KR100392515B1 - The method and the apparatus for production of transplants using microhydroponic culture system - Google Patents

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Abstract

본 발명은 마이크로 하이드로포닉 컬쳐 시스템(Microhydroponic culture system)을 이용한 기내 소식물체의 종묘 생산 장치 및 생산 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a seedling production apparatus and production method of the in-flight newsletter using a microhydroponic culture system.

더욱 상세하게는 생장점 배양을 통하여 증식단계를 거쳐 최종 발근 및 순화 과정만을 남긴 소식물체의 멀티플 슈티(multiple shoots)를 마이크로 컷팅(microcutting)하여 식물체 지지물에 치상하여 컬쳐 박스로 이식하는 단계와,More specifically, micro-cutting multiple shoots of the news material, which leaves only the final rooting and purifying process through the growth point culture, leaving the final rooting and purifying process, and implanting them into the culture box by implanting them into the plant support;

상기 컬쳐 박스로 이식한 소식물체를 온도 24±4℃, 광도(PPF) 110∼350μ㏖ㆍm-2ㆍs-1, CO2350∼2000ppm의 조건에서 산소와 배양액을 공급해주며 상면부를 다공성 랩으로 덮은 배양기(cultural box) 내에서 생육 중반기까지 배양하는 단계와,The news material implanted into the culture box was supplied with oxygen and a culture medium at a temperature of 24 ± 4 ° C. and a brightness (PPF) of 110 to 350 μmol · m −2 · s −1 and CO 2 of 350 to 2000 ppm, and the upper surface of the porous wrap Culturing until the middle of the growth in a culture box (covered with),

상기 배양된 생육 중반기의 소식물체를 랩을 제거하고 광도350μ㏖ㆍm-2ㆍs-1에서 생육시켜 출하하는 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 것으로서, 기존의 기내 배양에 의한 종묘 생산 방법에 비해 노동력 절감 효과가 뛰어나며 순화 과정의 실패를 방지할 수 있으며 또한 기내 배양시 광합성 환경을 제공함으로써 양질의 우량묘를 제공할 수 있도록 한 것이다.The cultivated mid-term growth material of the medium is characterized in that it comprises the step of removing the wrap and growing at a brightness of 350μmol · m −2 · s −1 and shipping, compared to the conventional seedling production method by in-flight culture The labor saving effect is excellent, and it is possible to prevent the failure of the purification process and to provide high quality seedlings by providing photosynthetic environment during in-flight cultivation.

Description

식물 조직배양과 수경재배를 이용한 기내 종묘 생산 방법 및 생산 장치{The method and the apparatus for production of transplants using microhydroponic culture system}The method and the apparatus for production of transplants using microhydroponic culture system}

본 발명은 식물 조직배양과 수경재배(Microhydroponic Culture System)를 이용한 기내 작은 식물체의 종묘 생산 장치 및 생산 방법에 관한 것으로서, 종묘 생산 작업에 필요한 노동력 절감 효과를 얻을 수 있는 동시에 양질의 우량묘를 생산할 수 있도록 한 것이다.The present invention relates to a seedling production apparatus and a method for producing small plants in-flight using plant tissue culture and hydroponic culture (Microhydroponic Culture System), which can produce high quality seedlings while attaining labor saving effect required for seedling production work. It would be.

식물 조직 배양에 의한 종묘 생산은 원예 산업에서 매우 중요하면서도 노동력이 많이 소요되는 어렵고 힘든 작업이다. 일반적으로 조직 배양에 의한 종묘 생산은 원하는 특정 유전 자원으로부터 건전한 cell 또는 생장점의 기내 획득으로부터 시작하여 원하는 수량만큼의 증식 과정을 거친 후 multiple shoots로부터 single shoot로 분리하여 발근 배지에 치상하고, 순화까지 완료하는데 총 345.75명의 인력이 필요하게 된다. 이 때 여러가지 공정 중에서 발근과 순화에만 투여되는 노동력이 290.5명으로 총 노동력의 84.18%라는 대부분의 노동력이 이 기간에 집중적으로 필요하게 된다.Seed production by plant tissue culture is a very important and labor intensive and laborious task in the horticultural industry. In general, seedling production by tissue culture starts from in-flight acquisition of healthy cells or growth points from specific genetic resources desired, proceeds with the desired number of growth processes, separates them from multiple shoots into single shoots, and finishes them on rooting medium and completes the purification. A total of 345.75 people will be required. At this time, among the various processes, only 290.5 workers are given only to rooting and purifying, and most of the labor force (84.18% of the total work force) will be concentrated during this period.

또한 증식, 발근 과정을 마친 소식물체는 포장에 정식되기 위하여 기외의 환경조건에 순화시켜야 된다. 그러나 조직 배양 식물은 99%가 넘는 습도와 고농도의 영양분, 식물호르몬, 비타민, 심지어는 식물의 최종 대사물인 당분까지 공급되어수동적으로 배양기내의 양분을 흡수하여 성장한 식물로써 공변세포 등의 식물체의 기관이 완전하게 발달되지 못한 불완전한 식물체로 배양병 밖으로 꺼냈을 때 적응, 즉 순화하지 못하고 많은 수의 식물이 고사하는 경우가 발생되어 조직배양에 의한 종묘 생산 자체를 어렵게 하기도 한다.In addition, news materials that have grown and rooted must be purified to environmental conditions outside of the packaging to be packaged. Tissue cultured plants, however, are supplied with over 99% humidity, high levels of nutrients, phytohormones, vitamins, and even sugar, the final metabolite of plants, to grow and absorb nutrients in the incubator. When taken out of the culture bottle as an incomplete plant that is not fully developed, adaptation, that is, it may not be purified and kills a large number of plants, may make the production of seedlings by tissue culture difficult.

