KR100426223B1

KR100426223B1 - 수용성 펩타이드 약물의 건조 리포좀 조성물 및 그의 제조방법

Info

Publication number: KR100426223B1
Application number: KR10-2000-0063457A
Authority: KR
Inventors: 한건; 고종호; 김은영
Original assignee: 한건
Priority date: 2000-10-27
Filing date: 2000-10-27
Publication date: 2004-04-08
Also published as: KR20020032795A

Abstract

본 발명은 수용성 펩타이드 약물, 특히 rhEGF (재조합 인간 상피 성장 인자)를 주성분으로 포함하고 오일, 계면활성제, 다공성 담체, 예를 들면, 솔비톨, 인지질, 유기 용매를 포함하는 것을 특징으로 하는, 수용성 펩타이드 약물, 특히 rhEGF-함유 건조 리포좀 조성물과 그의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 건조 리포좀 조성물은 수용성 펩타이드 약물을 충분히 봉입시켜 약물의 체내 소실을 지연시킴으로써 약물의 생체내이용율을 높이며, 또한 물리적 및 화학적 안정성이 우수하다. 본 발명에서는 종래의 리포좀 제조 방법과는 달리, 수용성 펩타이드 약물을 W/O 에멀젼으로 제조하여 담체에 봉입시킨 후 인지질로 코팅하는 독특한 제조 방법으로 수용성 펩타이드 약물의 건조 리포좀을 제조하는 것을 특징으로 한다.

Description

수용성 펩타이드 약물의 건조 리포좀 조성물 및 그의 제조 방법 {Dry Liposome Compositions Containing Water-soluble, Peptide-based Drugs, and Preparation Method Thereof}

본 발명은 수용성 펩타이드 약물을 안정한 표적화(targeting) 리포좀으로 제제화하는 방법에 관한 것이다. 더 구체적으로는, 본 발명은 수용성 펩타이드 또는 일반적인 수용성 약물을 고체 리포좀으로 제조함으로써, 안정한 약물 송달 수송체를 개발한 신규한 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법은 일반적인 수용성 약물에 광범위하게 적용할 수 있으며, 약물의 안정성과 체내동태학적 파라미터를 개선시켜 다양한 제제 설계를 가능하게 한다. 또한, 본 발명의 방법으로 수용성 약물의 생체내 이용율과 표적성을 향상시킬 수 있다.

생물 활성을 갖는 수용성 펩타이드 약물은 일반적으로 위장관 내에서 효소에 대해 불안정하여 생체이용율이 매우 낮으므로, 전신 작용 치료에 큰 어려움이 있다. 따라서, 이러한 불안정한 수용성 펩타이드 약물에 대하여 여러 가지 방법을 통해 약물을 안정화시키고 제제의 약효를 향상시키려는 연구가 수행되어 왔다.

기존의 불안정한 수용성 펩타이드 약물의 안정화 방법으로는 폴리머를 이용하여 미립자를 제조하거나 리피드를 이용하여 리포좀을 제조하는 방법이 있었다. 그러나, 불안정한 수용성 펩타이드 약물의 이러한 제형 제조시에는 고온 및 액상 상태에서의 약물 안정성에 문제가 있었다. 또한, 종래의 안정화 제조 방법들은 개별 약물의 특성에 따라 선택하여 사용해야 하므로, 일반적인 불안정한 펩타이드 약물들에 대해 광범위하게 적용하기에는 여러 가지 문제점이 있었다.

구체적으로, 종래 제조 방법들 중 수중 고온을 이용하는 방법에 있어서 불안정한 펩타이드 약물의 구조 중에서 아스파라기닐 잔기와 글루타민 잔기에서 탈아미드화 반응이 일어나거나, 또는 메티오닌(Met), 시스테인(Cys), 히스티딘(His), 트립토판(Trp), 타이로신(Tyr) 잔기들에서 산화 반응이 일어나 약물이 분해되어 약효가 감소될 수 있다.

한편, 종래의 건조 리포좀 제제의 제조 방법은 난용성 약물에만 적용할 수 있으며, 수용성 약물의 봉입은 가능하지 못하였다. 이는 난용성 약물은 인지질을 함유하는 유기 용매에 잘 녹지만, 수용성 약물은 인지질이나 유기 용매에 녹지 않기 때문이다. 따라서, 수용성 약물을 솔비톨 담체에 균일하게 봉입시키기 위한 분산성이 뛰어난 마이크로에멀젼 시스템이 필요하다. 본 발명은 이러한 분산성이 뛰어난 마이크로에멀젼을 제공한다.

