, d)

6-3)

상기 실시예 6-2)에서 얻은 화합물 0.30g(0.626mmol)을 사용하여 실시예 5-2)와 동일한 방법으로 반응을 수행하여 표제 화합물 0.09g을 38%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CD₃OD, ppm); δ2.90 (3H, s), 3.79 (2H, s), 7.34 (3H, m), 7.42 (3H, m), 7.61 (1H, s)

ESI MS(m/e) = 379 [M+1]

실시예 7 :

2-(4-클로로페닐)-N-{5-[메틸(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드의 합성

7-1)

상기 실시예 6에서 얻은 화합물 0.61g(1.27 mmole)을 디클로로메탄 8ml에 녹인 후 요오도메탄 0.4 ml(50 eq)과 1,8-디아자바이사이클로[5.4.0]운데-7-엔 0.57ml(3 eq)을 가하고 16시간동안 교반하였다. 용매를 감압증류로 제거한 다음 메탄올과 디클로로메탄 5:95 혼합액을 이용한 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제화합물 0.4g을 64% 수율로 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm); δ1.63 (9H, s), 2.96 (3H, s), 3.25 (3H, s), 3.80 (2H, s), 7.40 (4H, m), 7.66 (1H, dd), 8.00 (1H, s), 8.07 (1H, d)

7-2)

상기 실시예 7-1)에서 얻은 화합물 0.4 g(0.810mmol)을 사용하여 상기 실시예 5-2)와 동일한 방법으로 반응을 수행하여 표제 화합물 0.14 g을 44%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm); δ2.93 (3H, s), 3.29 (3H, s), 3.74 (2H, s), 7.40 (6H, m), 7.78 (1H, s)

ESI MS(m/e) = 393 [M+1]

실시예 8 :

2-[4-(2,5-디메틸-1-피롤리디닐)페닐]-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드의 합성

8-1)

에틸 2-[(4-벤질옥시)페닐]아세테이트 대신에 에틸 2-[4-(2,5-디메틸-1-파이롤리디닐)페닐]아세테이트를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 2-1)과 동일한 방법으로 실시하여 화합물 5.2g을 52%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm); δ1.10 (3H, d), 1.28 (3H, d), 1.70 (2H, m), 2.07 (1H, m), 2.28 (1H, m), 3.74 (2H, s), 3.77 (1H, m), 4.10 (1H, m), 6.60 (2H, m), 7.14 (2H, d), 8.14 (1H, dd), 8.37 (1H, d), 9.21 (1H, s)

8-2)

상기 실시예 8-1)에서 얻은 화합물 5.2g (13.2 mmol)을 사용하여 상기 실시예 2-2)와 동일한 방법으로 반응을 실시하여 표제 화합물 3.5g을 54%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm); δ1.11 (3H, d), 1.27 (3H, d), 1.70 (11H, m), 2.06 (1H, m), 2.28 (1H, m), 3.76 (3H, m), 4.10 (1H, m), 6.61 (2H, m), 7.14 (2H, d), 8.14 (1H, dd), 8.38 (1H, d), 9.21 (1H, s)

8-3)

상기 실시예 8-2)에서 얻은 화합물 3.5g (7.1 mmol)을 사용하여 상기 실시예 2-3)과 동일한 방법으로 반응을 실시하여 표제 화합물 3.0g을 91%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm); δ1.11 (3H, d), 1.26 (3H, d), 1.66 (11H, m), 2.08 (1H, m), 2.22 (1H, m), 3.74 (5H, m), 3.99 (1H, m), 6.56 (2H, m), 7.12 (2H, m), 7.32 (1H, s), 7.82 (1H, d), 8.11 (1H, d)

8-4)

상기 실시예 8-3)에서 얻은 화합물 3.0g(6.48 mmole)을 사용하여 상기 실시예 5-1)과 동일한 방법으로 반응을 실시하여 표제 화합물 2.0g을 57%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm); δ1.10 (3H, d), 1.25 (3H, d), 1.68 (11H, m), 2.04 (1H, m), 2.18 (1H, m), 2.99 (3H, s), 3.70 (3H, m), 3.98 (1H, m), 6.56 (2H, m), 7.14 (2H, m), 7.56 (1H, d), 8.02 (2H, m)

