KR100383554B1 - 한탄 바이러스 및 씬넌버 바이러스에 대한 인체 면역조절기능을 가지는 펩타이드 - Google Patents
한탄 바이러스 및 씬넌버 바이러스에 대한 인체 면역조절기능을 가지는 펩타이드 Download PDFInfo
- Publication number
- KR100383554B1 KR100383554B1 KR1020000017920A KR20000017920A KR100383554B1 KR 100383554 B1 KR100383554 B1 KR 100383554B1 KR 1020000017920 A KR1020000017920 A KR 1020000017920A KR 20000017920 A KR20000017920 A KR 20000017920A KR 100383554 B1 KR100383554 B1 KR 100383554B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- peptide
- virus
- amino acid
- peptides
- acid sequence
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 93
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 45
- 230000028993 immune response Effects 0.000 title claims description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 title abstract description 8
- 241000150288 Sin Nombre orthohantavirus Species 0.000 title 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 63
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 26
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 8
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 48
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 11
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 4
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 4
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 claims description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 3
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 claims description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 claims description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 claims description 2
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 claims 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 22
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 22
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 11
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 abstract description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000006058 immune tolerance Effects 0.000 abstract description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 abstract 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 33
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 16
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 14
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 14
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 102000025850 HLA-A2 Antigen Human genes 0.000 description 7
- 108010074032 HLA-A2 Antigen Proteins 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N diisopropylamine Chemical compound CC(C)NC(C)C UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 230000010039 intracellular degradation Effects 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- KSDTXRUIZMTBNV-INIZCTEOSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)butanedioic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 KSDTXRUIZMTBNV-INIZCTEOSA-N 0.000 description 1
- VXGGBPQPMISJCA-STQMWFEESA-N (2s)-2-[[(2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)propanoyl]amino]propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 VXGGBPQPMISJCA-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- DVBUCBXGDWWXNY-SFHVURJKSA-N (2s)-5-(diaminomethylideneamino)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)pentanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 DVBUCBXGDWWXNY-SFHVURJKSA-N 0.000 description 1
- XDDMZVMWZMSAMX-JHNJPSDUSA-N (2s,3s)-2-azanyl-3-methyl-pentanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O.CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O XDDMZVMWZMSAMX-JHNJPSDUSA-N 0.000 description 1
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HVCNXQOWACZAFN-UHFFFAOYSA-N 4-ethylmorpholine Chemical compound CCN1CCOCC1 HVCNXQOWACZAFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 101001002657 Homo sapiens Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001687 destabilization Effects 0.000 description 1
- 229940043279 diisopropylamine Drugs 0.000 description 1
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 102000055277 human IL2 Human genes 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000008288 physiological mechanism Effects 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- PXLIDIMHPNPGMH-UHFFFAOYSA-N sodium chromate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Cr]([O-])(=O)=O PXLIDIMHPNPGMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/42—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum viral
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
본 발명은 한탄 바이러스 및 씬넌버 바이러스에 대한 인체 면역성을 조절하는 기능을 가지는 펩타이드에 관한 것으로, 보다 상세하게는 한탄 바이러스의 단백질 항원과 씬넌버 바이러스의 단백질 항원의 아미노산 서열상에서 상기 두가지 바이러스에서 공통되는 아미노산 서열의 펩타이드들로서 상기 두가지 바이러스에 대한 세포독성 T-림프구를 유도하거나 상기 바이러스에 대한 면역관용을 유도할 수 있는 항원의 특정 부위(epitope)에 해당하는 펩타이드군의 아미노산 서열 및 이를 이용한 상기 바이러스들에 대한 특이성을 가지는 세포독성 T-림프구를 유도하는 방법에 관한 것이다. 상기 펩타이드를 이용하여 상기 바이러스들에 대한 인체 면역성을 조절하므로서 상기 바이러스들에 관련한 질환의 치료 및 예방을 할 수 있다.
Description
본 발명은 한탄 바이러스 및 씬넌버 바이러스에 대한 인체 면역성을 조절하는 기능을 가지는 펩타이드에 관한 것으로, 보다 상세하게는 한탄 바이러스의 단백질 항원과 씬넌버 바이러스의 단백질 항원의 아미노산 서열상에서 상기 두가지 바이러스에서 공통되는 아미노산 서열의 펩타이드들로서 상기 두가지 바이러스에 대한 세포독성 T-림프구를 유도하거나 상기 바이러스에 대한 면역관용을 유도할 수 있는 항원의 특정부위(epitope)에 해당하는 펩타이드군의 아미노산 서열 및 이를 이용한 상기 바이러스들에 대한 특이성을 가지는 세포독성 T-림프구를 유도하는 방법에 관한 것이다.