본 발명에서는 상기한 바와 같은 종래의 문제점들을 해결하여, 수용성 펩타이드 약물의 체내 소실을 지연시킴으로써 생체내 이용율을 높일 수 있을 뿐만 아니라 물리적 및 화학적 안정성이 우수한 수용성 펩타이드 함유 건조 리포좀 조성물 및 그의 제조 방법을 제공한다.

따라서, 본 발명의 신규한 제조 방법은 불안정한 수용성 펩타이드 약물을 안정화시키고 제제화함으로써 상기한 종래의 문제점들을 개선시키고, 일반적인 불안정한 수용성 펩타이드 약물에 광범위하게 적용할 수 있을 뿐만 아니라, 경구, 경피, 정맥주사 등의 투여를 위한 다양한 제형 설계가 가능하게 한다. 본 발명의 방법에 의해 안정성과 약효가 매우 우수한 조성물을 얻을 수 있다.

도 1은 rhEGF 건조 리포좀의 제조시 계면활성제의 종류에 따른 약물의 봉입 효율을 비교한 그래프도.

도 2는 rhEGF 건조 리포좀의 제조시 담체로서 만니톨과 솔비톨을 사용한 경우의 약물의 봉입 효율을 비교한 그래프도.

도 3은 rhEGF 건조 리포좀의 제조시 오일로서 유동 파라핀, 대두유, 에틸 올레에이트, 참기름을 사용한 경우 봉입 효율을 비교한 그래프도.

도 4는 rhEGF 건조 리포좀의 제조시 오일 용적이 봉입 효율에 미치는 영향을 나타내는 그래프도.

도 5는 rhEGF 약물 농도가 봉입 효율에 미치는 영향을 나타내는 그래프도.

도 6은 rhEGF 건조 리포좀을 물에 분산시켰을 때 입자 크기를 보여주는 분석도.

도 7은 rhEGF 건조 리포좀을 전자현미경 하에서 관찰한 사진도 (7a: 건조 솔비톨 표면, 7b: rhEGF 건조 리포좀 표면, 및 7c: rhEGF 건조 리포좀을 물에 분산시켰을 때 입자)

도 8은 rhEGF 건조 리포좀을 래트에 정맥 투여한 후의 혈중 농도 패턴을 보여주는 그래프도.

본 발명을 이하에 더욱 상세히 설명한다.

본 발명은 불안정한 수용성 펩타이드 약물의 수용액을 오일과 계면활성제를 사용하여 W/O 에멀젼으로 제조하고, 이 에멀젼에 다공성 담체를 분산시켜 수용성 펩타이드 약물을 담체에 봉입시키고 건조시킨 다음, 이를 인지질과 유기 용매의 용액을 사용하여 코팅시켜 유동성이 매우 좋은 과립으로 안정화시키는 방법에 관한 것이다. 이렇게 제조된 과립에 물을 첨가하여 진탕시켜 리포좀을 형성시킨다. 이러한 본 발명의 방법에 의해 다양한 표적성 제제를 제조할 수 있게 된다.

이러한 본 발명의 안정화 제조 방법을 적용할 수 있는 불안정한 수용성 펩타이드 약물의 대표적인 것으로는 재조합 인간 상피 성장 인자(rhEGF), 형질전환 (Transforming) 성장 인자-α(TGF-α), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 형질전환 성장 인자-β(TGF-β), 섬유아세포 성장 인자 (FGF), 염기성(basic) FGF 및 산성(acidic) FGF 등의 수용성 펩타이드 및 단백질 약물이 있다. 이 외에 하기 표 1에 나타낸 바와 같은 광범위한 수용성 약물이 또한 본 발명에 의해 바람직하게 안정화되어 이용될 수 있다.

