KR0132014B1

KR0132014B1 - 신규의 치환된 이미다졸 유도체 및 그의 제조방법

Info

Publication number: KR0132014B1
Application number: KR1019940002681A
Authority: KR
Inventors: 유성은; 이규양; 이상희; 김혜령; 서지희; 김낙정; 김선주; 차옥자; 이승호; 정이숙; 이병호; 서호원; 신영아; 신화섭
Original assignee: 강박광; 재단법인한국화학연구소
Priority date: 1994-02-16
Filing date: 1994-02-16
Publication date: 1998-04-17
Also published as: KR950025037A

Abstract

본 발명의 하기 일반식(Ⅰ)의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 그의 제조방법 및 상기 화합물 또는 그의 염을 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.

상기식에서,

A 는 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 C₁-C₆알킬 또는 OR₁(여기에서,

R₁은 H 또는 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 C₁-C₆알킬임)이고,

B 는 할로겐, CF₃또는 CF₂CF₃이며,

X 는 N 또는 N-옥사이드이고,

Y 는 -CH₂-, -CH(OR₁)- 또는 -C(=O)- 이며,

Z 는 H, 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 C₁-C₆알킬, 알케닐 또는 알키닐이다.

Description

신규의 치환된 이미다졸 유도체 및 그의 제조방법

본 발명은 신규의 치환된 이미다졸 유도체 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 그의 제조방법 및 상기 유도체 또는 그의 염을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 엔지오텐신 II 의 작용을 방해함으로써 엔지오텐신 II에 의해 유발되는 고혈압을 억제하는데에 유용한 치환된 이미다졸 유도체에 관한 것이다.

효소 레닌은 혈장 α-글로빈인엔지오텐시노겐에 작용하여 엔지오텐신 I 을 생산하는데, 이는 다시 엔지오텐신 전환 효소에 의해 엔지오텐신 II 로 된다. 이러한 엔지오텐신 II 는 강력한 혈관 압박제로서, 인간을 포함하는 여러 포유동물에서 고혈압을 유발하는 원인성 물질로 작용한다.

엔지오텐신 II 의 목표세포(target cell)상의 수용체(receptor)에서 엔지오텐신 II 의 작용을 방해할 경우 상기 호르몬과 수용체의 상호작용에 의해 발생하는 혈압상승을 막을 수 있게 되므로 엔지오텐신 II 의 작용을 막는 길항물질에 대해 연구가 꾸준히 진행되어 왔다. 특히 엔지오텐신 II 에 길항작용을 갖는 이미다졸 유도체에 관한 연구가 활발하게 진행되어 여러 가지 이미다졸 유도체가 개발되었다(A. T. Chiu et al., Eur. J. Pharm. 157, 13(1981); P. C. Wong et al.,. J. Pharmacol. Exp. Ther. 247, 1988); P. C. Wong et al., Hypertension 13, 489(1989) 등). 예를들면 문헌(D. J. Carini et al., J. Med. Chem. 34, 2525 (1990))에는 하기 구조식(A)의 이미다졸 유도체가 개시되어 있다.

본 발명자들은 기존에 개발된 이미다졸 유도체에 비해 더욱 효과적으로 엔지오텐신 II 의 작용을 억제할 수 있는 화합물을 개발하고자 노력한 결과 3 위치가 2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일 메틸로 치환되고 2,4 및 5 위치가 특정 치환기로 치환된 이미다졸 화합물들이 우수한 혈압강하 효과를 나타냄을 발견하였다.

본 발명은 하기 일반식(I)의 이미다졸 유도체 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.

상기식에서,

A 는 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 C₁-C₆알킬 또는 OR₁(여기에서, R₁은 H 또는 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 C₁-C₆알킬임)이고, B 는 할로겐, CH₃또는 CH₂CH₃이며, X 는 N 또는 N-옥사이드이고, Y 는 -CH₂-, CH(OR₁)-(여기에서, R₁은 상기 정의한 바와 같다) 또는 -C(=O)- 이며, Z 는 H, 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 C₁-C₆알킬, 알케닐 또는 알키닐이다. 본 발명의 화합물중 바람직한 화합물은 A 가 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 C₁-C₄알킬 또는 OR₁이고, R₁은 직쇄 C₂-C₃알킬이고, B 는 Cl, Br, I, CF₃, 또는 CF₂CF₃이며, X 는 N 또는 N-옥사이드이고, Y 는 -CH(OH)-또는 -C(=O)-이며, Z 는 H, 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 C₁-C₄알킬 또는 알케닐인 화합물이다.

상기 화합물중 가장 바람직한 화합물의 구체적 예는 다음과 같다:

{2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(1-옥시피리딘-2-일)메탄온,

{2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(3-메틸-1-옥시피리딘-2-일)메탄온,

{2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(1-옥시피리딘-3-일)메탄온,

{2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(1-옥시피리딘-4-일)메탄온,

{2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(6-메틸-1-옥시피리딘-2-일)메탄온,

{2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(6-에테닐-1-옥시피리딘-2-일)메탄온,

{2-에톡시-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(1-옥시피리딘-6-메틸-2-일)메탄온,

{2-에톡시-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(6-에테닐-1-옥시피리딘-2-일)메탄온,

{2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(피리딘-2-일)메탄온,

{2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메텔]-3H-이미다졸-4-일}(피리딘-3-일)메탄온,

{2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(피리딘-4-일)메탄온,

{2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(1-옥시피리딘-2-일)메탄올,

{2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(1-옥시피리딘-3-일)메탄올 및

{2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메텔]-3H-이미다졸-4-일}(1-옥시피리딘-4-일)메탄올.

본 발명의 일반식(I) 화합물은 다음과 같은 방법으로 제조할 수 있다. 일반식(III)의 피리딜할로겐 화합물을 염기와 반응시켜 피리딜 리튬 화합물을 제조하고 이를 일반식(II)의 화합물과 반응시켜 일반식 (IV)의 화합물을 제조한다. 이때 사용하는 염기로는 n-부틸리튬, s-부틸리튬, t-부틸리튬, 리튬디이소프로필아미드 등이 있으며 디에틸에테르, 테트라하이드로퓨란 등의 용매를 사용할 수 있으며 반응온도는 -78℃ 내지 상온이다.

상기식에서,

G 는 할로겐이고,

P1 은 보호기로서 1-에톡시에틸 또는 트리페닐메틸이고,

A, B 및 Z 는 각각 상기 정의한 바와 같다.

상기 일반식(IV) 화합물의 보호기 P₁을 제거하여 일반식(Ia)이 화합물을 제조하는 바 이때 염산, 화산, 톨루엔술폰산 등의 산을 사용하여 탈보호시키고 용매로 물, 물-테트라히드로퓨란, 알코올계 용매를 사용할 수 있다.

상기식에서,

A, B, Z 및 P₁은 각각 상기 정의한 바와 같다.

한편, 일반식(IV)의 화합물을 삼산화크롬, 피리듐 디크로메이트, 디메틸술폭사이드-옥살릴 클로라이드, 이산화망간 같은 산화제로 산화시켜 일반식(V)의 화합물을 제조하고 이를 상기 일반식(IV)의 화합물을 탈보호시키는 방법과 동일한 방법으로 처리하여 일반식(Ib)의 화합물을 제조할 수 있다.

상기식에서,

A, B, Z 및 P₁은 각각 상기 정의한 바와 같다.

또다른 방법으로, 일반식(IV)의 화합물을 메타클로로퍼옥시벤조산, 과산화수소, 옥손, 마그네슘 모노퍼프탈산등과 같은 산화제로 산화하여 일반식(VI)의 N-옥사이드 화합물을 제조하고, 이를 일반식(IV)의 화합물을 탈보호시키는 방법과 동일한 방법으로 처리하여 일반식(Ic)의 화합물을 제조할 수 있다.

