KR100418065B1 - 히스타민 ｈ2 수용체 길항제 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 리퀴리티제닌(liquirtigenin)과 아이소리퀴리티제닌(isoliquiritigenin)을 유효성분으로 하고, 위장에서 위액분비에 중요한 역할을 하는 히스타민 수용체의 활성을 특이적으로 억제하여 위산분비를 억제함으로써 이를 통해 위십이지장궤양 치료제로서 유용하게 이용될 수 있는 히스타민 H2수용체 길항제에 관한 것으로서,
리퀴리티제닌(2,3-dihydro-7-hydroxy-2-(4-hydroxy-phenyl)-(S)-4H-1-benzopyran)은
의 화학식으로 표시되고,
아이소리퀴리티제닌((E)-1-(2,4-Dihydroxyphenyl)-3-(4-hydroxyphenyl2-propen1-one)은

Description

히스타민 Ｈ2 수용체 길항제 {Use of liquiritigenin or isoliquiritigenin as an antagonist for histamine H2 receptors}
본 발명은 히스타민 H2수용체 길항제에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 리퀴리티제닌(liquirtigenin)과 아이소리퀴리티제닌(isoliquiritigenin)을 유효성분으로 하고, 위장에서 위액분비에 중요한 역할을 하는 히스타민 수용체의 활성을 특이적으로 억제하여 위산분비를 억제함으로써 이를 통해 위십이지장궤양 치료제로서 유용하게 이용될 수 있는 히스타민 H2수용체 길항제에 관한 것이다.
일반적으로 리퀴리티제닌(liquirtigenin: 2,3-dihydro-7-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-(S)-4H-1-benzopyran)과 아이소리퀴리티제닌(isoliquiritigenin: 2',4,4'-trihydroxychalcone 혹은 (E)-1-(2,4-Dihydroxypheny)3-(4- hydroxyphenyl2-propen1-one)은 세 개의 환을 가진 플라보노이드계 화합물(flavonoid)이며, 글리시리진(glycyrrhizin)과 더불어 한약재인 감초(Glycyrrhiza uralensis) 혹은 근종 식물의 주요성분인 것으로 알려져 있다.
한편, 히스타민(histamine)은 생체내의 대표적인 홀몬으로서 아미노산인 히스티딘(histidine)으로부터 만들어지는데, 상기 히스타민은 주로 mast cells과 호염구(basophils) 또는 신경세포의 말단에서 분비되며 알레르기 반응, 말초혈관의 확장, 위산의 분비, 간에서의 글리코겐의 분해, 포도당의 합성, 신경전달 등 많은 생리적인 작용을 유도하는 물질이다. 또한, 히스타민의 생리작용은 작용을 나타내는 세포들의 표면에 존재하는 히스타민 수용체를 매개로 하여 이루어지며, 히스타민이 히스타민 수용체에 결합함으로써 신호가 전달되어 생리작용을 발현시키게 된다.
현재까지 학회에 보고된 바에 따르면 히스타민은 H1, H2, 그리고 H3의 세 가지 종류의 수용체를 거쳐 그 효과를 나타낸다.(Haaksma EEJ, Leurs R, and Timmerman H. 1990. Pharmacol.Ther. 47:73-104). 그에 따르면, 히스타민 H1수용체는 주로 알레르기 및 면역반응에 관한 작용을 보이며, H2수용체는 위장관계에서 위산분비를 유도하는 작용을 보임을 알 수 있으며, H3수용체는 아직 주된 생리작용이 밝혀지지 않고 있다. 따라서, 최근에는 히스타민의 과잉반응을 억제하는 물질을 개발함으로써 위궤양 치료제 또는 알레르기 치료제 등 다양한 생리활성 물질로 개발하고자 하는 노력이 많이 이루어지고 있다.