따라서 보다 경제적으로 건전한 우량묘를 생산할 수 있는 생산체계를 확립할 필요성이 대두되고 있는 실정이다.Therefore, there is a need to establish a production system that can produce more economically sound blue seedlings.

본 발명은 상기의 사항을 고려하여 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 멀티플 슈티(multiple shoots)로부터 분리한 소식물체의 발근, 생육, 순화를 한 공정(one-step)으로 진행하기에 적합한 식물체 지지대 및 배양 배양기를 제공하는데 있다.The present invention has been made in view of the above matters, and an object of the present invention is a plant support suitable for proceeding rooting, growing, and purifying a news object separated from multiple shoots in a one-step. And a culture incubator.

본 발명의 다른 목적은 소식물체의 발근, 생육, 순화에 적합한 배양액의 조건 및 배양 방법을 규명하여 양질의 우량묘를 생산할 수 있는 종묘 생산 방법을 제공하는 데 있다.It is another object of the present invention to provide a seedling production method capable of producing high quality seedlings by identifying the conditions and culture methods of the culture medium suitable for rooting, growing, and purifying the news material.

도1은 본 발명에 따른 배양배양기의 사시도.1 is a perspective view of a culture incubator according to the present invention.

도2는 본 발명에 따른 배양배양기의 단면 구성도.Figure 2 is a cross-sectional view of the culture incubator according to the present invention.

도3은 본 발명에 따른 배양배양기의 지지물 사용상태 예시도.Figure 3 is an illustration of the use state of the support of the culture incubator according to the present invention.

<도면의 주요부분에 대한 부호 설명><Description of Signs of Major Parts of Drawings>

10:배양기(cultural box) 11:몸체10: cultural box 11: body

12:환기공(Hole for a air exchanges) 13:지지물12: Hole for a air exchanges 13:

13':알루미늄 매트 13":플러그 트레이(plug tray)13 ': aluminum mat 13 ": plug tray

14:배양액 15:밀리포어 랩 커버(Millipore wrap cover)14: Culture medium 15: Millipore wrap cover

16:공기조절기(Flow meter) 17:분배기16: Air meter 17: Distributor

18:절결부 19:펌프18: notch 19: pump

20:소식물체20: Small plants

이와 같은 목적을 달성하기 위해서 본 발명에 따른 마이크로 하이드로포닉 컬쳐 시스템(Microhydroponic culture system)을 이용한 기내 소식물체의 종묘 생산 방법은, 생장점 배양을 통하여 증식단계를 거쳐 최종 발근 및 순화 과정만을 남긴 소식물체의 멀티플 슈티(mutiple shoots)를 마이크로 컷팅(microcutting)하여 식물체 지지물에 치상하여 컬쳐박스로 이식하는 단계와,In order to achieve the above object, the seedling production method of the in-flight news material using the microhydroponic culture system according to the present invention, the growth of the news material through the growth stage through the growth point, leaving only the final rooting and purifying process of the Microcutting multiple shoots and implanting them into a culture box on the plant support;

상기 컬쳐박스로 이식한 소식물체를 온도 24±4℃, 광도(PPF) 110∼350μ㏖ㆍm-2ㆍs-1, CO2350∼2000ppm의 조건에서 산소와 배양액을 공급해주며 상면부를 다공성 랩으로 덮은 배양기(cultural box) 내에서 생육 중반기까지 배양하는 단계와,The news material implanted into the culture box was supplied with oxygen and a culture medium at a temperature of 24 ± 4 ° C. and a brightness (PPF) of 110 to 350 μmol · m −2 · s −1 and CO 2 of 350 to 2000 ppm, and the upper surface of the wrap was porous. Culturing until the middle of the growth in a culture box (covered with),

상기 배양된 생육 중반기의 소식물체를 랩을 제거하고 광도350μ㏖ㆍm-2ㆍs-1에서 생육시켜 출하하는 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 것으로서, 기존의 기내 배양에 의한 종묘 생산 방법에 비해 노동력 절감 효과가 뛰어나며 순화 과정의 실패를 방지할 수 있으며 또한 기내 배양시 광합성 환경을 제공함으로써 양질의 우량묘를 제공할 수 있도록 한 것이다.The cultivated mid-term growth material of the medium is characterized in that it comprises the step of removing the wrap and growing at a brightness of 350μmol · m −2 · s −1 and shipping, compared to the conventional seedling production method by in-flight culture The labor saving effect is excellent, and it is possible to prevent the failure of the purification process and to provide high quality seedlings by providing photosynthetic environment during in-flight cultivation.

