KR20050081092A

KR20050081092A - 생체적합성 친수성 고분자를 포함하는 콜로이드계 조성물,제형 및 이들의 제조 방법

Info

Publication number: KR20050081092A
Application number: KR1020040009337A
Authority: KR
Inventors: 정혜선; 정서영; 권익찬; 이수연; 노경호
Original assignee: 한국과학기술연구원
Priority date: 2004-02-12
Filing date: 2004-02-12
Publication date: 2005-08-18
Also published as: WO2005077336A1

Abstract

본 발명은 생체적합성 고분자를 포함하여 입체적으로 안정화된 상태인 에멀젼 또는 큐보좀 조성물, 이를 포함하는 에멀젼 또는 큐보좀 제형 및 이들의 제조방법에 관한 것이다.

Description

생체적합성 친수성 고분자를 포함하는 콜로이드계 조성물, 제형 및 이들의 제조 방법{COMPOSITION AND FORMULATION OF COLLOIDAL SYSTEM COMPRISING BIOCOMPATIBLE AQUEOUS-SOLUBLE POLYMER, AND PREPARATION METHOD THEREOF}

본 발명은 생체적합성 고분자를 포함하여 입체적으로 안정화된 상태인 에멀젼 또는 큐보좀 조성물, 이를 포함하는 제형 및 이들의 제조방법에 관한 것이다.

에멀젼(emulsion)은 하나의 액체가 자신이 섞이지 않는 다른 액체에 분산되어 있는 계를 일컬으며, 기름과 물로 구성된 에멀젼의 경우 연속 상(continuous phase)이 기름인지 물인지에 따라서, o/w (oil-in-water), w/o (water-in-oil), w/o/w 형태 등의 에멀젼으로 분류된다. 특히, o/w 형태의 에멀젼은 소수성 영역 (domain)을 가지고 있어서, 난용성 약물의 전달 체계로 유용하게 이용되어져 왔다. 에멀젼은 준안정 (metastable)한 시스템이기 때문에 약물 전달 기능을 효과적으로 수행하기 위해서는 에멀젼의 분해 속도를 느리게 하고 합체 (coalescence)를 포함한 엉김 현상에 대항해서 안정화시키기 위한 보조제(agent)가 요구된다.

또한, 큐보좀은 모노글리세라이드 (monoglyceride)에 물을 가하면 자발적으로 형성되는 안정한 입방상 (cubic phase) 구조체를 유화제를 이용하여 물에 분산시킨 것이다 (미국 특허 제5,531,925호). 에멀젼 또는 큐보좀 등의 분산계를 안정화시키기 위해서는 유화제가 필요하다. 유화제로는 주로 인지질, 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제 등이 사용된다. 큐보좀은 난용성, 양쪽성 약물을 쉽게 봉입하는 장점이 있으며, 점막흡착성이 있으므로 경구용 약물전달체계로 적합하다.

또한, 본 발명자들의 발명에 대한 대한민국 특허출원 제2000-12465호, 제2001-7123호 및 제2001-7125호에 모노글리세라이드 (monoglyceride), 유화제 (emulsifier) 및 유기용매로 구성된 약물의 가용화용 조성물이 개시되어 있다. 상기 약물의 가용화용 조성물은 난용성 물질 또는 단백질을 효과적으로 가용화시키는 것을 특징으로 하는데, 상기 조성물은 물에 혼합한 후 흔들어 주거나 볼텍스 (vortex)를 하면 평균 입자의 크기가 500 nm 이하인 입자의 분산액을 쉽게 형성한다. 상기 가용화용 조성물은 약물의 분자량 및 극성에 따라 정도의 차이가 있지만 대부분의 약물을 높은 효율로 봉입한다. 또한, 큐보좀과 마찬가지로 상기 가용화용 조성물의 분산액은 점막흡착성을 가지므로 경구용 약물전달체계로 적합하다.

친수성 고분자가 입자 분산체의 안정성을 증진시킨다는 몇 몇 보고가 있으며, 여기에는 이러한 안정화가 분산체와 고분자 간의 정전기적 인력 또는 입체적인 (sterical) 상호 작용에 의하여 성취된다고 설명되어 있다 (Michaut F., Hebraud P., Lafuma F., Perrin P., Langmuir, 2003; 19; 10086-10094. Gole A., Phadtare S., Sastry M.; Langevin D., Langmuir, 2003; 19; 9321-9327. Fritz G., Schadler V., Willenbacher N., Wagner N. J., Langmuir, 2002; 18; 6381-6390. Kawaguchi M., Tsujino T., Kato T. Langmuir, 2000; 16; 5568-5572.) Kawakami 등은 친수성 고분자가 리포좀 분산체의 물리적 안정성에 영향을 준다고 하였고, 이러한 안정화 현상을 리포좀과 이에 흡착된 고분자 간의 상호 작용으로 설명하고자 하였다 (Kawakami K., Nishihara Y., Hirano K. J. Phys. Chem. B, 2001; 105; 2374).

결손력 (Depletion force)은 입자간 인력으로 작용하기 때문에 엉김현상의 원인이 되고, 고분자의 농도가 일정농도보다 낮은 경우에는 오히려 고분자의 농도가 높아질수록 결손력이 강해져서 분산도가 떨어질 수 있으나, 일정농도 이상에서는 물리적 장애물로 작용을 하기 때문에 고분자의 농도가 증가하면 할수록 분산도가 높아진다. 그러나, 입자와 고분자간의 흡착이 있는 경우에는 그 특정 농도보다 낮은 영역에서도 고분자를 첨가할수록 분산도가 좋아지는 결과를 얻었다. 그러나, 이 논문은 이미 잘 분산되어 있는 리포좀계의 안정화를 도와주는 고분자의 역할을 설명한 것으로, 분산되지 않는 유상의 분산을 돕는 유화제로 수용성 고분자를 사용하는 본 발명과는 차이점이 명백하다.

식품 과학 분야에서 다당류와 계면활성제 간의 상호작용을 유도하여 결국은 식품의 콜로이드의 크리밍 속도를 조절하는 데에 이용하여 한 노력들이 보고된 바 있다. Hibberd 등은 0.95 % (w/w) 히드록시에틸셀룰로오즈 (hydroxyethylcellulose)가 물에서 유화제인 Brij 35에 의해서 유화된 60 % 이상의 매우 높은 농도의 헵탄(heptane)과 헥사데칸(hexadecane)의 혼합 기름을 합체(coalescence)로부터 안정화시켜 크리밍 속도를 늦출 수 있었다 (Hibberd DJ, Howe AM, Robins M. Cooloids and Surfaces 1988, 31, 347-353). Tunier 등도 에멀젼품에 있어서 농축제(thickener)로 사용되는 세포외 폴리사카라이드(exocellular polysacchrides, EPSs)를 높은 농도로 사용하여 유장 단백질(whey protein)로 유화된 액체 기름을 안정화시켜 크리밍 속도를 낮출 수 있었다고 하였다 (Tunier, R.; de Kruif, C. G. J. Colloid Interface Sci. 1999; 218; 201). 이들은 모두 높은 농도의 유화제로 이미 잘 유화되어 있는 계에 대해서 고분자를 도입하는 것에 의해 안정성을 높인 것으로, 고분자가 유화제의 역할을 하는 본 발명과는 크게 차이가 있다.

또한, Jumaa 등은 ABA 블록 공중합체 (F68)와 키토산으로 구성되는 혼합필름이 기름과 물 사이의 계면에 형성되어 오토클레이빙(autoclaving) 과정 동안 상분리가 되지 않으면서 캐스터 오일 (castor oil)이 열에 의한 손상을 받지 않을 수 있었다고 하면서, 일반적으로 지질 에멀젼을 살균하기 위해서 필요한 과정인 오토클레이빙 과정을 개선할 수 있었다고 보고하였다 (Jumaa M., Muller BW., Int. J. Pharm. 1999, 183; 175-184.). 그러나, 이 경우 키토산 농도의 4 배 이상의 유화제가 포함될 경우에만 상분리가 일어나지 않았다. 즉, 많은 양의 유화제를 필요로 한다는 점에서 본 발명과는 구별된다. 본 발명에서는 오일의 양이 유화제에 비해 20배 이상인데 비하여 기존문헌에서는 5배 이하이고, 키토산을 넣을 경우 오히려 유화제의 양을 증가시켜야 한다는 점에서, 기존의 문헌들에 기재된 키토산은 유화제의 역할을 한다고 볼 수 없다.

Spicer 등의 특허 (WO 02/066014 A2)에 개시된 방법은 전분 (Starch)을 전체 무게의 30 %의 양으로 사용하고, 사용된 전분과 물의 양이 1:2 (w/w)이므로, 균일한 용액상이 아니라 밀가루 반죽과 유사한 형태의 걸죽한 상태의 혼합물을 만들고 전체 무게의 10 % 정도의 모노글리세라이드를 섞은 후 작은 입자로 분쇄하기 위하여 원자화(atomization)라는 공정을 거친 후 즉시 건조시켜 분말을 제조하였다. 따라서, 이들이 사용한 전분과 덱스트란(Dextran)과 같은 고분자는 액상으로 존재하지 않으며, 분산 보조제라기 보다는 지질의 큐빅상을 둘러싸기 위해서 포접화합물(clathrate)로 사용되었다는 점에서 본 발명과 크게 차이가 있다.

이상에서 살펴본 바와 같이, 난용성 약물 및/또는 단백질등과 같은 물질의 체내전달효율을 증진시키기 위하여, 상기 물질의 체내 전달시스템으로 유용한 지방 에멀젼 또는 큐보좀의 분산성 및 안정성을 증가시키는 것이 무엇보다 중요하다. 이에, 본 발명자들은 생체적합성 친수성 고분자가 지방에멀젼 또는 큐보좀을 안정화시키는 작용을 한다는 것. 즉, 친수성 고분자가 지질로 구성된 에멀젼 또는 큐보좀계에서 유화제 역할을 한다는 것을 발견하여, 본 발명을 완성하였다. 지금까지, 친수성 고분자 수용액이 지방에멀젼 또는 큐보좀을 안정화시킨다는 것과 관련하여 보고된 바가 전혀 없다.

본 발명은 유화제를 사용하지 않거나 현저하게 소량만을 사용하고 생체적합성 친수성 고분자를 사용하여 분산성이 우수하고 입체적으로 안정화된 에멀젼 또는 큐보좀 조성물 및 이에 약물이 담지된 분산성 및 점막흡착성이 우수한 제형을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 생체적합성 친수성 고분자를 포함하여 입체적으로 안정화된 상태인 에멀젼 또는 큐보좀 조성물, 이를 포함하는 제형 및 이들의 제조방법에 관한 것이다.

우선, 본 발명은 생체적합성 친수성 고분자를 포함하여 입체적으로 안정화된 상태인 에멀젼 또는 큐보좀 조성물을 제공한다. 보다 상세하게, 본 발명은 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 30 중량%, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량% 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 에멀젼 조성물에 관한 것으로, 상기 에멀젼 조성물은 생체적합성 친수성 고분자의 유화 및 안정화 작용으로 인하여 입체적으로 (sterically) 안정화된 상태인 것을 특징으로 한다.

또한, 본 발명은 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 30 중량%, 한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량%, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량%, 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 에멀젼 조성물에 관한 것으로, 상기 에멀졀 조성물은 생체적합성 친수성 고분자의 유화 및 안정화 작용에 의하여 입체적으로 안정화된 상태인 것을 특징으로 한다.

또한, 본 발명은 한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량%, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량%, 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 큐보좀 조성물에 관한 것으로, 생체적합성 친수성 고분자의 안정화 작용에 의하여 입체적으로 안정화된 큐보좀의 조성물을 그 특징으로 한다.

또한, 본 발명은 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 6 중량%, 한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량%, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량%, 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 큐보좀 조성물에 관한 것으로, 상기 큐보좀 조성물은 생체적합성 친수성 고분자의 안정화 작용에 의하여 입체적으로 안정화된 상태인 것을 특징으로 한다.

또한, 본 발명은 파이탄트리올 0.1 내지 30 중량%, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량%, 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 큐보좀 조성물에 관한 것으로, 생체적합성 친수성 고분자의 안정화 작용으로 인하여 입체적으로 안정화된 상태인 것을 특징으로 한다.

또한, 본 발명은 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 6 중량%, 파이탄 트리올 0.1 내지 30 중량%, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량%, 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 큐보좀 조성물에 관한 것으로, 상기 큐보좀 조성물은 생체적합성 친수성 고분자의 안정화 작용에 의하여 입체적으로 안정화된 상태인 것을 특징으로 한다.

본 발명의 입체적으로 안정화된 에멀젼 또는 큐보좀의 조성물은 장기보관을 위하여 물이 제거된 상태의 에멀젼 전구체 또는 큐보좀 전구체 조성물 형태로 보관할 수 있다. 물을 제거하는 방법으로는 동결건조, 스프레이건조 (spray drying) 등의 통상적인 방법을 사용할 수 있다.

본 발명은 상기한 바와 같이 건조되어 안정한 상태에서 장기간 보관이 가능한 에멀젼 전구체 및 큐보좀 전구체 조성물을 제공한다.

우선, 본 발명은 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 30 중량부, 및 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부를 포함하는 장기보관 가능한 입체적으로 안정화된 에멀젼 전구체의 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 30 중량부, 한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량부, 및 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부를 포함하는 장기보관 가능한 입체적으로 안정화된 에멀젼 전구체 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 한 가지1 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량부 및 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부를 포함하는 입체적으로 안정화된 장기보관 가능한 큐보좀 전구체 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 6 중량부, 한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량부, 및 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부를 포함하는 장기보관 가능한 입체적으로 안정화된 큐보좀 전구체 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 파이탄트리올 0.1 내지 30 중량부 및 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부를 포함하는 입체적으로 안정화된 장기보관 가능한 큐보좀 전구체 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 6 중량부, 파이탄트리올 0.1 내지 30 중량부, 및 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부를 포함하는 장기보관 가능한 입체적으로 안정화된 큐보좀 전구체 조성물을 제공한다.

상기 기름으로서 트리글리세라이드, 요오드화 기름, 식물성 기름 및 동물성 기름으로 이루어진 군 중에서 한 가지 이상을 선택하여 사용하는 것이 바람직하다.

상기 트리글리세라이드는 포화 또는 불포화된 C₂-C₂₀인 모노글리세라이드계 화합물을 포함한다. 예컨대, 상기 트리글리세라이드는 트리아세틴 (triacetin), 트리부티린 (tributyrin), 트리카프로인 (tricaproin), 트리카프릴린 (tricaprylin), 트리카프린 (tricaprin), 및 트리올레인 (triolein) 등을 포함할 수 있다.

상기 요오드화 오일은 리파이오돌, 요오드화 양귀비씨 기름 (iodized poppy seed oil), 에티오돌 (ethiodol) 및 요오드화 대두유 (iodized soybean oil) 등을 포함할 수 있다.

상기 식물성 기름은 콩기름, 면실유, 올리브유, 양귀비씨 기름, 홍화씨기름 및 참기름 등을 포함할 수 있다.

상기 동물성 기름은 스쿠알란 및 스쿠알렌 등을 포함할 수 있다.

상기 모노글리세라이드계 화합물은 포화 또는 불포화된 C₁₀-C₂₂인 모노글리세라이드계 화합물을 포함하는 것이 바람직하다. 예컨대, 상기 모노글리세라이드계 화합물은 모노올레인(Monoolein), 모노팔미톨레인(Monopalmitolein), 모노미리스톨레인(Monomyristolein), 모노일레이딘(Monoelaidin), 모노이루이신(Monoerucin), 및 식물성 또는 동물성 기름의 트리글리세라이드로부터 반합성된 모노글리세라이드의 혼합물을 포함할 수 있으며, 보다 바람직하게는 모노올레인이다.