본 발명에 적용가능한 수용성 펩타이드 약물

상피 성장 인자 (EGF), rhEGF형질전환 성장 인자-α(TGF-α)혈소판 유래 성장 인자 (PDGF)형질전환 성장 인자-β(TGF-β)섬유아세포 성장 인자 (FGF)부신피질 자극 호르몬 (ACTH)바시트라신칼시토닌 (CT)융모성 성선자극 호르몬 (hCG)성장 호르몬 (소마토트로핀)그루미시딘 (Grumicidin) S인슐린황체형성 호르몬 유리 호르몬 (LHRH)옥시토신 (OT)소마토스타틴 (Somatostatin; SS)갑상선자극호르몬 유리 호르몬 (TRH)

본 발명에 사용되는 다공성 분말상 담체는 체내 독성을 일으키지 않아야 하고, 항원성이 없어야 하며, 체내에 축적되지 않아야 하는 등의 일반적인 조건을 갖는 것일 수 있다. 또한, 담체는 물에 넣었을 때 잘 용해되도록 수용성이어야 하고, 제조 과정상 충격에 안정하며, 유기 용매에 대한 용해도가 작아야 하고, 인체에 적용가능하고 투여 경로에 따른 조건에 적합하여야 한다. 이러한 조건을 만족하는 담체로는 솔비톨, 염화나트륨, 만니톨, 락토오스 등이 있다. 특히 솔비톨은 다공성 구조를 갖고 있어 그 사이에 많은 양의 약물을 축적할 수 있고, 또한 그의 표면에 인지질을 코팅함으로써 다양한 특성을 갖는 제제를 제조할 수 있으므로 본 발명에 가장 적합하다.

본 발명의 1차 봉입에서 사용되는 오일은 광유, 예를 들면, 유동 파라핀; 식물유, 예를 들면, 대두유, 옥수수유, 피마자유, 면실유, 카놀라유, 해바라기씨 기름, 홍화유, 참기름, 낙화생유; 비타민유, 예를 들면, 토코페롤 오일(VE); 에틸 올레에이트, 카프릴릭/카프릴산 트리글리세리드 등이 있다. 약물의 봉입 효율 면에서 특히 유동 파라핀이 본 발명에 적합한 오일이다.

계면활성제로서는 HLB값이 낮은 비이온계 계면활성제 Span류(Span 80)를 사용하여 약물을 함유한 수성상을 오일상 중에 분산시켜 수상/유상(W/O) 에멀젼을 제조한다. 본 발명에 사용할 수 있는 계면활성제로는 하기 표 2에 나타낸 바와 같은 비이온계 계면활성제들, 예를 들면, 폴리소르베이트 (Tween류), 소르비탄 지방산 에스테르 (Span류), 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르류 (Brij류), 폴록사머류 (Pluronic류), 폴리옥실 수소화 피마자유 (HCO류), 폴리에틸렌글리콜 에스테르류 (Labarfil, Labrafac; Gattefosse S.A. (프랑스) 제품), 메틸 글루코시드 유도체 (Glucate) 및 크레모포르류 (폴리옥시에틸화 피마자유)을 포함한다. 특히, 계면활성제는 Tween류, Span류, 폴록사머류 및 크레모포르류 중에서 선택된다. 계면활성제로서 Tween류와 Span류를 비교하면 Span 80의 경우 약물이 가장 많이 봉입된다 (도 1 참조).

본 발명에 사용가능한 계면활성제 종류
Tween (폴리소르베이트)	Tween 20, Tween 40, Tween 60, Tween 80
Span (소르비탄 지방산 에스테르)	Span 20, Span 40, Span 60, Span 80
Brij (폴리옥시에틸렌 알킬 에테르류)	Brij 72, Brij 76, Brij 78, Brij 700
Pluronic (폴록사머류)	F-68, L-44, F-87, F-108, F-127
HCO (폴리옥실 수소화 피마자유)	HCO-60, HCO-50, HCO-40
기 타	Labrafil M 1944CSLabrafil M 2125CSLabrafac Hydro.wL 1219Glucate DOCremophor RH 40Cremophor EL

본 발명에서 제제학적으로 사용되는 인지질로는 제제학적으로 사용가능한 포스파티딜콜린, 포스파티딜글리세롤 및 이들의 유도체를 사용할 수 있다. 상기한 유도체로는 디미리스토일포스파티딜콜린(DMPC), 디팔미토일포스파티딜콜린(DPPC), 디스테아로일포스파티딜콜린(DSPC), 디미리스토일포스파티딜글리세롤(DMPG), 디스테라오일포스파티딜에탄올아민-N-폴리(에틸렌글리콜) 2000과 이들의 유도체인 DSPE-PEG 1000, DSPE-PEG 2000, DSPE-PEG 5000, DSPE-PEG 10,000 및 디올레오일포스파티딜콜린, 디올레오일포스파티딜글리세롤 등이 있다. 본 발명에서는 축적되는 약물의 최대 용량과 그 자체의 성질을 고려한 후 적합한 계를 결정하고 인지질을 선택하여 사용한다.

