KR100435154B1 - Fermenting agents for producing of safe feed meals from food wastes - Google Patents

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KR100435154B1 KR10-2001-0040595A KR20010040595A KR100435154B1 KR 100435154 B1 KR100435154 B1 KR 100435154B1 KR 20010040595 A KR20010040595 A KR 20010040595A KR 100435154 B1 KR100435154 B1 KR 100435154B1
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Abstract

본 발명은 남은 음식물의 배출·수거 과정에서의 부패와 악취 생성을 방지하기 위하여 미생물 분말 5∼15 중량%와, 부형제 85∼95 중량%로 구성되는, 남은 음식물의 위생적 안전 사료화를 위한 발효제에 관한 것으로서, 상기 발효제는 배출 및 수거 단계에 있는 남은 음식물에 뿌려주거나 혼합시킬 경우 발효제를 구성하고 있는 미생물의 왕성한 성장과 올리고당의 남은 음식물 특유의 악취 및 부패산물의 생산 억제 작용에 의해 병원성 미생물의 증식이 방지될 뿐만 아니라 효소 역가 및 환원당 함량을 증가시키므로 남은 음식물의 균질성을 증가시키고 남은 음식물의 운반성과 보존성을 높여 사료화 이용 효율을 극대화시킬 수 있다.The present invention relates to a fermentation agent for hygienic safety feed of the remaining foods composed of 5 to 15% by weight of microbial powder and 85 to 95% by weight of excipients in order to prevent corruption and odor formation in the discharge and collection of the remaining food. When the fermentation agent is sprayed or mixed with the remaining foods in the discharge and collection stages, the growth of pathogenic microorganisms is prevented by the active growth of the microorganisms constituting the fermentation agent and the suppression of the production of odor and decay products peculiar to the remaining foods of the oligosaccharides. Not only is it prevented, but also increases the enzyme titer and reducing sugar content, thereby increasing the homogeneity of the remaining food and increasing the transportability and preservation of the remaining food, thereby maximizing feed efficiency.

Description

남은 음식물의 위생적 안전 사료화를 위한 발효제{Fermenting agents for producing of safe feed meals from food wastes}Fermenting agents for producing safe food meals from food wastes

본 발명은 남은 음식물의 위생적 안전 사료화를 위한 발효제에 관한 것으로서 더욱 상세하게는 남은 음식물의 배출·수거 과정에서의 부패 및 악취 생성을 방지하고, 병원성미생물의 성장을 억제하여 남은 음식물의 사료화 이용 효율을 극대화시킬 수 있는 미생물 분말을 포함하여 구성되는 발효제에 관한 것이다.The present invention relates to a fermentation agent for hygienic safety feed of the leftover food, and more particularly, to prevent decay and odor formation in the process of discharging and collecting the remaining food, and to inhibit the growth of pathogenic microorganisms to improve the feed efficiency of the remaining food. It relates to a fermentation agent comprising a microbial powder that can be maximized.

일반적으로 남은 음식물은 부패 가능성이 높고 냄새가 나며 시각적으로 불쾌할 뿐 아니라 취급도 어렵고 협잡물이 함유되어 있어 재활용율이 매우 낮은 물질이다.In general, the remaining food is a material with a high possibility of decay, smell, visually unpleasant, difficult to handle, and contains a lot of contaminants, it is a very low recycling rate.

이와 같은 남은 음식물을 처리하기 위한 방법으로는 매립이나 소각 등의 방법과 퇴비화를 통한 재활용 방법 등이 사용되고 있으나, 매립 방법의 경우 처리비용이 저렴한 장점이 있는 반면 침출수로 인해서 매립지 주변의 토양 및 지하수 오염을 유발하고, 침출수의 처리 시설비 및 유지비가 과다하여 처리 비용이 많이 소요되는 문제점이 있었다.As a method for treating the remaining foods such as landfill or incineration and recycling method through composting, landfill method has the advantage of low processing cost, while soil and groundwater contamination around landfill due to leachate Induced, there was a problem in that the treatment cost of the leachate is excessive, the treatment cost is high.

또한 소각 방법의 경우 남은 음식물의 과다한 수분함량으로 인하여 소각 효율이 낮고 보조 연료 사용으로 인해 비용이 많이 소요되며, 소각 과정에서 염소화합물과 다이옥신 등의 인체에 해로운 대기오염물질들이 많이 발생된다.In the incineration method, the incineration efficiency is low due to the excess water content of the food left behind, it is expensive due to the use of auxiliary fuel, and incineration process generates a lot of harmful air pollutants such as chlorine compounds and dioxins.

그리고 남은 음식물을 퇴비화하여 재활용하는 방법의 경우 남은 음식물의 높은 염분함량과 낮은 산도 때문에 토양의 산성화를 촉진시키고 토양 중 염분함량을 증가시켜 국토를 황폐화시키는 문제점들이 있었다.In the case of the composting and recycling of the remaining food, there is a problem of promoting the acidification of the soil and increasing the salinity of the soil to destroy the land due to the high salinity and low acidity of the remaining food.

본 발명은 종래의 상기와 같은 문제점들을 해결하기 위하여 안출된 것으로서 남은 음식물의 배출·수거 과정에서의 부패와 악취 생성을 방지할 수 있는 발효제를 제공하는 것을 목적으로 한다.An object of the present invention is to provide a fermentation agent that can prevent the decay and odor generation in the process of discharging and collecting the remaining food, which was devised to solve the above problems.

본 발명의 다른 목적은 남은 음식물의 배출·수거 과정에서 병원성 미생물의 성장을 억제하는 발효제를 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a fermentation agent that inhibits the growth of pathogenic microorganisms during the discharge and collection of the remaining food.

본 발명의 또 다른 목적은 남은 음식물의 운반성과 보존성을 향상시켜 사료화 이용효율을 극대화시킬 수 있는 발효제를 제공하는 것이다.Still another object of the present invention is to provide a fermentation agent capable of maximizing feed efficiency by improving the transportability and preservation of the remaining food.