상기 생체적합성 친수성 고분자는 천연고분자(Natural polymer), 천연고분자로부터 변형된 고분자(Modified natural polymer) 및 합성고분자(Synthetic polymer)로 이루어진 군 중에서 선택된다.

상기 천연고분자는 키토산(chitosan), 그 염 및 그 유도체; 덱스트란 및 그 유도체; 아카시아 검(Acacia gum); 트라가칸친(Tragacanthin); 히알루론 산(Hyaluronic acid), 그 염 및 그 유도체; 펙틴(Pectin), 그 염 및 그 유도체; 알긴산(Alginic acid), 그 염 및 그 유도체; 아가(Agar); 갈락도만난(Galactomannans), 그 염 및 그 유도체; 잔탄(Xanthan), 그 염 및 그 유도체; 베타-사이클로덱스트린(Beta-Cyclodextrin), 그 염 및 그 유도체; 및 아밀로즈(Amylose, 수용성 전분), 그 염 및 그 유도체 등을 포함할 수 있다.

상기 천연고분자로부터 변형된 고분자는 글리콜 키토산(Glycol chitosan), 그 염 및 그 유도체; 카복시메틸 셀룰로오스(Carboxymethyl cellulose, CMC), 그 염 및 그 유도체; 히드록시에틸 셀룰로오스(Hydroxyethyl cellulose, HEC), 그 염 및 그 유도체; 히드록시프로필 셀룰로오스(Hydroxypropyl cellulose, HPC), 그 염 및 그 유도체; 히드록시프로필 메틸셀룰로오스(Hydroxypropyl methylcellulose, HPMC); 메틸셀룰로오스(Methylcellulose), 그 염 및 그 유도체; 셀룰로오스 아세테이트 프탈레이트(Cellulose acetate phthalate), 그 염 및 그 유도체; 젤라틴(Gelatin), 그 염 및 그 유도체; 및 프로타민 설페이트(Protamine sulfate) 등을 포함할 수 있다.

상기 합성고분자는 폴리(베타-히드록시에틸 메타아크릴레이트)[Poly(beta-hydroxyethyl methacrylate), PHEMA]; 폴리아크릴아미드(Polyacrylamide, PA); 폴리비닐 알코올(Polyvinyl alcohol, PVA); 폴리아크릴 산(Polyacrylic acid, PAA), 그 염 및 그 유도체; 폴리비닐피롤리돈(Polyvinylpyrrolidone, PVP); 폴리에틸렌 옥사이드(Polyethyleneoxide, PEO); 폴리에틸렌 글리콜(Polyethyleneglycol, PEG); 폴리(에틸렌옥시드-b-프로필렌 옥사이드(Poly(ethylene oxide-b-propylene oxide), PEO-PPO); 및 폴리라이신(Polylysine) 등을 포함할 수 있다.

상기 수용액은 친수성 고분자를 가용화시킬 수 있는 pH 3 내지 6의 산성수용액, pH 8 내지 10의 염기성 수용액, pH 5 내지 9의 완충용액 및 염 용액 등을 포함하는 군 중에서 선택되는 것이 바람직하다.

또한, 상기 조성물은 조성물의 총중량에 대하여 5 중량% 이하의 양으로 기타 첨가제를 추가적으로 함유할 수 있다. 예를 들어, 에멀젼 또는 큐보좀의 안정화를 위하여 통상적으로 사용하는 양보다 훨씬 적은 양의 유화제를 첨가할 수 있다. 본 발명의 에멀젼 또는 큐보좀 조성물은 여기에 포함된 생체적합성 친수성 고분자의 유화 및 안정화 작용에 의하여 유화제를 포함하지 않고도 입체적으로 안정화된 상태를 유지할 수 있으며, 유화제를 포함하는 경우에도 통상적으로 사용되는 양보다 현저하게 적은 양만으로도 충분히 입체적으로 안정화된 상태를 유지할 수 있다. 또한, 본 발명의 에멀젼 또는 큐보좀 조성물은 지방산, 지방산의 에스테르류, 지방산의 알코올류 등과 같은 통상적으로 사용 가능한 첨가제를 0 내지 5 중량%의 양으로 추가적으로 함유할 수 있다.

상기 유화제는 인지질, 스핑고지질(sphingolipid), 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제 및 담즙산(bile acid)으로 이루어진 군 중에서 선택되는 것이 바람직하다.

상기 유화제로 사용되는 인지질은 포스파티딜콜린(Phosphatidyl Choline) 유도체, 포스파티딜에탄올아민(Phosphatidyl ethanolamine) 유도체, 포스파티딜세린(Phosphatidyl serine) 유도체, 및 친수성 고분자가 결합된 지질(polymeric lipid)를 포함하는 것이 바람직하다.

상기 유화제로 사용되는 스핑고지질은 세라마이드계(ceramides), 세레브로사이드계(cerebroside) 및 스핑고마이엘린계(sphingomyelins)를 포함하는 것이 바람직하다.

상기 유화제로 사용되는 비이온성 계면 활성제는 폴록사머(Poloxamer; Pluronic; 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 공중합체), 솔비탄 에스테르(Sorbitan esters; Span), 폴리옥시에틸렌 솔비탄(polyoxyethylene sorbitans; Tween), 및 폴리옥시에틸렌 에테르(polyoxy ehtylene ethers; Brij)를 포함하는 것이 바람직하다.

상기 유화제로 사용되는 음이온성 계면 활성제는 포스파티딜세린 유도체, 포스파티딘산(Phosphatidic acid) 유도체 및 소듐 도데실 설페이트(sodium dodecyl sulfate, SDS)를 포함하는 것이 바람직하다.

상기 유화제로 사용되는 양이온성 계면 활성제는 1,2-디올레일-3-트리메틸암모늄 프로판(1,2-dioleyl-3-trimethylammonium propane), 디메틸디옥타데실암모늄 클로라이드(dimethyldioctadecylammonium chloride), N-[1-(1,2-디올레일옥시)프로필]-N,N,N-트리메틸암모늄 클로라이드(N-[1-(1,2-dioleyloxy)propyl]-N,N,N-trimethylammonium chloride), 1,2-디올레일-3-에틸포스포콜린(1,2-dioleyl-3-ethylphosphocholine), 및 3β-[N-[(N',N'-디메틸아미노)에탄]카바모일]콜레스테롤 (3β-[N-[(N',N'-dimethylamino)ethan]carbamoyl]chloresterol)을 포함하는 것이 바람직하다.

상기 유화제로 사용되는 담즙산은 콜린산(cholic acid), 그의 염 및 유도체; 데옥시콜린산(Deoxycholic acid), 그의 염 및 유도체; 리토콜린산(Lithocholic acid), 그의 염 및 유도체; 및 체노콜린산(Chenocholic acid), 그의 염 및 유도체를 포함하는 것이 바람직하다.

본 발명에서 사용된 생체적합성 수용성 고분자는 주로 자연계에 존재하는 고분자거나 이들로부터 반합성되는 것이므로, 입수가 용이할 뿐 아니라, 점막 흡착성이 있어 약물 전달 체계로 사용되기에 유리하다. 또한, 이러한 생체적합성 친수성 고분자를 포함하는 기름 조성물은 상기 고분자의 유화제 작용에 의하여 유화 과정이 매우 간단하다는 것을 또 다른 특징으로 한다. 본 발명에서 제안하는 생체적합성 친수성 고분자에 의해하여 입체적으로 (sterically) 안정화된 기름 조성물은 약물의 서방적 방출 (controlled release)을 유도할 수 있는 제형 제조에 활용될 수 있다. 또한, 많은 친수성 고분자가 생분해 가능하고(biodegradable), 생체내 흡수 가능하고(bioabsorbable), 생체적합하므로, 안전한 물질이다.

본 발명의 입체적으로 안정화된 에멀젼 또는 큐보좀의 조성물은 장기보관을 위하여 물이 제거된 상태에서 보관될 수 있다. 일반적으로 에멀젼을 건조하여 보관하기 위해서는 건조시 및 재분산시 안정성을 증대시키기 위하여 많은 양의 동결건조 보호제 또는 크리밍 억제 물질을 첨가하여야 한다. 그러나, 본 발명에서는 안정화제로 사용되는 생체적합성 친수성 고분자가 동결건조시 입자의 뭉침을 효과적으로 방지하므로 별도의 동결건조 보호제를 첨가하지 않아도 된다는 커다란 장점이 있다. 또한, 콜로이드 입자는 건조된 고분자에 흡착되어 존재하다가 재분산시키기 위하여 수용액을 첨가하면 쉽게 재분산된다.

또한, 본 발명은 입체적으로 안정화된 에멀젼의 조성물의 제조방법을 제공한다. 상기 제조방법은

1) 한 가지 이상의 기름과 임의적으로 모노글리세라이드 및/또는 유화제를 잘 섞어서 단일액상으로 만들고,

2) 물 또는 수용액에 생체적합성 친수성 고분자와 임의적으로 유화제를 혼합한 용액을 제조하고,

3) 상기 단계 1) 및 2)에서 얻어진 단일액상과 용액을 함께 섞은 후 분산시키는 단계를 포함한다.

이 때, 단계 1) 및 2)의 순서는 바뀌어도 무방하다. 상기 단계 1)에서 단일액상을 만들기 위해서 가온하거나 소니케이션 (sonication) 할 수 있다. 단계 3)에서 분산시키는 방법으로는 손으로 흔들어주거나, 볼텍싱(vortexing), 소니케이션(sonication), 미세유동화(microfluidization) 등이 있다.

또한, 본 발명은 상기 입체적으로 안정화된 큐보좀 조성물의 제조방법을 제공한다. 상기 제조방법은

1) 모노글리세라이드, 파이탄트리올, 모노글리세라이드/기름 혼합물 또는 파이탄트리올/기름 혼합물과 임의적으로 유화제를 잘 섞어 단일액상으로 만들고,

이 때, 단계 1)과 2)의 순서는 바뀌어도 무방하다. 상기 단계 1)에서 단일액상을 만들기 위하여 가온하거나 소니케이션할 수 있다. 상기 단계 3)에서 분산시키는 방법으로는 손으로 흔들어주거나, 볼텍싱, 소니케이션, 미세유동화 등이 있다.

본 발명의 입체적으로 안정화된 큐보좀 조성물의 또다른 제조방법은

1) 모노글리세라이드, 파이탄트리올, 모노글리세라이드/기름 혼합물 또는 파이탄트리올/기름 혼합물과 임의적으로 유화제를 수용액과 섞어서 L2상, 라멜라상 또는 큐빅상을 제조하고

2) 물 또는 수용액에 생체적합성 친수성 고분자와 임의적으로 유화제를 넣은 용액을 제조하고,

3) 상기 단계 1) 및 2)에서 얻어진 L2상, 라멜라상 또는 큐빅상과 용액을 함께 섞은 후 분산시키는 단계를 포함한다.

이 때, 단계 1)과 2)의 순서는 바뀌어도 무방하다. 상기 단계 1)에서 단일액상을 만들기 위하여 가온하거나 소니케이션할 수 있다. 상기 단계 1)에서 L2상, 라멜라상 또는 큐빅상을 만들기 위해서는 모노글리세라이드, 파이탄트리올, 모노글리세라이드/기름 혼합물 또는 파이탄트리올/기름 혼합물과 수용액을 혼합한다. 이 때 수용액의 양과 첨가물의 종류에 따라 L2상, 라멜라상 또는 큐빅상이 형성된다. 상기 단계 1)에서 L2상, 라멜라상 또는 큐빅상을 제조하기 위하여 주사기 및 삼방향 스톱-코르크(stop-cork)로 구성된 지질혼합기(Cheng A., Hummel B., Qiu H., Caffrey M., Chem Phys Lipids, 1998; 95; 11-20)를 사용하거나, 이와 유사한 혼합방법을 사용할 수 있다. 상기 단계 3)에서 분산시키는 방법으로는 손으로 흔들어주거나, 볼텍싱, 소니케이션, 미세유동화 등이 있다.

본 발명의 입체적으로 안정화된 에멀젼 전구체 조성물은 본 발명의 입체적으로 안정화된 에멀젼 조성물을 동결건조 또는 스프레이 건조 등의 통상의 방법에 의하여 건조시켜 제조할 수 있다.

본 발명의 입체적으로 안정화된 큐보좀 전구체 조성물은 본 발명의 입체적으로 안정화된 큐보좀 조성물을 동결건조 또는 스프레이 건조 등의 통상의 방법에 의하여 건조시켜 제조할 수 있다.

상기 에멀젼 또는 큐보좀 조성물 및 에멀전 전구체 또는 큐보좀 전구체의 제조방법에서 사용된 기름, 모노글리세라이드, 생체적합성 친수성 고분자, 유화제 및 수용액은 상기한 바와 같다.

또한, 본 발명은 약물 및 상기 입체적으로 안정화된 에멀젼 또는 큐보좀 조성물을 포함하는 제형을 제공한다.

보다 구체적으로, 본 발명은 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 30 중량%, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량%, 한 가지 이상의 약물 0.1 내지 10 중량%, 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 입체적으로 안정화된 에멀젼 제형을 제공한다.

또한, 본 발명은 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 30 중량%, 한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량%, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량%, 한 가지 이상의 약물 0.1 내지 10 중량%, 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 입체적으로 안정화된 에멀젼 제형을 제공한다.

또한, 본 발명은 한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량%, 생체 적합성 고분자 0.01 내지 5 중량%, 한 가지 이상의 약물 0.1 내지 10 중량%, 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 입체적으로 안정화된 큐보좀 제형을 제공한다.

또한, 본 발명은 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 6 중량%, 한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량%, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량%, 한 가지 이상의 약물 0.1 내지 10 중량%, 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 입체적으로 안정화된 큐보좀 제형을 제공한다.

또한, 본 발명은 파이탄트리올 0.1 내지 30 중량%, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량%, 한 가지 이상의 약물 0.1 내지 10 중량%, 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 입체적으로 안정화된 큐보좀 제형을 제공한다.

또한, 본 발명은 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 6 중량%, 파이탄트리올 0.1 내지 30 중량%, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량%, 한 가지 이상의 약물 0.1 내지 10 중량%, 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 입체적으로 안정화된 큐보좀 제형을 제공한다.

본 발명의 입체적으로 안정화된 에멀젼 또는 큐보좀의 제형은 장기보관을 위하여, 하기의 에멀젼 전구체 제형 또는 큐보좀 전구체 제형과 같이, 물이 제거된 상태에서 보관될 수 있다. 물을 제거하는 방법으로는 동결건조, 스프레이건조 (spray drying) 등의 통상적인 방법을 사용할 수 있다.

이와 관련하여, 본 발명은 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 30 중량부, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부, 및 한 가지 이상의 약물 0.1 내지 10 중량부를 포함하는 장기보관 가능한 입체적으로 안정화된 에멀젼 전구체 제형을 제공한다.

또한, 본 발명은 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 30 중량부, 한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량부, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부, 및 한 가지 이상의 약물 0.1 내지 10 중량부를 포함하는 장기보관 가능한 입체적으로 안정화된 에멀젼 전구체 제형을 제공한다.

또한, 본 발명은 한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량부, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부, 및 한 가지 이상의 약물 0.1 내지 10 중량부를 포함하는 장기보관 가능한 입체적으로 안정화된 큐보좀 전구체 제형을 제공한다.

또한, 본 발명은 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 6 중량부, 한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량부, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부, 및 한 가지 이상의 물 0.1 내지 10 중량부를 포함하는 장기보관 가능한 입체적으로 안정화된 큐보좀 전구체 제형을 제공한다.