본 발명에 있어서는 경제적인 면과 표적화의 면을 고려하여, 경구 투여시에는 저순도의 60% 포스파티딜 콜린을 사용하고, 정맥 주사시에는 체내에서 지속적으로 약효를 나타내도록 하기 위해 99% 포스파티딜 콜린 또는 DSPE-PEG 2000 종류를 혼합하여 사용한다.

본 발명에서 2차 코팅에 사용될 수 있는 유기 용매는 인지질을 용해시키지만 솔비톨 및 부착된 약물은 용해시키지 않아야 하고, 휘발성이 좋아야 한다. 이러한 조건을 만족시키는 용매로는 디클로로메탄, 아세톤, 클로로포름, 메탄올, 에탄올 및 이들 중 1종 이상의 혼합액 등이 사용가능하다. 유기 용매는 약물에 따라 달리 선택되지만 주로 클로로포름, 메탄올, 에탄올 및 이들 중 1종 이상의 혼합액 등이 적합하다.

본 발명의 방법에 따라 제조한 과립은 약물과 인지질이 빛에 의해 산화되기 쉬우므로 차광할 필요가 있고, 고온 산소에 의해 약물과 리포좀의 안정성이 저하되므로 4℃에 보관하거나 산소와의 접촉을 피하여야 한다. 따라서, 제조한 과립은 갈색병에 질소로 충진시킨 뒤 저장해야 한다.

본 발명에 따른 과립의 제조 과정을 살펴보면, 우선 제조 장치로서 회전 혼합기를 사용하여 솔비톨 (298-500 ㎛)을, 계면활성제를 사용하여 약물을 함유한 수성상을 오일상 중에 분산시켜 제조한 W/O 에멀젼에 넣고 250 rpm에서 20분간 혼합한다. 헥산을 사용하여 입자 표면의 오일을 3-5회 세척해낸 후 회전식 증발 농축기에서 유기 용매를 완전히 증발시켜, 약물이 봉입된 건조한 담체를 얻는다. 약전체(sieve)를 사용하여 담체 입자를 298-500 ㎛가 되도록 한 후 다음과 같이 2차 코팅을 실시한다.

상기 제조한 담체를 회전식 증발 농축기에서 충분히 건조시킨 후 일정량의 인지질을 함유하는 유기 용매를 안정한 유리 선의 삼방 연결장치(3-way connector)가 있는 제조 장치를 이용하여 주입한다. 마지막으로, 유기 용매를 첨가하고 건조시킨 후, 진공 데스케이터에서 약 24시간 건조시킨다. 입자 크기가 고른 과립을 얻기 위하여 건조시킨 후 분쇄하여 298-500 ㎛ 크기의 입자를 분취하여 갈색병에 질소로 충전시킨 뒤 저장한다.

또한, 담체에 흡착된 유기 용매와 용액을 회수한 후, 담체를 유리봉을 사용하여 서서히 교반함으로써 담체끼리의 응결을 방지하여 과립으로 제조한다. 이렇게 제조된 과립은 유동성이 매우 좋다.

이렇게 제조된 과립은 액상 리포좀과는 달리 건조 상태로 보관할 수 있으므로 리포좀의 물리화학적 불안정성을 극복할 수 있고, 비교적 재현성있게 균질 제품을 얻을 수 있다. 특히 공업적인 규모의 멸균 처리도 가능하므로 종래 리포좀보다 더 유리하다. 따라서, 본 발명의 방법에 의해 제한된 약물이 아니라 일반적인 수용성 약물을 전반적으로 효과적으로 안정화시킬 수 있다.