인체에 한탄 바이러스 및 씬넌버 바이러스가 감염되면 상기 바이러스들을 제거할 목적으로 체내에서 여러 가지 생리적인 현상이 나타나게 되는데, 가장 중요한 생리기작 중의 하나인 감염된 세포를 파괴하여 제거함으로써 바이러스 감염으로부터 회복될 수 있다.
이러한 감염세포의 파괴는 세포살해능력(cytotoxicity)을 가진 또다른 종류의 세포에 의해 이루어지는데, 이러한 능력을 갖는 세포를 세포독성 T-림프구(cytotoxic T lymphocytes, 이하 'CTL'라 약칭함)라 한다. CTL이 세포살해능력을 발휘하기 위해서는 감염 바이러스의 구성 단백질의 일부분을 우선적으로 인식하여야 하는데, 이러한 특정 인식부위를 에피토프(epitope)라고 한다.
일반적으로, 바이러스 단백질은 감염된 숙주 세포내에서 합성된 후 세포내 분해과정을 거쳐 8 내지 15개의 아미노산으로 구성되는 짧은 펩타이드 형태로 전환된다. 이렇게 형성된 펩타이드 중의 일부가 숙주 세포내에 있는 주조직 적합분자(major histocompatibility complex molecule, 이하 'MHC'라 약칭함)와 결합한 형태로 감염 세포 표면에 드러나게 되면 이에 의해 CTL이 MHC와 결합된 펩타이드 일부분을 인식할 수 있게 되고, 인식된 감염 세포를 파괴하게 된다.
한편, MHC는 제 1군(class I)과 제 2군(class II) 두종류로 나뉘어진다. 이들 중 제 1군이 CTL의 유도에 더욱 중요한 작용을 하는 것으로 알려져 있다. 그러나, CTL이 인지할 수 있는 단백질의 부위는 바이러스 단백질의 세포내 분해 결과 생성된 펩타이드 단편들 중 특정한 아미노산 서열(epitope)을 갖고 있는 펩타이드에 한정되는 것으로 이러한 펩타이드와 결합한 MHC만을 특이적으로 인지하는 것으로 알려져 있다(Fremont, D. et al.,Science, 257:919-926, 1992; Matsumura, M. et al.,Science, 257:929-934, 1992). 따라서 이러한 특정부위에 대한 아미노산 서열을 알게 되면 상기 아미노산 서열에 상응하는 펩타이드를 화학적인 방법으로 합성하여 대량생산할 수 있게 되고, 이를 이용하여 인체내에 바이러스를 특이적으로 인지하는 CTL을 인위적으로 유도하거나 면역억제 등의 여러 가지 면역 반응을 조절할 수 있게 되어 바이러스성 질환의 치료와 예방에 효과적으로 이용할 수 있다.
이러한 배경 아래 여러 연구자들이 인간 면역결핍 바이러스(human immunodeficiency virus, HIV), B형 및 C형 간염 바이러스 그리고 인플루엔자(influenza) 바이러스의 항원 단백질의 아미노산 서열 가운데 CTL에 의해 인식될 수 있는 펩타이드의 아미노산 서열을 알아내기 위한 노력을 기울여 왔으며, 그 결과 이미 몇 개의 특정 아미노산 서열이 보고된 바 있다.
그러나, 지금까지 한탄 바이러스의 경우는 G1 및 G2 당단백질에 의해 중화항체가 유도되어 일어나는 체액성 면역에 대해서만 많은 연구가 이루어졌을뿐(Michael, N.P. et al.,J. Virol., 62:696, 1988; Jiro, A. et al.,J. Gen. Virol., 70:615, 1989; Xiao, X. et al.,Am. J. Trop. Med. Hyg., 47:397, 1992), 상기 바이러스의 N 단백질, G1 및 G2 단백질에 대한 세포성 면역 즉, CTL 유도에 의한 면역과정에 대한 연구는 단지 펩타이드 수준에서 일부 외국 연구팀에 의해 보고된 바 있을 뿐이다. 더구나 최근 미국내 큰 충격을 불러 일으켰던 씬넌버 바이러스는 한탄 바이러스와 유사한 바이러스라는 규명에 따라 그 치료 방법에 대한 관심이 집중되고 있다.