8-5)

상기 실시예 8-4)에서 얻은 화합물 2.0g(4.1 mmole)을 사용하여 상기 실시예 5-2)와 동일한 방법으로 반응을 실시하여 표제 화합물 1.5g을 92%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm); δ1.11 (3H, d), 1.21 (3H, d), 1.54 (2H, m), 2.01 (1H, m), 2.18 (1H, m), 2.87 (3H, s), 3.54 (2H, s), 3.61 (1H, m), 3.85 (1H, m), 6.43 (2H, m), 7.05 (2H, m), 7.14 (1H, d), 7.31 (1H, d), 7.53 (1H, s)

ESI MS(m/e) = 443 [M+1]

실시예 9 :

tert-부틸 5-[2-({5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아미노)-2-옥소에틸]-1,3-벤조티아졸-2-일카바메이트의 합성

9-1)

에틸 2-[(4-벤질옥시)페닐]아세테이트 대신에 에틸 2-{2-[(tert-부톡실카보닐)아미노]-1,3-벤조티아졸-5-일}아세테이트를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 2-1)과 동일한 방법으로 반응을 실시하여 표제 화합물 0.2g을 42%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm); δ1,47 (9H, s), 3.84 (2H, s), 7.38 (1H, s), 7.59 (2H, d), 7.86 (1H, s), 8.20 (1H, d), 8.38 (1H, dd), 9.11 (1H, s)

ESI MS(m/e) = 371 [M+1]

9-2)

상기 실시예 9-1)에서 얻은 화합물 0.066g(0.14 mmole)을 사용하여 상기 실시예 2-2)와 동일한 방법으로 반응을 실시하여 표제화합물 0.05g을 63%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm); δ1,46 (9H, s), 1.64 (9H, s), 3.91 (2H, s), 7.42 (1H, s), 7.64 (2H, d), 7.92 (1H, s), 8.25 (1H, d), 8.41 (1H, dd), 9.09 (1H, s)

9-3)

상기 실시예 9-2)에서 얻은 화합물 0.045g(0.079mmol)을 사용하여 상기 실시예 2-3)과 동일한 방법으로 반응을 실시하여 표제 화합물 0.035g을 82%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CD₃OD, ppm); δ1,53 (9H, s), 1.64 (9H, s), 3.92 (2H, s), 7.05 (1H, dd), 7.24 (1H, s), 7.34 (1H, d), 7.55 (1H, d), 7.66 (1H, d), 7.75 (1H, s)

9-4)

화합물 A

화합물 B

상기 실시예 9-3)에서 얻은 화합물 0.035g(0.065mmol)을 사용하여 상기 실시예 2-4)와 동일한 방법 (단 3-클로로프로판설포닐 클로라이드 대신에 메탄설포닐클로라이드를 사용)으로 반응을 실시하여 화합물 A와 B를 각각 0.02g과 0.005g을 전체 65%의 수율로 얻었다.

화합물 A

¹H NMR ( CDCl₃, ppm); δ1,53 (9H, s), 1.65 (9H, s), 2.90 (3H, s), 3.86 (2H, s), 7.36 (1H, d), 7.48 (1H, dd), 7.75 (1H, d), 7.81 (1H, s), 7.94 (1H, d)

ESI MS(m/e) = 617 [M+1]

화합물 B

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm); δ1,47 (9H, s), 2.76 (3H, s), 3.72 (2H, s), 7.14 (1H, dd), 7.32 (2H, m), 7.53 (2H, m), 7.79 (1H, s)

ESI MS(m/e) = 517 [M+1]

실시예 10 :

2-(2-아미노-1,3-벤조티아졸-6-일)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드의 합성

상기 실시예 9-4)에서 얻은 화합물 B 0.02g (0.032mmol)을 사용하여 상기 실시예 5-2)와 동일한 방법으로 반응을 실시하여 표제화합물 0.008g을 60%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm); δ2.88 (3H, s), 3.82 (2H, s), 7.34 (3H, m), 7.43 (1H, d), 7.60 (1H, s), 7.66 (1H, s)