상기식에서,

A, B, Z 및 P₁은 각각 상기 정의한 바와 같다.

상기 산화반응에서 산화제로서 메타클로로퍼옥시벤조산을 사용하는 경우 1 내지 3 당량을 사용하고 용매로는 클로로포름, 메틸렌클로라이드 등을 사용하며 반응온도는 상온 내지 사용용매의 비등점이며; 과산화수소를 사용하는 경우 아세트산, 트리플루오로아세트산을 용매로 사용하며 반응온도는 상온 내지 60℃ 이고; 옥손을 사용하는 경우 물과 아세톤 혼합용매를 사용하며 탄산수소나트륨과 같은 염기를 가할 수도 있으며; 마그네슘 모노퍼프탈산을 사용하는 경우 물이나 아세트산 용매하에서 실시하며 반응온도는 40℃ 내지 85℃ 이다.

또다른 한편, 일반식(V)의 화합물을 상기 산화반응을 통하여 화합물(VII)을 제조한 후 일반식(VII)의 화합물을 일반식(IV)의 화합물을 탈보호시키는 방법과 동일한 방법으로 처리하여 일반식(Id)의 화합물을 제조할 수 있다.

상기식에서,

A, B, Z 및 P₁은 각각 상기 정의한 바와 같다.

상기 일반식(VII) 화합물의 또다른 제조방법으로는 일반식(VI)의 화합물을 일반식(IV)의 화합물에서 일반식(V)의 화합물을 제조하는 방법과 동일한 방법으로 처리하여 제조할 수 있다.

상기식에서,

A, B, Z 및 P₁은 각각 상기 정의한 바와 같다.

상기 일반식(VI)의 화합물의 또다른 제법으로, 일반식(III)의 화합물을 일반식(IV)의 화합물에서 일반식(VI)의 화합물을 제조하는 방법과 동일하게 산화반응시켜 일반식(VIII)의 N-옥사이드 화합물을 제조하고 이를 일반식(III)의 화합물에서 일반식(IV)의 화합물을 제조하는 방법과 동일하게 염기와 반응시킨 다음 일반식(II)의 화합물과 반응시켜 일반식(VI)의 화합물을 제조할 수 있다.

상기식에서,

G 는 할로겐이고,

A, B, Z 및 P₁은 각각 상기 정의한 바와 같다.

본 발명은 또는 일반식(I)의 화합물의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하는데 바람직한 염으로는 칼륨염 또는 나트륨염 등을 예로 들 수 있으며 이들 염들은 통상의 공지된 방법으로 제조할 수 있다.

서두에서 언급한 바와 같이, 본 발명의 일반식(I)의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염은 엔지오텐신 II에 대한 길항작용에 의한 혈압 강하 효과로 고혈압 치료에 사용할 수 있을 뿐만 아니라 급성 또는 만성 심부전증 및 각종 신장기능 장애의 치료에도 사용할 수 있다. 또한, 본 발명의 화합물을 근육장애로부터 유발되는 편두통 및 레이너드 병의 치료 및 안구의 내압증가로 인해 유발되는 각종 안구질환의 치료에 유용하며 동맥경화의 과정을 방해할 수 있다.

이들 화합물은 단독으로 또는 다른 고혈압 치료제, 예를들면, 이뇨제, 안지오텐신 전환 효소 저해제, 칼슘 통로 차단제, 칼륨 통로 차단제 등과 함께 병용할 수 있다. 따라서, 본 발명은 일반식(I)의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 활성성분으로 포함하는 약학적 조성물을 제공한다. 특히, 본 발명은 혈압 강하 효과량의 일반식(I)의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염과 약학적으로 허용가능한 담체 등을 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.

상기 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 경우 투여하도록 조제되는 것이 바람직하다. 본 발명의 조성물은 단위 용량 형태인 것이 바람직하며, 적합한 단위 용량 형태로는 정제, 캅셀제 및 산제형태가 있다. 상기 단위 용량 형태는 본 발명의 화합물을 0.1∼1000mg, 더욱 바람직하게는 1∼500mg 함유할 수 있다. 본 발명의 조성물은 체중 70kg 의 성인의 경우 하루에 4회, 더욱 바람직하게는 1 또는 2 회 투여할 수 있으나, 환자의 증상, 성별 등 여러 가지 요인에 의해 다양하게 증감될 수 있다.

본 발명의 조성물은 통상적인 부형제, 예를들면, 충진제, 응집방지제, 결합제, 윤활제, 향미제 등과 합께 배합될 수 있으며, 배합은 통상 공지된 방법에 따라 수행한다. 이하 실시예로서 본 발명의 화합물의 제조를 예시하지만, 이로써 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다.

실시예에서 비율은 달리 언급하지 않는 한 v/v 기준이다.

[실시예]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(1-옥시피리딘-2-일)메탄온의 제조

(단계 1)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(피리딘-2-일)메탄올의 제조

2-브로모피리딘 174.5㎕(1.83mmole)을 테트라하이드로퓨란 3㎖에 녹인 뒤 -78℃ 로 냉각하고 헥산중의 1.6M n-부틸리튬용액 0.95㎖(1.53mmole)을 가한 후 -75℃에서 25 분동안 교반시켰다. 2-부틸-4-클로로-1[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]이미다졸-5-카르복시알데히드 303.5mg(0.61mmole)을 테트라하이드로퓨란 5㎖ 에 녹여 -78℃에서 상기 반응용액에 가한후 -20℃ 로 온도를 서서히 올리면서 1 시간동안 교반시켰다. 물 5㎖을 가하고 에틸 아세테이트 10㎖ 로 추출한 뒤 유기층을 물 5㎖ 로 세척한 후 무수 황산 나트륨으로 탈수건조시키고 감압농축한 뒤 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 분리정제하여 상기 목적화합물 246.4mg(수용 70%)을 얻었다.

(단계 2)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(피리딘-2-일)메탄온의 제조

(단계 1)에서 수득한 화합물 208mg(0.364mmole)을 메틸렌클로라이드 6㎖ 에 녹인 후 이산화망간 475mg(5.46mmole)을 가하여 상온에서 3 시간동안 교반시킨 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적 화합물 167.9mg(수율 81%)을 얻었다.

(단계 3)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(1-옥시피리딘-2-일)메탄온의 제조

(단계 2)에서 수득한 화합물 158mg(0.277mmole)을 메틸렌클로라이드 4㎖ 에 녹이고 순도 80% 의 3-클로로퍼옥시벤조산 119.5mg(0.55mmole)을 가하여 상온에서 5 시간동안 교반시킨 다음 순도 80% 의 3-클로로퍼옥시벤조산 65mg(0.3mmole)을 더 가하여 상온에서 3 시간동안 교반시켰다. 포화 중탄산 나트륨 수용액 3㎖ 물 3㎖ 로 세척한 뒤 무수 황산 나트륨으로 탈수건조시키고 감압농축한후 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 70mg(수율 43%)을 얻었다.

(단계 4)

2-부틸-5-클로로-3-[2'(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(1-옥시피리딘-2-일)메탄온의 제조

(단계 3)에서 수득한 화합물 29.1mg(0.05mmole)을 테트라하이드로퓨란 0.5㎖ 에 녹이고 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가하여 상온에서 4 시간 30 분동안 교반시켰다. 그다음 1N 수산화나트륨을 가하여 pH를 중성으로 조절하고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리 정제하여 상기 목적화합물 25mg(수율 94%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.90(t, 3H), 1.35(m, 2H), 1.60(m, 2H), 2.70(t, 2H), 5.73(s, 2H), 7.10(s, 4H), 7.50∼7.80(m, 7H), 8.30(d, 1H).