이에 본 발명자들은 CTL 유도 펩타이드에 의한 면역조절기작을 이용하여 한탄 바이러스 및 씬넌버 바이러스로 유발된 질환을 동시에 치료하고자, 한탄 바이러스의 단백질 항원과 씬넌버 바이러스의 단백질 항원의 아미노산 서열에서 완전히 일치하는 서열 부위를 선택하여, 이중 CTL에 의해 인식될 수 있는 펩타이드의 아미노산 서열을 밝히고, 상기 두 바이러스에서 공통적으로 존재하는 CTL 항원을 발견함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명의 목적은 한탄 바이러스와 씬넌버 바이러스의 단백질 항원 중 동일한 세포독성 T-림프구에 의해 인지될 수 있는 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드를 이용하여 한탄 바이러스 및 씬넌버 바이러스에 대해 특이적으로 반응하는 세포독성 T-림프구를 유도하는 방법을 제공하는 것이다.
도 1은 한탄 바이러스에 감염된 환자들 중에서 HLA-A2.1 분자를 발현하는 환자를 선택한 결과를 나타낸 것이고,
도 2는 시험관 내에서 펩타이드와 T2 세포를 함께 배양한 후 세포 표면에서 발현이 증가된 MHC I 군 분자의 변화를 형광강도로 나타낸 그래프이고,
도 3은 한탄 바이러스에 감염된 환자의 혈액에서 유래한 CTL의 특정 펩타이드에 대한 세포의 파괴능을 나타낸 그래프이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
상기 본 발명의 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 한탄 바이러스와 씬넌버 바이러스의 단백질 항원의 공통되는 아미노산 서열을 가지는 펩타이드를 제공한다.
본 발명에서는 MHC 제 1군 분자와 결합할 수 있는 펩타이드가 특정 아미노산 서열을 가진다는 사실과 상기 분자가 가지는 구조적인 특성에 기초하여, 한탄 및 씬넌버 바이러스의 단백질 항원의 전체 아미노산 서열로부터 MHC 제 1군 분자와 결합할 가능성이 있는 펩타이드의 아미노산 서열을 결정한다. 이렇게 결정된 펩타이드 중 상기 두 바이러스에서 완전히 동일성을 보이는 서열의 펩타이드를 결정한다.
즉, 사람의 MHC 제 1군 분자와 결합할 수 있는 펩타이드는 아미노 말단으로부터 두 번째 위치의 아미노산과 카르복실 말단의 아미노산이 지방족 비극성 아미노산으로 이루어져 있다는 특성(Matsumura, M et al.,Science, 257:929-934, 1992)을 기초로 하여 상기 조건을 만족하는 아미노산 서열을 상기 바이러스들의 단백질 항원으로부터 찾아내는 것이다.
그 결과 하기표 1에 나타낸 바와 같이 9개의 서열을 확인하였다.
| 합성 펩타이드 | 아미노산 서열번호 | 아미노산 서열 | 아미노산 수 |
| L1 | HTNV:334-342 | ILQDMRNTI | 9 |
| SNV:333-341 | ILQDMRNTI | 9 | |
| L2 | HTNV:512-520 | ILPSKSLEV | 9 |
| SNV:513-521 | ILPSKSLEV | 9 | |
| L3 | HTNV:559-567 | VMSIDLNRL | 9 |
| SNV:560-568 | VMSIDLNRL | 9 | |
| L4 | HTNV:625-633 | NLRYLIPAV | 9 |
| SNV:626-634 | NLRYLIPAV | 9 | |
| L5 | HTNV:628-636 | YLIPAVTSL | 9 |
| SNV:629-637 | YLIPAVTSL | 9 | |
| L6 | HTNV:1137-1145 | EMWKSMFNL | 9 |
| SNV:1138-1146 | EMWKSMFNL | 9 | |
| L7 | HTNV:1188-1196 | ILLGSLSDL | 9 |
| SNV:1189-1197 | ILLGSLSDL | 9 | |
| L8 | HTNV:1273-1281 | IMELATAGI | 9 |
| SNV:1274-1282 | IMELATAGI | 9 | |
| L9 | HTNV:1736-1744 | GLDCARLEI | 9 |
| SNV:1737-1745 | GLDCARLEI | 9 |
*HTNV: 한탄 바이러스
*SNV: 씬넌버 바이러스
*아미노산 서열은 IUPAC의 명명법에 따라 기재함.