이하 본 발명을 상세하게 설명하면 다음과 같다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

(1) 배양기(cutural box) 및 소식물체 지지 매트의 구성(1) Construction of cutural box and news carrier support mat

일측 몸체(11)에 다수의 환기공(12)이 형성되고 투광성이 높은 배양기(cultural box)(10)와,A plurality of ventilation holes 12 are formed in one body 11 and a high light transmitting culture box 10,

상기 배양기(10) 바닥으로부터 일정높이에 소식물체 치상을 위해 설치된 지지 매트(13)와,A support mat 13 installed for tooth placement at a predetermined height from the bottom of the incubator 10,

상기 배양기(10) 바닥과 지지물(13) 사이에 충만되는 배양액(14)과,A culture solution 14 filled between the bottom of the incubator 10 and the support 13;

상기 배양기(10) 상단부에 씌워지는 미세한 다공성의 밀리퍼 랩(millipore wrap)커버(15)와,And a microporous millipore wrap cover (15) is covered on the upper end of the incubator (10),

상기 배양기(10) 일측에는 공기조절기(16)와 공기 펌프(19)가 구비되어 분배기(17)를 통하여 배양액(14)에 산소를 공급할 수 있도록 된 구성이다.One side of the incubator 10 is provided with an air conditioner 16 and an air pump 19 to supply oxygen to the culture medium 14 through the distributor 17.

상기 배양기 내의 배양액(14)에 떠있는 지지물(13)는 십자모양의 칼집내 절결부(18)를 형성하여 작은 소식물체(20)가 지지되어 생육될 수 있도록 한 구성하였다.The support 13 floating in the culture solution 14 in the incubator was formed so that the small news object 20 could be supported and grown by forming a cross-shaped cutout 18.

본 발명의 다른 실시예로서, 상기 지지물(13)는 보온성이 높은 알루미늄 매트(13') 또는 플러그 트레이(plug tray)(13")로 구성하였다.In another embodiment of the present invention, the support 13 is composed of a high thermal insulation aluminum mat (13 ') or a plug tray (plug tray) (13 ").

이와 같이 구성된 본 발명의 배양기(기내) 바닥에는 식물체의 종류에 따라서 다소차이는 있지만 배양액을 바닥으로부터 3㎝∼6㎝정도의 높이로 배양액(14) 저장하고 그 위에 십자 형태로 칼집이 형성된 지지물(13)를 뛰운다.The bottom of the incubator (inflight) of the present invention configured as described above is slightly different depending on the type of plant, but the culture medium 14 is stored at a height of about 3 cm to 6 cm from the bottom, and a support formed with a sheath in a cross shape thereon ( Run 13).

상기 지지물(13)에 다수 형성된 십자형태의 절결부(18)에는 소식물체(20)을 끼워 지지토록 하며 소식물체가 성장하여 줄기가 굵어지더라도 십자형태로 칼집으로 형성된 절결부(18)가 벌어지게 되므로 소식물체는 생육시 전혀 방해를 받지 않는다.In the cross-shaped cutout portion 18 formed in the support 13, the news object 20 is sandwiched and supported so that the news object grows and the stem grows thicker. Newspapers are not disturbed at all when they are grown.

또한 본 발명의 배양액(14)은 소식물체가 생육됨에 따라서 배양액과 산소를 펌프(19)로 공급할 수 있다.In addition, the culture solution 14 of the present invention can supply the culture solution and oxygen to the pump 19 as the news material is grown.

상기 배양기(10) 내의 공기량과 온도는 공기조절기(16)로 항상 일정하게 유지하게 된다.The amount and temperature of air in the incubator 10 is always kept constant by the air regulator 16.

상기 본 발명의 구성에 따라서 종묘 생산방법을 설명하기로 한다.Seedling production method according to the configuration of the present invention will be described.

(2) 종묘 생산 방법(2) seedling production method

생장점 배양을 통하여 증식단계를 거쳐 최종 발근 및 순화 과정만을 남긴 소식물체의 멀티플 슈티(multiple shoots)를 마이크로 컷팅(microcutting)하여 상기기재한 바와 같은 알루미늄 매트(aluminium mat)(13')로 이루어진 식물체 지지물에 치상하여 거베라 배양액(Electric Conductivity(이하 EC) 2.0)중 어느 하나의 컬쳐박스로 이식한다.Plant support made of an aluminum mat (13 ') as described above by microcutting multiple shoots of the news material, which leaves only the final rooting and purifying process through the growth stage through the growth point culture. It is then implanted into one of the culture boxes of Gerbera culture (Electric Conductivity (EC) 2.0).

상기 컬쳐박스로 이식한 소식물체를 온도 24±4℃, 광도(PPF) 110∼350μ㏖ㆍm-2ㆍs-1, CO2350∼2000ppm의 조건에서 산소와 배양액(14)을 공급해주면서 기내 환경 조성을 위해 상면부를 다공성 밀리포어 랩 커버(15)로 덮은 배양기(cultural box)(10) 내에서 생육 중반기까지 배양한다.The news material implanted into the culture box was supplied with oxygen and a culture medium 14 at a temperature of 24 ± 4 ° C., a light intensity (PPF) of 110 to 350 μmol · m −2 · s −1 , and CO 2 350 to 2000 ppm. In order to create an environment, the upper surface is incubated in the culture box 10 covered with the porous millipore wrap cover 15 until the middle of the growth period.