본 발명의 상기와 같은 목적들은 미생물 분말과 부형제와 올리고당으로 구성되는 발효제를 제공함으로써 달성되는데, 상기 발효제는 발효제를 구성하고 있는 미생물의 왕성한 성장과 올리고당의 악취·부패산물 생산 억제 작용에 의해 효소 역가 및 환원당 함량 등을 증가시켜 남은 음식물의 사료화 이용 효율을 극대화시킬 수 있다.The above object of the present invention is achieved by providing a fermentation agent composed of microbial powder, excipient and oligosaccharide, the fermentation agent enzyme activity by the active growth of microorganisms constituting the fermentation agent and the odor and decay products production of oligosaccharides And by reducing the content of reducing sugar, etc., it is possible to maximize the efficiency of food use of the remaining food.

도 1는 시험예 1에서 남은 음식물 중 총 미생물의 수 비교표,1 is a comparison table of the total number of microorganisms in the food remaining in Test Example 1,

도 2는 시험예 1에서 남은 음식물 중 효모 생균 수 비교표,2 is a comparison table of the number of yeast live bacteria in the food remaining in Test Example 1,

도 3은 시험예 1에서 남은 음식물 중 유산균 수 비교표,3 is a comparison table of the number of lactic acid bacteria in the food remaining in Test Example 1,

도 4는 시험예 1에서 남은 음식물 중 병원성 대장균 수 비교표,4 is a comparison table of the number of pathogenic E. coli among the foods remaining in Test Example 1;

도 5는 시험예 1에서 남은 음식물 중 각 미생물 수 비교표이다5 is a comparison table of the number of microorganisms in the food remaining in Test Example 1

본 발명은 미생물 분말 5∼15 중량%와, 부형제 85∼95 중량%로 구성되는, 남은 음식물의 위생적 안전 사료화를 위한 발효제에 관한 것이다.The present invention relates to a fermentation agent for hygiene safe feed of the remaining food, consisting of 5 to 15% by weight of microbial powder and 85 to 95% by weight of excipients.

본 발명에 있어서, 상기 미생물 분말과 부형제로 구성되는 발효제 100 중량부에 대하여 5∼15 중량부의 올리고당이 더 첨가되어 구성되는 것이 바람직하다.In the present invention, it is preferable that 5 to 15 parts by weight of oligosaccharide is further added to 100 parts by weight of the fermentation agent consisting of the microbial powder and the excipient.

본 발명에 있어서, 상기 미생물 분말은 바실러스 서큘란스(Bacillus circulanse; ATCC-9500)와, 바실러스 메가테리움(Bacillus megaterium; ATCC-10778)과, 락토바실러스 아밀로필러스(Lactobacillus amylophilus; ATCC-49845)와, 웨이쉘라 콘퓨사(Weissella confusa; ATCC-14434)와, 비피더스 에스피.(Bifidus sp.; ATCC-11863)와, 캔디다 유틸리스(Candida utilis; ATCC-9950)와, 캔디다 에스피.(Candida sp.; ATCC-90238, ATCC-60374)로 구성되는 군으로부터 선택되는 1종 이상을 혼합하여 구성되는 것을 특징으로 한다.In the present invention, the microbial powder is Bacillus circulanse (ATCC-9500), Bacillus megaterium (ATCC-10778), and Lactobacillus amylophilus (ATCC-49845) Weissella confusa (ATCC-14434), Bifidus sp. (ATCC-11863), Candida utilis (ATCC-9950), and Candida sp. ATCC-90238, ATCC-60374) It is characterized in that it is composed of one or more selected from the group consisting of.

남은 음식물은 단백질과 에너지 함량이 높아 사료 자원으로서의 이용 가치가 매우 높다.The remaining foods are high in protein and energy, making them very valuable as feed sources.

이러한 남은 음식물의 사료화 과정은 크게 배출·수거 단계, 사료화 단계, 가축급여 단계의 3 단계로 구분할 수 있는데 그 중 배출·수거 단계에서 남은 음식물이 가장 부패되기 쉽고 가축에게 치명적이거나 또는 생산성을 떨어뜨리는 병원성 세균이 성장하게 된다.The remaining foods can be categorized into three stages: discharge, collection, feed, and livestock feeding. Among them, food remaining in the discharge and collection stage is most decaying, fatal to livestock, or reduces productivity. Bacteria grow.

따라서, 남은 음식물의 위생적 안전 사료화를 위해서는 배출·수거 단계에서의 부패를 방지하고 병원성 미생물의 증식을 방지하여 위생적 안전성을 확보하는 것이 최우선 과제이므로, 본 발명자들은 이를 충족시킬 수 있는 발효제로서 적합한 미생물을 선발하고 다양한 비교 실험을 거쳐 이들로부터 최종 균주들을 선별한 다음 적합한 부형제와 올리고당을 선정하여 본 발명의 남은 음식물의 위생적 안전 사료화를 위한 수거·배출 단계용 발효제를 개발하였다.Therefore, for the hygienic safety feed of the remaining food is to prevent the decay in the discharge and collection step, and to ensure the hygienic safety by preventing the growth of pathogenic microorganisms, the present inventors have a suitable microorganism suitable as a fermentation agent to satisfy this The final strains were selected through various comparison experiments, and then suitable excipients and oligosaccharides were selected to develop a fermentation agent for the harvesting and discharging stage for hygienic safe feed of the remaining foods of the present invention.

이하, 본 발명의 발효제를 실시예를 들어 상세하게 설명하고자 하나 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to Examples, but the present invention is not limited thereto.

실시예 1Example 1

미생물의 선발Selection of Microorganisms

1) 남은 음식물 기질의 특이성(산성, pH 4∼5; 고염분, 농도 2∼3%, 반유동성)을 고려하여 이러한 특이한 조건에서 최대의 성장률을 나타내는 미생물들을 문헌과 미생물자원 데이터 베이스(data base) 검색 작업을 통하여 ATCC의 원종 미생물 10종(박테리아 6종, 효모 3종 및 곰팡이 1종)을 확보하고, 시판 발효제로부터 간균 2종과 구균 2종 및 효모 1종을, 남은 음식물로부터 간균과 구균 각 2종 및 비피더스균 1종을 순수 분리한 다음, 상기 20종의 미생물들을 대상으로 한 남은 음식물 변형 배지에서의 성장률을 조사하였다.1) Considering the specificity of the remaining food substrate (acidity, pH 4-5; high salinity, concentration 2-3%, semi-fluidity), microorganisms showing the maximum growth rate under these specific conditions were found in the literature and microbial resource database. Through the search, 10 species of native microorganisms (6 bacteria, 3 yeasts, and 1 mold) of ATCC were secured, and 2 bacillus, 2 cocci and 1 yeast were obtained from commercial fermentation agents. Two and one bifidus bacteria were isolated purely, and then the growth rate in the remaining food modified medium of the 20 microorganisms was examined.