또한, 본 발명은 파이탄트리올 0.1 내지 30 중량부, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부, 및 한 가지 이상의 약물 0.1 내지 10 중량부를 포함하는 장기보관 가능한 입체적으로 안정화된 큐보좀 전구체의 제형을 제공한다.

또한, 본 발명은 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 6 중량부, 파이탄트리올 0.1 내지 30 중량부, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부, 및 한 가지 이상의 물 0.1 내지 10 중량부를 포함하는 장기보관 가능한 입체적으로 안정화된 큐보좀 전구체 제형을 제공한다.

상기 기름은 트리글리세라이드, 요오드화 기름, 식물성 기름 및 동물성 기름으로 이루어진 군 중에서 한 가지 이상 선택되는 것이 바람직하다.

상기 트리글리세라이드는 포화 또는 불포화된 C₂-C₂₀인 모노글리세라이드계 화합물을 포함하는 것이 바람직하다. 예컨대, 상기 트리글리세라이드는 트리아세틴 (triacetin), 트리부티린 (tributyrin), 트리카프로인 (tricaproin), 트리카프릴린 (tricaprylin), 트리카프린 (tricaprin), 및 트리올레인 (triolein) 등을 포함할 수 있다.

상기 모노글리세라이드계 화합물은 포화 또는 불포화된 C₁₀-C₂₂의 모노글리세라이드계 화합물로 이루어진 군 중에서 한 가지 이상 선택되는 것이 바람직하다. 예컨대, 본 발명의 모노글리세라이드계 화합물은 모노올레인(Monoolein), 모노팔미톨레인(Monopalmitolein), 모노미리스톨레인(Monomyristolein), 모노일레이딘(Monoelaidin), 모노이루이신(Monoerucin), 및 식물성 또는 동물성 기름의 트리글리세라이드로부터 반합성된 모노글리세라이드의 혼합물 중에서 선택되며, 보다 바람직하게는, 모노올레인일 수 있다.

또한, 본 발명의 생체적합성 친수성 고분자는 천연고분자(Natural polymer), 천연고분자로부터 변형된 고분자(Modified natural polymer), 및 합성고분자(Synthetic polymer) 등으로 이루어진 군 주에서 선택될 수 있다.

상기 천연고분자는 키토산(chitosan), 그 염 및 그 유도체; 덱스트란 및 그 유도체; 아카시아 검(Acacia gum); 트라가칸친(Tragacanthin); 히알루론 산(Hyaluronic acid), 그 염 및 그 유도체; 펙틴(Pectin), 그 염 및 그 유도체; 알긴산(Alginic acid), 그 염 및 그 유도체; 아가(Agar), 갈락도만난(Galactomannans), 그 염 및 그 유도체; 잔탄(Xanthan), 그 염 및 그 유도체; 베타-사이클로덱스트린(Beta-Cyclodextrin), 그 염 및 그 유도체; 및 아밀로즈(Amylose, soluble starch), 그 염 및 그 유도체 등을 포함한다.

상기 천연고분자로부터 변형된 고분자는 글리콜 키토산(Glycol chitosan), 그 염 및 그 유도체; 카복시메틸 셀룰로오스(Carboxymethyl cellulose, CMC), 그 염 및 그 유도체; 히드록시에틸 셀룰로오스(Hydroxyethyl cellulose, HEC), 그 염 및 그 유도체; 히드록시프로필 셀룰로오스(Hydroxypropyl cellulose, HPC), 그 염 및 그 유도체; 히드록시프로필 메틸셀룰로오스 (Hydroxypropyl methylcellulose, HPMC); 메틸 셀룰로오스 (Methylcellulose), 그 염 및 그 유도체; 셀룰로오스 아세테이트 프탈레이트(Cellulose acetate phthalate), 그 염 및 그 유도체; 젤라틴(Gelatin), 그 염 및 그 유도체; 및 프로타민 설페이트(Protamine sulfate) 등을 포함한다.

상기 합성고분자는 폴리(베타-히드록시에틸 메타아크릴레이트)[Poly(beta-hydroxyethyl methacrylate, PHEMA]; 폴리아크릴아미드(Polyacrylamide, PA); 폴리비닐 알코올(Polyvinyl alcohol, PVA); 폴리아크릴 산(Polyacrylic acid, PAA), 그 염 및 그 유도체; 폴리비닐피롤리돈(Polyvinylpyrrolidone, PVP); 폴리에틸렌 옥사이드(Polyethyleneoxide, PEO); 폴리에틸렌 글리콜(Polyethyleneglycol, PEG); 폴리(에틸렌옥사이드-b-프로필렌 옥사이드[Poly(ethylene oxide-b-propylene oxide), PEO-PPO]; 및 폴리라이신(Polylysine) 등을 포함한다.

상기 약물은 단백질, 항바이러스제, 스테로이드계 소염제 (SAID), 비스테로이드계 소염제(NSAID), 항생제, 항진균제, 비타민, 호르몬, 프로스타글란딘(prostaglandin), 프로스타사이클린(prostacyclin), 항암제, 항대사제, 축동제(mitotics), 콜린작동성 약물, 아드레날린 길항제(adrenaline antagonist), 항경련제, 항불안제, 정온제, 항우울제, 마취제, 진통제, 동화성 스테로이드제, 에스트로겐(estrogen), 프로게스테론(progesteron), 글리코사미노글리칸(glycosaminoglycan), 폴리뉴클레오타이드(polynucleotide), P-당단백질 억제제, 간대사 저해제, 면역 억제제 또는 면역 촉진제 등일 수 있다.

상기 단백질은 기능성 펩타이드(functional peptide); 부신피질 호르몬(adrenocorticotropic hormone, ACTH)과 절편(fragment); 안지오텐신(angiotensin)과 그의 관련 펩타이드; 항체 절편(antibody fragment); 항원(antigen)과 그의 절편; 심방 나트륨 배설촉진 펩타이드(atrial natriuretic peptide); 생부착성 펩타이드(bioadhesive peptide); 브래디키닌(Bradykinin)과 그의 관련 펩타이드; 칼시토닌(calcitonin)과 그의 관련 펩타이드; 세포 표면 수용체 단백질 절편(cell surface receptor protein fragment); 화학주성 펩타이드(chemotactic peptide); 시클로스포린류(cyclosporins); 사이토카인류(cytokines); 디노르핀(Dynorphin)과 그의 관련 펩타이드; 엔돌핀(endorphin)과 β-리도트로핀 절편 (β-lidotropin fragment); 엔케팔린(enkephalin)과 그의 관련 단백질; 효소활성 억제제(enzyme inhibitors); 피브로넥틴 절편(fibronectin fragment)과 그의 관련 펩타이드; 위장 펩타이드(gastrointestinal peptide); 성장호르몬 분비 펩타이드(growth hormone releasing peptide); 면역자극 펩타이드(immunostimulating peptide); 인슐린 (insulin)과 인슐린-유사 성장인자(insulin-like growth factor); 인터루킨류(interleukins), 황체형성 호르몬 분비 호르몬(luthenizing hormone releasing hormone, LHRH)과 그의 관련 펩타이드; 멜라닌세포 자극 호르몬(melanocyte stimulating hormone)과 그의 관련 펩타이드; 핵 전달신호(neuclear localization signal) 관련 펩타이드; 뉴로텐신(neurotensin)과 그의 관련 펩타이드; 신경전달물질 펩타이드(neurotransmitter peptide); 아편양제제 펩타이드(opioid peptide); 옥시토신(oxytocin); 바소프레신(vasopressin)과 그의 관련 펩타이드; 부신피질 호르몬(parathyroid hormone)과 절편; 단백질 키나아제(ptotein kinase) 관련 펩타이드; 소마토스타틴(somatostatin)과 그의 관련 펩타이드; 기질 P(substance P)와 그의 관련 펩타이드; 전이 성장인자(transforming growth factor, TGF) 및 그의 관련 펩타이드; 종양 괴사 인자 절편(tumor necrosis factor fragment); 면역글로블린 (immunoglobulin)류, 안지오제닌 (angiogenin), 골형성 단백질 (bone morphogenic protein), 케모카인 (chemokine), 콜로니 자극 인자 (colony stimulating factor, CSF)와 관련 단백질, 성장인자류(growth factors), 인터페론(interferon), 인터루킨(interleukin), 렙틴(leptin), 소아마비 억제인자(leukemia inhibitory factor), 간세포 인자류(stem cell factors) 및 독소(toxin) 또는 톡소이드(toxoid) 등을 포함한다. 이 때, 상기의 관련 펩타이드와 관련 단백질은 아미노산의 종류가 약간씩 다르면서 구조나 기능이 유사한 펩타이드 및 단백질을 의미한다.

상기 약물로 사용되는 펩타이드 중 인슐린은 소 췌장 인슐린(bovine pancreatic insulin), 인간 재조합(human recombinant) 인슐린, 돼지 췌장 (porcine pancreatic) 인슐린, arg-인슐린(arg-insulin), 인슐린-바이오틴(insulin-biotin), 인슐린-FITC(insulin-FITC), 리스프로(LysPro, 미국 Eli Lilly), 및 폴리에틸렌 글리콜-인슐린(polyethylene glycol-insulin, PEG-insulin)로 이루어진 군 중에서 선택되는 것이 바람직하다.

또한, 상기 기능성 펩타이드 (functional peptide)는 안지오스타틴(angiostatin)을 포함한 항암성(anticancer) 펩타이드, 항고혈압(antihypertension) 펩타이드, 항혈전(antiblood-clotting) 펩타이드, 및 항진균성(antimicrobial) 펩타이드 등을 포함할 수 있다.

상기 항암제는 독소루비신, 시스플라틴, 카보플라틴, 카무스틴 (BCNU), 다카바진, 에도포사이드, 플루오로우라실 (5-FU) 또는 파클리탁셀 및 그 유도체 등이 사용 될 수 있다. 상기 파클리탁셀 유도체로서 파클리탁셀, 도시탁셀, 브로모탁셀, 탁소티어 등을 포함할 수 있다.

상기 P-당단백질 억제제는 신코닌(cinchonin), 칼슘 채널 저해제, 칼모듈린 길항제, 빈카 알칼로이드(Vinca alcaloid), 항부정맥제, 스테로이드, 항고혈압제, 구충제, 및 면역억제제 등을 포함할 수 있다. 이 때, 상기 칼슘 채널 저해제는 베라파밀(verapamil), 니페디핀(nifedipine), 니카디핀(nicardipine), 및 니트렌디핀(nitrendipine)과 같는 디히드로피리딘(dihydropyridines) 등을 포함할 수 있다. 상기 칼모듈린 길항제는 트리플루오로페라진(trifluoroperazine) 등을 포함할 수 있다. 상기 항고혈압제는 레세핀(reserpine) 등을 포함할 수 있다. 상기 빈카 알칼로이드는 빈크리스틴(vincristine), 및 빈블라스틴(vinblastine) 등을 포함할 수 있다. 상기 스테로이드는 프로게스테론 등을 포함할 수 있다. 상기 항부정맥제는 아미오다론(amiodarone), 및 퀴니딘(quinidine) 등을 포함할 수 있다. 상기 구충제는 퀴나크린(quinacrine), 및 퀴닌(quinine) 등을 포함할 수 있다. 상기 면역억제제는 사이클로스포린류, 스타우로스포린(staurosporine), 및 태크로리머스(tacrolimus) 등을 포함할 수 있다.

상기 간 대사 저해제는 사이클로스포린 A, 독소루비신(doxorubicin), 에토포사이드(etoposide, VP-16) 또는 시스플라틴(cisplatin)과 같은 항암제, 베라파밀(verapamil), 및 타모시펜(tamoxifen) 등을 포함할 수 있다.

또한, 상기 제형은 조성물의 총중량에 대하여 5 중량% 이하의 양으로 기타 첨가제를 추가적으로 함유할 수 있다. 예를 들어, 에멀젼 또는 큐보좀의 안정화를 위하여 통상적으로 사용하는 양보다 훨씬 적은 양의 유화제를 첨가할 수 있다. 또한, 지방산, 지방산의 에스테르류, 지방산의 알코올류 등과 같은 통상적으로 사용 가능한 첨가제를 0 내지 5 중량% 함유시킬 수 있다.

상기 유화제로는 인지질, 스핑고지질 (sphingolipid), 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제 및 담즙산 (bile acid) 중에서 선택된 것을 사용하는 것이 바람직하다.

상기 유화제로 사용되는 인지질은 포스파티딜콜린 (Phosphatidyl Choline) 유도체, 포스파티딜에탄올아민 (Phosphatidyl ethanolamine) 유도체, 포스파티딜세린 (Phosphatidyl serine) 유도체, 및 친수성 고분자가 결합된 지질 (polymeric lipid)로 구성된 군 중에서 선택되는 것이 바람직하다.

상기 유화제로 사용되는 스핑고지질은 세라마이드계(ceramides), 세레브로사이드계(cerebroside), 및 스핑고마이엘린계(sphingomyelins)로 구성된 군 중에서 선택되는 것이 바람직하다.

상기 유화제로 사용되는 비이온성 계면 활성제는 폴록사머(Poloxamer; Pluronic; 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 공중합체), 솔비탄 에스테르(Sorbitan esters; Span), 폴리옥시에틸렌 솔비탄(polyoxyethylene sorbitans; Tween), 및 폴리옥시에틸렌 에테르 (polyoxy ehtylene ethers; Brij)로 구성된 군 중에서 선택되는 것이 바람직하다.

상기 유화제로 사용되는 음이온성 계면 활성제는 포스파티딜세린 유도체, 포스파티딘산 (Phosphatidic acid) 유도체, 및 소듐 도데실 설페이트 (sodium dodecyl sulfate, SDS)로 구성된 군 중에서 선택되는 것이 바람직하다.

상기 유화제로 사용되는 양이온성 계면 활성제는 1,2-디올레일-3-트리메틸암모늄 프로판(1,2-dioleyl-3-trimethylammonium propane), 디메틸디옥타데실암모늄 클로라이드(dimethyldioctadecylammonium chloride), N-[1-(1,2-디올레일옥시)프로필]-N,N,N-트리메틸암모늄 클로라이드 (N-[1-(1,2-dioleyloxy)propyl]-N,N,N-trimethylammonium chloride), 1,2-디올레일-3-에틸포스포콜린 (1,2-dioleyl-3-ethylphosphocholine), 및 3β-[N-[(N',N'-디메틸아미노)에탄]카바모일]콜레스테롤 (3β-[N-[(N',N'-dimethylamino)ethan]carbamoyl]chloresterol)로 구성된 군 중에서 선택되는 것이 바람직하다.

상기 유화제로 사용되는 담즙산은 콜린산 (cholic acid)과 그의 염 및 유도체, 데옥시콜린산 (Deoxycholic acid)과 그의 염 및 유도체, 리토콜린산 (Lithocholic acid)과 그의 염 및 유도체, 및 체노콜린산 (Chenocholic acid)과 그의 염 및 유도체로 구성된 군 중에서 선택되는 것이 바람직하다.

상기 수용액은 친수성 고분자를 가용화시킬 수 있는 pH 3 내지 6의 산성수용액, pH 8 내지 10의 염기성 수용액, pH 5 내지 9의 완충용액 및 염 용액 등으로 이루어진 군 중에서 선택된다.

또한, 본 발명은 상기 입체적으로 안정화된 에멀젼 제형의 제조방법을 제공한다. 상기 제조방법은

1) 한 가지 이상의 기름, 약물과 임의적으로 모노글리세라이드 및/또는 유화제를 잘 석어서 단일액상으로 만들고,

2) 물 또는 수용액에 생체적합성 친수성 고분자와 임의적으로 유화제를 혼합하여 용액을 제조하고,

3) 상기 단계 1) 및 2)에서 얻은 단일액상과 용액을 함께 섞은 후 분산시키는 단계를 포함한다.