ESI MS(m/e) = 417 [M+1]

실시예 11 :

2-(2-클로로페닐)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드의 합성

11-1)

상기 실시예 4와 동일한 방법으로 얻은 화합물 7.7g(18.25 mmole)을 디클로로메탄 100 ml 에 녹인 후 트리에틸아민 10ml(4.0eq)과 벤질클로로포메이트 3.9ml(1.5eq)를 가하고 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압증류로 제거하여 표제 화합물 6.7g을 66%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm); δ3.44 (6H, s), 3.90 (2H, s), 5.49 (2H, s), 7.27 (2H, m), 7.35-7.49 (8H, m), 7.56 (1H, dd), 7.90 (1H, d), 8.70 (1H, s)

11-2)

상기 실시예 11-1)에서 얻은 화합물 6.7g(12.05mmol)을 디클로로메탄 50 ml 에 녹인 후 트리에틸아민 6.7ml(4.0eq), 디-tert-부틸디카보네이트 6.6g(2.5eq)와 디메틸아미노피리딘 0.12g(0.1eq)을 가하고 1시간동안 교반하였다. 용매를 감압증류로 제거한 다음 에틸아세테이트와 헥산으로 처리하여 표제화합물 5.9g을 77%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm); δ1.65 (18H, s), 3.42 (6H, s), 5.50 (2H, s), 7.19 (1H, dd), 7.50 (1H, d), 7.70 (1H, d)

11-3)

상기 실시예 11-2)에서 얻은 화합물 5.9g (9.25mmol)을 디클로로메탄 20 ml 에 녹인 후 트리플루오로아세트산 5 ml을 가하고 4시간 동안 교반하였다. 용매를 감압증류로 제거한 다음 에틸아세테이트로 처리하여 표제 화합물 4.0g을 99%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm); δ3.44 (6H, s), 5.56 (2H, s), 7.20 (1H, dd), 7.52 (1H, d), 7.73 (1H, d)

11-4)

상기 실시예 11-3)에서 얻은 화합물 0.05g (0.0114mmol)을 테트라하이드로퓨란 5 ml에 녹인 후 2-(2-클로로페닐)아세틸 클로라이드를 가하고 2시간 환류하였다. 용매를 감압증류로 제거한 다음 헥산과 에틸아세테이트 1:1 혼합액을 이용한 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물 0.02g을 30%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm); δ3.44 (6H, s), 3.90 (2H, s), 5.49 (2H, s), 7.27 (2H, m), 7.36-7.48 (8H, m), 8.18 (1H, d), 8.26 (1H, s), 8.34 (1H, s)

11-5)

상기 실시예 11-4)에서 얻은 화합물 0.02g (0.034mmol)을 테트라하이드로퓨란 5 ml 에 녹인 후 2N 수산화나트륨용액 2 ml 을 가하고 6시간 환류하였다. 용매를 감압증류로 제거하여 표제 화합물 0.005g을 32%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm); δ2.88 (3H, s), 3.93 (2H, s), 7.22 (2H, m), 7.28-7.38 (4H, m), 7.63 (1H, s)

ESI MS(m/e) = 457 [M+1]

실시예 12 :

2-(2-플루오로페닐)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드의 합성

12-1)

2-(2-클로로페닐)아세틸클로라이드 대신 2-(2-플루오로페닐)아세틸클로라이드를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 11-4)와 동일한 방법으로 반응을 실시하여 표제 화합물 0.038g을 64%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm); δ3.41 (6H, s), 3.75 (2H, s), 5.46 (2H, s), 7.05 (2H, m), 7.24 (3H, m), 7.37 (2H, m), 7.45 (2H, m), 8.17 (1H, d), 8.39 (1H, s), 9.31 (1H, s)

12-2)

상기 실시예 12-1)에서 얻은 화합물을 사용하여 상기 실시예 11-5)와 동일한 방법으로 반응을 실시하여 표제 화합물 0.01g을 34%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm); δ2.91 (3H, s), 3.90 (2H, s), 7.14 (2H, m), 7.33 (2H, m), 7.43 (2H, m), 7.65 (1H, s)