상기 표 1에 기재된 9개의 펩타이드는 MHC 제 1군 분자와 결합을 이룰 수 있는 최소의 서열을 나타낸 것으로 본 발명에서는 상기 9개의 펩타이드 뿐만 아니라 상기 펩타이드 전후에 최소 1 내지 5개의 아미노산을 추가로 포함하는 모든 펩타이드 및 상기의 펩타이드들과 동일한 기능을 갖는 '기능적 등가물'을 포함한다. '기능적 등가물'이라 함은 상기 펩타이드의 아미노산 서열 중 1개 또는 2개의 아미노산이 다른 아미노산으로 치환된 모든 펩타이드를 의미하는 것으로, 그 치환의 범위는 Gly, Ala; Val, Ile, Leu; Asp, Glu; Asn, Glu; Asn, Gln; Ser, Thr; Lys, Arg 및 Phe, Tyr과 같은 조합에서 선택된다.
상기 펩타이드의 아미노산 서열에 대응하는 핵산의 서열로 한정되는 유전자는 백신 등으로 다양하게 이용될 수 있다.
한탄 및 씬넌버 바이러스의 단백질 서열로부터 선택된 상기 표 1의 펩타이드와 결합할 수 있는 MHC 제 1군 분자를 세포 표면에 발현하는 백혈구 세포를 얻기 위해서는, 상기 바이러스에 감염된 환자들로부터 채취한 백혈구 세포에 상기 분자에 대한 항체와 이에 대한 2차 항원 접합체를 반응시켜 상기 분자를 발현하는 백혈구 시료를 얻는다(도 1 참조).
구체적으로, 우선표 1에 개시된 펩타이드 중 MHC 제 1군 분자와 결합하는 능력을 가진 펩타이드를 선별하기 위하여, 상기 펩타이드들을 T2 세포주에 넣어 반응시켜, 그 결과 적절하게 결합을 이룬 펩타이드를 결정한다. 결합 정도의 차이는 있으나 7 개의 펩타이드, L1, L2, L3, L5, L7, L8, L9가 MHC 제 1군 분자와 적절하게 결합할 수 있다(도 2 참조). 본 발명에서 이용한 T2 세포주는 세포내에서 펩타이드가 MHC 제 1군 분자와 결합하고 그 결합체가 세포 표면에 전개되는 이동 경로에 이상이 있어 상기의 결합이 불가능한 MHC 제 1군 분자 구조의 불안정화가 초래되거나 펩타이드와 결합을 이루지 못한 MHC 제 1군 분자가 세포 표면에 전개되는 현상을 일으키는데 이는 반응온도를 조절하여 극복될 수 있다.
MHC 제 1군 분자와 결합하는 상기 펩타이드 CTL에 의한 인지 여부를 확인하기 위해, 상기 바이러스에 감염되고 MHC 제 1군 분자를 발현할 수 있는 환자의 혈액으로부터 얻은 백혈구 시료를 사람의 인터루킨-2와 함께 배양하고, 상기 펩타이드를 동위원소로 표지된 T2 세포에 결합시킨 뒤 이를 백혈구 세포와 혼합하여, 백혈구 세포의 CTL에 의해 인식되는 펩타이드와 결합된 세포가 파괴되는 원리를 이용함으로써 상기 펩타이드들 중 CTL에 의해 특이적으로 인식될 수 있는 펩타이드군을 결정한다. 그 결과 정도의 차이는 있으나 L1, L2, L3, L5, L7, L8, L9 에 대해 특이성을 보이는 CTL이 한종류 이상 상기 바이러스 감염 환자의 백혈구내에 존재함을 확인할 수 있다.