마이크로 커팅(Microcutting)한 기내 소식물체의 발근, 생육, 순화를 한 공정(one-step)으로 진행하기 위해서는 배양기(cultural box)(10)에 소식물체를 치상하여 발근과 지상부 생육이 활발히 진행되는 배양 중기까지는 기내배양(in vitro)의 환경을 조성해 주어야 하고, 지상부, 지하부 생육이 어느정도 진행된 생육 후반기에는 포장 이식을 위하여 외부 환경과 같은 기외배양(ex vitro) 환경을 조성해 줄 수 있어야 한다.In order to progress the rooting, growth, and purifying of the microcutting in-flight newsletter in a one-step process, the culture is carried out in a culture box 10 to actively root and grow the ground. By mid-term, the in vitro environment should be created, and in the later stages of growth in the above-ground and underground areas, it should be possible to create an ex-vitro environment such as the external environment for packaging transplantation.

기존의 조직배양에 의한 종묘 생산은 마이크로 컷팅(microcutting)한 소식물체의 발근을 위하여 고농도의 양분과 식물호르몬, 비타민, 당 등이 첨가된 작은 배양병에 무균 상태로 치상하면서 이루어지게 되는데, 이러한 방법으로 종묘를 생산할 경우 소식물체가 능동적인 광합성 작용없이 배양병에 존재하는 양분을 섭취함으로써 생장할 수 있도록 고안되어 있으므로 생산비가 많이 들 뿐 아니라 포장 정식을 위한 순화 과정에서 많이 고사하는 경우가 발생되며 많은 노동력이 필요하고 이러한 대부분의 노동력이 발근과 순화 작업에 집중되어 있다.Seedling production by conventional tissue culture is carried out aseptically in small culture bottles containing high concentrations of nutrients, plant hormones, vitamins and sugars for rooting of microcutting news materials. In the case of seedling production, the news material is designed to grow by ingesting the nutrients present in the culture bottle without active photosynthesis. Labor is needed and most of this work is concentrated on rooting and purifying.

따라서 본 발명에서는 광합성에 의한 능동적인 생장을 할 수 있는 조건을 제공하기 위하여 당과 비타민 공급을 제거하고 EC 농도를 적정 수준으로 낮추고, 이산화 탄소(CO2)공급 및 광도를 높여줌으로써 소식물체가 능동적으로 광합성을 할 수 있도록 환경 조건을 만들어 발근 및 지상부 생육이 어느 정도 진행되었을 때 포장으로의 이식을 위한 순화를 동시에 진행할 수 있도록 하였다.Therefore, in the present invention, to provide conditions for active growth by photosynthesis, by removing sugar and vitamin supply, lowering the EC concentration to an appropriate level, increasing the carbon dioxide (CO 2) supply and brightness, the news material is active. Environmental conditions were created to enable photosynthesis, so that when rooting and ground growth were progressed to some degree, purifying for transplantation into the pavement was carried out simultaneously.

상기 배양된 생육 중반기의 소식물체를 외기에 서서히 순화시킨 후 출하하게 되는데, 생육 후반기의 순화 과정을 서서히 진행시키기 위해서는 기내 배양 환경을 조성해 주기 위하여 배양기(culture box) 상면을 덮어 주었던 다공성 밀리포어 랩 커버를 조금씩 찢어주는 간단한 작업으로 순화를 완료할 수 있다.The culture medium in the mid-growth of the growth material is gradually purified to the outside and then shipped, in order to proceed slowly in the second half of the growth process, the porous millipore wrap cover that covered the top of the culture box (culture box) to create an in-flight culture environment You can complete the purification with a simple operation that tears off a bit.

이와 같은 순화 과정은 약 2일간의 기간이 소요되며 총 생산 기간을 간단히 도식화 하면 하기 표 4와 같다.This purification process takes a period of about two days, and simply summarize the total production period is shown in Table 4 below.

이하 실시예를 통하여 본 발명을 상세하게 설명하면 다음과 같다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to the following Examples.

[실시예 1] 마이크로 하이드로포닉 컬쳐 시스템(Microhydroponic culture system)(in-ex vitro)과 기존의 조직배양(in vitro)에 의한 식물 생육 비교Example 1 Comparison of Plant Growth by Microhydroponic Culture System ( in-ex vitro ) and Existing Tissue Culture ( in vitro )

본 발명에 따른 종묘 생산 방법에 의하여 생산된 식물체의 생육 상태를 비교하기 위하여 거베라 508(타마라)와 512(라코) 2품종을 이용하여 하기 표 5의 조건으로 실험을 실시하여 기내배양(in vitro)과 마이크로 하이드로포닉 컬쳐 시스템(Microhydroponic culture system)(in-ex vitro)에 의한 발근 및 생장율을 조사하여 표 6에 나타내었다.In order to compare the growth of the plants produced by the seedling production method according to the present invention using two gerbera 508 (Tamara) and 512 (Laco) varieties, the experiments were carried out under the conditions of Table 5 below in vitro culture ( in vitro ) Table 6 shows the rooting and growth rates of the microhydroponic culture system and the microhydroponic culture system ( in-ex vitro ).