상기 미생물들의 남은 음식물에서의 성장률은 이들을 남은 음식물 변형 배지에서 배양시킨 다음 스펙트로포토미터(spectrophotometer)를 사용하여 650nm에서 흡광도를 측정하고 이로부터 세포의 셀 밀도(cell density)를 산출하여 측정하였다.The growth rate of the microorganisms in the remaining food was measured by culturing them in the remaining food modified medium and then measuring the absorbance at 650 nm using a spectrophotometer and calculating the cell density of the cells therefrom.

미생물의 남은 음식물 변형 배지에서의 성장률Growth rate of microorganisms in remaining food modified medium 미생물microbe 미생물 배양시간(hour)Microbial incubation time (hour) 1One 33 66 99 1212 1515 1818 2121 2424 3636 4848 7272 ATCC-9500ATCC-9500 0.1580.158 0.4080.408 1.2511.251 1.9051.905 2.1472.147 2.2572.257 2.3822.382 2.5112.511 2.6052.605 3.0073.007 3.0553.055 2.9482.948 ATCC-10778ATCC-10778 0.0970.097 0.2630.263 0.6620.662 1.4091.409 1.9871.987 2.3552.355 2.4482.448 2.5172.517 2.5472.547 2.8392.839 3.0193.019 3.0403.040 ATCC-25599ATCC-25599 0.0280.028 0.0980.098 0.1080.108 0.2150.215 0.4670.467 0.6780.678 0.7860.786 0.8980.898 1.0241.024 1.0211.021 1.0361.036 1.1381.138 ATCC-35854ATCC-35854 0.1380.138 0.3220.322 0.5510.551 1.2211.221 2.0162.016 2.2262.226 2.3422.342 2.4212.421 2.3802.380 2.3822.382 2.4102.410 2.4642.464 ATCC-49845ATCC-49845 0.1910.191 0.8910.891 1.8831.883 2.2612.261 2.4612.461 2.5022.502 2.5032.503 2.5032.503 2.5212.521 2.5842.584 2.6262.626 2.6412.641 ATCC-49445ATCC-49445 0.0830.083 0.1120.112 0.2110.211 0.3430.343 0.5150.515 0.5360.536 0.5380.538 0.5020.502 0.6400.640 0.7750.775 0.9020.902 0.8290.829 ATCC-14434ATCC-14434 0.1470.147 0.3580.358 0.6780.678 0.9970.997 1.5691.569 2.3472.347 2.8792.879 3.0453.045 3.0893.089 3.1243.124 3.2363.236 3.2983.298 ATCC-39867ATCC-39867 0.0260.026 0.6540.654 1.3471.347 2.0762.076 2.3452.345 2.3982.398 2.4872.487 2.3672.367 2.5672.567 2.6892.689 2.9782.978 3.0243.024 ATCC-9950ATCC-9950 0.1480.148 0.7740.774 2.0262.026 2.0112.011 1.9131.913 2.0242.024 1.8851.885 1.9321.932 2.0482.048 2.1582.158 2.2522.252 2.1372.137 CF-1CF-1 0.0830.083 0.0890.089 0.0980.098 0.1040.104 0.1260.126 0.1780.178 0.2180.218 0.2760.276 0.3050.305 0.4570.457 0.5870.587 0.7890.789 CF-2CF-2 0.1050.105 0.2130.213 0.2460.246 0.3560.356 0.5670.567 0.6780.678 0.7890.789 0.8950.895 0.9780.978 1.0341.034 1.2561.256 1.4561.456 CF-3CF-3 0.0970.097 0.3470.347 0.5060.506 1.0451.045 0.9870.987 1.2361.236 1.7861.786 1.9871.987 2.0032.003 2.0672.067 2.0982.098 2.1052.105 CF-4CF-4 0.2110.211 0.2340.234 0.3560.356 0.4570.457 0.4690.469 0.5670.567 0.7890.789 0.9130.913 1.0371.037 1.5671.567 1.7861.786 1.9561.956 CF-5CF-5 0.4560.456 0.5460.546 0.6780.678 0.7890.789 0.9870.987 1.0321.032 1.1461.146 1.5671.567 1.8971.897 1.8971.897 1.9761.976 2.0322.032 RF-1RF-1 0.1090.109 0.3580.358 1.0881.088 1.6751.675 1.8761.876 1.9631.963 2.0872.087 2.1892.189 2.2262.226 2.6142.614 2.6572.657 2.6982.698 RF-2RF-2 0.0500.050 0.7430.743 0.9430.943 1.1351.135 1.3891.389 1.5681.568 1.6981.698 2.1982.198 2.6532.653 2.6692.669 2.7452.745 2.9652.965 RF-3RF-3 0.1230.123 0.3290.329 0.4980.498 0.6380.638 0.6540.654 0.8970.897 0.7860.786 1.2381.238 1.4571.457 2.0012.001 2.3962.396 2.6982.698 RF-4RF-4 0.0300.030 0.0690.069 0.0980.098 0.0990.099 0.1130.113 0.1630.163 0.1930.193 0.2380.238 0.2980.298 0.4360.436 0.5360.536 0.7460.746 RF-5RF-5 0.1250.125 0.6780.678 1.7511.751 1.4971.497 1.6691.669 1.7691.769 1.6981.698 1.7841.784 1.7891.789 1.8771.877 1.9641.964 1.8591.859

상기 표 1은 남은 음식물 변형배지에서 상기 미생물들의 성장률을 시간의 경과에 따라 측정한 결과로서 흡광도가 높게 측정된 미생물은 성장률이 높다는 것을 의미하며 이로부터 초기성장률(배양 6-9시간 정도 후)이 높게 나타난 하기 표 2의 미생물 10종을 1차 선별하였다.Table 1 is a result of measuring the growth rate of the microorganisms in the remaining food modified medium over time, which means that the microorganisms with high absorbance measured had a high growth rate and the initial growth rate (after 6-9 hours in culture) was 10 microorganisms of Table 2 shown as high were selected first.