이때, 단계 1)과 2)의 순서는 바뀌어도 무방하다. 단계 1)에서 단일액상을 만들기 위해서 가온하거나 소니케이션 할 수 있다. 단계 3)에서 분산시키는 방법으로는 손으로 흔들어주거나, 볼텍싱, 소니케이션, 미세유동화 등이 있다.

또한, 본 발명은 입체적으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조방법을 제공한다. 상기 제조방법은

1) 모노글리세라이드, 파이탄트리올, 모노글리세라이드/기름 혼합물 또는 파이탄트리올/기름 혼합물, 약물과 임의적으로 유화제를 잘 섞어서 단일액상으로 만들고,

3) 상기 단계 1)과 2)에서 얻어진 단일액상과 용액을 함께 섞은 후 분산시키는 단계를 포함한다.

이때, 단계 1)과 2)의 순서는 바뀌어도 무방하다. 단계 1)에서 단일액상을 만들기 위해서 가온하거나 소니케이션할 수 있다. 단계 3)에서 분산시키는 방법으로는 손으로 흔들어주거나, 볼텍싱, 소니케이션, 미세유동화 등이 있다.

본 발명의 입체적으로 안정화된 큐보좀의 제형 또 다른 제조방법은

1) 모노글리세라이드, 파이탄트리올, 모노글리세라이드/기름 혼합물 또는 파이탄트리올/기름 혼합물, 임의적으로 유화제를 수용액과 섞어서 L2상, 라멜라상 또는 큐빅상을 제조하고

2) 물 또는 수용액에 생체적합성 친수성 고분자와 임의적으로 유화제를 넣은 수용액을 제조하고,

3) 상기 단계 1)과 2)에서 얻어진 L2상, 라멜라상 또는 큐빅상과 액상을 함께 섞은 후 분산시키는 단계를 포함한다.

이 때, 단계 1)과 2)의 순서는 바뀌어도 무방하다. 단계 1)에서 L2상, 라멜라상 또는 큐빅상을 제조하는 방법으로는 주사기 및 삼방향 스톱-코르크로 구성된 지질혼합기를 사용하거나, 이와 유사한 혼합방법을 사용할 수 있다. 상기 단계 1)의 약물은 지용성일 경우 지질에, 수용성일 경우 수용액과 섞는다. 상기 단계 1)에서 L2상, 라멜라상 또는 큐빅상을 만들기 위해서 모노글리세라이드, 파이탄트리올, 모노글리세라이드/기름 혼합물 또는 파이탄트리올/기름 혼합물과 수용액을 혼합한다. 이 때, 수용액의 양과 첨가물의 종류에 따라 L2상, 라멜라상 또는 큐빅상이 형성된다. 단계 3)에서 분산시키는 방법으로는 손으로 흔들어주거나, 볼텍싱, 소니케이션, 미세유동화 등이 있다.

본 발명의 입체적으로 안정화된 에멀젼 전구체 또는 큐보좀 전구체의 제형은 에멀젼 제형 또는 큐보좀 제형을 동결건조하거나 스프레이 건조 등의 통상의 방법을 이용하여 제조할 수 있다.

본 발명에 의한 조성물 및 제형은 유화제가 없거나 소량만 존재할 경우에도 효과적으로 콜로이드계가 형성되며, 에멀젼 또는 큐보좀의 조성물 및 제형의 건조 후에도 이들이 액상이 아닌 고상으로 존재하도록 도와주며, 수용성 고분자가 콜로이드계의 재분산을 도와주기 때문에 산업상 이용가능성이 높아진다. 또한 생체적합성 수용성 고분자는 점막흡착성이 우수하므로 세포내로의 흡수를 도와줄 수 있다는 장점이 있다.

본 발명에서 사용되는 생체적합성 친수성 고분자 중 일부는 쉽게 가교되는 성질을 가지고 있다. 예를 들어, 키토산은 설페이트 이온, 트리폴리포스페이트 (TPP) 등, 알긴산염, 히아룰론산 염 등은 칼슘이온 등의 생체적합성 이온들을 이용하여 가교할 수 있다. 따라서, 본 발명의 조성물 또는 제형은 고분자를 가교하여 제조될 수 있는데, 가교 후 건조하면 파우더와 같은 물성이 더 크게 나타나므로 고형화에 도움을 준다. 또한 생체내에서 과량의 체액에 의해 희석되면 가교제가 희석되어 본래의 상태로 돌아가게 되므로 콜로이드계는 다시 분산되게 된다.

큐보좀의 경우 약물의 생체이용율을 높이는 장점이 있음에도 불구하고 실용화하기 어려운 결정적인 문제점을 가지고 있다. 즉, 큐보좀은 과량의 수용액에 분산된 계이므로 상기 제형들의 경우 경구투여를 할 경우 과량의 물을 함께 투여해야 한다는 것이다. 따라서, 상기 약물전달체계들의 경우 물을 제거하여 제조한 분말형태가 가장 투여하기 적합한 제형이 될 수 있다. 그러나, 큐보좀의 분산액은 물을 제거하면 반고상 또는 액상이 되고 항응집제(anticaking agent) 없이는 재분산이 어려워 체내에서 장운동에 의해 자발적으로 분산되기 어려워지므로 약물전달효율이 감소한다. 따라서, 본 발명은 약물을 가용화할 수 있으며, 생체적합하고, 장내에서 장액에 의하여 수 마이크로미터 크기로 분산되며, 점막흡착성이 강하여 약물의 생체이용율을 높일 수 있는 기존 약물전달체계의 장점은 모두 가지면서, 분말 상태인 조성물 또는 제형을 제공하므로, 산업화의 가능성이 크다고 할 수 있다.

이하, 본 발명을 실시예에 의하여 상세히 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 설명하기 위한 것일 뿐이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다.

실험예 1. 분자량이 서로 다른 키토산 및 그 수용액의 제조

분자량이 >100 kDa인 키토산 (탈아세틸화 정도 = 95 %; 신영 케미칼, Korea)을 2 중량 %의 초산 용액에서 아질산 나트륨 (NaNO₂)과 반응시켜 가수분해하여 저분자량의 키토산을 제조하였다. 키토산의 분자량은 키토산 수용액의 점성도를 측정하여 결정했다. 점성도는 오스트발트 (Ostwald) 점성도계 (viscometer)로 측정했고 점성도를 키토산 농도에 대해 도표화하여 고유점성도 (intrinsic viscosity) 값을 구하여 키토산의 분자량을 결정하였다 (Zhang H.; Neau SH.; Biomaterials, 2001; 22; 1653-1658.; Chen RH, Hwa HD,; Carbohydr. Polym.; 1996; 29; 253.). 이와 같이 얻어진 키토산의 고유 점성도와 분자량을 다음의 표 1에 나타내었다.

고유 점성도 (mL/g)	키토산 분자량 (kDa)
8.1	3
21	11
40	22
59	35
112	74
145	100

키토산 수용액은 분자량이 다른 각각의 키토산을 수용액에 넣은 후 교반하여 제조하였다. 분자량이 20 kDa 이상인 경우 수용액은 pH 4.8 이하인 소듐 아세테이트 완충용액 또는 2 % (v/v) 이하의 초산용액을 사용하였으며, 10 kDa 이하인 경우에는 물을 사용하였다.

실시예 1. 고분자 수용액으로 안정화된 식물성 기름 에멀젼 조성물의 제조 1

콩기름 (soybean oil, Sigma Chemical Company) 100 μL를 3 %의 키토산 (분자량 22 kDa) 수용액 900 μL에 넣은 후 2분간 소니케이션하거나 약 15 초간 볼텍스 (vortex)하여 유화시켜 콩기름 10 중량 %, 키토산 2.7 중량 %인 지방 에멀젼을 제조하였다. 레이저 준탄성 광산란 방법 (Laser Quasi-elastic light scattering method, Brookhaven Instruments, USA)으로 에멀젼의 입자 크기를 측정하였다. 입자의 평균 지름은 소니케이션 및 볼텍싱 한 경우 각각 50 nm, 526 nm였다.

비교예 1. 고분자 수용액을 첨가하지 않은 식물성 기름 에멀젼 조성물의 제조 1

키토산 수용액 대신에 물을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 에멀젼을 제조하였다. 소니케이션 및 볼텍싱 할 경우 모두 상 분리가 수 분 내에 일어나는 것을 육안 및 현미경으로 확인하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 입자크기를 측정하였지만, 상분리가 일어났기 때문에 입자 크기를 측정할 수 없었다.

실시예 2. 고분자 수용액으로 안정화된 식물성 기름 에멀젼 조성물의 제조 2

분자량 22 kDa인 키토산 대신에 분자량 11 kDa 및 100 kDa인 키토산을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 에멀젼을 제조하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 입자크기를 측정한 결과 볼텍싱 한 경우 입자의 평균 지름은 각각 526 nm, 909 nm 였다.

비교예 2. 고분자 수용액을 첨가하지 않은 식물성 기름 에멀젼 조성물의 제조 2

키토산 수용액 대신에 물을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 2와동일한 방법으로 에멀젼을 제조하였다. 소니케이션 및 볼텍싱 할 경우 모두 상 분리가 수 분 내에 일어나는 것을 육안 및 현미경으로 확인하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 입자크기를 측정하였지만, 상분리가 일어났기 때문에 입자 크기를 측정할 수 없었다.

실시예 3. 고분자 수용액으로 안정화된 식물성 기름 에멀젼 조성물의 제조 3

키토산 대신에 알긴산염 (Yakuri Pure Chemicals, Japan) 또는 폴리에틸렌 옥사이드 (분자량 35 kDa; Fluka)를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 에멀젼을 제조하였다. 볼텍싱하는 경우 입자의 평균 지름을 표2에서 정리하여 보여준다. 반면, 키토산 수용액 대신 물을 사용하는 경우에는 전혀 분산되지 않았다.

고분자	기름:키토산 중량%	입자크기 (nm)
알긴산염	10 : 0.9	1690
폴리에틸렌 옥사이드	10 : 0.9	1276

실시예 4. 고분자 수용액으로 안정화된 식물성 기름 에멀젼 조성물의 제조 4

콩기름 대신에 참기름 (sesame seed oil, Sigma) 또는 트리카프로인 (Sigma)을 사용하고, 분자량 22 kDa인 키토산 대신 분자량 11 kDa인 키토산을 사용하고, 조성비가 달라진 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 에멀젼을 제조하였다. 볼텍싱하는 경우의 입자의 평균 지름을 표 3에서 나타내었다. 키토산 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 전혀 분산되지 않았다.

고분자	기름:키토산 중량%	입자크기 (nm)
참기름	10 : 2.7	2665
트리카프로인	1 : 2.9	1531

실시예 5. 고분자 수용액으로 안정화된 식물성 기름 에멀젼 조성물의 제조 5

콩기름대신에 트리카프릴린 (Sigma)을 사용하고, 분자량 22 kDa인 키토산 대신 분자량 35 kDa인 키토산을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 에멀젼을 제조하였다. 볼텍싱하는 경우의 입자의 평균 지름은 1137 nm 였다. 키토산 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 전혀 분산되지 않았다.

실시예 6. 고분자 수용액으로 안정화된 식물성 기름 에멀젼 조성물의 제조 6

키토산 대신에 알긴산염을 사용하고, 콩기름 대신 참기름을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 에멀젼을 제조하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 입자크기를 측정한 결과 볼텍싱 하는 경우 입자의 평균 지름은 각각 1290 nm 였다.

실시예 7. 유화제가 있을 때 고분자 수용액으로 안정화된 식물성 기름 에멀젼 조성물의 제조 1

콩기름과 유화제 (트윈 80 또는 DMTAP; 1,2-dimyristoyl-3- trimethylammonium propane, Sigma)를 섞은 혼합물 100 μL를 분자량이 서로 다른 분자량을 가진 3 %의 키토산 수용액 900 μL에 넣은 후 실시예 1과 같은 방법으로 유화시켰다. 볼텍싱하는 경우 입자의 평균 지름을 표 4에 나타내었다. 키토산 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 전혀 분산되지 않았다.

키토산의 분자량	유화제	기름:키토산:유화제 중량%	입자크기 (nm)
11	트윈 80	10 : 2.7 : 0.3	666
22	트윈 80	10 : 2.64 : 0.3	566
22	DMTAP	10 : 2.64 : 0.2	1235
100	트윈 80	10 : 2.64 : 0.3	870
100	DMTAP	10 : 2.64 : 0.2	1143

실시예 8. 유화제가 있을 때 고분자 수용액으로 안정화된 식물성 기름 에멀젼 조성물의 제조 2

콩기름과 트윈 80을 섞은 혼합물 100 μL를 1 % 또는 0.11 %의 폴리에틸렌 옥사이드 (분자량 35 kDa) 수용액 900 μL에 넣은 후 실시예 1과 같은 방법으로 유화시켰다. 볼텍싱하는 경우 입자의 평균 지름을 표 5에 나타내었다. 폴리에틸렌 옥사이드 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 전혀 분산되지 않았다.

콩기름:폴리에틸렌 옥사이드:트윈 80 중량%	입자크기 (nm)
10 : 0.9 : 0.3	647
10 : 0.1 : 0.3	910

실시예 9. 유화제가 있을 때 고분자 수용액으로 안정화된 식물성 기름 에멀젼 조성물의 제조 3

콩기름과 트윈 80을 섞은 혼합물 100 μL를 서로 다른 종류의 1 % 고분자 수용액 900 μL에 넣은 후 실시예 1과 같은 방법으로 유화시켰다. 볼텍싱한 경우 입자의 평균 지름을 표 6에 나타내었다. 고분자 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 전혀 분산되지 않았다.

고분자	기름:고분자:유화제 중량%	입자크기 (nm)
히알루론산염	10 : 0.9 : 0.3	651
글리콜 키토산	10 : 0.9 : 0.3	614
알긴산염	10 : 0.8 : 0.3	1966

실시예 10. 유화제가 있을 때 고분자 수용액으로 안정화된 식물성 기름 에멀젼 조성물의 제조 4

참기름과 서로 다른 유화제를 섞은 혼합물 100 μL를 서로 다른 고분자 수용액 900 μL에 넣은 후 실시예 1과 같은 방법으로 유화시켰다. 볼텍싱한 경우 입자의 평균 지름을 표 7에 나타내었다. 고분자 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 전혀 분산되지 않았다.

고분자	유화제	기름:고분자:유화제 중량%	입자크기 (nm)
알긴산염	트윈 80	10 : 0.8 : 0.3	1191
키토산 100 kDa	트윈 80	10 : 2.64 : 0.3	964
키토산 11 kDa	트윈 80	10 : 2.64 : 0.3	449
알긴산염	DMTAP	10 : 0.8 : 0.1	1881
키토산 11 kDa	DMTAP	10 : 2.64 : 0.3	1274

실시예 11. 유화제가 있을 때 고분자 수용액으로 안정화된 트리클리세라이드 기름 에멀젼 조성물의 제조 5

여러 종류의 트리글리세라이드와 서로 다른 유화제를 섞은 혼합물 100 μL를 서로 다른 종류 및 농도의 고분자 수용액 900 μL에 넣은 후 실시예 1과 같은 방법으로 유화시켰다. 볼텍싱한 경우 입자의 평균 지름을 표8에 나타내었다. 고분자 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 전혀 분산되지 않았다.