상기 표 6의 결과를 살펴보면 마이크로 하이드로포닉 컬쳐 시스템(Microhydroponic culture system)의 경우가 거베라 508, 512 두 품종 모두초장, 생체중, 뿌리의 수, chlorophyll 농도, 엽면적의 모든 항목에서 기내배양보다 월등히 좋은 결과를 나타내어 기존의 배양 방법보다 경제적, 품질의 측면 모두에서 우수한 방법인 것으로 나타났다.In the results of Table 6, the microhydroponic culture system of the gerbera 508, 512 both varieties of plant height, live weight, number of roots, chlorophyll concentration, leaf area was much better than in-flight culture It is shown that the method is superior in terms of economic and quality than the conventional culture method.

그러나 뿌리 길이와 잎 수에서 기내배양이 높은 수치로 나타났는데, 뿌리길이는 너무 길 경우 이식 작업에 어려움을 초래할 수 잇으므로 뿌리의 수만 충분히 확보할 수 있다면 너무 길지 않은 것이 작업에 유리할 것으로 사료되었다.However, in-flight cultivation was high in root length and number of leaves. If the root length is too long, it may cause difficulty in transplantation work.

또한 엽수의 전개가 마이크로 하이드로포닉 컬쳐 시스템(Microhydroponic culture system)에서 기존의 배양방법보다 약간 적게 나왔는데, 이는 추후의 실시예 3의 실험에서 적정 배지를 규명함으로써 본 발명의 방법에서 더 좋은 결과를 얻을 수 있었다.In addition, the development of the leaves was slightly less than the conventional culture method in the Microhydroponic culture system, which can be obtained in the method of the present invention by identifying the appropriate medium in the experiment of Example 3 later. there was.

[실시예 2] 마이크로 하이드로포닉 컬쳐 시스템(Microhydroponic culture system)에서 식물 생육에 적합한 배지공급방식Example 2 Medium Feeding Method Suitable for Plant Growth in a Microhydroponic Culture System

마이크로 하이드로포닉 컬쳐 시스템(Microhydroponic culture system)에서 마이크로 컷팅(microcutting)한 소식물체의 생육에 적합한 배양방법을 모색하기 위하여, Ebb Flood(저면관수법), DFT(Deep Flood Technique), 배양액의 양을 박막으로 흐르게 하여 산소 공급이 원활하도록 한 DFT를 변형시킨 mDFC(modified DFC)와 같은 배지 공급 방식별로 구분하여 가장 경제적이면서 식물체 생육에 적합한 배지공급방식을 실험하여 그 결과를 표 7에 나타내었다.In order to find a culture method suitable for the growth of microcutting news materials in a microhydroponic culture system, the amount of Ebb Flood, Deep Flood Technique, and culture medium were thinned. The medium feeding method such as mDFC (modified DFC) modified by the DFT to make the oxygen supply flowing smoothly was tested by experimenting with the most economical and suitable medium for plant growth, and the results are shown in Table 7.

본 실험의 모든 배양 환경 및 배지는 상기 실시예 1의 조건과 동일하게 실시하였다.All culture environments and media of this experiment were carried out in the same manner as in Example 1.

배양기(Cultural box)에 소식물체를 치상하였을 때 액체 배양액은 배지내 용존산소량을 많이 함유하고 있어야 식물 생육이 가능하므로 식물 생육에 적합한 배지공급방식을 규명하기 위하여 양액 공급 방법별 실험을 실시한 결과 표 7에서 나타난 바와 같이 거베라 508과 512번 품종 공히 배지공급방식에 따라 커다란 생육 차이가 관찰되지 않았다. 이는 시스템(system)별 배지내 공기 공급량을 균일하게 맞추어 줌으로써 생육에 큰 차이를 보이지 않은 것으로 사료된다.When the news material was healed in the culture box, the liquid culture medium must contain a large amount of dissolved oxygen in the medium, so that the growth of the plant is possible. As shown in Fig. 2, no significant growth differences were observed in gerbera 508 and 512 varieties depending on the medium feeding method. It is thought that this does not show a big difference in growth by uniformly adjusting the air supply amount in the medium for each system.

따라서 배지내 공기 공급량을 최적의 조건으로 맞추어 줄 수 있다면 배지공급방식은 각각의 배양 조건에 따라 자유롭게 적용할 수 있을 것으로 판단되었다.Therefore, if the air supply in the medium can be adjusted to the optimum conditions, it was determined that the medium supply method could be freely applied according to the respective culture conditions.