발효제 개발을 위해 1차 선별된 미생물의 종류Types of Microorganisms Primary Screened for Fermentation 구 분division 박테리아bacteria 효 모Yeast 곰팡이mold 문헌검색후 구입Purchase after literature search Bacillus circulanse(ATCC-9500),Bacillus megaterium(ATCC-10778),Bacillus subtilis(ATCC-35854),Lactobacillus amylophilus(ATCC-49845),Weissella confusa(ATCC-14434),Teredinobacter turnerae(ATCC-39867)Bacillus circulanse (ATCC-9500), Bacillus megaterium (ATCC-10778), Bacillus subtilis (ATCC-35854), Lactobacillus amylophilus (ATCC-49845), Weissella confusa (ATCC-14434), Teredinobacter turnerae (ATCC-39867) Candida utilis(ATCC-9950)Candida utilis (ATCC-9950) Tricocladium canadense(ATCC-201360)Tricocladium canadense (ATCC-201360) 남은음식물 순수분리Leftover food pure separation Bifidus sp.(RF-5)(ATCC-11863)Bifidus sp. (RF-5) (ATCC-11863) 시판발효제 순수분리Commercial fermentation agent pure separation Candida sp.(CF-5)(ATCC-90238, ATCC-60374)Candida sp. (CF-5) (ATCC-90238, ATCC-60374)

실시예 2Example 2

최종 균주 선별Final strain screening

1차 선발 미생물 10종을 대상으로 남은 음식물 변형배지에서의 효소생산능, 성장률과 배가시간(doubling time), 기질분해율, 환원당 함량 등을 조사하였다.Enzyme production capacity, growth rate and doubling time, substrate degradation rate and reducing sugar content of 10 strains of the first selected microorganism were investigated.

1차 선발 미생물의 남은 음식물 변형 배지에서의 효소 생산능력Enzyme Production Capacity of Residual Food Modified Medium of Primary Selection Microorganisms 미생물microbe 배지 중 효소의 분포 (단위: unit)Distribution of enzymes in the medium (unit) 프로테아제(Protease)Protease 아밀라제(Amylase)Amylase 글루카나제(Glucanase)Glucanase 펙티나제(Pectinase)Pectinase 셀룰라제(Cellulase)Cellulase ATCC-9500ATCC-9500 40.5940.59 124.13124.13 134.56134.56 34.5634.56 8.678.67 ATCC-10778ATCC-10778 32.1432.14 113.65113.65 128.67128.67 44.3244.32 12.6712.67 ATCC-35854ATCC-35854 26.7826.78 39.3639.36 98.6598.65 19.7819.78 9.459.45 ATCC-49845ATCC-49845 54.2154.21 94.6894.68 87.2687.26 38.4338.43 9.789.78 ATCC-14434ATCC-14434 63.8263.82 132.16132.16 98.6498.64 45.1745.17 12.1412.14 ATCC-39867ATCC-39867 37.2337.23 76.5576.55 102.15102.15 13.1713.17 14.7814.78 ATCC-9950ATCC-9950 23.4223.42 84.5684.56 56.8956.89 32.1332.13 11.1211.12 ATCC-201360ATCC-201360 36.7836.78 68.7968.79 26.4726.47 21.2921.29 8.188.18 CF-5CF-5 67.2167.21 41.2441.24 38.2238.22 48.2748.27 16.7916.79 RF-5RF-5 45.8245.82 84.3784.37 98.6498.64 56.7956.79 11.8911.89

상기 표 3은 남은 음식물 변형배지에서 미생물들이 생산해 내는 효소의 역가를 측정한 결과를 나타낸 것으로서 단백질 분해효소의 역가(protease)는 락토바실러스 아밀로필러스(Lactobacillus amylophilus;ATCC-49845), 웨이쉴라 콘퓨사(Weissella confusa;ATCC-14434), 캔디다 에스피.(Candida sp.; ATCC-90238, ATCC-60374); 전분분해의 역가(amylase)는 바실러스 서큘란스(Bacillus circulanse; ATCC-9500), 바실러스 메가테리움(Bacillus megaterium; ATCC-10778), 웨이쉘라 콘퓨사(Weissella confusa; ATCC-14434); 펙틴 분해효소의 역가(pectinase)는 웨이쉘라 콘퓨사(Weissella confusa; ATCC-14434), 비피더스 에스피.(Bifidus sp.; ATCC-11863), 캔디다 에스피.(Candida sp.: ATCC-90238, ATCC-60374); 섬유소 분해효소의 역가(pectinase)는 바실러스 메가테리움(Bacillus megaterium; ATCC-10778), 테레디노박터 투네래(Teredinobacter turnerae; ATCC-39867), 캔디다 에스피.(Candida sp.; ATCC-90238, ATCC-60374)에서 높게 나타났다.Table 3 shows the results of measuring the enzyme titer produced by the microorganisms in the remaining food modified medium, the protease titer ( Lactobacillus amylophilus ( ATCC-49845), Welshilla cone) Weissella confusa ( ATCC-14434), Candida sp. (ATCC-90238, ATCC-60374); The amylase of starch decomposition is Bacillus circulanse (ATCC-9500), Bacillus megaterium (ATCC-10778), Weissella confusa (ATCC-14434); The pectinase titers are Weissella confusa (ATCC-14434), Bifidus sp. (ATCC-11863), Candida sp .: ATCC-90238, ATCC-60374 ); Pectinase titers are Bacillus megaterium (ATCC-10778), Teredinobacter turnerae (ATCC-39867), Candida sp .; ATCC-90238, ATCC- 60374).