기름	고분자	유화제	기름:고분자:유화제 (중량%)	입자크기 (nm)
트리카프로인	키토산 11 kDa	트윈 80	1:2.9:0.1	1109
트리카프린	키토산 11 kDa	트윈 80	10:2.64:0.5	1384
트리카프린	키토산 11 kDa	DMTAP	10:2.64:0.5	433
트리카프릴린	키토산 11 kDa	트윈 80	10:2.64:0.5	469
트리카프릴린	키토산 11 kDa	DMTAP	10:2.64:0.5	417
트리카프릴린	키토산 35 kDa	DMTAP	1:2.97:0.1	2461
트리카프릴린	폴리에틸렌 옥사이드 35 kDa	트윈 80	10:0.9:0.3	502
트리카프릴린	폴리에틸렌 옥사이드 35 kDa	DMTAP	10:0.9:0.5	1153
트리카프릴린	폴리에틸렌 옥사이드 8 kDa	DMTAP	1:4.95:0.1	873

실시예 12. 유화제가 있을 때 고분자 수용액으로 안정화된 동물성 기름 에멀젼 조성물의 제조 1

동물성 기름인 스쿠알렌 또는 스쿠알란과 서로 다른 유화제를 섞은 혼합물 100 μL를 3 % 키토산 (분자량 11 kDa) 수용액 900 μL에 넣은 후 실시예 1과 같은 방법으로 유화시켰다. 볼텍싱한 경우 입자의 평균 지름을 표 9에 나타내었다. 고분자 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 전혀 분산되지 않았다.

기름	유화제	기름:고분자:유화제 (중량%)	입자크기 (nm)
스쿠알란	DMTAP	10 : 2.64 : 0.5	726
스쿠알렌	트윈 80	10 : 2.64 : 0.5	614
스쿠알렌	DMTAP	10 : 2.64 : 0.2	299

실시예 13. 고분자 수용액으로 안정화된 혼합 기름 에멀젼 조성물의 제조 1

트리카프린과 모노올레인을 부피비로 1:2로 섞은 혼합기름 10 μL를 0.1, 0.5, 1.5 % 키토산 (분자량 3 kDa) 수용액 990 μL에 넣은 후 실시예 1과 같은 방법으로 유화시켰다. 볼텍싱한 경우 입자의 평균 지름을 표 10에 나타내었다. 고분자 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 평균 입자 크기 2000 nm 내외의 분산계를 이루지만, 고분자 용액에 분산시킬 경우와는 달리 불안정하여 2 ~ 3 시간 후에는 상분리가 일어났다.

기름:키토산 중량%	입자크기 (nm)
1 : 0.1	1083
1 : 0.5	664
1 : 1.5	567

실시예 14. 고분자 수용액으로 안정화된 혼합 기름 에멀젼 조성물의 제조 2

0.75 % 및 1 % 키토산 (분자량 35 kDa) 수용액 990 μL을 사용한 것을 제외하고는 실시예 13과 같은 방법으로 유화시켰다. 볼텍싱한 경우 입자의 평균 지름을 표 11에 나타내었다. 고분자 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 평균 입자 크기 2000 nm 내외의 분산계를 이루지만, 고분자용액에 분산시킬 경우와는 달리 불안정하여 2 ~ 3 시간 후에는 상분리가 일어났다.

기름:키토산 중량%	입자크기 (nm)
1 : 1	870
1 : 0.75	391

실시예 15. 고분자 수용액으로 안정화된 혼합 기름 에멀젼 조성물의 제조 3

0.1 % 및 0.5 % 키토산 (분자량 74 kDa) 수용액 990 μL을 사용한 것을 제외하고는 실시예 13과 같은 방법으로 유화시켰다. 볼텍싱한 경우 입자의 평균 지름을 표 12에 나타내었다. 고분자 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 평균 입자 크기 2000 nm 내외의 분산계를 이루지만, 고분자용액에 분산시킬 경우와는 달리 불안정하여 2 ~ 3 시간 후에는 상분리가 일어났다.

기름:키토산 중량%	입자크기 (nm)
1 : 0.1	652
1 : 0.5	375

실시예 16. 고분자 수용액으로 안정화된 혼합 기름 에멀젼 조성물의 제조 4

트리카프린 대신 트리카프릴린을 사용하고 3 % 키토산 (분자량 35 kDa) 수용액 990 μL을 사용한 것을 제외하고는 실시예 13과 같은 방법으로 유화시켰다. 입자의 평균 지름이 1527 nm인 안정한 분산계를 이루었다. 고분자 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 평균 입자 크기 530 nm 내외의 분산계를 이루지만, 고분자용액에 분산시킬 경우와는 달리 불안정하여 2 ~ 3 시간 후에는 상분리가 일어났다.

실시예 17. 고분자 수용액으로 안정화된 혼합 기름 에멀젼 조성물의 제조 5

트리카프린 대신 트리카프로인 30 μL를 사용하고 3 % 키토산 (분자량 35 kDa) 수용액 970 μL을 사용한 것을 제외하고는 실시예 13과 같은 방법으로 유화시켰다. 입자의 평균 지름이 1790 nm인 안정한 분산계를 이루었다. 고분자 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 평균 입자 크기 1600 nm 내외의 분산계를 이루지만, 고분자용액에 분산시킬 경우와는 달리 불안정하여 2 ~ 3 시간 후에는 상분리가 일어났다.

실시예 18. 고분자 수용액으로 안정화된 혼합 기름 에멀젼 조성물의 제조 6

0.3, 0.9 % 키토산 (분자량 11 kDa) 수용액 990 μL을 사용한 것을 제외하고는 실시예 13과 같은 방법으로 유화시켰다. 볼텍싱한 경우 입자의 평균 지름을 표 13에 나타내었다. 고분자 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 평균 입자 크기 1500 nm 내외의 분산계를 이루지만, 고분자용액에 분산시킬 경우와는 달리 불안정하여 2 ~ 3 시간 후에는 상분리가 일어났다.

기름:키토산 중량%	입자크기 (nm)
1 : 0.3	556
1 : 0.9	392

실시예 19. 고분자 수용액으로 안정화된 혼합 기름 에멀젼 조성물의 제조 7

0.033 % 알긴산염, 1 % 폴리에틸렌옥사이드 (분자량 35 kDa) 수용액 990 μL을 사용한 것을 제외하고는 실시예 13과 같은 방법으로 유화시켰다. 볼텍싱한 경우 입자의 평균 지름을 표 14에 나타내었다. 고분자 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 평균 입자 크기 2000 nm 내외의 분산계를 이루지만, 고분자용액에 분산시킬 경우와는 달리 불안정하여 2 ~ 3 시간 후에는 상분리가 일어났다.

고분자	기름:키토산 중량%	입자크기 (nm)
알긴산염	1 : 0.0033	659
폴리에틸렌 옥사이드 35 kDa	1 : 0.1	581

실시예 20. 유화제가 있을 때 고분자 수용액으로 안정화된 혼합 기름 에멀젼 조성물의 제조

트리글리세라이드과 모노올레인을 부피비로 1:2로 섞은 혼합기름에 여러종류 및 농도의 유화제를 넣어 단일액상을 만든 후 여러 종류 및 농도의 고분자 수용액에 넣은 후 실시예 1과 같은 방법으로 유화시켰다. 볼텍싱한 경우 입자의 평균 지름을 표 15에 나타내었다. 고분자 수용액 대신 물을 사용할 경우의 평균 입자 크기 또한 표 15에 나타내었다. 그러나, 물을 사용한 경우 고분자 용액에 분산시킨 경우와는 달리 불안정하여 2 ~ 3시간 후에는 상분리가 일어났다.

트리글리세라이드	고분자	유화제	기름:고분자:유화제 (중량%)	입자크기 (nm)
트리글리세라이드	고분자	유화제	기름:고분자:유화제 (중량%)	고분자존재시	물에 분산시
트리카프로인	키토산 35 kDa	트윈 80	1.2:2.9:0.2	2086	분산되지 않음
트리카프로인	키토산 35 kDa	트윈 80	3:2.9:0.2	672	> 2 μm
트리카프린	알긴산염	트윈 80	1:0.33:0.1	2330	분산되지 않음
트리카프린	키토산 100 kDa	DMTAP	5:2.85:0.2	2016	> 2 μm
트리카프린	키토산 100 kDa	트윈 80	5:2.85:0.2	1511
트리카프린	키토산 100 kDa	트윈 80	5:0.3:0.2	398
트리카프린	폴리에틸렌 옥사이드 35 kDa	DMTAP	5:0.33:0.5	852	> 2 μm
트리카프린	키토산 11 kDa	트윈 80	1:0.3:0.1	278	분산되지 않음
트리카프린	키토산 11 kDa	DMTAP	1:0.3:0.1	1085	분산되지 않음
트리카프릴린	키토산 35 kDa	트윈 80	1:2.9:0.033	1448	> 2 μm
트리카프릴린	키토산 35 kDa	DMTAP	1:2.9:0.033	1413	> 2 μm

실시예 21. 사이클로스포린 A를 함유한, 고분자 수용액으로 안정화된 식물성 기름 에멀젼 제형

사이클로스포린 A (Cyclosporin A) 2 mg을 콩기름 100 μL에 녹인 후 0.33 % (w/v)의 키토산 (분자량 35 kDa) 수용액에 넣은 후 실시예 1과 같은 방법으로 유화시켰다. 실시예 1과 동일한 방법으로 입자의 크기를 측정하였다. 소니케이션한 경우와 볼텍싱한 경우의 입자의 평균 지름은 각각 58, 374 nm였다.

실시예 22. 파이렌을 함유한, 고분자 수용액으로 안정화된 식물성 기름 에멀젼 제형

사이클로스포린 A대신 파이렌을 사용한 것을 제외하고는 실시예 21과 같은 방법으로 유화시켰다. 실시예 1과 동일한 방법으로 입자의 크기를 측정하였다. 소니케이션한 경우와 볼텍싱한 경우의 입자의 평균 지름은 각각 83, 574 nm였다.

실시예 23. 유화제가 있을 때 사이클로스포린 A를 함유한, 고분자 수용액으로 안정화된 식물성 기름 에멀젼 제형

콩기름 100 μL와 트윈 80 3 μL를 섞은 혼합물에 사이클로스포린 A 2 mg을 녹여서 0.3 % (w/v) 키토산 (분자량 35 kDa) 수용액 897 μL에 넣은 후 에멀젼 제형을 제조하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 입자의 크기를 측정하였다. 볼텍싱한 경우의 입자의 평균 지름은 354 nm였다.

실시예 24. 유화제가 있을 경우 탈리푸르메이트를 함유한, 고분자 수용액으로 안정화된 식물성 기름 에멀젼 제형

사이클로스포린 A대신에 탈리푸르메이트를 사용한 것을 제외하고는 실시예 23과 같은 방법으로 유화시켰다. 실시예 1과 동일한 방법으로 입자의 크기를 측정하였다. 볼텍싱한 경우의 입자의 평균 지름은 각각 945 nm였다.

실시예 25. 사이클로스포린 A를 함유한, 고분자 수용액으로 안정화된 혼합 에멀젼 제형

콩기름 대신에 트리글리세라이드와 모노글리세라이드를 다양한 비율로 섞은 혼합 기름을 사용하고 약물을 녹여주기 위해 약 30 ℃에서 가열해준 것을 제외하고는 실시예 21과 동일한 방법으로 에멀젼 제형을 제조하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 입자의 크기를 측정하였다. 볼텍싱한 경우의 입자의 평균 지름을 표 16에 나타내었다.

트리글리세라이드	트리글리세라이드:모노글리세라이드 (중량%)	입자 크기 (nm)
트리카프린	1 : 2	305
트리카프릴린	1 : 4	451
트리카프릴린	1 : 2	660
트리카프릴린	1 : 1	634
트리카프릴린	2 : 1	422

실시예 26. 유화제가 있을 때 사이클로스포린 A를 함유한, 고분자 수용액으로 안정화된 혼합 에멀젼 제형

콩기름 대신에 트리카프릴린과 모노글리세라이드를 다양한 비율로 섞은 혼합 기름을 사용하고 약물을 녹여주기 위해 약 30 ℃에서 가열해준 것을 제외하고는 실시예 23과 동일한 방법으로 에멀젼 제형을 제조하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 입자의 크기를 측정하였다. 볼텍싱한 경우의 입자의 평균 지름을 표 17에 나타내었다. 고분자 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 평균 입자 크기 2000 nm 내외의 분산계를 이루지만, 고분자용액에 분산시킬 경우와는 달리 불안정하여 2 ~ 3시간 후에는 상분리가 일어났다.

트리카프릴린 : 모노글리세라이드 중량%	입자 크기 (nm)
1 : 4	443
1 : 2	512
1 : 1	432

실시예 27. 파이렌을 함유한, 고분자 수용액으로 안정화된 혼합 에멀젼 제형

콩기름 대신에 트리카프릴린과 모노글리세라이드를 다양한 비율로 섞은 혼합 기름을 사용하고 약물을 녹여주기 위해 약 30 ℃에서 가열해준 것을 제외하고는 실시예 22와 동일한 방법으로 에멀젼 제형을 제조하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 입자 크기를 측정하였다. 볼텍싱한 경우의 입자의 평균 지름을 표 18에 나타내었다.

트리글리세라이드	트리글리세라이드:모노글리세라이드 (중량%)	입자 크기 (nm)
트리카프린	1 : 2	507
트리카프릴린	1 : 4	854
트리카프릴린	1 : 2	400
트리카프릴린	1 : 1	495
트리카프릴린	2 : 1	772

실시예 28. 유화제가 있을 때 파이렌을 함유한, 고분자 수용액으로 안정화된 혼합 에멀젼 제형

콩기름 대신에 트리카프릴린과 모노글리세라이드를 다양한 비율로 섞은 혼합 기름을 사용하고 사이클로스포린 A 대신에 파이렌을 사용한 것을 제외하고는 실시예 23과 같은 방법으로 에멀젼 제형을 제조하였다. 볼텍싱한 경우의 입자의 평균 지름을 표 19에 나타내었다. 고분자 수용액 대신 물을 사용할 경우에는 평균 입자 크기 2000 nm 내외의 분산계를 이루지만, 고분자용액에 분산시킬 경우와는 달리 불안정하여 2 ~ 3시간 후에는 상분리가 일어났다.

트리카프릴린 : 모노글리세라이드 중량%	입자 크기 (nm)
1 : 4	392
1 : 2	325
1 : 1	514
2 : 1	332

실시예 29. 탈리푸르메이트를 함유한, 고분자 수용액으로 안정화된 혼합 에멀젼 제형

파이렌 대신에 탈리푸르메이트를 사용한 것을 제외하고는 실시예 27과 동일한 방법으로 에멀젼 제형을 제조하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 입자 크기를 측정하였다. 볼텍싱한 경우의 입자의 평균 지름을 표 20에 나타내었다.

트리글리세라이드	트리글리세라이드 : 모노글리세라이드 중량%	입자 크기 (nm)
트리카프린	1 : 2	1453
트리카프릴린	1 : 4	952
트리카프릴린	1 : 2	338
트리카프릴린	1 : 1	660
트리카프릴린	2 : 1	681

실시예 30. 유화제가 있을 때 탈리푸르메이트를 함유한, 고분자 수용액으로 안정화된 혼합 에멀젼 제형

콩기름 대신에 트리카프릴린과 모노글리세라이드를 다양한 비율로 섞은 혼합 기름을 사용하고 사이클로스포린 A 대신에 탈리푸르메이트를 사용한 것을 제외하고는 실시예 23과 같은 방법으로 에멀젼 제형을 제조하였다. 볼텍싱한 경우의 입자의 평균 지름은 459 nm였다.