[실시예 3] 마이크로 하이드로포닉 컬쳐 시스템(Microhydroponic culture system)에서 소식물체 생육을 위한 최적 배양액 규명 실험Example 3 Identification of Optimal Culture Solution for News Product Growth in a Microhydroponic Culture System

기존의 조직 배양에서 발근 과정은 대부분 MS배지에 발근촉진 생장 조절물질및 agar를 첨가한 고체배지에 치상하여 발근 완료 후 출하하게 된다. 그러나 이렇게 기내 발근할 경우 전술한 바와 같이 무균작업의 어려움과 별도의 순화를 위한 재이식 및 순화 환경의 조성이 필요하여 작업량이 배가되므로 한번의 치상으로 발근과 순화를 동시에 실시할 수 있는 배양조건을 규명할 필요가 있다. 또한 상기 실시예 1의 실험에서 1/2MS배지를 이용하여 마이크로 하이드로포닉 컬쳐 (microhydroponic culture)했을 때 기내배양보다 엽수 분화가 적게 나와 엽수분화를 촉진시킬 수 있는 배지의 규명이 절실하였다. 따라서 배지공급방식은 상기 실시예 2의 배지공급방식 중 DFT 방식을 이용하고, MS배지의 농도를 조절한 1/2MS배지(EC 3.0), 1/3MS배지(EC 2.0, 1/4MS배지(EC 1.5) 처리구와 거베라 배양액(EC 2.0)을 이용하여 마이크로 컷팅(microcutting)한 소식물체의 생육을 관찰하여 그 결과를 표 8에 나타내었다.In the existing tissue culture, the rooting process is mostly carried out on the solid medium containing the root growth regulator and agar added to the MS medium, and is shipped after completion of rooting. However, in the case of rooting in the plane, as mentioned above, the difficulty of aseptic work and the need for re-transplantation and purification environment for the separate purification are required. It is necessary to identify. In addition, in the experiment of Example 1, when the microhydroponic culture using the 1 / 2MS medium (microhydroponic culture), less leaf differentiation than in-flight culture, the identification of the medium that can promote leaf differentiation is urgently needed. Therefore, the medium supply method using the DFT method of the medium supply method of Example 2, 1 / 2MS medium (EC 3.0), 1 / 3MS medium (EC 2.0, 1 / 4MS medium (EC 2.0) by adjusting the concentration of the MS medium (EC 1.5) The growth of micro-cutting material was observed using the treatment and gerbera culture (EC 2.0), and the results are shown in Table 8.

상기 표 8에서 알 수 있듯이 508, 512번 품종 공히 생육에 약간의 차이는 있지만 초장, 뿌리 길이는 MS배지를 이용앴을 때 길어지는 것으로 나타났고, 엽수의 분화 및 chlorophyll의 농도는 거베라 배양액에서 높은 것으로 나타나 EC 2.0의 거베라 배양액이 마이크로 하이드로포닉 컬쳐(microhydroponic culture)에서 식물 생육의 질적인 측면의 생장을 촉진하는 것으로 판단되었다.As can be seen from Table 8, the 508 and 512 varieties were slightly different in growth, but the height and root length were increased when using MS medium, and the differentiation of the leaves and the concentration of chlorophyll were high in the gerbera culture. Gerbera cultures of EC 2.0 were found to promote the growth of the qualitative aspects of plant growth in microhydroponic cultures.

[실시예 4] Microhydroponic culture system용 소식물체 지지물에 따른 소식물체의 생존율 실험[Example 4] Survival test of the news object according to the news support for the microhydroponic culture system

기내배양한 소식물체는 크기가 아주 작고(초장 15∼30mm, 줄기경 1.0∼2.5mm) 기내배양에 의해 공변세포 등 식물체의 형태적 발달이 미숙한 상태로 관행의 삽목과 같은 방법으로 치상하였을 때 식물체 생존율에 악영향을 미치므로 이러한 소식물체의 재식에 적합하면서 생육을 촉진시킬 수 있고 또한 출하시 간단한 방법으로 포장으로 이식할 수 있는 소식물체 지지물이 필요하다.In-flight cultures are very small (15-30 mm long, stem diameter 1.0-2.5 mm) and incubated in the same way as conventional cuttings with immature morphological development of plants such as stool cells. As it adversely affects the survival rate of plants, there is a need for a news support that is suitable for planting such news materials, promotes growth, and can be transplanted into packaging in a simple manner at the time of shipment.

따라서 본 발명에 따른 알루미늄 매트(aluminium mat)로 이루어진 소식물체 지지물을 사용하여 배양한 것과 플라스틱 흙 쟁반(plastic pug tray)를 이용하여 별도의 배지없이 빈 플러그 쟁반(plug tray) 속에 소식물체를 넣는 방법으로 재식한 것을 치상후 20일 후에 비교하여 그 결과를 표 9에 나타내었다.Therefore, a method of putting a news object in an empty plug tray without a separate medium by culturing using a news material support made of aluminum mat according to the present invention and using a plastic pug tray. After planting with 20 days after the tooth was compared and the results are shown in Table 9.

상기 표 9의 결과에서, 162구, 288구 등 재식 밀도가 넓을 때는 식물체 생육에 큰 영향을 미치지 않았으나, 400구 이상의 좁은 재식 간격으로 치상하였을 때 잎이 플러그 트레이(plug tray)의 상면부를 덮고 있으므로 뿌리와 전개된 앞 사이의 줄기 부분의 통기성 부족으로 생장점 부근이 무르는 경우가 발생하여 마이크로 하이드로포닉 컬쳐 시스템(Microhydroponic culture system)의 지지물로서 plug tray는 부적한 점이 있으나 주위의 환경에 따라서 적합한 경우도 있다.In the results of Table 9, when the planting density, such as 162 spheres, 288 spheres wide, did not have a significant effect on plant growth, but when the leaves are covered with a narrow planting interval of more than 400 spheres, the leaves cover the upper surface of the plug tray (plug tray) The lack of air permeability of the stem between the root and the developed forearm causes the growth near the growth point, which makes the plug tray an inadequate support for the Microhydroponic culture system. have.