이와 같이 본 발명에 의해 제조된 고형 과립은 제제학적으로 광범위하게 이용가능한 새로운 수용성 펩타이드의 안정화계(系)로서, 얻어진 과립을 물 또는 체액에 가하면 리포좀으로 되며, 내용 약물은 안정화된 상태로 존재하므로 생체이용율을 현저하게 향상시킬 수 있다. 또한, 이러한 과립은 유동성이 좋은 분말성으로 제조되기 때문에 보관상 유리하다. 또한, 다양한 약물의 고형 리포좀 제제가 가능하므로 다방면에 응용할 수 있다. 즉, 본 발명에서 얻은 과립은 통상의 방법으로 이를 리포좀 과립제, 리포좀 캅셀제, 리포좀 정제, 용시 용해성 분말형 리포좀 주사제 등으로 제조할 수 있으므로, 여러 가지 제형 설계를 통해 효과적인 약물수송계로 응용될 수 있다.

상술한 바와 같이 본 발명의 방법에 따라, 불안정한 수용성 펩타이드 약물을 W/O 에멀젼으로 하여 다공성 분말상 담체에 봉입시켜 유동성이 좋은 고형 과립 상태로 제조하여 안정화시킴으로써, 종래 문제점들을 해소함과 동시에, 종래의 리포좀과는 달리 건조 상태로 보관할 수 있는 균질한 제품을 제조할 수 있으며, 공업적 규모의 멸균 처리가 가능한 등 매우 유리하다. 본 발명의 방법은 특히 일반적인 수용성 약물에 광범위하게 이용할 수 있고, 이를 이용하여 여러 가지 제형 설계가 가능하며 또한 수용성 약물의 생체이용률을 향상시킬 수 있다. 이하, 본 발명을 실시예에 의하여 예시한다.

실시예 1

수용성 펩타이드 약물로서 rhEGF를 사용하였다. 이를 봉입시키기 위해 우선 다공성 분말상 담체로서 솔비톨 0.5 g을 칭량하여, 유동 파라핀, 에틸 올레에이트, 대두유, 피마자유, 면실유, 홍화유, 참기름, 낙화생유 중에서 선택된 오일 12.5 ㎖, Span 80 0.05 ㎖와 rhEGF 0.1 ㎖ (0.1 ㎎/㎖) 함유한 w/o 에멀젼 중에서 회전 혼합기를 사용하여 250 rpm 하에 20분간 분산시켰다. 이어서, n-헥산으로 3회 세척하여 입자 표면의 오일을 제거한 후 회전 증발기에서 유기 용매를 충분히 제거하여, rhEGF이 봉입된 건조한 담체를 얻었다. 약전체를 사용하여 담체 입자를 298-500 ㎛가 되도록 한 후 2차 코팅을 실시한다.

DPPC와 DSPE-PEG 2000 (몰비 5:1) 75 ㎎를 클로로포름 7.5 ㎖에 용해시킨 용액 (10 ㎎/㎖)으로 각각의 담체를 서로 응집되기 전까지 반복 코팅시켰다.

코팅 절차는 다음과 같다: 상기에서 얻은 rhEGF 함유 솔비톨 담체 5 g을 취하여 회전 증발 농축기의 플라스크에 넣은 후 약 1시간 동안 감압 건조시켰다. 회전 증발 농축기의 삼방 연결장치를 이용하여 리포좀 구성 성분을 용해시킨 클로로포름 용액을 일정량씩 도입되도록 조정하고, rhEGF 함유 솔비톨 담체를 코팅시켰다. 회전 증발 농축기의 회전수는 100 rpm으로 유지시켰고, 솔비톨이 완전히 건조되어 자유 유동 상태가 되면 다시 용액을 가하여 반복 코팅시켰다. rhEGF와 인지질이 함유된 솔비톨을 12시간 동안 냉동 건조시킨 후 4℃에서 냉장 보관하였다.

도 3에 도시한 바와 같이, 오일로서 유동 파라핀, 대두유, 에틸 올레에이트, 참기름, 피마자유를 사용한 경우의 봉입 효율을 비교하면, 유동 파라핀을 사용한경우 봉입 효율이 가장 높았다.

실시예 2

약전체로 친 입자 크기 298-500 ㎛의 솔비톨 중에 2% 메틸렌 블루 색소로 수용성 약물을 대체하여 실시예 1에서와 같이 실시하여, 건조 리포좀 표면 상의 메틸렌 블루의 파란색 착색을 확인하였다. 이로써, 일반적인 수용성 약물도 본 발명의 방법에 의해 담체에 봉입될 수 있음을 확인하였다.