특히, 위산분비에 중요한 역학을 담당하는 히스타민 H2수용체는 히스타민과 결합하여 활성화되었을 경우 아데닐릴 사이클레이즈(adenylyl cyclaes)의 활성화를 가져와서 세포 내 신호전달을 유도하는 사이클릭 에이엠피(cAMP)의 농도를 증가시키고, 결국 단백질 인산화 효소 A(protein kinase A)를 활성화 시킨다. (Gespach C, Saal F, Cost H, and Abita JP. 1982. Mol. Pharmcol. 22:546-553 혹은 Sawutz DG, Kalinyak K, Whitsett JA, and Johnson CL. 1984. J. Pharmacol. Exp. Ther. 231:1-7).
한편, 소화성 궤양은 위장관부터 십이지장까지의 부분에 걸쳐 일어나는 궤양을 통칭하며 이중 위십이지장 궤양이 가장 일반적이고 임상적으로도 중요한 질병이다. 특히, 위십이지장 궤양의 치료가 늦어질 때 위암으로 발전하는 경우가 많다. 기본적으로 이들은 위장관을 헐게끔 공격하는 인자인 위산 및 펩신(pepsin)의 영향과 이들로부터 위벽을 보호하는 방어인자인 점막(mucosa)의 기능간에 평형이 깨어짐으로써 일어난다. 따라서, 이 두 조절인자에 대한 적절한 조치를 취하는 것이 가장 중요한 치료 방법으로 제시되고 있다.
현재까지 소화성 궤양의 치료에 이용되는 약물은 그 기작이 매우 다양하다.(Wollin A. 1987. Clin. Invest. Med. 10:209-214). 지난 수십년간 가장 많이 이용되어 온 약물은 제산제이다. 위산의 과다한 분비의 직접적인 중화를 통해 효과를 보이는 제산제들은 값이 싸고 또한 위장관내에서 흡수되지 않으면서 효과적인 제산작용을 보이는 약물들을 중심으로 개발되어 왔으며 대표적인 약물은 수산화알루미늄과 수산화마그네슘의 혼합물이다. 하지만, 이와 같은 수산화알루미늄과 수산화마그네슘의 혼합물은 소화액이 과다하게 분비되는 시간 동안을 포함하여 한밤중이나 새벽 등 시간대를 막론하고 계속 투여해야 하는 단점이 있다.
따라서, 보다 근본적으로 소화액의 유리를 막는 약물이 탐색되게 되어 이후 아세틸콜린 수용체 억제제 및 프로스타글란딘 수용체 활성 약물 등이 개발되었다. 하지만, 이들은 혈액 내 및 말초신경계에 두루 존재하여 작용할 수 있기 때문에 위장관이 아닌 다른 신경세포에 작용하여 나타나는 부작용으로 인해 널리 쓰이지는 않고 있다.
현재 가장 각광을 받는 약물은 위벽의 수소이온 운반체 (proton pump)억제제와 히스타민 H2수용체 억제제이다. 수소이온 운반체는 위벽에만 존재하여 위장관내로 수소이온을 퍼냄으로써 위산의 합성에 관여하는 단백질이다. (Sachs G, Spenney JG, Lewin M. 1978. Physiol. Rev. 58:106-173). 따라서 오메프라졸 (omeprazole)과 같은 수소이온 운반체 억제제를 이용할 경우 합성되는 위산의 양을 낮추어 줄 수 있다. 한편 히스타민 H2수용체는 다른 장기보다 위장관에서 두드러지는 효과를 보이며 위산 분비를 촉진시킨다. 따라서 히스타민 H2수용체 억제제는 별다른 부작용 없이 바로 위산 분비를 억제하는데 응용될 수 있다.
현재 개발되어 사용되는 히스타민 H2수용체 억제제는 비교적 적은 독성을 가짐에도 불구하고 임상에서 장기적으로 투여했을 경우 부작용이 나타나고 있는데(cimetidine의 경우 전체의 1-3% 정도), 그 부작용으로는 두통, 현기증, 및 구토 등의 중추신경관 관련 질환을 포함하여, 설사 및 피부 발적 같은 것이 보고되었다. 또한, 남성에 있어서 발기부전(impotence)과 정력감퇴(loss of libido) 및 유방형성(gynecomastia) 등이 유발될 수 있는 것으로 보고되었는데 이는 이들 계열의 약물이 에스트라디올(estradiol)의 수산화 반응(hydroxylation)을 억제하여 혈장 내 에스트라디올을 높이기 때문이라고 제시되고 있다.