[실시예 2]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(피리딘-2-일)메탄올의 제조

상기 실시예 1 의 (단계 1)에서 수득한 화합물 44.5mg(0.078mmole)을 테트라하이드로퓨란 1㎖ 에 녹인후 1N 염산 수용액 1㎖을 가하여 상온에서 6 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 약 6 정도로 조절하여 감압농축한 뒤 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 38mg(수율 97.5%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.82(t, 3H), 1.25(m, 2H), 1.50(m, 2H), 2.40(t, 2H), 5.20(q, 2H), 6.05(s, 1H), 6.60(d, 2H), 7.00(d, 2H), 7.10(m, 1H), 7.30∼7.70(m, 6H), 8.30(d, 1H).

[실시예 3]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(피리딘-2-일)메탄온의 제조

상기 실시예 1 의 (단계 2)에서 수득한 화합물 26.9mg(0.047mmole)을 테트라하이드로퓨란 5㎖ 에 녹이고 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가하여 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절하고 감압농축한 뒤 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 22.9mg(수율 98%)을 얻었다.

¹H NMR(아세톤-d₅) δ

0.95(t, 3H), 1.40(m, 2H), 1.70(m, 2H), 2.80(t, 2H), 5.70(br s, 2H), 7.10(s, 4H), 7.50∼8.10(m, 8H).

[실시예 4]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(1-옥시피리딘-2-일)메탄올의 제조

상기 실시예 1 의 (단계 3)에서 수득한 화합물 38.9mg(0.0664mmole)을 메탄올 1㎖ 에 녹인후 수소화붕소나트륨 15㎖(0.132mmole)을 가하여 상온에서 10 분동안 교반시켰다. 그 다음 아세톤 0.5㎖를 가하여 여분의 수소화붕소나트퓸을 제거한 뒤 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 알코올 화합물 37.3mg(수율 95.5%)을 얻었다. 알코올 화합물 37.3mg(0.0634mmole)을 테트라하이드로퓨란 0.5㎖ 에 녹인후 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가하여 상온에서 2 시간 30 분동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절하고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 32mg(수율 98%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.85(t, 3H), 1.30(m, 2H), 1.50(m, 2H), 2.50(t, 3H), 5.20∼5.50(q, 2H), 6.15(s, 1H), 6.80(d, 2H), 7.00(d, 2H), 7.20∼7.60(d, 1H), 7.90((d, 1H), 8.07(d, 1H).

[실시예 5]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(1-옥시피리딘-3-일)메탄온의 제조

(단계 1)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(피리딘-3-일)메탄올의 제조

3-브로모피리딘 0.75㎖(7.76mmole)을 에틸 에테르 10㎖ 에 녹인 뒤 -40℃ 로 냉각하고 헥산용액중의 2.5M n-부틸리튬용액 2.8㎖(7mmole)을 가하고 -40℃에서 20분간 교반시켰다. 2-부틸-4-클로로-1-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일페닐]이미다졸-5-카르복시알데히드 382mg(0.776mmole)을 에틸 에테르 5㎖ 에 녹여 -40℃에서 상기 반응용액에 가하고 -40℃에서 8시간동안 교반시킨 후 상온으로 온도를 서서히 올리면서 교반시켰다. 포화 중탄산나트륨 수용액 7㎖을 가하고 에틸 아세테이트 15㎖ 로 추출한 뒤 유기층을 물 5㎖ 로 세척하고 무수 황산 나트륨으로 탈수 건조시키고 감압농축한 뒤 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 185mg(수율 42%)을 얻었다.

(단계 2)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(피리딘-3-일)메탄온의 제조

(단계 1)에서 수득한 화합물 147.8mg(0.259mmole)을 메틸렌클로라이드 4㎖에 녹인 뒤 이산화망간 482mg(5.54mmole)을 가하여 상온에서 15시간동안 교반시킨 후 실리카겔 컬럼 크래마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 132.5mg(수율 89.8%)을 얻었다.

(단계 3)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(1-옥시피리딘-3-일)메탄온의 제조

(단계 2)에서 수득한 화합물 113mg(0.198mmole)을 메틸렌 클로라이드 4ml에 녹인 후 순도 80%의 메타클로로퍼옥시벤조산 86㎖(0.397mmole)을 가하여 상온에서 5 시간동안 교반시켰다. 그 다음 포화 중탄산나트륨 수용액 3㎖ 로 세척한 뒤 무수 황산 나트륨으로 탈수건조하여 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 97mg(수율 83.7%)을 얻었다.

(단계 4)

(단계 3)에서 수득한 화합물 43mg(0.073mmole)을 테트라하이드로퓨란 0.5㎖ 에 녹인 후 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가하여 15시간동안 상온에서 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 약 6 정도로 조절한 뒤 감압농축하고 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 35.5mg(수율 94.7%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.90(t, 3H), 1.35(m, 2H), 1.65(m, 2H), 2.75(t, 2H), 5.55(s, 2H), 7.05(q, 4H), 7.45∼7.80(m, 6H), 8.50(m, 2H).

[실시예 6]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(피리딘-3-일)메탄올의 제조

실시예 5 의 (단계 1)에서 수득한 화합물 60.5mg(0.106mmole)을 테트라하이드로퓨란 1㎖ 에 녹인 후 1N 염산 수용액 약 1㎖을 가하여 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절한 후 감압농축하고 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 39.8mg(수율 75%)을 얻었다.

¹H NMR(아세톤-d₆) δ

0.95(t, 3H), 1.45(m, 2H), 1.80(m, 2H), 2.72(t, 2H), 5.50(q, 2H), 6.30(s, 1H), 6.60(d, 2H), 6.90(s, 2H), 7.45∼8.30(m, 8H).

[실시예 7]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(피리딘-3-일)메탄온의 제조

실시예 5 의 (단계 2)에서 수득한 화합물 33.8mg(0.059mmole)을 테트라하이드로퓨란 5㎖ 에 녹인후 1N 염산 수용액 약 0.5㎖을 가하여 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절한 후 감압농축하고 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 25.2mg(수율 86%)을 얻었다.

¹H NMR(아세톤-d₆) δ

0.95(t, 3H), 1.45(m, 2H), 1.80(m, 2H), 2.83(t, 2H), 5.65(s, 2H), 7.15(br s, 4H), 7.50∼7.80(m, 5H), 8.10(m, 1H) 8.90(br s, 2H),

[실시예 8]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(1-옥시피리딘-3-일)메탄올의 제조

실시예 5 의 (단계 3)에서 수득한 화합물 55.4mg(0.095mmole)을 메탄올 2㎖ 에 녹인후 수소화 붕소나트륨 5.4㎖(0.14mmole)을 가하여 상온에서 5 분간 교반시켰다. 아세톤 5㎖을 가하여 여분의 수소화 붕소나트륨을 제거한 뒤 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 환원된 알코올 화합물 50mg(수율 89.6%)을 얻었다. 상기 알코올 화합물 50mg(0.085mmole)을 테트라하이드로퓨란 0.5㎖ 에 녹인 후 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가하여 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 약 6 정도로 조절한 후 감압농축하고 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 40.9mg(수율 93%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.85(t, 3H), 1.30(m, 2H), 1.55(m, 2H), 2.55(t, 2H), 5.20(d, 1H), 5.40(d, 1H), 6.08(s, 1H), 6.63(d, 2H), 6.97(d, 2H), 7.25(m, 2H), 7.50(m, 2H), 7.60(m, 2H), 8.00(br s, 1H), 8.13(br s, 1H).