ESI MS(m/e) = 441 [M+1]

실시예 13 :

2-[1,1'-비페닐]-4-일-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드의 합성

2-(2-클로로페닐)아세틸클로라이드 대신 1,1'-비페닐아세틸클로라이드를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 11-4), 11-5)와 동일한 방법으로 반응을 실시하여 표제 화합물 0.033g을 58%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm); δ2.75 (3H, s), 3.67 (2H, s), 7.16 (2H, m), 7.23 (1H, m), 7.34 (5H, m), 7.53 (5H, m)

ESI MS(m/e) = 499 [M+1]

실시예 14 :

2-[4-(2-퓨릴)페닐]-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드의 합성

2-(2-클로로페닐)아세틸클로라이드 대신 2-[4-(2-퓨릴)페닐]아세틸클로라이드를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 11-4), 11-5)와 동일한 방법으로 반응을 실시하여 표제 화합물 0.005g을 11%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm); δ2.70 (3H, s), 3.60 (2H, s), 6.17 (1H, d), 6.59 (1H, d), 7.10 (1H, dd), 7.22 (1H, d), 7.27 (2H, d), 7.43 (2H, d), 7.48 (1H, s)

ESI MS(m/e) = 411 [M+1]

실시예 15 :

2-(4-에톡시페닐)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드의 합성

2-(2-클로로페닐)아세틸클로라이드 대신 2-(4-에톡시페닐)아세틸클로라이드를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 11-4), 11-5)와 동일한 방법으로 반응을 실시하여 표제 화합물 0.055g을 73%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CD₃OD, ppm); δ1.35 (3H, t), 2.90 (3H, s), 3.71 (2H, s), 4.02 (2H, m), 6.88 (2H, d), 7.31 (2H, d), 7.40 (1H, d), 7.61 (1H, s), 7.76 (1H, s)

ESI MS(m/e) = 389 [M+1]

실시예 16 :

2-(4-이소프로필페닐)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드의 합성

2-(2-클로로페닐)아세틸클로라이드 대신 2-(4-이소프로필페닐)아세틸클로라이드를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 11-4), 11-5)와 동일한 방법으로 반응을 실시하여 표제 화합물 0.045g을 65%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (CD₃OD, ppm); δ1.23 (6H, d), 2.89 (3H, s), 2.99 (1H, m), 3.75 (2H, s), 7.20 (2H, d), 7.32 (3H, m), 7.40 (1H, d), 7.63 (1H, s)

ESI MS(m/e) = 387 [M+1]

실시예 17 :

N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}-2-[2-(4-몰포리닐)-1,3-벤조티아졸-6-일]아세트아미드의 합성

2-(2-클로로페닐)아세틸클로라이드 대신 2-[2-(4-몰포리닐)-1,3-벤조티아졸-5-일]아세틸클로라이드를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 11-4), 11-5)와 동일한 방법으로 반응을 실시하여 표제 화합물 0.01g을 22%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm); δ2.87 (3H, s), 3.41 (4H, m), 3.61 (4H, m), 3.75 (2H, s), 7.20 (1H, dd), 7.42 (1H, d), 7.65 (2H, m), 8.08 (2H, m)

ESI MS(m/e) = 565 [M+1]

실시예 18 :

N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}-2-[4-(1-피페리디닐)페닐]아세 트아미드의 합성

2-(2-클로로페닐)아세틸클로라이드 대신 2-[4-(1-피페리디닐)페닐]아세틸클로라이드를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 11-4), 11-5)와 동일한 방법으로 반응을 실시하여 표제 화합물 0.1g을 11%의 수율로 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d_6, ppm); δ1.52 (2H, m), 1.60 (4H, m), 2.87 (3H, s), 3.10 (4H, m), 3.59 (2H, s), 6.89 (2H, d), 7.19 (2H, d), 7.23 (1H, dd), 7.41 (1H, d), 7.63 (1H, s)

ESI MS(m/e) = 506 [M+1]

실험예 1 :