1차 선발 미생물의 남은 음식물 변형배지에서의 성장률과 배가 시간Growth Rate and Doubling Time of Residual Food Modified Medium of Primary Selection Microorganisms 미생물microbe 미생물의 성장률Growth rate of microorganisms OD value at 650㎚OD value at 650nm cfu or tfu/㎖ mediumcfu or tfu / ml medium 배가시간(doubling time)Doubling time 1h1h 6h6h 12h12h 1h1h 6h6h 12h12h ATCC-9500ATCC-9500 0.1580.158 1.1251.125 2.1472.147 3.13×108 3.13 × 10 8 2.78×109 2.78 × 10 9 16.78×1010 16.78 × 10 10 〈 0.5h〈0.5h ATCC-10778ATCC-10778 0.0970.097 0.6620.662 1.9871.987 0.24×108 0.24 × 10 8 1.51×109 1.51 × 10 9 8.67×1010 8.67 × 10 10 〈 0.5h〈0.5h ATCC-35854ATCC-35854 0.1380.138 0.5510.551 2.0162.016 3.01×108 3.01 × 10 8 1.28×109 1.28 × 10 9 13.46×1010 13.46 × 10 10 〈 0.5h〈0.5h ATCC-49845ATCC-49845 0.1910.191 1.8831.883 2.4612.461 3.78×108 3.78 × 10 8 6.79×109 6.79 × 10 9 26.21×1010 26.21 × 10 10 〈 0.5h〈0.5h ATCC-14434ATCC-14434 0.1470.147 0.6780.678 1.5691.569 3.54×108 3.54 × 10 8 1.76×109 1.76 × 10 9 4.42×1010 4.42 × 10 10 〈 0.5h〈0.5h ATCC-39867ATCC-39867 0.0260.026 1.3471.347 2.3452.345 0.09×108 0.09 × 10 8 6.78×109 6.78 × 10 9 23.12×1011 23.12 × 10 11 〈 1h〈1h ATCC-9950ATCC-9950 0.1480.148 0.7740.774 2.0262.026 4.21×108 4.21 × 10 8 2.05×109 2.05 × 10 9 73.17×1010 73.17 × 10 10 〈 1h〈1h ATCC-201360ATCC-201360 -- -- -- 0.11×104 0.11 × 10 4 4.29×104 4.29 × 10 4 8.76×104 8.76 × 10 4 〉8h〉 8h CF-5CF-5 0.0970.097 0.5060.506 0.9870.987 1.07×108 1.07 × 10 8 1.16×1010 1.16 × 10 10 2.19×1010 2.19 × 10 10 〈 0.5h〈0.5h RF-5RF-5 0.1090.109 1.0881.088 1.8761.876 4.65×108 4.65 × 10 8 3.88×109 3.88 × 10 9 12.97×1010 12.97 × 10 10 〈 0.5h〈0.5h

상기 표 4는 미생물의 수를 직접 세어 남은 음식물 배지에서의 성장률 및 배가시간을 측정한 결과이며, 이와 같은 측정 결과들을 토대로 초기 성장률이 빠르고 효소의 생산능력이 높으며 배가시간이 짧은 미생물인 바실러스 서큘란스(Bacilluscirculanse; ATCC-9500)와, 바실러스 메가테리움(Bacillus megaterium; ATCC-10778)과, 락토바실러스 아밀로필러스(Lactobacillus amylophilus; ATCC-49845)와, 웨이쉘라 콘퓨사(Weissella confusa; ATCC-14434)와, 비피더스 에스피.(Bifidus sp.; ATCC-11863)와, 캔디다 유틸리스(Candida utilis; ATCC-9950)와, 캔디다 에스피.(Candida sp.; ATCC-90238, ATCC-60374)로 구성되는 7종의 최종 원종균주를 선발하였다.Table 4 is a result of measuring the growth rate and the doubling time in the food medium remaining by directly counting the number of microorganisms, Bacillus Circus which is a microorganism having a high initial growth rate, high production capacity of enzyme and a short doubling time based on the measurement results (Bacilluscirculanse; ATCC-9500), Bacillus megaterium (ATCC-10778), Lactobacillus amylophilus (ATCC-49845), Weissella confusa (ATCC-14434) ), Bifidus sp. (ATCC-11863), Candida utilis (ATCC-9950), and Candida sp. (ATCC-90238, ATCC-60374). Final seed strains of the species were selected.

캔디다 유틸리스(Candida utilis)의 경우 배가시간이 다소 길었으나 효모라는 특이성 때문에 선택되었다.Candida utilis had a longer doubling time but was selected because of its specificity of yeast.

실시예 3Example 3

발효제 제조Fermentation

동결 건조된 상기 실시예 2에서 최종 선발된 7종의 미생물(바실러스 서큘란스, 바실러스 메가테리움, 바실러스 아밀로필러스, 락토바실러스 아밀로필러스, 웨이쉘라 콘퓨샤 및 비피더스 에스피.의 박테리아 5종과; 캔디다 유틸리스 및 캔디다 에스피.의 효모 2종)을 각각 동량으로 혼합하여 구성되는 미생물 분말 5g과 밀기울 45g을 혼합하여 발효제를 제조하였다.Five bacteria of the seven microorganisms (Bacillus Circus, Bacillus megaterium, Bacillus amylophyllus, Lactobacillus amylophilus, Weissella confusae and Bifidus sp.. And 5 g of microbial powder and 45 g of bran, each of which was mixed in equal amounts with Candida utility and Candida sp. Yeast, respectively, to prepare a fermentation agent.

실시예 4Example 4

발효제 제조Fermentation

동결 건조된 상기 실시예 2에서 최종 선발된 7종의 미생물(바실러스 서큘란스, 바실러스 메가테리움, 바실러스 아밀로필러스, 락토바실러스 아밀로필러스, 웨이쉘라 콘퓨샤 및 비피더스 에스피.의 박테리아 5종과; 캔디다 유틸리스 및 캔디다 에스피.의 효모 2종) 분말을 각각 동량으로 혼합하여 구성되는 미생물 분말 5g과 밀기울 40g과 글루코만난올리고당 5g을 혼합하여 밀기울 색상의 연한 노란색이며 냄새가 나지 않는 분말 제재인 발효제를 제조하였다.Five bacteria of the seven microorganisms (Bacillus Circus, Bacillus megaterium, Bacillus amylophyllus, Lactobacillus amylophilus, Weissella confusae and Bifidus sp.. And 5 g of microbial powder, 40 g of bran, and 5 g of glucomannanan oligosaccharide, which are made by mixing the same amount of yeast of Candida utility and Candida sp. Was prepared.

상기 7종의 미생물은 각각 대량으로 액상 배양한 다음 동결 건조하고 각 미생물의 성장속도와 성장률 및 배가시간을 고려하여 균종 등량 희석법을 적용 각각 동량으로 혼합하였다.The seven microorganisms were cultured in a liquid phase in large quantities, and then lyophilized, and mixed in the same amount by applying the same amount dilution method in consideration of the growth rate, growth rate, and doubling time of each microorganism.