실시예 31. 파클리탁셀을 함유한, 고분자 수용액으로 안정화된 혼합 에멀젼 제형

파이렌 대신에 파클리탁셀을 사용한 것을 제외하고는 실시예 27과 동일한 방법으로 에멀젼 제형을 제조하였다. 실시예 1과 동일한 방법으로 입자 크기를 측정하였다. 볼텍싱한 경우의 입자의 평균 지름을 표 21에 나타내었다.

트리글리세라이드	트리글리세라이드:모노글리세라이드 (중량%)	입자 크기 (nm)
트리카프린	1 : 2	996
트리카프릴린	1 : 4	1022
트리카프릴린	1 : 2	439
트리카프릴린	1 : 1	495
트리카프릴린	2 : 1	1616

실시예 32. 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 조성물의 제조 1

모노올레인 650 μL를 3 ml 용량의 주사기에 넣고 물 350 μL를 다른 주사기에 넣은 후 각 주사기에서 공기를 제거한다. 두 주사기를 삼방향 스탑콕 (three-way stopcork)을 연결하여 100회 정도 번갈아 밀어서 큐빅상을 제조하였다. 500 μL의 큐빅상을 3 % 키토산 용액 10 ml에 넣고 볼텍싱하여 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀을 현미경으로 관찰한 결과 20 μm의 지름을 가진 입자가 존재하며, 약 1 ~ 3 μm 크기의 많은 입자가 관찰되었다. 또한 분산액을 450 nm 구멍크기를 가진 주사기 필터로 필터한 맑은 용액을 실시예 1에서와 같은 방법으로 평균입자의 크기를 측정한 결과 105 nm 였다. 입자크기의 범위는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다.

비교예 3. 고분자 수용액을 첨가하지 않은 큐보좀 조성물의 제조

키토산 수용액 대신에 물을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 32과 동일한 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 33. 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 조성물의 제조 2

5 % 트리폴리포스페이트 (TPP) 수용액을 물 대신 사용한 것을 제외하고는 실시예 32와 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. TPP는 키토산을 가교시키므로 고상은 파우더와 같은 물성을 보였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 34. 유화제를 첨가한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 조성물의 제조 1

키토산 수용액 대신에 유화제인 1% 플루로닉 F 127 (BASF, USA)과 3% 키토산을 함유한 수용액을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 32와 동일한 방법으로 에멀젼을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 1% 플루로닉 F 127과 3% 키토산을 함유한 수용액 대신에 1% 플루로닉 F 127수용액에 분산할 경우 큐빅상은 키토산 용액을 사용한 것과 유사하게 분산되었으나 동결건조 후 반고상이 되어 재분산되기 어려웠다.

비교예 4. 유화제를 첨가한 고분자 수용액을 첨가하지 않은 큐보좀 조성물의 제조 1

1% 플루로닉 F 127 (BASF, USA)과 3% 키토산을 함유한 수용액 대신에 1% 플루로닉 F 127을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 34와 동일한 방법으로 에멀젼을 제조하였다. 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 35. 유화제를 첨가한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 조성물의 제조 2

5 % 트리폴리포스페이트 (TPP) 수용액을 물 대신 사용한 것을 제외하고는 실시예 34와 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. TPP는 키토산을 가교시키므로 고상은 파우더와 같은 물성을 보였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 36. 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 조성물의 제조 3

3% 클리콜 키토산 수용액을 키토산 수용액 대신 사용한 것을 제외하고는 실시예 A1과 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 37. 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 조성물의 제조 5

1% 알긴산염 수용액을 키토산 수용액 대신 사용한 것을 제외하고는 실시예 32와 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 알긴산염 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 38. 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 조성물의 제조 6

3 % 염화칼슘 수용액을 물 대신 사용한 것을 제외하고는 실시예 37과 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 칼슘이온은 알긴산염을 가교시키므로 고상은 파우더와 같은 물성을 보였다. 알긴산염 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 39. 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 조성물의 제조 7

모노올레인 대신 파이탄트리올을 사용한 것을 제외하고는 실시예 32와 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 40. 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 조성물의 제조 8

5 % TPP 수용액을 물 대신 사용한 것을 제외하고는 실시예 39와 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. TPP는 키토산을 가교시키므로 고상은 파우더와 같은 물성을 보였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 41. 유화제를 첨가한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 조성물의 제조 2

키토산 수용액 대신에 유화제인 1% 플루로닉 F 127 (BASF, USA)과 3% 키토산을 함유한 수용액을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 40과 동일한 방법으로 에멀젼을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 1% 플루로닉 F 127과 3% 키토산을 함유한 수용액 대신에 1% 플루로닉 F 127수용액에 분산할 경우 큐빅상은 키토산 용액을 사용한 것과 유사하게 분산되었으나 동결건조 후 반고상이 되어 재분산되기 어려웠다.

비교예 5. 유화제를 첨가한 고분자 수용액을 첨가하지 않은 큐보좀 조성물의 제조 2

1% 플루로닉 F 127 (BASF, USA)과 3% 키토산을 함유한 수용액 대신에 1% 플루로닉 F 127을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 41과 동일한 방법으로 에멀젼을 제조하였다. 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다. 큐빅상은 키토산 용액을 사용한 것과 유사하게 분산되었으나 동결건조 후 반고상이 되어 재분산되기 어려웠다.

실시예 42. 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 조성물의 제조 9

3% 클리콜 키토산 수용액을 키토산 수용액 대신 사용한 것을 제외하고는 실시예 35와 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 43. 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조 1

모노올레인 대신 파이렌 1 %(w/w)를 함유한 모노올레인을 사용한 것을 제외하고는 실시예 35와 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. TPP는 키토산을 가교시키므로 고상은 파우더와 같은 물성을 보였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 44. 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조 2

5 % 트리폴리포스페이트 (TPP) 수용액을 물 대신 사용한 것을 제외하고는 실시예 43과 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. TPP는 키토산을 가교시키므로 고상은 파우더와 같은 물성을 보였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 45. 유화제를 첨가한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조 1

키토산 수용액 대신에 유화제인 1% 플루로닉 F 127 (BASF, USA)과 3% 키토산을 함유한 수용액을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 43과 동일한 방법으로 에멀젼을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 1% 플루로닉 F 127과 3% 키토산을 함유한 수용액 대신에 1% 플루로닉 F 127수용액에 분산할 경우 큐빅상은 키토산 용액을 사용한 것과 유사하게 분산되었으나 동결건조 후 반고상이 되어 재분산되기 어려웠다.

비교예 46. 유화제를 첨가한 고분자 수용액을 첨가하지 않은 큐보좀 제형의 제조 1

1% 플루로닉 F 127 (BASF, USA)과 3% 키토산을 함유한 수용액 대신에 1% 플루로닉 F 127을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 32와 동일한 방법으로 에멀젼을 제조하였다. 큐빅상은 키토산 용액을 사용한 것과 유사하게 분산되었으나 동결건조 후 반고상이 되어 재분산되기 어려웠다.

실시예 47. 유화제를 첨가한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조 2

5 % 트리폴리포스페이트 (TPP) 수용액을 물 대신 사용한 것을 제외하고는 실시예 34과 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. TPP는 키토산을 가교시키므로 고상은 파우더와 같은 물성을 보였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 48. 유화제를 첨가한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조 7

모노올레인 대신 파이탄트리올을 사용한 것을 제외하고는 실시예 45와 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 49. 소혈청 알부민을 함유한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조 1

1 % FITC-소혈청 알부민 (FITC-bovine serum albumin, FITC-BSA) 수용액을 물 대신 사용한 것을 제외하고는 실시예 32와 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 50. 소혈청 알부민을 함유한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조 2

모노올레인 대신 파이탄트리올을 사용한 것을 제외하고는 실시예 49과 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 51. 인슐린을 함유한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조 1

모노올레인 650 μL를 3 ml 용량의 주사기에 넣고 5 % TPP 용액 350 μL를 다른 주사기에 넣은 후 각 주사기에서 공기를 제거한다. 두 주사기를 삼방향 스탑콕 (three-way stopcork)을 연결하여 100회 정도 번갈아 밀어서 큐빅상을 제조하였다. TPP 용액 대신에 240 mg/ml의 인슐린 용액을 넣어 같은 방법으로 큐빅상을 제조하였다 두 종류의 큐빅상을 각각 250 μL 취하여 3 % 키토산 용액 10 ml에 넣고 다시 삼방향 스탑콕에 연결하여 100 회정도 번갈아 밀어서 큐빅상을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조된 모습은 도 1에 나타낸 바와 같다. 도 1에서 알 수 있는 바와 같이, 동결건조후에 상분리 없이 고상으로 존재하였다.

실시예 52. 인슐린을 함유한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조 2

모노올레인 650 μL를 3 ml 용량의 주사기에 넣고 5 % TPP 용액 350 μL를 다른 주사기에 넣은 후 각 주사기에서 공기를 제거한다. 두 주사기를 삼방향 스탑콕 (three-way stopcork)을 연결하여 100회 정도 번갈아 밀어서 큐빅상을 제조하였다. TPP 용액 대신에 240 mg/ml의 인슐린 용액을 넣어 같은 방법으로 큐빅상을 제조하였다 두 종류의 큐빅상을 각각 250 μL 취하여 3 % 키토산 용액 10 ml에 넣고 볼텍싱하여 큐빅상을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다.

실시예 53. 인슐린을 함유한 유화제가 포함된 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조 1

3 % 키토산 용액 대신 1% 플루로닉 F 127과 3% 키토산을 함유한 수용액을 사용한 것을 제외하고는 실시예 51과 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 54. 소혈청 알부민을 함유한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조 3

모노올레인 950 μL를 3 ml 용량의 주사기에 넣고 1 % FITC-BSA 용액 50 μL를 다른 주사기에 넣은 후 각 주사기에서 공기를 제거한다. 두 주사기를 삼방향 스탑콕 (three-way stopcork)을 연결하여 100회 정도 번갈아 밀어서 L2상을 제조하였다. L2상 500 μL를 취하여 3 % 키토산 용액 10 ml에 넣고 볼텍싱하여 큐빅상을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다.

실시예 55. 소혈청 알부민을 함유한 유화제를 포함한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조 1

3 % 키토산 용액 대신 1% 플루로닉 F 127과 3% 키토산을 함유한 수용액을 사용한 것을 제외하고는 실시예 54와 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 56. 소혈청 알부민을 함유한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조 4

모노올레인 850 μL를 3 ml 용량의 주사기에 넣고 1 % FITC-BSA 용액 150 μL를 다른 주사기에 넣은 후 각 주사기에서 공기를 제거한다. 두 주사기를 삼방향 스탑콕 (three-way stopcork)을 연결하여 100회 정도 번갈아 밀어서 라멜라 액정상을 제조하였다. 라멜라 액정상 500 μL를 취하여 3 % 키토산 용액 10 ml에 넣고 볼텍싱하여 큐빅상을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다.

실시예 57. 소혈청 알부민을 함유한 유화제를 포함한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조 2

3 % 키토산 용액 대신 1% 플루로닉 F 127과 3% 키토산을 함유한 수용액을 사용한 것을 제외하고는 실시예 56과 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 58. 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 조성물의 제조 9

모노올레인 300 μL를 3 % 키토산 용액 10 ml에 넣고 볼텍싱하여 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 59. 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 조성물의 제조 10

모노올레인 950 μL를 3 ml 용량의 주사기에 넣고 물 50 μL를 다른 주사기에 넣은 후 각 주사기에서 공기를 제거한다. 두 주사기를 삼방향 스탑콕 (three-way stopcork)을 연결하여 100회 정도 번갈아 밀어서 L2상을 제조하였다. 500 μL의 L2상을 3 % 키토산 용액 10 ml에 넣고 볼텍싱하여 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 60. 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 조성물의 제조 11

모노올레인 850 μL를 3 ml 용량의 주사기에 넣고 물 150 μL를 다른 주사기에 넣은 후 각 주사기에서 공기를 제거한다. 두 주사기를 삼방향 스탑콕 (three-way stopcork)을 연결하여 100회 정도 번갈아 밀어서 라멜라 액정상을 제조하였다. 500 μL의 라멜라 액정상을 3 % 키토산 용액 10 ml에 넣고 볼텍싱하여 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 61. 소혈청 알부민을 함유한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조 5

물 50 μL 대신 3% FITC-BSA 수용액 50 μL를 사용한 것을 제외하고는 실시예 59와 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

실시예 62. 소혈청 알부민을 함유한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조 6

물 150 μL 대신 3% FITC-BSA 수용액 150 μL를 사용한 것을 제외하고는 실시예 60과 같은 방법으로 큐보좀을 제조하였다. 제조된 큐보좀의 입자크기는 100 nm ~ 20 μm 였으며, 동결건조후에 상분리없이 고상으로 존재하였다. 키토산 수용액 대신에 물에 분산할 경우 큐빅상은 전혀 분산되지 않았다.

시험예 1. In vivo 경구투여 실험

상기 실시예 51에서 제조된 큐보좀으로 동물실험을 수행하였다.

1-1. 당뇨 유도

6주령의 휘스터계 수컷 랫트를 8~10시간 동안 절식시킨 후 스트렙토조토신 (streptozotocin)과 알록산 모노하이드레이트 (alloxan monohydrate)가 용해된 일반 생리 식염수 (normal saline solution) 100 mg/kg을 복강 내로 이틀 간격으로 3회 반복 주사하였다. 상기와 같이 처리된 랫트로부터 일주일 후 혈액을 채혈하여 혈당치를 측정하였고, 이들 중 비공복 상태에서의 혈당치가 400 mg/dL 이상으로 나타난 랫트를 당뇨가 유도된 것으로 간주하여 하기의 실험을 수행하였다.

1-2. 인슐린을 함유한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀의 경구투여 실험

인슐린을 함유한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 용액 300 μL를 6~7주령의 정상 랫트와 상기 시험예 1-1에서 선별된 당뇨가 유도된 랫트를 4시간 동안 절식시킨 후 꼬리 정맥에서 혈액을 채취하여 혈당치를 측정하였고 상기 값을 약물투여 전 초기값으로 사용하였다. 실시예 51에서 제조된 인슐린을 함유한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀의 액상제형 300 μL를 존데로 경구투여하였다. 각 실험동물당 인슐린의 투여량은 89 IU/kg이 된다. 비교군으로 PBS 및 인슐린/PBS 용액을 사용하여 동일한 방법으로 경구투여하였다. 약물투여 후 1, 2, 3, 4 및 6시간 째에 꼬리 정맥에서 혈액을 채취하여 혈당치를 측정하였다. 투여전 초기값을 100%로 하여 각 시간대의 혈당치를 환산하여 그 결과를 도 2에 나타내었다.

도 2에 나타난 바와 같이, 본 발명의 인슐린을 함유한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀을 투여한 당뇨가 유발된 랫트 실험군에서는 초기 혈당치에 비하여 1시간 경과 후 약 50 % 정도 감소되었고 낮은 혈당이 약 3시간 까지 지속된 반면, PBS를 투여한 군과 인슐린 수용액을 투여한 군에서는 유의성이 없는 결과를 보였다.

본 발명의 에멀젼 또는 큐보좀 조성물은 생체적합성 친수성 고분자를 포함함으로써 유화제를 별도로 사용하지 않거나 매우 소량만을 사용하여도 분산성과 안정성이 우수하여 난용성 및/또는 양쪽성 약물의 약물전달체계로서 유용하다.

도 1은 실시예 51에서 제조된 인슐린을 함유한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 제형을 동결건조한 파우더의 사진이다

도 2는 인슐린을 함유한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 용액을 정상 수컷 랫트의 꼬리 정맥에 주사한 후 상대적 혈당치를 측정한 그래프이다.