즉, 펩타이드 L1, L2, L3, L5, L7, L8, L9는 인체내에 주입될 경우 한탄 및 씬넌버 바이러스 항원을 인식하여 감염된 세포를 파괴하여 상기 바이러스 감염상태로부터 회복될 수 있게 하는 CTL을 활성화시키는 기능을 가지므로, 상기 펩타이드 항원 및 이에 동등한 효과를 가지는 기능적 등가물, 그리고 상기 펩타이드의 아미노산 서열에 대응하는 염기서열을 갖는 유전자 백신을 상기 바이러스 감염 환자를 치료하거나, 상기 바이러스 감염 예방에 이용할 수 있음이 명백하다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 한탄 및 씬넌버 바이러스 유래의 항원 중 공통의 아미노산 서열을 가지는 펩타이드의 합성
한탄 바이러스 및 씬넌버 바이러스 단백질 항원의 아미노산 서열 중 사람의 MHC 제 1군 분자인 HLA-A2.1 분자와 결합가능한 아미노 말단으로부터 두 번째 위치의 아미노산과 카르복실 말단의 아미노산이 루신(leucine), 발린(valine) 또는 이소루신(isoleucine) 등의 지방족 비극성 아미노산(aliphatic nonpolar acid)를 갖는 아미노산 서열의 펩타이드를 선택하였고, 이 중 HLA-A2.1 분자의 3차 구조에 적합하게 결합되는 특성을 갖는 것으로 예측되며 상기 두 바이러스에서 완전히 동일한 서열의 펩타이드를 선택하여, 상기와 같이 결정된 아미노산 서열에 따라 9 가지의 펩타이드(표 1)를 아래에 기술된 방법으로 합성하였다.
펩타이드 합성을 위해서, 어플라이드 바이오시스템 430A 합성기와 Fmoc 프로그램 및 측쇄 보호기를 가진 L-아미노산[라이신(Boc), 아스파트산(OtBu), 트립토판(tBu), 아르기닌(Mtr)]을 사용하여 고체상 펩타이드 합성방법(solid-phase peptide synthesis)으로 합성하였다. 구체적으로 상기 고체상 펩타이드 합성방법은 다음의 단계로 구성된다. 즉, 1) 각각 0.35 mmol의 Fmoc-Asp-OH와 0.35 mmol의 Fmoc-Arg-OH을 포함한 p-벤질옥시벤질알콜-레진(p-benzyloxybenzylzlcohol-resin) 1 g에 55 %의 피페리딘(piperidine)을 포함한 N-메틸프롤리돈(N-methylprollidone, 1x2 min, 1x5 min) 용액을 가하여 Nα을 제거(deprotection)하는 단계; 2) N-메틸프롤리돈 6 ml에 용해된 1.5 mmol의 Fmoc-AA-OH을 1.5 mmol의 디이소프로필카보다이이미드(diisopropylcarbodiimide)와 1.5 mmol의 1-하이드록시벤조트리아졸(1-hydroxybenzotriazole)을 이용하여 활성화시키고 1.5 시간 동안 결합시키는 단계 및 3) N-메틸피롤리돈에 5 % 농도로 녹아 있는 N-에틸모폴린(N-ethylmorphorline)으로 씻어내는 단계로 구성되는데, 이러한 활성화단계와 결합단계를 반복하여 수행하였다. 상기 반응의 진행 중, 반응에 참여하지 않는 아미노 그룹은 N-메틸피롤리돈에 용해된 아세틱 안하이드라이드(acetic anhydride, 2.5 mmol)와 디이소프로필에틸아민(diisopropylamine, 1.2 mmol)에 의하여 보호된다. 상기와 같이 레진에 결합한 펩타이드를 합성한 뒤에는 분석용 펩타이드 탐침(probe)을 트리플루오로아세토리틱 분해(trifluoroacetolytic cleavage)에 의하여 제거한 다음, 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)와 FAB 질량분석기에 의해 아미노산의 분석을 행하여 원하는 서열의 아미노산이 합성되었는지 확인하였다.
상기표 1에 기재된 9 개의 펩타이드 뿐만 아니라 상기 펩타이드 전후에 최소 1 내지 5개의 아미노산을 추가로 포함하는 모든 펩타이드 및 상기의 펩타이드들과 동일한 기능을 갖는 '기능적 등가물'로서, 상기 펩타이드의 아미노산 서열 중 1개 또는 2개의 아미노산이 다른 아미노산으로 치환된 모든 펩타이드가 상기 MHC 제 1군 분자인 HLA-A2.1 분자와 결합 가능한 펩타이드임을 또한 확인하였으며, 그 치환의 범위는 Gly, Ala; Val, Ile, Leu; Asp, Glu; Asn, Glu; Asn, Gln; Ser, Thr; Lys, Arg 및 Phe, Tyr과 같은 조합에서 선택됨을 확인하였다.