그러나 알루미늄 매트(aluminium mat)에 치상한 경우 알루미늄 매트(aluminium mat)가 배양액 위에 떠 있고 지하부는 지속적으로 공기를 공급하므로 지상부 및 지하부의 공기흐름이 원활하여 식물생육 및 생존율이 98.58%로 매우 높은 결과가 나왔다.However, if it is healed on an aluminum mat, the aluminum mat floats on the culture solution and the underground part continuously supplies air, so the air flow in the ground part and the underground part is smooth, resulting in a very high plant growth and survival rate of 98.58%. Came out.

또한 소식물체의 생육이 진행됨에 따라 초장이 길어지고, 줄기가 굵어지게 되는데 본 지지물은 이에 따라 유동적으로 그 식물의 크기에 맞추어지면서 성장한 후 포장 이식시에는 간단히 뽑아서 이식할 수 있는 장점이 있는 것으로 확인되었다.In addition, as the news material grows, the grass grows longer and the stem grows thicker. The support grows in accordance with the size of the plant accordingly. It became.

이상에서 본 바와 같이 본 발명에 따른 마이크로 하이드로포닉 컬쳐시스템(Microhydroponic culture system)은 증식된 소식물체의 multiple shoots로부터 분리한 single shoot의 치상, 발근과 지상부 생육이 활발히 진행되는 생육 초기부터 중기까지는 기내배양(in vitro)의 조건을 조성해주고, 발근과 지상부 생육이 어느정도 진행된 배양 후기부터는 서서히 기외의 대기와 조건을 같게 해 주어(ex vitro) 소식물체의 발근, 생육, 순화를 one-step으로 진행할 수 있도록 하는 우수한 방법임을 알 수 있었고 또한 본 발명에 따른 배양기(culture box) 및 소식물체 지지물은 최적의 조건을 제공하는 것을 확인할 수 있었다..As described above, the microhydroponic culture system according to the present invention is incubated from the early stage to the middle stage of growth of the denture, rooting and ground growth of the single shoot separated from the multiple shoots of the propagated news material. haejugo create the conditions (in vitro), rooting and shoot growth is given by the same to the atmosphere and the condition of gradually gioe Starting somewhat advanced culture reviews (ex vitro) to proceed with the rooting, growth, purification of the post body by one-step It was found that it is an excellent method to the culture box and the carrier support according to the present invention was confirmed to provide the optimum conditions.

상기한 바와 같이 이루어지는 본 발명에 의하면, 조직배양을 통한 종묘생산에서 가장 많은 노동력을 필요로 하는 발근, 순화 과정을 배양기(cultural box)를 이용하여 동일한 장소에서 별도의 이식작업 없이 기내와 기외의 효과를 동시에 낼 수 잇는 조건을 제공함으로써 기존의 방법에서 필요한 노동력의 42%만으로 종묘생산이 가능하며, 기존의 방법에서 문제점으로 지적되었던 순화과정에서 발생하는 종묘생산의 실패를 방지할 수 있으며, 종묘 배양시 발근 과정부터 자체적으로 광합성을 할 수 있는 조건을 제공함으로써 양질의 우량묘를 생산할 수 있는 마이크로 하이드로포닉 컬쳐 시스템(Microhydroponic culture system)을 이용한 기내 소식물체의 종묘 생산 장치 및 생산 방법을 제공할 수 있다.According to the present invention made as described above, the rooting and purifying process that requires the most labor in seedling production through tissue culture, using a culture box (cultural box) in the same place without a separate transplant operation and in vitro effects By providing conditions that can simultaneously produce seedlings, seedling production is possible with only 42% of the labor required by the existing methods, and the failure of seedling production that occurs during the purification process, which has been pointed out as a problem with the existing methods, can be prevented. By providing conditions for photosynthesis on its own from the rooting process of the city, it is possible to provide a seedling production apparatus and a production method of the in-flight news material using a microhydroponic culture system capable of producing high quality seedlings. .

Claims (8)