결국, 소화성 궤양의 치료제가 다양한 계열의 약물로 개발되어 있으며 각각의 약물을 이용한 여러 치료 전략이 제시될 수 있음에도 불구하고 이들이 근본적으로 소화성 궤양의 상처부분을 아물게 하는 직접적인 치유효과를 보이는 것은 아니다. 이들 약물은 다만 위산으로부터의 공격을 억제하여 상처를 악화시키지 않게 유지하는 역할만을 담당할 뿐 궤양의 소멸은 결국 인체의 자연치유력에 의존할 수 밖에 없다. 이러한 한계는 소화성 궤양의 치료에는 대단히 오랜 시간동안의 약물 투여를 필요로 하게 한다.
따라서 약물의 단기적 급성 독성 뿐 만 아니라 만성 독성 및 그로 인한 부작용도 고려되어야 좋은 치료제가 될 수 있다.
기존의 히스타민 H2수용체 길항제들은 히스타민에 존재하는 이미다졸(imidazole) 구조를 모핵으로 이를 퓨란(furan) 혹은 타이아졸(thiazole)로 치환시켜 설계되었는데, 모핵과 비교적 유사한 시메티딘(cimetidine) 및 라니티딘(ranitidine)은 물론, 같은 모핵에 약간 변형된 잔기를 가진 약물, 예를 들어 파모티딘(famotidine) 혹은 니자티딘(nizatidine)등 에서도 상대적으로 덜하지만 여전히 무시할 수 없는 부작용이 있다고 알려져 있다. 이 때문에 새로운 모핵을 가진 히스타민 H2수용체 억제제의 필요성이 대두되고 있다.
본 발명은 상기와 같은 종래 기술의 문제점을 해결하기 위하여 안출한 것으로서, 그 목적은 리퀴리티제닌 또는 아이소리퀴리티제닌을 유효성분으로 하여 히스타민 H2수용체의 활성과 관련된 질환의 치료제로 사용될 수 있으며, 부작용이 적고, 안전성이 뛰어난 히스타민 H2수용체 길항제를 제공하는데 있다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 위장에서 위액분비에 중요한 역할을 하는 히스타민 H2수용체의 활성을 특이적으로 억제하여 위산분비를 억제함으로써 이를 통해 새로운 의학적 용도인 위십이지장궤양 치료제로서 유용하게 이용될 수 있는 히스타민 H2수용체 길항제를 제공하는데 있다.
도 1은 히스타민 H2수용체 활성에 따라 감초 물 추출물의 농도에 대한 사이클릭 에이엠피의 생성효과를 나타내는 그래프,
도 2a는 히스타민 H2수용체 활성에 따라 각각의 감초 물 추출물 분획에 대한 사이클릭 에이엠피의 생성효과를 비교하는 그래프,
도 2b는 도 2a에서 감초 물 추출물 분획 중 활성 성분을 포함하고 있는 분획 F11의 농도에 대한 사이클릭 에이엠피의 생성효과를 나타내는 그래프,
도 3은 히스타민 H2수용체 활성에 따라 억제제에 대한 리퀴리티제닌 및 아이소리퀴리티제닌의 사이클릭 에이엠피의 생성효과를 나타내는 그래프,
도 4는 인도메타신, 라니티딘, 및 아이소리퀴리티제닌의 처리에 의한 백서의 위궤양에 대한 치료효과를 나타내는 사진,
도 5는 인도메타신, 라니티딘, 및 아이소리퀴리티제닌의 투여에 의한 위궤양 유발 부위의 헤마톡실린-에오진 염색법에 의한 조직학적 형태를 비교한 사진.