- ● - ; 인산염 완충용액 (PBS) 300 μL 경구 투여군

- ○ - ; 인산염 완충용액 (PBS)에 용해된 인슐린 300 μL 경구투여군 (인슐린 농도 89 IU/kg)

- ■ - ; 인슐린을 함유한 고분자 수용액으로 안정화된 큐보좀 용액 300 μL (인슐린 농도 89 IU/kg)

Claims

한 가지 이상의 기름 0.1 내지 30 중량%, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량% 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는, 입체적으로 (sterically) 안정화된 에멀젼 조성물.
제 1 항에 있어서, 한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물을 0.1 내지 30 중량%의 양으로 추가적으로 포함하는 조성물.
한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량%, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량%, 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 입체적으로 안정화된 큐보좀 조성물.
제 3 항에 있어서, 한 가지 이상의 기름을 0.1 내지 6 중량%의 양으로 추가적으로 포함하는 조성물.
파이탄트리올 0.1 내지 30 중량%, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량%, 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 입체적으로 안정화된 큐보좀 조성물.
제 5 항에 있어서, 한 가지 이상의 기름을 0.1 내지 6 중량%의 양으로 추가적으로 포함하는 조성물.
한 가지 이상의 기름 0.1 내지 30 중량부, 및 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부를 포함하는 장기보관 가능한 입체적으로 안정화된 에멀젼 전구체의 조성물.
제 7 항에 있어서, 한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량부를 추가적으로 포함하는 에멀젼 전구체 조성물.
한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량부 및 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부를 포함하는 입체적으로 안정화된 장기보관 가능한 큐보좀 전구체 조성물.
제 9 항에 있어서, 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 6 중량부를 추가적으로 포함하는 큐보좀 전구체 조성물.
파이탄트리올 0.1 내지 30 중량부 및 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부를 포함하는 입체적으로 안정화된 장기보관 가능한 큐보좀 전구체 조성물.
제 11 항에 있어서, 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 6 중량부를 추가적으로 포함하는 조성물.
제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 기름이 트리글리세라이드, 요오드화 기름, 식물성 기름 및 동물성 기름으로 이루어진 군 중에서 선택된 한 가지 이상의 기름인 조성물.
제 13 항에 있어서, 상기 트리글리세라이드가 포화 또는 불포화된 C₂-C₂₀인 모노글리세라이드계 화합물을 포함하는 조성물.
제 13 항에 있어서, 상기 트리글리세라이드가 트리아세틴 (triacetin), 트리부티린 (tributyrin), 트리카프로인 (tricaproin), 트리카프릴린 (tricaprylin), 트리카프린 (tricaprin), 및 트리올레인 (triolein)으로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 조성물.
제 13 항에 있어서, 상기 요오드화 오일이 리파이오돌, 요오드화 양귀비씨 기름 (iodized poppy seed oil), 에티오돌 (ethiodol) 및 요오드화 대두유 (iodized soybean oil)로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 조성물.
제 13 항에 있어서, 상기 식물성 기름이 콩기름, 면실유, 올리브유, 양귀비씨 기름, 홍화씨기름 및 참기름으로 구성된 군 중에서 선택된 것인 조성물.
제 13 항에 있어서, 상기 동물성 기름이 스쿠알란 또는 스쿠알렌인 조성물.
제 2 항 내지 제 4 항 및 제 8 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 모노글리세라이드계 화합물이 포화 또는 불포화된 C₁₀-C₂₂인 모노글리세라이드계 화합물을 포함하는 조성물.
제 19 항에 있어서, 상기 모노글리세라이드계 화합물이 모노올레인(Monoolein), 모노팔미톨레인(Monopalmitolein), 모노미리스톨레인(Monomyristolein), 모노일레이딘(Monoelaidin), 모노이루이신(Monoerucin), 및 식물성 또는 동물성 기름의 트리글리세라이드로부터 반합성된 모노글리세라이드의 혼합물로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 조성물.
제 20 항에 있어서, 상기 모노글리세라이드계 화합물이 모노올레인인 조성물.
제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 생체적합성 친수성 고분자가 천연고분자(Natural polymer), 천연고분자로부터 변형된 고분자(Modified natural polymer) 및 합성고분자(Synthetic polymer)로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 조성물.
제 22 항에 있어서, 상기 천연고분자가 키토산(chitosan), 그 염 및 그 유도체; 덱스트란 및 그 유도체; 아카시아 검(Acacia gum); 트라가칸친(Tragacanthin); 히알루론 산(Hyaluronic acid), 그 염 및 그 유도체; 펙틴(Pectin), 그 염 및 그 유도체; 알긴산(Alginic acid), 그 염 및 그 유도체; 아가(Agar); 갈락도만난(Galactomannans), 그 염 및 그 유도체; 잔탄(Xanthan), 그 염 및 그 유도체; 베타-사이클로덱스트린(Beta-Cyclodextrin), 그 염 및 그 유도체; 및 아밀로즈(Amylose, 수용성 전분), 그 염 및 그 유도체로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 조성물.
제 22 항에 있어서, 상기 천연고분자로부터 변형된 고분자가 글리콜 키토산(Glycol chitosan), 그 염 및 그 유도체; 카복시메틸 셀룰로오스(Carboxymethyl cellulose, CMC), 그 염 및 그 유도체; 히드록시에틸 셀룰로오스(Hydroxyethyl cellulose, HEC), 그 염 및 그 유도체; 히드록시프로필 셀룰로오스(Hydroxypropyl cellulose, HPC), 그 염 및 그 유도체; 히드록시프로필 메틸셀룰로오스(Hydroxypropyl methylcellulose, HPMC); 메틸셀룰로오스(Methylcellulose), 그 염 및 그 유도체; 셀룰로오스 아세테이트 프탈레이트(Cellulose acetate phthalate), 그 염 및 그 유도체; 젤라틴(Gelatin), 그 염 및 그 유도체; 및 프로타민 설페이트(Protamine sulfate)로 이루어진 군 주에서 선택된 것인 조성물.
제 22 항에 있어서, 상기 합성고분자가 폴리(베타-히드록시에틸 메타아크릴레이트)[Poly(beta-hydroxyethyl methacrylate), PHEMA]; 폴리아크릴아미드(Polyacrylamide, PA); 폴리비닐 알코올(Polyvinyl alcohol, PVA); 폴리아크릴 산(Polyacrylic acid, PAA), 그 염 및 그 유도체; 폴리비닐피롤리돈(Polyvinylpyrrolidone, PVP); 폴리에틸렌 옥사이드(Polyethyleneoxide, PEO); 폴리에틸렌 글리콜(Polyethyleneglycol, PEG); 폴리(에틸렌옥시드-b-프로필렌 옥사이드(Poly(ethylene oxide-b-propylene oxide), PEO-PPO); 및 폴리라이신(Polylysine)로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 조성물.
제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 수용액이 상기 친수성 고분자를 가용화시킬 수 있는 산성수용액, 염기성 수용액, 완충용액 및 염 용액 등을 포함하는 군 중에서 선택된 것인 조성물.
제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서, 유화제, 지방산, 지방산의 에스테르류 및 지방산의 알코올류로 이루어진 군 중에서 선택된 첨가제를 5 중량% 이하의 양으로 추가적으로 함유하는 조성물.
제 27 항에 있어서, 상기 유화제가 인지질, 스핑고지질(sphingolipid), 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제 및 담즙산(bile acid)으로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 조성물.
제 28 항에 있어서, 상기 인지질이 포스파티딜콜린(Phosphatidyl Choline) 유도체, 포스파티딜에탄올아민(Phosphatidyl ethanolamine) 유도체, 포스파티딜세린(Phosphatidyl serine) 유도체, 및 친수성 고분자가 결합된 지질(polymeric lipid)로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 조성물.
제 28 항에 있어서, 상기 스핑고지질이 세라마이드계(ceramides), 세레브로사이드계(cerebroside) 및 스핑고마이엘린계(sphingomyelins)로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 조성물.
제 28 항에 있어서, 상기 비이온성 계면 활성제가 폴록사머(Poloxamer; Pluronic; 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 공중합체), 솔비탄 에스테르(Sorbitan esters; Span), 폴리옥시에틸렌 솔비탄(polyoxyethylene sorbitans; Tween), 및 폴리옥시에틸렌 에테르(polyoxy ehtylene ethers; Brij)로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 조성물.
제 28 항에 있어서, 상기 음이온성 계면 활성제가 포스파티딜세린 유도체, 포스파티딘산(Phosphatidic acid) 유도체 및 소듐 도데실 설페이트(sodium dodecyl sulfate, SDS)로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 조성물.
제 28 항에 있어서, 상기 양이온성 계면 활성제가 1,2-디올레일-3-트리메틸암모늄 프로판(1,2-dioleyl-3-trimethylammonium propane), 디메틸디옥타데실암모늄 클로라이드(dimethyldioctadecylammonium chloride), N-[1-(1,2-디올레일옥시)프로필]-N,N,N-트리메틸암모늄 클로라이드(N-[1-(1,2-dioleyloxy)propyl]-N,N,N-trimethylammonium chloride), 1,2-디올레일-3-에틸포스포콜린(1,2-dioleyl-3-ethylphosphocholine), 및 3β-[N-[(N',N'-디메틸아미노)에탄]카바모일]콜레스테롤 (3β-[N-[(N',N'-dimethylamino)ethan]carbamoyl]chloresterol)로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 조성물.
제 28 항에 있어서, 상기 담즙산이 콜린산(cholic acid), 그의 염 및 유도체; 데옥시콜린산(Deoxycholic acid), 그의 염 및 유도체; 리토콜린산(Lithocholic acid), 그의 염 및 유도체; 및 체노콜린산(Chenocholic acid), 그의 염 및 유도체로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 조성물.
한 가지 이상의 기름과 임의적으로 모노글리세라이드 및/또는 유화제를 잘 섞어서 단일액상으로 만들고, 물 또는 수용액에 생체적합성 친수성 고분자와 임의적으로 유화제를 혼합하여 용액을 제조하고,

상기에서 얻어진 단일액상과 용액을 함께 섞은 후 분산시키는 단계를 포함하는 에멀젼 조성물의 제조방법.
제 35 항에 있어서, 상기 단일액상의 제조를 가온하거나 소니케이션하여 수행하는 방법.
제 35 항에 있어서, 상기 분산을 손으로 흔들어주거나, 볼텍싱(vortexing), 소니케이션(sonication) 또는 미세유동화(microfluidization)하여 수행하는 방법.
모노글리세라이드, 파이탄트리올, 모노글리세라이드/기름 혼합물 또는 파이탄트리올/기름 혼합물과 임의적으로 유화제를 잘 섞어 단일액상으로 만들고, 물 또는 수용액에 생체적합성 친수성 고분자와 임의적으로 유화제를 혼합하여 용액을 제조하고,

상기에서 얻어진 단일액상과 용액을 함께 섞은 후 분산시키는 단계를 포함하는 큐보좀 조성물 제조방법.
제 38 항에 있어서, 상기 단일액상의 제조를 가온하거나 소니케이션하여 수행하는 방법.
제 38 항에 있어서, 상기 분산을 손으로 흔들어주거나, 볼텍싱, 소니케이션, 또는 미세유동화하여 수행하는 방법.
모노글리세라이드, 파이탄트리올, 모노글리세라이드/기름 혼합물 또는 파이탄트리올/기름 혼합물과 임의적으로 유화제를 수용액과 섞어서 L2상, 라멜라상 또는 큐빅상을 제조하고, 물 또는 수용액에 생체적합성 친수성 고분자와 임의적으로 유화제를 혼합하여 용액을 제조하고,