본 발명의 발효제는 상기와 같이 제조되는 미생물 분말 5∼15 중량%와, 부형제 85∼95 중량%로 구성된다.The fermentation agent of the present invention is composed of 5 to 15% by weight of the microbial powder prepared as described above and 85 to 95% by weight of the excipient.

미생물 분말이 5 중량%보다 적게 첨가될 경우에는 남은 음식물 발효시 미생물의 생존성을 상실할 수 있어 발효제로서의 기능을 하지 못하게 되고, 15 중량%보다 많이 첨가되면 발효제의 경제성이 떨어지며 보관과정 중에 약간의 수분에 노출되어도 발효제중에서 포함된 기질을 이용하여 발효가 일어날 수 있는 문제점이 있다.If less than 5% by weight of the microbial powder is added, the viability of the microorganisms may be lost during fermentation of the remaining foods, so that the microbial powder may not function as a fermentation agent. Even when exposed to water, there is a problem that fermentation may occur using a substrate included in the fermentation agent.

상기 부형제로는 옥수수 가루, 밀기울, 쌀겨 등이 사용될 수 있으나 부형제의 가격, 확보 용이성, 흡수력, 미생물과의 희석 용이성 및 미생물에 대한 보존성 등을 조사·분석한 결과 밀기울이 가장 바람직한 것으로 나타났다.Corn excipients, wheat bran, rice bran may be used as the excipient, but bran is most preferred as a result of the investigation and analysis of the excipient price, ease of storage, absorbency, ease of dilution with microorganisms and preservation of microorganisms.

본 발명에 있어서, 상기 미생물 분말과 부형제로 구성되는 발효제 100 중량부에 대하여 5∼15 중량부의 올리고당이 더 첨가되어 구성되는 것이 바람직하다.In the present invention, it is preferable that 5 to 15 parts by weight of oligosaccharide is further added to 100 parts by weight of the fermentation agent consisting of the microbial powder and the excipient.

올리고당은 병원성 미생물의 성장과 부착을 억제시키기 위하여 첨가되는 것으로서 글루코만난올리고당(glucomannan-oligosaccarides), 이눌로올리고당(inulo-oligosaccarides), 프락토올리고당(fructo-oligosaccarides), 만난올리고당(manan-oligosaccarides)으로 구성되는 군으로부터 선택되는 1종 이상이 사용될 수 있다.Oligosaccharides are added to inhibit the growth and adhesion of pathogenic microorganisms and consist of glucomannan-oligosaccarides, inulo-oligosaccarides, fructo-oligosaccarides, and manan-oligosaccarides. One or more selected from the group consisting of can be used.

상기 올리고당이 미생물 분말과 부형제로 구성되는 발효제 100 중량부에 대하여 5 중량부보다 적게 첨가될 경우에는 병원성 미생물에 저항하는 올리고당 고유의 효력을 발생할 수 없고, 15 중량부보다 많이 첨가될 경우에는 올리고당이 점도가 매우 높은 물질이므로 발효제의 제조 공정이 어려워지거나 불가능하게되고 또한 높은 수분 함량 때문에 발효제의 보관성을 상실하게 된다.When the oligosaccharide is added less than 5 parts by weight based on 100 parts by weight of the fermentation agent consisting of microbial powder and excipients, the inherent effect of oligosaccharides resistant to pathogenic microorganisms may not occur, and when more than 15 parts by weight of oligosaccharide is added Since the material is very high viscosity, the manufacturing process of the fermentation agent becomes difficult or impossible, and because of the high water content, the storage property of the fermentation agent is lost.

본 발명자들은 상기 발효제를 남은 음식물에 다양한 첨가 비율로 뿌려주거나 혼합하여 시험한 결과 경제성과 투여환경 등을 고려할 때 남은 음식물 100 중량부에 대하여 본 발명의 발효제 1∼3 중량부를 첨가하는 것이 가장 바람직한 것으로 나타났다.The present inventors are most preferred to add 1 to 3 parts by weight of the fermentation agent of the present invention to 100 parts by weight of the remaining foods in consideration of economics and administration environment as a result of spraying or mixing the fermenter in the remaining foods at various addition ratios. appear.

시험예 1Test Example 1

본 발명의 남은 음식물의 위생적 안전 사료화를 위한 발효제의 효과를 검증하기 위하여 발효제를 투여하지 않은 비교예 1(남은 음식물 3000g), 부형제만 투여한 비교예 2(남은 음식물 2950g, 밀기울 50g), 실시예 3에서 제조된 발효제를 투여한 실시예 5{남은 음식물 2950g + 발효제 50g(밀기울 45g + 동결 미생물 5g)} 그리고 실시예 4에서 제조된 발효제를 투여한 실시예 6{남은 음식물 2950g + 발효제 50g(밀기울 40g + 동결 미생물 5g + 글루코만난올리고당 5g)}을 각각 4반복으로 수행하였다.In order to verify the effect of the fermentation agent for hygienic safety feed of the remaining foods of the present invention, Comparative Example 1 (3000g remaining foods) without the fermentation agent, Comparative Example 2 (2950g remaining foods, bran 50g), only the excipients administered, Example Example 5 {remaining food 2950g + fermentation agent 50g (bran 45g + frozen microorganism 5g)} administered the fermentation agent prepared in Example 3 and Example 6 {remaining food 2950g + 50g fermentation agent (bran) with the fermentation agent prepared in Example 4 40 g + frozen microorganism 5 g + glucomannan oligosaccharide 5 g)} were performed in four replicates each.

시험 시작 후 4회에 걸쳐 보관용기의 뚜껑을 열고 냄새에 대한 관능시험을 수행하였고, 1일 간격으로 3일간 시료를 채취하여 각종 미생물의 수를 조사하였다.After the start of the test, the lid of the storage container was opened four times, and the sensory test for odor was performed. Samples were taken for 3 days at an interval of 1 day to examine the number of microorganisms.

채취한 시료는 9㎖의 0.1% 펩톤 용액에서 연속 희석하여 피씨(PC; plate count), 엠알에스(MRS), 와이엠(YM) 및 에스에스(SS) 한천편팡배지(액상배지 100㎖당 한천 1.5g)에 접종시킨 후 37℃에서 2∼4일간 배양하고 형성된 군락수를 세어 생균수를 측정하였다.Samples were serially diluted in 9 ml of 0.1% peptone solution and plate count, PC, MRS, YM, and SS agar batting medium (agar 1.5 per 100 ml of liquid medium). g) and inoculated in g) was incubated at 37 ° C for 2 to 4 days and the number of colonies formed was counted and the number of viable cells was measured.