도 6은 인도메타신에 의해 유발된 위궤양에 대한 라니티딘과 아이소리퀴리티제닌의 치료율을 나타내는 도표.
상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명의 제1 특징에 따르면, 하기의 화학식 1로 표시되는 리퀴리티제닌 (2,3-dihydro-7-hydroxy-2-(4-hydroxy-phenyl)-(S)-4H-1-benzopyran)을 유효성분으로 하여 위산분비를 억제함으로써 위장관 관련 질병의 치료제로 사용될 수 있는 히스타민 H2수용체 길항제를 제공한다.
화학식 1.
한편, 상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명의 제2 특징에 따르면, 하기의 화학식 2로 표시되는 아이소리퀴리티제닌 ((E)-1-(2,4-Dihydroxyphenyl)-3-(4-hydroxyphenyl2-propen1-one)을 유효성분으로 하여 위산분비를 억제함으로써 위장관 관련 질병의 치료제로 사용될 수 있는 히스타민 H2수용체 길항제를 제공한다.
화학식 2.
이때, 본 발명의 부가적인 특징에 따르면, 상기 리퀴리티제닌 또는 아이소리퀴리티제닌의 유효성분은 전체 조성물의 0.01 내지 99.99 중량%를 차지하는 것이 바람직하다.
또한, 본 발명의 다른 부가적인 특징에 따르면, 상기 리퀴리티제닌 또는 아이소리퀴리티제닌의 유효성분은 감초(Glycyrrhiza uralensis) 및 근종식물 추출물의 형태로 첨가되는 것이 바람직하다.
또한, 본 발명의 또 다른 부가적인 특징에 따르면, 상기 리퀴리티제닌 또는 아이소리퀴리티제닌의 50% 저해농도(50% inhibition concentration, IC50)는 약 100 μM 이고, 리퀴리티제닌 또는 아이소리퀴리티제닌의 화합물의 유효량은 0.1 ㎍/Kg 내지 1 g/Kg 인 것이 바람직하다. 특히, 300㎍/Kg 내지 1mg/Kg 인 경우가 가장 바람직하다.
본 발명의 상술한 목적과 여러 가지 장점은 이 기술분야에 숙련된 사람들에 의해, 후술되는 본 발명의 바람직한 실시예로부터 더욱 명확하게 될 것이다.
이하, 본 발명에 따른 히스타민 H2수용체 길항제의 바람직한 실시예들을 첨부도면을 참조하여 상세히 설명하고자 한다.
도 1은 히스타민 H2수용체 활성에 따라 감초 물 추출물의 농도에 대한 사이클릭 에이엠피의 생성효과를 나타내는 그래프이고, 도 2a는 히스타민 H2수용체 활성에 따라 각각의 감초 물 추출물 분획에 대한 사이클릭 에이엠피의 생성효과를 비교하는 그래프이고, 도 2b는 도 2a에서 감초 물 추출물 분획 중 활성 성분을 포함하고 있는 분획 F11의 농도에 대한 사이클릭 에이엠피의 생성효과를 나타내는 그래프이고, 도 3은 히스타민 H2수용체 활성에 따라 억제제에 대한 리퀴리티제닌 및 아이소리퀴리티제닌의 사이클릭 에이엠피의 생성효과를 나타내는 그래프이다.
또한, 도 4는 인도메타신, 라니티딘, 및 아이소리퀴리티제닌의 처리에 의한 백서의 위궤양에 대한 치료효과를 나타내는 사진이며, 도 5는 인도메타신, 라니티딘, 및 아이소리퀴리티제닌의 투여에 의한 위궤양 유발 부위의 헤마톡실린-에오진 염색법에 의한 조직학적 형태를 비교한 사진이다.