[실시예 9]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(1-옥시피리딘-4-일)메탄온의 제조

(단계 1)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(피리딘-4-일)메탄올의 제조

헥산용액중의 2.5M n-부틸리튬용액 1.38㎖(3.45mmole)에 에틸에테르 5㎖ 을 가한 뒤 테트라메틸에틸렌 디아민 155㎕(1.03mmole)을 가하여 상온에서 10 분동안 교반하면서 -78℃ 로 냉각시켰다. 4-브로모피리딘 544mg(3.44mmole)을 에틸 에테르 3㎖ 에 녹여 상기 용액에 가하고 -78℃에서 30분동안 교반시켰다. 2-부틸-4-클로로-1-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]이미다졸-5-카르복시알데히드 508mg( 1.03mmole)을 에틸 에테르 3㎖ 에 녹여 -78℃에서 상기 용액에 가한 후 -40℃에서 5 시간동안 교반시켰다. 그 다음 포화 중탄산나트륨 수용액 7㎖을 가하고 에틸 아세테이트 20㎖ 로 추출한 뒤 유기층을 물 7㎖ 로 세척하고 무수 황상 나트륨으로 탈수건조시키고 감압농축한 뒤 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 373mg(수율 63%)을 얻었다.

(단계 2)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(피리딘-4-일)메탄온의 제조

상기 (단계 1)에서 수득한 화합물 202.6mg(0.355mmole)을 메틸렌 클로라이드 3㎖ 에 녹인 뒤 이산화 망간 518㎖(5.96mmole)을 가하여 상온에서 15 시간동안 교반시킨 다음 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 179.7mg(수율 89%)을 얻었다.

(단계 3)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(1-옥시피리딘-4-일)메탄온의 제조

상기 (단계 2)에서 수득한 화합물 135.2mg(0.237mmole)을 메틸렌 클로라이드 3㎖ 에 녹인후 순도 50% 의 메타클로로퍼옥시벤조산 184㎖(0.533mmole)을 가하여 상온에서 2 시간동안 교반시켰다. 그 다음 포화 중탄산나트륨 수용액 3㎖로 2 회 세척한 뒤 무수 황산 나트륨으로 탈수건조시키고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 130mg(수율 94%)을 얻었다.

(단계 4)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(1-옥시피리딘-4-일) 메탄온의 제조

상기 (단계 3)에서 수득한 화합물 44mg(0.075mmole)을 테트라하이드로퓨란 0.5㎖ 에 녹인후 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가하여 상온에서 17 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절한 후 감압농축하고 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 32.3mg(수율 84%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.90(t, 3H), 1.38(m, 2H), 1.66(m, 2H), 2.78(t, 2H), 5.50(s, 2H), 6.97(d, 2H), 7.08(d, 2H), 7.48(m, 4H), 7.73(d, 2H), 8.40(d, 2H).

[실시예 10]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(피리딘-4-일) 메탄올의 제조

실시예 9 의 (단계 1)에서 수득한 화합물 52.4mg(0.09mmole)을 테트라하이드로퓨란 5㎖ 에 녹인후 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가하여 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절한 후 감압농축하고 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 39.2mg(수율 87%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.85(t, 3H), 1.30(m, 2H), 1.55(m, 2H), 2.47(t, 2H), 5.20(q, 2H), 6.10(s, 2H), 6.65(d, 2H), 6.90(d, 2H), 7.30(d, 2H), 7.45∼7.65(m, 4H), 8.35(d, 2H).

[실시예 11]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(피리딘-4-일) 메탄온의 제조

실시예 9 의 (단계 2)에서 수득한 화합물 45mg(0.079mmole)을 테트라하이드로퓨란 0.5㎖ 에 녹인후 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가하여 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절한 후 감압농축하고 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 38mg(수율 96.6%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.90(t, 3H), 1.38(m, 2H), 1.65(m, 2H), 2.75(t, 2H), 5.60(s, 2H), 7.02(d, 2H), 7.10(d, 2H), 7.52(m, 6H), 8.74(d, 2H).

[실시예 12]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸3H-이미다졸-4-일(1-옥시피리딘-4-일) 메탄올의 제조

실시예 9 의 (단계 3)에서 수득한 화합물 48mg(0.082mmole)을 메탄올 1㎖ 에 녹인후 수소화붕소 나트륨 6.2mg(0.164mmole)을 가하여 상온에서 5 분간 교반시키고 아세톤 0.5㎖을 가하여 여분의 수소화 붕소 나트륨을 제거한 뒤 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 알코올 화합물 48mg(수율 99%)을 얻었다. 알코올 화합물 48mg(0.082mmole)을 테트라하이드로퓨란 0.5㎖ 에 녹인 후 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가하여 상온에서 15 시간동안 교반시키고 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 맞춘 후 감압농축하고 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 30mg(수율 71%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.80(t, 2H), 1.27(m, 2H), 1.53(m, 2H), 2.40(m, 2H), 5.20(d, 2H), 5.98(d, 2H), 6.48(d, 2H), 6.78(d, 1H), 6.82(d, 2H), 7.25(d, 2H), 7.60(m, 4H), 7.90(d, 2H).

[실시예 13]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(3-메틸-1-옥시피리딘-2-일) 메탄온의 제조

(단계 1)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(3-메틸피리딘-2-일) 메탄올의 제조

2-브로모-3-메틸피리딘 290mg(1.68mmole)을 테트라하이드로퓨란 4㎖ 에 녹인 뒤 -78℃ 로 냉각시키고 질소가스하에서 헥산용액중의 2.5M n-부틸리튬용액 0.54㎖(1.35mmole)을 천천히 가한 후 -78℃에서 30분동안 교반시켰다. 2-부틸-4-클로로-1-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]이미다졸-5-카르복시알데히드 332mg(0.67mmole)을 테트라하이드로퓨란 2㎖ 에 녹여서 -78℃에서 상기 반응용액에 천천히 가한후 30 분동안 교반시키고 반응온도 0℃ 로 올리면서 1시간동안 더 교반시켰다. 물 10ml를 가하고 에틸 아세테이트(20㎖×2)로 추출한 뒤 유기층을 포화 염화나트륨 수용액 10㎖ 로 세척하고 무수 황산 마그네슘으로 건조시킨 후 감압하에서 용매를 제거하고 남은 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 380mg(수율 97%)을 얻었다.

(단계 2)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(3-메틸피리딘-2-일) 메탄온의 제조

(단계 1)에서 수득한 화합물 380mg(0.65mmole)을 메틸렌 클로라이드 3㎖에 녹이고 이산화 망간 584mg(6.72mmole)을 가한 후 상온에서 15 시간동안 교반시킨 후 셀라이트 패드(celite pad)로 이산화 망간을 여과하고 농축하였다. 그 다음, 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 310mg(수율 82%)을 얻었다.

(단계 3)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(3-메틸-1-옥시피리딘-2-일) 메탄온의 제조

상기 (단계 2)에서 수득한 화합물 209mg(0.36mmole)을 메틸렌 클로라이드 3㎖ 에 녹이고 순도 50%의 3-클로로퍼옥시벤조산 85mg(0.54mmole)을 가하고 상온에서 15 시간동안 교반하였다. 포화 중탄산나트륨 수용액 5㎖를 가하고 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 추출한 후 포화 염화나트륨 수용액 5㎖ 로 세척하고, 무수 황산 마그네슘으로 건조시킨 후 감압농축하였다. 그 다음 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 173mg(수율 80%)을 얻었다.

(단계 4)

상기 (단계 3)에서 수득한 화합물 147mg(0.245mmole)을 테트라하이드로퓨란 1㎖ 에 녹이고 1N 염산 수용액 1㎖을 가하여 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절하고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 116mg(수율 90%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.91(t, 3H), 1.37(9m, 2H), 1.63(m, 2H), 2.19(s, 3H), 2.77(t, 2H), 5.81(s, 2H), 7.15(s, 4H), 7.47∼7.73(m, 5H), 7.99(dd, 1H), 8.21(d, 1H).