CDK1, CDK2와 CDK4의 억제활성

CDK1과 CDK2의 단백질 억제효과의 분석실험은 키타가와 방법 (Kitagawa, M. et al.; Oncogene, 9: 2549, 1994) 을 따랐으며, CDK4 의 경우는 칼손 방법을 따랐다 (Carlson, B. A. et al.; Cancer Research 56: 2473, 1996). 우선 CDK1는 CDK1 유전자를 발현하는 배큐로바이러스(baculovirus)와 우브퀴틴(Ubquitin)에 의해 분 해되는 시그널 서열(signal sequence)이 포함된 아미노 말단 86 아미노산을 절단하여 만든 인간의 N-말단 절단 사이클린 B1 (human N-terminal truncated cyclin B1) 유전자를 발현하는 배큐로바이러스를 곤충세포에 동시에 감염시킨 후 정제된 활성효소를 사용하였으며, CDK2는 CDK2 유전자를 발현하는 배큐로바이러스와 사이클린 A 유전자를 발현하는 배큐로바이러스를 동시에 감염시킨 곤충세포 추출액 또는 이로부터 정제된 활성효소를 사용하였다. CDK4 효소도 역시 CDK4 유전자를 발현하는 배큐로바이러스와 사이클린 D1 유전자를 발현하는 배큐로바이러스를 동시에 감염시킨 곤충세포로부터 얻었다. CDK1과 CDK2의 기질은 히스톤 H1이나 Rb 단백질을 사용하였고, CDK4의 기질은 Rb 단백질을 사용하였다. 농도별로 희석한 화합물을 넣고 적당량의 CDK1/사이클린 B1, CDK2/사이클린 A 또는 CDK4/사이클린 D1과 기질 단백질, 그리고 [감마-³²P 라벨된] ATP를 넣고 반응시킨 후 기질을 분리하여 기질에 포함된 방사성활성을 측정하였다.

이상 설명한 방법에 따라 CDK1, CDK2 및 CDK4에 대해 측정된 본 발명에 따른 저해제의 각 효소활성 저해능력을 IC₅₀ 값으로 나타내었다. 그 결과는 하기 표 1 에 나타난 바와 같다.

실험예 2. 세포의 성장 저해능을 측정 [SRB(Sulforhodamine B) assay 이용]

5% 이산화탄소가 든 37^oC 배양기에서 5% FBS가 든 RPMI1640 배지로 키운 암세포 (HCT-116, A549, 또는 NCI-H460)를 96-웰 플레이트에 웰 당 2000에서 3000개씩 100 ul의 동일 배지에서 하루동안 키운다. 여기에 각각의 화합물을 동일 배지로 희석하여 처리하고자 하는 농도의 2x 원액(stock)으로 만든 후, 각각을 100ul씩 웰에 첨가하여 48시간 처리한 후 여기에 웰 당 100ul의 4% 포름알데히드 용액을 처리하여 세포를 고정한다. 이를 상온에서 1시간 이상 방치한 후 용액을 버리고 수돗물로 3-4번 세척한 후 50^oC 건조기에서 건조한다. 그 다음 각 웰에 0.4% SRB가 든 1% 아세트산 염색 용액을 50ul씩 첨가하여 약 1시간 가량 세포를 염색한다. 그 후 염색액을 제거하고, 다시 1% 아세트산 용액으로 각 웰을 3-4번 세척한 후 다시 50 ^oC 건조기에서 건조한다. 그 다음 10mM Tris(pH 10.5) 용액 100ul를 각 웰에 첨가하여 세포에 부착된 SRB 염료(dye)를 30분가량 용출시킨다. 그 다음 96-웰 플레이트를 리더(reader)(스펙트라맥스(spectraMax) 340)로 옮겨 530nm (비교(reference)파장; 650nm)에서 흡광도를 측정하여 세포의 양을 결정한다.

이상 설명한 방법에 따라 세가지 세포주에 대해 측정된 본 발명에 따른 저해제의 각 세포주의 성장 저해능력을 GI₅₀ 값으로 나타내었다. 그 결과는 하기 표 1 에 나타난 바와 같다.