먼저, 본 발명자들은 한의학에서 널리 처방되어 왔던 한약재인 감초에서 히스타민 H2수용체 억제물질로 작용할 수 있는 리퀴리티제닌과 그 유도체인 아이소리퀴리티제닌을 발견하여 이들이 히스타민 H2수용체가 전하는 아데닐릴 사이클레이즈의 활성을 억제함을 확인하였으며, 또한 이들이 백서(rat)에서 위십이지장궤양에 대한 치료효과가 있음을 확인하였다. 따라서, 개괄적이나마 한약재가 가진 독성 및 투여 농도, 투여 용량의 한계 등에 대한 기본적인 데이터(data)가 확립되게 되었다. 상기에서 화학식 1 또는 화학식 2의 화합물은 일반적인 공지의 화학합성 방법에 의해 제조될 수 있으나, 한약재인 감초로부터 추출하여 이용하는 경우 안전성 및 비용면에서 화학합성에 의한 경우보다 유리할 수 있다.
본 발명의 실시예에서는 한약재를 대상으로 히스타민 H2수용체에 길항 활성을 가지는 화합물을 탐색하였다. 인간 백혈구전구세포(human promyelocytoma cell) 즉, HL-60 세포는 위장관에 분포하는 히스타민 H2수용체와 동일한 히스타민 H2수용체를 가지고 있어서 동 수용체의 활성 검색을 위한 좋은 모델세포가 될 수 있다. 사이클릭 에이엠피의 생성량은 먼저 감초 혹은 기타 검체를 먼저 처리한 후 히스타민을 처리하여 히스타민 H2수용체 활성화에 의한 사이클릭 에이엠피의 생성을 유도하고 곧 세포를 용해시켜 가용성인 사이클릭 에이엠피를 추출한 다음, 방사능으로 표지된 [3H] 사이클릭 에이엠피와 함께 사이클릭 에이엠피 결합단백질과의 경쟁적 결합반응을 수행하여 정량하였다.
본 발명자가 163종의 한약재를 이용하여 열수추출물을 얻은 후, 이들을 검체로 하여 인간 백혈구전구세포 HL-60 세포에서 히스타민 H2수용체의 활성화에 의한 사이클릭 에이엠피의 생성을 억제시키는 물질을 찾은 결과, 감초가 우수한 효과를 나타냄을 알 수 있었다. 감초 추출물은 농도의존적으로 히스타민 H2수용체의 활성화를 억제하였다.
감초의 추출물을 여러 분획으로 나누어 히스타민 H2수용체의 길항 효과를 추적하였으며 최종적으로 활성을 가지는 분획을 얻었다. 이 분획 역시 농도의존적으로 히스타민 H2수용체의 활성을 억제하였다.
이러한 억제효과는 히스타민 H2수용체를 가지지 않는 다른 모델 세포에서는 보이지 않는데, 신경세포인 PC12세포에서 아데닐릴 사이클레이즈(adenylyl cyclase)를 활성화시키는 포스콜린(forskolin)이나 아데노신 수용체를 활성화시킴으로써 사이클릭 에이엠피를 증가시키는 시지에스21680(CGS21680)의 효과에는 감초추출물이 아무런 효과를 보이지 않음을 확인하였다.
활성을 가지는 분획에 대한 구조분석 결과 이들이 리퀴리티제닌임이 밝혀졌으며 이의 억제효과를 확인하였다. 또한, 이들과 함께 존재하는 아이소리퀴리티제닌 역시 농도의존적으로 히스타민 H2수용체에 대해 억제작용을 보였다. 따라서 리퀴리티제닌과 그 유도체인 아이소리퀴리티제닌은 히스타민 H2수용체에 대해 억제작용을 보였다.
결국, 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 리퀴리티제닌과 그 유도체인 아이소리퀴리티제닌의 히스타민 H2수용체 길항제로 작용하여 위산분비를 억제하며, 히스타민 H2수용체가 활성화되면 그 세포 내 농도가 증가하는 사이클릭 에이엠피의 세포 내 농도를 감소시킴으로써 위십이지장궤양의 치료약물로 이용될 수 있는 특성을 가졌다고 할 수 있다.