[실시예 14]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일페닐]-3H-이미다졸-4-일(4-메틸-1-옥시피리딘-2-일) 메탄온의 제조

(단계 1)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(4-메틸피리딘-2-일) 메탄올의 제조

2-브로모-4-메틸피리딘 336mg(1.95mmole)을 테트라하이드로퓨란 5㎖ 에 녹인 뒤 -78℃ 로 냉각시키고 질소가스하에서 헥산용액중의 2.5M n-부틸리튬용액 0.62㎖(1.56mmole)을 천천히 가한 후 -78℃에서 30분동안 교반시켰다. 2-부틸-4-클로로-1-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]이미다졸-5-카르복시알데히드 385mg(0.78mmole)을 테트라하이드로퓨란 2㎖ 에 녹여서 -78℃에서 상기 반응용액에 천천히 가한후 30 분동안 교반시키고 반응온도 0℃ 로 올리면서 1 시간동안 더 교반시켰다. 물 10ml를 가하고 에틸 아세테이트(20㎖×2)로 추출한 뒤 유기층을 포화 염화나트륨 수용액 10㎖ 로 세척하고 무수 황산 마그네슘으로 건조시킨 후 감압하에서 용매를 제거하고 남은 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 305mg(수율 67%)을 얻었다.

(단계 2)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(4-메틸피리딘-2-일) 메탄온의 제조

(단계 1)에서 수득한 알코올 화합물 275mg(0.47mmole)을 메틸렌 클로라이드 3㎖ 에 녹이고 이산화 망간 408mg(4.69mmole)을 가한 후 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 셀라이트 패드(celite pad)로 이산화 망간을 여과하고 농축하였다. 그 다음, 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 214mg(수율 78%)을 얻었다.

(단계 3)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(4-메틸-1-옥시피리딘-2-일) 메탄온의 제조

상기 (단계 2)에서 수득한 화합물 146mg(0.25mmole)을 메틸렌 클로라이드 3㎖ 에 녹이고 순도 50%의 3-클로로퍼옥시벤조산 129mg(0.37mmole)을 가하고 상온에서 15 시간동안 교반한 다음 포화 중탄산나트륨 수용액 5㎖를 가하고 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 추출한 후 포화 염화나트륨 수용액 5㎖ 로 세척하였다. 그 다음 무수 황산 마그네슘으로 건조시킨 후 감압농축하였다. 그 다음 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 74mg(수율 49%)을 얻었다.

(단계 4)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(4-메틸-1-옥시피리딘-2-일) 메탄온의 제조

상기 (단계 3)에서 수득한 화합물 68mg(0.113mmole)을 테트라하이드로퓨란 0.5㎖ 에 녹이고 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가한 후 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절하고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 51mg(수율 85%)을 얻었다.

¹H NMR(200MHz, CD₃OD) δ

0.89(t, 3H), 1.35(m, 2H), 1.61(m, 2H), 2.48(s, 3H), 2.73(t, 2H), 5.76(s, 2H), 7.14(s, 4H), 7.46∼7.72(m, 6H), 8.23(d, 1H).

[실시예 15]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(5-메틸-1-옥시피리딘-2-일) 메탄온의 제조

(단계 1)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(5-메틸피리딘-2-일) 메탄올의 제조

2-브로모-5-메틸피리딘 314mg(1.83mmole)을 테트라하이드로퓨란 4㎖ 에 녹인 뒤 -78℃ 로 냉각시키고 질소가스하에서 헥산용액중의 2.5M n-부틸리튬용액 0.61㎖(1.53mmole)을 천천히 가한 후 -78℃에서 30분동안 교반시켰다. 2-부틸-4-클로로-1-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]이미다졸-5-카르복시알데히드 300mg(0.61mmole)을 테트라하이드로퓨란 2㎖ 에 녹여서 -78℃에서 상기 반응용액에 천천히 가한후 30 분동안 교반시키고 반응온도 0℃ 로 올리면서 1 시간동안 더 교반시켰다. 물 10ml를 가하고 에틸 아세테이트(20㎖×2)로 추출한 뒤 유기층을 포화 염화나트륨 수용액 10㎖ 로 세척하고 무수 황산 마그네슘으로 건조시킨 후 감압하에서 용매를 제거하고 남은 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 278mg(수율 78%)을 얻었다.

(단계 2)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(5-메틸피리딘-2-일) 메탄온의 제조

(단계 1)에서 수득한 알코올 화합물 230mg(0.39mmole)을 메틸렌 클로라이드 3㎖ 에 녹이고 이산화 망간 340mg(3.9mmole)을 가한 후 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 셀라이트 패드(celite pad)로 이산화 망간을 여과하고 농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 204mg(수율 90%)을

얻었다.

(단계 3)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(5-메틸-1-옥시피리딘-2-일) 메탄온의 제조

상기 (단계 2)에서 수득한 화합물 169mg(0.29mmole)을 메틸렌 클로라이드 3㎖ 에 녹이고 순도 50%의 3-클로로퍼옥시벤조산 200mg(0.58mmole)을 가하고 상온에서 15 시간동안 교반하였다. 그 다음 포화 중탄산나트륨 수용액 5㎖를 가하고 에틸 아세테이트(10㎖×2)로 추출한 후 포화 염화나트륨 수용액 5㎖ 로 세척하고, 무수 황산 마그네슘으로 건조시킨 후 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 108mg(수율 62%)을 얻었다.

(단계 4)

상기 (단계 3)에서 수득한 화합물 40mg(0.067mmole)을 테트라하이드로퓨란 0.5㎖ 에 녹이고 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가한 후 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절하고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 33mg(수율 93%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.88(t, 3H), 1.32(m, 2H), 1.58(m, 2H), 2.44(s, 3H), 2.71(t, 2H), 5.74(s, 2H), 7.13(br s, 4H), 7.44∼7.70(m, 6H), 8.22(s, 1H).

[실시예 16]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(5-메틸피리딘-2-일) 메탄올의 제조

상기 실시예 15의 (단계 1)에서 수득한 화합물 30mg(0.051mmole)을 테트라하이드로퓨란 0.5㎖ 에 녹이고 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가한 후 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절하고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 25mg(수율 96%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.85(t, 3H), 1.28(m, 2H), 1.50(m, 2H), 2.21(s, 3H), 2.44(t, 2H), 5.10(d, 1H), 5.26(d, 1H), 6.01(s, 1H), 6.77(d, 1H), 6.96(d, 1H), 7.37∼7.66(m, 6H), 8.14(s, 1H).

[실시예 17]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(5-메틸피리딘-2-일) 메탄온의 제조

상기 실시예 15의 (단계 2)에서 수득한 화합물 32mg(0.055mmole)을 테트라하이드로퓨란 0.5㎖ 에 녹이고 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가한 후 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절하고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 26mg(수율 93%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.90(t, 3H), 1.37(m, 2H), 1.62(m, 2H), 2.47(s, 3H), 2.72(t, 2H), 5.57(d, 2H), 7.08(br s, 4H), 7.44∼7.71(m, 5H), 7.85(dd, 1H), 8.50(d, 1H).