이 때 사용된 액상배지의 조성은 하기 표 5에 나타내었다.The composition of the liquid medium used at this time is shown in Table 5 below.

액상배지조성과 종류Liquid medium composition and type 배지의 조성물Composition of medium 배지의 종류Type of badge MRSMRS YMYM SSSS TPTP 트립톤 또는 프로테오스 펩톤Tryptone or proteose peptone 10g10 g 5g5 g 5g5 g 5g(트립톤)5 g (tryptone) 육추출물 또는 맥아추출물Meat Extract or Malt Extract 10g10 g 3g(맥아)3 g (malt) 5g5 g 효모 추출물Yeast extract 5g5 g 3g3 g 2.5g2.5g 포도당 또는 유당Glucose or lactose 20g20 g 10g10 g 10g(유당)10 g (lactose) 1g1 g 폴리소르베이트 80Polysorbate 80 1g1 g 담즙염 No.3Bile salt No.3 8.5g8.5 g 암모니움(또는 소디움) 시트레이트Ammonium (or sodium) citrate 2g2 g 8.5g(소디움)8.5 g (sodium) 훼릭 시트레이트(FeC6H5O7)Ferric Citrate (FeC 6 H 5 O 7 ) 1g1 g 소디움 아세테이트Sodium acetate 5g5 g 소디움 씨오썰페이트(Na2S2O3)Sodium Seasulfate (Na 2 S 2 O 3 ) 8.5g8.5 g 황산마그네슘(MgSO4·7H2O)Magnesium Sulfate (MgSO 4 · 7H 2 O) 0.10g0.10 g 황산망간(MnSO4·4H2O)Manganese Sulfate (MnSO 4 4H 2 O) 0.05g0.05g 인산칼륨(dibasic)Potassium phosphate (dibasic) 2g2 g 브릴리안트 그린Brilliant Green 0.33㎎0.33mg 뉴트랄 레드Neutral Red 0.025g0.025 g 증류수Distilled water 1000㎖1000 ml 1000㎖1000 ml 100㎖100 ml 1000㎖1000 ml

하기 표 6은 상기 시험예 1에서 남은 음식물 방치 기간별 악취에 대한 관능치(5 : 참기 힘든 심한 악취, 4 : 심한 악취, 3 : 중간정도 악취, 2 : 약간의 악취, 1 : 느끼기 힘든 악취, 0 : 악취 전혀 없음)를 나타낸 것으로서 발효제로 처리하지 않은 남은 음식물의 경우 하루가 지나면서부터 심한 악취가 나기 시작하였다. 그러나 본 발명의 발효제를 첨가한 실시예 5와 6의 경우 한여름(시험기간중 평균 외기온도 29±6℃; 남은 음식물 내부온도 42±3℃)에 남은 음식물을 2∼3일간 방치하여도 전혀 악취가 나지 않았다.Table 6 is a sensory value for the odor according to the food leftover period in Test Example 1 (5: unbearable severe odor, 4: severe odor, 3: medium odor, 2: slight odor, 1: difficult odor, 0 : No odor at all), the remaining foods that had not been treated with fermentation began to have severe odors after one day. However, in Examples 5 and 6 to which the fermentation agent of the present invention was added, even if the food left in the summer (average outside air temperature 29 ± 6 ℃; internal food temperature 42 ± 3 ℃ during the test period) 2 to 3 days, no odor Did not go out.

남은 음식물 악취에 대한 관능치 비교Comparison of sensory values for leftover food odor 구 분division 관능치Sensory value 12h12h 24h24h 48h48h 72h72h 비교예 1Comparative Example 1 22 44 55 55 비교예 2Comparative Example 2 1One 33 33 55 실시예 5Example 5 1One 22 00 00 실시예 6Example 6 1One 1One 00 22

도 1은 상기 시험예 1에서 남은 음식물 중 총 미생물의 수를 비교하여 도시한 것으로서 배양기간(방치시간)이 경과할수록 미생물의 수가 급격히 증가한 것을 알 수 있으며, 발효제가 첨가된 실시예 5와 6의 경우 접종 미생물의 성장에 의해 비교예 1과 2의 경우보다 총 미생물의 수가 더 많았다.Figure 1 shows the comparison of the total number of microorganisms in the food left in Test Example 1, it can be seen that the number of microorganisms sharply increased as the incubation period (leave time) elapsed, Examples 5 and 6 of the fermentation agent is added The total number of microorganisms was higher than that of Comparative Examples 1 and 2 due to the growth of the inoculated microorganisms.

상기 시험예 1에서 남은 음식물 중 효모의 생균수를 방치 시간에 따라 비교하여 본 결과 도 2에 도시된 바와 같이 발효제가 첨가된 실시예 5과 6의 경우는 접종 효모의 성장에 의해 비교예 1과 2보다 더 많은 수의 효모가 존재하는 것으로 나타났다.As a result of comparing the number of viable cells of yeast in the remaining foods in Test Example 1 according to the standing time, in the case of Examples 5 and 6 to which the fermentation agent was added as shown in FIG. A greater number of yeasts were found.

그리고 상기 시험예 1에서 남은 음식물중 유산균의 수를 비교한 결과 도 3에 도시된 바와 같이 실시예 5와 6의 경우 발효제를 구성하고 있는 유산균의 왕성한 활동에 의해 비교예 1과 2의 경우보다 더 많은 유산균들이 군락을 형성하고 있는 것으로 나타났다.And as a result of comparing the number of lactic acid bacteria in the remaining foods in Test Example 1, as shown in Figure 3, in the case of Examples 5 and 6 due to the vigorous activity of the lactic acid bacteria constituting the fermenting agent than in the case of Comparative Examples 1 and 2 Many lactic acid bacteria were found to form colonies.