상기와 같은 실험으로 리퀴리티제닌과 아이소리퀴리티제닌의 위십이지장궤양 치료약물로서의 가능성을 얻은 후 이를 생체실험을 이용하여 검증하였다. 실험실시약으로 구입할 수 있는 아이소리퀴리티제닌을 백서에 경구 투여한 뒤 인도메타신 (indomethacin) 투여로 유도된 위궤양에 대한 치유효과를 셰이법(Shay's method)에 의하여 실험하였다. 그 결과, 아이소리퀴리티제닌은 기존 알려진 히스타민 H2수용체 길항제인 라니티딘과 마찬가지로 궤양에 대한 회복작용을 보였다. 따라서 리퀴리티제닌과 아이소리퀴리티제닌의 위십이지장궤양 치료약물로서의 기능성을 가지고 있다고 할 수 있다.
이하, 본 발명에 의한 실시예에서의 실험과정을 좀더 상세히 설명하고자 한다.
<실시예 1>
감초를 3시간 이상 물중탕하여 열수 추출물을 얻은 다음, 이의 농축액을 취하여 히스타민 H2수용체의 활성화에 따른 사이클릭 에이엠피 생성량에 미치는 영향을 검사하였다. 혈구전세포 HL-60 세포에 감초의 물추출물을 전처리한 뒤 10분 후 히스타민을 처리하고 15분 후 세포를 융해시켜 세포질액을 취하였다. 세포 용해 전의 모든 실험 용매에는 사이클릭 에이엠피의 분해를 막는 아이비엠엑스(IBMX)를 함유하게끔 하였다.
그후, 세포질액을 섭씨 60도 오븐에서 건조시킨 뒤 이를 생리완충액 200㎕로 재용해 시킨 뒤 이를 방사능 표지된 사이클릭 에이엠피와 사이클릭 에이엠피 결합단백질을 함께 넣고 2시간 섭씨 4도에 냉장보관하여 반응시킨다. 이후, 결합단백질에 결합되지 않은 사이클릭 에이엠피를 활성탄 분말을 넣어 흡착, 원심분리하고 상등액을 취하여 액상 폭광 계수기(liquid scintillation counter)로 방사능을 측정함으로써 결합단백질에 결합된 방사능 표지된 사이클릭 에이엠피의 양을 측정한다. 이러한 과정에서 농도를 알고 있는 사이클릭 에이엠피를 대조군으로 하여 각각의 방사능을 구한 뒤 원하는 검체의 방사능을 이들과 비교함으로써 사이크릭 에이엠피의 생성량을 측정한다.
도 1은 히스타민 H2수용체 활성에 따라 감초 물 추출물의 농도에 대한 사이클릭 에이엠피의 생성효과를 정량적으로 나타내는 그래프이다. 감초추출물을 처리하지 않았을 때의 히스타민의 효과 및 히스타민의 처리 없이 생성되는 사이클릭 에이엠피의 양을 함께 표시하였다. 감초 물추출물의 농도가 증가함에 따라 히스타민의 사이클릭 에이엠피 생성효과가 억제됨을 알 수 있다.
<실시예 2>
상기 실시예 1에서 검증된 감초 시료를 컬럼 크로마토그래피법(column chromatography)으로 성분을 분리한 뒤 각 분획의 효과를 검증하였다. 이때, 검증방법은 실시예 1과 동일한 방법으로 이용하였다. 수차례 반복적인 분획의 활성평가를 통해 활성성분을 추적하였으며 도 2a가 그 대표적인 예이다. 이 분획중 활성이 최종적으로 검증된 성분 분획의 효과를 도 2b에 표시하였다. 해당 분획 역시 감초물추출물과 같이 히스타민의 사이클릭 에이엠피 생성효과를 억제함을 알 수 있으며 30㎍/ml 의 농도에서 100% 억제 효과를 나타내었고 3㎍/ml 의 농도에서 50% 억제효과를 나타내었다.