Claims (5)

1. 하기 화학식 1의 화합물, 약제학적으로 허용되는 그의 염, 및 수화물:

   [화학식 1]

   

   상기 식에서,

   R1 은 C₆-C₁₀-방향족 그룹; 할로겐, 아미드, C₁-C₆-알킬로 치환될 수 있는 카바메이트, 에스테르, C₁-C₆-알킬, C₁-C₆-알콕시, 시아노, 하이드록시, 설포닐, 할로겐으로 치환될 수 있는 C₁-C₆-알킬 설폭시, 설폰아미드, 아미딘, 아미독심, C₃-C₆-사이클로알킬, C₁-C₆-알킬기에 의해 치환될 수 있는 질소 및 산소원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리 내에 포함된 C₃-C₆-헤테로사이클로알킬, 아미노, 페닐, 퓨릴 및 티오펜 그룹으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 C₆-C₁₀-방향족 그룹; 질소, 산소 및 황 원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리에 포함된 C₆-C₁₀-방향족 그룹; 질소, 산소 및 황 원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리에 포함된 9원 내지 10원으로 이루어진 융합된 방향족 그룹; 또는 질소 및 산소 원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리 내에 포함된 C₃-C₆-헤테로사이클릭 그룹, 아미노 그룹, 및 C₁-C₆-알킬기로 치환될 수 있는 카바메이트 그룹으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 치환된, 질소, 산소 및 황 원자로 이루어진 군에서 선택된 헤테로원자 하나 이상이 고리에 포함된 9원 내지 10원으로 이루어진 융합된 방향족 그룹을 나타내며,

   R2 및 R3 은 각각 수소; C₁-C₆-알킬; 또는 할로겐으로 치환될 수 있는 C₁-C₆-알킬 설포닐 그룹을 나타낸다.
2. 제 1 항에 있어서,

   N-(5-{[(3-클로로프로필)설포닐]아미노}-1H-인다졸-3-일)-2-페닐아세트아미드;

   N-(5-{[(3-클로로프로필)설포닐]아미노}-1H-인다졸-3-일)-2-(4-하이드록시페닐)아세트아미드;

   4-{2-[(5-{[(3-클로로프로필)설포닐]아미노}-1H-인다졸-3-일)아미노]-2-옥소에틸}페닐 3-클로로-1-프로판설포네이트;

   N-{5-[비스(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}-2-페닐아세트아미드;

   N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}-2-페닐아세트아미드;

   2-(4-클로로페닐)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

   2-(4-클로로페닐)-N-{5-[메틸(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

   2-[4-(2,5-디메틸-1-피롤리디닐)페닐]-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

   tert-부틸 5-[2-({5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아미노)-2-옥소에틸]-1,3-벤조티아졸-2-일카바메이트;

   2-(2-아미노-1,3-벤조티아졸-6-일)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

   2-(2-클로로페닐)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

   2-(2-플루오로페닐)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

   2-[1,1'-비페닐]-4-일-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

   2-[4-(2-퓨릴)페닐]-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

   2-(4-에톡시페닐)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

   2-(4-이소프로필페닐)-N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}아세트아미드;

   N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}-2-[2-(4-몰포리닐)-1,3-벤조티아졸-6-일]아세트아미드;

   N-{5-[(메틸설포닐)아미노]-1H-인다졸-3-일}-2-[4-(1-피페리디닐)페닐]아세트아미드 중에서 선택되는 화합물.
3. 하기 화학식 5의 화합물에 대해 설폰아미드화 및 알킬레이션 반응 중 하나 이상을 수행하고, 탈보호화과정을 수행하여 제 1 항에 정의된 화학식 1의 화합물을 제조하는 방법 :

   [화학식 5]

   

   상기식에서, R1은 제 1 항에서 정의된 바와 같다.
4. 약제학적으로 허용되는 담체와 함께 제 1 항에 정의된 화학식 1의 화합물, 약제학적으로 허용되는 그의 염, 또는 수화물을 활성성분으로서 함유하는 암, 염증, 혈관 협착증 및 혈관 생성의 억제 또는 치료용 조성물.
5. 제 4 항에 있어서, 암의 억제 또는 치료에 사용되는 조성물.