[실시예 18]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(5-메틸-1-옥시피리딘-2-일) 메탄올의 제조

상기 실시예 15의 (단계 3)에서 수득한 화합물 30mg(0.050mmole)을 메탄올 1㎖ 에 녹이고 수소화 붕소 나트륨 1.9mg(0.050mmole)을 가하여 상온에서 30 분간 교반하였다. 물 5㎖를 가하여 에틸아세테이트(10㎖×2)로 추출하고 유기층을 포화 염화나트륨 수용액 5㎖ 로 세척하고 무수 황산 마그네슘으로 건조시키고 감압농축하여 알코올 화합물 25㎖을 얻었다. 상기 수득한 알코올 화합물 25㎖을 테트라하이드로퓨란 0.5㎖에 녹이고, 1N 염산 수용액 0.5ml를 가한 후 상온에서 18 시간동안 교반하고 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절한 후 감압농축하고 남은 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 상기 목적화합물 20mg(수율 75%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.87(t, 3H), 1.31(m, 2H), 1.53(m, 2H), 2.24(s, 3H), 2.58(t, 2H), 5.32(d, 1H), 5.49(d, 1H), 6.10(s, 1H), 6.96(d, 2H), 7.06(d, 2H), 7.38(d, 1H), 7.52∼7.72(m, 4H), 8.04(s, 1H)

[실시예 19]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(6-메틸-1-옥시피리딘-2-일) 메탄온의 제조

(단계 1)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(6-메틸피리딘-2-일) 메탄올의 제조

2-브로모-3-메틸피리딘 151mg(0.878mmole)을 테트라하이드로퓨란 2㎖ 에 녹인 뒤 -78℃ 로 냉각시키고 헥산용액중의 2.5M n-부틸리튬용액 0.25㎖(0.625mmole)을 천천히 가한 후 -78℃에서 30분동안 교반시켰다. 2-부틸-4-클로로-1-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]이미다졸-5-카르복시알데히드 116.6mg(0.237mmole)을 테트라하이드로퓨란 3㎖ 에 녹여서 -78℃에서 상기 반응용액에 가하고 -78℃에서 2 시간동안 교반시킨 후 상온으로 온도를 서서히 울리면서 교반하였다. 그다음 포화 중탄산 나트륨 수용액 10ml를 가하고 에틸 아세테이트 15㎖ 로 추출한 뒤 유기층을 물 7㎖ 로 세척하고 무수 황산 마그네슘으로 탈수 건조시키고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 94.8mg(수율 68%)을 얻었다.

(단계 2)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(6-메틸피리딘-2-일) 메탄온의 제조

(단계 1)에서 수득한 화합물 211.6mg(0.36mmole)을 메틸렌 클로라이드 5㎖ 에 녹인 후 이산화 망간 620mg(7.13mmole)을 가하여 상온에서 15 시간동안 교반시킨 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 180.6mg(수율 86%)을 얻었다.

(단계 3)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(6-메틸-1-옥시피리딘-2-일) 메탄온의 제조

(단계 3)에서 수득한 화합물 143.5mg(0.246mmole)을 메틸렌 클로라이드 7㎖ 에 녹인 후 메타클로로퍼옥시벤조산 258mg(순도 50%, 0.74mmole)을 가하고 상온에서 5 시간동안 교반하였다. 그 다음 포화 중탄산 나트륨 수용액 5㎖로 세척한 뒤 무수 황산 나트륨으로 탈수 건조시키고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 53.6mg(수율 36%)을 얻었다.

(단계 4)

(단계 3)에서 수득한 화합물 23mg(0.038mmole)을 테트라하이드로퓨란 0.5㎖ 에 녹이고 1N 염산 수용액 0.3㎖을 가하여 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절한 후 감압농축하고 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 16.5mg(수율 82%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.90(t, 3H), 1.33(m, 2H), 1.60(m, 2H), 2.51(s, 3H), 2.70(t, 2H), 5.77(s, 2H), 7.15(s, 4H), 7.43∼7.72(m, 7H).

[실시예 20]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(6-메틸피리딘-2-일) 메탄올의 제조

상기 실시예 19 의 (단계 1)에서 수득한 화합물 42.3mg(0.0722mmole)을 테트라하이드로퓨란 1㎖ 에 녹인 후 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가하여 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절하고 감압농축하고 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 33.7mg(수율 91%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.83(t, 3H), 1.28(m, 2H), 1.49(m, 2H), 2.37(s, 3H), 2.42(t, 2H), 5.28(q, 2H), 6.00(s, 1H), 6.72(d, 2H), 6.95(d, 2H), 7.00(d, 1H), 7.27(d, 1H), 7.44∼7.70(m, 5H).

[실시예 21]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(6-메틸피리딘-2-일) 메탄온의 제조

상기 실시예 19 의 (단계 2)에서 수득한 화합물 36.8mg(0.063mmole)을 테트라하이드로퓨란 0.5㎖ 에 녹인 후 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가하여 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절하고 감압농축하고 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 23.2mg(수율 72%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.90(t, 3H), 1.36(m, 2H), 1.62(m, 2H), 2.59(s, 3H), 2.72(t, 2H), 5.60(s, 2H), 7.10(s, 4H), 7.45∼7.70(t, 6H), 7.88(t, 1H).

[실시예 22]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(6-메틸-1-옥시피리딘-2-일) 메탄올 제조

상기 실시예 19 의 (단계 3)에서 수득한 화합물 22.7mg(0.038mmole)을 메탄올 1㎖ 에 녹이고 수소화 붕소 나트륨 2.2mg(0.057mmole)을 가하여 상온에서 15 분간 교반시킨 후 아세톤 0.5㎖를 가하여 여분의 수소화 붕소나트륨을 제거하고 감압농축한 후, 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 알코올 화합물 18.3mg(수율 80%)을 얻었다. 상기 수득한 알코올 화합물 18.3mg(0.03mmole)을 테트라하이드로퓨란 0.5㎖ 에 녹인후 1N 염산 수용액 0.3㎖ 을 가하여 상온에서 15 시간동안 교반시키고 1N 수산화나트륨으로 pH 를 중성으로 조절하고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 14.4mg(수율 90%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.84(t, 3H), 1.30(m, 2H), 1.54(m, 2H), 2.39(s, 3H), 2.50(t, 2H), 5.35(q, 2H), 6.12(s, 1H), 6.80(d, 2H), 7.03(d, 2H), 7.28∼7.80(m, 7H).

[실시예 23]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(6-에틸-1-옥시피리딘-2-일) 메탄온의 제조

(단계 1)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일페닐]-3H-이미다졸-4-일(6-에틸피리딘-2-일) 메탄올의 제조

2-브로모-6-에틸피리딘 246mg(1.32mmole)을 테트라하이드로퓨란 5㎖ 에 녹인 뒤 -78℃ 로 냉각하고 헥산용액중의 2.5M n-부틸리튬용액 0.45㎖(1.125mmole)을 가하여 -78℃에서 30분동안 교반시켰다. 2-부틸-4-클로로-1-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]이미다졸-5-카르복시알데히드 311mg (0.63 mmole)을 테트라하이드로퓨란 8㎖ 에 녹여서 -78℃에서 상기 반응용액에 가하고 -78℃에서 상온으로 온도를 서서히 올리면서 교반시켰다. 그 다음, 포화 중탄산 나트륨 수용액 15ml를 가하고 에틸 아세테이트 25㎖ 로 추출한 뒤 유기층을 물 15㎖ 로 세척하고 무수 황산 마그네슘으로 탈수 건조시키고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 242.6mg(수율 68%)을 얻었다.

(단계 2)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(6-에틸피리딘-2-일) 메탄온의 제조

상기 (단계 1)에서 수득한 화합물 201mg(0.335mmole)을 메틸렌 클로라이드 5㎖ 에 녹이고 이산화 망간 291mg(3.35mmole)을 가하여 상온에서 3 시간동안 교반시켰다. 셀라이트 패드로 이산화망간을 여과하고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 151mg(수율 75%)을 얻었다.

(단계 3)

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(6-에틸-1-옥시피리딘-2-일) 메탄온의 제조

상기 (단계 2)에서 수득한 화합물 115.8mg(0.194mmole)을 메틸렌 클로라이드 3㎖ 에 녹인 후 메타클로로퍼옥시벤조산 100mg(순도 50%, 0.291mmole)을 가하여 상온에서 6 시간동안 교반시켰다. 그 다음, 포화 중탄산 나트륨 수용액 10㎖로 세척한 후 무수 황산 나트륨으로 탈수 건조시키고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 75.4mg(수율 63%)을 얻었다.