<실시예 2> 펩타이드의 세포독성 T-림프구 유도 활성 확인
<2-1> HLA-A2 분자를 발현하는 백혈구 적출
한탄 바이러스에 감염된 환자들로부터 혈액을 채취하여 적혈구를 제거하고 백혈구만 얻은 후 이들 백혈구 세포의 표면에 HLA-A2 분자의 발현 상태를 확인하고자, HLA-A2 분자를 인지하는 항체를 이용하여 세포 표면에 상기 분자를 발현하는 백혈구를 유세포 분석기(flow cytometry, Becton Dickenson)로 분석하였다.
우선 감염된 환자의 혈액에서 유래한 백혈구 세포에 항-HLA-A2 항체(anti-HLA-A2 antibody)인 BB7.2 항체를 혼합하여 4℃에서 40 분간 반응시킨 후, 인산 완충액(phosphate buffer saline, 이하 'PBS'라 약칭함)으로 세척하여 반응하지 않은 항체를 제거하였다. BB7.2 항체 생산을 위하여 BB7.2 세포주(ATCC)를 3일간 배양하였고 이에 따라 배양액 속에 존재하는 항체(anti-HLA-A2 antibody)를 분리하였다. 그 후 상기 반응액에 플루오르신 이소치오시아네이트(fluorescein isothiocyanate, FITC)를 부착한 항-마우스 면역글로불린 항체(anti-mouse immunoglobulin antibody, Pharmingen)를 가하여 40 분간 4℃에서 반응시키고 PBS로 세척하여 반응하지 않은 항체를 제거한 후 유세포 분석기를 이용하여 분석하였다.
그 결과,도 1에 나타낸 바와 같이, 한탄 바이러스에 감염된 환자들 중에는 세포표면에 HLA-A2 분자를 발현하는 환자와 발현하지 않는 환자가 존재하며, 본 발명에서는 상기한 방법에 의해 HLA-A2 분자를 발현하는 것으로 확인된 환자의 혈액을 이용하였다.
<2-2> MHC 분자와의 결합도 측정
표 1에 개시된 펩타이드가 MHC 제 1군 분자인 HLA-A2 분자와 결합할 수 있는지를 확인하기 위하여, 상기 펩타이드를 T2 세포주에 5, 10, 20, 40, 60 ug/ml의 농도가 되도록 각각 넣어 주고, T2 세포내 MHC 제 1군 분자가 펩타이드와 결합하여 안정화될 수 있는 반응 온도인 37℃에서 4 시간 동안 반응시켰다. 그 후 PBS로 세척하여 반응을 하지 않은 펩타이드를 제거하고, 상기 세포에 BB7.2 항체를 가해준 후, 다시 40 분 동안 4℃에서 반응시켰다. 반응 후 세포를 다시 PBS로 세척하여 반응하지 않은 항체를 제거하고 여기에 FITC를 부착한 항-마우스 면역글로불린 항체를 가하여 40 분 동안 4℃에서 반응시킨 후 PBS로 세척하여 반응하지 않은 여분의 항체를 제거한 후 유세포 분석기로 반응결과를 분석하였다.
그 결과,도 2에 나타낸 바와 같이, 각 펩타이드에 대한 HLA-A2 분자의 결합력의 정도는 다르지만 상기 9개의 펩타이드들 중 7개의 펩타이드, L1, L2, L3, L5, L7, L8, L9 가 HLA-A2 분자와 결합함을 알 수 있었다.
<2-3> 환자의 혈액에 존재하는 CTL의 펩타이드 인지도 측정
MHC 제 1군 분자와 결합하는 펩타이드의 CTL에 의한 인식 여부를 확인하기 위해, 한탄 바이러스에 감염된 것으로 확정된 환자 즉 혈액내 바이러스 항체가 ELISA 분석치로 1.0 이상으로 확인된 환자의 혈액으로부터 HLA-A2 분자를 가지는 백혈구를 분리하였다. 분리된 백혈구를 20 유니트(unit)의 사람 인터루킨-2(interleukine-2)와 함께 이산화탄소가 함유된 37℃의 배양기(CO2incubator)에서 2일 동안 배양했다.
한편, 표적세포인 T2 세포의 내부에 동위원소인 소디움크로메이트(Cr51)를 추적 원소로 넣어 주고, 특정 펩타이드를 상기 세포 표면에 결합하도록 유도하였다. 그 후 상기와 같이 준비된 바이러스 감염 환자의 백혈구 세포와 표적세포의 비율을 12 : 1의 일정한 비율로 혼합하여 37℃의 CO2배양기에서 4 시간 동안 반응시켰다.