실시예 3

계면활성제로서 Tween 20 (HLB 16.7), Tween 80 (HLB 15.0), Span 20 (HLB 8.6), Span 80 (HLB 4.3)을 사용하여 실시예 1에서와 같이 건조 리포좀을 제조하였다. 이렇게 제조된 건조 리포좀의 봉입 효율을 측정한 결과, HLB값이 큰 계면활성제가 HLB값이 작은 계면활성제보다 봉입 효율이 더 작았다. 즉, 계면활성제로서 HLB값이 낮은 Span 80을 사용한 경우 약물이 가장 많이 봉입되었다 (도 1).

실시예 4

담체로서 솔비톨 대신 만니톨을 사용하여 실시예 1에서와 같이 실시하였다. 그 결과는 만니톨을 사용한 경우의 약물의 봉입 효율이 솔비톨을 사용한 것보다는 낮았다 (도 2).

실험예 1. 봉입 효율의 측정

상기 제조한 건조 리포좀의 봉입 효율은 실제 봉입량/이론 봉입량으로부터 산출하였다.

실시예 1에서 오일 용적을 다르게 하여 봉입 효율에 미치는 영향을 도 4에나타냈다. 도 4에서 알 수 있는 바와 같이, 오일량이 많을수록 봉입 효율이 작아지며, 오일량이 12.5 ㎖일 때 봉입 효율은 약 98%이다.

또한, 실시예 1에서 약물의 로딩양을 다르게 하여 봉입 효율에 미치는 영향을 도 5에 나타냈다. 약물량이 많을 수록 봉입 효율이 크다.

실험예 2. 입자 크기의 측정

실시예 1에서 제조한 rhEGF-함유 건조 리포좀 조성물에 주사용증 류수를 첨가하고 교반하여 형성된 리포좀의 입자 크기를 광산란 분광 분석기 (Light scattering spectrophotometer: Nicomp 370, Particle Sizing System, Inc. (미국 캘리포니아주 산타 바바라))를 이용하여 측정하였다.

결과는 다음과 같다 (도 6 참조):

실시예 1의 리포좀의 입자 크기: 166.3±53.5 ㎚.

실험예 3. 전자 현미경 하의 관찰

건조 솔비톨과 건조 리포좀의 표면을 관찰하기 위해, 이온 피복기를 사용하여 백금으로 피복한 후 주사 전자 현미경(SEM)으로 관찰하였다 (도 7a 및 도 7b). 또한, 건조 리포좀을 물에 분산시킨 후 입자 모양를 관찰하기 위해, 탄소 피복 그리드 상에 샘플을 넣고 2% 암모늄 몰리브데이트로 염색한 후 투과 전자 현미경(TEM)으로 관찰하였다 (도 7c).

도 7a를 살펴보면 솔비톨 표면이 다공성임을 알 수 있으며, 도 7b를 살펴보면 솔비톨 표면이 약물과 인지질로 코팅된 것을 확인할 수 있다. 또한, 도 7c에서는 건조 리포좀을 주사용 증류수에 분산시키면 리포좀 입자가 형성되는 것을 확인할 수 있다.

실험예 4. 약물 동태학적 연구

200-250 g의 스프라그-도울리계(Sprague-Dawley) 래트를 사용하여 약물동태학적 실험을 실시하였다. 래트에 실시예 1의 조성물과 생리식염수에 녹인 rhEGF 제제를 각각 100 ng/㎏씩 정맥 주입한 후 0, 2, 4, 6, 8, 10, 15, 30, 60, 90, 120시간에 혈액을 채취하였다. 혈액 중 rhEGF농도를 ELISA법으로 측정하여 약물동태학적 파라미터를 산출하여 비교하였다. 결과는 표 2에 나타냈다 (도 8 참조).