(단계 4)

상기 (단계 3)에서 수득한 화합물 40.9mg(0.067mmole)을 테트라하이드로퓨란 1㎖ 에 녹인 후 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가하여 상온에서 4 시간 30 분동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절하고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 28.8mg(수율 79%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.89(t, 3H), 1.34(m, 5H), 1.59(m, 2H), 2.70(t, 2H), 2.95(q, 2H), 5.77(s, 2H), 7.14(s, 4H), 7.43(t, 1H), 7.50∼7.22(m, 6H).

[실시예 24]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-0일메틸]-3H-이미다졸-4-일(6-에틸피리딘-2-일) 메탄올의 제조

실시예 23 의 (단계 1)에서 수득한 화합물 40.7mg(0.068mmole)을 테트라하이드로퓨란 1㎖ 에 녹인 후 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가하여 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절하고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 27.9mg(수율 77.8%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.84(t, 3H), 1.18(t, 3H), 1.25(m, 2H), 1.49(m, 2H), 2.41(t, 2H), 2.68(q, 2H), 5.25(q, 2H), 6.02(s, 1H), 6.78(d, 2H), 6.75(d, 2H), 7.03(d, 1H), 7.25(d, 1H), 7.44∼7.70(m, 5H)

[실시예 25]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(6-에틸피리딘-2-일) 메탄온의 제조

실시예 23 의 (단계 2)에서 수득한 화합물 35mg(0.0586mmole)을 테트라하이드로퓨란 1㎖ 에 녹인 후 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가하여 상온에서 15 시간동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중성으로 조절하고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 27.7mg(수율 90%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.92(t, 3H), 1.32(m, 5H), 1.60(m, 2H), 2.72(t, 2H), 2.87(q, 2H), 5.60(s, 2H), 7.10(s, 4H), 7.48∼7.68(m, 6H), 7.90(t, 1H)

[실시예 26]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(6-에틸-1-옥시피리딘-2-일) 메탄올의 제조

실시예 23 의 (단계 3)에서 수득한 화합물 31.4mg(0.051mmole)을 메탄올 1㎖ 에 녹인 뒤 수소화 붕소나트륨 2.9mg(0.0765mmole)을 가하여 상온에서 5분간 교반시켰다. 아세톤 0.2㎖을 가하여 여분의 수소화 붕소 나트륨을 제거하고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 29mg(수율 92%)을 얻었다. 상기 수득한 알코올 화합물 29mg(0.047mmole)을 테트라 하이드로퓨란 1㎖ 에 녹인 후 1N 염산 수용액 0.5㎖을 가하여 상온에서 3 시간 30분동안 교반시켰다. 그 다음 1N 수산화나트륨으로 pH를 중심으로 조절하고 감압농축한 후 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리정제하여 상기 목적화합물 24.6mg(수율 96%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.85(t, 3H), 1.27(m, 5H), 1.53(m, 2H), 2.52(t, 2H), 2.84(m, 2H), 5.40(q, 2H), 6.15(s, 1H), 6.85(d, 2H), 7.02(d, 2H), 7.25∼7.84(m, 6H).

[실시예 27]

2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일(6-에테닐-1-옥시피리딘-2-일) 메탄온의 제조

실시예 19 의 (단계 1)에서 2-부틸-4-클로로-1-[2'-(1-(1-에톡시에틸)-1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]이미다졸-5-카르복시알데히드 500mg(1.02mmole)과 2-브로모-6-메틸피리딘 대신에 2-브로모-6-에테닐피리딘 372mg(2.02mmole)을 사용하여 실시예 19 의 단계 1,2,3,4 와 동일한 방법을 실시하여 상기 목적화합물 106mg(수율 19%)을 얻었다.

¹H NMR(CD₃OD) δ

0.88(t, 3H), 1.32(m, 2H), 1.57(m, 2H), 2.70(t, 2H), 5.74(s, 2H), 5.80(d, 1H), 6.30(d, 1H), 7.11∼7.68(m, 10H), 7.98(d, 1H).

본 발명의 화합물들의 효과를 알아보기 위해 하기와 같은 방법으로 엔지오텐신 II 수용체에 대한 결합력 및 혈압강하 효과를 측정하였다.

1. 엔지오텐신 II 수용체에 대한 결합력 분석(binding assay)

문헌(Chiu, A.T. et al., Eur, J. Pharm. 157, 13(1981))의 방법을 참조하여, 엔지오텐신 II 수용체에 대한 각 화합물의 효과를 측정하기 위한 방사성 동위원소가 부착된 리간드를 사용하여 수용체와 반응시킨 후 유리섬유 여과막으로 여과하는 과정을 거쳐 결합하지 않은 여분의 리간드를 제거한 뒤 세척된 여과막에 잔존하는 동위원소의 양을 측정하여 수용체에 대한 리간드의 결합반응을 정량하였으며, 그 방법은 구체적으로 다음과 같다.

(i) 엔지오텐신 II 수용체의 분리

한국화학연구소 실험동물실로 부터 250∼350g 의 스프라그-돌리 쥐(Spraque-Dawley rat) 및 위스타 쥐Wistar rat)를 분양받아서 사용하였으며 모든 실험과정은 특별한 언급이 없는 한 4℃에서 시행되었다.

실험동물로부터 부신(위스타 쥐의 경우는 간)을 적출하여 피질과 수질을 분리한 후이를 슈크로즈 완충액(0.2M 슈크로즈, 1mM EDTA, 10mM 트리스, pH7.2)으로 세척한 후 동일한 완충액으로 테플론 막자와 브린크만 호모게나이저(Brinkmann homogenizer)를 이용하여 조직을 분쇄하였다. 그 뒤 3000Xg 로 10 분간 원심분리하여 침전물을 제거하고 상등액을 합쳐서 다시 12,000Xg 로 13분간 원심 분리하였다. 최종 상등액을 102,000Xg 로 1시간동안 원심분리하고 상등액을 제거한 후 침전물을 트리스 완충액(50mM 트리스, 5mM MgCl₂, pH7.2)으로 세척한 후 다시 102,000Xg 로 1시간 원심분리하여 상등액을 제거한 후 침전물을 즉시 사용하거나 -70℃ 에 보관하였다.

상기 침전물을 적당량의 상기 트리스 완충액에 현탁시키고 단백질 함량을 바이오래드(Bio-Rad) DC 단백질 분석 키트로 측정한 후 각각의 조직의 종류에 따라 적정량의 단백질 농도로 조정하였다: 0.2∼0.3mg/㎖(스프라그 돌리 쥐:부신 피질), 1.5∼2.0mg/㎖(스프라그-돌리 쥐:부신 수질), 1.5∼2.0mg/㎖(위스타 쥐:간). 소 혈청 알부민(BSA)울 0.25% 가 되도록 가한 다음 즉시 사용하거나 알맞은 부피로 취하여 -70℃ 에 냉동보관한 후 사용하였다.

(ii) 본 발명의 화합물들의 엔지오텐신 II 결합 효과 측정

분석용 완충액(50mM 트리스(pH 7.2), 5mM MgCl₂, 0.25% BSA)에 리간드로 50㎕ 의 [³H] 엔지오텐신 II(NEN, NET-446)와 효과를 분석하고자 하는 화합물을 여러농도로 10㎕ 씩 넣어 최종부피가 0.5㎖ 이 되게 하였다.

대조 화합물로는 로사르탄(Losartan; Dup 753)을 사용하였다. 상기 수용체 현탁액 100㎕ 를 첨가한 후 60분간 25℃ 의 교반수조에서 반응시킨 후 3㎖ 의 차가운 분석용 완충액을 넣어 반응을 종료시키고 와트만(Whatman)유리사 여과막 GF/C를 이용하여 브랜델 세포 수확기 시스템(Brandel cell harvester system)으로 수용체에 결합된 동위원소를 분리한 후 세척하고 여과막에 잡힌 방사능을 액체 신틸레이션 계수기(Liquid scintillation counter)로 측정하여 다음과 같은 방법으로 분석한 화합물이 엔지오텐신 II 가 엔지오텐신 II 수용체에 결합하지 못하도록 하는 정도,즉 결합 저해도(%)를 결정하였다.