생장점 배양을 통하여 증식단계를 거쳐 최종 발근 및 순화 과정만을 남긴 소식물체의 멀티플 슈티(mutiple shoots)를 마이크로 컷팅(microcutting)하여 식물체 지지물에 치상하여 컬쳐박스로 이식하는 단계와,Microcutting mutiple shoots of the news material, which leaves only the final rooting and purifying process through the growth point cultivation, and implants them into the culture box by implanting them into the plant support; 상기 컬쳐박스로로 이식한 소식물체를 온도 24±4℃, 광도(PPF) 110∼350μ㏖ㆍm-2ㆍs-1, CO2350∼2000ppm의 조건에서 산소와 배양액을 공급해주며 상면부를 다공성 랩으로 덮은 배양기(cultural box) 내에서 생육 중반기까지 배양하는 단계와,The news material implanted into the culture box was supplied with oxygen and a culture medium at a temperature of 24 ± 4 ° C. and a brightness (PPF) of 110 to 350 μmol · m −2 · s −1 and CO 2 350 to 2000 ppm, and the upper surface was porous. Culturing until the middle of the growth in a culture box covered with a wrap; 상기 배양된 생육 중반기의 소식물체를 랩을 제거하고 광도350μ㏖ㆍm-2ㆍs-1에서 생육시켜 출하하는 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 마이크로 하이드로포닉 컬쳐 시스템(Microhydroponic culture system)을 이용한 기내 소식물체의 종묘 생산 방법.Incubating the culture medium in the mid-term growth phase is removed by the wrap and grown at a light intensity of 350μmol · m −2 · s −1 and shipped in the cabin using a microhydroponic culture system (Microhydroponic culture system) How to produce seedlings of news objects. 제 1항에 있어서,The method of claim 1, 상기 발근 배지는, 거베라 배양액(Electric Conductivity 2.0)인 것을 특징으로 하는 마이크로 하이드로포닉 컬쳐 시스템(Microhydroponic culture system)을 이용한 기내 소식물체의 종묘 생산 방법.The rooting medium is a gerbera culture (Electric Conductivity 2.0) characterized in that the seedling production method of the in-flight news material using a microhydroponic culture system (Microhydroponic culture system). 식물의 세포, 조직, 종자 및 완전한 식물체로부터 이들을 배양, 발아 및 번식시키는 상자형 배양기에 있어서,In a box-type incubator that incubates, germinates and propagates them from the cells, tissues, seeds and complete plants of the plant, 일측 몸체(11)에 다수의 환기공(12)이 형성되고 투광성이 높은 배양기(cultural box)(10)와,A plurality of ventilation holes 12 are formed in one body 11 and a high light transmitting culture box 10, 상기 배양기(10) 바닥으로부터 일정높이에 소식물체 치상을 위해 설치된 지지 매트(13)와,A support mat 13 installed for tooth placement at a predetermined height from the bottom of the incubator 10, 상기 배양기(10) 바닥과 지지물(13) 사이에 충만되는 배양액(14)과,A culture solution 14 filled between the bottom of the incubator 10 and the support 13; 상기 배양기(10) 상단부에 씌워지는 미세한 다공성의 밀리포어 랩(millipore wrap)커버(15)와,And a microporous millipore wrap cover (15) is covered on the upper end of the incubator (10), 상기 배양기(10) 일측에는 공기조절기(16)와 공기 펌프(19)가 구비되어 분배기(17)를 통하여 배양액(14)에 산소를 공급고 온도를 일정하게 유지할 수 있도록 구성된 것을 특징으로 하는 식물 조직배양과 수경재배을 이용한 기내 종묘 생산 장치.One side of the incubator 10 is provided with an air conditioner 16 and an air pump 19 is characterized in that the plant tissue is characterized in that it is configured to supply oxygen to the culture medium 14 through the distributor 17 and to maintain a constant temperature In-flight seedling production device using culture and hydroponics. 제3항에 있어서,The method of claim 3, 상기 배양기 내의 지지물(13)은, 십자모양의 칼집을내 다수의 절결부(18)를 형성하여 작은 소식물체(20)가 지지되어 생육될 수 있도록 한 것을 특징으로 하는 식물 조직배양과 수경재배을 이용한 기내 종묘 생산 장치.The support 13 in the incubator has a cross-shaped sheath and forms a plurality of cutouts 18 so that the small news object 20 can be supported and grown using plant tissue culture and hydroponic cultivation. Inflight seedling production unit. 제3항에 있어서,The method of claim 3, 상기 지지물(13)은, 보온성이 높은 알루미늄 매트(13')로 된 것을 특징으로 하는 식물 조직배양과 수경재배을 이용한 기내 종묘 생산 장치.The support 13 is an in-flight seedling production apparatus using plant tissue culture and hydroponic cultivation, characterized in that the high thermal insulation aluminum mat (13 '). 제3항에 있어서,The method of claim 3, 상기 지지물(13)은, 플러그 트레이(plug tray)(13")로 된 것을 특징으로 하는 식물 조직배양과 수경재배을 이용한 기내 종묘 생산 장치.The support 13 is an in-plant seedling production apparatus using plant tissue culture and hydroponic cultivation, characterized in that the plug tray (13 "). 제3항에 있어서,The method of claim 3, 상기 배양기는, 마이크로 하이드로포닉 컬쳐 시스템(Microhydroponic culture system)을 위한 컬쳐 박스(cultural box)로 일루어진 것을 특징으로 하는 식물 조직배양과 수경재배을 이용한 기내 종묘 생산 장치.The incubator is an in-plant seedling production apparatus using plant tissue culture and hydroponic culture, characterized in that the culture box (cultural box) for the microhydroponic culture system (Microhydroponic culture system). 제3항에 있어서,The method of claim 3, 상기 배양기는, 마이크로 하이드로포닉 컬쳐 시스템(Microhydroponic culture system)을 위한 컬쳐 베드(cultural bed)로 일루어진 것을 특징으로 하는 식물 조직배양과 수경재배을 이용한 기내 종묘 생산 장치.The incubator is an in-plant seedling production apparatus using plant tissue culture and hydroponic culture, characterized in that the culture bed (cultural bed) for a microhydroponic culture system (Microhydroponic culture system).
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