<실시예 3>
감초 물추출물 대신 리퀴리티제닌과 아이소리퀴리티제닌(Sigma, 미국)을 이용하여 실시예1과 동일한 방법으로 실험하였다. 그 결과 도 3에서 보이는 바와 같이 각 성분이 감초추출물 분획과 동일한 방법으로 히스타민 H2수용체 활성에 따른 사이클릭 에이엠피의 생성효과를 억제함을 알 수 있었다. 리퀴리티제닌과 아이소리퀴리티제닌은 비슷한 정도의 효과를 가지고 있었으며 300μM 내지 1mM의 농도에서 100% 억제 효과를 나타내었고, 100μM의 농도에서 50% 억제효과를 나타내었다.
<실시예 4>
도 4는 인도메타신, 라니티딘, 및 아이소리퀴리티제닌의 처리에 의한 백서의 위궤양에 대한 치료효과를 나타내는 사진이다. 24시간 절식 시킨 백서(250g)에 생리 식염수(A), 라니티딘(5mg/kg, B) 및 아이소리퀴리티제닌(100mg/kg, C)을 경구로 투여한 다음, 1시간이 경과한 후 백서를 개복하여 유문부를 결찰하고 봉합한다. 30분이 경과하면 인도메타신 (40mg/kg)을 경구로 투여하여 위산분비를 촉진시켜 위궤양을 유도한다(A). 이때, 라니티딘(5mg/kg, B) 또는 아이소리퀴리티제닌(100mg/kg, C)을 함께 투여할 경우, 아이소리퀴리티제닌에 의한 위궤양 치료정도가 라니티딘의 효과와 유사하게 나타났다.
<실시예 5>
도 5는 인도메타신, 라니티딘, 및 아이소리퀴리티제닌의 투여에 의한 위궤양 유발 부위의 헤마톡실린-에오진 염색법에 의한 조직학적 형태를 비교한 사진이다.궤양의 크기를 잰 후, 위를 4% 포르말린에 넣어 하루동안 고정시킨 다음, 인도메타신에 의해 유발된 위병변 부위와 라니티딘, 아이소리퀴리티제닌이 투여된 위의 조직 일부분을 파라핀 포매법을 이용해 고정을 시킨다. 그후, 마이크로톰(microtome)을 이용해 일정 두께로 잘려진 조직을 슬라이드글라스 위에 고정시킨 다음, 헤마톡실린-에오진을 이용해 염색을 시킨다. 궤양이 유발된 조직의 경우(A), 위점막층에 손상이 가해지고 심할 경우, 근육층까지 조직의 손상이 나타났다. 이러한 손상된 위 점막층은 라니티딘이나 아이소리퀴리티제닌에 의해 일부분만 손상이 일어났으며, 대부분은 완전한 형태를 나타내었다.
<실시예 6>
도 6은 백서에서 인도메타신에 의해 유발되는 위궤양에 대한 라니티딘과 아이소리퀴리티제닌의 치료 정도를 나타낸 도표이다.
백서의 위를 대만부를 경계로 절단한 다음, 인도메타신에 의해 유발된 위궤양의 병변 부위와 라니티딘, 아이소리퀴리티제닌에 의해 치료된 궤양의 병변 부위를 모눈종이를 이용해 계산한다. 계산된 병변의 크기는 투여된 약물의 치료 정도를 확인하기위해 다음과 같은 계산식에 적용이 된다.
치료율(%) = (대조군의 위병변면적(mm2) - 약물투여군의 위병변면적(mm2)/대조군의 위병변면적(mm2)) X 100
도 6은 인도메타신에 의해 유발된 위궤양이 라니티딘과 아이소리퀴리티제닌에 의해 치료되는 정도를 보여주는 결과로, 라니티딘의 경우, 86 - 99.6 %의 치료율을 나타냈으며, 아이소리퀴리티제닌의 경우, 80 - 95.65 %의 치료율을 나타내었다.