도 4는 상기 시험예 1에서 남은 음식물 중 병원성 대장균의 수를 비교한 것으로서 실시예 5와 6의 경우 발효제 투여에 의해 유산균과 효모가 급격히 성장하여 남은 음식물내 미생물군을 우점하고 병원성 미생물들의 성장을 급격히 억제시키는 것으로 나타나 본 발명의 발효제가 남은 음식물의 위생적 안전 사료화에 크게 기여할 것으로 평가되었다.4 is a comparison of the number of Escherichia coli among the remaining foods in Test Example 1, in the case of Examples 5 and 6, the lactic acid bacteria and yeast are rapidly grown by the administration of fermentation agent, dominant in the remaining food microbial group and the growth of pathogenic microorganisms It has been shown to be rapidly suppressed, and the fermenting agent of the present invention was evaluated to greatly contribute to the hygienic safety feed of the remaining food.

도 5는 상기 시험예 1에서 남은 음식물 중 각 미생물의 수를 비교한 것으로서 실시예 5와 6의 경우 발효제 투여에 의해 유산균과 효모가 급격히 성장하여 남은 음식물내 미생물군을 우점함으로써 병원성 미생물인 살모넬라의 성장률이 급격히 감소하여 살모넬라가 전혀 검출되지 않았다. 이 결과 역시 본 발명이 남은 음식물의 안전 사료화에 크게 기여할 것으로 평가되는 항목이다.5 is a comparison of the number of microorganisms in the remaining foods in Test Example 1, Examples 5 and 6 in the case of the growth pathogenic microorganisms Salmonella by dominating the microbial group in the remaining foods by rapid growth of lactic acid bacteria and yeast The growth rate decreased dramatically so that Salmonella was not detected at all. This result is also an item that the present invention will greatly contribute to the safety of the food of the remaining food.

상기 실시예 5와 6의 경우 12시간과 14시간 경과시에 각각 약간의 악취와 느끼기 힘든 정도의 악취가 생성되었지만 48시간 및 72시간이 경과한 후에는 오히려 악취가 나타나지 않았다. 이는 실시예 5와 6의 경우 미생물들에 의한 발효취가 생성되기 때문인데, 일반적으로 악취는 아주 낮은 단위에서 감지되지만 발효취와 같은 좋은 냄새는 악취에 비해 놓은 단위에서 감지된다.In Examples 5 and 6, a slight odor and a hard odor were generated after 12 hours and 14 hours, respectively, but after 48 hours and 72 hours, the odor did not appear. This is because in Examples 5 and 6, fermentation odor generated by microorganisms is generated. In general, odor is detected in a very low unit, but a good smell such as fermentation odor is detected in a unit placed in comparison to odor.

본 발명의 발효제는 배출 및 수거 단계에 있는 남은 음식물에 뿌려주거나 혼합시킬 경우 발효제를 구성하고 있는 미생물의 왕성한 성장과 올리고당의 남은 음식물 특유의 악취 및 부패산물의 생산 억제 작용에 의해 병원성 미생물의 증식이 방지될 뿐만 아니라 효소 역가 및 환원당 함량을 증가시키므로 남은 음식물의 균질성을 증가시키고 남은 음식물의 운반성과 보존성을 높여 사료화 이용 효율을 극대화시킬 수 있다.When the fermentation agent of the present invention is sprayed or mixed with the remaining foods in the discharge and collection stages, the growth of pathogenic microorganisms is suppressed by the active growth of the microorganisms constituting the fermentation agent and the suppression of the production of odor and decay products peculiar to the remaining foods of oligosaccharides. Not only is it prevented, but also increases the enzyme titer and reducing sugar content, thereby increasing the homogeneity of the remaining food and increasing the transportability and preservation of the remaining food, thereby maximizing feed efficiency.

또한, 이와 같은 남은 음식물의 사료 이용으로 농가의 사료 비용이 절감될 뿐 아니라 외국으로부터의 단미사료 수입량을 감소시키고 남은 음식물로 인한 환경오염을 방지하는 효과가 있다.In addition, the use of the feed of the remaining food not only reduces the feed cost of the farmhouse, but also reduces the amount of short-term feed imported from foreign countries and has the effect of preventing environmental pollution due to the remaining food.

Claims (5)

웨이쉘라 콘퓨사(Weissella confusa; ATCC-14434)와, 비피더스 에스피.(Bifidus sp.; ATCC-11863)와, 캔디다 유틸리스(Candida utilis; ATCC-9950)와, 캔디다 에스피.(Candida sp.; ATCC-90238, ATCC-60374)로 구성되는 군으로부터 선택되는 1종 이상을 혼합하여 구성되는 미생물 분말 5∼15 중량%와, 부형제 85∼95 중량%로 구성되는, 남은 음식물의 위생적 안전 사료화를 위한 발효제.Weissella confusa (ATCC-14434), Bifidus sp. (ATCC-11863), Candida utilis (ATCC-9950), Candida sp .; ATCC -90238, ATCC-60374) 5 to 15% by weight of microbial powder consisting of a mixture of one or more selected from the group consisting of, and 85 to 95% by weight of an excipient, fermentation agent for the hygienic safe feed of the remaining foods . 제1항에 있어서, 상기 미생물 분말과 부형제로 구성되는 발효제 100 중량부에 대하여 5∼15 중량부의 올리고당이 더 첨가되어 구성되는 것을 특징으로 하는, 남은 음식물의 위생적 안전 사료화를 위한 발효제.According to claim 1, Fermenting agent for hygiene safe feed of the remaining food, characterized in that 5 to 15 parts by weight of oligosaccharides are further added to 100 parts by weight of the fermentation agent consisting of the microbial powder and excipients. 삭제delete 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 부형제는 옥수수 가루, 밀기울, 쌀겨로 구성되는 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는, 남은 음식물의 위생적 안전 사료화를 위한 발효제.According to claim 1 or 2, wherein the excipient is characterized in that at least one selected from the group consisting of corn flour, bran, rice bran, fermentation agent for hygiene safe feed of the remaining food. 제2항에 있어서, 상기 올리고당은 글루코만난올리고당(glucomannan-oligosaccarides), 이눌로올리고당(inulo-oligosaccarides), 프락토올리고당 (fructo-oligosaccarides), 만난올리고당(manan-oligosaccarides)으로 구성되는 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는, 남은 음식물의 위생적 안전 사료화를 위한 발효제.The oligosaccharide of claim 2, wherein the oligosaccharide is selected from the group consisting of glucomannan-oligosaccarides, inulo-oligosaccarides, fructo-oligosaccarides, and manan-oligosaccarides. Fermentation agent for the hygienic safe feed of the remaining food, characterized in that more than one species.
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