결합저해도(%) = [{(T-B) - (S-B)}/(T-B)] × 100

T : 화합물 미처리 반응 생성물의 DPM

S : 화합물 처리 반응 생성물의 DPM

D : 공 시험의 DPM

2. 신성 고혈압에 대한 혈압 강하 효과 측정

(i) 신성 고혈압 유발

신성 고혈압을 유발시키기 위하여 한국화학연구소 안정성센타에서 분양받은 4주령 수컷 스프라크-돌리 쥐(Spraque-Dawley rat)의 좌측 신동맥 결찰을 행하였다.

우선 에테르로 쥐를 마취시키고 복부의 털을 제거한 후 좌복부의 수술부위를 소독하였다. 세로로 약 1cm 가량 절개한 다음 복부 대동맥 가까이의 신동맥을 주위조직 및 정맥으로부터 조심스럽게 분리하여 봉합사(4/0 sterile surgical silk)로 신동액을 완전히 결찰하였다. 그리고 바늘이 달리 봉합사(4/0 sterile surgical silk with needle)로 신동맥을 완전히 결찰하였다. 감염방지를 위하여 수술부위를 소독약으로 소독한 후 세파졸린 소디움 주사액을 200∼250mg/kg일로 2일간 근육주사하였다. 결찰 6∼8 일 후 수축기 혈압이 180mmHg 이상인 동물을 신성 고혈압 모델동물로 실험에 사용하였다. 이때, 혈압측정은 동물의 꼬리로부터 비마취상태의 혈압을 측정하는 테일 커프(tail-cuff)법(Gerold, M. et al., Arzneimittrel-Forsch, 18 1285(1968))을 이용하였다.

(ii) 약물의 혈압강하 작용 평가

평가하고자 하는 화합물을 상기에서 만든 신성 고혈압 쥐에 정맥 또는 경구투여하였다. 쥐의 혈압은 도뇨관(catheter)을 통해 직접법(Chiu, A. T. et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 250 867(1989))으로 측정하였다.

쥐를 케타민 하이드로클로라이드 (Ketamine hydrochloride)(125mg/kg, i.p.)로 마취시킨 다음 폴리에틸렌 튜브 50(PE50)을 PE10 에 연결한 도뇨관에 헤파린 함유 염수 용액을 채워서 경동맥과 경정맹에 각각 꽂아 넣었다. 도뇨관의 다른쪽 끝은 피하를 따라 목뒤로 뽑아낸 후 고정하였다. 목부분의 수술부위는 금소글립으로 봉합하였다.

동물을 적어도 3시간 이상 안정시킨 후 경동맥에 꽂아넣은 한 도뇨관을 이소텍 압력변환기(isotec pressure transducer)에 연결하여 생리반응 측정기(physiograph Linearcorder WR3310)로 혈압 및 심박동수를 측정하였다. 혈압이 안정된 것을 확인한 후 시험물질을 정맥 또는 경구투여하였다. 정맥 투여시 투여부피는 1.0㎖/kg, 세척부피는 0.2㎖ 로 하였다. 약물 투여후 24시간까지 일정한 시간 간격으로 혈압 및 심박동수의 변화를 측정하여 표준물질의 약효와 비교하였다.

평가 대상 화합물은 정맥 주사시 0.05N KOH 에 녹여 사용 하였고, 경구 투여시에는 트윈 80 에 현탁시켜 투여하였다. 상기 효과 분석의 결과는 하기 표1 과 같다.

Claims

하기 일반식(I)의 화합물 또는 그이 약학적으로 허용가능한 염:

상기식에서, A 는 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 C₁-C₆알킬 또는 OR₁(여기에서, R₁은 H 또는 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 C₁-C₆알킬이)이고, B 는 할로겐, CF₃또는 CF₂CF₃이며, X 는 N 또는 N-옥사이드이고, Y 는 -CH₂-, -CH(OR₁)-(여기에서, R₁은 상기 정의한 바와같다) 또는 -C(=O)- 이며, Z 는 H, 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 C₁-C₆알킬, 알케닐 또는 알키닐이다.
제1항에 있어서, A가 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 C₂-C₄알킬 또는 OR₁이고, R₁은 직쇄 C₂-C₃알킬이고, B 는 Cl, Br, I, CF₃또는 C₂CF₃이며, X 는 N 또는 N-옥사이드이고, Y 는 -CH(OH)- 또는 -C(=O)-이며, Z 는 H, 직쇄, 분지쇄 또는 시클릭 C₁-C₄알킬 또는 알케닐인 일반식(I)의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
제1항 또는 2항에 있어서, 하기 화합물들로 이루어진 그룹으로부터 선택된 일반식(I)의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염: {2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(1-옥시피리딘-2-일)메탄온, {2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(3-메틸-1-옥시피리딘-2-일)메탄온, {2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(1-옥시피리딘-3-일)메탄온, {2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(1-옥시피리딘-4-일)메탄온, {2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(6-메틸-1-옥시피리딘-2-일)메탄온, {2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(6-에테닐-1-옥시피리딘-2-일)메탄온, {2-에톡시-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(1-옥시피리딘-6-메틸-2-일)메탄온, {2-에톡시-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(6-에테닐-1-옥시피리딘-2-일)메탄온, {2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(6-에틸-1-옥시피리딘-2-일)메탄온, {2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(피리딘-2-일)메탄온, {2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(피리딘-3-일)메탄온, {2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(피리딘-4-일)메탄온, {2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(1-옥시피리딘-2-일)메탄올, {2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(1-옥시피리딘-3-일)메탄올 및 {2-부틸-5-클로로-3-[2'-(1H-테트라졸-5-일)바이페닐-4-일메틸]-3H-이미다졸-4-일}(1-옥시피리딘-4-일)메탄올.
하기 일반식(III)의 피리딜 할로겐 화합물을 염기와 반응시켜 피리딜리튬 화합물을 제조하고, 이를 하기 일반식(II)이 화합물과 반응시켜 하기 일반식(IV)의 화합물을 제조한 다음 이로부터 보호기를 제거함을 포함하는, 하기 일반식(Ia) 화합물의 제조방법:

상기식에서, A, B 및 Z 는 각각 제 1 항에서 정의한 바와 같고, P₁은 보호기이며, G 는 할로겐이다.
하기 일반식(IV)의 화합물을 산화시켜 하기 일반식(V)의 화합물을 제조한 다음 이로부터 보호기를 제거함을 포함하는, 하기 일반식(Ib) 화합물의 제조방법:

상기식에서, A, B 및 Z 는 각각 제 1 항에서 정의한 바와 같고, P₁은 보호기이다.
하기 일반식(IV)의 화합물을 산화시켜 하기 일반식(VI)의 화합물을 제조하거나; 하기 일반식(III)의 화합물을 산화시켜 하기 일반식(VIII)의 N-옥사이드를 제조하고 이를 하기 일반식(II)의 화합물과 반응시켜 하기 일반식(VI)의 화합물을 제조하고 이로부터 보호기를 제거함을 포함하는 하기 일반식(Ic) 화합물의 제조방법.

상기식에서, A, B 및 Z 는 각각 제 1 항에서 정의한 바와 같고, G 는 할로겐이며, P₁은 보호기이다.
하기 일반식(V)의 화합물을 산화시키거나, 하기 일반식(VI)의 화합물을 산화시켜 하기 일반식(VII)의 화합물을 제조하고 이로부터 보호기를 제거함을 포함하는, 하기 일반식(Id) 화합물의 제조방법:

상기식에서, A, B 및 Z 는 각각 제 1 항에서 정의한 바와 같고, P₁은 보호기이다.
활성성분으로서 혈압강화 효과량의 제1항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 혈압강하제 조성물.