한편, 본 발명은 비독성, 불활성, 제약상 적합한 부형제 이외에, 본 발명에 따른 1종 이상의 화합물을 함유하거나, 또는 본 발명에 따른 1종 이상의 유효화합물로 이루어질 수 있다. 본 발명의 화합물은 임상투여시에 경구 또는 비경구로 투여가 가능하며 일반적인 의약품제제의 형태로 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 투약 단위의 제형들을 포함하는데, 제형은 개별 투약 형태, 예를 들면 정제, 피복 정제, 캡슐제, 환제, 좌약 및 앰플제로 존재하고, 약제 중 유효화합물의 함량은 개별 투약량의 분율 또는 배수에 해당한다. 비독성이고 불활성인 제약상 적합한 부형제는 고상, 준고상 또는 액상 회석제, 충전제 및 모든 유형의 제형 보조물을 사용할 수 있다. 이때, 바람직한 제형으로는 정제, 피복정제, 캡슐제, 환제, 과립제, 좌약, 액제, 현탁액제 및 에멀전제, 페이스트제(pastes), 연고제, 겔제, 크림제, 로션제, 산제 및 분무제 등이 포함된다.
본 발명은 특정의 실시예와 관련하여 도시 및 설명하였지만, 첨부된 특허청구범위에 의해 나타난 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 한도 내에서 다양한 개조 및 변화가 가능하다는 것을 당 업계에서 통상의 지식을 가진 자라면 누구나 쉽게 알 수 있을 것이다.
이상에서 설명한 바와 같은 본 발명의 히스타민 H2수용체 길항제는 위산분비를 억제함으로써 새로운 의학적 용도인 위장관 관련 위십이지장궤양 치료제로서 유용하게 이용될 수 있는 효과가 있다.
또한, 본 발명의 유효성분으로 사용되는 리퀴리티제닌 및 아이소리퀴리티제닌은 히스타민 H2수용체에 특이적으로 작용하여 사이클릭 에이엠피 생성을 억제하므로 부작용의 가능성이 적으며, 안전성이 높은 히스타민 H2수용체 활성과 관련된 질병의 치료제로 유용하게 이용될 수 있는 효과가 있다.

Claims (7)

  1. (a) 히스타민 H2 수용체 길항제로 작용하는 하기 화학식 1로 표시되는 리퀴리티제닌 (2,3-dihydro-7-hydroxy-2-(4-hydroxy-phenyl)-(S)-4H-1-benzopyran)의 약제학적 유효량; 및
    (b) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 위십이지장궤양 예방 또는 치료용 약제학적 조성물:
    화학식 1
  2. (a) 히스타민 H2 수용체 길항제로 작용하는 하기 화학식 2로 표시되는 아이소리퀴리티제닌 ((E)-1-(2,4-Dihydroxyphenyl)-3-(4-hydroxyphenyl2-propen1-one)의 약제학적 유효량; 및
    (b) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 위십이지장궤양 예방 또는 치료용 약제학적 조성물:
    화학식 2
  3. 삭제
  4. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 리퀴리티제닌 또는 아이소리퀴리티제닌은 감초 (Glycyrrhiza uralensis) 또는 근종식물 추출물의 형태로 첨가되는 것을 특징으로 하는 위십이지장궤양 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
  5. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 리퀴리티제닌 또는 아이소리퀴리티제닌의 히스타민 H2 수용체에 대한 50% 저해농도 (50% inhibition concentration, IC50)는 100 μM 인 것을 특징으로 하는 위십이지장궤양 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
  6. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 리퀴리티제닌 또는 아이소리퀴리티제닌의 약제학적 유효량은 0.1 ㎍/Kg 내지 1 g/Kg 인 것을 특징으로 하는 위십이지장궤양 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
  7. 제 6 항에 있어서, 상기 리퀴리티제닌 또는 아이소리퀴리티제닌의 약제학적 유효량은 300 ㎍/Kg 내지 1 mg/kg인 것을 특징으로 하는 위십이지장궤양 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
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