본 발명에 따른 rhEGF-함유 건조 리포좀 조성물의 AUC와 T_1/2는 용액 제제와 비교하면 각각 1.38배 및 3.35배 증가하였다. 따라서, 본 발명의 조성물은 용액 제제와 비교할 때 체내 소실이 지연되어 더 높은 생체내이용율을 나타내는 것을 확인할 수 있었다.

rhEGF 건조 리포좀을 래트에 정맥 투여한 후 체내 약물동태학적 파라미터

파라미터제제	AUC(ng·min/㎖)	T_1/2(min)	CL(㎖/min/㎏)	MRT(min)	Vdss(㎖/㎏)
용액	686.34	9.26	0.0146	4.332	0.0633
건조 리포좀	9473.89	31.04	0.0106	6.106	0.0644
AUC: 혈중 약물 농도 곡선하 면적, T_1/2: 생체내 반감기,CL: 클리어런스, MRT: 평균 체류 시간, Vdss: 분포 용적

본 발명의 방법에 따라, 불안정한 수용성 펩타이드 약물을 W/O 에멀젼으로 하고 다공성 분말상 담체에 봉입시켜 유동성이 좋은 고형 과립 상태로 제조하여 안정화시킴으로써, 종래의 문제점들을 해소함과 동시에, 종래의 리포좀과는 달리 건조 상태로 보관할 수 있는 균질한 제품을 제조할 수 있으며, 공업적 규모의 멸균 처리가 가능한 등 매우 유리하다. 본 발명의 방법은 특히 일반적인 수용성 약물에 광범위하게 이용할 수 있고, 이를 이용하여 여러 가지 제형 설계가 가능하며 또한 수용성 약물의 생체이용률을 향상시킬 수 있다.

Claims

수용성 펩타이드 약물의 수용액을 광유, 식물유, 비타민유, 에틸 올레에이트 및 카프릴릭/카프릴산 트리글리세리드로 이루어진 군 중에서 선택되는 오일, 및 폴리소르베이트, 소르비탄 지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르류, 폴록사머류, 폴리옥실 수소화 피마자유, 폴리에틸렌글리콜 에스테르류, 메틸 글루코시드 유도체 및 크레모포르류로 이루어진 군 중에서 선택되는 비이온계 계면활성제와 혼합하여, 수용성 펩타이드 약물의 W/O 에멀젼을 제조하는 단계;

상기 W/O 에멀젼에 솔비톨, 염화나트륨, 글루코스 및 만니톨로 이루어진 군 중에서 선택되는 다공성 분말상 담체를 분산시켜 봉입시킨 후 표면의 오일을 제거하고 물을 증발시켜, 수용성 펩타이드 약물이 봉입된 건조 담체를 제조하는 단계; 및

상기 건조 담체를 인지질과 클로로포름, 메탄올, 에탄올 및 이들 중 1종 이상의 혼합액 중에서 선택되는 유기 용매의 용액으로 코팅하고 건조시키는 단계를 포함하는, 수용성 펩타이드 약물의 안정화 건조 리포좀의 제조 방법.
제1항에 있어서, 상기 수용성 펩타이드 약물이 재조합 인간 상피 성장 인자(rhEGF), 형질전환(Transforming) 성장 인자-α(TGF-α), 형질전환 성장 인자-β(TGF-β), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 섬유아세포 성장 인자(FGF), 염기성(basic) FGF와 산성(acidic) FGF, 부신피질 자극 호르몬(ACTH), 바시트라신, 칼시토닌(CT), 융모성 성선자극 호르몬(hCG), 성장 호르몬(소마토트로핀), 그루미시딘(Grumicidin) S, 인슐린, 황체형성 호르몬 유리 호르몬(LHRH), 옥시토신(OT), 소마토스타틴(Somatostatin; SS), 갑상선자극호르몬 유리 호르몬(TRH)로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 방법.
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제1항에 있어서, 상기 건조 담체를 코팅하는데 사용된 인지질이 포스파티딜콜린, 포스파티딜글리세를, 디미리스토일포스파티딜콜린, 디미리스토일포스파티딜글리세롤, 디올레오일포스파티딜콜린, 디올레오일포스파딜글리세롤, 디스테라오일포스파티딜에탄올아민-N-폴리(에틸렌글리콜) (DSPE-PEG) 및 콜레스테롤로 이루어진 군 중에서 선택된 것을 사용하는 방법.
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제1항의 방법으로 제조된 수용성 펩타이드 약물의 안정화 건조 리포좀을 리포좀 과립제, 리포좀 캅셀제, 리포좀 정제, 리포좀 외용제제 및 용시 용해성 분말형 리포좀 주사제 중에서 선택된 제형으로 제제화시킨 제제.