환자의 백혈구에 존재하는 CTL 중 상기 특정 펩타이드가 결합된 T2 세포를 인식하는 CTL이 있는 경우 인식된 세포가 파괴되고 세포내에 존재하는 Cr51이 유출되게 되는데, 이러한 원리를 이용하여 배양액 중에 존재하는 동위원소의 양을 측정함으로써 특정 CTL에 의한 펩타이드 인식 여부를 측정하였다. 그 결과,도 3에서 보듯이, 펩타이드 L1, L2, L5, L7, L8, L9의 경우 환자에 따라 정도의 차이는 있었으나, 특정 펩타이드를 인식하는 CTL이 각각의 환자에서 적어도 한 종류 이상이 존재함을 알 수 있었다.
상술한 바와 같이 본 발명의 펩타이드 L1, L2, L5, L7, L8, L9의 6 종류의 펩타이드군은 인체내에 존재하는 한탄 바이러스 항원을 인지하는 CTL을 활성화시킬 수 있으며, 유사 바이러스인 씬넌버 바이러스에서도 완전히 동일한 아미노산 서열을 가지므로 씬넌버 바이러스 항원을 인지하는 CTL을 활성화하는 데에도 이용가능하다. 따라서 상기 펩타이드 항원 및 이를 기초로 한 유전자 백신은 한탄 및 씬넌버 바이러스 관련 질환의 예방과 치료에 유용하게 이용될 수 있다.
Claims (9)
- 서열번호 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7로 기재되는 아미노산 서열을 가지는 것을 특징으로 하는 한탄 바이러스 및 씬넌버 바이러스에 대한 면역반응을 유도하는 펩타이드.
- 제 1항에 있어서, 면역반응은 세포독성 T-림프구(cytotoxic T-lymphocyte)의 세포 살해(cytotoxicity) 활성을 유도하는 것을 특징으로 하는 펩타이드.
- 제 1항에 있어서, MHC(major histocompatibility complex) 분자와 결합할 수 있으며, CTL에 의해 인지될 수 있는 것을 특징으로 하는 펩타이드.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 제 1항에 있어서, 각 펩타이드의 아미노산말단 또는 카르복실산말단 쪽으로 Gly, Ala ; Val, Ile, Leu ; Asp, Glu ; Asn, Glu ; Asn, Gln ; Ser, Thr ; Lys, Arg 및 Phe, Tyr 으로 구성되는 군에서 선택되는 아미노산이 추가되는 것을 특징으로 하는 펩타이드.
- 제 1항의 펩타이드의 아미노산 서열을 코딩하는 유전자.
- 제 8항의 유전자를 포함하는 백신.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020000017920A KR100383554B1 (ko) | 2000-04-06 | 2000-04-06 | 한탄 바이러스 및 씬넌버 바이러스에 대한 인체 면역조절기능을 가지는 펩타이드 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020000017920A KR100383554B1 (ko) | 2000-04-06 | 2000-04-06 | 한탄 바이러스 및 씬넌버 바이러스에 대한 인체 면역조절기능을 가지는 펩타이드 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20010094317A KR20010094317A (ko) | 2001-10-31 |
| KR100383554B1 true KR100383554B1 (ko) | 2003-05-12 |
Family
ID=19662140
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020000017920A KR100383554B1 (ko) | 2000-04-06 | 2000-04-06 | 한탄 바이러스 및 씬넌버 바이러스에 대한 인체 면역조절기능을 가지는 펩타이드 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR100383554B1 (ko) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR0123538B1 (ko) * | 1993-04-29 | 1997-11-28 | 이호왕 | 한탄바이러스, 서울바이러스, 푸우말라바이러스, 벨그라드바이러스 및 호왕바이러스 항원을 이용한 유행성출혈열 혼합백신 및 혼합진단제 |
| US5837441A (en) * | 1993-08-25 | 1998-11-17 | University Of New Mexico | Hantavirus-associated respiratory distress virus antigens |
| KR0166425B1 (ko) * | 1995-12-29 | 1999-01-15 | 허영섭 | 한탄 바이러스에 대한 인체 면역조절기능을 가진 펩타이드 |
| KR0178422B1 (ko) * | 1995-12-29 | 1999-03-20 | 허영섭 | 한탄 바이러스의 펩타이드 항원을 함유하는 리포좀 |
-
2000
- 2000-04-06 KR KR1020000017920A patent/KR100383554B1/ko not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR0123538B1 (ko) * | 1993-04-29 | 1997-11-28 | 이호왕 | 한탄바이러스, 서울바이러스, 푸우말라바이러스, 벨그라드바이러스 및 호왕바이러스 항원을 이용한 유행성출혈열 혼합백신 및 혼합진단제 |
| US5837441A (en) * | 1993-08-25 | 1998-11-17 | University Of New Mexico | Hantavirus-associated respiratory distress virus antigens |
| KR0166425B1 (ko) * | 1995-12-29 | 1999-01-15 | 허영섭 | 한탄 바이러스에 대한 인체 면역조절기능을 가진 펩타이드 |