상기에서 얻어진 L2상, 라멜라상 또는 큐빅상을 상기 용액과 함께 섞은 후 분산시키는 단계를 포함하는 큐보좀 조성물 제조방법.
제 41 항에 있어서, 상기 L2상, 라멜라상 또는 큐빅상의 제조를 주사기 및 삼방향 스톱-코르크(stop-cork)로 구성된 지질혼합기를 사용하여 수행하는 방법.
제 41 항에 있어서, 상기 분산을 손으로 흔들어주거나, 볼텍싱, 소니케이션, 또는 미세유동화하여 수행하는 방법.
한 가지 이상의 기름 0.1 내지 30 중량%, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량%, 한 가지 이상의 약물 0.1 내지 10 중량%, 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 입체적으로 안정화된 에멀젼 제형.
제 44 항에 있어서, 한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물을 0.1 내지 30 중량%의 양으로 추가적으로 포함하는 에멀젼 제형.
한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량%, 생체 적합성 고분자 0.01 내지 5 중량%, 한 가지 이상의 약물 0.1 내지 10 중량%, 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 입체적으로 안정화된 큐보좀 제형.
제 46 항에 있어서, 한 가지 이상의 기름을 0.1 내지 6 중량%의 양으로 추가적으로 포함하는 큐보좀 제형.
파이탄트리올 0.1 내지 30 중량%, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량%, 한 가지 이상의 약물 0.1 내지 10 중량%, 및 나머지를 차지하는 물 또는 수용액을 포함하는 입체적으로 안정화된 큐보좀 제형.
제 48 항에 있어서, 한 가지 이상의 기름을 0.1 내지 6 중량%의 양으로 추가적으로 포함하는 큐보좀 제형.
한 가지 이상의 기름 0.1 내지 30 중량부, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부, 및 한 가지 이상의 약물 0.1 내지 10 중량부를 포함하는 장기보관 가능한 입체적으로 안정화된 에멀젼 전구체 제형.
제 50 항에 있어서, 한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량부를 추가적으로 포함하는 에멀젼 전구체 제형.
한 가지 이상의 모노글리세라이드계 화합물 0.1 내지 30 중량부, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부, 및 한 가지 이상의 약물 0.1 내지 10 중량부를 포함하는 장기보관 가능한 입체적으로 안정화된 큐보좀 전구체 제형.
제 49 항에 있어서, 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 6 중량부를 추가적으로 포함하는 큐보좀 전구체 제형.
파이탄트리올 0.1 내지 30 중량부, 생체적합성 친수성 고분자 0.01 내지 5 중량부, 및 한 가지 이상의 약물 0.1 내지 10 중량부를 포함하는 장기보관 가능한 입체적으로 안정화된 큐보좀 전구체 제형.
제 54 항에 있어서, 한 가지 이상의 기름 0.1 내지 6 중량부를 추가적으로 포함하는 큐보좀 전구체 제형.
제 44 내지 제 55 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 기름이 트리글리세라이드, 요오드화 기름, 식물성 기름 및 동물성 기름으로 이루어진 군 중에서 선택된 한 가지 이상의 것인 제형.
제 56 항에 있어서, 상기 트리글리세라이드가 포화 또는 불포화된 C₂-C₂₀인 모노글리세라이드계 화합물을 포함하는 제형.
제 57 항에 있어서, 상기 트리글리세라이드가 트리아세틴 (triacetin), 트리부티린 (tributyrin), 트리카프로인 (tricaproin), 트리카프릴린 (tricaprylin), 트리카프린 (tricaprin), 및 트리올레인 (triolein)로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 56 항에 있어서, 상기 요오드화 오일이 리파이오돌, 요오드화 양귀비씨 기름 (iodized poppy seed oil), 에티오돌 (ethiodol) 및 요오드화 대두유 (iodized soybean oil)로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 56 항에 있어서, 상기 식물성 기름이 콩기름, 면실유, 올리브유, 양귀비씨 기름, 홍화씨기름 및 참기름으로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 56 항에 있어서, 상기 동물성 기름이 스쿠알란 또는 스쿠알렌인 제형.
제 45 내지 제 47 항 및 제 51 항 내지 제 53 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 모노글리세라이드계 화합물이 포화 또는 불포화된 C₁₀-C₂₂의 모노글리세라이드계 화합물을 포함하는 제형.
제 62 항에 있어서, 상기 모노글리세라이드계 화합물이 모노올레인(Monoolein), 모노팔미톨레인(Monopalmitolein), 모노미리스톨레인(Monomyristolein), 모노일레이딘(Monoelaidin), 모노이루이신(Monoerucin), 및 식물성 또는 동물성 기름의 트리글리세라이드로부터 반합성된 모노글리세라이드의 혼합물로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 63 항에 있어서, 상기 모노글리세라이드계 화합물이 모노올레인인 제형.
제 44 항 내지 제 55 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 생체적합성 친수성 고분자가 천연고분자(Natural polymer), 천연고분자로부터 변형된 고분자(Modified natural polymer), 및 합성고분자(Synthetic polymer)로 구성된 군 주에서 선택된 것인 제형.
제 65 항에 있어서, 상기 천연고분자가 키토산(chitosan), 그 염 및 그 유도체; 덱스트란 및 그 유도체; 아카시아 검(Acacia gum); 트라가칸친(Tragacanthin); 히알루론 산(Hyaluronic acid), 그 염 및 그 유도체; 펙틴(Pectin), 그 염 및 그 유도체; 알긴산(Alginic acid), 그 염 및 그 유도체; 아가(Agar), 갈락도만난(Galactomannans), 그 염 및 그 유도체; 잔탄(Xanthan), 그 염 및 그 유도체; 베타-사이클로덱스트린(Beta-Cyclodextrin), 그 염 및 그 유도체; 및 아밀로즈(Amylose, soluble starch), 그 염 및 그 유도체로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 65 항에 있어서, 상기 천연고분자로부터 변형된 고분자가 글리콜 키토산(Glycol chitosan), 그 염 및 그 유도체; 카복시메틸 셀룰로오스(Carboxymethyl cellulose, CMC), 그 염 및 그 유도체; 히드록시에틸 셀룰로오스(Hydroxyethyl cellulose, HEC), 그 염 및 그 유도체; 히드록시프로필 셀룰로오스(Hydroxypropyl cellulose, HPC), 그 염 및 그 유도체; 히드록시프로필 메틸셀룰로오스 (Hydroxypropyl methylcellulose, HPMC); 메틸 셀룰로오스 (Methylcellulose), 그 염 및 그 유도체; 셀룰로오스 아세테이트 프탈레이트(Cellulose acetate phthalate), 그 염 및 그 유도체; 젤라틴(Gelatin), 그 염 및 그 유도체; 및 프로타민 설페이트(Protamine sulfate)로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 65 항에 있어서, 상기 합성고분자가 폴리(베타-히드록시에틸 메타아크릴레이트)[Poly(beta-hydroxyethyl methacrylate, PHEMA]; 폴리아크릴아미드(Polyacrylamide, PA); 폴리비닐 알코올(Polyvinyl alcohol, PVA); 폴리아크릴 산(Polyacrylic acid, PAA), 그 염 및 그 유도체; 폴리비닐피롤리돈(Polyvinylpyrrolidone, PVP); 폴리에틸렌 옥사이드(Polyethyleneoxide, PEO); 폴리에틸렌 글리콜(Polyethyleneglycol, PEG); 폴리(에틸렌옥사이드-b-프로필렌 옥사이드[Poly(ethylene oxide-b-propylene oxide), PEO-PPO]; 및 폴리라이신(Polylysine)로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 44 항 내지 제 55 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약물이 단백질, 항바이러스제, 스테로이드계 소염제 (SAID), 비스테로이드계 소염제(NSAID), 항생제, 항진균제, 비타민, 호르몬, 프로스타글란딘(prostaglandin), 프로스타사이클린(prostacyclin), 항암제, 항대사제, 축동제(mitotics), 콜린작동성 약물, 아드레날린 길항제(adrenaline antagonist), 항경련제, 항불안제, 정온제, 항우울제, 마취제, 진통제, 동화성 스테로이드제, 에스트로겐(estrogen), 프로게스테론(progesteron), 글리코사미노글리칸(glycosaminoglycan), 폴리뉴클레오타이드(polynucleotide), P-당단백질 억제제, 간대사 저해제, 면역 억제제 및 면역 촉진제로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 64 항에 있어서, 상기 단백질이 기능성 펩타이드(functional peptide); 부신피질 호르몬(adrenocorticotropic hormone, ACTH)과 절편(fragment); 안지오텐신(angiotensin)과 그의 관련 펩타이드; 항체 절편(antibody fragment); 항원(antigen)과 그의 절편; 심방 나트륨 배설촉진 펩타이드(atrial natriuretic peptide); 생부착성 펩타이드(bioadhesive peptide); 브래디키닌(Bradykinin)과 그의 관련 펩타이드; 칼시토닌(calcitonin)과 그의 관련 펩타이드; 세포 표면 수용체 단백질 절편(cell surface receptor protein fragment); 화학주성 펩타이드(chemotactic peptide); 시클로스포린류(cyclosporins); 사이토카인류(cytokines); 디노르핀(Dynorphin)과 그의 관련 펩타이드; 엔돌핀(endorphin)과 β-리도트로핀 절편 (β-lidotropin fragment); 엔케팔린(enkephalin)과 그의 관련 단백질; 효소활성 억제제(enzyme inhibitors); 피브로넥틴 절편(fibronectin fragment)과 그의 관련 펩타이드; 위장 펩타이드(gastrointestinal peptide); 성장호르몬 분비 펩타이드(growth hormone releasing peptide); 면역자극 펩타이드(immunostimulating peptide); 인슐린 (insulin)과 인슐린-유사 성장인자(insulin-like growth factor); 인터루킨류(interleukins), 황체형성 호르몬 분비 호르몬(luthenizing hormone releasing hormone, LHRH)과 그의 관련 펩타이드; 멜라닌세포 자극 호르몬(melanocyte stimulating hormone)과 그의 관련 펩타이드; 핵 전달신호(neuclear localization signal) 관련 펩타이드; 뉴로텐신(neurotensin)과 그의 관련 펩타이드; 신경전달물질 펩타이드(neurotransmitter peptide); 아편양제제 펩타이드(opioid peptide); 옥시토신(oxytocin); 바소프레신(vasopressin)과 그의 관련 펩타이드; 부신피질 호르몬(parathyroid hormone)과 절편; 단백질 키나아제(ptotein kinase) 관련 펩타이드; 소마토스타틴(somatostatin)과 그의 관련 펩타이드; 기질 P(substance P)와 그의 관련 펩타이드; 전이 성장인자(transforming growth factor, TGF) 및 그의 관련 펩타이드; 종양 괴사 인자 절편(tumor necrosis factor fragment); 면역글로블린 (immunoglobulin)류, 안지오제닌 (angiogenin), 골형성 단백질 (bone morphogenic protein), 케모카인 (chemokine), 콜로니 자극 인자 (colony stimulating factor, CSF)와 관련 단백질, 성장인자류(growth factors), 인터페론(interferon), 인터루킨(interleukin), 렙틴(leptin), 소아마비 억제인자(leukemia inhibitory factor), 간세포 인자류(stem cell factors) 및 독소(toxin) 또는 톡소이드(toxoid)로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 70 항에 있어서, 상기 인슐린이 소 췌장 인슐린(bovine pancreatic insulin), 인간 재조합(human recombinant) 인슐린, 돼지 췌장 (porcine pancreatic) 인슐린, arg-인슐린(arg-insulin), 인슐린-바이오틴(insulin-biotin), 인슐린-FITC(insulin-FITC), 리스프로(LysPro, 미국 Eli Lilly), 및 폴리에틸렌 글리콜-인슐린(polyethylene glycol-insulin, PEG-insulin)로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 70 항에 있어서, 상기 기능성 펩타이드 (functional peptide)가 안지오스타틴(angiostatin)을 포함하는 항암성(anticancer) 펩타이드, 항고혈압(antihypertension) 펩타이드, 항혈전(antiblood-clotting) 펩타이드, 및 항진균성(antimicrobial) 펩타이드로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 69 항에 있어서, 상기 항암제가 독소루비신, 시스플라틴, 카보플라틴, 카무스틴 (BCNU), 다카바진, 에도포사이드, 플루오로우라실 (5-FU), 및 파클리탁셀 및 그 유도체로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 73 항에 있어서, 상기 파클리탁셀 유도체가 파클리탁셀, 도시탁셀, 브로모탁셀 및 탁소티어로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 69 항에 있어서, 상기 P-당단백질 억제제가 신코닌(cinchonin), 칼슘 채널 저해제, 칼모듈린 길항제, 빈카 알칼로이드(Vinca alcaloid), 항부정맥제, 스테로이드, 항고혈압제, 구충제, 및 면역억제제로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 75 항에 있어서, 상기 칼슘 채널 저해제가 베라파밀(verapamil), 니페디핀(nifedipine), 니카디핀(nicardipine), 및 니트렌디핀(nitrendipine)로 이루어진 군 중에서 선택된 디히드로피리딘(dihydropyridines)이고, 상기 칼모듈린 길항제가 트리플루오로페라진(trifluoroperazine)이고, 상기 항고혈압제가 레세핀(reserpine)이고, 상기 빈카 알칼로이드가 빈크리스틴(vincristine), 및 빈블라스틴(vinblastine)으로 이루어진 군 주에서 선택된 것이고, 상기 스테로이드가 프로게스테론이고, 상기 항부정맥제가 아미오다론(amiodarone), 및 퀴니딘(quinidine)으로 구성된 군 중에서 선택된 것이고. 상기 구충제가 퀴나크린(quinacrine), 및 퀴닌(quinine)으로 이루어진 군 중에서 선택된 것이고, 상기 면역억제제가 사이클로스포린류, 스타우로스포린(staurosporine), 및 태크로리머스(tacrolimus)로 이루어진 구 중에서 선택된 것인 제형.
제 69 항에 있어서, 상기 간 대사 저해제가 사이클로스포린 A, 독소루비신(doxorubicin), 에토포사이드(etoposide, VP-16), 시스플라틴(cisplatin), 베라파밀(verapamil), 및 타모시펜(tamoxifen)으로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 44 항 내지 제 55 항 중 어느 한 항에 있어서, 유화제, 지방산, 지방산의 에스테르류, 및 지방산의 알코올류로 이루어진 군 중에서 선태된 첨가제를 5 중량% 이하의 양으로 추가적으로 함유하는 제형.
제 78 항에 있어서, 상기 유화제가 인지질, 스핑고지질 (sphingolipid), 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제 및 담즙산 (bile acid)으로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 79 항에 있어서, 상기 인지질이 포스파티딜콜린 (Phosphatidyl Choline) 유도체, 포스파티딜에탄올아민 (Phosphatidyl ethanolamine) 유도체, 포스파티딜세린 (Phosphatidyl serine) 유도체, 및 친수성 고분자가 결합된 지질 (polymeric lipid)로 이루어진된 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 79 항에 있어서, 상기 스핑고지질이 세라마이드계(ceramides), 세레브로사이드계(cerebroside), 및 스핑고마이엘린계(sphingomyelins)로 구성된 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 79 항에 있어서, 상기 비이온성 계면 활성제가 폴록사머(Poloxamer; Pluronic; 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 공중합체), 솔비탄 에스테르(Sorbitan esters; Span), 폴리옥시에틸렌 솔비탄(polyoxyethylene sorbitans; Tween), 및 폴리옥시에틸렌 에테르 (polyoxy ehtylene ethers; Brij)로 구성된 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 79 항에 있어서, 상기 유화제로 사용되는 음이온성 계면 활성제는 포스파티딜세린 유도체, 포스파티딘산 (Phosphatidic acid) 유도체, 및 소듐 도데실 설페이트 (sodium dodecyl sulfate, SDS)로 구성된 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 79 항에 있어서, 상기 양이온성 계면 활성제가 1,2-디올레일-3-트리메틸암모늄 프로판(1,2-dioleyl-3-trimethylammonium propane), 디메틸디옥타데실암모늄 클로라이드(dimethyldioctadecylammonium chloride), N-[1-(1,2-디올레일옥시)프로필]-N,N,N-트리메틸암모늄 클로라이드 (N-[1-(1,2-dioleyloxy)propyl]-N,N,N-trimethylammonium chloride), 1,2-디올레일-3-에틸포스포콜린 (1,2-dioleyl-3-ethylphosphocholine), 및 3β-[N-[(N',N'-디메틸아미노)에탄]카바모일]콜레스테롤 (3β-[N-[(N',N'-dimethylamino)ethan]carbamoyl]chloresterol)로 구성된 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 79 항에 있어서, 상기 담즙산은 콜린산 (cholic acid)과 그의 염 및 유도체, 데옥시콜린산 (Deoxycholic acid)과 그의 염 및 유도체, 리토콜린산 (Lithocholic acid)과 그의 염 및 유도체, 및 체노콜린산 (Chenocholic acid)과 그의 염 및 유도체로 구성된 군 중에서 선택된 것인 제형.
제 44 항 내지 제 55 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 수용액이 친수성 고분자를 가용화시킬 수 있는 산성수용액, 염기성 수용액, 완충용액 및 염 용액 등으로 이루어진 군 중에서 선택된 것인 제형.
한 가지 이상의 기름, 약물과 임의적으로 모노글리세라이드, 유화제를 잘 섞어서 단일액상으로 만들고, 생체적합성 친수성 고분자와 임의적으로 유화제를 넣은 수용액을 제조하고,

상기에서 얻어진 단일액상과 수용액을 함께 섞은 후 분산시키는 단계를 포함하는 입체적으로 안정화된 에멀젼 제형의 제조방법.
제 87 항에 있어서, 상기 단일액상의 제조를 가온하거나 소니케이션 하여 수행하는 방법.
제 87 항에 있어서, 상기 분산을 손으로 흔들어주거나, 볼텍싱, 소니케이션, 또는 미세유동화하여 수행하는 방법.
모노글리세라이드, 파이탄트리올, 모노글리세라이드/기름 혼합물 또는 파이탄트리올/기름 혼합물, 약물과 임의적으로 유화제를 잘 섞어서 단일액상으로 만들고, 생체적합성 친수성 고분자와 임의적으로 유화제를 넣은 수용액을 제조하고,

상기에서 얻어진 단일액상과 수용액을 함께 섞은 후 분산시키는 단계를 포함하는 입체적으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조방법.
제 90 항에 있어서, 상기 단일액상의 제조를 가온하거나 소니케이션하여 수행하는 방법.
제 90 항에 있어서, 상기 분산을 손으로 흔들어주거나, 볼텍싱, 소니케이션, 또는 미세유동화하여 수행하는 방법.
모노글리세라이드, 파이탄트리올, 모노글리세라이드/기름 혼합물 또는 파이탄트리올/기름 혼합물, 임의적으로 유화제를 수용액과 섞어서 L2상, 라멜라상 또는 큐빅상을 제조하고, 생체적합성 친수성 고분자와 임의적으로 유화제를 넣은 수용액을 제조하고,

상기에서 얻어진 L2상, 라멜라상 또는 큐빅상과 수용액을 함께 섞은 후 분산시키는 단계를 포함하는 입체적으로 안정화된 큐보좀 제형의 제조방법.
제 93 항에 있어서, 상기 L2상, 라멜라상 또는 큐빅상의 제조를 주사기 및 삼방향 스톱-코르크로 구성된 지질혼합기를 사용하여 수행하는 방법.
제 93 항에 있어서, 상기 분산을 손으로 흔들어주거나, 볼텍싱, 소니케이션, 또는 미세유동화하여 수행하는 방법.