| KR0178422B1 (ko) * | 1995-12-29 | 1999-03-20 | 허영섭 | 한탄 바이러스의 펩타이드 항원을 함유하는 리포좀 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| J Med Virol 2000 Feb;60(2):189-99 * |
| J Virol. 1998 Jan;72(1):57-64 * |
| Virus Genes. 1996;12(3):249-56. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20010094317A (ko) | 2001-10-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU633007B2 (en) | Heterofunctional cellular immunological reagents, vaccines containing same and methods for the use of same | |
| Langbeheim et al. | Antiviral effect on MS-2 coliphage obtained with a synthetic antigen. | |
| CA2363947C (en) | Hiv peptides, antigens, vaccine compositions, immunoassay kit and a method of detecting antibodies induced by hiv | |
| JP3491896B2 (ja) | 免疫調節ペプチド | |
| US5807552A (en) | Compositions for conferring immunogenicity to a substance and uses thereof | |
| KR20010053042A (ko) | 구제역에 대한 합성 펩티드 백신 | |
| IE64006B1 (en) | Antigens particulary envelope antigens of the virus of lymphadenopathies and of the acquired immune-deficiency syndrome and virus process for producing virus envelope antigens use of said antigens in the preparation of immunogenic compositions or for the diagnosis of the presence of antibodies against this virus | |
| CA2173138A1 (en) | Peptide capable of inducing immune response against hiv and aids preventive or remedy containing the peptide | |
| JPH08502244A (ja) | 免疫調節ペプチド | |
| CA2660064C (en) | Promiscuous pap cd4 t cell epitopes | |
| JP5065004B2 (ja) | 安定化Ｔａｔ抗原及び抗ＨＩＶワクチン接種のためのその使用 | |
| KR100383554B1 (ko) | 한탄 바이러스 및 씬넌버 바이러스에 대한 인체 면역조절기능을 가지는 펩타이드 | |
| US5476765A (en) | Synthetic peptide compositions with immunoreactivities to antibodies to HTLV and as vaccines | |
| CN107141355B (zh) | 一种htnv抗原表位线性串联多肽及表位肽-复合物四聚体和应用 | |
| WO1992021377A1 (en) | Peptides for use in induction of t cell activation against hiv-1 | |
| AU2006200454B2 (en) | Compositions and methods for treating viral infections | |
| JP2002509157A (ja) | Ｂ型肝炎ウイルスのｘプロテインに由来するペプチド抗原を含むリポソーム | |
| US5681696A (en) | Synthetic peptide compositions with immunoreactivities to antibodies to HTLV | |
| KR100194283B1 (ko) | B형 간염 바이러스에 대한 인체 면역조절기능을 가진 x 단백질 유래의 펩타이드 | |
| KR100190910B1 (ko) | C형 간염 바이러스에 대한 인체 면역조절기능을 가진펩타이드 | |
| KR0166425B1 (ko) | 한탄 바이러스에 대한 인체 면역조절기능을 가진 펩타이드 | |
| CA2290217C (en) | Peptides for the detection of hiv-1 group o | |
| AU2006235980B9 (en) | HIV peptides, antigens, vaccine compositions, immunoassay kit and a method of detecting antibodies induced by HIV | |
| NO176022B (no) | Analogifremgangsmåte til fremstilling av små peptider som hindrer binding til T4-reseptorer og virker som immunorganer |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant | ||
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20090429 Year of fee payment: 7 |
|
| LAPS | Lapse due to unpaid annual fee |